专利名称：取代的噻吩磺酰脲及-硫脲、其制备方法及其作为药物或诊断试剂的用途以及含有它们的药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及取代的噻吩磺酰脲及-硫脲I R(1)为氢、卤素、含1或2个碳原子的烷基、含1或2个碳原子的烷氧基、含1或2个碳原子的巯基烷基、含1或2个碳原子的氟烷氧基及含1或2个碳原子的氟烷基；R(2)为氢、甲基或三氟甲基；X为氧(化合物Ia)或硫(化合物Ib)；Y和Z可相同或不同，为氢、F、Cl、Br、I、含1或2个碳原子的烷基及含1或2个碳原子的烷氧基。
所用的卤素取代基可以是氟、氯、溴及碘元素。类似的噻吩磺酰脲公开于荷兰专利申请NL7011219；类似的苯磺酰脲公开于德国公开专利2413514和1518874。上述文献描述了它们的降血糖作用。这种降血糖磺酰脲的原型是优降糖，它用作一种治疗糖尿病的治疗试剂并且是研究所谓ATP-敏感的钾通道的被认同的工具。除其降血糖作用外，优降糖至今还有不能用于治疗的其它作用，但其机理都是由于对这些ATP-敏感的钾通道的阻断。这包括(特别是)对心脏的抗纤维性颤动作用。但在治疗心室纤颤或其初发阶段，会同时伴随不需要的血糖降低或因其能更加重病人的病情而相当危险。
因此，本发明的目的是合成具有与优降糖同样好的对心脏作用但与优降糖相比在其心脏活性剂量或浓度时对血糖不起作用或作用明显地小。磺酰脲或硫脲优先作用于心脏，这已公开于欧洲专利0612724(Hoe 93/F058)。
优选的化合物I中R(1)为氢或甲基；R(2)为氢、含1或2个碳原子的烷基或含1或2个碳原子的烷氧基；X为氧或硫；Z和Y彼此不同并为氟、氯、甲氧基或烷氧基。
特别优选的化合物I中，R(1)为氢或甲基；R(2)为氢或含1或2个碳原子的烷基；X为氧；Z和Y彼此不同并为氟、氯、甲氧基或乙氧基。
更加特别优选的化合物I中R(1)为氢或甲基；R(2)为氢或含1或2个碳原子的烷基；X为硫；Z和Y彼此不同并为氟、氯、甲氧基或乙氧基。
本发明的化合物是治疗所有类型的心律失常及预防因心率失常引起的心脏猝死的很有价值的药物并因此可作为抗心率失常药。心脏心率失常的例子有室上心率失常如房性心搏过速、心房扑动或阵发性室上心率失常或室性心率失常如室性期外收缩，但特别是危及生命的室性心动过速或特别危险的室性纤维性颤动。对于冠状血管狭窄造成的心率失常(例如发生在心绞痛或急性心肌梗塞或心肌梗塞的慢性后遗症中)的病例它们特别适用。因此，它们特别适用于预防有心肌梗塞病史的病人的心脏猝死。在此类心率失常和/或因心率失常造成的心脏猝死的其它症状为慢性高血压造成的如心脏功能不全或心脏肥大。
此外，此化合物可对心脏收缩力降低起积极作用。在本文中，涉及与疾病相关的心脏收缩力的(例如在心脏功能不全中)减退的问题，也涉及急性病例(例如休克作用下的急性心力衰竭)的问题。同样，在心脏移植中手术后的心脏可更快并更可靠地恢复其功能。它同样适用于需要通过心麻痹溶液对心脏进行暂时麻痹的心脏手术中。
本发明还涉及制备化合物I的方法，它包括(a)将通式II的芳香族磺酰胺或其通式III的盐 与通式IV的R(2)-取代的异氰酸酯反应R(2)-N＝C＝OIV得到取代的噻吩磺酰脲I。
在通式II的盐中适宜的阳离子M为碱金属、碱土金属、铵及四烷基铵离子。与R(2)-取代的异氰酸酯IV相当，可使用R(2)-取代的氨基甲酸酯、R(2)-取代的氨基甲酰卤素或R(2)-取代的脲；(b)未取代的噻吩磺酰脲Ia〔R(2)＝H)〕 其可通过通式II的芳香族噻吩磺酰胺或其盐III与异氰酸三烷基甲硅烷基酯或四异氰酸硅反应并将起初的硅取代噻吩磺酰脲裂解(如水解)制备。此外可以通过与卤化氰反应并将起初形成的N-氰基磺酰胺在0℃至100℃与无机酸水解制备噻吩磺酰胺2或其盐III。(c)噻吩磺酰脲Ia可以通过芳香族噻吩磺酰胺II或其盐III自通式V的R(2)-取代的三氯乙酰胺在碱的存在下在惰性溶剂中按照Synthesis 1987，734-735在25℃至150℃制备。 适宜的碱为，例如，碱金属或碱土金属的氢氧化物、氢化物、氨化物或烃氧化物，如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢化钠、氢化钾、氢化钙、氨基钠、氨基钾、甲醇钠、乙醇钠、甲醇钾或乙醇钾。
适宜的惰性溶剂为醚如四氢呋喃、二噁烷、二甘醇二甲醚(diglyme)、酮如丙酮或丁酮、腈如乙腈、硝基化合物如硝基甲烷、酯如乙酸乙酯、酰胺如二甲基甲酰胺(DMF)或N-甲基吡咯烷酮(NMP)、六甲基磷酰胺(Phosphorsurehexamethyltriamid)、亚砜如DMSO、砜如四氢噻吩砜、以及烃如苯、甲苯及混合二甲苯。此外，这些溶剂彼此的混合物也是适宜的。 自噻吩磺酰胺II及其盐III和R(2)-取代的异硫氰酸酯VI制备。
R(1)-N＝C＝S VI未取代的噻吩磺酰硫脲I〔R(2)＝H〕可通过通式II的芳香族噻吩磺酰胺或其盐III与异硫氰酸三烷基甲硅烷基酯或四异硫氰酸硅反应并将起初形成的硅取代噻吩磺酰脲裂解(如水解)制备。此外可以将芳族噻吩磺酰胺II或其盐III与苯甲酰基异硫氰酸酯反应并将中间产物苯甲酰基取代的噻吩磺酰硫脲与无机酸水溶液反应得到Ib〔R(2)＝H〕。相似的方法描述于J.Med.Chem.1992，35，1137-1144。另外一种方案为将方法(a)提及的N-氰基磺酰胺与硫化氢反应。(e)通式Ia取代的噻吩磺酰脲可通过结构Ib的噻吩磺酰硫脲的转换反应制备。将相应的取代的噻吩磺酰硫脲的硫原子用氧原子置换，例如，可借助重金属氧化物或盐或者通过使用氧化剂(如过氧化氢、过氧化钠或亚硝酸)进行。硫脲也可通过用光气或五氯化磷处理脱硫化。作为中间体，制得氯甲酸脒或碳化二亚胺，它被转化(例如通过皂化或加入水)成相应的取代的噻吩磺酰脲。异硫脲在脱硫作用中与硫脲表现相似，也可同样用作这些反应的起始物质。(f)噻吩磺酰脲Ia可自通式VII的噻吩磺酰卤化物 使用R(2)-取代脲或R(2)-取代二(三烷基甲硅烷基)脲来制备。三烷基甲硅烷基保护基可通过标准方法从所得三烷基甲硅烷基-噻吩磺酰脲中除去。此外，磺酰氯VII可与乙二酰脲反应得到噻吩磺酰基乙二酰脲，将它用无机酸水解得到相应的噻吩磺酰脲Ia。(g)噻吩磺酰脲Ia可通过式R(2)-NH2的胺类与通式VIII的噻吩磺酰基异氰酸酯反应制备。 同样，胺R(2)-NH2可与噻吩磺酰基氨基甲酸酯、噻吩磺酰基氨基甲酰卤化物或噻吩磺酰脲Ia〔其中R(2)-II〕反应得到化合物Ia。(h)噻吩磺酰硫脲Ib可通过式R(2)-NH2的胺类与通式IX的噻吩磺酰基异硫氰酸酯反应制备。 同样，胺R(2)-NH2可与噻吩磺酰基氨基甲酸硫酯或噻吩磺酰基氨基甲酰硫代卤化物反应得到化合物Ib。(i)相应的取代的苯亚磺酰基-或-亚磺酰脲可用氧化剂如过氧化氢、过氧化钠或亚硝酸氧化得到噻吩磺酰脲Ia。化合物I及其生理可接受的盐是有用的治疗剂，它不仅适于作抗心率失常药，也可靠用于人或哺乳动物(例如，猴、狗、小鼠、大鼠、家兔、豚鼠或猫)的心血管系统障碍的病例、心脏功能不全、心脏移植或脑血管疾病的预防。
化合物I生理可接受的盐可以按照Remmington′sPharmaceutical Science，第17版，1985年，14-18页理解为式X的化合物 它可以自无毒有机和无机碱及取代的噻吩磺酰脲I制备。在本文中，式X中M是钠、钾、铷、钙、镁或铵离子的盐是优选的，并且可以是基本氨基酸(如赖氨酸或精氨酸)的酸加成产物。
噻吩磺酰脲I的上述合成方法的起始化合物可通过文献中描述的已知方法制备(例如在标准手册如Houben-Weyl，Methoden der Organischen Chemie(有机化学方法)，GeorgThieme Verlag，Stuttgart；Organic Reactions，John Wiley&Sons，Inc.，New York；及上述的专利申请中)，即在上述已知的并适于反应的条件下。也可使用已知的、但在此未详细描述的方法。如果需要，起始物质也可就地形成，即不将它们从反应混合物中分离而立即进一步反应。 方案1式XI的适当取代的胺可按照方案1酰化并进行卤代磺酰化，胺基酰化的适宜的酰化试剂为式R4-COB的羧酸的烷基酯、卤化物(如氯化物或溴化物)或酸酐。
在本文中，R4是苯甲酸衍生物。在本例中的苯甲酸可以被一个或两个相同或不同的在前文中限定的基团Y和Z取代或无取代。
B为离去基如卤素、含1、2、3或4个碳原子的烷氧基、三卤代乙酸酯或(C1-C4)-羧酸酯。这样的例子为5-氯-2-甲氧基苯甲酰氯、5-氯-2-甲氧基苯甲酸酐及其-(C1-C4)-烷基酯或2，5-二氟苯甲酰氯。化合物XII的合成要在惰性溶剂的存在(或不存在)下加入叔碱(如吡啶或三烷基胺)进行，也可存在催化剂如二甲基氨基吡啶。反应温度约0℃至160℃，优选20℃至150℃。适宜的惰性溶剂为醚(如四氢呋喃、二噁烷)、甘醇醚如甘醇单甲醚或甘醇单乙醚(甲基甘醇或乙基甘醇)、甘醇二甲醚(二甘醇二甲醚)、酮如丙酮或丁酮、腈如乙腈、硝基化合物如硝基甲烷、酯如乙酸乙酯、酰胺如二甲基甲酰胺(DMF)或N-甲基吡咯烷酮(NMP)、六甲基磷酰胺、亚砜如DMSO、氯代烃如二氯甲烷、氯仿、三氯乙烯、1，2-二氯乙烷或四氯化碳、以及烃如苯、甲苯及二甲苯。此外，这些溶剂彼此的混合物也是适宜的。
胺XI一般通过标准方法制得，例如自噻吩-2-甲醛，它与硝基甲烷反应得到相应的硝基链烯，然后进行还原(如用四氢锂铝)，在此方法中得到XI。
按照方案1酰化的胺XII以已知的方式按照方案2转化成磺酰胺XIII 磺酰胺XIII通过已知方法制备，即在对于所述反应是已知的且适宜的反应条件下进行。在此也可使用已知的但这里并未详细描述的方法。如果需要，合成可一步、两步或多步完成。特别是，通过亲电试剂在惰性溶剂存在(或不存在)下在-10℃至120℃(优选0℃至100℃)将酰化的胺XII转化为芳香族磺酸及其衍生物(如转化为磺酰卤素)的方法是优选的。例如，可用硫酸或发烟硫酸进行磺酰化，用卤代磺酸进行卤代磺酰化，在无水金属卤化物存在下与磺酰卤化物或在无水金属卤化物存在下与亚磺酰卤化物反应随后进行氧化反应(按照已知方式进行)得到芳香族磺酰卤化物。如果磺酸是初级反应产物，这些初级产物或直接或通过用叔胺(如吡啶或三烷基胺)或碱金属或碱土金属的氢氧化物或能就地形成这些碱性化合物的试剂处理以已知方式通过酰卤化物(如三卤化磷、五卤化磷、三氯氧化磷、亚硫酰卤化物或草酰卤化物)转化为磺酰卤化物。磺酸衍生物以文献中的已知方式转化为磺酰胺，优选在惰性溶剂中在0℃至l00℃将磺酰氯与氨水反应。此外，芳香族磺酰胺可按照文献中的已知方法合成，按照方案1通过与碱金属或碱土金属的有机试剂在惰性气体中在-100℃至50℃(优选-100℃至30℃)反应，与二氧化硫反应并随后与氨基磺酸热处理制备式XII的酰化胺。
根据取代基R(1)在酰化胺XII中的位置，也可将氨磺酰引入噻吩环的其它位置，例如如果5位已被R(1)占据，则引入到4位。
本发明的化合物I及其生理可接受的盐可用于药物制剂的生产，特别是以非化学途径。在本文中，它们本身可以与至少一种固体或液体赋形剂或辅剂加到一起或与其它具有心血管活性的药物(如钙拮抗剂、NO供体或ACE抑制剂)合用制成合适的剂型。这些制剂可用作人用药物或兽药。
可能的赋形剂为适于经肠(如口服)或非肠道(如静脉给药或局部用药)给药且不与此新化合物反应的有机或无机物质，例如水、植物油、苄醇、聚乙二醇、三乙酸甘油酯、明胶、碳水化物如乳糖或淀粉、硬脂酸镁、滑石、羊毛脂及凡士林。特别是片剂、包衣片剂、胶囊、糖浆、汁或滴剂用于口服给药，溶液剂(优选油或水溶液)及此外的悬浮液剂、乳液剂或移植片可用于直肠给药，软膏、乳膏剂、糊剂、洗液、凝胶、喷雾剂、泡剂、气雾剂、溶液剂(例如溶剂为醇如乙醇或异丙醇、乙腈、DMF、二甲基乙酰胺、1，2-丙二醇或其彼此间或与水的混合物)或散剂用于局部给药。化合物I也可被冻干并且所得冻干物可用于如注射剂的制备。特别是为了局部用药，脂质体制剂也是适宜的。它们含有稳定剂和/或湿润剂、乳化剂、盐和/或辅剂如润滑剂、防腐剂、稳定剂和/或湿润剂、乳化剂、调节渗透压的盐、缓冲物质、着色剂及调味剂和/或芳香物质。如果需要，其中也可含有一利或多种其它活性物质，如一种或多种维生素。
用于治疗心脏心率失常的化合物I的剂量依赖于治疗是急性的或预防性的。一般来讲，如果进行预防则对75公斤的成人每公斤每天剂量为约至少0.1mg(优选至少1mg)至最多100mg(优选最多10mg)是适宜的。这样的剂量可分作口服或非肠道一次性剂量或多达四次的单剂量。如果治疗心脏心率失常的急性病例，如在特护时，优选非肠道给药。在紧急状态优选的剂量是10至100mg并且可用静脉连续输液的形式给药。
适于说明心脏作用的试验动物为，例如，小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、狗、猴或猪。因此此化合物可以在人或兽药中用作药物活性化合物。此外它们可用作制备其它药物活性化合物的中间体。
按照本发明，除了在实施例作描述的化合物外，可得到包括于下表中的化合物I1)2-〔2-(5-氟-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基羰基氨基磺酰基)噻吩2)2-〔2-(5-溴-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基羰基氨基磺酰基)噻吩3)2-〔2-(5-甲基-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基羰基氨基磺酰基)噻吩4)2-〔2-(5-氟-2-乙氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基羰基氨基磺酰基)噻吩5)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基羰基氨基磺酰基)-4-甲氧基噻吩6)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(甲基氨基羰基氨基磺酰基)-4-甲氧基噻吩7)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(甲基氨基羰基氨基磺酰基)-4-甲硫基噻吩8)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(甲基氨基羰基氨基磺酰基)-4-甲氧基噻吩9)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(甲基氨基羰基氨基磺酰基)-4-三氟噻吩10)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(甲基氨基羰基氨基磺酰基)-4-三氟甲氧基噻吩11)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基羰基氨基磺酰基)-4-甲硫基噻吩12)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基羰基氨基磺酰基)-4-甲氧基噻吩13)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基羰基氨基磺酰基)-4-三氟噻吩14)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基羰基氨基磺酰基)-4-三氟甲氧基噻吩15)2-〔2-(5-氟-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基硫代羰基氨基磺酰基)噻吩16)2-〔2-(5-溴-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基硫代羰基氨基磺酰基)噻吩17)2-〔2-(5-甲基-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基硫代羰基氨基磺酰基)噻吩18)2-〔2-(5-氟-2-乙氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基硫代羰基氨基磺酰基)噻吩19)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基硫代羰基氨基磺酰基)-4-甲氧基噻吩20)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(甲基氨基硫代羰基氨基磺酰基)-4-甲氧基噻吩21)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(甲基氨基硫代羰基氨基磺酰基)-4-甲硫基噻吩22)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(甲基氨基硫代羰基氨基磺酰基)-4-甲氧基噻吩23)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(甲基氨基硫代羰基氨基磺酰基)-4-三氟噻吩24)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(甲基氨基硫代羰基氨基磺酰基)-4-三氟甲氧基噻吩25)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基硫代羰基氨基磺酰基)-4-甲硫基噻吩26)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基硫代羰基氨基磺酰基)-4-甲氧基噻吩27)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基硫代羰基氨基磺酰基)-4-三氟噻吩28)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基硫代羰基氨基磺酰基)-4-三氟甲氧基噻吩实施例实施例12-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(甲基氨基羰基氨基磺酰基)噻吩
将120mg粉末氢氧化钠和141mgN-甲基三氯乙酰胺(0.8mmol)加入到存在于9ml DMSO中的229mg(0.8mmol)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-氨磺酰-噻吩中。在65℃搅拌混合物1.5小时。冷却后，将其搅拌加入pH2的冰水中。用抽滤滤除沉淀物并吸收在二氯甲烷中，用水洗涤并用硫酸镁干燥。蒸发除去溶剂后，剩下黄棕色粗品，用二氯甲烷/5％甲醇处理后，在-4℃结晶。
得到165mg熔点为160-161℃的纯品。
实施例22-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(氨基羰基氨基磺酰基)噻吩 将229mg(0.8mmol)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-氨磺酰-噻吩用448mg KOCN和0.6ml三乙胺处理，然后将混合物加热回流4小时。冷却后的溶液过滤并蒸发至干。残余物用40ml水、25ml三乙胺和25ml乙酸乙酯搅拌。有机相用水/1％三乙胺萃取三次。将结合的水相用2N盐酸酸化。形成的沉淀物在冰浴中搅拌3小时并将其抽滤。熔点172-174℃。
实施例32-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-3-甲基-5-(甲基氨基羰基氨基磺酰基)噻吩 与实施例1方法相同，由2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-3-甲基-5-氨磺酰-噻吩和三氯乙酰胺制备。粗品通过在30℃的乙酸乙酯中搅拌纯化。熔点185-187℃实施例42-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-3-甲基-5-(氨基羰基氨基磺酰基)噻吩
将311mg(0.8mmol)2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-3-甲基-5-氨磺酰-噻吩用448mg KOCN和0.6ml三乙胺处理，然后将混合物加热回流4小时。冷却后的溶液过滤并蒸发至干。残余物用40ml水、25ml三乙胺和25ml乙酸乙酯搅拌。有机相用水/1％三乙胺萃取三次。将结合的水相用2N盐酸酸化。形成的沉淀物在冰浴中搅拌3小时并将其抽滤。熔点174-172℃。实施例52-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-(甲基氨基硫代羰基氨基磺酰基)噻吩 将375mg 2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-氨磺酰-噻吩与415mg碳酸钾和90mg异硫氰酸甲酯一起溶于3ml无水DMF中，然后将混合物在60℃搅拌3小时。冷却后溶液加入到2N HCl中，抽滤除去所得沉淀物。干燥的残余物在硅胶上用乙酸乙酯/甲苯(1∶1)的展开剂进行色谱法纯化。产量228mg，熔点182-184℃。
实施例62-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-4-(甲基氨基羰基氨基磺酰基)-5-甲基-噻吩 与实施例1方法相似，由2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-5-甲基-4-氨磺酰-噻吩和三氯乙酰胺制备。熔点198-199℃。
实施例72-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-4-(氨基羰基氨基磺酰基)-5-甲基-噻吩与实施例2方法相似，由2-〔2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基〕-4-氨磺酰-5-甲基-噻吩和KOCN制备。熔点160-161℃。
药理学数据化合物I的治疗特性可用下列模型显示(1)在豚鼠的乳头肌上的动作电位时间(a)介绍正如在心肌细胞局部缺血期间观察到的，ATP缺乏状态导致动作电位时间的缩短。它们被认作是所谓折返心率失常(它常引起心脏猝死)的原因之一。通过ATP的下降而引起的ATP-敏感的K通道的开放被认为是根本原因。
(b)方法用标准微电极技术测定动作电压。为此，将不同性别的豚鼠通过打击其头部宰杀，移出心脏，并将乳头肌分离并悬挂于器官浴器(Organbad)中。器官浴器灌以Ringer溶液(0.9％氯化钠、0.048％氯化钾、0.024氯化钙、0.02％碳酸氢钠和0.1％葡萄糖)并在36℃充入95％氧和5％二氧化碳的混合气体。用1V和1毫秒(ms)时间及频率2Hz的矩形脉冲通过电极刺激肌肉。将装有3mM氯化钾溶液的玻璃微电极插入到细胞内产生并记录动作电位。试验物质以2.2×10-5mol每升的浓度加入到Ringer溶液中。用Hugo Sachs放大器将动作电位放大并显示在示波器上。动作电位的时间在再极化度为95％(APD95)时确定。
通过加入1μM钾通道开放剂(Kaliumkanaloffner)溶液Hoe234(J.Kaiser，H.Gogelein，Naunyn-Schmiedebergs Arch.Pharm.1991，343，R59)或通过加入2-脱氧葡萄糖产生动作电位的降低。这些物质的动作电位降低效应通过同时加入试验物质来防止或降低。将试验物质作为在丙二醇中的贮备液加入浴液中。指示的数据值为加入后30分钟的测量值。优降糖在这些检测中作为标准。所有例子中的试验浓度为2×10-5M。
(c)结果检测值如下
(2)分离的β-细胞的膜电位(a)介绍粗略解释降血糖药磺酰脲的作用机制。靶器官为胰腺的β-细胞，其中产生降血糖激素胰岛素分泌的增加。通过细胞膜电位控制胰岛素的释放。优降糖引起细胞膜的去极化，其通过钙离子注入的增加促进胰岛素的释放。本发明一些化合物的细胞膜去极化的程度ΔU在RINm5F细胞(一种胰腺肿瘤细胞系)上测定。此模型中化合物的作用强度指明了这个化合物降血糖的强度。
(b)方法RINm5F细胞的细胞培养在37℃将RINm5F细胞培养于RPMI 1640培养基(Flow)中，其中加入11mM葡萄糖、10％(体积比)小牛血清、2mM谷氨酰胺及50μg/ml的庆大霉素。为了此项研究，细胞通过在无钙含0.25％胰蛋白酶的培养基孵育(约3分钟)分离并保存于冰上。
检测方法将分离的RINm5F细胞转移到装有示差式干涉对比光学系统的倒置显微镜上的有机玻璃室中。在目视控制(400倍放大)下，开口端直径约1μm的火抛光的微量移液管在显微操作器的帮助下置于细胞上。通过在接线移液管(Patch-Pipotte)上提供轻微负压(Unterdruck)，在玻璃和细胞膜间首先产生高电密封，然后通过提高测量移液管下膜斑的负压而分离。在整个细胞构形中，通过接线夹放大器(L/M EPC7)记录细胞电位并通过使用电压接线夹(Spannungsrampe)测量整个细胞电流。溶液接线移液管装有氯化钾溶液(mmol/升)140氯化钾、10氯化钠、1.1氯化镁、0.5EGTA、1Mg-ATP、10HEPES、pH＝7.2，并且氯化钠溶液存在于保存液中(mmol/升)140氯化钠、4.7氯化钾、1.1氯化镁、2氯化钙、10HEPES、pH＝7.4。制备试验物质在二甲基亚砜(DMSO)中的贮备液(浓度为100mmol)及在氯化钠溶液中的相应稀释液。DMSO本身对细胞电位没有作用。为了在控制条件下稳定细胞电位，在所有试验中向保存液中加入ATP-敏感K+离子通道的开放剂二噁烷(100μmol)。所有试验在34±1℃下进行。
(c)结果(本试验中本发明化合物的浓度10-5mol/升)<
>
权利要求
1.式I的取代的噻吩磺酰脲及-硫脲 R(1)为氢、卤素、含1或2个碳原子的烷基、含1或2个碳原子的烷氧基、含1或2个碳原子的巯基烷基、含1或2个碳原子的氟烷氧基及含1或2个碳原子的氟烷基；R(2)为氢、甲基或三氟甲基；X为氧(化合物Ia)或硫(化合物Ib)；Y和Z可相同或不同，为氢、F、Cl、Br、I、含1或2个碳原子的烷基及含1或2个碳原子的烷氧基。
2.权利要求1中式I的化合物，其中R(1)为氢或甲基；R(2)为氢、含1或2个碳原子的烷基或含1或2个碳原子的烷氧基；X为氧或硫；Z和Y彼此不同并为氟、氯、甲氧基或烷氧基。
3.权利要求1中式I的化合物，其中R(1)为氢或甲基；R(2)为氢或含1或2个碳原子的烷基；X为氧；Z和Y彼此不同并为氟、氯、甲氧基或乙氧基。
4.权利要求1中式I的化合物，其中R(1)为氢或甲基；R(2)为氢或含1或2个碳原子的烷基；X为硫；Z和Y彼此不同并为氟、氯、甲氧基或乙氧基。
5.制备权利要求1中化合物的方法，其中包括(a)将通式II的芳香族磺酰胺或其通式为III的盐 与通式IV的R(2)-取代异氰酸酯反应R(2)-N＝C＝O IV得到取代的噻吩磺酰脲I，其中R(1)、Y和Z与权利要求1的限定相同且其中阳离子M为碱金属、碱土金属、铵及四烷基铵离子，R(2)的限定与权利要求1相同；或(b)未取代的噻吩磺酰脲Ia〔R(2＝H)〕可通过通式II的芳香族噻吩磺酰胺或其盐III与异氰酸三烷基甲硅烷基酯或四异氰酸硅反应并将起初的硅取代噻吩磺酰脲裂解制备；或(c)噻吩磺酰脲Ia可以通过芳香族噻吩磺酰胺II或其盐III与通式V的R(2)-取代的三氯乙酰胺在适宜的碱的存在下反应制备； 或(d)噻吩磺酰硫脲Ib 由噻吩磺酰胺II及其盐III和R(2)-取代的异硫氰酸酯VI反应制备； R(1)-N＝C＝SVI或(e)通过结构Ib的噻吩磺酰硫脲的转化制备式Ia的取代的噻吩磺酰脲；或(f)由式VII的噻吩磺酰卤化物； 和R(2)-取代脲或R(2)-取代的二(三烷基甲硅烷基)脲制备噻吩磺酰脲Ia；或(g)通过式R(2)-NH2的胺类与式VIII的噻吩磺酰基异氰酸酯反应制备噻吩磺酰脲Ia；或 (h)通过式R(2)-NH2的胺类与式IX的噻吩磺酰基异硫氰酸酯反应制备噻吩磺酰硫脲Ib；或 (i)氧化苯亚磺酰基-或-亚磺酰脲得到噻吩磺酰脲Ia。
6.权利要求1的化合物I制备治疗心脏心率失常药物的用途。
7.权利要求1的化合物I制备防止心脏猝死药物的用途。
8.权利要求1的化合物I制备治疗心脏局部缺血疾病的用途。
9.权利要求1的化合物I用于生产抑制ATP-敏感钾通道的科学工具的用途。
10.权利要求1的化合物I用于生产治疗心力衰减药物的用途。
11.权利要求1的化合物I用于生产心脏移植后改善心脏功能的药物的用途。
12.含有有效剂量的权利要求1的式I化合物的药物。
全文摘要
本发明涉及取代的噻吩磺酰脲及-硫脲、其制备方法及其作为药物的用途其中R(1)、R(2)、X、Y和Z在权利要求中限定了含义，它对心血管系统起作用。
文档编号A61K31/38GK1134421SQ96101109
公开日1996年10月30日 申请日期1996年1月30日 优先权日1995年2月1日
发明者H·恩格勒特, J·哈彤, P·科劳瑟, D·马尼, H·约格莱恩, J·凯瑟 申请人:赫彻斯特股份公司