新化合物的制作方法

专利名称：新化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的化合物及其医疗上可接受的盐，其抑制外源性或内源性刺激的胃酸分泌，因此可用于预防及治疗胃肠道炎症疾病。另一方面，本发明涉及用于医疗的本发明化合物；这些新化合物的制备方法；含有至少一个作为活性成分的本发明化合物或其医疗上可接受的盐的药用组合物；以及该活性化合物在制备以上所表明医学用途的药物上的应用。
背景技术：
具有抗溃疡剂活性的下式苯并咪唑衍生物在EP-B-0266326及US5106862中公开

其中R1尤其为下式的芳基基团

其中R7、R8和R9各自独立代表尤其是H或C1-C6烷基，或卤素；R2尤其为H；R3尤其为H或C1-C6烷基；n为0-6的整数；R4、R5和R6为H或C1-C6烷基；A为多至6个碳原子、任选由一杂原子如O或N间断的亚烷基。
有关胃酸泵(H+、K+-ATP酶)的药理学综述见Sachs等，(1995)Annu.Rev.Pharmacol.Toxical.35:277-305。
本发明的公开已惊奇地发现式Ⅰ化合物，其为取代的苯并咪唑衍生物，其中所述苯基部分由低级烷基在2-和6-位上取代，作为胃肠道的H+、K+-ATP酶的抑制剂特别有效，因此可用作胃酸分泌的抑制剂。
因此，本发明一方面涉及通式Ⅰ的化合物或其药学上可接受的盐

其中R1为低级烷基；R2为低级烷基；R3，其在所述苯环的3、4或5位上，为(a)H(b)卤素，或
(c)低级烷基；R4为(a)H，或(b)低级烷基；X，其在4或7位上与杂环相连，为(a)NH或(b)O。
在此所用的术语“低级烷基”指具有1-6个碳原子的直或支链烷基。该低级烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基及直或支链戊基及己基。
术语“卤素”包括氟、氯、溴及碘。
两种纯对映体、外消旋混合物及两个对映体的不等量混合物都在本发明的范围之内。应该清楚地是所有可能的非对映形式(纯对映体、外消旋混合物及两个对映体的不等量混合物)都包括在本发明的范围之内。本发明还包括具有式Ⅰ化合物的生理功能的式Ⅰ化合物的衍生物。
根据制备方法的条件，所获得的式Ⅰ的终产物或者为中性物或者为盐形式。这些终产物的游离碱及其盐形式都包括在本发明的范围内。
该类新化合物的酸加成盐可以以本身已知的方法，用碱性试剂如碱或通过离子交换将其转化成游离碱。所获得的游离碱也可与有机或无机酸生成盐。
在制备酸加成盐中，优选使用能形成适当、医疗上可接受的盐的酸。这些酸的实例包括氢卤酸如盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、脂肪族、脂环族、芳香族或杂环羧酸或磺酸，如甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、枸橼酸、抗坏血酸、马来酸、羟基马来酸、丙酮酸、对羟基苯甲酸、朴酸、甲磺酸、乙磺酸、羟基乙磺酸、卤代苯磺酸、甲苯磺酸或萘磺酸。
本发明优选的化合物为那些式Ⅰ化合物，其中R1为CH3或CH2CH3；R2为CH3或CH2CH3；R3为H、4-F或4-Cl；R4为H或CH3而X为与所述杂环在4-位相连的NH或O。
本发明特别优选的化合物为4-(2,6-二甲基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑；4-(2,6-二甲基苄氧基)-2-甲基苯并咪唑；4-(2,6-二甲基-4-氟苄氨基)-2-甲基苯并咪唑；4-(2,6-二甲基4-氟苄氧基)-2-甲基苯并咪唑；4-(2,6-二甲基苄氨基)-1,2-二甲基苯并咪唑；4-(2-乙基-6-甲基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑；4-(2,6-二乙基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑；4-(2,6-二甲基-4-氟苄氨基)-1,2-二甲基苯并咪唑；4-(2,6-二甲基-4-氟苄氧基)-1,2-二甲基苯并咪唑。制备本发明还提供用于制备具有通式Ⅰ的化合物的下列方法A-C方法A用于制备具有通式Ⅰ化合物的方法A包括以下步骤a)使通式Ⅱ化合物

其中X1为与所述杂环在4或7位上相连的NH2或OH而R4按式Ⅰ中定义，与通式Ⅲ化合物反应

其中R1、R2和R3按式Ⅰ中定义而Y为离去基团，如卤化物、甲苯磺酰氧基或甲磺酰氧基，而生成式Ⅰ化合物。
该反应在惰性溶剂如丙酮、乙腈、二甲氧基乙烷、甲醇、乙醇或二甲基甲酰胺中，有或无碱存在下容易地进行。该碱如碱金属氢氧化物，如氢氧化钠和氢氧化钾；醇化钠，如甲醇钠和乙醇钠；碱金属氢化物如氢化钠和氢化钾；碱金属碳酸盐，如碳酸钾和碳酸钠；或有机胺，如三乙胺。方法B用于制备具有通式Ⅰ化合物的方法B包括以下步骤可以使式Ⅳ化合物

其中R4按式Ⅰ中定义而NH2基团与所述杂环在4或7位上相连，与通式Ⅴ化合物反应

其中R1、R2和R3按式Ⅰ中定义，在路易斯酸如氯化锌存在下生成式Ⅵ化合物

其中R4按式Ⅰ中定义而亚胺氮与所述杂环在4或7位上相连，从而将通式Ⅵ化合物如通过用硼氢化钠或氰基硼氢化钠还原生成通式Ⅰ化合物。该反应可在标准条件下，在惰性溶剂中如甲醇或乙醇中进行。方法C其中R4为“低级烷基”的通式Ⅰ化合物可通过将其中R4为H的通式Ⅰ化合物在惰性溶剂如乙腈或丙酮中，有或无碱存在下用通式Ⅶ化合物烷基化而制得R4X2Ⅶ其中R4按式Ⅰ中定义而X2为离去基团如卤化物、甲磺酸酯或甲苯磺酸酯。该碱为如碱金属氢氧化物，如氢氧化钠和氢氧化钾；醇化钠，如甲醇钠和乙醇钠；碱金属氢化物如氢化钠和氢化钾；碱金属碳酸盐，如碳酸钾和碳酸钠；或有机胺，如三乙胺。医学用途另一方面，本发明涉及用于医疗上特别是用于抗胃肠道炎症疾病上的式Ⅰ化合物。本发明还提供式Ⅰ化合物在制备用于抑制胃酸分泌或用于治疗胃肠道炎症疾病的药物上的用途。
因此本发明的化合物可用于预防及治疗哺乳动物包括人在内的胃肠道炎症疾病及与胃酸有关的疾病，如胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、消化性食管炎和Zollinger-Ellison综合征。另外，该类化合物还可用于治疗其中需要抗胃酸分泌效用的其它胃肠道紊乱如胃泌素瘤患者及急性上部胃肠道出血的患者。它们还可用于加强护理状况患者、手术前后预防酸吸出的患者以及应激性溃疡患者。药物剂型另一方面，本发明涉及药用组合物，其含有至少一种作为活性成分的本发明化合物或其医疗上可接受的盐。
本发明的化合物还可与其它活性成分如抗菌素如羟氨苄青霉素一起用于制剂中。
为临床应用，要将本发明化合物制成供口服、直肠、非胃肠道或其它给药方式的药物制剂。该药物制剂含有一种本发明化合物结合一或多种药学上可接受的组分。所述载体可以为固体、半固体或液体稀释剂、或胶囊形式。这些药物制剂为本发明的另一目的。通常活性化合物的用量为所述制剂的0.1-95％(重量)，对供非胃肠道应用的制剂而言优选为0.1-20％(重量)，而对供口服给药的制剂而言优选0.1-50％(重量)。
在制备供口服给药的、含有以单位剂量形式的本发明式Ⅰ化合物的药物制剂时，可将所选择的化合物与固体、粉状组分如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露糖醇、淀粉、支链淀粉、纤维素衍生物、明胶或其它适当的组分，以及崩解剂和润滑剂如硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酰富马酸钠及聚乙二醇蜡混合。然后将混合物制成颗粒或压制成片剂。
软明胶胶囊可用含有本发明的活性化合物、植物油、脂肪或其它适于作为软明胶胶囊的载体的混合物胶囊制备。硬明胶胶囊可含有活性化合物的颗粒。硬明胶胶囊也可含有活性化合物结合固体粉状组分如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、马铃薯淀粉、玉米淀粉、支链淀粉、纤维素衍生物或明胶。
供直肠给药的剂量单位可被制成(ⅰ)栓剂形式，其含有与中性脂肪基质混合的活性物质；(ⅱ)明胶直肠胶囊形式，其含有与植物油、石蜡油或其它适于作为明胶直肠胶囊的载体混合的活性物质；(ⅲ)现成的微灌肠剂形式；或(ⅳ)干的微灌肠制剂形式，其只在给药前在适当溶剂中被复制成。
供口服给药的液体制剂可制成糖浆或混悬液形式，如溶液或混悬液，其含有0.1-20％(重量)的活性成分而剩余部分由糖或糖醇及乙醇、水、甘油、丙二醇及聚乙二醇的混合物组成。如果需要，这些液体制剂可含有着色剂、香味剂、糖精及羧甲基纤维素或其它增稠剂。供口服的液体制剂也可以被制成干粉形式，在使用前用适当的溶剂复制成溶液。
供非胃肠道给药的溶液可被制成本发明化合物在药学上可接受的溶剂中的溶液，优选浓度为0.1-10％(重量)。这些溶液也可含有稳定剂和/或缓冲剂且可分配成以安瓿或管制瓶形式的单位剂量。供非胃肠道给药的溶液也可制成干燥制剂，使用前临时用适当的溶剂复制成溶液。
每日活性物质的剂量一般在很宽范围内变化，而且依各种因素如每个患者的个体需要、给药途径及疾病而定。总之，口服及非肠道剂量在每日5-1000mg活性物质范围之内。
本发明的化合物还可与其它活性成分，如用于治疗或预防由人胃粘膜的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)感染引起的症状的成分一起制成制剂。这些其它的活性成分可为抗菌剂，特别是-b-内酰胺类抗菌剂如羟氨苄青霉素、氨苄青霉素、头孢噻吩、头孢克罗或头孢克肟；-大环内酯类如红霉素或6-甲氧基红霉素；-四环素类如四环素或脱氧土霉素；-氨基糖甙类如庆大霉素、卡那霉素或丁胺卡那霉素；-喹诺酮类如诺氟沙星、环丙沙星或依诺沙星；-其它如甲硝哒唑、呋喃妥因或氯霉素；或-含铋盐的制剂如碱式柠檬酸铋、碱式水杨酸铋、碱式碳酸铋、碱式硝酸铋或碱式没食子酸铋。
实施例1．制备本发明的化合物实施例1.1合成4-(2,6-二甲基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑

将4-氨基-2-甲基苯并咪唑(6.0g,0.041mol)溶解于乙腈(120ml)中。向溶液中加入2,6-二甲基苄氯(6.3g,0.041mol)、碳酸钠(16g,0.15mol)和催化量的碘化钠，将反应混合液回流3小时。过滤除去碳酸钠，用二氯甲烷洗涤。真空蒸除溶剂得一油状残留物，经快速硅胶层析，用二氯甲烷∶甲醇(10∶1)洗脱。将残留物用乙酸乙酯处理结晶得3.3g(30％)标题化合物。
(1H-NMR,300MHz,CDCl3):2.35(s,6H),2.50(s,3H),4.35(s,2H),4.45(bs,1H),6.50(d,1H),6.75(d,1H),6.95-7.15(m,4H)。实施例1.2合成4-(2,6-二甲苄氧基)-2-甲基苯并咪唑

将4-羟基-2-甲基苯并咪唑(0.59g,4mmol)溶于乙腈(15ml)中。向该溶液中加入2,6-二甲基苄氯(0.52g,4mmol)、氢氧化钠(0.16g,4mmol)(溶于1ml水中)，将该反应混合液回流2小时。减压蒸除溶剂，将残留物溶解于二氯甲烷中，用2M NaOH洗涤。分离有机层，用硫酸钠干燥，减压蒸发。将油状残留物经硅胶柱层析纯化。产物用含5％甲醇的二氯甲烷洗脱。用乙腈结晶得0.18g(18％)标题化合物。
(1H-NMR,300MHz,DMSO-d6):2.3(s,6H),2.40(s,3H),5.25(s,2H),6.9(d,1H),7.05-7.15(m,4H),7.2(t,1H)。实施例1.3合成4-(2,6-二甲基-4-氟苄氨基)-2-甲基苯并咪唑

将4-氨基-2-甲基苯并咪唑(0.6g,4.1mmol)溶于乙腈(10ml)中。向此溶液中加入2,6-二甲基-4-氟-苄基苄溴(0.89g,4.1mol)和碳酸钾(0.68g,4.9mmol)，将混合液在70-80℃加热3小时。将反应混合液冷却至室温，加入二氯甲烷(25ml)和水(25ml)。分离有机层，用硫酸钠干燥，减压蒸发。将残留物用乙酸乙酯结晶二次，再经硅胶柱层析纯化，用含10％甲醇的二氯甲烷作洗脱剂。得到0.26g(22％)标题化合物。
(1H-NMR,300MHz,CDCl3):2.3(s,6H),2.45(s,3H),4.25(s,2H),4.35(bs,1H),6.45(d,1H),6.65(d,2H),6.7(d,1H),7.1(t,1H)。实施例1.4合成4-(2,6-二甲基-4-氟苄氧基)-2-甲基苯并咪唑

将4-羟基-2-甲基苯并咪唑(0.57g,3.8mmol)溶于乙腈(4ml)中。向该溶液中加入氢氧化钠(0.17g,43mmol)(溶于1ml水中)和溶于乙腈(6ml)中的2,6-二甲基-4-氟苄溴(0.82g,3.8mmol)，将反应混合液回流80分钟，再在室温下搅拌20小时。向该反应混合物中加入二氯甲烷(25ml)和水(25ml)。分离有机层，用2M NaOH洗涤三次，用硫酸钠干燥，减压蒸发。残留物用乙酸乙酯结晶，然后经硅胶柱层析纯化二次a)二氯甲烷∶甲醇(10∶1)；b)乙酸乙酯∶甲醇∶乙酸∶水(96∶6∶6∶4)。得到0.066g(6％)标题化合物。
(1H-NMR,300MHz,DMSO-d6):2.3(s,6H),2.5(s,3H),5.05(s,2H),6.7(d,2H),6.8(d,1H),7.15(t,1H),7.25(d,1H)。实施例1.5
合成4-(2,6-二甲基苄氨基)-1,2-二甲基苯并咪唑

将4-(2,6-二甲基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑(0.2g,0.75mmol)溶于乙腈(15ml)中。向该溶液中加入碘甲烷(0.05ml,0.82mmol)和碳酸钾(0.2g,1.4mmol)，将该反应混合液在室温下搅拌20小时。过滤除去固体，用二氯甲烷洗涤。真空蒸除溶剂得油状残留物，经硅胶快速层析，用二氯甲烷∶甲醇(10∶1)洗脱。用乙腈结晶得0.018g(9％)标题化合物。
(1H-NMR,500MHz,CDCl3):2.4(s,6H),2.55(s,3H),3.65(s,3H),4.4(d,2H),4.55(bs,1H),6.55(d,1H),6.7(d,1H),7.05(d,2H),7.1(t,1H),7.2(t,1H)。实施例1.6合成4-(2-乙基-6-甲基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑

将4-氨基-2-甲基苯并咪唑(0.4g,2.7mmol)和2-乙基-6-甲基苄氯(0.46g,2.7mmol)溶解于10ml二甲氧基乙烷中。向该溶液中加入碳酸钠(0.5g,4.7mmol)和碘化钾(0.2g,4.7mmol)。将该反应混合液回流2小时。过滤除去无机盐，用二甲氧基乙烷洗涤。将滤液蒸发至干。残留物经硅胶柱层析纯化。将产物用50∶50二氯甲烷和乙酸乙酯混合液洗脱。得0.21g标题化合物。
(1H-NMR,400MHz,CDCl3):1.1(t,3H),2.35(s,3H),2.45(s,3H),2.70(q,2H),4.35(s,2H),4.45(bs,1H),6.55(d,1H),6.75(d,1H),6.95-7.20(m,4H)。实施例1.7合成4-(2,6-二乙基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑

将4-氨基-2-甲基苯并咪唑(0.79g,5.4mmol)和2,6-二乙基苯甲醛(1.1g,6.6mmol)溶解于甲醇(30ml)中。加入ZnCl2(0.9g,6.6mmol)，然后分小份加入NaBH3CN(0.42g,6.6mmol)，将反应混合液在通氩气下回流3小时，再在室温下搅拌16小时。将混合液倒入1M NaOH水溶液(50ml)中。将得到的黄色悬浮液用DCM提取，将有机溶液用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，然后减压蒸发。将油状残留物(1.8g)用乙酸乙酯和乙腈混合液重结晶纯化得到0.65g(41％)标题化合物。
(1H-NMR,300MHz,CDCl3):1.2(t,6H),2.5(s,3H),2.27(q,4H),4.35(d,2H),4.55(bs,1H),6.05(d,1H),6.75(d,1H),7.0-7.25(m,4H),9.0(bs,1H)。实施例1.8合成4-(2,6-二甲基-4-氟苄氨基)-1,2-二甲基苯并咪唑

将4-(2,6-二甲基-4-氟苄氨基)-2-甲基苯并咪唑(0.1g,0.35mmol)溶解于1,2-二甲氧基乙烷(3ml)中。加入固体氢氧化钠(25mg,0.63mmol)和溴化四丁基铵(5mg,0.016mmol)。将混合物在室温下搅拌15分钟。加入碘甲烷(60mg,0.42mmol)，将反应混合物在室温下搅拌2.5小时。减压蒸除溶剂。将残留物经硅胶柱层析纯化，用二氯甲烷∶乙酸乙酯(50∶50)为洗脱剂。得到80mg(76％)标题化合物。
(1H-NMR,300MHz,CDCl3):2.38(s,6H),2.53(s,3H),3.67(s,3H),4.32(d,2H),4.44(bs,1H),6.51(d,1H),6.68(d,1H),6.75(d,2H),7.18(t,1H)。实施例1.9合成4-(2,6-二甲基-4-氟苄氧基)-1,2-二甲基苯并咪唑

将4-(2,6-二甲基-4-氟苄氧基)-2-甲基苯并咪唑(180mg,0.63mmol)溶解于1,2-二甲氧基乙烷(6ml)中。向该溶液中加入氢氧化钠(26mg,0.65mmol)和碘甲烷(0.47ml,0.76mmol)。将该反应混合液在室温下搅拌3.5小时。蒸除溶剂后，残留物经硅胶层析纯化，用二氯甲烷∶甲醇10∶1洗脱。将得到的一部分组分经硅胶层析，以乙酸乙酯为洗脱剂，得到40mg(21％)标题化合物。
(1H-NMR,300MHz,CDCl3):2.40(s,6H),2.58(s,3H),3.70(s,3H),5.24(s,2H),6.75(d,2H),6.82(d,1H),6.93(d,1H),7.19(t,1H)。实施例1.10制备4-(2,6-二甲基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑盐酸盐将4-(2,6-二甲基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑(0.5g,1.9mmol)溶解于乙酸乙酯(20ml)和甲醇(6ml)中。向该溶液中加入盐酸(12M)(0.16ml,1.9mol)，将混合液在室温下搅拌5分钟。滤去沉淀的盐，干燥得到所需的产物，为白色结晶性固体(0.45g,79％)。
(1H-NMR,500MHz,MeOD):2.4(s,6H),2.8(s,3H),4.45(s,2H),6.9(d,1H),7.0(d,1H),7.1(d,2H),7.15(t,1H),7.4(t,1H)。实施例1.11制备4-(2,6-二甲基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑的甲磺酸盐将4-(2,6-二甲基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑(0.5g,1.9mmol)溶解于乙酸乙酯(20ml)和甲醇(7ml)中。向该溶液中加入甲磺酸(0.18g,1.9mmol),将混合液在室温下搅拌5分钟。滤去沉淀的盐，干燥得所需要的产物，为白色结晶状固体(0.58g,85％)。
(1H-NMR,500MHz,MeOD):2.4(s,6H),2.65(s,3H),2.75(s,3H),4.45(s,2H),6.9(d,1H),7.0(d,1H),7.1(d,2H),7.15(t,1H),7.4(t,1H)。2．制备中间体实施例2.1合成2,6-二甲基-4-氟-苄溴将3,5-二甲基-氟苯(5g,0.04mol)、多聚甲醛(15g)、氢溴酸(70ml)(30％乙酸液)和乙酸(25ml)的混合液在室温下搅拌4.5小时。向该混合液中加入水和石油醚，分离有机层，用无水硫酸钠干燥，减压小心蒸发。将残留物经硅胶柱层析纯化，以石油醚为洗脱剂得到标题化合物(3.7g,43％)。
(1H-NMR,300MHz,CDCl3):2.5(s,6H),4.55(s,2H),6.75(d,2H)。实施例2.2合成2-乙基-6-甲基苄基氯将2-乙基-6-甲基苯甲醇(1.0g,6.67mmol)溶解于10ml二氯甲烷中。加入亚硫酰氯(1.0g,8.5mmol)。将混合液在室温下搅拌过夜。蒸发反应混合液。将残留物溶解于二氯甲烷中，通过5g硅胶过滤。蒸发滤液。得到1.0g(89％)标题化合物(油状物)。
(1H-NMR,300MHz,CDCl3):1.29(t,3H),2.46(s,3H),2.76(q,2H),4.71(s,2H),7.0-7.2(m,3H)。3．生物学试验3.1体外试验对分离的兔胃腺上酸分泌的抑制作用对体外分离的兔胃腺上酸分泌的抑制效应按照Berglindh等(1976)Acta Physiol.Scand.97,401-414中说明方法测定。实施例1.1-1.7化合物显示出小于1.6μM的IC50值。
用作对照的化合物(A)(4-苄氨基-2-甲基苯并咪唑)为EP-B-0266326的权利要求1中所要求的化合物，其中A为CH2NH；R2、R3、R4、R5和R6是H；n为1；及R1为式Ⅱ’基团，其中R7、R8和R9为H。
用作对照的化合物(A)显示的IC50值为12.9μM。

用作对照的化合物(B)(4-苄氧基-2-甲基苯并咪唑)为EP-B-0266326的权利要求1中要求的化合物，其中A为CH2O；R2、R3、R4、R5和R6为H；n为1；及R1为式Ⅱ’基团，其中R7、R8和R9为H。
用作对照的化合物(B)显示的IC50值为7.8μM。

因此，本发明化合物与带有未被取代的苯基的化合物(A)和(B)相比在体外显示明显更好的对酸分泌的抑制效应。结论为提高作用的原因是本发明化合物的苯基在2-和6-位上被低级烷基取代。3.2体内试验对雌性大鼠酸分泌的抑制作用使用雌性Sprague-Dawly种大鼠。将鼠分别在胃(腔)和十二指肠的上部装上插瘘管以用来收集胃分泌物及给予试验的药物。手术后恢复14天，再进行试验。
在进行分泌试验前，将动物禁食但给水20小时。通过胃插管将胃反复用自来水(37℃)冲洗，皮下注射6ml林格-葡萄糖。在2.5-4小时期间输注(1.2ml/h，皮下)五肽促胃酸激素和氯化氨甲酰胆碱(分别为20和110n.mol/kg.h)来刺激胃酸分泌，同时收集每30分钟一份的胃分泌物。将试验物质或载体在开始刺激后60分钟时给药(静脉内和十二指肠内给药，1ml/kg)，或者在开始刺激前2小时给药(口服，5ml/kg，胃插管关闭)。可以增加给药与刺激的时间间隔，以研究作用的持续时间。将胃液汁样品用NaOH,0.1M滴定至pH7.0，按照产物的滴定剂体积和浓度来计算酸排出量。
再以4-6只大鼠的组平均反应过一步计算。在刺激中给药的情况下，试验物质或载体给药后的期间内的酸排出量以分数的反应来表示，该分数反应确定给药前30分钟内酸排出量为1.0。从由试验化合物及载体中得出的分数反应来计算百分抑制率。在刺激前给药的情况下，直接从试验物质和载体给药后记录的酸排出量来计算百分抑制率。大鼠的生物利用度使用Sprague-Dawley种的成年鼠。试验前1-3天将全部鼠在麻醉下在左颈动脉插管。用于静脉内试验的大鼠在颈静脉内也要插管(Popovic(1960)J.Appl.Physiol.15,727-728)。将这些插管外置于颈背部。
从给药到其后5.5小时的时间内反复从颈动脉内取血液样本(0.1-0.4g)。将样品冷冻至分析试验化合物。
通过计算分别从大鼠或狗的(ⅰ)十二指肠内(id)或口服(p.o)给药及(ⅱ)静脉内(i.v.)给药下血液/血浆浓度(AUC)曲线下的面积之间的商来估算生物利用度。
血液浓度对时间曲线AUC下的面积通过对数/线性梯形法则来测定，而且通过用终点状态的清除速度常数除以最后测定的血液浓度来外推其无限性。十二指肠内或口服给药后的系统生物利用度(F％)按下式计算(F％)=(AUC(p.o.或i.d.)/AUC(i.v.))×100对神智清醒狗的胃酸分泌抑制及生物利用度试验使用Labrador retriever或Harrier狗，雌雄均有。给狗装上十二指肠瘘管供试验化合物或载体的给药，再装上胃瘘管或小胃(Heidenhaim-pouch)以供收集胃分泌物。
进行分泌实验前将动物禁食约18小时，但可给水。通过多至6.5小时输注产生约80％个体最大分泌反应剂量的二盐酸组胺(12ml/h)来刺激胃酸分泌，收集连续每30分钟份的胃液。开始输注组胺后1或1.5小时时，口服、十二指肠内或静脉内给予试验化合物或载体，剂量为每公斤体重0.5ml。口服给药时，需指出要将试验化合物给到小胃狗的主要酸分泌的胃部。
胃液样本的酸性通过滴定至pH7.0来测定，再计算酸排出量。在试验物质及载体给药后的收集期间的酸排出量以分数的反应来表达，确定给药前部分的酸排出量为1.0。从由试验化合物及载体中得出的分数反应来计算百分抑制率。
用来分析血浆中试验化合物浓度的血液样品在给药后多至4小时的间隔内取样。在收集后30分钟内将血浆分离、冷冻，然后分析。口服或十二指肠内给药后的系统生物利用度(F％)按以上小鼠模型中说明的方法计算。
权利要求
1．式Ⅰ的化合物或其药学上可接受的盐
其中R1为低级烷基；R2为低级烷基；R3，其在所述苯环的3、4或5位上，为(a)H,(b)卤素，或(c)低级烷基；R4为(a)H，或(b)低级烷基；X，其在4或7位上与所述杂环相连，为(a)NH或(b)O。
2．根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中X与所述杂环在4位上相连。
3．根据权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为CH3或CH2CH3；R2为CH3或CH2CH3；R3为H、4-F或4-Cl；R4为H或CH3。
4．根据权利要求3的化合物，其为化合物4-(2,6-二甲基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑或其药学上可接受的盐。
5．根据权利要求3的化合物，其为化合物4-(2,6-二甲基苄氧基)-2-甲基苯并咪唑或其药学上可接受的盐。
6．根据权利要求3的化合物，其为化合物4-(2,6-二甲基-4-氟苄氨基)-2-甲基苯并咪唑或其药学上可接受的盐。
7．根据权利要求3的化合物，其为化合物4-(2,6-二甲基-4-氟苄氧基)-2-甲基苯并咪唑或其药学上可接受的盐。
8．根据权利要求3的化合物，其为化合物4-(2,6-二甲基苄氨基)-1,2-二甲基苯并咪唑或其药学上可接受的盐。
9．根据权利要求3的化合物，其为化合物4-(2-乙基-6-甲基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑或其药学上可接受的盐。
10．根据权利要求3的化合物，其为化合物4-(2,6-二乙基苄氨基)-2-甲基苯并咪唑或其药学上可接受的盐。
11．根据权利要求3的化合物，其为化合物4-(2,6-二甲基-4-氟苄氨基)-1,2-二甲基苯并咪唑或其药学上可接受的盐。
12．根据权利要求3的化合物，其为化合物4-(2,6-二甲基-4-氟苄氧基)-1,2-二甲基苯并咪唑或其药学上可接受的盐。
13．化合物，其为根据权利要求1-12中任一项的化合物的盐酸盐。
14．化合物，其为根据权利要求1-12中任一项的化合物的甲磺酸盐。
15．用于医疗上的根据权利要求1-14中任一项的化合物。
16．制备根据权利要求1-14中任一项的化合物的方法，其包括使通式Ⅱ的化合物
其中X1为与所述杂环在4或7位上相连的NH2或OH,R4按式Ⅰ中定义，与通式Ⅲ化合物反应
其中R1、R2和R3按式Ⅰ中定义，Y为离去基团，在惰性溶剂中，有或无碱存在下生成式Ⅰ化合物。
17．制备根据权利要求1-14中任一项的化合物的方法，其包括(a)使式Ⅳ化合物
其中R4按式Ⅰ中定义而所述NH2与所述杂环在4或7位上相连，与式Ⅴ化合物反应
其中R1、R2和R3按式Ⅰ中定义，在路易斯酸存在下，在惰性溶剂中生成式Ⅵ化合物
其中R4按式Ⅰ中定义，而所述亚胺氮原子与所述杂环在4或7位上相连，(b)在标准条件下，在惰性溶剂中，将式Ⅵ化合物还原成通式Ⅰ的化合物。
18．制备根据权利要求1、2、3或8中任一项的、其中R4为“低级烷基”的化合物的方法，其包括将其中R4为H的式Ⅰ化合物在惰性溶剂中，有或无碱存在下用式Ⅶ化合物烷基化R4X2Ⅶ其中R4按式Ⅰ中定义而X2为离去基团，生成其中R4为“低级烷基”的式Ⅰ化合物。
19．药物制剂，其包含根据权利要求1-14中任一项的化合物并另外含有药学上可接受的载体。
20．应用根据权利要求1-14中任一项的化合物来制备抑制胃酸分泌的药物。
21．应用根据权利要求1-14中任一项的化合物来制备治疗胃肠道炎症疾病的药物。
22．应用根据权利要求1-14中任一项的化合物来制备用于治疗或预防由人胃粘膜的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)感染引起的症状的药物，其中采用给药的所述盐至少要与一种抗菌剂结合。
23．抑制胃酸分泌的方法，其包括给所需这种抑制的哺乳动物包括人类有效量的根据权利要求1-14中任一项的化合物。
24．治疗胃肠道炎症疾病的方法，其包括给所需这种治疗的哺乳动物包括人类有效量的根据权利要求1-14中任一项的化合物。
25．治疗或预防由人胃粘膜的幽门螺杆菌感染引起的症状的方法，其包括给所需这种治疗的哺乳动物包括人类有效量的根据权利要求1-14中任一项的化合物，其中所述盐至少要与一种抗菌剂结合给药。
26．用于抑制胃酸分泌的药物制剂，其中所述活性成分为根据权利要求1-14中任一项的化合物。
27．用于治疗胃肠道炎症疾病的药物制剂，其中所述活性成分为根据权利要求1-14中任一项的化合物。
28．用于治疗或预防由人胃粘膜的幽门螺杆菌感染引起的症状的药物制剂，其中所述活性成分为根据权利要求1-14中任一项的化合物并结合至少一种抗菌剂。
全文摘要
本发明涉及式(Ⅰ)的苯并咪唑衍生物,其中苯基部分在2－和6－位上被低级烷基取代,其抑制外源性或内源性所刺激的胃酸分泌,故可用于预防和治疗胃肠道炎症疾病。
文档编号A61K31/00GK1226236SQ9719670
公开日1999年8月18日 申请日期1997年6月5日 优先权日1996年6月10日
发明者K·阿明, M·达尔斯特伦, P·诺德贝里, I·斯塔克 申请人:阿斯特拉公司