专利名称：速效止痛灵擦剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及治疗跌打损伤、踝关节损伤、软组织损伤等疾病，消炎止痛，活血化瘀的外用中成药，特别是速效止痛灵擦剂及其制备方法。
在国内出版的文献中，检索出一些止痛中药外用治疗跌打损伤、软组织损伤的报导。如1995年出版的“中国中医骨伤科”杂志第3卷第5期1-5页，由候伟等报导的损伤液化膜涂膜剂，主要药物组成为白芷、当归、红花、防风、三七等，具有抗炎、止痛作用。1994年出版的“陕西中医”杂志第15卷第6期256页，由尚中校同志报导的“栀红大黄搽剂治疗软组织损伤121例”，采用栀红大黄搽剂其主要药物组成为山栀、大黄、红花、冰片，治疗软骨组织损伤121例，总有效率为98.3％。该药物有消除瘀血肿胀、缓解疼痛、恢复功能的作用。1997年出版的“陕西中医”杂志第18卷第2期64-65页，由陈双全报导的舒筋止痛液治疗肩周炎，其主要药物组成为制马钱子、川乌、草乌、血竭、白花蛇、苏木、樟脑、冰片等，治疗肩周炎100例，总有效率为80％，该药具有活血化瘀、祛风散寒、通络止痛等作用。
从上述国内文献报导的止痛中药外用治疗跌打损伤、软组织损伤的论述来看，其外用擦剂药物组成各不相同。
本发明的目的是提供一种速效止痛灵擦剂，用以治疗跌打损伤、闪挫扭伤所致关节骨肉疼痛、青紫肿胀之症，具有解痛镇痛、抗炎消肿、活血化瘀、行气通脉的功能，本发明的药方组成与现有公开的外用擦剂药物组成各不相同。
本发明的内容是速效止痛灵擦剂及其制备方法。速效止痛灵擦剂处方范围是三七24.5-25.5g枯矾37.0-38g 苏木24.5-25.5g血竭24.5-25.5g硼砂24.5-25.5g冰片112-113g速效止痛灵擦剂优先选择的处方是三七25.0g枯矾37.5g苏木25.0g血竭25.0g硼砂25.0g冰片112.5g速效止痛灵擦剂的制备方法是1.取三七、苏木(30目-60目的粗粉)与硼砂、枯矾(80目-100目的细粉)混匀；2.加浓度为70-80％的乙醇1000ml，浸泡60-85小时；3.进行过滤，将过滤剩下的药渣进行压榨；
4.将浸出液和压榨液混合，静置24小时以上；5.在浸出液和压榨液的混合液中，加入血竭、冰片，并溶解在混合液中；6.再添加浓度为70-80％的乙醇至1000ml，摇匀、澄清过滤，即得。
〔药物来源〕本制剂中药材三七、苏木、血竭、冰片、硼砂、枯矾为〖中华人民共和国药典〗标准。
1.三七 本品为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk)F.H.Chende的干燥根。本品应符合《中国药典》1995版一部第8-9页三七项下的有关规定。
2.苏木 本品为豆科植物苏木Caesalpinin sappan L.的干燥芯材。本品应符合《中国药典》1995版一部第140页苏木项下的有关规定。
3.血竭 本品为棕榈科植物骐驎竭Daemonnrops dracoBL果实及树干中的树脂，见《中国药典》1995版一部，附录23页。
4.冰片 本品为无色透明或白色半透明的片状松脆结晶。本品应符合《中国药典》1995版一部第122页冰片项下的有关规定。
5.硼砂本品为天然硼砂经精制而成的结晶，见《中国药典》1995版一部，附录25页。
6.枯矾 本品为硫酸盐类矿物明矾石加工提炼制成的白矾经煅烧而成。本品应符合《中国药典》1995版一部第89页白矾项下的有关规定。按君、臣、佐、使组方原则分析处方配伍三七，性味甘微苦、温、归肝、胃经。《本草纲目》称三七，“凡杖扑伤损、瘀血淋漓者，随即唧烂罨之即止，青肿者即消散。”《本草求真》称“病因血瘀则疼作，三七气味苦温，能于血分化其血瘀。”疮疡，取其酸涩而收也。”《长沙药解》称“矾石，最化瘀浊，化败血而消痞鞭，最收湿气而化瘀腐，善吐下老痰宿饮。缘痰涎凝结，粘滞于上下窍隧之间，牢不可动，矾石收罗而扫荡之，离根失据，脏腑不容，实非吐下之物也。”综合以上诸家所论，枯矾能除痰浊、化瘀浊、祛败血、消痞硬，既能消除瘀血，又能化解痰浊，是化瘀消痰治疗痰瘀互结之证的佳品。《医学衷中参西录》称“三七善化瘀血。若跌打损伤，内连脏腑经络作疼痛者，外敷内服，奏效尤捷”。据以上各家所论，三七有活血化瘀之功，能化瘀止疼痛，化瘀消散青肿。
血竭，性味甘咸、平，归心、肝经。《纲止》称河间刘氏云“血竭除血痛，为和血之圣药是矣”。《本草经疏》称“骐驎竭，散瘀血、生新血之要药，故主破积血，止痛。李珣以之治伤折打损，一切疼痛，血气搅刺”。《本草逢原》称“血竭，取以调和血气，而无留滞壅毒之患。”据以上各家评论，血竭具散瘀血，破积血之功，尤擅长于治疗外伤瘀血疼痛，且能调和气血而无留滞壅毒之患。
苏木，性味甘咸微辛、平、归心、肝、脾经。《纲目》称苏木，“少用则和血，多用则破血”。《本草经疏》称苏木，“咸主入血，辛能走散，败浊瘀积之血行，故能祛一切凝滞留结之血。”《本草求真》称苏木，“功用有类红花，少用则能和血，多用则能破血。故凡病跌扑损伤等症，皆宜相症合以它药调治。”综合以上各家所论，苏木具活血、破血逐瘀之功，能令败浊瘀积之血行，能祛凝滞留结之血，用于治疗跌扑损伤之瘀血证。
硼砂，性味甘咸、凉，归肺、胃经。《纲目》称硼砂“能去胸膈上焦之热，治痰热。”《本草经疏》称硼砂“能解上焦胸膈肺分之痰热，破症结也。”“克削为用，消散为能，宜攻有余。”《本草汇言》称硼砂“淡渗清化，如诸病属气闭、痰结、火结者，用此立消。”综合以上各家所论，硼砂能行气闭，清化痰热、破症结，以克削、消散痰结为能事。有报道称用煅硼砂研极细末点于眼内 及龈交穴，并作弯腰、转身、蹲下、起立等动作活动腰部，用以治疗闪腰疼痛，多数病例1-3次痊愈。
枯矾，性味酸涩、寒，归肺、肝、脾、大肠经。《纲目》称“矾石之用，吐利风热之痰涎，取其酸苦涌泄也；治诸血痛、脱肛、阴挺、疮疡，取其酸涩而收也。”《长沙药解》称“矾石，最化瘀浊，化败血而消痞鞭，最收湿气而化瘀腐，普吐下老痰宿饮。缘痰涎凝结，粘滞于上下窍隧之间，牢不可动，矾石收罗而扫荡之，离根失据，脏腑不容，实非吐下之物也。”综合以上诸家所论，枯矾能除痰浊、化瘀浊、祛败血、消痞硬，既能消除瘀血，又能化解痰浊，是化瘀消痰治疗痰瘀互结之证的佳品。
冰片，性味辛苦、微寒，归心、脾、肺经。《本草衍义》称“龙脑，此物大通利关膈热塞，其清香为百药之先，大人小儿风涎闭壅甚济用。”《本草集要》称“龙脑，大辛善走，故能通利结气，取其辛散也。”《纲目》称“火郁则发之，从治之法，辛主发散故尔。能走能散，使壅塞能利，则经络条达。”《本草经疏》称“龙脑香，性善走窜开窍，无往不达；芳香之气，能辟一节邪恶。”《本草述》称“龙脑香，其所疗诸症，如宗所谓通利关膈热壅，切斋所谓散热通利结气，中 所谓气闭生絷诸症，举能开之，是其散壅、利结、开闭，对待不爽。更诸说皆以为从治之法者，良不谬也。此味既谓辛散是矣，凡壅者、结者、闭者，随其所患之处而能散血也。”《医林纂要》称“冰片，辛香之气固无不达，性走而不守，亦能止痛。”综合以上诸家所论，冰片辛散苦泄，能通利结气，解散壅塞，条达经络，走窜开窍，清解热结，能避邪恶，又能散血止痛。故凡壅者、结者、闭者，冰片能散壅、利结，开闭。
酒精，性味甘苦辛、温，归心、肝、肺、胃经。《养生要集》称“酒者，节其分剂而饮之，宜和百脉。”《名医别录》称“大寒凝海，惟酒不冰，明其热性，独冠群物，药家多须以行药势。”《汤液本草》称“酒能行诸经不止。”《本草经疏》称“世之于酒，不谓其引药性上行，即谓其引药性入血；不曰行药势，岂不以是药本治是病，特其机势不张，借此以行之耶？”综合以上各家所论，酒能宜和百脉，行诸经不止，更主要的作用是行药势，即借酒力而令它药的治疗作用得到充分的发挥。
速效止痛灵方中，三七化瘀止痛、消肿，用于跌扑扭挫等外伤所致关节、肌肉瘀血疼痛、青紫肿胀其效甚佳，故为方中君药。血竭能散瘀血、破积血，且能防瘀血留滞壅毒，用治外伤瘀血肿痛青紫其效颇佳；苏木能活血、破血而逐瘀，并能令败浊瘀积之血行，能祛凝滞留结之血，与血竭相伍，助三七化瘀止痛消肿，为方中之臣药。硼砂行气闭、清痰热、破症结、2克消痰结；枯矾能除痰浊、化瘀浊、祛败血、消痞硬，痰瘀兼化。硼砂，枯矾二味以除痰为主，兼以化瘀，助君药之化瘀止痛消肿，故同为佐药。冰片利结气、散壅塞、通经络、解热结；酒精通血脉、行诸经、行药热，二味全力，助君、臣、佐之药力，行药势于病位，入此二味为方中使药。方中七味药，按君、臣、佐、使配伍，各司其治，又相互配合协调，相得益彰，共奏活血祛瘀、清化痰热、行气通经络之效，用以治疗跌打损伤、闪挫扭伤所致关节骨肉疼痛、青紫肿胀之症。速效止痛灵擦剂〔处方〕三七 25.0g枯矾 37.5g苏木 25.0g血竭 25.0g硼砂 25.0g冰片 112.5g〔制法〕取三七、苏木、硼砂、枯矾，加75％乙醇浸泡84小时，收集浸出液，压榨药渣，合并压榨液与浸出液，静置24小时以上，滤过，加入血竭、冰片溶解，再添加75％乙醇至1000ml，澄清过滤，即得。
〔性状〕本品为棕红色澄清液体。
〔鉴别〕1.取本品20ml，冷风吹干，残渣用乙醚(50、50ml)和蒸馏水(60、60ml)交替溶解后移入分液漏斗中，振摇，静置分层，吸出上层乙醚液，水层继续用乙醚萃取两次(每次30ml)，水层再用乙酸乙酯萃取两次(每次30ml)，水层水浴上挥去残留乙醚和乙酸乙酯，放冷后加到处理好的大孔吸附树脂柱(内径1.0cm，长15cm)中，首先用200ml蒸馏水冲洗，弃去水液；然后用50％乙醇350ml进行洗脱，取洗脱液20ml，水浴蒸干，残渣用醋酐溶解，加醋酐浓硫酸试液1-2滴，显黄色，渐变红色、青色。
2.取本品20ml，冷风吹干，残渣用乙醚(50、50ml)和蒸馏水(60、60ml)交替溶解后移入分液漏斗中，振摇，静置分层，弃去水层，醚层继续用蒸馏水洗涤两次(每次30ml)，醚层水浴挥干，残渣用95％乙醇10ml溶解，过滤，取滤液2ml置试管中，加稀HCl1ml，振摇，溶液由红色变为黄色，再加10％乙酸钠2-3ml，振摇后加热2-3分钟，溶液又由黄色变为红色。
3.取三七皂甙R1标准品适量，加甲醇制成1mg/ml的溶液作为对照品溶液；取本品20ml，冷风吹干，残渣用乙醚(50、50ml)和蒸馏水(60、60ml)交替溶解后移入分液漏斗中，振摇，静置分层，吸出上层乙醚液，水层继续用乙醚萃取两次(每次30ml)，水层再用乙酸乙酯萃取两次(每次30ml)，水层水浴上挥去残留乙醚和乙酸乙酯，放冷后加到处理好的大孔吸附树脂柱(内径1.0cm，长15cm)中，首先用200ml蒸馏水冲洗，弃去水液；然后用50％乙醇350ml进行洗脱，收集50％乙醇洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml，作为供试品溶液；依供试品溶液同法操作制备阴性对照品溶液。
照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》1995版一部，附录35页)试验，吸取对照品、供试品、阴性对照品溶液各5μl，分别点于同一含羧甲基纤维素钠的硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水(6∶4∶1)为展开剂，上行展开，取出凉干，喷以香草醛-硫酸试液，烘干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照品无此斑点。
4.取血竭标准药材2.0g，加95％乙醇20ml，振摇过滤，将滤液加盐酸使之析出沉淀，过滤，以少量的酸水洗涤沉淀，再用20％KOH洗涤后，转溶于氯仿中即为血竭红素氯仿液，以血竭红索氯仿液作为对照品溶液；取本品20ml，冷风吹干，残渣用乙醚(50、50ml)和蒸馏水(60、60ml)交替溶解后移入分液漏斗中，振摇，静置分层，弃去水层，醚层继续用蒸馏水洗涤两次(每次30m)，醚层水浴挥干，残渣用氯仿溶解，作为供试品溶液；依供试品溶液同法操作制备阴性对照品溶液。
照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》1995版一部，附录35页)试验，吸取对照品、供试品、阴性对照品溶液各5μl，分别点于同一含羧甲基纤维素钠的硅胶G薄层板上，以苯∶甲醇(9∶1.5)为展开剂，上行展开，取出吹干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照品无此斑点。
〔含量测定〕1.取本品1.0ml，冷风吹干，残渣用乙醚(30、30ml)和蒸馏水(40、40ml)交替溶解后移入分液漏斗中，振摇，静置分层，吸出上层乙醚液，水层继续用乙醚萃取两次(每次20ml)，水层再用乙酸乙酯萃取两次(每次30ml)，水层水浴上挥去残留乙醚和乙酸乙酯，放冷后加到已处理好的大孔吸附树脂柱(内径1.0cm，长15cm)中，首先用75ml蒸馏水冲洗，弃去水液，然后用50％乙醇125ml进行洗脱，收集50％乙醇洗脱液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并定容于10ml容量瓶中，取甲醇液250ul置10ml具塞试管中，于沸水浴(约94℃)加热5分钟挥去甲醇，取出放冷，加新鲜配制的5％香草醛冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，于70℃水浴保温15分钟，取出，立即用冷水冲凉，加冰醋酸5ml，混匀，放置10分钟，同法作空白，照分光光度法(《中华人民共和国药典》1995版一部，附录32页)于545nm处测定吸收度A，代入标准曲线方程，计算含量。
本品含三七总皂甙不得低于1.00mg/ml。
2.冰片照气相色谱法(95版药典一部附录VI E)测定。
系统适用性试验以甲基硅橡胶(SE-30)为固定液，涂布浓度5％，柱温140±10℃，理论塔板数以冰片峰计算应大于450。
对照品溶液的制备取冰片对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含0.6mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备取样品1ml置25ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，作供试品溶液测定法分别精密量取对照品溶液和供试品溶液0.5ul，注入气相色谱仪，计算，即得。
本品含冰片C10H13O应不小于20mg/ml。〔检查〕1.乙醇量按《中华人民共和国药典》1995版一部，附录56页的方法测定，本品的乙醇含量应在60-70％之间。
2.其它应符合《中华人民共和国药典》1995版一部，附录10页酊剂项下有关的各项规定。
制备工艺研究资料速效止痛灵擦剂是由三七、血竭、冰片、苏木、硼砂、枯矾六味中药经乙醇泡制而成，具有解痉镇痛、抗炎、消肿、活血祛瘀等作用，广泛应用于风湿痹痛、跌打损伤、骨折伤筋等症。根据文献报导，该擦剂中含有皂甙类化合物，因而以三七总皂甙的含量为考察指标，采用均匀试验设计筛选速效止痛灵擦剂的最佳生产工艺。
一.含量测定1.测定波长的选择取人参皂甙Rg1标准品适量，加甲醇制成1mg/ml的溶液作为对照品溶液；取提取液(三七、苏木、硼砂、枯矾的75％乙醇浸出液)1.0ml，冷风吹干，残渣用乙醚(30、30ml)和蒸馏水(40、40ml)交替溶解后移入分液漏斗中，振摇，静置分层，吸出上层乙醚液，水层继续用乙醚萃取两次(每次20ml)，水层再用乙酸乙酯萃取两次(每次30ml)，水层水浴挥去残留乙醚和乙酸乙酯，放冷后加到处理好的大孔吸附树脂柱(内径1.0cm，长15cm)中，首先用75ml蒸馏水冲洗，弃去水液；再用50％乙醇125ml进行洗脱，收集50％乙醇洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml，作为供试品溶液；另取阴性药液(苏木、硼砂、枯矾的75％乙醇浸出液)1.0ml，依供试品溶液同法操作制成阴性对照品溶液。
图1为人参皂甙Rg1标准品描图，图2为供试品扫描图，下面结合附图进行说明。精取标准溶液、供试品、阴性对照品溶液100、500、500ul，按含量测定法操作显色后，在TU-1221型UV/VIS分光光度计400-900nm波长范围内扫描(见图一、图二)，从图中可看出人参皂甙Rg1标准品在543nm处有一最大吸收峰，三七总皂甙在545nm处有一最大吸收峰，而阴性对照品在此波长处干扰很小，因此选定545nm为三七总皂甙的测定波长。
2.标准曲线的制备精密量取人参皂甙Rg1标准液(1mg/ml)20、30、40、50、60、70ul置于10ml具塞试管中，于沸水浴(约94℃)中，加热5分钟以挥去甲醇，取出放冷，加新鲜配制的5％香草醛冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，于70℃水浴保温15分钟，取出，立即用冷水冲凉，加冰醋酸5ml，混匀，放置10分钟，同法作空白，于545nm处测定吸收度A，以吸收度A对浓度C回归可得标准曲线方程为C＝28.39A-0.01359 r＝0.9993(P＜0.01)3.样品测定取本品1.0ml，冷风吹干，残渣用乙醚(30、30ml)和蒸馏水(40、40ml)交替溶解后移入分液漏斗中，振摇，静置分层，吸出上层乙醚液，水层继续用乙醚萃取两次(每次20ml)，水层再用乙酸乙酯萃取两次(每次30ml)，水层水浴上挥去残留乙醚和乙酸乙酯，放冷后加到已处理好的大孔吸附树脂柱(内径1.0cm，长15cm)中，首先用75ml蒸馏水冲洗，弃去水液，然后用50％乙醇125ml进行洗脱，收集50％乙醇洗脱液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并定容于10ml容量瓶中，取甲醇液250ul置10ml具塞试管中，于沸水浴(约94℃)加热5分钟挥去甲醇，取出放冷，加新鲜配制的5％香草醛冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，于70℃水浴保温15分钟，取出，立即用冷水冲凉，加冰醋酸5ml，混匀，放置10分钟，同法作空白，照分光光度法(《中华人民共和国药典》1995版一部，附录32页)于545nm处测定吸收度A，代入标准曲线方程，计算含量。
二.总皂甙提取的均匀实验设计1.均匀设计三七中含有多种皂甙，根据皂甙易溶于乙醇，我们采用乙醇为提取溶剂，用冷浸法提取总皂甙。在实验中，以三七总皂甙的含量为指标，考察醇浓度和浸泡时间两个因素的影响，并结合生产实际，每个因素选择了七个水平，因素水平见表1。
表1因素水平表因素水平乙醇浓度(％) 65 70 75 80 85 90 95冷浸时间(小时) 12 24 36 48 60 72 842.实验方法及数据选用U7(76)表制定实验方案，结果见表2。称取三七2.5g、苏木2.5g、硼砂2.5g、枯矾3.75g，加不同浓度的乙醇100ml浸泡一定时间，然后按含量测定项下操作测定含量，计算三七中含有三七总皂甙的含量。
表2U7(76)表试验号 乙醇浓度 浸泡时间三七总皂甙的含量(％) (h) (mg/g)1 1(65) 3(36) 45.852 2(70) 6(72) 62.013 3(75) 2(24) 52.484 4(80) 5(60) 54.115 5(85) 1(12) 37.276 6(90) 4(48) 36.867 7(95) 7(84) 21.763.数据处理将实验结果用计算机进行多元回归，求得回归方程Y＝-476.0739+14.108X1+0.2069X2-0.0951X1X2X1——乙醇浓度，X2——浸泡时间，R＝0.988，S＝2.899，F＝42.309＞F0.1(3，3)＝6.6054，F检验通过，回归方程有意义。优化条件为乙醇浓度——73.75％，浸泡时间——83.36小时，预测值＝64.487(mg/g)结合生产实际综合分析确定最优提取条件为75％乙醇，浸泡84小时。
4.验证实验称取处方比例五倍量的三七、苏木、硼砂、枯矾三份，分别按照均匀设计筛选的最优提取条件浸泡药材，所得药液进行含量测定，测定结果见表3。
表3三七总皂甙的含量(mg/g)批号 123 X±SD980104 62.2864.7464.7463.92±1.42980105 63.3763.3765.8364.19±1.42980106 62.5563.3765.5563.82±1.55将上述三个批号药液总皂甙的含量进行方差分析及q检验，结果表明三批药液的总皂甙含量均无显著性差异(P＞0.05)，两两批号间比较也无显著性差异(P＞0.05)，说明按最优提取条件提取的药液，其总皂甙含量接近于预测值。根据均匀设计筛选的最优提取条件，确定如下生产工艺取三七、苏木(粗粉)与硼砂、枯矾(细粉)混匀，加75％乙醇1000ml浸泡84小时，收集浸出液，压榨药渣，合并压榨液与浸出液，静置24小时以上，滤过，加入血竭、冰片溶解，再添加75％乙醇至1000ml，摇匀，澄清过滤，即得。
5.提取率实验称取三七药材2.5g三份，置索氏提取器中，用75％乙醇回流提取至提取完全，过滤，滤液回收乙醇，残渣加水溶解，按总皂甙测定项下规定进行操作测定含量，然后计算出1.0g三七药材中含有三七总皂甙的含量(mg/g)分别为87.49、86.81、88.17，X±SD＝87.49±0.68。按生产工艺制备三批药液，测定总皂甙含量并计算提取率，结果见表4。
表4提取率的测定980104980105980106药液总皂甙含量(mg/g)63.92 64.19 63.82三七药材中总皂甙含量(mg/g)87.49提取率(％) 73.06 73.37 72.95该生产工艺的提取率均在70％以上，可用于批量生产。
速效止痛灵擦剂家兔皮肤长期毒理试验资料速效止痛灵擦剂主要用以治疗跌打损伤的急性止痛，并能促进愈合，恢复正常运动功能。依外用中药三类新药要求，进行皮肤长期毒性研究。
目的 观察家兔完整皮肤和破损皮肤长期接触止痛灵擦剂，经皮肤渗透对局部和全身产生的毒性反应和反应的恢复程度。
动物和材料新西兰种健康白色家兔，体重2.12±0.35kg，雌雄各半，新疆地方病研究所动物室提供(生产证书(94)16001号)。速效止痛灵擦剂，深红色澄明液体，0.25g生药/ml，新疆医学院一附院张鸿飞大夫研制。76％乙醇，本室自配。硫化钠，分析纯，北京新光化学试剂厂出品。
方法与结果 取健康白色家兔30只，雌雄各半，每组6只，分笼饲养。给药前24小时将家兔背部脊柱两侧以10％Na2S溶液脱毛(约150cm2)。破损皮肤用木工细砂纸擦皮肤，以皮肤轻度均匀渗血为度依体重和性别均衡分为溶媒对照组(涂76％乙醇2.0ml/只，速效止痛灵擦剂完整皮肤低剂量组(涂1.0ml/只)，速效止痛灵擦剂高剂量组(涂3.0ml/只)；破损皮肤低剂量组和高剂量组(止痛灵擦剂两种剂量同完整皮肤组)。每天涂1次，连用60天。于第60天涂药后6小时，各组取4只(雌雄各半)，耳静脉取血作血常规和血生化测定。处死家兔，取皮肤(涂药处)、心、肝、脾、肺和肾，作大体死解与病理组织学检查，并计算脏器系数(脏器重/体重)。
各组余下2只家兔，停药后继续饲养2周，亦取静脉血作血常规和血生化测定，取皮肤(涂药处)、心、肝、脾、肺和肾，作大体与病理组织学检查，并计算脏器系数，以确定毒性反应的恢复程度。
结果，4组给药家兔(含可逆性观察家兔共10只)无一死亡，精神活动状态和进食量无异常，无任何中毒症状。逐日观察皮肤状况，破损皮肤薄痂于第3日脱落，第5日完全恢复正常。60天中各组家兔皮肤未发现肉眼可见的病理损害。实验结束时家兔平均体重为2.61±0.36kg，即家兔体重增加0.49kg。
脏器系数、血常规、血生化测定及皮肤、心、肝、脾、肺、肾病理组织学检查，给药组与溶媒给比较，均未见任何病理性变化(见表5-7，可逆性观察结果见表8-10)。
结论 止痛灵擦剂，家兔皮肤1.0ml/只和3.0ml/只(即为0.25g生药和0.75g生药/只)，两个剂量，连续外涂用药60天，未发现任何中毒症状，血常规、血生化测定和主要脏器病理组织学检查均未见任何病理变化。提示，速效止痛灵擦剂在规定剂量范围外涂家兔皮肤，无明显毒性，皮肤用药安全。表5速效止痛灵擦剂外涂60天对家兔脏器系数的影响。X±SD n＝4脏器系数(g/kg)组别心肝 脾 肺 肾溶媒对照组 2.46±0.32 29.58±2.98 0.53±0.14 5.20±1.53 2.94±0.29破损皮肤3.0ml/只.d 2.56±0.13* 30.87±3.44* 0.48±0.19* 5.97±0.61* 3.03±0.24*1.0ml/只.d 2.60±0.26* 29.36±4.71* 0.49±0.15* 5.14±0.84* 2.96±0.30*完整皮肤3.0ml/只.d 3.00±0.20** 34.76±7.14* 0.57±0.16* 5.61±2.04* 3.44±0.53*1.0ml/只.d 2.58±0.05* 29.06±3.56* 0.51±0.16* 5.84±0.81* 2.90±0.26**P＞0.05，**P＜0.05，与溶媒对照组比较表6速效止痛灵擦剂外涂60天对家兔外周血像的影响。X±SD n＝4组别 RBCHB HCT PLT WBC NL(×1012/L) (g/L)(％) (×109/L) (×109/L) (％)(％)溶媒对照组 6.34±0.37 137.0±6.0 44.8±1.7 370.2±46.1 8.4±2.1 39.2±2.9 60.9±2.8破损皮肤3.0ml/只.d 6.65±0.36* 141.0±12.1* 47.1±2.9* 371.8±9.8* 8.2±2.0* 47.6±11.0* 52.4±11.0*1.0ml/只.d 6.09±0.48* 130.0±10.3* 42.7±4.0* 384.5±63.1* 7.8±2.2* 47.0±6.3* 53.0±6.3*完整皮肤3.0ml/只.d 5.86±0.61* 127.0±12.5* 40.1±4.3* 367.8±88.6* 7.7±1.8* 44.5±10.4* 55.5±10.4*1.0ml/只.d 5.73±0.38* 136.0±8.5* 43.3±2.5* 365.6±46.3 7.7±1.1* 37.1±4.9* 62.9±4.9**P＞0.05，均与溶媒对照组比较表7速效止痛灵擦剂外涂60天对家兔血生化的影响。X±SD n＝4组别 CHO ALT AST TP GLU TRIGALBBUN Cr(mmol/L)(U/L) (U/L)(g/L) (mmol/L)(mmol/L) (g/L)(mmol/L)(um)溶媒对照组 1. 27±0.24 33.5±10.5 13.5±4.2 53.2±2.1 5.92±0.84 0.72±0.10 28.7±0.9 7.44±1.87 44.6破损皮肤3.0ml/只.d 1.00±0.22* 30.7±13.1* 14.8±3.4* 57.8±3.1* 5.87±0.33* 0.69±0.20* 29.2±0.6* 7.60±0.83* 39.71.0ml/只.d 1.28±0.46* 38.2±17.1* 14.2±2.9* 57.7±4.1* 6.95±0.71* 0.66±0.23* 30.0±2.0* 5.69±1.10* 58.0完整皮肤3.0ml/只.d 0.93±0.28* 33.7±9.9* 15.2±4.2* 55.1±3.9* 6.35±0.68* 0.67±0.16* 29.3±1.2* 7.56±1.00* 58.31.0ml/只.d 1.06±0.16* 36.5±7.9* 12.8±2.1* 52.2±4.8* 6.25±0.79* 0.67±0.08* 28.4±1.4* 6.00±1.03* 46.3*P＞0.05均与溶媒对照组比较表8速效止痛灵擦剂停药2周后家兔脏器系数的变化。X±SD n＝4器脏系数(g/kg)组别心 肝 脾 肺 肾溶媒对照组 2.53±0.22 30.01±7.11 0.50±0.13 5.70±0.66 3.07±0.31破损皮肤3.0ml/只.d 2.49±0.48* 29.00±5.16* 0.51±0.10* 5.38±0.89* 3.00±0.29*1.0ml/只.d 2.50±0.71* 29.87±2.14* 0.54±0.15* 5.81±0.90* 2.99±0.34*完整皮肤3.0ml/只.d 2.61±0.25* 29.59±4.25* 0.48±0.17* 5.90±1.02* 3.15±0.79*1.0ml/只.d 2.57±0.51* 28.99±5.71* 0.51±0.15* 5.09±0.48* 2.97±0.58**P＞0.05，均与溶媒对照组比较表9速效止痛灵擦剂停药2周后家兔外周血像的变化。X±SD n＝4组别RBC HB HCT PLT WBC N L(×1012/L)(g/L) (％) (×109/L) (×109/L)(％) (％)溶媒对照组 6.01±0.29 136.5±3.5 43.4±1.6 375.0±98.5 8.55±2.1 40.25±0.73 59.45±8.32破损皮肤3.0ml/只.d 5.91±0.34* 134.5±7.8* 45.1±3.7* 381.2±28.1* 8.35±0.21* 45.87±10.12* 5417±21.02*1.0ml/只.d 5.60±0.23* 134.0±1.4* 44.8±4.6* 377.2±108.2* 7.80±1.84* 43.97±8.29* 58.25±17.50*完整皮肤3.0ml/只.d 5.95±0.99* 132.5±12.0* 42.9±2.8* 370.2±89.7* 8.15±0.07* 44.12±9.92* 60.01±18.20*1.0ml/只.d 5.72±0.17* 136.0±5.7* 43.9±4.8* 374.1±90.1* 7.85±0.21* 39.20±5.68* 61.12±9.87**P＞0.05，均与溶媒对照组比较表10速效止痛灵擦剂停药2周后家兔血生化的变化。X±SD n＝2组别 CHO ALT AST TP GLU TRIGALB BVN Crea(mmol/L)(U/L)(U/L) (g/L) (mmol/L) (mmol/L) (g/L) (mmol/L) (umol/L)溶媒对照组 1.30±0.01 30.5±7.0 11.5±2.1 53.5±0.78 6.55±0.78 0.70±0.12 28.7±1.6 6.92±0.11 58.0±7.1破损皮肤3.0ml/只.d 1.00±0.18* 34.5±9.2* 11.8±2.1* 56.5±1.7* 6.20±0.14* 0.78±0.04* 30.3±1.2* 6.95±0.63* 52.0±5.7*1.0ml/只.d 1.33±0.07* 29.0±2.8* 12.5±0.7* 54.2±5.7* 7.65±0.35* 0.81±0.07* 27.9±1.7* 5.80±0.93* 49.0±25.5*完整皮肤3.0ml/只.d 1.30±0.08* 32.0±2.8* 10.2±5.7* 52.5±4.7* 6.90±1.24* 0.74±0.20* 28.6±1.3* 7.04±0.16* 52.5±7.8*1.0ml/只.d 1.23±0.10* 31.8±7.9* 12.5±2.1* 52.7±1.2* 6.75±1.15* 0.70±0.10* 28.8±1.8* 6.07±0.13* 52.5±2.1**P＞0.05 ，均与溶媒对照组比较速效止痛灵擦剂皮肤急性毒性试验资料速效止痛灵擦剂是新疆医学院一附院张鸿飞大夫研制的新药，是以三七、血竭、冰片等制成的纯中药外用剂型。为了解其毒性大小，特测定其皮肤急性毒性。
目的 观察动物完整皮肤和破损皮肤短时期接触受试物-速效止痛灵擦剂所产生的毒性反应。
动物及材料 健康新西兰种白色家免，雌雄各半，体生2.04±0.15kg，新疆地方病研究所动物室提供(生产证书(94)16001号)。止痛灵擦剂，深红色澄明液体，0.25g生药/ml，新医一附院张鸿飞大夫研制，溶媒为76％乙醇。硫化纳(脱毛用)，分析纯，北京新光化学试剂厂出品，批号920619。
方法与结果 选取白色家兔20只，依体重和性别均衡分成对照组(涂溶媒76％乙醇2.0ml/只)、完整皮肤低剂量组(涂止痛灵擦剂1.0ml/只)、完整皮肤高剂量组(涂止痛灵擦剂3.0ml/只)。破损皮肤以木工细砂纸擦皮肤以渗血为度，涂止痛灵擦剂3.0ml/只)。破损皮肤以木工细砂纸擦皮肤以渗血为度，涂止痛灵擦剂低、高两个剂量组同上述完整皮肤组。每组4只家兔，涂药前24小时以脱手剂(10％硫化钠溶液)脱去各组家兔背部脊柱两侧的毛(约150cm2)。涂药后24小时，用温水除去皮肤残留的受试物，去除受试物后1、24、48、72小时至第7日，每日观察并记录动物的体重、皮肤毛发、眼和粘膜的变化，呼吸、中枢神经系统、四肢活动等情况及其他中毒表现。
结果，7天后4组涂药家兔无一死亡，试验结束时家兔平均体重为2.23±0.21kg。毛发无异常，皮肤无红肿无皮疹，破损皮肤已完全恢复正常。家兔眼与粘膜亦无异常。呼吸和四肢活动亦无异常变化(见附表11)结论 止痛灵擦剂给家兔完整皮肤、破损皮肤涂1.0和3.0ml/只，(0.25g生药和0.75g生药/只)，连续观察7天，各项指标未见明显变化。故认为速效止痛灵擦剂在所用剂量范围内无明显毒性作用，用药安全。附表11速效止痛灵擦剂家兔皮肤急性毒性表(1-7日)组别 n 剂量每日用药 中毒表现 死亡数(只)(ml/次) 次数对照组(溶媒组) 42.0 qd 无 无完整皮肤低剂量 41.0 qd 无 无完整皮肤高剂量 43.0 qd 无 无破损皮肤低剂量 41.0 qd 无 无破损皮肤高剂量 43.0 qd 无 无速效止痛灵擦剂皮肤过敏试验资料速效止痛灵擦剂，主要用于跌打损伤的治疗，用药时药物反复对皮肤接触，依三类中药新药的要求，作本制剂的皮肤过敏试验研究。
目的 通过家兔皮肤重复接触止痛灵擦剂后，观察机体免疫系统在皮肤上的反应。
动物与材料 白色豚鼠，体重280±15g，雌雄各半，新疆地方病研究所动物室供给(生产证书(94)16001号)。止痛灵擦剂，0.25g生药/ml，新疆医学院一附院张鸿飞大夫研制。76％乙醇，本室自配。硫化钠(AR)，北京新光化学试剂厂产品。2，4-二硝基氯苯，上海试剂一厂出品。
方法与结果 选取健康白色豚鼠30只，每组10只，雌雄各半。依体重和性别均衡分为止痛灵擦剂组，76％乙醇赋形剂组和2，4-二硝基氯苯陌性对照组。各鼠均以109％NaS溶液脱去脊部两侧毛(每侧均9cm2)。
1.致敏接触速效止痛灵擦剂组豚鼠于左侧脱毛区涂止痛灵0.2ml；赋形剂组豚鼠于同侧脱毛区涂76％乙醇0.2ml；阳性对照组豚鼠以同法同侧涂1％2，4-二硝基氯苯溶液0.2ml。豚鼠均分笼饲养。至少持续6小时。于第7天和第14天同法各重复一次，共计3次。
2.激发接触于未次给受试物致敏后14天，将止痛灵擦剂、76％乙醇和0.1％2，4-二硝基氯苯溶液各0.2ml，分别涂各组豚鼠右侧脱毛区，6小时后洗脱受试物，即刻观察，并于24、48和72小时观察皮肤过敏反应情况。按表12记录各组时间过敏反应分值，依表13对皮肤过敏反应用出评价。
结果，速效止痛灵擦剂组、76％乙醇赋形剂组豚鼠规定的各观察时间均未见红斑与水肿，分值均为零。而2，4-二硝基氯苯阳性对照组豚鼠可见不同程度红斑，过敏反应发生率为80～100％(表14)。但3组豚鼠均未见哮喘、站立不稳或休克等严重过敏反应症状。
结论 止痛灵擦剂外和不引起豚鼠皮肤过敏反应，而2，4-二硝基氯苯对豚鼠有高至极度过敏性。
表12皮肤过敏反应程度的评分标准皮肤过敏反应情况 分值红斑无红斑 0轻度红斑，勉强可见 1中度红斑，明显可见 2重度红斑 3紫红色红斑并有焦痂形成 4水肿无水肿 0轻度水肿，勉强可见 1中度水肿，明显可见(边缘高出周围皮肤) 2重度水肿，皮肤隆起1mm，轮廓清楚 3严重水肿，皮肤隆起1mm以上并有扩大或有水泡或破溃 4最高总分值 8表13 皮肤致敏性评价标准致敏发生率(％) 皮肤致敏性评价0～10无致敏性11～30 轻度致敏性31～60 中度致敏性61～80 高度致敏性81～100 极度致敏性表14止痛灵擦剂豚鼠皮肤过敏试验记录表止痛灵擦剂组平均分值赋形剂组平均分值二硝基氯苯组平均分值日期红斑 水肿 致敏率(％) 红斑 水肿 致敏率(％) 红斑 水肿 致敏率(％)1月19日 000 00 01.801001月20日 000 00 01.801001月21日 000 00 01.70901月22日 000 00 01.4080新疆医学院第一附属医院骨科速效止痛灵擦剂临床应用观察——附307例报告速效止痛灵擦剂(下称止痛灵)是一种纯中药外用擦剂，经临床应用获得疗效甚为显著。尤以止痛效果甚佳，同时伴有消肿、祛瘀功能。目前尚未见到有此速效同类药物报导。
今将应用止痛灵治疗病例归纳如下一般资料临床应用307例，其中男180例，女127例。用药时无年龄限制。故未统计年龄。本组治疗病种均为闭合性损伤，计有肩周炎12例，男7例，女5例。退行性膝关节，骨关节炎21例男8例，女13例。关节扭伤153例，男107例，女46例(腕46、膝52、踝55)，指(趾)损伤22例，男10例，女12例，软组织(躯干、四肢)损伤89例，男41例，女48例。
用药方法棉签蘸药擦涂患处，每次适量。一日三次，疗程为四天。
疗效判定A.痊愈，疼痛消失，活动恢复正常无压痛点，可以恢复原来工作。
B.显效，活动正常或基本正常，伤部压痛轻微，工作生活不受影响，劳累后偶有轻度酸痛。
C.有效，疼痛明显减轻，活动受限显著好转，可参加轻便工作。
D.症状与体征改善较少或无改善。
与正红药油疗效比较正红药油为华人堂药业公司永隆南洋集团出品，用药方法每日三次局部擦药。病例选择为踝关节扭伤每组25例，腕关凶扭伤每组12例，因随机选择对损伤程度未去划分，但均不伴有骨折，总有观察见表15.16两者有明显差别。表15踝关节的扭伤
表16腕关节的扭伤
对某些病种的疗效观察肩周炎首次用药后3分钟，疼痛明显减轻，随之肩关节活动幅度增大。继之每日用药一次，用药5次后疼痛消失，活动正常。观察4周无复发。
退行性膝关节炎首次用药后2分钟疼痛消失，止下楼梯关节处无痛感。经日一次用药，5次用药后观察；6例7天后复痛，8例12天后复痛，7例14天后复痛。再次用药后疼痛消失，活动正常。
腕关节扭伤首次用药后2分钟疼痛消失，拿、提物件时无痛感。一日三次用药4天恢复正常，观察一周无复发。
踝关节扭作，首次用药后2.5分钟疼痛减轻，可行走活动，一日三次用药3天后肿及瘀斑基本消失，活动不受限，4天后恢复正常，观察一周无复发。
膝关节扭伤首次用药后3分钟疼痛消失。一日三次用药一天后关节活动时疼痛明显减轻，肿胀减轻，两天后行走时轻度酸痛不影响活动，3天后除用力时关节稍有不适外已基本正常，肿胀消失，瘀斑范围缩小色淡。4天后完全恢复正常，观察一周无复发。
软组织损伤依各种车辆撞、挤伤为主，余为摔伤、压伤与钝器击伤。受伤面积大者占体表面积20％左右，小者占0.5％左右，重者一日三次用药4天，2天局部肿胀消失，瘀斑范围缩小，3天后恢复正常工作，轻者1-2次用药即恢复正常。两者疼痛均在用药后2分钟消失。
指(趾)损伤，以砸、压、挤伤为主，一日三次用药，3天后恢复正常。平均用药1.5分钟痛消失，关节活动无痛感。
有皮肤破损者仍可用药，可止痛，止血消炎，促进伤口愈合。
骨软骨炎引起的疼痛用药后1分钟后疼痛消失，跑跳均恢复正常。一日三次两天后停药，观察一周无复发。
经过临床观察，速效止痛灵擦剂对于疼痛确有其快速疗效，同时对肿胀、瘀斑也有促进吸收作用，用法简单一擦即灵，无任何毒副作用及禁忌，老、少皆宜，可做为家庭常配外用药。
对观察病例来说，退行性膝关节炎疗效略差于其他类损伤，这说明止痛灵仅消除疼痛症状，对已发生退行性病无法使其消除，遗憾的是未能对退行性病变做远期疗效观察。
权利要求
1.一种速效止痛灵擦剂，包括三七、冰片、血竭、苏木，其特征在于处方范围为三七24.5-25.5g枯矾37.0-38g 苏木24.5-25.5g血竭24.5-25.5g硼砂24.5-25.5g冰片112-113g
2.一种速效止痛灵擦剂的制备方法，其特征在于①取三七、苏木(30目-60目的粗粉)与硼砂、枯矾(80目-100目的细粉)混匀；②加浓度为70-80％的乙醇1000ml，浸泡60-85小时；③进行过滤，将过滤剩下的药渣进行压榨；④将浸出液和压榨液混合，静置24小时以上；⑤在浸出液和压榨液的混合液中，加入血竭、冰片，并溶解在混合液中；⑥再添加浓度为70-80％的乙醇至1000ml，摇匀、澄清过滤，即得。
3.根据权利要求1所述的速效止痛灵擦剂，其特征在于优先选择的处方是三七25.0g枯矾37.5g苏木25.0g血竭25.0g硼砂25.0g冰片112.5g
4.根据权利要求2所述的速效止痛灵擦剂的制备方法，其特征在乙醇的浓度为75％，浸泡84小时。
全文摘要
一种速效止痛灵擦剂及其制备方法。本擦剂的主要药物组成为三七、枯矾、苏木、血竭、硼砂、冰片。将三七、苏木与硼砂、枯矾混匀,加浓度70—80%的乙醇浸泡60—85小时,然后进行过滤,将过滤下剩的药渣进行压榨,再将浸出液和压榨液混合静置后加入血竭和冰片,并溶解在混合液中,再加浓度为70—80%的乙醇,摇匀、澄清过滤即得。本擦剂用以治疗跌打损伤、闪挫扭伤所致的关节骨肉疼痛、青紫肿胀之症。
文档编号A61K33/06GK1240658SQ9811466
公开日2000年1月12日 申请日期1998年6月29日 优先权日1998年6月29日
发明者张鸿飞 申请人:张鸿飞