专利名称：叶下珠有效部位的提取方法及抗艾滋病的新用途的制作方法
技术领域：
本发明是关于中草药叶下珠有效部位的提取方法的发明，本发明还涉及叶下珠有效部位的新医药用途。
叶下珠(Phllanthus urinaria)是大戟科叶下珠属草本植物，具有平肝清热、利水解毒的作用。中医用于治疗肠炎、痢疾，传染性肝炎，肾炎水肿，尿路感染，小儿疳积，火眼目翳，口疮头疮，无名肿毒等症。对于叶下珠的研究已有一些报道，由于提取方法的不同，所得到有效部位也不尽相同，当然其药理作用也有所差异。正是由于目前对叶下珠的有效成分还不十分清楚，有必要对其进行进一步的深入研究。
本发明目的是通过采用不同溶剂的提取，获得叶下珠的不同有效部位。
本发明的另一个目的是寻找叶下珠有效部位的新用途。
本发明提取叶下珠的方法如下叶下珠粉Phllanthus urinaria 2公斤，用95％乙醇渗漉至无色，回收溶剂得到醇浸膏A(30.5克)。剩余的药粉再用5倍的水煮提3次。水液浓缩得稠浸膏B(190克)。取A4克，50毫升水分散，分别用石油醚，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇萃取4次(25x1，15x3)。回收溶剂得AA(0.1克)，为墨绿色稠膏；AB(0.1克)，为深绿色稠膏；AC(0.4克)，为棕黄色粉末；AD(0.05克)，为棕黄色稠膏。剩余水部分及不溶物冷风吹干得AE(0.4克)。其中A，B，AC，AD，AE为有效部位，经硅胶及聚酰胺薄层检识，365nm下为含有黄色，亮黄色，棕色，兰色荧光斑点的混合物，三氯化铁-铁氰化钾显色为兰色斑点。
本发明的上述有效部位，作为药物活性成分，可以制备成常规的药物剂型，例如，片剂、丸剂、散剂、膏剂、胶囊剂、口服液、颗粒剂等。
本发明药物片剂的制备方法为取上述提取的叶下珠有效部位A，加入赋型剂药用淀粉，混合均匀，造粒，入压片机压片，即得。
本发明的叶下珠有效部位A，B，AC，AD，AE，经实验研究表明，均具有抗艾滋病病毒的作用。可用于制备抗艾滋病的药物。
实验例 抗艾滋病活性的测试目前研究抗艾滋病药物的主要靶点是针对艾滋病病毒复制周期中的5个阶段来有效抑制HIV的复制。抗艾滋病药物的研究主要有(1)阻断HIV与T4细胞的结合。(2)阻止HIV的脱壳。(3)抑制HIV的逆转录。(4)阻止HIV前体蛋白的裂解。(5)抑制HIV的基因表达。由于病毒感染细胞的第1步是HIV的gp120与T4细胞的CD4抗原分子结合识别靶细胞，外周膜融合并把病毒粒子的遗传物质RNA释放到胞质中(脱壳)。因此封闭gp120与CD4分子或改变两者的性质都可以阻断或干扰HIV与细胞的结合。
本实验由英国药物研究中心Medical Research Center测试叶下珠的抗艾滋病活性，选用HIV-I MN cells-c8166测试药物抑制合胞体的形成(cyncytia)及对gp120与T4细胞的CD4抗原分子结合的控制百分率(Ag gp120％control)，测出抑制Ag gp120感染的半数有效浓度ED50和半数致毒量ED50及治疗指数SI。结果表明A，B对艾滋病毒都有较好的抑制作用，由A分离的AC，AD，AE有效部位抗艾滋病毒的活性更增强了，而且毒性逐渐减弱。结果见下表
实施例1叶下珠粉Phllanthus urinaria 2公斤，用95％乙醇渗漉至无色，回收溶剂得到醇浸膏A30.5克。取A20克，250毫升水分散，用乙酸乙酯萃取。回收溶剂得棕黄色粉末AC2克。加入药用淀粉198克，混合均匀，装胶囊，每粒装1克。
实施例2取叶下珠粉Phllanthus urinaria4公斤，用95％乙醇渗漉至无色，回收溶剂得到醇浸膏A(61克)。取A40克，500毫升水分散，分别用石油醚，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇萃取4次(25x1，15x3)。回收溶剂得AA(1克)，为墨绿色稠膏；AB(1克)，为深绿色稠膏；AC(4克)，为棕黄色粉末；AD(0.5克)，为棕黄色稠膏。剩余水部分及不溶物冷风吹干得AE(4克)。取其中的有效部位AE4克作为药物活性成分，加入赋型剂药用淀粉260克，按等量递加法混合，过筛混合均匀，再与糊精84克混合均匀，加乙醇(50％)适量制软材。通过16目尼龙筛制粒，在55℃以下干燥，干粒再过16目筛整粒，加入硬脂酸镁7克，混匀后压片。
实施例3叶下珠粉Phllanthus urinaria 2公斤，用95％乙醇渗漉至无色，回收溶剂得到醇浸膏A(30.5克)。取浸膏A30克，加入药用淀粉8克，混合均匀制粒，60℃以下干燥，加入1％硬脂酸镁，混匀，压制成片，即得。
权利要求
1.叶下珠的有效部位，其特征在于它是以下述方法提取得到的A、B、AC、AD、AE中的任何一种叶下珠粉Phllanthus urinaria，用95％乙醇渗漉至无色，回收溶剂得到醇浸膏A；剩余的药粉再用水煮提3次，水液浓缩得稠浸膏B；取浸膏A加水分散，分别用石油醚，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇萃取4次，回收溶剂得墨绿色稠膏AA、深绿色稠膏AB、棕黄色粉末AC、棕黄色稠膏AD，剩余水部分及不溶物冷风吹干得AE。
2.权利要求1所述的叶下珠有效部位的提取方法，其特征在于该方法包括如下步骤叶下珠粉Phllanthus urinaria，用95％乙醇渗漉至无色，回收溶剂得到醇浸膏A；剩余的药粉再用水煮提3次，水液浓缩得稠浸膏B；取浸膏A加水分散，分别用石油醚，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇萃取4次，回收溶剂得墨绿色稠膏AA、深绿色稠膏AB、棕黄色粉末AC、棕黄色稠膏AD，剩余水部分及不溶物冷风吹干得AE。
3.权利要求1所述的叶下珠有效部位的新用途，其特征在于所述叶下珠有效部位在制备抗艾滋病药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了叶下珠有效部位的提取方法,该方法是通过乙醇提取,然后分别用石油醚,乙醚,乙酸乙酯,正丁醇进行萃取,得到不同的有效部位,经实验证明,提取所得到的有效部位具有抗艾滋病病毒的作用。
文档编号A61P31/12GK1255355SQ9812508
公开日2000年6月7日 申请日期1998年12月2日 优先权日1998年12月2日
发明者张兰珍 申请人:北京中医药大学