专利名称:识别微小环境变化的mri造影剂的制作方法
技术领域:
本发明涉及包括钆(Gd)类造影剂与高分子的复合物的造影剂。更详细地说是涉及该高分子随着环境的变化、特别是随着pH、光和温度的变化而发生相转移,水溶性改变的高分子造影剂以及使用该造影剂为特征的进行造影的方法。
背景技术:
近年来临床影像诊断的发展非常迅速,X射线CT(计算机断层摄影)、超声波影像诊断、MRI(核磁共振影像)诊断、闪烁照相法等各种各样的影像诊断法已被用到身体几乎所有的部位。而且,开发了适于这些影像诊断法的各种造影剂,并报道了它们的使用性能。
特别是MRI诊断法,最近,不仅在放射线诊断领域,而且在整个医学界已成为一项十分引人关注的新的诊断法。MRI用的造影剂与其它造影剂相比时,具有优异的分辨组织中浓度的能力,被认为无需受X光照射等,具有很好的安全性。在临床上,对于指出病变、获得与正常及发病部位的解剖学及功能有关的影像很有用。
但是,其检测的本领还不能说十分完美,仅限于部分疾病和部位,有待更高功能造影剂的开发。
尤其希望出现1)低浓度(低注入量)、2)以高感度检测出肿瘤等的目标细胞、3)无毒、而且4)很快能从体内排出的MRI造影剂。特别期待着开发出反差优异,而且可以在正常组织等不需要造影的部位不造影。仅在肿瘤和特定脏器的部位进行造影的MRI造影剂。
本发明的目的是提供能进一步增强造影能力、而且富有功能性的MRI造影剂,即,可以在正常细胞等不需要造影的部位不造影,只是在目标的肿瘤等细胞处显出造影,以使肿瘤等的检测感度显著提高的高功能性MRI造影剂。另外,还提供可以只在血中显出高的造影能力,使检测感度得以提高的高功能的血管造影用的MRI造影剂。
发明概述本发明的研究者们针对上述课题进行了反复专心地研究,其结果,发现将对微小环境变化有响应的高分子和钆(Gd)类MRI造影剂结合,可以只在目标部位发挥造影能力,即成功地得到可对MRI造影能力进行开-关切换的MRI造影剂、进一步将该Gd类MRI造影剂高分子化,成功地获得了更优异的造影能力,从而完成了本发明。
即,本发明的内容如下所述。(1)由钆(Gd)类造影剂和高分子复合形成的造影剂,其中的高分子是一种随着环境的变化发生相转移,水溶性改变的高分子造影剂。(2)Gd类造影剂是指高分子造影剂的上述(1)中记述的造影剂。(3)高分子造影剂具有直链状交替共聚物高分子的结构,特别是指由Gd与聚(二亚乙基三胺五乙酸)(DTPA)-1,3-丙二胺(PDA)形成的络合高分子的上述(2)中记述的造影剂。(4)环境变化是指pH变化的上述(1)或(2)中记述的造影剂。(5)高分子是指可从聚二乙氨基乙基甲基丙烯酸酯(PEAMA)、聚L-组氨酸(PLH)、聚L-赖氨酸(PLL)、聚(1-乙烯基咪唑)(PVI)及由它们的衍生物组成的组中选择一种的上述(4)中记述的造影剂。(6)环境变化是指光的变化的上述(1)或(2)中记述的造影剂。(7)高分子是指聚〔双(4-二甲氨基)苯基〕(4-乙烯基苯基)-甲基-隐色氢氧化物或其衍生物的上述(6)中记述的造影剂。(8)环境变化是指温度变化的上述(1)或(2)中记述的造影剂。(9)高分子是指聚(N-异丙基丙烯酰胺)或其衍生物的上述(8)中记述的造影剂。(10)环境变化是指活体内酶的出现乃至分布发生变化的上述(1)或(2)中记述的造影剂。(11)由Gd配位化合物和随着环境变化发生相转移,水溶性变化的高分子的聚合物组成的Gd类造影剂及由随着相同的环境变化而发生相转移,水溶性变化的高分子组成的复合物的上述(1)中记述的造影剂。(12)环境变化是指pH变化的上述(11)中记述的造影剂。(13)Gd类造影剂中的高分子及用于与该Gd类造影剂形成复合物的高分子,可相同或不同,可从由PDEAMA、PLH、PLL、PVI及它们的衍生物组成的组中选择的上述(12)中记述的造影剂。(14)在正常组织处不发挥造影能力,而在肿瘤组织和/或炎症组织处可发挥造影能力的上述(13)中记述的造影剂。(15)Gd类造影剂是指聚L-赖氨酸和Gd-DTPA的聚合物的上述(11)中记述的造影剂。(16)进一步接上合成高分子,尤其是接上亲水性高分子或多糖类的化合物,做成接枝共聚物的上述(1)、(2)或(11)中任一项记述的造影剂。(17)根据环境变化,可以可逆地控制造影能力的上述(1)或(11)中记述的造影剂。(18)由Gd类造影剂和高分子的复合物组成的造影剂的制备方法,该高分子随着环境的变化发生相转移,水溶性改变。(19)Gd类造影剂是指高分子造影剂的上述(18)中记述的制备方法。(20)环境变化是指pH发生变化的上述(18)和(19)中记述的制备方法。(21)高分子是指从由PDEAMA、PLH、PLL、PVI及它们的衍生物组成的群体中选择的一种的上述(20)中记述的制备方法。(22)该造影剂是指由Gd类络合物和随着环境的变化发生相转移,水溶性改变的高分子的聚合物形成的Gd类造影剂与由随着相同的环境变化发生相转移,水溶性改变的高分子的复合物形成的造影剂的上述(18)中记述的制备方法。(23)环境变化是指pH发生了变化的上述(22)中记述的制备方法。(24)Gd类造影剂中的高分子及用于与该Gd类造影剂形成复合物的高分子,可相同或不同,可从PDEAMA、PLH、PLL、PVI及它们的衍生物组成的群体中选择的上述(23)中记述的制备方法。(25)一种造影方法,其特征在于所用的造影剂是由Gd类造影剂和高分子形成的复合物的造影剂,而且是随着环境的变化,该高分子发生相转移,水溶性产生变化的高分子的造影剂。(26)Gd类造影剂是指高分子造影剂的上述(25)中记述的造影方法。(27)环境变化是指pH发生了变化的上述(25)和(26)中记述的造影方法。(28)高分子是由PDEAMA、PLH、PLL、PVI及它们的衍生物组成的群体中选择的一种的上述(27)中记述的造影方法。(29)上述(25)中记述的造影方法,其特征在于该造影剂是由Gd类络合物和随环境变化发生相转移,水溶性产生变化的高分子的聚合物形成的Gd类造影剂与随相同环境的变化发生相转移,水溶性产生变化的高分子形成的复合物的造影剂。(30)环境变化是指pH发生了变化的上述(29)中记述的造影方法。(31)上述(30)中记述的造影方法,其特征在于,Gd类造影剂中的高分子及与该Gd类造影剂形成复合物所用的高分子,可以相同或不同,可从由PDEAMA、PLH、PLL、PVI及它们的衍生物组成的群体中选择。(32)上述(31)中记述的造影方法,其特征在于,在正常组织中不发挥造影能力,而在肿瘤及/或炎症组织中能发挥造影能力。(33)上述(25)或(29)中记述的造影方法,其特征在于,随着环境的变化可以可逆地控制造影能力。(34)一种商业包装盒,它包含由Gd类造影剂和高分子的复合物形成的造影剂,高分子是随着环境变化发生相转移,水溶性产生变化的高分子造影剂,以及记述该造影剂可否用于MRI造影或适用的情况的说明书。(35)上述(34)中记述的商业包装盒,它包含由Gd络合物和随环境变化发生相转移,水溶性产生变化的高分子的聚合物所形成的Gd类造影剂,和随相同的环境变化发生相转移,水溶性产生变化的高分子的复合物所形成的造影剂,以及记述该造影剂可否用于MRI造影或适用的情况的说明书。
附图简述
图1是聚[Gd(DTPA-PDA)m]n化合物的合成路线图。图2是随着本发明中MRI造影剂pH的变化,其造影能力具有开、关切换功能的模型图。图3是表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA或PLH的复合物的pH与T1松驰时间的倒数的关系图。-◆-表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14单独时的情况。-■-表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA的复合物时的情况。-▲-表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PLH的复合物时的情况。图4是表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA或PLH的复合物的pH与T2松驰时间的倒数的关系图。-◆-表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14单独时的情况。-■-表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA的复合物时的情况。-▲-表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PLH的复合物时的情况。图5是表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA、 PLH或PLL的复合物的pH与R1松驰能力(T1松驰时间的倒数)的关系图。-◆-表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14单独时的情况。-■-表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA的复合物时的情况。-▲-表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PLL复合物时的情况。-●-表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PLH复合物时的情况。图6是表示PLL(Gd-DTPA)(16%)、PDEAMA或两者的混合物的溶液的浊度和pH的关系图。-◇-表示PLL(Gd-DTPA)(16%)单独时的情况。-□-表示PDEAMA单独时的情况。-●-表示PLL(Gd-DTPA)(16%)和PDEAMA的混合物时的情况。图7是表示PLL(Gd-DTPA)(16%)或PLL(Gd-DTPA)(16%)和PDEAMA的混合物的R1松驰能力(可由T1松驰时间计算)与pH变化的关系图。-◇-表示PLL(Gd-DTPA)(16%)单独时的情况。-●-表示PLL(Gd-DTPA)(16%)和PDEAMA的混合物时的情况。图8是表示PLL(Gd-DTPA) (16%)或PLL(Gd-DTPA)(16%)和PDEAMA的复合物中,MRI信号的强度与pH的关系图。□、
■分别表示pH为4、5、7、7.5时的结果。图9是表示在聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PLH的复合物中PLH的量和T1松驰时间的倒数关系图。-◆-表示pH为6(氯化钠的浓度150mM)时的情况。-●-表示pH为6(氯化钠的浓度75mM)时的情况。-■-表示pH为7.5(氯化钠的浓度150mM)时的情况。图10是表示聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PLH的复合物中PLH的量与该复合物样品的澄清液中Gd的浓度及T1松驰时间的倒数的关系图。棒图表示澄清液中Gd的浓度、折线表示T1松驰时间的倒数(松驰能力)。图11是表示在肿瘤组织及肌肉中由于注射了本发明的MRI造影剂而引起的信号相对强度发生变化的图。□表示注射前、□表示刚刚注射后、■表示注射了20小时后的结果。图12是表示与本发明的MRI造影剂的pH响应有关的R1松驰能力的可逆性的曲线图。
发明详述MRI造影剂的造影机理及程序与其它造影剂有很大差异。如拿X射线造影剂来说,造影剂自身对X射线吸收值高的话,则直接影响影像的亮度,与此相反,MRI造影剂自身则不能直接描绘,而是由造影剂活化周围质子的松驰现象,间接地使影像的亮度时而上升时而下降,产生反差。MRI造影剂,大家知道的有T1增强型造影剂及T2增强型造影剂两种。T1增强型造影剂,以往采用螯合剂、螯合Gd离子形成络合物,因镧系金属钆(Gd)使质子的纵向松驰时间(T1)具有很强的缩短效应。T1增强型造影剂是阳性造影剂,造影剂存在的部位辉度上升影像发白光。T2增强型造影剂是使质子的横向松驰时间(T2)缩短的造影剂,采用由葡聚糖的衍生物将超强磁性氧化铁微粒(磁铁矿)胶体化而得到的物质。T2增强型造影剂是阴性造影剂,造影剂存在的部位辉度降低影像变暗。
本发明中采用的Gd系造影剂,虽然做成T1增强型造影剂来用就不受特别的限制,但是,为了获得优异的造影能力,使用高分子化的物质为好。造影剂经高分子化后,抑制了分子旋转的速度,在磁场中被激发的MRI造影剂的能量很容易传给周围的质子,使质子的松驰时间缩短,可以增强造影能力。理想的可列举对分子运动具有更大的抑制效果的直链型结构的物质,特别是与1,3-丙二胺(PDA)形成高分子化的络合物时,取直链状交替共聚高分子的结构,预想有高的螯合稳定性。Gd类造影剂的高分子化具体地可采用以下的方法。高分子化的过程如图1所示。
首先,将金属螯合剂二亚乙基三胺五醋酸酐(DTPA)和PDA在DMF(N,N-二甲基甲酰胺)中,边加温边搅拌,使其聚合,DTPA以PDA做居中媒介,合成直链状聚合的分子量为5,000~30,000,最好为20,000~30,000的聚(DTPA-PDA)。将该合成物和Gd在缓冲液中混合,由于在DTPA部位引入了Gd,所以制得Gd络合的高分子化的MRI造影剂即聚[Gd(DTPA-PDA)m]n。这里,m表示相对1分子的Gd而言,DTPA-PDA聚合物的分子数,n表示1个Gd络合高分子中,Gd(DTPA-PDA)m聚合物的分子数。Gd和DTPA的摩尔比,可根据维持高的松驰能力、维持水溶性、带电状态等因素适当选择,但是对1摩尔Gd而言,DTPA一般为1~60摩尔、理想的为2~10摩尔、更理想的为5摩尔。
在本发明中,为与Gd系造影剂形成复合物而用的功能高分子,只要是随着环境的变化发生相转移,水溶性产生变化的高分子物质,别无特殊的限制,可根据对环境变化的响应和诊断的目标部位等因素的不同而不同。
作为响应的环境变化可列举活体内能看见的微小的环境变化和由外部的物理刺激引起的环境变化等。
作为活体内能看见的微小的环境变化,可列举pH的变化、酶表达的变化、葡萄糖浓度的变化等,作为由外部的物理刺激引起的环境的变化,可列举由温度、光、超声波及磁场等的物理刺激引起的变化。利用光作为由外部的物理刺激引起的环境变化时,结合的高分子可以用聚〔双(4-二甲氨基)苯基〕(4-乙烯基-苯基)-甲基-隐色的氢氧化物及其衍生物等,利用温度变化的时候,可用聚(N-异丙基丙烯酰胺)及其衍生物等。
利用pH变化的时候,更具体地说,例如,利用与正常的时候不同的弱酸性的组织内(如肿瘤组织中)的pH变化时,适宜用在弱酸性下引起相转移的聚二乙氨基乙基甲基丙烯酸酯(PDEAMA)、聚L-组氨酸(PLH)、聚(1-乙烯基咪唑)(PVI)及其它们的衍生物等,而利用偏碱性的pH变化时,适宜用在碱性下引起相转移的聚L-赖氨酸(PLL)及其衍生物等。
所谓相转移,一般来说是指物质伴随着适当条件的变化,从某一相向其它相变化的现象,而本发明中,则表示溶解状态与沉淀状态之间的变迁。更具体地说,是表示溶解状态和凝聚状态之间的转移,在本发明中,这种转移随着环境的变化会可逆地进行(在混合高分子溶液中,把高分子物质浓度高的相和稀薄相发生相分离的现象称作凝聚作用,这时,形成的高分子的浓相呈微小悬滴,称作凝聚)。
例如,pH响应性高分子PDEAMA的相转移现象在pH为7.5左右、PLH及PVI的相转移现象在pH为6.5左右、PLL的相转移现象在pH为10左右时能看到。
随环境变化而有响应的高分子和Gd系MRI造影剂的复合物,虽然根据所用高分子的不同而不同,但是,一般来说,在相转移点以下的水溶液中,室温下经搅拌混合就可制备。例如,合成与pH有响应性的高分子复合物时,在相转移pH以下的条件下,将该pH响应性高分子与Gd类MRI造影剂进行混合就可制得。例如采用PDEAMA时,在pH为5~7左右、最好pH为6.5左右的水溶液中、室温下进行混合,采用PLH及PVI时,在PH为4~6左右、最好pH为6左右的水溶液中、室温下进行混合,采用PLL时,在pH为7~9左右、最好pH为8.5左右的水溶液中、室温下进行混合形成复合物。
在本发明的另一个方案中,作为Gd系造影剂、特别是作为高分子化的Gd系造影剂适宜用Gd络合物和随环境变化发生相转移和水溶性变化的高分子的聚合物。用该聚合物和随环境变化发生相转移,水溶性产生变化的高分子(前述)形成复合物,就能制得本发明的造影剂。作为应该有响应的环境变化可列举前述的内容,具体地说,可列举在活体内可见的微小的环境变化(pH的变化、酶表达的变化、葡萄糖浓度的变化等)和由外部的物理刺激引起的环境变化(由温度、光、超声波及磁场等物理刺激引起的变化等),最好是pH的变化。作为与Gd络合物形成的聚合物可用的,随着环境变化发生相转移,产生水溶性变化的高分子,可列举前述的物质,例如与pH的变化有响应的时候,可列举PLL、PDEAMA、PLH以及PVI等。更佳的是PLL。这里,为制备Gd络合物而用的螯合剂,只要是能与Gd络合的物质,就无特殊的限制,理想的物质是在该领域中常用的DTPA(前述)。Gd络合物和这些高分子的结合,虽然因所使用的高分子的不同而不同,但是,一般可用该领域中众所周知的方法进行。例如用Gd-DTPA作Gd络合物的高分子,当用PLL时,可按欧洲专利说明书0331616(实施例37)中的方法进行。让PLL中的氨基和DTPA上的5个羧基中的一个形成共价键,合成PLL-DTPA,接着加入Gd离子就可制得PLL(Gd-DTPA)。为了与制得的Gd系造影剂形成复合物而使用的、随环境变化而发生相转移、产生水溶性变化的高分子,因响应的环境变化不同而分别为前述不同的物质。例如如果pH发生变化的话,可用PLL、PDEAMA、PLH及PVI等。
Gd系造影剂和高分子的量比随所用的Gd系造影剂和高分子的种类及形成复合体时的条件等不同而不同,但是,其电荷比,相对1个Gd系造影剂而言,高分子要调到0.2~10、理想的为0.5~10、更佳的为1~3。特别是当将Gd络合物和随环境变化发生相转移,产生水溶性变化的高分子的聚合物作为Gd系造影剂使用的时候,相对1个该造影剂而言,高分子最好调到0.2~5、更理想的是调到0.8~1.2。DTPA具有许多羧基,含有用该物质络合的Gd络合物的Gd系造影剂,整体而言是阴离子性高分子。另外,PDEAMA、PLL和PLH等对pH有响应的高分子,具有氨基是阳离子性高分子。两者因离子的相互作用而复合,形成聚离子复合物。由该聚离子复合物组成的本发明的造影剂,在pH约为4~9,最好pH约为6~8的范围内,可使其造影能力下降,另外,由于pH偏移了上述的范围又可使造影能力提高。这种造影能力可随pH的变化发生可逆的变化。
还有,在本发明中,理想的是将亲水性的合成高分子聚合物和多糖类等与上述的造影剂结合在一起。为使该合成高分子聚合物和多糖类与Gd系造影剂形成复合物,可用接枝共聚法结合在所用的环境响应性高分子上(主链高分子)。环境响应性高分子的主链高分子和上述的合成高分子聚合物或多糖类的结合,因所用主链高分子和合成高分子聚合物或多糖类的不同而不同,但是,可用合成接枝共聚物而用的一般方法。
作为适合本发明中使用的合成高分子聚合物,可举例如聚乙烯、聚乙二醇、聚氧乙二醇、聚对苯二甲酸乙二酯、聚丙烯、聚丙二醇、聚氨酯、聚氨酯脲素、茁霉多糖酸、茁霉多糖醇、聚乙烯聚合物、聚乙烯醇、聚氯乙烯、聚乙烯吡咯烷酮、尼龙、聚苯乙烯、聚乳酸、氟代烃、氟化碳、聚四氟乙烯、聚丙烯酸酯、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、聚丙烯酰胺等以及它们的衍生物等。本发明中,可用分子量约1,000~100,000的高分子,最好用约5,000~50,000的高分子。
另外,作为适合本发明而用的多糖类可列举如阿拉伯聚糖、果聚糖(fructan)、脱氧半乳聚糖、阿拉伯半乳聚糖、半乳聚糖、聚半乳糖醛酸(galacturonan)、葡聚糖、甘露聚糖、木聚糖、左聚糖、岩藻依聚糖、高角叉菜胶、半乳糖愈创葡聚糖(galactocallolose)、果胶、果胶酯酸、直链淀粉、茁霉多糖、糖原、支链淀粉、纤维素、葡聚糖、ブスツラン、甲壳质、琼脂糖、角蛋白、软骨素、硫酸软骨素、透明质酸、褐藻酸、黄原树胶、淀粉、羧甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、甲氧基纤维素、赤鲜糖、苏糖、核糖、阿糖、木糖、来苏糖、阿洛糖、阿卓糖、葡萄糖、甘露糖、古罗糖、艾杜糖、半乳糖、塔罗糖、赤鲜酮糖、核酮糖、木酮糖、阿洛酮糖、果糖、山梨糖、塔格糖、葡糖醛酸、葡糖酸、葡糖二酸、半乳糖醛酸、甘露醛糖酸、葡糖胺、半乳糖胺以及神经氨糖酸等,分子量可用约300~10,000,最好用约1,000~5,000的,它们的来源并无特别的限制。
上述接枝共聚物呈现核-壳结构。在这种结构中,高分子Gd造影剂被封入具有很强疏水环境的核内,由于Gd与周围水的质子不能接触,所以不能造影。另外,由于在壳上具有亲水性的高分子,所以,整体来说保持着水溶性,由于具有亲水性,所以抑制了活体内同蛋白质等生物组分的吸附等的相互作用,避免吸入纲状内皮系统,可望延长在血中的停留时间。再有,利用对异常糖链的识别功能,可望对特定的内脏器官和细胞具有目标指向性能。
送到目标部位后,随着其组织的pH的变化,主链高分子发生相转移,破坏了电荷的平衡,于是核-壳结构不能保持了,Gd与周围的水的质子接触,其结果就显出了造影的能力。
例如在进行肿瘤等的造影时,血中和正常组织中,pH为中性至弱碱性,pH在该范围内,能保持核-壳结构,不能造影,当向弱酸性的肿瘤等转移时,则开始能造影了。另外,在进行血管造影时,将其设计成在pH为中性至弱碱性的血中,由于不能保持核-壳结构,所以可造影,当向弱酸性的溶酶体等转移时,因重新构筑核-壳结构,所以造影能力消失。因此,由于只在目的部位可以造影,而在其它部位不能造影。所以可获得相对高的检测灵敏度。特别是,作为Gd系造影剂,使用Gd络合物和PLL或PDEAMA等高分子的聚合物,并与PLL或PDEAMA等pH响应性高分子制成复合物时,可有效地对肿瘤组织或发生炎症的部位进行造影。
pH变化时,该复合物的结构变化如模式图2所示。
我们认为,本发明中,造影剂的造影能力可逆地转换,是通过可逆地控制相转移,使Gd分子与其周围的水分子发生相互作用,即通过控制由电磁波激发的Gd的能量向周围水分子的传播引起的。
本发明中,造影剂通常以在注射用蒸馏水、生理食盐水或林格氏液等溶剂中呈悬浮或溶解等状态使用,另外,根据需要,还可含有药理上允许的载体、赋形剂等添加剂。该造影剂除适用于细胞等以外,还可通过给血管(静脉、动脉)中注入、经口给予、直肠内给予、阴道内给予、淋巴管内给予、关节内给予等方法给予活体内,理想的情况是以水剂、乳剂或悬浊液等状态给予。作为本发明的造影剂中含的添加剂,虽然根据其给予形态、给予路径等的不同而不同,但是,具体地说,使用注射剂的时候,可单独或组合使用缓冲剂、抗菌剂、稳定剂、溶解助剂或赋形剂等,使用口服药剂(具体地说,是水剂、糖浆剂、乳剂或悬浊液等)时,可单独或搭配使用着色剂、防腐剂、稳定剂、悬浊剂、乳化剂、粘稠剂、甜味剂、芳香剂等。各种添加剂通常可使用该领域允许使用的物质。
本发明的造影剂可按过去的MRI用造影剂的方法进行给予、造影。作为具体的给予方法,有静脉内注射和口服等。另外,具体的用量虽然根据使用对象的年龄和身材的高矮及造影的部位等可适当地增减,但是,通常其中所含的Gd系造影剂的量,即Gd的量,可在5~100μmol/kg,最好在10~50μmol/kg的范围内选择。
本发明的造影剂,除了人以外,还适合作为各种动物用的造影剂,其给予形态、给予路径、给予量等,可根据动物的体重和状态进行适当地选择。
实施例下面为了更详细地说明本发明,举出实施例及实验例,然而本发明决非仅限于这些例子。实施例1聚[Gd(DTPA-PDA)m]n的合成1)聚(DTPA-PDA)的合成将DTPAA(二亚乙基三胺五乙酸酐、Dojin公司制,12mM)于60℃下,加温溶解在20ml的DMF(N,N-二甲基甲酰胺)中。另外,将PDA(1,3-丙二胺,Wako公司制,12mM)和TEA(三乙胺,Wako公司制,50mM)分别溶解在20ml的DMF中配成溶液。在60℃下将两溶液搅拌混合24小时。将制得的混合液在80℃下蒸发干固,再用约30ml的水溶解。将该水溶液用100%的乙醇进行沉淀。将沉淀物过滤后干燥,得5.7g粗品聚DTPA-PDA。为了进一步精制,将制得的粗品聚DTPA-PDA用30ml的水再溶解,进行超滤(差示分子量5000d),得0.8g精制聚DTPA-PDA。
2)聚[Gd(DTPA-PDA)m]n的制备在0.1M的磷酸缓冲液(pH 7.2)中,于室温下,将1ml的0.1M的钆(Gd)水溶液和86.2mg的上述1)中制得的聚DTPA-PDA进行混合(GdDTPA摩尔比=1∶2),将Gd引到DTPA上,制得聚[Gd(DTPA-PDA)2]35。以GdDTPA的摩尔比为1∶5进行同样的混合,制得聚[Gd(DTPA-PDA)5]14。实施例2聚[Gd(DTPA-PDA)m]n的评价将实施例1中制得的聚[Gd(DTPA-PDA)2]35及聚[Gd(DTPA-PDA)5]14的质子松驰能与以往的MRI造影剂进行比较。作为以往的MRI造影剂,使用的是Gd-DTPA(マグネビスト)。质子松驰能用ミニスペツワ(NMS 120/125/10 VTS、日本ブルカ-公司制),在频率为20MHz、测定温度为40℃的条件下进行测定。T1的测定用IR(Inversion recovery)法,在初期τ为2ms,τ倍率为1.7及测定20个点的条件下进行测定。T2的测定用CPMG(Garr-Purcell-Meiboon-Gill)法,在τ为1ms,测定50个点的条件下进行测定。
质子松驰时间(T1及T2),由该质子松驰时间算出的质子松驰能(R1及R2)分别列于表1和表2中。
表1MRI造影剂的高分子化对T1及T2松驰时间的影响
表2MRI造影剂的高分子化对质子松驰能的影响
过PDA将Gd系MRI造影剂进行高分子化,则每单位Gd的质子松驰能与Gd-DTPA比较,显示了2倍以上的高的数值。实施例3由PLL及葡聚糖制备接枝共聚物在15ml 0.1M的硼酸缓冲液(pH 8.5)中,加入100mg的PLL·HCl盐(肽研究所制)及100mg的葡聚糖(Mw=2,600,フナコシ公司制),再加入0.3M的氰基硼氢化钠,于45℃下,使其反应2天,制得PLL接枝葡聚糖(葡聚糖的接枝率为6%)。实施例4由PLL及透明质酸制备接枝共聚物在15ml 0.1M的硼酸缓冲液(pH 8.5)中,加入100mgPLL·HCl盐(肽研究所制)及100mg透明质酸(Mw=8,000,电气化学工业制),再加入0.3M的氰基硼氢化钠,0.4M NaCl,在37℃下,使其反应2天,制得PLL接枝透明质酸(透明质酸的接枝率为2%)。实施例5PDEAMA和聚[Gd(DTPA-PDA)m]n的混合溶液的制备将4.6mg的PDEAMA(聚二乙氨基乙基甲基丙烯酸酯)加入100μl实施例1中制得的聚[Gd(DTPA-PDA)5]14的水溶液(20mM Gd/l、46.24mg高分子/ml)中,混合(以这种质量比,可使各种电荷相等),加水,制得1ml的溶液。实施例6PLH和聚[Gd(DTPA-PDA)m]n混合溶液的制备将4mg的PLH(聚L-组氨酸,シグマ公司制)添加到100μl的实施例1中制得的聚[Gd(DTPA-PDA)5]14的水溶液(20mM Gd/l,46.24mg高分子/ml)中,混合(以这种质量比使各种电荷相等),加入水制得1ml的溶液。实施例7PLL接枝葡聚糖和聚[Gd(DTPA-PDA)m]n的混合溶液的制备将7.25ml实施例3中制得的PLL接枝葡聚糖(葡聚糖的Mw=2,600,接枝率为6%)添加到100μl实施例1中制得的聚[Gd(DTPA-PDA)5]14的水溶液(20mM Gd/l,46.24mg高分子/ml)中,混合(以这种质量比使各种电荷相等),加水制得1ml的溶液。实施例8聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA或PLH的混合溶液的酸、碱滴定将50μl 1N的HCl添加到实施例5及6中制得的聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA及PLH的混合溶液中,将pH值调到酸性范围后,滴入2μl 1N的NaOH,分别测定pH值。同时观察该混合溶液的状态。结果归纳于表3中。
表3高分子混合溶液的相转移行为和pH
>在电荷相等的聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA及PLH的混合体系中,pH在3.8以下的话,两个混合溶液都不形成复合物而溶解。复合物形成的pH范围,PDEAMA是从pH 3.8~pH 7.8、而PLH是从pH3.7~pH 5.6之间。如果pH值在它们以上的话,则PDEAMA或PLH完全脱质子化而沉淀,聚[Gd(DTPA-PDA)5]14则呈游离状态。实施例9各pH值溶液(pH 5~9)中的聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA的复合物的制备将实施例1中制得的聚[Gd(DTPA-PDA)5]14添加到1ml pH为5的溶液中,使Gd浓度达到2mM。再将4.6mg的PDEAMA添加到该溶液中,以适量的1N的NaOH调节各pH值(pH 5~9),室温下混合1小时(以该质量比使各种电荷相等),制得复合物。实施例10各pH值溶液(pH 5~9)中的聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PLH的复合物的制备将实施例1中制得的聚[Gd(DTPA-PDA)5]14添加到1ml pH为5的溶液中,使Gd浓度达到2mM。再将4.5mg的PLH添加到该溶液中,以适量的1N的NaOH调节各pH值(pH 5~9),室温下混合1小时(以该质量比使各种电荷相等),制得复合物。实施例11聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA或PLH的复合物在各种pH值下的T1、T2松驰时间的测定研究了实施例9及实施例10中制得的各pH值下的聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA及PLH的复合物的T1、T2松驰时间的倒数和pH的关系。即,T1、T2松驰时间的倒数值越高,造影能力越强。作为对照使用了实施例1中制得的聚[Gd(DTPA-PDA)5]14单独的物质。T1、T2松驰时间的测定与实施例2一样进行。T1松驰时间的倒数和pH的关系如图3所示。T2松驰时间的倒数和pH的关系如图4所示。
聚[Gd(DTPA-PDA)5]14在各pH值范围内,其造影能力未见有什么变化。但是,与PDEAMA形成复合物时,pH值为7.5以上,与PLH形成复合物时,pH值为6.5以上的话,则能看到造影能力的显著变化。实施例12聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA、 PLH或PLL形成的复合物,在各种pH的条件下,R1松驰能的测定(a)母液的制备(1)聚[Gd(DTPA-PDA)5]14母液;按实施例1的方法制备、46.3mg/ml·0.15M NaCl(2)PDEAMA母液;按下述实施例13(b)的方法制备,44.95mg/ml·0.15M NaCl(3)PLL母液;用PLL·HCl盐(肽研究所制)制备,39.4mg/ml·0.15M NaCl(4)PLH母液;用PLH·HCl盐(シゲマ社制)制备,41.3mg/ml·0.15M NaCl(b)测定方法对以下的样品,将1N的NaOH每次加2μl,使pH在约3~10的范围内变化,与实施例2一样,用ミニスペツク来测定T1松驰时间,其倒数即可算出R1松驰能。结果示于图5中。样品调制后马上进行该测定。<样品>
只是聚[Gd(DTPA-PDA)5]14的溶液将0.15M的NaCl加到本实施例(a)的(1)50μl中,制得1ml的溶液。
聚[Gd(DTPA-PDA)5]14+PDEAMA将本实施例(a)之(1)及(2)各50μl,先后加入0.1 5M NaCl,做成1ml的溶液。
聚[Gd(DTPA-PDA)5]14+PLL将本实施例(a)之(1)及(3)各50μl,先后加入0.15M NaCl中,做成1ml的溶液。
聚[Gd(DTPA-PDA)5]14+PLH将本实施例(a)之(1)及(4)各50μl,先后加入0.15M NaCl中,做成1ml的溶液。
(c)结果只是聚[Gd(DTPA-PDA)5]14的话,在整个pH范围内,R1松驰能未看到有很大的变化。而在与PDEAMA、PLL或PLH的混合溶液中,则看到了与pH值依赖的R1的变化。将R1下降,达最小值及观察到复原现象时的pH值归纳在表4中。
表4
因此,例如,用聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PDEAMA形成的复合物作MRI造影剂使用时,pH在弱酸至中性的范围内的话,PDEAMA的内部疏水部分包围了聚[Gd(DTPA-PDA)5]14造影剂,形成了复合物结构,使其不能发挥造影活性,但是,在弱碱性范围的话,PDEAMA发生相转移,聚[Gd(DTPA-PDA)5]14造影剂被释放,与周围的质子接触,就可发挥造影活性。实施例13在PLL(Gd-DTPA)(16%)溶液、PDEAMA溶液或两者的混合溶液中复合物的形成和pH的关系(a)PLL(Gd-DTPA)(16%)的制备PLL(Gd-DTPA)(16%)从Schering AG(柏林·德国)得到。在本实施例中,Gd被引入到16%的DTPA上,制成PLL(Gd-DTPA)(16%)使用。将PLL(Gd-DTPA)在0.1M的DETA溶液中反应4天,接着用水透析1周(MwCO=3,500),使Gd离子解离,做成聚阴离的状态。(到使用前为止一直冻结干燥)。这种状态的PLL(Gd-DTPA)(16%)如下所示(下面,将该物质用〔I〕表示)。
PLL(Gd-DTPA)(16%)[I]
〔I〕中〔Gd〕/〔DTPA单元〕的比,按实验例2(后述),由ICP确认,结果为0.16。其次,〔I〕的数均分子量由GPC(gelpermeation chromatography、凝胶渗透色谱)测定。GPC用JASCO 880-PU泵装置,流速0.8ml/分(25℃),在超氢化凝胶1000柱(日本-ウオ-タ-公司)的条件下进行测定。用含0.5M的乙酸及0.3M的硫酸钠水溶液作移动相。聚合物的检测用折射率检测器(830-RI、ジヤスコ)及多角光散射检测器(Dawn-DSP,Wyatt Technology)。〔I〕的数均分子量为5×104。
(b)PDEAMA的制备由对应的单体DEAMA在DMF中,并有聚合引发剂2,2′-偶氮(2,4-二甲基戊腈)存在下,45℃,真空条件下,进行3天的自由基聚合,制得用下式表示的聚〔2-(二甲氨基)乙基甲基丙烯酸酯〕(下面用〔II〕表示该物质)。
聚〔2-(二乙氨基)乙基甲基丙烯酸酯〕〔II〕聚合后,将过剩的丙烯腈边搅拌边添加到该溶液中,使聚合物〔II〕沉淀。用三醋酸纤维素酯膜(MWCO=20,000,Sartorius)将该溶液进行超滤,回收聚合物〔II〕。
〔II〕的数均分子量为8.6×104。
(c)浊度的测定在各种pH值的条件下,由形成复合物时浊度的变化来研究PLL(Gd-DTPA)(16%)和PDEAMA形成的复合物的状态。
对由本实施例(a)制得的〔I〕的0.15M的NaCl溶液(3.4mg/ml)及由本实施例(b)制得的〔II〕的0.15M的NaCl溶液(3.8mg/ml)及两者等量混合的溶液,用0.1M的NaOH溶液进行滴定,使溶液的pH值发生变化。pH值用TOA HM-20E型pH计测定。滴定中溶液的浊度用Beckman DU-640分光光度计,测定500nm处的吸光度。其结果如图6所示。pH值超过3时混浊开始形成,这表示从这个pH值附近开始逐渐形成聚离子复合物。这种混浊状态一直到pH值为8都能观察到,pH值到8时,突然消失。(其后,虽然能观察到第2次的浊度变化,但是,我们认为这是由于〔II〕在pH值为8时,几乎脱质子化,该复合物发生了解离而引起的)。实施例14PLL(Gd-DTPA)(16%)和PDEAMA的复合物中pH与R1松驰能的关系对于实施例1 3(a)制得的〔I〕溶液及该〔I〕溶液和实施例13(b)中制得的〔II〕溶液以等量混合的溶液,研究了使该溶液的pH值发生变化时的质子松驰能的变化。质子松驰能(T1松驰时间的倒数,即R1松驰能)按实施例2进行测定。结果如图7所示。〔I〕及〔II〕的混合溶液的松驰能在pH为4时急剧减小,中性附近时几乎为0。这表示,pH值在中性附近时,〔I〕及〔II〕的混合溶液的松驰能与水差不多,即处于不能发挥造影能力的状态。由该实验也知道了PLL(Gd-DTPA)(16%)和PDEAMA从pH为4时开始形成复合物,而且,到中性附近时,几乎完全失去了造影能力。实施例15PLL(Gd-DTPA)(16%)和PDEAMA复合物中pH与MRI信号强度的关系(a)实验方法对于实施例13(a)中制得的〔I〕及该〔I〕和实施例13(b)中制得的〔II〕以等量进行混合的混合物,研究了使该溶液的pH值发生各种变化时,MRI信号强度的变化。
用80%v/v兔子血清·0.15M NaCl溶液稀释〔I〕及〔I〕和〔II〕的等量混合物,至Gd的最终浓度为1.0mM,再将pH调节到4、5、7或7.5制成被测溶液。作为对照溶液,用pH值调节到4、5、7或7.5的80%v/v兔子血清·0.15M NaCl溶液。将各种pH的被测溶液或对照溶液分别填充到1ml的可自由使用的注射器(φ5mm)中。对该注射器用4.7T动物摄像机(Omega CSI-2型,GE-Bruker公司制)进行MRI造影。MRI的影像用T1及T2的合成-WI(TR/TE=300/12ms)得到。
对被测溶液、对照溶液及水分别测定MRI信号的强度,被测溶液或对照溶液以对水的相对强度表示。结果示于图8中。
(b)结果〔I〕和〔II〕的混合物,在pH为5、7及7.5时,其MRI信号的强度几乎与水相等(相对强度约为1),与此相反,pH为4时,相对强度约为3,可发挥造影能力。由这些结果可知,含〔I〕和〔II〕的复合物的MRI造影剂,对pH的变化,有很好的对应结果。实验例1聚[Gd(DTPA-PDA)5]14与PLH的混合比发生变化时,对T1缓和能的影响使聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PLH的混合比(重量比)发生变化时,求pH为6及pH为7.5(因为PLH的相转移pH约为6.5,所以对其前后pH的情况进行了研究)时的T1松驰能。
将聚[Gd(DTPA-PDA)5]14溶解在pH为6及pH为7.5的15mM的磷酸缓冲液中,使Gd的浓度为20mM。该磷酸缓冲液pH为6时,将盐浓度调为75mM及150mM的氯化钠、pH为7.5时,调到150mM的氯化钠。
在100μl的这些聚[Gd(DTPA-PDA)5]14溶液中,改变重量比添加PLH(聚[Gd(DTPA-PDA)5]14∶PLH=1∶0~9)、用上述缓冲液,最终配到1ml(Gd浓度1mM∶157μg/ml)。这些样品溶液与实施例2一样,测定T1松驰时间,进而算出其倒数(松驰能)。结果示于图9中。pH为6时,无论是哪种盐浓度的溶液中,两者的重量比在1∶2以上,则T1松驰能表现出下降的趋势。pH为7.5时,看不到T1松驰能的变化,我们认为这是由于在该pH值下,PLH和聚[Gd(DTPA-PDA)5]14没有形成复合物之故。实验例2聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PLH的各种混合液中,Gd浓度的测定改变实验例1中聚[Gd(DTPA-PDA)5]14和PLH的重量比时,如果pH为6,则能看到T1松驰能的变化。为此,研究了该松驰能和样品液中Gd浓度的关系。
将聚[Gd(DTPA-PDA)5]14溶解在pH为6,盐浓度为150mM的氯化钠的15mM的磷酸缓冲液中,使Gd的浓度调至20mM。在100μl该聚[Gd(DTPA-PDA)5]14溶液中,改变重量比添加PLH(聚[Gd(DTPA-PDA)5]14∶PLH=1∶0~9),再用上述缓冲液,最终配到1ml(Gd的浓度1mM157μg/ml),作为各样品液。以12000rpm的速度将上述复合物溶液进行5分钟的离心分离,分出上层清液和沉淀。将得到的上层清液0.3ml用5ml水稀释,以供Gd浓度的测定及T1松驰能的测定。T1松驰能的测定按实施例2进行。Gd浓度由ICP(inductivelycoupled plasma,高频感应耦合等离子体),以测定波长为342nm、247nm、以1kw的高频输出进行测定(ICP发光分光分析装置;ヤイコ-电子公司制)。各样品液的上层清液中的Gd浓度和T1松驰能的关系如图10所示。
可以看到各上层清液中的Gd浓度与T1松驰能之间有良好的对应关系,证实了T1松驰能依赖于样品中Gd浓度,即依赖于进入上层清液中的聚[Gd(DTPA-PDA)5]14的量。实验例3由PLL(Gd-DTPA)(16%)和PDEAMA的复合物组成的造影剂在肌肉及肿瘤组织中的MRI信号的强度本实验例中证实了本发明的造影剂在活体内的pH响应性。
(a)实验方法作为被检动物使用移植了colon 26腺癌细胞(由旭川医科大学中岛进助教授提供)的BALB/c裸鼠(约20g,雌性,8周龄)。将100μl造影剂溶液直接注射到该鼠的肿瘤部位及大腿肌处,该造影剂溶液是用0.1 5M的NaCl(pH7)将实施例13(a)中制得的〔I〕及该〔I〕和实施例13(b)中制得的〔II〕的等量混合物的最终Gd的浓度调到2.0mM的造影剂溶液。MRI造影及MRI信号的强度测定,在注射前、注射刚结束、注射后经过20小时,按实施例15中记载的相同条件进行。另外,MRI造影及各造影剂的注入在麻醉下进行。结果如图11所示。
(b)结果由图11可知,在正常的筋肉部位,造影剂尽管注入了20小时,但都看不到MRI信号强度的变化,该部位就不能造影。然而,在肿瘤组织处,随着时间的延长,其信号强度则增强,得到异常的肿瘤组织的造影。
对这种能发挥组织特异的造影能力的机理可以推测是因在Colon26细胞的细胞表面呈现的二烯丙基路易斯酸等能使糖链作用的细胞表面酸化,从而使本发明的造影剂的造影能力对pH的响应成开通状态的缘故。该结果表明,对细胞表面呈现二烯丙基路易斯酸的炎症部位等的造影,本发明的MRI造影剂同样适用。实验例4PLL(Gd-DTPA)(16%)和PDEAMA的复合物中R1松驰能的可逆性研究(a)母液的制备(1)PLL(Gd-DTPA)(16%)母液(按实施例13(a)制备,67.8mg/ml·0.15M NaCl)(2)PDEAMA母液(按实施例13(b)制备,44.95mg/ml·0.15M NaCl)(b)测定方法将上述(1)及(2)分别取50μl及83μl,再加0.15M的NaCl,配成1ml的溶液。对该样品每次加15μl 1N的NaOH及1N的HCl,使pH交替在3和7附近变化,按实施例2,用ミニスペツケ分别测定R1松驰能。结果示于图12中。
(c)结果pH为3时, R1值约为14,pH为7时,R1值约为1,由于R1值与pH响应,所以表明本发明的造影剂与pH的变化相对应,而且,MRI信号的强度可以可逆地开-关转换。
产业上利用的可能性通过将Gd系MRI造影剂与一种高分子材料复合,能够使不需要造影的部位不被造影,而只在作为目标的肿瘤等细胞内显现造影能力,结果使肿瘤等的检测感度得以显著地提高成为可能,上述的高分子材料是一种对环境变化有响应,且造影能力可开-关切换的具有环境变化响应性的高分子材料。另外,将该造影剂经高分子化,可获得更优异的造影能力,经这些造影能力的改善,使副作用更少、检测效果更好的MRI的诊断成为可能。
本申请是以在日本申请的平成9年特许愿第64497号为基础的,其内容全部包含在本发明书中。
权利要求
1.一种由钆(Gd)系造影剂和高分子的复合物形成的造影剂,其特征是该高分子随着环境的变化发生相转移,水溶性改变的高分子造影剂。
2.权利要求1的造影剂,其特征是Gd系造影剂是高分子造影剂。
3.权利要求2的造影剂,其特征是高分子造影剂是直链状交替共聚物的结构。
4.权利要求3的造影剂,其特征在于高分子造影剂是由Gd与聚(二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)-1,3-丙二胺(PDA))形成的络合高分子。
5.权利要求1或2的造影剂,其特征在于环境变化是指pH的变化。
6.权利要求5的造影剂,其特征在于高分子是从由聚二乙氨基乙基甲基丙烯酸酯(PDEAMA)、聚L-组氨酸(PLH)、聚L-赖氨酸(PLL)、聚(1-乙烯基咪唑)(PVI)及它们的衍生物组成的组中选择的一种。
7.权利要求1或2的造影剂,其特征在于环境变化是指光的变化。
8.权利要求7的造影剂,其特征在于高分子是指聚〔双(4-二甲氨基)苯基〕(4-乙烯基-苯基)-甲基-隐色氢氧化物或其衍生物。
9.权利要求1或2的造影剂,其特征在于环境变化是指温度的变化。
10.权利要求9的造影剂,其特征在于高分子是指聚(N-异丙基丙烯酰胺)或其衍生物。
11.权利要求1或2的造影剂,其特征在于环境变化是指活体内酶的表达乃至分布的变化。
12.权利要求1的造影剂,它是由Gd系造影剂和随着与下述相同的环境变化发生相转移,水溶性改变的高分子的复合物形成的,该Gd系造影剂是由Gd络合物与随环境变化发生相转移,水溶性改变的高分子的聚合物形成的。
13.权利要求12的造影剂,其特征在于环境变化是指pH的变化。
14.权利要求13的造影剂,其特征在于Gd系造影剂中所含的高分子及为了与该Gd系造影剂形成复合物而使用的高分子,可以相同或不同,可从由PDEAMA、PLH、PLL、PVI及它们的衍生物组成的组中选择。
15.权利要求14的造影剂,其特征在于在正常组织处不发挥造影能力,而在肿瘤组织和/或炎症组织处可发挥造影能力。
16.权利要求12的造影剂,其特征在于Gd系造影剂是指聚L-赖氨酸与Gd-DTPA的聚合物。
17.权利要求1、2或12的任一种造影剂,其特征是进一步与合成高分子或多糖类结合,形成接枝共聚物。
18.权利要求17的造影剂,其特征在于合成高分子是亲水性高分子。
19.权利要求1或12的造影剂,其特征在于随着环境的变化,可以可逆地控制造影能力。
20.一种造影剂的制备方法,其特征在于该造影剂是由Gd系造影剂与高分子的复合物形成的造影剂,该高分子是随着环境的变化发生相转移,水溶性改变的高分子。
21.权利要求20的制备方法,其特征在于Gd系造影剂是高分子造影剂。
22.权利要求20或21的制备方法,其特征在于环境变化是指pH的变化。
23.权利要求22的制备方法,其特征在于高分子是从由PDEAMA、PLH、PLL、PVI及它们的衍生物组成的组中选择的一种。
24.权利要求20的制备方法,其特征在于该造影剂是由Gd系造影剂和随着下述相同的环境变化发生相转移,水溶性改变的高分子的复合物形成的,而Gd系造影剂是由Gd络合物和随环境的变化发生相转移,产生水溶性变化的高分子的聚合物形成的。
25.权利要求24的制备方法,其特征在于环境变化是指pH的变化。
26.权利要求25的制备方法,其特征在于Gd系造影剂中所含的高分子及为与该Gd系造影剂形成复合物而使用的高分子可以相同或不同,从由PDEAMA、PLH、PLL、PVI及它们的衍生物组成的组中选择。
27.一种造影方法,其特征在于使用的造影剂是由Gd系造影剂和高分子的复合物形成的造影剂,该高分子是随着环境的变化发生相转移,产生水溶性变化的高分子。
28.权利要求27的造影方法,其特征在于Gd系造影剂是高分子造影剂。
29.权利要求27或28的造影方法,其特征在于环境变化是指pH的变化。
30.权利要求29的造影方法,其特征在于高分子是从由PDEAMA、PLH、PLL、PVI及它们的衍生物组成的组中选择的一种。
31.权利要求27的造影方法,其特征在于该造影剂是由Gd系造影剂和随着下述相同的环境变化发生相转移,产生水溶性变化的高分子的复合物所形成的,而该Gd系造影剂是由Gd络合物和随环境变化发生相转移,产生水溶性变化的高分子的聚合物所形成的。
32.权利要求31的造影方法,其特征在于环境变化是指pH的变化。
33.权利要求32的造影方法,其特征在于Gd系造影剂中所含的高分子及为与该Gd系造影剂形成复合物而使用的高分子,可以相同或不同,从由PDEAMA、PLH、PLL、PVI及它们的衍生物组成的组中选择。
34.权利要求33的造影方法,其特征在于它在正常组织处不发挥造影能力,而在肿瘤组织和/或炎症组织处可发挥造影能力。
35.权利要求27或31的造影方法,其特征在于随着环境的变化,可以可逆地控制造影能力。
36.一种商业包装盒,其特征在于它包括造影剂及该造影剂可否用于MRI造影或适合使用的情况的说明书,该造影剂是由Gd系造影剂和高分子的复合物所形成的造影剂,该高分子是随环境变化发生相转移,水溶性改变的高分子。
37.权利要求36的商业包装盒,其特征在于它包含造影剂及记述该造影剂可否用于MRI造影的或适合使用的情况的说明书,该造影剂是由Gd系造影剂和随下述相同环境变化发生相转移,水溶性改变的高分子的复合物形成的造影剂,而Gd系造影剂是由Gd络合物和随环境变化发生相转移,水溶性改变的高分子的聚合物所形成的。
全文摘要
涉及含有钆(Gd)系造影剂和高分子的复合物的造影剂。更详细地说是涉及一种造影剂及以使用该造影剂为特征的造影方法,其特征在于该造影剂是该高分子是随着环境的变化,特别是随着pH、光或温度的变化会发生相转移,水溶性发生变化的造影剂。将对微小的环境变化有响应的高分子与Gd系MRI造影剂结合,使其只在目标部位才能发挥其造影能力,即,使MRI造影能力的开-关切换成为可能。因此,在不需要造影的部位不造影,只在目标的肿瘤和特定的部位才能发挥造影能力,制得特异性好的造影剂,使特异性好的MRI诊断成为可能。
文档编号A61K49/12GK1256634SQ9880521
公开日2000年6月14日 申请日期1998年3月16日 优先权日1997年3月18日
发明者赤池敏宏, 三川雅人, 丸山厚, 三轮直人 申请人:赤池敏宏, 日本先灵株式会社