专利名称：治疗神经变性病药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种含有唑尼沙胺或它的金属盐作为活性成分的治疗神经变性病的药物。
背景技术：
唑尼沙胺[化学名称3-氨磺酰甲基(sulfamoylmethyl)-1，2-苯并异噁唑或1，2-苯并异噁唑-3-甲基氨磺酰；参考，例如，MerckIndex，12th Ed_10323(1996)]已经用作治疗癫痫病的药物或在日本，韩国等用来预防各种癫痫病的发作。JP-B-60-33114，JP-B-61-59288和USP 4，172，896公开了唑尼沙胺的制备方法和作为抗癫痫药物的应用。而且，JP-B-7-84384和USP5，128，354也公开了唑尼沙胺作为局部缺血性脑损伤药物的用途。
随着老龄化的发展，神经变性病如帕金森病的病人数量逐渐增加。帕金森病是一种病人的协调运动受到扰乱的渐进性和悲剧性疾病，而且随着时间流逝病人的运动逐渐缓慢，并最终发展为手臂和大腿的僵化或震颤。上述疾病的病因已知是由于产生多巴胺的黑质纹状体神经元的破裂和损伤引起纹状体多巴胺减少。
另外，纹状体多巴胺减少的动物，是通过给C57黑色小鼠以1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(下文，指“MPTP”)获得，它已经广泛地应用于帕金森病的动物样本。Life Sci_54，245(1994)公开了抗癫痫药物拉莫三嗪[化学名称3，5-二氨基-6-(2，3-二氯苯基)-1，2，4-三嗪]和苯妥英，它们对MPTP诱导的多巴胺缺少表现出抑制效果，而卡马西乎并没有这种效果。然而，在上述文章的试验中，黑色小鼠皮下注射15mg／kg剂量的盐酸MPTP仅一次，因此上述的小鼠并不适合作为帕金森病的动物样本。
目前对帕金森病的药物疗法是使用多巴胺再生剂(例如，左旋多巴，或左旋多巴与卡比多巴的组合药物或结合治疗)，多巴胺能激动剂(例如，溴隐亭或特麦角脲)，多巴胺释放剂(例如，金刚烷胺)，抗胆碱能药(例如，比哌立登或苯海索)，单胺氧化酶B抑制剂(MAO-B)(例如，司来吉兰)等。然而，这些药物从效果和副作用的角度来看都并不令人满意，人们已经在努力开发一种新的更有效的药物。
本发明人已经发现唑尼沙胺和它的金属盐对MPTP诱导的多巴胺能神经变性病具有特别强的抑制效果，并由此实现了本发明。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种用于治疗神经变性病的药物，其含有唑尼沙胺或它的金属盐作为活性成分。
本发明的另一个目的是提供唑尼沙胺或它的金属盐在制备神经变性病药物中的应用。
本发明的又一个目的是提供了一种预防和／或治疗哺乳动物(包括人)神经变性病的方法，其包括给需要这种预防和／或治疗的哺乳动物以有效量的唑尼沙胺或它的金属盐。
图1是表示在C57黑色小鼠最后一次给以MPTP后24小时，被切除的纹状体中各种单胺神经介质和它的代谢产物的含量，盐酸MPTP腹膜给药，每天一次，剂量为30mg／kg，共8天。
图2表示在C57黑色雄性小鼠最后一次给以MPTP后的14天，唑尼沙胺和卡马西平对MPTP诱导的多巴胺能神经变性病的抑制作用。
实现本发明的最佳方式唑尼沙胺金属盐的实例包括钠盐，钾盐和锂盐。唑尼沙胺例如，可以通过JP-B-60-33114，JP-B-61-59288和USP 4，172，896中公开的方法制备。
唑尼沙胺和已知的抗癫痫药物的药理学实验结果如下所示，其解释了唑尼沙胺作为神经变性病药物的应用。
在药理学实验中使用的对照抗癫痫药物列于下。
卡马西平(参见，例如Merck Index，12th Ed_1826(1996))；苯妥英(参见，例如Merck Index，12th Ed_7475(1996))；拉莫三嗪(参见，例如Merck Index，12th Ed_5367(1996))；苯巴比妥(参见，例如Merck Index，12th Ed_7386(1996))；乙琥胺(参见，例如Merck Index，12th Ed_3794(1996))；丙戊酸钠(参见，例如Merck Index，12th Ed_10049(1996))；
地西泮(参见，例如Merck Index，12th Ed_3042(1996))；和乙酰唑胺(参见，例如Merck Index，12th Ed_50(1996))。
每个实验中，通过高压液相色谱(HPLC)方法测定纹状体中单胺神经介质和它的代谢产物的含量。HPLC使用的系统包括泵(L-6000，日本Hitachi有限公司生产)，自动注射器，样品柱(Cosmosil 5C18-A，日本Nacalai Tesque，Inc_生产；4．6φ×250mm)，以及电化学检测器(ECD-100，日本Eicom公司生产)，实验条件如下。
流动相0．05M柠檬酸，含有0．075M高氯酸钠乙腈缓冲液(92．5∶7．5，pH4．3)上述缓冲液含有0．022％辛基磺酸钠和0．0015％EDTA·2钠盐。
流速0．9ml／min。
检测条件工作电极石墨电极参比电极银／氯化银使用电压750mV另外使用Dunnett的多重比较实验进行统计分析。
实验1帕金森病动物样本的获得实验使用C57黑色雄性小鼠(11周)。将盐酸MPTP溶解在生理盐水中，浓度3mg／ml，并将所得溶液腹膜内注射到小鼠，每10g体重注射0．1ml，即剂量为30mg／kg，每天一次，共8天。MPTP最后一次给药后24小时，对小鼠的头部进行微波照射，并切下纹状体。
将切下的纹状体用含有内标物(5-羟基triptophol；20ng／ml)的50倍体积的0．1N甲酸丙酮(15∶85)匀浆，并将混合物冷却条件下离心。收集一定量的上清液并在氮气流中蒸发干燥。然后，所得产物溶解在0．01N乙酸中并离心，然后通过装有电化学检测器的HPLC测定上清液中各种单胺神经介质和它的代谢产物的含量。
在MPTP最后一次给药后24小时内各种单胺神经介质和它的代谢产物的含量变化显示在图1中。每组有8只动物，图中的垂直线代表标准误差，以及符号**表示与对照组(生理盐水处理组)的数值有显著差别，p＜0．01。
从图1中可以清楚地看出，MPTP显著降低了多巴胺(DA)和它的代谢产物，高香草酸(HVA)和3，4-二羟基苯乙酸(DOPAC)的含量，但并不影响去甲肾上腺素(NA)，5-羟色胺(5HT)和它们的代谢产物，3-甲氧基-4-羟基苯基亚乙基二醇(MOPEG)和5-羟基吲哚-乙酸(5HIAA)的含量，因此可以肯定MPTP表现了对多巴胺能神经元的选择性。
而且，从图2所显示的实验2的结果，可以清楚地看出即使在MPTP最后一次给药后14天也可以观察到MPTP诱导的纹状体内的多巴胺和它的代谢产物的含量降低，这种含量的降低是不可逆的，并且表明这种缺少多巴胺的小鼠特别适合作为帕金森病的实验动物。
实验2对MPTP诱导的多巴胺能神经变性病的抑制作用与实验1相同的方式用盐酸MPTP腹膜内注射C57黑色雄性小鼠(11周)，剂量为30mg／kg，每天一次，共8天。将测试药物，即抗癫痫药物悬浮在0．5％黄蓍胶水溶液中，并在MPTP给药8天时，提前30分钟将所得溶液口服给药，每10g体重小鼠0．1ml。在唑尼沙胺和卡马西平实验中，MPTP最后一次给药后24小时以及14天，小鼠的头接受微波照射并切除纹状体。使用实验1中的同样方法测定纹状体中的多巴胺和它的代谢产物的含量。在各种抗癫痫药物实验中，分别在不同时间对唑尼沙胺(ZNS)，卡马西平(CBZ)，以及苯妥英(PHT)，拉莫三嗪(LTG)，苯巴比妥(PB)，乙琥胺(ESM)，丙戊酸钠(VPA)，地西泮(DZP)和乙酰唑胺(AZA)的一组药物进行了测定。各种抗癫痫药物的给药剂量列在下面。此外，剂量后面的圆括号中的数值表示与小鼠产生抗惊厥效果的剂量之比。产生抗惊厥效果的剂量，拉莫三嗪和地西泮在Epilepsia，27，483(1986)中有描述，其它抗惊厥药物则分别记载在Arzneim。Forsch．(Drug Res．)，30，477(1980)中。
唑尼沙胺(ZNS)10，30，100mg／kg(分别约0．5倍，约1．5倍，约5．1倍)卡马西平(CBZ)20，60mg／kg(分别约1．5倍，约4．5倍)苯妥英(PHT)30mg／kg(约3．8倍)拉莫三嗪(LTG)30mg／kg(约11．5倍)苯巴比妥(PB)40mg／kg(约3．4倍)
乙琥胺(ESM)600mg／kg(约2．2倍)丙戊酸钠(VPA)800mg／kg(约2．5倍)地西泮(DZP)5mg／kg(约4．2倍)以及乙酰唑胺(AZA)100mg／kg(约3．8倍)MPTP最后一次给药后24小时，各种抗癫痫药物对多巴胺能神经变性病的抑制效果列于表1中，根据纹状体中多巴胺和它的代谢产物，3，4-二羟基苯乙酸(DOPAC)的含量确定抑制率。根据正常动物组、赋形剂处理组以及测试药物处理组的数值评估抑制作用。表中的数值代表平均值±标准误差，以及星号*和**表示与赋形剂处理组的显著差别分别是p＜0．05和p＜0．01。
而且，MPTP最后一次给药(每组5-6只动物)后14天唑尼沙胺和卡马西平对多巴胺能神经变性病的抑制效果列于图2中。图中的垂直线代表标准误差，以及星号*和**表示与赋形剂处理组的显著差别分别是p＜0．05和p＜0．01。
表1对MPTP诱导的多巴胺能神经变性病的抑制作用
从表1和图2中清楚地看出，本发明的唑尼沙胺(ZNS)抑制MPTP诱导的24小时组和14天组纹状体中多巴胺和它的代谢产物，3，4-二羟基苯乙酸(DOPAC)的含量降低作用呈剂量依赖抑制效应，剂量是10mg／kg，约是小鼠产生抗惊厥效果剂量的0．5倍。特别地，30mg／kg(约是小鼠产生抗惊厥效果剂量的1．5倍)剂量的唑尼沙胺对多巴胺和DOPAC含量降低表现出特别强的抑制效果，剂量为100mg／kg(约是小鼠产生抗惊厥效果剂量的5．1倍)时，抑制率几乎为100％。
另一方面，从表1和图2中清楚地看出，卡马西平(CZB)对MPTP诱导的24小时和14天纹状体中多巴胺和DOPAC的含量降低的抑制作用并不明显。此外，在其它抗癫痫药物中，除拉莫三嗪和苯妥英外，即使剂量是小鼠产生抗惊厥效果剂量的2倍或多倍时，它们对纹状体中多巴胺和DOPAC含量降低没有抑制作用。虽然苯妥英在30mg／kg(约是小鼠产生抗惊厥效果剂量的3．8倍)剂量时对多巴胺和DOPAC含量降低有抑制作用，但抑制率仅分别为37．4％和30．2％。在30mg／kg(约是小鼠产生抗惊厥效果剂量11．5倍)剂量时，拉莫三嗪对多巴胺和DOPAC含量降低的抑制作用强于苯妥英，但抑制率仅分别为51．6％和34．1％，比唑尼沙胺在30mg／kg(约是小鼠产生抗惊厥效果剂量1．5倍)剂量时的抑制率80．3％和82．1％还要差。
从上述实验结果可以清楚地看出，唑尼沙胺和它的金属盐在小鼠产生抗惊厥效果剂量时对MPTP诱导的多巴胺能神经变性病有相当强的抑制效果，具有低毒性，因此它们可以作为在预防和治疗哺乳动物(包括人)的各种神经变性病如原发或继发帕金森病，亨廷顿舞蹈病，舞蹈病样综合征和肌张力障碍综合征中的神经变性病药物。本发明药物可以通过口服，非肠道以及直肠方式中的任一种方式给药。根据给药方式，需治疗的疾病类型，症状严重程度，病人年龄等情况确定唑尼沙胺和它的金属盐的剂量，但通常是1-50mg／kg／天，优选2-20mg／kg／天，并可以一次或分几次给药。
唑尼沙胺和它的金属盐可以单独用作神经变性病药物或以药物组合物的形式使用，其可以通过与药物可接受载体或稀释剂混合制备。药物组合物的剂型可以有片剂，胶囊，颗粒，粉剂，糖浆，注射剂以及栓剂，并可以通过常规方法制备。此外，市场上可以买到的抗癫痫药物唑尼沙胺片剂和粉剂可以作为本发明神经变性病药物。
药物可接受载体或稀释剂可以是任意通常使用在药物领域中并且不与唑尼沙胺或它的金属盐反应的常规材料。用于制备片剂，胶囊，颗粒和粉剂的药物可接受载体或稀释剂的合适的例子包括赋形剂(例如，乳糖，玉米淀粉，蔗糖，甘露糖醇，硫酸钙或微晶纤维素)，崩解剂(例如，carmellose钠，改性淀粉，或carmellose钙)，粘合剂(例如，甲基纤维素，明胶，阿拉伯树胶，乙基纤维素，羟丙基纤维素，或聚乙烯吡咯烷酮)，以及润滑剂(例如，近于无水的硅酸，硬脂酸镁，滑石，或氢化油)。可以通过常规方法对片剂进行包衣，常规包衣剂如巴西棕榈蜡，羟丙基甲基纤维素，大粒凝胶，羟丙基甲基邻苯二甲酸盐，乙酸邻苯二甲酸纤维素，蔗糖，二氧化钛，脂肪酸脱水山梨醇酯，以及磷酸钙。
用于制备糖浆的药物可接受载体或稀释剂的合适的例子包括甜味剂(例如，蔗糖，葡萄糖，或果糖)，悬浮剂(例如，阿拉伯树胶，黄蓍胶，carmellose钠，甲基纤维素，藻酸钠，微晶纤维素或veegum)，以及分散剂(例如，脂肪酸脱水山梨醇酯，十二烷基硫酸钠，或多乙氧基醚80)。在制备糖浆时，可以任选加入调味剂，香味剂或防腐剂。而且，这种糖浆可以干糖浆形式存在，使用时溶解或悬浮。
栓剂的基质的合适例子包括可可脂，饱和的脂肪酸甘油酯，甘油基明胶，以及大粒凝胶。在制备栓剂时，可以任选加入表面活性剂或防腐剂。
注射制剂通常是将唑尼沙胺的金属盐溶解在蒸馏水中注射使用，并在其中任意加入加溶剂，缓冲剂，pH调节剂，等渗剂，缓解疼痛剂或防腐剂。
根据组合物的总重量，这些药物组合物中含有的活性成分唑尼沙胺或它的金属盐的量是至少0．5％(％重量，下文同此)，优选10-70％。这些药物组合物中可以任选含有其它有治疗作用的下述化合物。
本发明神经变性病药物可以与其它药物一起使用，如多巴胺再生剂(例如，左旋多巴，或左旋多巴与卡比多巴的组合药物或结合治疗)，多巴胺能激动剂(例如，溴隐亭或特麦角脲)，多巴胺释放剂(例如，金刚烷胺)，抗胆碱能药(例如，比哌立登或苯海索)，单胺氧化酶B抑制剂(MAO-B)(例如，司来吉兰)等。
本发明的神经变性病药物组合物举例如下。
制剂1片剂唑尼沙胺100g乳糖35g玉米淀粉17g微晶纤维素 40g羟丙基纤维素6g几乎无水的硅酸 1g硬脂酸镁1g总共200g在上述组分中，将唑尼沙胺，乳糖，玉米淀粉和微晶纤维素混合，并向其中加入已溶于水的羟丙基纤维素，并将混合物捏合，干燥和造粒。向这些颗粒中加入硬脂酸镁和几乎无水的硅酸，并将混合物压缩得到1000个片芯，每个重200mg。然后，通过常规方法使用羟丙基甲基纤维素，大粒凝胶，二氧化钛，滑石和几乎无水的硅酸将上述片芯包衣形成包膜药片。
制剂220％粉剂唑尼沙胺200g乳糖719g羟丙基纤维素20g几乎无水的硅酸 1g总共940g使用高切力的造粒机，将上述所有组分混合，用含有乙基纤维素(40g)和羟丙基纤维素(20g)的乙醇溶液(200g)喷雾造粒，并做成颗粒。然后干燥并调整粒径得到20％粉剂。
工业实用性如上所述，唑尼沙胺和它的金属盐在小鼠产生抗惊厥效果剂量条件下对多巴胺能神经变性病有相当强的抑制效果，因此它们可以作为在预防和治疗哺乳动物(包括人)的各种神经变性病如帕金森病，亨廷顿舞蹈病，舞蹈病样综合征和肌张力障碍综合征中的神经变性病药物。
权利要求
1．一种含有唑尼沙胺或它的金属盐作为活性成分的治疗神经变性病药物。
2．根据权利要求1的药物，其中活性成分是唑尼沙胺。
3．根据权利要求1或2的药物，其中神经变性病是帕金森病。
4．唑尼沙胺或它的金属盐在制备神经变性病药物中的应用。
5．唑尼沙胺在制备神经变性病药物中的应用。
6．根据权利要求4或5的用途，其中神经变性病是帕金森病。
7．一种预防和／或治疗哺乳动物神经变性病的方法，其包括给需要这种预防和／或治疗的哺乳动物以有效量的唑尼沙胺或它的金属盐。
8．一种预防和／或治疗哺乳动物神经变性病的方法，其包括给需要这种预防和／或治疗的哺乳动物以有效量的唑尼沙胺。
9．根据权利要求7或8的预防和／或治疗方法，其中神经变性病是帕金森病。
10．根据权利要求7-9中的任一项的预防和／或治疗方法，其中每日剂量是1-50mg／kg体重哺乳动物。
11．根据权利要求10的预防和／或治疗方法，其中每日剂量是2-20mg／kg体重哺乳动物。
12．根据权利要求7-11中的任一项的预防和／或治疗方法，其中哺乳动物是人。
全文摘要
本发明提供了一种用于治疗神经变性病的药物,其含有唑尼沙胺或它的金属盐作为活性成分。本发明药物可以用于预防和治疗哺乳动物(包括人)的各种神经变性病如帕金森病,亨廷顿舞蹈病,舞蹈病样综合征和肌张力障碍综合征。
文档编号A61K31/423GK1283113SQ98812680
公开日2001年2月7日 申请日期1998年12月21日 优先权日1997年12月26日
发明者增田义信, 越智喜昭 申请人:大日本制药株式会社