甘草酸提取物在制备治疗牙龈炎药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及植物化学领域，特别是涉及甘草酸提取物在制备治疗牙龈炎药物中的 应用。
【背景技术】
[0002] 甘草是豆科植物甘草、胀果甘草、或者光果甘草的干燥根茎，是临床常用的中草药 品种。
[0003] 甘草性甘、平，具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药之功效。
[0004] 甘草含有多种化学成分，主要成分有甘草酸、甘草甙等。甘草的化学组成极为复 杂，目前为止从甘草中分离出的化合物有甘草甜素、甘草次酸、甘草甙、异甘草甙、新甘草 甙、新异甘草甙、甘草素、异甘草素以及甘草西定、甘草醇、异甘草醇、7-甲基香豆精、伞形花 内酯等数十种化合物，但这些成分和数量通常会随甘草的种类、种植区域、采收时间等因素 的不同而异。大量的研宄表明，甘草甜素和黄酮类物质是甘草中最重要的生理活性物质，主 要存在于甘草根表皮以内的部分。
【发明内容】
[0005] 本发明公开了一种甘草提取物，所述的甘草提取物是将甘草粉打粉后，在70%的 乙醇溶剂中超声处理60分钟得到，超声功率为80W，超声频率为30kHz。
[0006] 优选地，甘草粉与乙醇溶剂的料液比为1:10 (m/v)。
[0007] 同时，本发明还公开了甘草提取物中甘草酸含量的测定方法，所述的测定方法是 用紫外分光光度法检测其在252波长处的吸收峰，并通过甘草酸标准品制作标准曲线，从 而获得甘草提取物中甘草酸的含量。
[0008] 进一步地，我们还公开了所述的甘草酸提取物在抗辐射中药组合物中的应用，所 述的抗辐射中药组合物还包括分别与甘草提取物等质量的黄芪、茉莉花、玫瑰花、白菊花。
[0009] 同时，我们还公开了所述的甘草酸提取物在制备治疗牙龈炎药物中的应用。
[0010] 进一步地，在制备治疗牙龈炎药物时，还包括与甘草提取物等质量的鲜车前草和 鲜薄荷。
[0011] 更进一步地，在制备治疗牙龈炎药物时，还包括有与甘草提取物等质量的绿皮鸭 蛋。
[0012] 一种抗辐射中药组合物的制备方法，包括如下步骤： 按照前述的方法通过超声波提取甘草，获得甘草提取物，将提取物减压浓缩形成浸膏， 然后将黄芪用70%乙醇浸提24小时后，浓缩形成黄芪浸膏，将甘草浸膏、黄芪浸膏、茉莉花、 玫瑰花、白菊花共沸回流，过滤，得到抗辐射中药组合物。
[0013] 一种治疗牙龈炎药物的制备方法，包括如下步骤： 按照前述的方法通过超声波提取甘草，获得甘草提取物，将提取物减压浓缩形成浸膏， 然后将甘草浸膏与鲜车前草共沸回流，过滤，取过滤液，鲜薄荷加入过滤液中，蒸馏，收集蒸 馏液，即为治疗牙龈炎药物。
[0014] 本发明不仅公开了一种工艺简单、产品纯度高、易于工业化推广的甘草提取工艺， 同时还给出了这一工艺所得产品的药物用途，具有很好的市场价值。
【具体实施方式】
[0015] 实施例1试验用甘草中甘草酸的含量测定 精密称取甘草酸标准品0. 0230g，用50%乙醇水溶液溶解，制得浓度为0. 23mg/mL的标 准品溶液。
[0016] 分别精密量取0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1.Oml标准品溶液，用50%乙醇水溶液稀释至 10mL，检测其在252nm处吸光度，得到标准曲线： y = Zt913s?UCTO。
[0017] 实施例2超声波提取条件的考察 2. 1超声波功率的考察 甘草粉与乙醇以Ig:l〇ml的比例浸泡，分别选用不同的超声功率提取60分钟，将处理 后的溶液抽滤。
[0018] 按照实施例1中的方法获得甘草提取物中的甘草酸含量，利用甘草提取物中的甘 草酸和甘草中的甘草酸比值，得到提取率，提取率与超声波功率的关系见图1。
[0019] 2. 2超声时间的条件考察 甘草粉过20目筛，超声波功率为80W，料液比为1:10,浸泡至药材全部浸湿后，分别超 声处理30分钟、40分钟、50分钟、60分钟、70分钟、80分钟，将超声处理后的溶液抽滤。
[0020] 照实施例1中的方法获得甘草提取物中的甘草酸含量，利用甘草提取物中的甘草 酸和甘草中的甘草酸比值，得到提取率，提取率与时间的关系见图2。
[0021] 2. 3超声波处理溶剂的考察 甘草粉过20目筛，超声波功率为80W，料液比为1:10,分别用不同浓度的乙醇溶液浸泡 至药材全部浸湿后，进一步继续超声处理，将超声处理后的溶液抽滤。
[0022] 照实施例1中的方法获得甘草提取物中的甘草酸含量，利用甘草提取物中的甘草 酸和甘草中的甘草酸比值，得到提取率，提取率与溶剂浓度的关系见图3。
[0023] 2. 4超声波处理综合条件的正交实验 影响因素及水平见表1 :
正交实验结果见表2 :
[0024] 因此，确定最佳提取工艺为：所述的甘草提取物是将甘草粉打粉后，在70%的乙醇 溶剂中超声处理60分钟得到，超声功率为80W，超声频率为30kHz。
[0025] 优选地，甘草粉与乙醇溶剂的料液比为1:10 (m/v)。
[0026] 实施例3 将甘草粉打粉后，过20目筛，在70%的乙醇溶剂中超声处理60分钟得到，超声功率为 80W，超声频率为30kHz，甘草粉与乙醇溶剂的料液比为1:10 (m/v)。制得甘草提取物。
[0027] 实施例4 按照实施例3的方法通过超声波提取甘草，获得甘草提取物，将提取物减压浓缩形成 浸膏，然后将黄芪用70%乙醇浸提24小时后，浓缩形成黄芪浸膏，将甘草浸膏、黄芪浸膏、茉 莉花、玫瑰花、白菊花共沸回流，过滤，得到抗辐射中药组合物。
[0028] 实施例5 选用体重18-22g雄性C57小鼠40只。小鼠饲养环境温度21°C±2°C，相 湿度50% ±10%，12小时灯光12小时黑暗，预养3天，随机分为3组，即正常组， 辐射组，实验组(选用实施例4中所得的中药组合物)，每组10只。60C〇y射线一次性全 身均匀照射，照射剂量为7. 5Gy，剂量率为213. 16cGy/min，照后立即灌胃给药，正常组和照 射组给予等体积蒸馏水，中药组合物组50mg/kg，连续给药5天，连续观察小鼠30天。
[0029] 结果：含有甘草提取物的中药组合物提高小鼠存活率30%，延长平均存活时间， 差异极显著，且存活小鼠状态良好。
[0030] 实施例5 按照实施例3的方法通过超声波提取甘草，获得甘草提取物，将提取物减压浓缩形成 浸膏，然后将甘草浸膏与鲜车前草共沸回流，过滤，取过滤液，鲜薄荷加入过滤液中，蒸馏， 收集蒸馏液，即为治疗牙龈炎药物。
[0031] 实施例6 在麻醉状态下，选择菌斑评分在2-4 (菌斑面积装电脑25%~75%以上的面颊侧牙齿表 面)，牙龈炎评分在1-3 (轻微或中等牙龈炎）的比格犬12只，随机分为实验组和对照组，每 组6只。将动物麻醉后，对其第三白齿处的牙龈炎和牙结石评分，用菌斑液显色后对菌斑评 分。
[0032] 同时在其左上侧的第三前臼齿的前庭区域切取3mm的齿龈组织进行HE染色，在光 镜下对炎性渗透评分。
[0033] 牙龈炎的评分等级为： 0 :没有牙龈炎 1:非常轻微牙龈炎(红肿，碰触不出血)， 2 :轻微牙龈炎(红肿，碰触延迟出血)， 3 :中等牙龈炎(红肿，碰触后立即出血)， 4 :严重牙龈炎(溃疡，自发性出血)。
[0034] 牙结石的评分等级根据牙结石占面颊侧牙齿表面的面积分级， 0:0% 1 ：< 25%, 2:25-49%, 3:50-74%, 4 ：> 75%〇
[0035] 炎性渗透评分： 〇 :有散在的慢性炎细胞单个或者小堆的排列在上皮细胞表面， 1 :在上皮细胞的旁边有稀疏但连接成带的炎细胞聚集， 2 :在上皮细胞周围大量渗透的炎细胞取代了正常的牙銀纤维， 3 :在组织中广泛，大量聚集的炎细胞取代了大多数的牙龈纤维。
[0036] 然后分别用浸润有实施例5中治疗牙龈炎药物的棉球覆盖动物唇侧和面积ace的 牙齿和齿龈，生理盐水做对照，每次10秒钟，每天两次，持续14天。第15天再次将动物麻 醉，并对其菌斑、牙龈炎和牙结石评分，同时在其右上侧的第三前白齿的前庭区域切取3mm 的齿龈组织进行HE染色，在光镜下对炎性渗透评分。
[0037] 结果表明经过治疗后，菌斑和牙龈炎症状评分在实验组显著降低，p< 0. 05,对照 组无显著差异，P> 0. 1，具体结果见表3。
[0038]表 3:
【主权项】
1. 甘草酸提取物在制备治疗牙龈炎药物中的应用。2. 根据权利要求1所述的应用，其特征是，还包括与甘草提取物等质量的鲜车前草和 鲜薄荷。
【专利摘要】本发明涉及植物化学领域，特别是涉及甘草酸提取物在制备治疗牙龈炎药物中的应用，还包括与甘草提取物等质量的鲜车前草和鲜薄荷。本发明不仅公开了一种工艺简单、产品纯度高、易于工业化推广的甘草提取工艺，同时还给出了这一工艺所得产品的药物用途，具有很好的市场价值。
【IPC分类】A61K35/57, A61K36/738, A61K36/484, A61K36/68, A61P39/00, A61P1/02, G01N21/33
【公开号】CN104887746
【申请号】CN201510276984
【发明人】蔡永柱
【申请人】蔡永柱
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月27日