一种环二肽在制备治疗消化道溃疡的药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明所属生物医药领域，特别是一种环二肽在制备治疗消化道溃疡的药物中的 应用。
【背景技术】
[0002] 胃溃疡、十二指肠溃疡统称为消化道溃疡病。由于生活节奏加快，工作压力加大， 近年消化道溃疡病的发病率不仅未见下降，反有上升趋势。近10多年来本病的症状也变得 不典型，无规律的胃部隐痛常不会引起人们的注意，直到发生呕血或黑便时方到医院就诊。 消化性溃疡主要指发生在胃和十二指肠的慢性溃疡，亦可发生于食管下段、胃空肠吻合口 周围及含有异位胃粘膜的美克尔（MECKEL)憩室。这些溃疡的形成与胃酸和胃蛋白酶的消 化作用有关，故又称消化性溃疡。本病绝大多数（95%以上）位于胃和十二指肠，故还称为 胃十二指肠溃疡。本病的总发病率占人口的5-10%，十二指肠溃疡较胃溃疡多见，以青壮年 多发，男多于女，儿童亦可发病，老年患者所占比例亦逐年有所增。
[0003] 目前，人们对消化性溃疡认识不足，常常严重了才引起注意，在传统用药治疗过程 中，使用的大部分药物经肝脏的首过效应疗效大打折扣，造成治疗时间长，而患者在病情得 到控制还没完全根治的时候，往往不会继续治疗下去。所以造成了该病的复发率一直比较 商。
【发明内容】
[0004] 针对上述消化道溃疡的治疗时间长，复发率高的问题，发明人想到利用生物学中 的小分子物质能够直接穿透细胞膜这一特征，可以避免肝脏首过效应，能够很快直达病灶， 使得药效最大的发挥出来以快速的达到根治的目的。经过长期的实验研究，发明人也终于 找到了具有治疗消化道溃疡的小分子物质，该小分子物质属于环肽中的环二肽，分子结构 简单。
[0005] 本发明提供了一种小分子物质在消化道溃疡中的应用，特别是一种环二肽在消化 道溃疡中的应用。尤其是在制备治疗胃溃疡药物中的应用，或在制备治疗胃粘膜损伤的药 物中的应用。
[0006] 本发明所述的环二肽是环-L-脯-L-丙二肽，相对分子质量为168. 23,具体的分子 结构如下：
[0007] 本发明所述的环-L-脯-L-丙二肽可以由化学合成制得，也可从生物体中提取纯 化得到。
[0008] 所述的环-L-脯-L-丙二肽的化学合成的制备方法，其特征在于合成步骤包括缩 合、脱保护、环化三个阶段，具体技术方案如下：
[0009] 1.中和缩合：取进行Boc氨基保护的L-脯氨酸与丙氨酸甲酯盐酸盐在含有 THF(四氢呋喃）、吡啶、（Boc)20、DMAP(催化剂）的条件下进行中和缩合反应得到N-叔丁 氧羰基-脯氨酰丙氨酸甲酯；
[0010] 2.脱保护：在EtoAc(乙酸乙酯）和HC1的饱和溶液的作用下对步骤1中得到的 N-叔丁氧羰基-脯氨酰丙氨酸甲酯进行氨基脱保护处理，得到脯氨酰丙氨酸甲酯；
[0011] 3.环化：将步骤2中得到的脯氨酰丙氨酸甲酯与甲醇混合，用NaHC03调节pH后， 加热回流18小时，过滤，柱层析纯化，得到白色的环-L-脯-L-丙二肽。
[0012] 合成路线如下：
[0013]
[0014] 本发明所述的环-L-脯-L-丙二肽分子量小，结构简单，人工合成也简单，对治疗 消化道溃疡的效果显著，在治疗过程中能很快透过黏膜组织进入血液循环，避免肝脏的首 过效应，快速到达病灶，使得发挥出最大的效果治疗消化道溃疡，缩短了治疗时间，减少了 药物使用量，复发率也相应降低。
【具体实施方式】
[0015] 以下是结合具体试验对本发明的说明，并不是对本发明保护范围的限制。
[0016] 实施例1本发明中所述的环-L-脯-L-丙二肽的制备方法 [0017]主要药品试剂：L_丙氨酸、经Boc氨基保护的脯氨酸
[0018] 制备环-L-脯-L-丙二肽的过程：
[0019] (1)丙氨酸甲酯盐酸盐的制备：向适量甲醇与二氯亚砜的混合液中加入L-丙氨酸 l〇g，在室温下搅拌24h。TLC跟踪反应完成，减压旋干溶剂，得到白色的丙氨酸甲酯盐酸盐 15. 08g〇
[0020] (2)中和缩合反应：向100ml无水四氢呋喃中加入步骤（1)中得到的丙氨酸甲酯 盐酸盐、经Boc氨基保护的脯氨酸20g、吡啶20ml、DMAP，待全部混合后，在氩气的保护下 加入溶于无水四氢呋喃的（Boc)20,室温下搅拌10小时。TLC跟踪反应完成，柱层析纯化 (石油醚：乙酸乙酯=4:1)，旋干溶剂得到黄色的N-叔丁氧羰基-脯氨酰丙氨酸甲酯固体 27. 52g〇
[0021] (3)Boc保护氨基脱保护处理：取步骤（2)中得到的N-叔丁氧羰基-脯氨酰丙氨 酸甲酯，加入乙酸乙酯盐酸（HCl/EtOAc)的饱和溶液2. 5L，冰水浴下搅拌2h，冰水浴中减压 蒸掉溶剂，以甲醇-乙醚重结晶得白色的脯氨酰丙氨酸甲酯固体23. 13g。
[0022] (4)环-L-脯-L-丙二肽的制备：将步骤（3)中得到的脯氨酰丙氨酸甲酯加入到 0. 9L甲醇中，用NaHC03调节pH为7-8,加热回流18h，过滤，柱层析纯化（乙酸乙酯：甲醇 =2:1)，最后得到白色固体环-L-脑-L-丙二肤15. 79g。
[0023] 实施例2环-L-脯-L-丙二肽在溃疡中的应用
[0024] 1、实验材料
[0025] 1. 1样品：按实施例1制得样品：环-L-脯-L-丙二肽
[0026] 1. 2实验动物：KM小鼠，18~22g，160只，雌雄各半。SD大鼠，200~220g，204只， 雌雄各半。
[0027] 1. 3实验试剂：盐酸雷尼替丁胶囊、达喜（铝碳酸镁片）。
[0028]2、样品对胃溃疡粘膜的保护功能评价方法
[0029] 2. 1无水乙醇致小鼠胃粘膜损伤模型试验
[0030] 160只KM小鼠按性别与体重随机分组（详见表1)，各组给予相应的药物， 环-L-脯-L-丙二肽组1的小鼠给药连续6天，第5天给药后禁食24小时，自由饮水，其余 各组小鼠给药连续10天，第9天给药后禁食24h，自由饮水。每组的小鼠在末次给药3h后， 所有小鼠给予〇. 2ml无水乙醇进行灌胃，1小时后处死动物，结扎幽门，1%甲醛固定，观察 并评定溃疡指数（标准：条索状损伤的长度大于1mm者，测定其长度，每毫米计1分，其宽度 大于1_者计分加倍，长度与宽度均小于1_，计0. 5分，将计分相加即为该鼠的溃疡指数） 并计算溃疡抑制百分率。
[0031] 2. 2乙酸致大鼠慢性胃溃疡模型试验
[0032] 除假手术组（12只），其余大鼠采用10 %醋酸按0. 05ml/只平刺于胃浆膜下 0. 4-0. 5_造模。术后造模大鼠进一步分组（详见表2)，并于第2日开始给药，每日1次， 环-L-脯-L-丙二肽组1给药10天，其余各组给药14天，末日给药后禁食禁水一夜后处死 动物。以游标卡尺测定溃疡最大长径及垂直于最大长径的最大宽径。计算溃疡指数（溃疡 指数=溃疡最大长径X垂直于最大长径的最大宽径）及溃疡抑制率。
[0033]3、样品对胃溃疡粘膜的保护功能评价结果
[0034] 3. 1样品对无水乙醇致小鼠胃粘膜损伤的影响
[0035] 表1样品对无水乙醇致小鼠胃粘膜损伤的影响(:t±S)
[0036]
[0037] 注：*:P〈0. 05与对照组比较
[0038] 结果显示，与对照组比较，环-L-脯-L-丙二肽可使无水乙醇致小鼠胃粘膜损伤的 溃疡指数明显降低，具有统计学意义（P〈〇. 05)。从表1中的结果显示，使用雷尼替丁的阳性 组的小鼠在给药10天后的溃疡指数和溃疡抑制率与环-L-脯-L-丙二肽组给药6天后的 溃疡指数和溃疡抑制率相差不大。实验结果中还显示环-L-脯-L-丙二肽对无水乙醇致胃 粘膜损伤有较好的保护作用。
[0039] 3. 2样品对乙酸致大鼠慢性胃溃疡模型的影响
[0040] 表2样品对乙酸致大鼠慢性胃溃疡模型的影响（无土S)
[0041]
[0043] 注：*表示与模型组比较P〈0. 05
[0044] 由表2显示，模型组的溃疡指数与假手术组有差异（P< 0. 05);环-L-脯-L-丙 二肽的溃疡指数与模型组比较有明显改善（P< 〇. 05)。
[0045] 3. 3功能评价结果由上述实验结果表明：环-L-脯-L-丙二肽对急、慢性胃溃疡的 黏膜具有修复作用，且疗效显著，溃疡抑制率高，与普通药物相比，缩短了治疗时间。
【主权项】
1. 一种环二肽在制备治疗消化道溃疡的药物中的应用。2. -种如权利要求1中所述的环二肽的应用，其特征在于，所述应用为环-L-脯-L-丙 二肽在制备治疗消化道溃疡的药物中的应用。3. 环-L-脑-L-丙二肤在制备治疗胃溃瘍的药物中的应用。4. 环-L-脯-L-丙二肽在制备治疗胃粘膜损伤的药物中的应用。5. 环-L-脯-L-丙二肽在制备治疗慢性胃溃疡的药物中的应用。6. -种如权利要求1中所述的环二肽的应用，其特征在于，所述的环二肽的合成路线 包括中和缩合反应、氨基脱保护、环化三个阶段，具体包括如下几个步骤： (1) 中和缩合反应：取进行Boc氨基保护的L-脯氨酸与丙氨酸甲酯盐酸盐在含有四氢 呋喃、吡啶、（Boc)20、DMAP的条件下进行中和缩合反应得到N-叔丁氧羰基-脯氨酰丙氨酸 甲酯； (2) 氨基脱保护：在EtoAc和HC1的饱和溶液的作用下对步骤（1)中得到的N-叔丁氧 羰基-脯氨酰丙氨酸甲酯进行氨基脱保护处理，得到脯氨酰丙氨酸甲酯； (3) 环化：将步骤（2)中得到的脯氨酰丙氨酸甲酯与甲醇混合，用NaHC03调节pH后，加 热回流18小时，过滤，柱层析纯化，得到白色的环-L-脯-L-丙二肽。
【专利摘要】本发明提供了一种环二肽在制备治疗消化道溃疡的药物中的应用,所述的环二肽为环-L-脯-L-丙二肽。该二肽具有分子量小，结构简单等特点。对消化道溃疡的治疗效果显著，在治疗过程中能很快透过黏膜组织进入血液循环，避免肝脏的首过效应，快速到达病灶，使得发挥出最大的效果治疗消化道溃疡，缩短了治疗时间，减少了药物使用量，复发率也相应降低。
【IPC分类】A61P1/04, C07K1/16, A61K38/12, C07K5/12, C07K1/06
【公开号】CN105311619
【申请号】CN201410273122
【发明人】陈光健
【申请人】陈光健
【公开日】2016年2月10日
【申请日】2014年6月18日