骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用

骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用【专利摘要】本发明涉及中药及其用途
技术领域：
，是一种骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用。本发明首次公开了骆驼刺提取物对IBS?D具有良好的治疗效果，具体的，骆驼刺提取物具有升高腹部回缩反射的容量阈值、降低空肠平滑肌运动波振幅、降低粪便含水量、升高血清K+含量、降低红细胞压积等作用，在抑制内脏超敏性方面或改善由应激或肠易激引起的排便异常方面具有良好的效果，多个病理环节多措并举，将对IBS?C、IBS?D以及IBS?A均具有良好的治疗效果，并且，采用纯中药制方，副作用小。【专利说明】骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用
技术领域：
[0001]本发明涉及中药及其用途
技术领域：
，是一种骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用。【
背景技术：
】[0002]随着社会竞争、生存压力的增大，因应激导致的胃肠功能紊乱性疾病----肠易激综合征（irritablebowelsyndrome，IBS)的患病率达到8%至16%。IBS是一种以慢性或者反复发作的腹痛伴排便习惯改变为特征的功能性肠病，并缺乏形态学和生化标志的异常。根据患者排便情况可分为便秘型肠易激综合征（constipation-predominantofirritablebowelsyndrome,IBS-C)、腹泻型肠易激综合征（diarrhea-predominantofirritablebowelsyndrome，IBS-D)和腹泻便秘交替型肠易激综合征（alternating-predominantofirritablebowelsyndrome,IBS-A)。在我国，临床上以IBS-D最为多见。[0003]IBS的共同特征是胃肠运动功能改变和内脏器官的敏感性异常。腹胀、便秘和腹泻是IBS最常见的临床症状，胃肠道动力是研究重点。有报道提示IBS患者食管括约肌的张力低于正常，伴有收缩异常，有学者认为IBS患者存在胃排空延迟的现象，也有一些学者认为只有伴有消化不良的IBS患者才有胃排空延迟的现象，还有一些学者认为IBS患者存在小肠运动异常，如:大多数研究认为腹泻型IBS患者存在小肠运动加快，便秘型IBS患者小肠运动减慢，另外有研究显示腹泻型IBS患者在消化间期复合移行复合运动有缩短现象存在，有研究发现精神因素，特别是一些负面的因素如焦虑、抑郁、暴躁等都可以引起迷走神经兴奋性增高，导致IBS患者肠道运动增强，引起一些胃肠道的腺体分泌增加，导致IBS患者腹痛、腹泻、便秘等症状的加剧。多年来，普遍形成共识的是认为肠道动力异常是IBS症状产生的主要病理生理基础，IBS患者的肠道动力异常主要具有两个特征:第一，广泛性，即可涉及到全胃肠道(包括胆管系统）；第二，高反应性，即对各种生理和非生理刺激的动力反应过强，呈反复发作过程。[0004]IBS是一种全球性疾病，人群患病率较高，其症状可反复发作，严重影响患者的生活质量，并占用了大量的医疗资源。随着现代医学的发展目前临床上治疗IBS的药物日渐增多，但仍然没有一种药物对IBS治疗完全有效。目前临床上西医对改善IBS的治疗药物包括：调节胃肠动力和感觉药物、止泻药、消除胃涨剂、微生态制剂、抗抑郁及镇痛治疗药等。因西药多只能阻断一二个病理环节，且其不良反应多，药物的费用高，病人往往难以接受长期服用药物治疗，故其疗效不尽理想，症状反复，严重影响了患者的生存质量。故在其治疗上，西医目前尚缺乏任何单一的理想的药物被证实能有效治疗IBS。越来越多的研究表明，中医药在调节治疗此类功能失调性疾病作用上占有很大的优势。因此，从传统中医药宝库中探索和寻找治疗IBS的药材或提取物成了目前研究的热点。[0005]胳盤刺(学名:AlhagisparsifoliaShap.)属豆科、落叶草本。从沙漠和戈壁深处吸取地下水份和营养，是一种自然生长的耐旱植物，因为这种植物茎上长着刺状的很坚硬的小绿叶，故叫骆驼刺，是草本植物，是戈壁滩和沙漠中骆驼唯一能吃的赖以生存的草，故又名骆驼草。骆驼刺主要分布在沙漠和戈壁深处吸取地下水分和营养，是一种自然生长的耐旱植物。主要产于宁夏、新疆、甘肃，生长于海拔150米至1500米的沙荒地、盐渍化低湿地和覆沙戈壁上。骆驼刺能分泌糖类物质，干燥后收集的刺糖是少数民族用于治疗腹痛腹胀、痢疾腹泻、滋补强壮、平衡体液和异常胆液质的民间用药。[0006]骆驼刺目前主要用于防风固沙及作为饲料使用，虽然也作为维药的常用药，但由于对骆驼刺的化学成分及药理作用机制不详等原因，导致只知道不同的部位可以治疗不同的疾病，但具体是什么成分有效，具体的药理作用、其所带来的副作用还处于不明了状态，导致不能合理的利用骆驼刺中的多种有效化学成分，这样极大程度的导致对骆驼刺药用资源的浪费。故非常需要对骆驼刺进行系统的药效物质基础分析，阐明其中的有效化学成分及其物质基础，从而合理利用骆驼刺中各种有效成分制成所需药物，真正实现合理利用地产药用资源。[0007]因此本着就地取材、因地制宜的原则，筛选具有抗IBS作用的民族新药候选药物就成了刻不容缓的治疗手段。该候选药物的筛选一旦成功，并进行研制生产，能够充分发挥中医药在调节治疗功能失调性疾病作用上的优势，后期该产品的上市，必将满足患者的需求，市场前景也将非常广阔。【
发明内容】[0008]本发明提供了一种骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用，克服了上述现有技术之不足，其能有效解决由于西医只能阻断一二个病理环节使得目前尚缺乏任何单一的理想的药物能有效治疗IBS的问题。[0009]本发明的技术方案是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用。[0010]下面是对上述发明技术方案的进一步优化或/和改进：[0011]上述骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用，其特征在于骆驼刺提取物按下述制备方法得到：第一步，取干燥的骆驼刺地上部分，粉碎后得到骆驼刺粉，用60%至80%的乙醇回流提取2次至3次，每次乙醇回流提取的时间为1小时至3小时，每次乙醇回流提取时乙醇的用量为骆驼刺粉与乙醇的体积比为1:8至1:12,合并每次乙醇回流提取的提取液得到乙醇混提液；第二步，将乙醇混体液浓缩至溶液中含生药量为〇.5g/ml至1.5g/ml的浓缩液;第三步，用石油醚萃取浓缩液2次至5次，每次石油醚萃取时所取用石油醚的体积为待萃液体积的1倍至3倍，最后一次石油醚萃取完成后，静置到出现明显分层，弃去石油醚层留下水层;第四步，对第三步中得到的水层用乙酸乙酯萃取2次至5次，每次乙酸乙酯萃取时所取用乙酸乙酯的体积为待萃液体积的1倍至3倍，最后一次乙酸乙酯萃取完成后，静置到出现明显分层，弃去乙酸乙酯层留下水层;第五步，对第四步中得到的水层用正丁醇萃取2次至5次，每次正丁醇萃取时所取用正丁醇的体积为待萃液体积的1倍至3倍，将每次正丁醇萃取完成后得到的正丁醇层混合后得到正丁醇混萃液;第六步，对正丁醇混萃液进行干燥至物料中的含水量不大于10%即得到骆驼刺提取物。[0012]上述骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用，其特征在于第三步中静置时间为2小时至6小时，第四步中静置时间为2小时至6小时。[0013]上述骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用，其特征在于第六步的干燥温度为50°C至70°C。[0014]本发明首次公开了骆驼刺提取物对IBS-D具有良好的治疗效果，具体的，骆驼刺提取物具有升高腹部回缩反射的容量阈值、降低空肠平滑肌运动波振幅、降低粪便含水量、升高血清K+含量、降低红细胞压积等作用，在抑制内脏超敏性方面或改善由应激或肠易激引起的排便异常方面具有良好的效果，多个病理环节多措并举，将对IBS-C、IBS-D以及IBS-A均具有良好的治疗效果，并且，采用纯中药制方，副作用小。【附图说明】[0015]图1为骆驼刺提取物对IBS-D大鼠模型腹部回缩反射的容量阈值条状图。[0016]图2为正常组大鼠模型的平滑肌运动波振幅图。[0017]图3为模型组IBS-D大鼠模型的平滑肌运动波振幅图。[0018]图4为阳性对照组IBS-D大鼠模型的平滑肌运动波振幅图。[0019]图5为高剂量组IBS-D大鼠模型的平滑肌运动波振幅图。[0020]图6为低剂量组IBS-D大鼠模型的平滑肌运动波振幅图。[0021]图7为骆驼刺提取物对IBS-D大鼠粪便含水率的影响条状图。[0022]图8为骆驼刺提取物对IBS-D大鼠模型血清K+的影响条状图。[0023]图9为骆驼刺提取物对IBS-D大鼠红细胞压积的影响条状图。[0024]图10为骆驼刺提取物对IBS-D大鼠模型胸腺系数的影响条状图。【具体实施方式】[0025]本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。本发明中所提到各种化学试剂和化学用品如无特殊说明，均为现技术中公知公用的化学试剂和化学用品;本发明中的百分数如没有特殊说明，均为质量百分数;本发明中的溶液若没有特殊说明，均为溶剂为水的水溶液，例如，盐酸溶液即为盐酸水溶液。[0026]下面结合实施例及附图对本发明作进一步描述：[0027]实施例1，该骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用。骆驼刺提取物可以为根据现有技术得到的骆驼刺提取物。[0028]实施例2,作为实施例1的优化，骆驼刺提取物可以按下述制备方法得到：第一步，取干燥的骆驼刺地上部分，粉碎后得到骆驼刺粉，用60%至80%的乙醇回流提取2次至3次，每次乙醇回流提取的时间为1小时至3小时，每次乙醇回流提取时乙醇的用量为骆驼刺粉与乙醇的体积比为1:8至1:12,合并每次乙醇回流提取的提取液得到乙醇混提液;第二步，将乙醇混体液浓缩至溶液中含生药量为0.5g/ml至1.5g/ml的浓缩液;第三步，用石油醚萃取浓缩液2次至5次，每次石油醚萃取时所取用石油醚的体积为待萃液体积的1倍至3倍，最后一次石油醚萃取完成后，静置到出现明显分层，弃去石油醚层留下水层;第四步，对第三步中得到的水层用乙酸乙酯萃取2次至5次，每次乙酸乙酯萃取时所取用乙酸乙酯的体积为待萃液体积的1倍至3倍，最后一次乙酸乙酯萃取完成后，静置到出现明显分层，弃去乙酸乙酯层留下水层;第五步，对第四步中得到的水层用正丁醇萃取2次至5次，每次正丁醇萃取时所取用正丁醇的体积为待萃液体积的1倍至3倍，将每次正丁醇萃取完成后得到的正丁醇层混合后得到正丁醇混萃液;第六步，对正丁醇混萃液进行干燥至物料中的含水量不大于10%即得到骆驼刺提取物。第三步中，第一次进行石油醚萃取时的待萃液为浓缩液，后面几次进行石油醚萃取时的待萃液为上次石油醚萃取后得到的水层;第四步中，第一次进行乙酸乙酯萃取时的待萃液为第三步最后得到的水层，后面几次进行乙酸乙酯萃取时的待萃液为上次乙酸乙酯萃取后得到的水层;第五步中，第一次进行正丁醇萃取时的待萃液为第四步最后得到的水层，后面几次进行正丁醇萃取时的待萃液为上次正丁醇萃取后得到的水层；先采用石油醚进行萃取，能够除掉浓缩液中大部分的油性杂质，使后面几步的萃取更加方便快捷。[0029]实施例3，作为实施例2的优化，第三步中静置时间为2小时至6小时，第四步中静置时间为2小时至6小时。静置2小时至6小时能够达到较好的分层效果。[0030]实施例4,作为实施例2和实施例3的优化，第六步的干燥温度为50°C至70°C。[0031]实施例5,该骆驼刺提取物可以按下述制备方法得到第一步，取2.4kg干燥的骆驼刺地上部分，粉碎后得到骆驼刺粉，用70%的乙醇回流提取3次，每次乙醇回流提取的时间为2小时，每次乙醇回流提取时乙醇的用量为骆驼刺粉与乙醇的体积比为1:10,合并每次乙醇回流提取的提取液得到乙醇混提液；第二步，将乙醇混体液浓缩至溶液中含生药量为I.〇g/ml的浓缩液;第三步，用石油醚萃取浓缩液3次，每次石油醚萃取时所取用石油醚的体积为待萃液体积的1倍，最后一次石油醚萃取完成后，静置到出现明显分层，弃去石油醚层留下水层;第四步，对第三步中得到的水层用乙酸乙酯萃取3次，每次乙酸乙酯萃取时所取用乙酸乙酯的体积为待萃液体积的1倍，最后一次乙酸乙酯萃取完成后，静置到出现明显分层，弃去乙酸乙酯层留下水层;第五步，对第四步中得到的水层用正丁醇萃取3次，每次正丁醇萃取时所取用正丁醇的体积为待萃液体积的1倍，将每次正丁醇萃取完成后得到的正丁醇层混合后得到正丁醇混萃液;第六步，对正丁醇混萃液在50°C条件下进行干燥至物料中的含水量不大于10%即得到骆驼刺提取物。[0032]骆驼刺提取物对肠易激综合征的影响评价实验。[0033]1、造模[0034]采取传统束缚应激刺激联合高乳糖饲料喂养方式建立腹泻型肠易激综合征（IBS-D)大鼠模型。[0035]1.1、高乳糖饲料配方：[0036]参考文献将普通饲料配方中淀粉改为乳糖。配方如表1所示：[0037]1.2、模型制备[0038]1.2.1、动物和分组：取6周龄（140±20g)SD大鼠50只，雄性，适应性饲养5d后随机分为5组:正常组、模型组、阳性对照组、高剂量组和低剂量组，每组10只。[0039]造模当日即给予每只SD大鼠高乳糖饲料喂养，每日上午用医用橡皮膏束缚模型组、阳性对照组、高剂量组、低剂量组的各大鼠双后肢，并悬挂lh，使之无法行动，烦躁不安，造成一定的应激刺激，持续7天。[0040]每日观察每只SD大鼠如下状态:激惹行为、好斗倾向、排便次数、粪便形态、毛色和精神状况。[0041]2、给药[0042]2.1、受试品:骆驼刺提取物；[0043]2.2、给药剂量及给药周期:造模首日开始给药，高剂量组和低剂量组的大鼠分别以400mg/kg、20〇11^/1^胳§它刺提取物灌胃给药14天，阳性对照组大鼠以60mg/kg的马来酸曲美布汀灌胃给药14天。[0044]2.3、日常观察:每日观察动物激惹行为、好斗倾向、排便次数、粪便形态、毛色和精神状况。[0045]3、试验[0046]3.1、腹部回缩反射的容量阈值[0047]连续给药14天后禁食24h，禁水12h，各SD大鼠分别于清醒状态下放入自制的固定器，将6F导尿管经肛门缓慢插入，气囊末端距肛门约2cm并固定。30min后经外口气囊内先后注入37°C生理盐水(0.8ml，0.9ml，Iml，I.Iml和1.2ml)扩张，以腹部回缩反射作为标准，记录容量阈值。为得到准确的评估结果，对每一阈值都重复进行3次扩张，数据取均值。[0048]3.2、在体平滑肌运动的影响[0049]连续给药7天后各SD大鼠禁食12h，灌胃新鲜牛乳(20ml/kg)l小时后，麻醉、固定后于剑突下2cm处做正中切口，剪开后分离出回肠，将针式电极正、负极按要求连接，多道生理信号采集处理系统记录餐后Ih空肠平滑肌运动波，分析计算运动波振幅和频率。[0050]3.3、粪便含水量检测[0051]分别于给药7d和Hd时收集每只SD大鼠24h内粪便，称量粪便的干、湿重，计算粪便含水量。[0052]3.4、血清电解质和血红细胞压积[0053]实验结束后，行腹主动脉取血，其中0.5ml加入EDTA-2K抗凝，用于红细胞压积(HCT)测定，其余3000rpm离心10min，分离血清，用于血电解质钾离子(K+)、钠离子(Na+)、氯离子(Cl-)浓度测定。[0054]3.5、脏器系数[0055]上述实验结束后，处死大鼠后摘取脾脏和胸腺，滤纸去湿，电子天平称重，以"脏器系数=器官质量/体质量"计算胸腺和脾脏指数。[0056]4、试验结果[0057]4.1、腹部回缩反射的容量阈值[0058]试验结果如表2和图1所示，与模型组比较，高剂量组和低剂量组均可显著升高腹部回缩反射的容量阈值。[0059]4.2、骆驼刺提取物对IBS-D大鼠模型在体平滑肌运动的影响[0060]试验结果如图2、图3、图4、图5和图6所示，经多道生理信号采集处理系统记录餐后Ih空肠平滑肌运动，与模型组比较，高剂量组和低剂量组均可显著降低IBS-D大鼠空肠平滑肌运动波振幅。[0061]4.3、骆驼刺提取物对IBS-D大鼠粪便含水量的影响[0062]收集每只动物24h内排便，称量粪便干、湿重，计算粪便含水率，进行组间对照。如表3和图7所示，与模型组比较，胳驼刺提取物高低剂量组均能显著降低IBS-D大鼠的粪便含水量。[0063]4.4、骆驼刺提取物对IBS-D大鼠血清电解质的影响[0064]结果见表4和图8,与模型组比较，骆驼刺提取物可显著升高IBS-D大鼠血清K+的含量(？〈0.01)，但各组间血清他+、(：1-、0&2+含量无统计学差异(？>0.05)。[0065]4.5、骆驼刺提取物对IBS-D大鼠红细胞压积(HCT)的影响[0066]结果见表5和图9,与正常组比较，SD模型大鼠的红细胞压积显著升高；与模型组比较，骆驼刺提取物可显著降低IBS-D大鼠红细胞压积(p〈0.05)。[0067]4.6、骆驼刺提取物对IBS-D大鼠模型脏器系数的影响[0068]试验结果如表6和图10所示，与模型组比较，正丁醇高低剂量组均可显著提高IBS-D大鼠的胸腺系数，但脾脏系数未见明显差异。[0069]结论[0070]由上述实验可知，骆驼刺提取物具有显著升高IBS-D大鼠腹部回缩反射的容量阈值、降低空肠平滑肌运动波振幅、降低粪便含水量、升高血清K+含量、降低红细胞压积等作用，且各剂量组与阳性对照组相比效果相当，说明根据本发明实施例得到的骆驼刺提取物在抑制内脏超敏性方面或改善由应激或肠易激引起的排便异常方面具有良好的效果，确定骆驼刺提取物具有抗IBS-D的作用。[0071]IBS根据排便情况可分为便秘型肠易激综合征（constipation-predominantofirritablebowelsyndrome,IBS-C)、腹泻型肠易激综合征（diarrhea-predominantofirritablebowelsyndrome，IBS-D)和腹泻便秘交替型肠易激综合征（alternating-predominantofirritablebowelsyndrome,IBS-A)。临床上以IBS-D最为多见。IBS的共同特征是胃肠运动功能改变和内脏器官的敏感性异常。腹胀、便秘和腹泻是IBS最常见的临床症状，胃肠道动力是研究重点。有报道提示IBS患者食管括约肌的张力低于正常，伴有收缩异常，存在胃排空延迟、小肠运动异常的现象，而精神因素，特别是一些负面的因素如焦虑、抑郁、暴躁等都可以引起迷走神经兴奋性增高，导致IBS患者肠道运动增强，引起一些胃肠道的腺体分泌增加，导致IBS患者腹痛、腹泻、便秘等症状的加剧。多年来，普遍形成共识的是认为肠道动力异常是IBS症状产生的主要病理生理基础，IBS患者的肠道动力异常主要具有两个特征:第一，广泛性，即可涉及到全胃肠道;第二，高反应性，即对各种生理和非生理刺激的动力反应过强，呈反复发作过程。本研究发现骆驼刺提取物具有升高腹部回缩反射的容量阈值、降低空肠平滑肌运动波振幅、降低粪便含水量、升高血清K+含量、降低红细胞压积等作用，在抑制内脏超敏性方面或改善由应激或肠易激引起的排便异常方面具有良好的效果，将对IBS-C、IBS-D以及IBS-A均具有良好的治疗效果，并且，采用纯中药制方，副作用小。[0072]以上技术特征构成了本发明的实施例，其具有较强的适应性和实施效果，可根据实际需要增减非必要的技术特征，来满足不同情况的需求。[0073]表1[0086]注:与空白组比较:#?〈0.05，##口〈0.01;与模型组比较:吨〈0.05，*邙〈0.01[0087]表6[0089]注:与空白组比较:#?〈0.05，##口〈0.01;与模型组比较:吨〈0.05，*邙〈0.01。【主权项】1.一种骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用。2.根据权利要求1所述的骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用，其特征在于骆驼刺提取物按下述制备方法得到:第一步，取干燥的骆驼刺地上部分，粉碎后得到骆驼刺粉，用60%至80%的乙醇对骆驼刺粉回流提取2次至3次，每次乙醇回流提取的时间为1小时至3小时，每次乙醇回流提取时乙醇的用量为骆驼刺粉与乙醇的体积比为1:8至1:12，合并每次乙醇回流提取的提取液得到乙醇混提液;第二步，将乙醇混体液浓缩至溶液中含生药量为〇.5g/ml至1.5g/ml的浓缩液;第三步，用石油醚萃取浓缩液2次至5次，每次石油醚萃取时所取用石油醚的体积为待萃液体积的1倍至3倍，最后一次石油醚萃取完成后，静置到出现明显分层，弃去石油醚层留下水层;第四步，对第三步中得到的水层用乙酸乙酯萃取2次至5次，每次乙酸乙酯萃取时所取用乙酸乙酯的体积为待萃液体积的1倍至3倍，最后一次乙酸乙酯萃取完成后，静置到出现明显分层，弃去乙酸乙酯层留下水层;第五步，对第四步中得到的水层用正丁醇萃取2次至5次，每次正丁醇萃取时所取用正丁醇的体积为待萃液体积的1倍至3倍，将每次正丁醇萃取完成后得到的正丁醇层混合后得到正丁醇混萃液;第六步，对正丁醇混萃液进行干燥至物料中的含水量不大于10%即得到骆驼刺提取物。3.根据权利要求2所述的骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用，其特征在于第三步中静置时间为2小时至6小时，第四步中静置时间为2小时至6小时。4.根据权利要求2或3所述的骆驼刺提取物作为制备治疗肠易激综合征药物的应用，其特征在于第六步的干燥温度为50°C至70°C。【文档编号】A61P1/00GK105943592SQ201610411321【公开日】2016年9月21日【申请日】2016年6月13日【发明人】魏鸿雁,马晓玲,夏提古丽·阿不利孜,徐晓琴【申请人】新疆维吾尔自治区中药民族药研究所