一种牵牛子多糖的制备方法及其抗肿瘤应用
【专利摘要】本发明公开了一种牵牛子多糖的制备方法及其抗肿瘤应用。制备方法包括以下步骤：取牵牛子于60℃烘干，粉碎，过60目筛；将原料置于超声?微波装置中，加入原料8~10倍的40~50%的乙醇溶液，设置超声500W常开、微波功率为600~800W，提取2~3h，离心，取上清液，减压浓缩，乙醇沉淀，过滤，收集沉淀，洗涤干燥，即得。经药效学评价，高浓度的牵牛子多糖有较好的抑制肿瘤的作用。将牵牛子多糖与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。
【专利说明】
一种牵牛子多糖的制备方法及其抗肿瘤应用
技术领域
[0001] 本发明属于医药领域，具体涉及一种牵牛子多糖的制备方法及其抗肿瘤应用。
【背景技术】
[0002] 癌症已成为严重危害人类健康且难以治愈的疾病。目前治疗癌症的方法是以化学 治疗为主，但是化学药物存在毒副作用大及肿瘤细胞多药物所产生的耐受等问题。多糖又 称多聚糖，是自然界含量最丰富的生物聚合物，具有高效、低毒等优点，是广泛存在于有机 体内的一种重要的信息分子受体，参与分子识别、细胞粘附以及集体防御等过程的调节、抗 肿瘤、抗病毒和降血糖等。
[0003] 裂叶牵牛是被子植物门旋花科牵牛属一年生缠绕草本植物。国内外学者对于其种 子牵牛子的化学成分研究较多，主要成分是糖类、大环内酯、蒽醌和酚类等。现用的抗肿瘤 药物毒性是临床很棘手的问题，基本上属于对癌细胞的直接杀伤作用，干扰癌细胞的DNA合 成，中断DNA到RNA的转录或影响癌细胞的有丝分裂。然而，药物在破坏肿瘤细胞的同时，无 选择的对机体其他增殖旺盛如骨髓细胞、淋巴细胞、胃黏膜细胞、生殖细胞等也同时进行了 攻击。在临床上表现为不同程度的毒性反应和并发症。因此，从天然植物中发现新的、高效、 低毒抗肿瘤药物是目前研究的热点。在我国有着丰富的裂叶牵牛资源，牵牛子多糖可成为 治疗肿瘤的辅助药物，所以开发与牵牛子多糖相关的抗肿瘤药物和功能性食品具有良好的 产业前景。
[0004] 通过文献检索，在有关牵牛子多糖的报道中，未见到抗癌活性的研究。
【发明内容】
[0005] 为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗肿瘤疾病，本发明提供一种牵牛子多 糖的制备方法及其抗肿瘤应用。
[0006] 为了实现上述目的，本发明的技术方案如下： a. 取牵牛子于60°C烘干，粉碎，过60目筛； b. 将原料置于超声-微波装置中，加入原料8~10倍的40~50%的乙醇溶液，设置超声 500W常开、微波功率为600~800W，提取2~3h，离心，取上清液，减压浓缩，得浓缩液； c. 向所得浓缩液中加入3倍体积量的95%°C的乙醇，0~5 °C静置24h，收集沉淀，洗涤干 燥，即得。
[0007] 牵牛子多糖在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0008] 通过体外肿瘤细胞体外抑制试验，观察牵牛子多糖的抗肿瘤作用，结果表明牵牛 子多糖对腹水型S180、肝癌及黑色素瘤B16均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其 毒副作用小。
[0009] 本发明的有益效果通过以下实验得到了验证： 实验方法： 1、受试提取物:牵牛子多糖 2、细胞株:腹水瘤细胞株S180、肝癌细胞株K562及HL-60。
[0010] 3、给药剂量和方法 牵牛子多糖组:l〇mg/kg/天，灌胃给药，隔一天一次，共五天。
[00?1 ]阴性对照组：10mg/kg/天，生理盐水肌注给药，隔一天一次，共五天。
[00?2]阳性对照组:30mg/kg/天，5-氟尿啼啶肌注给药，隔一天一次，共五天。
[0013] 4、种植瘤模型的建立与给药 (1)皮下种植:分别将上述细胞培养至90%融合，收集细胞，取2 X 10 6细胞悬液，注射至 小鼠肋下皮下组织，于术后15天取材，称量瘤重。另取同样模型，观察30天，计算药物对模型 动物存活率的影响。
[0014] (2)脾内种植瘤肝转移模型：取2X10 6细胞悬液注射至小鼠脾包膜内，于术后15天 取脾和肝脏，测量瘤重和肝转移数。
[0015] (3)给药方式:种植瘤细胞同时给药。
[0016] 5、结果 结果如表1、表2和表3显示，牵牛子多糖用药组均有不同程度的抑制肿瘤生长和转移的 作用，可延长实验小鼠的生存期。
[0017]表1牵牛子多糖对种植瘤的抑制作用(n=20，ac 土 S)
表2牵牛子多糖对肿瘤肝转移发生率的影响(n=20，％)
表3牵牛子多糖对实验小鼠生存率的影响(n=20，％)
由表1、表2和表3可以看出，牵牛子多糖组用药抑制肿瘤生长、转移的效果与阳性对照 组基本相当，可有效延缓实验小鼠的生存寿命，其效果明显优于对照组。
[0018] 本发明用于制备抗肿瘤药物时，将牵牛子多糖与医学上可接受的辅料一起制成抗 肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。
[0019] 下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0020] 实施例1 牵牛子多糖的制备 取牵牛子于60°c烘干，粉碎，过60目筛;将原料置于超声-微波装置中，加入原料10倍的 50%的乙醇溶液，设置超声500W常开、微波功率为600W，提取2h，离心，取上清液，减压浓缩， 得浓缩液；向所得浓缩液中加入3倍体积量的95%°C的乙醇，5°C静置24h，收集沉淀，洗涤干 燥，即得，经UV检测，其含量为85.8%。
[0021] 实施例2 片剂:牵牛子多糖40g，淀粉140g，鹅去氧胆酸盐20g，制粒，压片制成1000片。服用方法： 成人一次1片，一日2次。
[0022] 实施例3 胶囊:牵牛子多糖40g，淀粉140g，壳聚糖20g，混勾，制成1000粒。服用方法:成人一次1 粒，一日2次。
【主权项】
1. 一种牵牛子多糖的制备方法，其特征在于包括以下步骤： a. 取牵牛子于60°C烘干，粉碎，过60目筛； b. 将原料置于超声-微波装置中，加入原料8~10倍的40~50%的乙醇溶液，设置超声 500W常开、微波功率为600~800W，提取2~3h，离心，取上清液，减压浓缩，得浓缩液； c .向所得浓缩液中加入3倍体积量的95%°C的乙醇，0~5 °C静置24h，收集沉淀，洗涤干 燥，即得。2. 根据权利要求1所述方法制备的牵牛子多糖在制备抗肿瘤药物中的应用。
【文档编号】A61K36/39GK106038663SQ201610306677
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年5月11日
【发明人】杨成东
【申请人】南京泽朗医药科技有限公司