一种毛果巴豆叶挥发油的制备方法及其应用
【专利摘要】本发明公开了一种毛果巴豆叶挥发油的制备方法及其应用。制备方法包括以下步骤：（1）取毛果巴豆叶，粉碎；（2）超临界CO2萃取；（3）溶剂萃取，即得毛果巴豆叶挥发油。采用本发明制备方法，工艺操作简便、得率高，污染小，提高了经济效益。经药效学评价，毛果巴豆叶挥发油在抗肿瘤方面有很好的效果，尤其是对人白细胞病(U937)和（P388）效果更佳，可用于制备抗白血病药物。
【专利说明】
一种毛果巴豆叶挥发油的制备方法及其应用
技术领域
[0001] 本发明涉及一种毛果巴豆叶挥发油的制备方法及其应用。
【背景技术】
[0002] 巴豆，又称猛子仁、刚子、巴菽、双眼龙等，为大戟科植物巴豆的干燥成熟果实。全 世界有800余种，我国有21种。生巴豆味辛、性热;有大毒、归胃、大肠经。内服泻下寒积，逐水 消肿、祛痰利咽，外用蚀疮，可用于恶疮疥癣。
[0003] 该属植物中的多数品种能入药，具有广泛的生物活性，如抗癌、抗炎镇痛、血管松 弛、昆虫拒食、抗胃溃疡、止血等。近来有研究发现挥发油有促进伤口愈合的作用，挥发油有 影响气道平滑肌的作用，枝叶的挥发油有调节抗生素的作用。
[0004] 白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病。克隆性白血病细胞因为增殖失控、分 化障碍、凋亡受阻等机制在骨髓和其他造血组织中大量增殖累积，并浸润其他组织和器官， 同时正常造血受抑制。临床可见不同程度的贫血、出血、感染发热以及肝、脾、淋巴结肿大和 骨骼疼痛。据报道，我国各地区白血病的发病率在各种肿瘤中占第六位。
【发明内容】
[0005] 为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗癌症，提供一种毛果巴豆叶挥发油的 制备方法及其在抗白血病药物中的应用。
[0006] 为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案： 将毛果巴豆叶经初步筛选去杂后，阴干，粉碎，过40目筛;称取一定量的毛果巴豆叶粉 末采用超临界C02萃取装置萃取挥发油，设置萃取压力为20~30MPa，萃取温度为45~55°C，流 速为25~30kg/h，收集毛果巴豆叶粗提油;将得到的粗提油再经有机溶剂萃取、无水硫酸钠 干燥、减压浓缩等步骤，即得毛果巴豆叶挥发油。
[0007] 所述的有机溶剂为石油醚或乙醚中的任意一种。
[0008] 本发明所述方法制备的毛果巴豆叶挥发油在制备抗白血病药物中的应用。
[0009] 采用本方法制备毛果巴豆叶挥发油，工艺简便易操作，制备量大，产品得率高，且 污染小。
[0010] 下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0011] 实施例1: 将毛果巴豆叶经初步筛选去杂后，阴干，粉碎，过40目筛;称取一定量的毛果巴豆叶粉 末采用超临界C02萃取装置萃取挥发油，设置萃取压力为20MPa，萃取温度为45°C，流速为 25kg/h，收集毛果巴豆叶粗提油;将得到的粗提油再经石油醚萃取、无水硫酸钠干燥、减压 浓缩等步骤，即得淡黄色的毛果巴豆叶挥发油，收率为3.13%。
[0012] 实施例2: 将毛果巴豆叶经初步筛选去杂后，阴干，粉碎，过40目筛;称取一定量的毛果巴豆叶粉 末采用超临界C02萃取装置萃取挥发油，设置萃取压力为25MPa，萃取温度为50°C，流速为 25kg/h，收集毛果巴豆叶粗提油;将得到的粗提油再经石油醚萃取、无水硫酸钠干燥、减压 浓缩等步骤，即得黄色的毛果巴豆叶挥发油，收率为2.94%。
[0013] 实施例3: 将毛果巴豆叶经初步筛选去杂后，阴干，粉碎，过40目筛;称取一定量的毛果巴豆叶粉 末采用超临界C02萃取装置萃取挥发油，设置萃取压力为30MPa，萃取温度为55°C，流速为 30kg/h，收集毛果巴豆叶粗提油；将得到的粗提油再经乙醚萃取、无水硫酸钠干燥、减压浓 缩等步骤，即得黄色的毛果巴豆叶挥发油，收率为3.21%。
[0014] 实施例4: 毛果巴豆叶挥发油在抗白血病药物中的应用 1、材料 细胞株:U937和P338细胞株，由中国科学院上海药物研究所提供。
[0015] 2、方法 在含有10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中，将被试细胞调成密度为2 X 104细胞/ml。将 上述细胞株悬液接种于96孔培养板，每孔50μ 1，置于饱和湿度、37 °C和5%⑶2培养箱中培养 24小时。分别加入溶剂对照0.1%二甲基亚砜、阳性对照顺铂(DDP)以及不同浓度单体化合物 的二甲亚砜溶液各50μ1，每组设3个复孔。培养72小时，于培养结束前4小时，各培养孔加入 5mg/ml四唑翁盐(ΜΤΤ) 10μ 1，置于饱和湿度、37 °C和5%C02培养箱中培养4小时，每孔中加入 150μ 1二甲亚砜，振荡溶解生成MTT晶体甲臜，用酶标仪测570nm0. D值，细胞存活率由样品 〇. D值对于对照品0. D值的比值计算。其中，毛果巴豆叶挥发油对U937和P338细胞的半数抑 制浓度(IC5Q)由剂量效应曲线得到。
[0016] 3、结果 实验结果如下表： 表1毛果巴豆叶挥发油对U937细胞的抑制作用(n=10，g土S)
表2毛果巴豆叶挥发油对P338细胞的抑制作用(η=10，； 土S)
由表1和表2可以看出，本发明所制备的毛果巴豆叶挥发油对U937和P338细胞的生长有 明显的抑制作用，其对U937和P338细胞的生长抑制活性强于阳性对照顺铂(DDP)，可抑制肿 瘤细胞在体外培养基中的繁殖增长，在制备抗白血病药物中有良好的应用前景。
【主权项】
1. 一种毛果巴豆叶挥发油的制备方法，其特征在于包括以下步骤:将毛果巴豆叶经初 步筛选去杂后，阴干，粉碎，过40目筛;称取一定量的毛果巴豆叶粉末采用超临界C0 2萃取装 置萃取挥发油，设置萃取压力为20~30MPa，萃取温度为45~55°C，流速为25~30kg/h，收集毛 果巴豆叶粗提油;将得到的粗提油再经有机溶剂萃取、无水硫酸钠干燥、减压浓缩等步骤， 即得毛果巴豆叶挥发油。2. 根据权利要求1所述的一种毛果巴豆叶挥发油的制备方法，其特征在于，所述的有机 溶剂为石油醚或乙醚中的任意一种。3. 根据权利要求1~2所述方法制备的毛果巴豆叶挥发油在制备抗白血病药物中的应 用。
【文档编号】A61P35/02GK106038671SQ201610302998
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年5月10日
【发明人】杨成东
【申请人】南京泽朗医药科技有限公司