专利名称：包含蛋白酶的储存稳定的液体洗涤剂或清洗剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及液体洗涤剂和清洗剂的领域。本发明特别地涉及包含酶的液体洗涤剂和清洗剂，其包含与膦酸盐/酯组合的特定蛋白酶；并且还特别地涉及这类洗涤剂和清洗剂的用途和使用方法。本发明还涉及特定的蛋白酶在包含膦酸盐/酯的液体洗涤剂或清洗剂中的用途。
背景技术：
迄今为止，对于洗涤剂和清洗剂优选使用枯草杆菌蛋白酶类型的蛋白酶。现有技术中已知用于洗涤剂或清洗剂的蛋白酶最初来自微生物，例如芽孢杆菌属(Bacillus)、链霉菌属(Str印tomyces)、腐质霉属(Humicola)或假单胞菌属(I^seudomonas)；和/或利用本身已知的生物技术方法通过合适的微生物制备，例如通过芽孢杆菌属或丝状真菌的转基因表达宿主。膦酸盐/酯特别存在于现有技术的液体洗涤剂中，但是也存在于清洗剂中。例如它们用作配位剂用于防止沉淀，或者用作漂白剂稳定剂。当作为配位剂存在时，它们用于例如软化水。它们能够包围溶液中诸如Ca2+的阳离子，并且因而改变该阳离子的化学行为。 在钙的情况下，形成水硬度的特性消失。其他阳离子也可以被配合，并且因而保护免于进行化学反应。它们还可以用作缓蚀剂或过氧化物稳定剂，特别是在漂白剂中。国际专利申请WO 95/23221公开来自迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)DSM 5483 的枯草杆菌蛋白酶类型的蛋白酶或蛋白酶变体，其适合用于洗涤剂或清洗剂。这些蛋白酶还包括这样的蛋白酶，其可以包含氨基酸取代R99E、A、S或G。另外，据公开洗涤剂可以包含膦酸盐/酯，特别是聚膦酸盐/酯。洗涤剂可以是固体或液体。然而，该文件并未公开必须包含与这样的蛋白酶组合的膦酸盐/酯的任何具体洗涤剂和/或清洗剂。包含蛋白酶的现有技术液体洗涤剂和清洗剂的一个缺点是它们通常未表现出令人满意的蛋白水解活性，特别是在低温下，例如10°c -50°c，特别是10°C -40°c或 20°C-40°C，而且洗涤剂或清洗剂因此未表现出最佳清洗性能。包含蛋白酶的现有技术液体洗涤剂和清洗剂的另一缺点是它们储存稳定性不足，并因此在很短的时间后丧失相当程度的蛋白水解活性。
发明内容
本发明的目的是克服上述缺点，并提供表现出有利蛋白水解活性的液体洗涤剂或清洗剂，特别是在如上文所述的温度下，此外还表现出改善的储存稳定性。因此，本发明提供液体洗涤剂或清洗剂，其包含(al)蛋白酶，其包含与SEQ ID no. 1所示的氨基酸序列至少80%相同的氨基酸序列，并且在根据SEQ ID no. 1编号的位置99处包含氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)；或者(a2)蛋白酶，其包含与SEQ ID no. 1所示的氨基酸序列至少80%相同的氨基酸序列，并且在根据SEQ ID no. 1编号的位置99处包含氨基酸天冬酰胺(N)或谷氨酰胺(Q)； 或者(a3)蛋白酶，其包含与SEQ ID no. 1所示的氨基酸序列至少80%相同的氨基酸序列，并且在根据SEQ ID no. 1编号的位置99处包含氨基酸丙氨酸(A)或甘氨酸(G)或丝氨酸⑶；以及(b)膦酸盐/酯。令人惊讶地注意到，包含这样的蛋白酶与膦酸盐/酯的组合的液体洗涤剂或清洗剂表现出关于蛋白酶敏感的污渍的有利清洗性能，另外在储存中有利地稳定。本发明的洗涤剂或清洗剂的优选实施方案在10°c -60°c的温度下，还优选在低温下例如10°C -50 10°C -40°C或20°C -40°C下，表现出关于至少一种蛋白酶敏感类型的污渍的有利清洗性能。 因此本发明的洗涤剂或清洗剂使得能够改善去除纺织品和/或坚硬表面(例如盘子)上的至少一种、优选多种蛋白酶敏感类型的污渍。关于上文所提到的国际专利申请1095/^23221, 本发明因此涉及特别有利的选择，这使得实现高性能、储存稳定的液体洗涤剂或液体清洗剂。为了本发明的目的，清洗性能理解为表示关于对蛋白酶降解敏感的一种或多种类型的污渍的减轻性能，特别是洗衣污渍或陶器污渍。这样的洗衣污渍的实例为棉布上的血-乳液/墨汁、棉布上的全蛋/色素、棉布上的巧克力-乳汁/墨汁、聚酯/棉布上的花生油-色素/墨汁、棉布上的草或棉布上的可可，特别如下文进一步所述。这类陶器污渍的实例为牛奶、肉末或蛋黄。为了本发明的目的，包含蛋白酶的洗涤剂或清洗剂或者由这样的洗涤剂或清洗剂形成的洗涤液或清洗液以及蛋白酶本身均表现出各自的清洗性能。因此水解酶的清洗性能有助于所述洗涤剂或清洗剂或者由所述洗涤剂或清洗剂形成的洗涤液或清洗液的清洗性能。清洗性能优选如下文进一步所述来测定。洗涤液或清洗液理解为包含洗涤剂或清洗剂的工作溶液，该溶液作用于纺织品或织物(洗涤液)或坚硬表面(清洗液)，并且因此与纺织品或织物或坚硬表面上存在的污渍接触。通常，当洗涤或清洗过程开始并且在例如洗衣机、洗碗机或另一合适的容器中用水稀释洗涤剂或清洗剂时产生洗涤液或清洗液。本发明的洗涤剂或清洗剂中所含的洗涤剂或清洗剂包含与SEQ ID no. 1所示的氨基酸序列至少80%相同的氨基酸序列，并且其在根据SEQ ID no. 1编号的位置99处包含氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)或者氨基酸天冬酰胺(N)或谷氨酰胺(Q)或者氨基酸丙氨酸(A)或甘氨酸(G)或丝氨酸( 。更优选地，所述氨基酸序列与SEQ ID no. 1所示的氨基酸序列至少 81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、 94%、95%、96%、97%、98%相同，并且特别优选99%相同。SEQ ID no. 1是来自迟缓芽孢杆菌DSM 5483的成熟碱性蛋白酶的序列，其在国际专利申请W092/21760中公开，并且该公开援引加入本文。根据本发明，发现通过将这样的蛋白酶加入包含膦酸盐/酯的液体洗涤剂或清洗剂，获得储存特别稳定的液体洗涤剂，特别是关于其储存之后剩余的蛋白水解活性，特别是在1-5周、1-4周、1. 5-3周的储存期之后，并且特别优选2周之后。本发明的洗涤剂或清洗剂中所包含的蛋白酶表现出蛋白水解活性，即其能够水解多肽或蛋白的肽键。因此所述蛋白酶为催化肽键水解并因此能够切割肽或蛋白的酶，特别是枯草杆菌蛋白酶。在本发明的另一实施方案中，所述洗涤剂或清洗剂的特征在于所述蛋白酶进一步包含根据SEQ ID no. 1编号的以下氨基酸中的至少一个(a)位置3处的苏氨酸(3T)，(b)位置4处的异亮氨酸GI)，(c)位置61处的丙氨酸、苏氨酸或精氨酸(61A、61T或61R)，(d)位置巧4处的天冬氨酸或谷氨酸(154D或1ME)，(e)位置188处的脯氨酸(188P)，(f)位置193处的甲硫氨酸(193M)，(g)位置199处的异亮氨酸(1991)，(h)位置211处的天冬氨酸、谷氨酸或甘氨酸Q11D、211E或211G)，⑴氨基酸(a)-(h)的组合。因此除了位置99处的所示氨基酸中的一个，所述蛋白酶包含各自位置处的上文所述氨基酸中的一个或多个。这些氨基酸可以带来进一步有利的特性和/或进一步增强的现有特性。特别地，上文所述的氨基酸在液体洗涤剂或清洗剂中或者在由这种洗涤剂或清洗剂形成的洗涤液中带来蛋白水解活性和/或所述蛋白酶稳定性的增加。通过将这样的蛋白酶加入包含膦酸盐/酯的液体洗涤剂或清洗剂，同样获得储存特别稳定的液体洗涤剂， 特别是关于其储存之后剩余的蛋白水解活性，特别是在1-5周、1-4周、1.5-3周的储存期之后，并且特别优选2周之后。本文通过将所用的蛋白酶的氨基酸序列与如SEQ ID no. 1所示的来自迟缓芽孢杆菌的蛋白酶的氨基酸序列比对来定义氨基酸位置。因为在现有技术中来自迟缓芽孢杆菌的蛋白酶构成描述蛋白酶和氨基酸变化的重要参考分子，在氨基酸位置分配中参考来自迟缓芽孢杆菌的蛋白酶的编号(SEQID no. 1)是有利的。而且编号基于成熟蛋白。如果所用的蛋白酶的氨基酸序列包含比SEQ ID no. 1的来自迟缓芽孢杆菌的蛋白酶更多数目的氨基酸残基，这种分配也特别应当使用。基于来自迟缓芽孢杆菌的蛋白酶的氨基酸序列中的所示位置，本发明所用的蛋白酶中的氨基酸位置是在比对中精确分配至这些位置的氨基酸位置。因此，除了位置99，特别有利的位置相应为在与SEQ ID no. 1的比对中分配，并因此根据SEQ ID no. 1编号中的位置3、4、61、154、188、193、199和211。以下氨基酸残基在来自迟缓芽孢杆菌的蛋白酶的野生型分子中的所示位置处S3、V4、G61、S154、A188、V193、 V199和L211。氨基酸3T、4I、61A、154D、154E、211D、211G和211E特别优选，条件是本发明所用的蛋白酶中的相应位置未天然地采用这些优选氨基酸中的一个。例如，3T和41取代通过对分子的稳定效应导致蛋白酶的储存稳定性和清洗性能的改善，并且因此导致包含蛋白酶的含膦酸盐/酯的液体洗涤剂或清洗剂的清洗性能改善。因为各自位置提供上文所述氨基酸，如果SEQ ID no. 1在各自位置包含另一氨基酸，可以产生来自SEQ ID no. 1的进一步的序列偏差。根据存在的来自SEQ ID no. 1的序列偏差的数目，因此产生SEQ ID no. 1中的本发明所用的蛋白酶可以表现的不同最大相同性值，关于所有其他氨基酸其甚至应当匹配SEQ ID no. 1。在每种单独情况下对于所建议的氨基酸的每种可能的组合应当考虑这个因素，而且还取决于蛋白酶的氨基酸序列的长度。例如，具有1、2、3、4、5、6、7、8或9个序列变化，对于长度为269个氨基酸的氨基酸序列，最大相同性量分别为 99. 63%,99. 26%,98. 88%,98. 51%,98. 14%,97. 77%,97. 40%,97. 03% 或96. 65 %，或者对于长度为275个氨基酸的氨基酸序列，分别为99. 64 %、99. 27 %、 98. 91%,98. 55%,98. 18%,97. 82%,97. 45%,97. 09%或 96. 73%。核酸或氨基酸序列的相同性是通过序列比较来确定的。这样的比较通过在核苷酸序列或氨基酸序列中互相分配相似的序列来进行。这种序列比较优选在现有技术建立的常规使用的 BLAST 算法的基础上进行(Altschul，S. F.，Gish, W.，Miller, W.，Myers, Ε. W. & Lipman,D. J. (1990)" Basic localalignment search tool. “ J. Mol. Biol. 215 :403-410, and Altschul, Stephan F. , Thomas L. Madden, Alejandro A. Schaffer, Jinghui Zhang, Hheng Zhang,WebbMiller,and David J. Lipman(1997) :" Gapped BLAST and PSI-BLAST a newgeneration of protein database search programs“ ；Nucleic Acids Res. ,25, S. 3389-340 ，并且原则上通过互相分配核酸或氨基酸序列中核苷酸或氨基酸的相似序列来进行。所考虑的位置的表格分配称为比对。现有技术中可用的另一算法为FASTA算法。利用计算机软件常规创建序列比较(比对)，特别是多个序列比较。例如经常使用 Clustal 系列(参见例如 Chenna et al. (2003) Multiple sequence alignment with the Clustal series of programs. Nucleic Acid Research 31,3497-3500)、T-Coffee (参见例如Notredame et al. (2000) :T-Coffee :A novel method for multiple sequence alignment. J. Mol. Biol. 302，205-217)或者基于这些程序或算法的程序。例如经常使用 Clustal (参见例如 Chenna et al. (2003) :Multiple sequence alignment with the Clustal series of programs. Nucleic Acid Research 31，3497-3500)、T-Coffee (参见例如Notredame et al. (2000) :T~Coffee :A novel method for multiple sequence alignment. J. Mol. Biol. 302，205-217)以及BLAST或FASTA用于数据库检索，或者基于这些程序或算法的程序。为了本发明的目的，序列比较和比对优选用计算机程序Vector NTI Suite 10.3 (Invitrogen Corporation,1600Faraday Avenue，Carlsbad，California，USA) 利用预设的缺省参数进行。这样的比较允许做出关于所比较的序列的相似性的说明。常规以百分比相同性 (即其中相同的核苷酸或氨基酸残基的比例)或互相对应的位置来说明。较广泛的术语“同源性”还包括考虑氨基酸序列中保守的氨基酸取代，因此氨基酸具有相似的化学活性，因为它们一般在蛋白内发挥相似的化学活性。因此所比较的序列的相似性还可以百分比同源性或百分比相似性来说明。可以对整个多肽或基因或者仅对单个结构域作出关于相同性和/ 或同源性的说明。因此各种核酸或氨基酸序列的同源或相同结构域通过序列中的匹配来定义。这类结构域经常表现出相同功能。它们可以很小，并且仅包含几个核苷酸或氨基酸。这类小结构域经常发挥对蛋白的总体活性必不可少的功能。因此序列匹配仅涉及单个任选的小结构域可以是有意义的。然而，如果没有另外说明，在本申请中关于相同性或同源性的说明在每种情况下涉及所示核酸或氨基酸序列的整个长度。在本发明的这个主题的另一实施方案中，如上文所述，所述洗涤剂或清洗剂的特征在于所述蛋白酶包含氨基酸序列，所述氨基酸序列与SEQ IDno. 1所示的氨基酸序列相同，并且是通过保守氨基酸单取代或多取代获得自或可获得自SEQ ID no. 1的蛋白酶。术语“保守氨基酸取代”表示一个氨基酸残基取代(交换)另一个氨基酸残基，这种取代不导致取代氨基酸的位置中的极性或电荷变化，例如非极性氨基酸残基取代另一非极性氨基酸残基。为了本发明的目的，保守氨基酸取代包括例如G = A = S、I=V = L = M、D = E、N =Q、K = R、Y = F，S = Τ、G = A = I= V = L = M = Y = F = W = P = S = Τ。在本发明的另一实施方案中，本发明的洗涤剂或清洗剂的进一步特征在于其清洗性能至少对应于包含蛋白酶的洗涤剂或清洗剂的清洗性能，所述蛋白酶包含对应于SEQ ID no. 2 或 SEQ ID no. 3 或 SEQ ID no. 4 或 SEQID no. 5 或 SEQ ID no. 6 或 SEQ ID no. 7 或 SEQ ID no. 8所示氨基酸序列的氨基酸序列，清洗性能在包含4. 0-8. 0克/升洗涤液的添加率的洗涤剂和蛋白酶的洗涤系统中测定，待比较的蛋白酶在相同活性下使用，并且相对于一种或多种污渍类型棉布上的血-乳液/墨汁、棉布上的全蛋/色素(全蛋/煤烟)、聚酯/棉布上的花生油-色素/墨汁和棉布上的草测定清洗性能，特别是相对于以下污渍类型中的一种或多种-棉布上的血-乳液/墨汁可获得自CFT(CenterFor Testmaterials) B. V. Vlaardingen, Netherlands 的产品编号 C-05-棉布上的全蛋/色素(全蛋/煤烟)可获得自wfkTestgewebe GmbH ； Briiggen-Bracht,Germany 的产品编号 10N，或者可获得自 CFT (Centre For Testmaterials) B. V. Vlaardingen, Netherlands 的产品 C-S-37-聚酯/棉布上的花生油-色素/墨汁可获得自CFT(CenterFor Testmaterials)B. V. Vlaardingen, Netherlands ^jfm^^ PC-10-棉布上的草可获得自 Eidgenossische Material-und Prufanstalt (EMPA) Testmaterialien AG, St. Gallen, Switzerland 的产品编号 164,通过测量洗涤的纺织品的白度，洗涤过程在20°C的温度下进行至少30分钟，任选 60分钟，并且水表现出15. 5-16. 5° dH(德国硬度)的硬度。用于洗涤系统的洗涤剂为液体洗涤剂，其优选具有表1所示的组成(所有值均以重量百分比表示)表1
权利要求
1.一种液体洗涤剂或清洗剂，其包含(al)蛋白酶，其包含与SEQ ID no. 1所示的氨基酸序列至少80%相同的氨基酸序列， 并且在根据SEQ ID no. 1编号的位置99处包含氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)；或者(a2)蛋白酶，其包含与SEQ ID no. 1所示的氨基酸序列至少80%相同的氨基酸序列， 并且在根据SEQ ID no. 1编号的位置99处包含氨基酸天冬酰胺(N)或谷氨酰胺(Q)；或者 (a3)蛋白酶，其包含与SEQ ID no. 1所示的氨基酸序列至少80%相同的氨基酸序列， 并且在根据SEQ ID no. 1编号的位置99处包含氨基酸丙氨酸(A)或甘氨酸(G)或丝氨酸 ⑶；以及(b)膦酸盐/酯。
2.如权利要求1所述的洗涤剂或清洗剂，其中，所述蛋白酶进一步包含根据SEQID no. 1编号的以下氨基酸中的至少一个(a)位置3处的苏氨酸(3T)，(b)位置4处的异亮氨酸(41)，(c)位置61处的丙氨酸、苏氨酸或精氨酸(61A、61T或61R)，(d)位置巧4处的天冬氨酸或谷氨酸(154D或1ME)，(e)位置188处的脯氨酸(188P)，(f)位置193处的甲硫氨酸(193M)，(g)位置199处的异亮氨酸(1991)，(h)位置211处的天冬氨酸、谷氨酸或甘氨酸Q11D、211E或211G)， ⑴氨基酸(a)-(h)的组合。
3.一种液体洗涤剂或清洗剂，其包含(b)蛋白酶，其选自a.蛋白酶，其包含SEQ ID no. 2 或 SEQ ID no. 3 或 SEQ ID no. 4 或 SEQ ID no. 5 或 SEQ ID no. 6 或 SEQ ID no. 7 或 SEQ ID no. 8 的氨基酸序列；b.蛋白酶，相对于SEQ ID no. 2 或 SEQ ID no. 3 或 SEQ ID no. 4 或 SEQ ID no. 5 或 SEQ ID no. 6或SEQ ID no. 7或SEQ ID no. 8，其包含在至少一个位置处修饰的氨基酸序列，根据SEQ ID no. 1编号的所述修饰选自i.位置3处的苏氨酸(3T)， .位置4处的异亮氨酸01)，iii.位置61处的丙氨酸、苏氨酸或精氨酸(61A、61T或61R)，iv.位置巧4处的天冬氨酸或谷氨酸(154D或1ME)，v.位置188处的脯氨酸(188P)，vi.位置193处的甲硫氨酸(193M)，vii.位置199处的异亮氨酸(1991)，viii.位置211处的天冬氨酸、谷氨酸或甘氨酸Q11D、211E或211G)，ix.氨基酸(i)-(viii)的组合；(c)膦酸盐/酯。
4.如权利要求1-3中任一项所述的洗涤剂或清洗剂，其中所述膦酸盐/酯选自1-羟基乙烷-1，1- 二膦酸(HEDP)、氨基三(亚甲基膦酸)(ATMP)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTPMP或DETPMP或DTPNT)、乙二胺四(亚甲基膦酸)(EDTMP)、2-膦酰基丁烷-1，2，4-三羧酸(PBS-AM)及上述物质的组合。
5.如权利要求1-4中任一项所述的洗涤剂或清洗剂，其中所述膦酸盐/酯存在的量为 0. 01-4wt. %，和/或相对于活性蛋白，所述蛋白酶存在的量为lX10_8-5wt. %。
6.如权利要求1-5中任一项所述的洗涤剂或清洗剂，其进一步包含选自以下物质的组分i.阴离子和/或聚阴离子物质，和/或 .阳离子和/或聚阳离子物质，和/或 iii.包含羟基和/或多羟基的物质。
7.如权利要求1-6中任一项所述的洗涤剂或清洗剂，其包含至少一种其他成分，特别是选自表面活性剂、助洗剂、过氧化合物、漂白活化剂、醇、酸、泛灰抑制剂、荧光增白剂、抑泡剂、水溶性盐、增稠剂、挥发性碱和/或碱、亲水剂及上述物质的组合的成分。
8.如权利要求1-7中任一项所述的洗涤剂或清洗剂，其包含至少一种其他酶，特别是蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、半纤维素酶、甘露聚糖酶、鞣酸酶、木聚糖酶、黄原胶酶、β -葡糖苷酶、卡拉胶酶、过氧化氢酶、氧化酶、氧化还原酶或脂肪酶，优选上述酶的混合物。
9.权利要求1-8中任一项所述的洗涤剂或清洗剂用于从纺织品或坚硬表面去除蛋白酶敏感性污渍的用途。
10.一种用于清洗纺织品或坚硬表面的方法，其中在至少一个方法步骤中使用权利要求1-8中任一项所述的洗涤剂或清洗剂。
11.如权利要求10所述的方法，其中所述膦酸盐/酯在所述洗涤液中存在的浓度为 0. 00075-0. 05wt. %，和/或所述蛋白酶在所述洗涤液中存在的浓度为0. 0005-0. 03wt. %0
12.如权利要求10或11所述的方法，其在10°C_60°C的温度下进行。
13.蛋白酶在还包含膦酸盐/酯的液体洗涤剂或清洗剂中提供蛋白水解活性的用途， (al)所述蛋白酶包含与SEQ ID no. 1所示的氨基酸序列至少80%相同的氨基酸序列，并且在根据SEQ ID no. 1编号的位置99处包含氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)；或者(a2)所述蛋白酶包含与SEQ ID no. 1所示的氨基酸序列至少80%相同的氨基酸序列， 并且在根据SEQ ID no. 1编号的位置99处包含氨基酸天冬酰胺(N)或谷氨酰胺(Q)；或者 (a3)所述蛋白酶包含与SEQ ID no. 1所示的氨基酸序列至少80%相同的氨基酸序列，并且在根据SEQ ID no. 1编号的位置99处包含氨基酸丙氨酸(A)或甘氨酸(G)或丝氨酸 ⑶。
14.如权利要求13所述的用途，其中所述蛋白酶进一步包含根据SEQIDno. 1编号的以下氨基酸中的至少一个(j)位置3处的苏氨酸(3T)， (k)位置4处的异亮氨酸GI)，(1)位置61处的丙氨酸、苏氨酸或精氨酸(61A、61T或61R)， (m)位置巧4处的天冬氨酸或谷氨酸(154D或1ME)， (η)位置188处的脯氨酸(188Ρ)， (ο)位置193处的甲硫氨酸(193Μ)， (P)位置199处的异亮氨酸(1991)，(q)位置211处的天冬氨酸、谷氨酸或甘氨酸Q11D、211E或211G)， (r)氨基酸(a)-(h)的组合。
15.选自以下蛋白酶的蛋白酶在还包含膦酸盐/酯的液体洗涤剂或清洗剂中提供蛋白水解活性的用途，a.蛋白酶，其包含SEQ ID no. 2 或 SEQ ID no. 3 或 SEQ ID no. 4 或 SEQID no. 5 或 SEQ ID no. 6 或 SEQ ID no. 7 或 SEQ ID no. 8 的氨基酸序列；b.蛋白酶，相对于SEQ ID no. 2 或 SEQ ID no. 3 或 SEQ ID no. 4 或 SEQID no. 5 或 SEQ ID no. 6或SEQ ID no. 7或SEQ ID no. 8，其包含在至少一个位置处修饰的氨基酸序列，根据SEQ ID no. 1编号的所述修饰选自i.位置3处的苏氨酸(3T)， .位置4处的异亮氨酸01)，iii.位置61处的丙氨酸、苏氨酸或精氨酸(61A、61T或61R)，iv.位置巧4处的天冬氨酸或谷氨酸(154D或1ME)，v.位置188处的脯氨酸(188P)，vi.位置193处的甲硫氨酸(193M)，vii.位置199处的异亮氨酸(1991)，viii.位置211处的天冬氨酸、谷氨酸或甘氨酸Q11D、211E或211G)，ix.氨基酸(i)-(viii)的组合。
全文摘要
一种包含膦酸盐/酯的液体洗涤剂或清洗剂，期望其表现出有利的蛋白水解活性，并且还表现出改进的储存稳定性。通过使用蛋白酶实现上述目标，所述蛋白酶包含与SEQ ID no.1所示的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，并且在根据SEQ ID no.1编号的位置99处包含氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)、或者氨基酸天冬酰胺(N)或谷氨酰胺(Q)、或者氨基酸丙氨酸(A)或甘氨酸(G)或丝氨酸(S)。
文档编号C11D3/36GK102498207SQ201080040795
公开日2012年6月13日 申请日期2010年9月15日 优先权日2009年9月16日
发明者A·施皮茨, D·森多-米勒, I·普吕泽尔, K·本达, K-H·毛雷尔, M-S·希德尔, P·西格特, S·威兰, S·米勒, T·奥康奈尔, T·巴斯蒂格凯特, T·艾廷 申请人:汉高股份有限及两合公司