专利名称：一种兔颞下颌关节囊内黏连动物模型及其建立方法
一种兔颞下颌关节囊内黏连动物模型及其建立方法
技术领域：
本发明涉及一种动物模型，具体地说，是关于一种兔颞下颌关节囊内黏连动物模
型及其建立方法。背景技术：
最员下台页关节(temporomandibular joint,TMJ)结构紊舌L (internalderangement， ID)是常见病、多发病，据统计在人群中发病率高达28 % 88 % ，临床表现主要为疼痛、张 口受限、关节杂音及下颌功能障碍等，严重影响患者的咀嚼、语言等功能，甚至对患者的心 理造成极大的影响。许多学者通过建立TMJ ID动物模型，探讨TMJ ID后的组织变化，而对 高达55% 93%的最常见的伴发病症一囊内黏连(intra-articular adhesion, IA)则关 注较少。 自1990年Tallents等报道建立TMJADD动物模型的方法以来，先后又有部分学 者提出了不同的建立TMJADD动物模型的方法，概括起来总共有三种方法。方法一 是以 Tallents等、Ali等和Mills等为代表的打开关节囊、切断关节盘部分附着的方法，该方 法对关节损伤较大，无法真正模拟人类关节盘移位的自然过程；方法二 是以Kubota等采 用前牵引的方法，该方法虽未切断关节盘的附着，但也打开了关节囊、并且牵引线位于双板 区，可对关节面造成摩擦，产生继发性损害；因此，上述两种方法本身均人为地破坏了关节 的完整性及内环境，在人类TMJID的病例中，不会出现关节盘附着的完全断裂和关节腔的 暴露，因此无法真正模拟人类TMJ ID的产生过程。方法三是以Imai等所采用的关节外牵 引的方法，该方法虽未暴露关节组织，但因受力方向为后上，改变了下颌骨在关节窝内的位 置，而关节盘与关节结节的相对关系并未发生改变，因此，该动物模型实际上并非真正的关 节盘前移位。龙星等介绍了其采用缝线将关节盘的前伸部分固定在其前方的颧弓上，建立 关节盘前移位动物模型的方法，该方法尽管没有打开关节囊，保存了关节的完整性，但存在 关节盘前移的程度有限和形成TMJID的速度过快之不足。谷志远等为了研究关节双板区的 适应性改建，曾对TMJID动物模型的建立方法进行了改进，采用双股橡皮筋持续牵引关节 盘前伸部的方法，但对IA则未进行研究。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种兔颞下颌关节囊内黏连动物模 型，所述的动物模型在不打开关节囊的前提下，可完全模拟人类颞下颌关节结构紊乱的自 然病程。 本发明的再一目的是，提供一种兔颞下颌关节囊内黏连动物模型的建立方法。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案是一种兔颞下颌关节囊内黏连动物模 型，可由下述方法制备获得将橡皮筋牵引已经进行全身麻醉的大白兔关节盘向前，产生关 节盘的移位，然后采用核磁共振和内镜来检验模型建立是否成功。 所述的橡皮筋固定部位是在白兔眶骨的前缘处，牵引的部位在关节盘的前伸部。
所述的橡皮筋的牵引长度范围为9. 5-40mm，牵引力范围为80_120g。
所述的橡皮筋的牵引长度为40mm，牵引力为120g。 为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是一种兔颞下颌关节囊内黏连 动物模型的建立方法，将橡皮筋牵引已经进行全身麻醉的大白兔关节盘向前，产生关节盘 的移位，然后采用核磁共振和内镜来检验模型建立是否成功，所述的动物模型的建立方法 中以一侧关节作为实验侧，另一侧为对照侧。 所述的橡皮筋固定部位是在兔眶骨的前缘处，牵引的部位在关节盘的前伸部，所 述的橡皮筋的牵引长度范围为9. 5-40mm，牵引力范围为80-120g。
所述的橡皮筋的牵引长度为40mm，牵引力为120g。
本发明优点在于 1、没有打开关节囊、切断关节盘的诸附着，手术本身对关节内部结构的影响较 小； 2、橡皮筋被固定于眶骨前缘，即眶下壁的前一个突起处，此点较为恒定，从而保证 了手术的可重复性； 3、采用丝线穿过关节盘的前伸部，并固定弹力橡皮筋，利用其弹性回縮力、牵引关 节盘逐渐前移，较符合ADD的缓慢发展过程； 4、对牵引关节盘向前的力进行了量化，即采用的牵引力约为120g，故能基本控制 关节盘前移的量，对不同动物之间关节盘前移的程度可进行比较研究，便于进行组织学研 究和比较。这就使实验者可以根据自己的实验目的，选择合适的牵引力来建立动物模；
5、去除部分颧骨下缘、充分显露关节囊，达到准确牵引关节盘前伸部的目的，同时 尽可能使牵引方向与翼外肌牵拉方向一致； 6、应用MRI和内镜技术来确定有无TMJ ID和IA的形成，这不同于以往是在处死 动物后获取组织标本来评价模型的成功与否； 7、本发明可以为颞下颌关节囊内黏连的形成机制研究提供可靠的动物模型；
8、本发明可以为研究颞下颌关节骨关节病的形成机制提供可靠的动物模型；
9、本发明可以为研究某些药物，预防和治疗颞下颌关节囊内黏连和骨关节病的形 成，提供可靠的动物模型。
附图1A是兔TMJ ID模型建立的手术示意图，图中将弹力橡皮筋从9.5mm牵引至 40mm固定。 附图1B是兔TMJ ID模型建立的手术示意图，图中为去除部分眶骨后，显露牵引的 方向。 附图1C是兔TMJ ID模型建立的手术示意图，图中为牵引后关节盘的移位和牵引
部位以及双板区的滑膜充血。图中标号分别为1、示双板区血管增生，滑膜充血，2、关节腔黏
连，3、前移位的关节盘，4、牵引关节盘的部位。 附图2是实验后兔下颌左偏及前牙斜向磨耗。 附图3A是兔动物模型建立后的组织学评价，图中为兔动物模型建立后的实验侧 关节可见盘移位和黏连形成(箭头示)。
附图3B是兔动物模型建立后的组织学评价，图中为对照侧关节盘无移位，关节腔 内表面光滑、无黏连。
具体实施方式
下面结合附图对本发明提供的一种兔颞下颌关节囊内黏连动物模型及其建立方
法的具体实施方式
作详细说明。
实施例1
l材料和方法
1. 1材料 1. 1. 1实验动物及分组健康成年新西兰大耳白兔16只，由上海交通大学医学院实 验动物中心提供，实验前由上海第九人民医院动物房适应性饲养2周。实验动物纳入标准 为6月龄，体重2. 5 3kg，无缺失牙、咬合异常，营养状况良好，无全身系统性疾病，动作敏 捷者。将实验动物随机分为4组，每组4只；右侧关节作为实验侧，左侧为对照侧；分别于术 后1、2、4和8周进行MRI、内镜的观察，检测关节盘的移位程度和有无关节IA形成，之后处 死动物留取标本进行组织学观察。 1. 1. 2实验材料和器械实验使用的药物为①速眠新注射液(2ml/支，由医学科学 院军事兽医研究所生产)；②盐酸氯胺酮注射液(2ml/支，由江苏恒瑞医药股份有限公司生 产)； 2%盐酸利多卡因注射液(5ml/支，由上海复兴朝晖药业有限公司生产)； 阿托品 注射液(lmg/2ml/支，由河北天成药业有限公司生产)；⑤注射用青霉素钠(80万u/瓶，由 上海新先锋有限公司生产)。实验使用常规器械和敷料由由上海第九人民医院动物实验室 提供，包括各种手术巾、纱布、手术电刀、吸引器、血管钳、组织剪、骨凿、缝合器械。所使用的 牵引钉为浙江宁波慈北医疗器械有限公司生产的直径2. Omm，长度为10mm的正畸支抗钉。
1. 1. 3TMJID动物模型的建立 用氯胺酮0. 2ml和速眠新0. 8ml肌内注射进行全身麻醉，耳前区剪毛、消毒、铺巾， 局部注射2%利多卡因1. 5ml。沿颧突根部上方斜向前下方颧弓表面做长约2. 5 3. Ocm的 凹面向上的弧形切口 ，暴露颧突根部及眶下壁，可见在眶下壁的上缘有前后两个小突起，前 一突起距离颧突根部约40mm，在该突起稍下方用牵引钛钉钻孔，穿入强生丝线(图1A)。去 除部分颧骨，显露关节囊(图1B)，用强生2-0丝线(正畸用，美国TP Orthodontics Inc. 生产)的针自下向上垂直穿过关节盘的前伸部，用弹力橡皮筋牵引关节盘向前(图1C)，使 弹力橡皮筋的形变长度从9. 5mm至40mm，即约120g的牵引力，用丝线将橡皮筋固定于眶骨 上，同时将橡皮筋置于眶骨的深面，以使橡皮筋牵引的方向尽可能的与翼外肌作用于关节 盘的方向一致。用碘伏消毒液冲洗创面后，分层关闭创口。术后每日肌注青霉素20万u，连 续3d ;颗粒软饲料喂养1周后改正常饲料喂养。
1. 1. 4MRI和内镜技术检测上述动物模型。
2结果 所有兔的下颌均不同程度地偏向对照侧，且伴有前牙的斜向磨耗(图2) ;HE染色 发现实验侧的关节盘均出现了前移位，关节腔内有黏连物积聚(图3A);而对照侧无关节盘 移位，关节腔内表面光滑、无黏连形成(图3B)。说明该动物模型的建立方法成功率高、可 靠稳定，更符合人类TMJ ID的形成过程。在关于评价动物模型建立成功与否的标准，与以
5往不同，我们不是单纯采用处死动物取标本，进行组织学观察，而是在处死动物前，应用MRI 和内镜技术来确定有无TMJ ID和IA的形成，这就为后续部分研究或者利用动物模型进行 深入研究提供了保证。在本研究中，我们应用MRI来评价动物模型的建立是否成功，证实了 兔关节盘的前移位及关节液的存在，并借助T2序列上有无关节液进而诊断有无黏连，并经 内镜证实。 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为 本发明的保护范围。
权利要求
一种兔颞下颌关节囊内黏连动物模型，其特征在于，所述的动物模型可由下述方法制备获得将橡皮筋牵引已经进行全身麻醉的大白兔关节盘向前，产生关节盘的移位，然后采用核磁共振和内镜来检验模型建立是否成功。
2. 根据权利要求1所述的动物模型，其特征在于，所述的橡皮筋固定部位是在白兔眶 骨的前缘处，牵引的部位在关节盘的前伸部。
3. 根据权利要求l所述的动物模型，其特征在于，所述的橡皮筋的牵引长度范围为9. 5-40mm，牵引力范围为80_120g。
4. 根据权利要求3所述的动物模型，其特征在于，所述的橡皮筋的牵引长度为40mm，牵 引力为120g。
5. —种兔颞下颌关节囊内黏连动物模型的建立方法，其特征在于，将橡皮筋牵引已经 进行全身麻醉的白兔关节盘向前，产生关节盘的移位，然后采用核磁共振和内镜来检验模 型建立是否成功，所述的动物模型的建立方法中以一侧关节作为实验侧，另一侧为对照侧。
6. 根据权利要求5所述的动物模型的建立方法，其特征在于，所述的橡皮筋固定部位 是在白兔眶骨的前缘处，牵引的部位在关节盘的前伸部，所述的橡皮筋的牵引长度范围为 9. 5-40mm，牵引力范围为80_120g。
7. 根据权利要求6所述的动物模型的建立方法，其特征在于，所述的橡皮筋的牵引长 度为40mm，牵引力为120g。
全文摘要
本发明涉及一种兔颞下颌关节囊内黏连动物模型，所述的动物模型可由下述方法制备获得将橡皮筋牵引已经进行全身麻醉的大白兔关节盘向前，产生关节盘的移位，然后采用核磁共振和内镜来检验模型建立是否成功。本发明还提供了一种兔颞下颌关节囊内黏连动物模型的建立方法。本发明可以为颞下颌关节囊内黏连、颞下颌关节骨关节病的形成机制研究提供可靠的动物模型；本发明还可以为研究某些药物，预防和治疗颞下颌关节囊内黏连和骨关节病的形成，提供可靠的动物模型。
文档编号G09B23/28GK101766504SQ20091004493
公开日2010年7月7日 申请日期2009年1月6日 优先权日2009年1月6日
发明者刘秀明, 张善勇, 杨驰, 蔡协艺, 陈敏洁, 魏魁杰 申请人:上海交通大学医学院附属第九人民医院