吡啶酮化合物及其制备方法

专利名称：吡啶酮化合物及其制备方法
喜树碱是一种首次从中国植物喜树(canptotheca acuminata)的叶和树皮中分离出来的天然化合物(参见Wall等，美国化学会志883888(1966))。喜树碱是由中氮茚并[1，2-b]喹啉碎片与六元α-羟基内酯稠合组成的五环化合物。带有α-羟基的20位碳是非对称的，它赋予分子旋光特性。天然喜树碱的20位碳具有绝对“S”构型，可用下式表示 喜树碱对包括人结肠、肺部和乳腺肿瘤细胞在内的数种癌细胞系表现出抗增殖活性系(Suffness，M等生物碱化学和药理学，Bross，A.，ed.，Vol.25，p.73(Academic Press，1985))。据认为喜树碱的抗增殖活性与其抑制DNA的拓扑异构酶I的活性有关。
人们认为α-羟基内酯结构为喜树碱同时具备体内外活性的必要条件(喜树碱新的抗癌药物，Putmesil，M.等ed.，p.27(CRC Press.1995)Wall，M.等，癌症研究55753(1995)；Hertzberg等，药物化学杂志32715(1982)和Crow等，药物化学杂志354160(1992))。本发明涉及一类新的喜树碱化合物，其中β-羟基内酯代替了天然喜树碱的α-羟基内酯。本发明化合物表现出现有技术中不曾预料到的强生物活性。
因此，本发明的目的是不同于所有已知喜树碱化合物的新喜树碱化合物，在一定意义上说它们包含代替α-羟基内酯(或其开环羟基羧酸形式)的β-羟基内酯(或其开环羟基羧酸形式)；或后者的可药用盐。应该清楚本发明的喜树碱化合物与在骨架结构上带有或不带有(例如嘉树碱化合物的)其它化学取代基的喜树碱(即与六元α-羟基内酯稠合的中氮茚并[1，2-b]喹啉碎片)具有相同的结构骨架。如下所述，各种喜树碱化合物是专业人员所熟知的。β-羟基内酯是指在α-羟基内酯的羧基碳原子和带有羟基的α-碳原子之间还含有一个碳原子的内酯。可以是七元“闭合”或“开环”的β-羟基内酯(其中羰基与相邻氧原子间的酯键被水解)通过羧基和羟基形成，这些基团可以是取代的或未取代的。
本发明的喜树碱化合物可在中氮茚并[1，2-5]喹啉碎片上(例如为改善该化合物的溶解性)或在开环或闭合β-羟基内酯(例如为改善该化合物的稳定性)上带有取代基。闭合β-羟基内酯环上取代作用的实例包括在β-碳上的烷基取代(如乙基)。开环β-羟基内酯上取代作用的实例包括在β-碳上的烷基取代，羧酸上的取代(例如酰胺化作用)和对所形成的羟基的取代(例如和酯化)或抑制作用。
更具体地说，本发明的主题是外消旋形式、对映体形式或其组合形式的式(I)和式(II)化合物或后者的药用盐， 其中R1表示低级烷基，低级链烯基，低级炔基，低级卤代烷基和低级烷氧基低级烷基或低级烷硫基低级烷基；R2，R3，R4独立地表示H，卤素，低级卤代烷基，低级烷基，低级链烯基，氰基，低级氰基烷基，硝基，低级硝基烷基，酰氨基，低级酰氨基烷基，肼基，低级肼基烷基，叠氮基，低级叠氮基烷基，(CH2)mNR6R7，(CH2)mOR6，(CH2)mSR6，(CH2)mCO2R6，(CH2)mNR6C(O)R8，(CH2)mC(O)R8，(CH2)mOC(O)R8，O(CH2)mNR6R7，OC(O)NR6R7，OC(O)(CH2)mCO2R6或(CH2)n[N＝X]，OC(O)[N＝X]，(CH2)mOC(O)[N＝X](其中[N＝X]，在本发明中表示含有氮原子N的4-7元杂环基，它表示杂环的元数，并且X表示完全构成杂环基所需的其余单元，选自O、S、CH2、CH、N、NR9和COR10)，芳基或者取代(即，在杂环或芳基上取代一至四次)或未取代的低级芳烷基，其中取代基是低级烷基、卤素、硝基、氨基、低级烷氨基、低级卤代烷基、低级羟烷基、低级烷氧基或低级烷氧基低级烷基)或者R2和R3一起形成3或4链节的链，其中链的元素选自CH、CH2、O、S、N或NR9；R5表示H，卤素，低级卤代烷基，低级烷基，低级烷氧基，低级烷氧基低级烷基，低级烷硫基低级烷基，环烷基，环烷基低级烷基，氰基，氰基烷基，低级烷基低级磺酰烷基，低级羟烷基，硝基，(CH2)mC(O)R8，(CH2)mNR6C(O)R8，(CH2)mNR6R7，(CH2)mN(CH3)(CH2)nNR6R7，(CH2)mOC(O)R8，(CH2)mOC(O)NR6R7，(CH2)mS(O)qR11，(CH2)mP(O)R12R13，(CH2)2P(S)R12R13，(CH2)n[N＝X]，OC(O)[N＝X]，(CH2)mOC(O)[N＝X]，芳基或者取代(即，在芳基或杂芳基上取代一至四次)或未取代的芳基低级烷基，其中取代基是低级烷基、卤素、硝基、氨基、低级烷氨基、低级卤代烷基、低级羟烷基、低级烷氧基或低级烷氧基低级烷基；R6和R7独立地表示H，和低级烷基，低级羟烷基，低级烷基低级氨基烷基，低级氨基烷基，环烷基，环烷基低级烷基，低级链烯基，低级烷氧基低级烷基，低级卤代烷基，或者芳基或取代(即，在芳基上取代一至四次)或未取代的芳基低级烷基，其中的取代基是低级烷基、卤素、硝基、氨基、低级烷氨基、低级卤代烷基、低级羟烷基、低级烷氧基或低级烷氧基低级烷基；R8表示H，和低级烷基，低级羟烷基，氨基，低级烷氨基，低级烷基低级氨基烷基，低级氨基烷基，环烷基，环烷基低级烷基，低级链烯基，低级烷氧基，低级烷氧基低级烷基，低级卤代烷基或者芳基或取代(即，在芳基上取代一至四次)或未取代的芳基低级烷基，其中取代基是低级烷基、卤素、硝基、氨基、低级烷氨基、低级卤代烷基、低级羟烷基、低级烷氧基或低级烷氧基低级烷基；R9表示H，低级烷基，低级卤代烷基，芳基或者被一个或多个基团取代的芳基，所述基团选自低级烷基、卤素、硝基、氨基、低级烷氨基、低级卤代烷基、低级羟烷基、低级烷氧基或低级烷氧基低级烷基；R10表示H，低级烷基，低级卤代烷基，低级烷氧基，芳基或被一个或多个取代基取代的芳基(即，在芳基上存在一至四个取代基)，所述取代基选自低级烷基、低级卤代烷基、低级羟烷基或低级烷氧基低级烷基；R11表示低级烷基，芳基，(CH2)mOR14，(CH2)mSR14，(CH2)2NR14R15或(CH2)m[N＝X]；R12和R13独立地表示低级烷基，芳基，低级烷氧基，芳氧基或氨基；R14和R15独立地表示H和低级烷基或芳基；R16表示H或OR21；R17表示OR6或NR6R7；R18和R19独立地表示H，卤素，低级烷基，低级烷氧基或羟基；R20表示H或卤素；R21表示H，低级烷基，CHO或C(O)(CH2)mCH3；m是包含0-6的整数；n是1或2；和q表示0-2的整数；并且[N＝X]表示4-7元杂环基，X表示补全所述杂环基所需的单元，选自O、S、CH2、CH、N、NR9和COR10。
具体地说，本发明的主题是例如上面定义的式I和式II化合物，其中R1表示低级烷基，低级链烯基，低级卤代烷基，低级烷氧基低级烷基或低级烷硫基低级烷基；R5表示H，卤素，低级卤代烷基，低级烷基，低级烷氧基，低级烷氧基低级烷基，低级烷硫基低级烷基，环烷基，环烷基低级烷基，氰基，氰基烷基，低级羟烷基，硝基，(CH2)mC(O)R8，(CH2)mNR6C(O)R8，(CH2)mNR6R7，(CH2)mN(CH3)(CH2)nNR6R7，(CH2)mOC(O)R8，(CH2)mOC(O)NR6R7或(CH2)n[N＝X]，OC(O)[N＝X]，(CH2)mOC[N＝X]，芳基或者取代或未取代的芳基低级烷基；R12和R13独立地表示低级烷基；R16表示OR21；并且R18、R19和R20表示H。
更具体地说，本发明的主题是如上所定义的式I和式II化合物，其中R1表示低级烷基，低级链烯基，低级卤代烷基或低级烷氧基低级烷基；R2、R3和R4独立地表示H，卤素，低级卤代烷基，低级烷基，硝基，酰氨基，低级酰氨基烷基，肼基，低级肼基烷基，叠氮基，低级叠氮基烷基，(CH2)mNR6R7，(CH2)mOR6，(CH2)mSR6，(CH2)mC(O)R8，OC(O)NR6R7，(CH2)n[N＝X]或取代或未取代的(CH2)mOC(O)[N＝X]，或者OC(O)[N＝X]；或者R2和R3一起形成3或4链节的链，其中所述链的元素选自CH、CH2、O、S、N或NR9；R5表示H，卤素，低级卤代烷基，低级烷基，低级烷氧基，低级烷氧基低级烷基，低级烷硫基低级烷基，低级羟烷基，硝基，(CH2)mC(O)R8，(CH2)mNR6C(O)R8，(CH2)mNR6R7，(CH2)mN(CH3)(CH2)nNR6R7，(CH2)mOC(O)R8，(CH2)mOC(O)NR6R7或者取代或未取代的OC(O)[N＝X]或(CH2)n[N＝X]，或(CH2)mOC(O)[N＝X]；R6和R7独立地表示H，低级烷基，低级羟烷基，低级烷基低级氨基烷基，低级氨基烷基，环烷基，环烷基低级烷基，低级烷氧基低级烷基，芳基，芳基低级烷基或者低级卤代烷基；R8表示H和低级烷基，低级羟烷基，低级烷基氨基，低级烷基低级氨基烷基，低级氨基烷基，环烷基，环烷基低级烷基，低级链烯基，低级烷氧基，低级烷氧基低级烷基，低级卤代烷基，芳基或者芳基低级烷基；R9表示H，低级烷基或低级卤代烷基；R10表示H，低级烷基，低级卤代烷基或低级烷氧基；R11表示低级烷基；R14和R15独立地表示H或低级烷基。
更具体地说，本发明的主题是如下定义的式I化合物，其中R1表示乙基；R2和R3独立地表示H，低级烷基，卤素，低级卤代烷基或(CH2)mOR6，或者R2和R3一起形成亚甲二氧基或亚乙二氧基；并且R4和R5独立地表示H和低级烷基，(CH2)mNR6R7或者未取代或被低级烷基取代的(CH2)n[N＝X]。优选R4表示H或者(CH2)mNR6R7，其中R6和R7独立地表示H或低级烷基，并且R5表示H和低级烷基或者未取代或被低级烷基取代的(CH2)n[N＝X]；取代或未取代[N＝X]的实例可列举哌啶基，吗啉基，哌嗪基，咪唑基和4-甲基哌嗪基。
更优选地，R2表示H或卤素，并优选为H、氯或氟；且R3表示H，低级烷基，卤素或OR6，其中R6表示H、低级烷基或芳基低级烷基并且优选为H、氟、氯、甲基或甲氧基。同样更优选地，R2和R3一起形成亚甲二氧基或亚乙二氧基。
更具体地，本发明的主题是下文实施例中描述的产物，尤其是对应于下式的化合物或其药用盐-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5，12-二乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-8-乙基-2，3，8，9-四氢-8-羟基-10H，12H-[1，4]二氧杂环乙二烯并(dioxino)[2，3-g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-10，13(15H)-二酮-10-苄氧基-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，1 5(4H，13H)-二酮-5-乙基-4，5-二氢-5，10-二羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-11-(二甲氨基)甲基-5-乙基-4，5-二氢-5，10-二羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，1 3H)-二酮-9-氯-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-10-甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-9，10-二氟-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-7-乙基-7，8-二氢-7-羟基-9H，11H-[1，3]间二氧杂环戊烯并[4，5-g]-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-9，12(14H)-二酮-9-氯-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-9，11-二氯-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-10-甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-10-氟-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-10-氯-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-10-氯-5-乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5，12-二乙基-4，5-二氢-5，10-二羟基-11-吗啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5，12-二乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-12-甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-9-氯-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-9-氯-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-12-吗啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-12-哌啶子基甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-12-吗啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-10-氟-4，5-二氢-5-羟基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-10-氟-4，5-二氢-5-羟基-12-吗啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-10-甲基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-10-甲基-12-吗啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-10-甲基-12-哌啶子基甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-8-乙基-2，3，8，9-四氢-8-羟基-16-(4-甲基哌嗪甲基)-10H，12H-(1，4)二氧杂环乙二烯并[2，3-g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-10，13(15H)-二酮-9-氯-5-乙基-10-氟-4，5-二氢-5-羟基-12-吗啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮。
更具体地，本发明的目的还在于上述式II化合物或其药用盐，其中R1表示乙基；R2和R3独立地表示H，低级烷基，卤素，低级卤代烷基或(CH2)mOR6，或者R2和R3一起形成亚甲二氧基或亚乙二氧基；并且R4和R5独立地表示H和低级烷基，(CH2)mNR6R7或者未取代或被低级烷基取代的(CH2)n[N＝X]；R20表示H并且R17表示OR6，其中R6表示H或低级烷基，或者NR6R7中的R6和R7独立地表示H、低级烷基、芳基或芳基低级烷基。优选地R4表示H或者(CH2)mNR6R7，其中R6和R7独立地表示H或低级烷基；R5表示H和低级烷基或者未取代或被低级烷基取代的(CH2)n[N＝X]并且R17表示OR6，其中R6表示H或低级烷基。作为被取代或未被取代的[N＝X]的实例可列举哌啶基，吗啉基，哌嗪基，咪唑基和4-甲基哌嗪基。
更优选地R2表示H或卤素并优选为H、氯或氟；R3表示H，低级烷基，卤素或OR6，其中R6表示H、低级烷基或芳基低级烷基并优选为H、氟、氯、甲基或甲氧基。同样更优选地R2和R3一起形成亚甲二氧基或亚乙二氧基。
更具体地，本发明的目的是下文实施例中描述的产物，尤其是下式表示的产物或其药用盐-β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯-β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸乙酯-β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸-β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸甲酯-β-乙基-α，α-二氟-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸乙酯-β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸乙酯-β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯-β-乙基-γ-(12-乙基-8-羟甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-β-羟基-丙酸-γ-(12-苄氧基-8-羟甲基-9-氧(1 1H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-β-乙基-β-羟基--丙酸(E)。
如本文采用的涉及烷基、烷硫基和烷氧基的术语低级基团是指直链或支链、含有1-6个碳原子的饱和脂肪烃基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、甲硫基、乙硫基、甲氧基和乙氧基。涉及链烯基或炔基的术语低级基团是指含有2-6个碳原子并且有一个或多个双键或三键的基团，例如乙烯基、烯丙基、异丙烯基、戊烯基、己烯基、丙烯基、乙炔基、丙炔基和丁炔基。术语环烷基是指含有3-7个碳原子的环，例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基。术语芳基是指含有至少一个芳环的单环、双环或三环烃化合物，每个环最多包含7个环节，例如苯基、萘基、蒽基、联苯基或茚基。术语卤素是指氯、溴、碘或氟。相应的低级卤代烷基、低级氰基烷基、低级硝基烷基、低级酰氨基烷基、低级肼基烷基、低级叠氮基烷基、芳基低级烷基、低级羟烷基、低级烷氧基低级烷基、低级烷硫基低级烷基和低级烷磺酰基低级烷基分别被一至三个取代基取代，所述取代基是卤素、氰基、硝基、酰氨基、肼基、叠氮基、芳基、羟基、低级烷氧基、低级烷硫基或低级磺酰基。低级烷氨基可含有一个或两个低级烷基，例如NHCH3、NHCH2CH3、N(CH3)2或N(CH3)(CH2CH3)。[N＝X]的实例包括哌啶基、吗啉基、哌嗪基和咪唑基。
通过对喜树碱的观察，发现本发明化合物的β-羟基内酯或β-羟基羧酸根上带有羟基的碳原子是非对称的。因此，本发明的化合物具有两种可能的对映体构型，即“R”和“S”构型。本发明包括这两种对映体构型和这些构型的各种结合，以及“RS”外消旋混合物。为了简便起见，当结构式中未给出具体构型时，应理解为表示两种对映体构型和它们的混合物。
本发明的主题还包括从喜树碱或取代的喜树碱开始或者通过完全化学合成的方式制备通式I和II化合物的方法。
本发明涉及从喜树碱或取代的喜树碱开始制备本发明式I和II化合物的方法，其特征在于-将下式其中R1、R2、R3、R4、R5和R20具有上述定义的喜树碱 的α-羟基内酯还原为通式A的α-羟基乳醇 其中R1、R2、R3、R4、R5和R20具有如上所示含义。-使用适宜的氧化剂处理，断裂如此形成的化合物A的键合相邻甲醇的碳-碳键，得到式B化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5和R20具有如上所示含义。-然后，使用功能烷基化试剂处理，开裂式B化合物的甲酰基官能团得到通式C的β-羟基酯 其中R1、R2、R3、R4、R5、R18、R19和R20具有如上所示含义并且R17表示OR6，R6表示低级烷基、环烷基、环烷基低级烷基、低级链烯基、低级烷氧基低级烷基或者芳基或芳基低级烷基；-将所述通式C化合物环化，得到通式D的β-羟基内酯化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R18、R19和R20具有如上所示含义，-将通式D的内酯开环，得到式E化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R18、R19和R20具有如上所示含义；R16表示OR21，其中R21表示H或低级烷基；并且R17表示OR6或NHR6且R6表示H、低级烷基、环烷基、环烷基低级烷基、低级链烯基、低级烷氧基低级烷基、或者芳基或芳基低级烷基。
某些式E化合物也可通过水解相应式C化合物的酯官能团获得。其中R16和/或R17独立地表示羟基的通式E化合物可在本领域专业人员已知的常规条件下经过酯化或酰胺化形成对应于式E的酯或酰胺。
在上面的方法中，如果需要，R1、R2、R3和R4基团可按照常规的保护方法加以保护(Greene，T.有机合成中的保护基10-86(JohnWiley&Sons 1981))。在该方法中，借助还原试剂在适宜的溶剂中，例如使用硼氢化钠在甲醇中进行还原反应。化合物A形成化合物B的步骤在氧化条件下，例如使用四乙酸铅、高碘酸或偏高碘酸钠在适宜的溶剂如乙酸中完成。用官能化烷基化试剂进行的处理步骤可借助金属衍生物，例如锂或锌或者借助羧酸酯在无水非质子传递溶剂如四氢呋喃中完成。由化合物C获得化合物D的内酯化步骤一般在酸性条件下进行，例如使用溶于无水溶剂如二氯甲烷或二恶烷的三氟乙酸或氯化氢气处理。将化合物D的内酯环开环以获得化合物E的步骤可通过例如在碱性条件下水解，然后中和来完成。
用作原料的取代喜树碱的实例参见美国专利4473692，4604463，4894956，5162532，5395939，5315007，5264579，5258516，5254690，5212317和5341745，PCT专利申请US 91/08028，US 94/06451，US90/05172，US 92/04611，US 93/10987，US 91/09598，EP 94/03058和EP95/00393及欧洲专利申请325247，495432，321122和540099。
本发明还涉及式I和II化合物的制备方法，其特征在于-将通式M的化合物 其中R1、R18和R19具有上述含义并且R20表示氢或卤原子，用通式N的2-卤代-3-喹啉甲醇偶合 其中R2、R3、R4和R5具有上述含义并且X表示卤原子，得到式O化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R18、R19、R20和X具有上述含义；-然后将通式O化合物环合，获得如上定义的式D化合物。
在上面的方法中，如果需要，R1、R2、R3和R4基团可按照常规的保护方法加以保护(Greene，T.有机合成中的保护基10-86(JohnWiley&Sons 1981))。由通式M和N化合物形成化合物O的步骤可通过本领域专业人员公知的Mitsunobu反应(参考Mitsunobu，O等，合成反应P.1(1981))进行处理来完成。通过使用亲核的例如化合物M或后者的脱质子衍生物，用膦如三苯基膦和偶氮二甲酸衍生物如偶氮二甲酸二乙酯在非质子传递溶剂如四氢呋喃或N，N-二甲基甲酰胺中处理脱去化合物N的羟基官能团。化合物O的环合优选在钯催化剂(如二乙酸钯)的存在下，在碱性条件下(例如可与相转移试剂例如四丁基溴化铵结合的碱金属乙酸盐)在非质子传递溶剂如乙腈或N，N-二甲基甲酰胺中，在50℃-120℃的温度下进行(R.Grigg等，四面体46，p4003(1990))。
通式M化合物是新化合物。它们可按照如下方法制备，其特征在于-下式所示吡啶的羰基 其中R1和R20具有上述含义并且R2表示卤原子或低级烷氧基，用醛缩醇官能团保护，得到通式F化合物 其中R1、R20和R22具有上述含义并且Z和Z’独立地表示低级烷基或一起形成含2-4个碳原子的饱和烃链；-向通式F化合物中引入羟甲基官能团，得到通式G化合物 其中R1、R20、R22、Z和Z’具有上述含义，-随后保护通式G化合物的醇官能团，得到通式H化合物 其中R1、R20、R22、Z和Z’具有上述含义且R23表示醇官能团保护基。-通式H的醛缩醇化合物脱保护，得到通式I’化合物 其中R1、R20、R22和R23具有上述含义，-用官能烷基化试剂处理式I’化合物，得到通式J的β-羟基酯 其中R1、R20、R22和R23具有上述含义，R18和R19如通式II中所定义且R17表示OR6，其中R6表示低级烷基、环烷基、环烷基低级烷基、低级链烯基、低级烷氧基低级烷基、或者芳基或芳基低级烷基-除去通式J化合物的保护基R23，得到通式K化合物 其中R1、R18、R19、R20和R22具有上述含义且R17表示OR6，其中R6表示低级烷基、环烷基、环烷基低级烷基、低级链烯基、低级烷氧基低级烷基、或者芳基或芳基低级烷基-通式K化合物环合形成通式L化合物 其中其中R1、R18、R19、R20和R22具有上述含义并且最后-将L化合物的基团R22转化为羰基，得到通式M化合物 其中R1、R18、R19和R20具有上述含义。
4-酰基-2-吡啶(例如按照Lamattina，J.L.杂环化学杂志20，533页(1983))的羰基优选通过醛缩醇，优选环醛缩醇，按照本领域专业人员所知的常规条件(Greene，T.，有机合成中的保护基10-86(John Wiley&Sons1981))加以掩蔽。当R22是氯或氟时，由此获得的中间体用醇钠或醇钾在非质子传递溶剂(例如乙腈)或在(衍生所述醇盐的)醇中在0℃-100℃处理，得到通式F化合物。通式F化合物用芳基-或烷基锂(例如基锂)在醚溶剂例如四氢呋喃中在-100℃-0℃处理可在3位锂盐化。将甲酰化亲电子试剂例如N，N-二甲基甲酰胺加到如此获得的锂盐化中间体中，所得的醛在水解后用还原试剂例如硼氢化钠处理，得到通式G化合物。按照本领域专业人员所知的常规条件对化合物G的醇官能团进行掩蔽，得到通式H化合物。醇官能团保护基实例的包括形成醚的官能团[例如甲基、甲氧基甲基、四氢吡喃基、2-甲氧基乙氧基甲基、苄氧基甲基、叔丁基和苄基(取代或未取代的)]和酯(例如甲酸酯、乙酸酯和异丁酸酯)。其它伯羟基保护基的实例可参见Greene，T.，有机合成中的保护基10-86(John Wiley&Sons 1981)。通式H化合物在维持R23基团完整性的选择性环境中例如通过在酸性条件下(例如用三氟乙酸)处理完成去保护步骤得到通式I，化合物。官能团的保护和脱保护的选择性条件是本领域专业人员已知的(Greene，T.，有机合成中的保护基10-86(John Wiley&Sons 1981))。用功能化烷基试剂处理I，化合物得到通式J的β-羟基酯的反应可借助烯醇锂或羧酸酯的锌衍生物在非质子传递无水溶剂如四氢呋喃中进行。在本领域专业人员已知的脱保护条件下裂解通式J化合物的保护基R23可得到通式K化合物。例如，当R23是苄基时，通式J化合物与钯催化剂的醇溶液被放置在0.5-10巴的氢气压下。如此获得的通式K化合物的环化可在酸性条件下(例如用三氟乙酸或溶于无水溶剂如二氯甲烷或二恶烷的氯化氢气处理)进行，得到如通式L化合物中的七元β-羟基内酯环。例如用热盐酸处理或者使用碘化三甲基硅烷可将通式L化合物转化为通式M的吡啶酮。由通式P的N-乙酰苯胺 可获得通式N的2-卤代-3-喹啉-甲醇，通式P的R2、R3和R4具有通式I和II中所示的含义。在下文的方法中，如果需要R2、R3和R4基团可按照常规保护方法加以保护(Greene，T.，有机合成中的保护基10-86(JohnWiley&Sons 1981))。
然后可按照下述方法获得式N化合物通过用乙酰化试剂如乙酐处理所述的式P苯胺进行N-乙酰化。如此获得的N-乙酰苯胺在50℃-100℃下，优选75℃下用Vilsmeyer试剂(通过磷酰氧氯与N，N-二甲基甲酰胺在0℃-10℃下反应获得)处理，得到相应的2-氯-3-喹啉甲醛(参见例如Meth-Cohn.等，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.Ip.1520(1981)；Meth-Cohn等，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.I p25-9(1981)和Nakasimhan等，J.Am.Chem.Soc.，112，p4431(1990))。通过将产物在惰性溶剂如乙腈中、在碘盐或溴盐(例如碘化钠或四丁基溴化铵)的存在下加热，2-氯-3-喹啉甲醛的2位氯可被碘或溴取代。该转化反应需痕量的酸如浓盐酸催化。2-卤代-3-喹啉甲醛在本领域专业人员已知的常规条件下例如在醇溶剂(如甲醇)中、用硼氢化钠在0℃-40℃处理可容易地还原为对应于通式N的2-卤代-3-喹啉甲醇。
式N化合物也可按照下述方法获得将如上所定义的通式P苯胺与腈(如氯代乙腈或丙腈)在三氯化硼和其它路易斯酸如三氯化铝、四氯化钛或二乙基氯化铝的存在下、在非质子溶剂或非质子溶剂的混合物中反应进行酰化，然后水解(参见Sugasawa，T.等，美国化学会志100，p4842(1078))。之后将所得的中间体用乙基丙二酰氯在非质子溶剂如乙腈中、在碱如三乙胺存在下处理，再用碱金属醇盐如甲醇钠在甲醇中处理，得到4位取代的2-羟基-3-喹啉羧酸乙酯。后者用磷酰氧氯处理可转化为2-氯-3-喹啉羧酸乙酯。当喹啉的4位带有氯甲基时，用仲胺如二甲胺、N-甲基哌嗪、吗啉或哌啶处理可进行亲核取代。然后用二异丁基氢化铝在非质子溶剂如二氯甲烷中还原2-氯-3-喹啉羧酸乙酯，得到通式N的2-氯-3-喹啉甲醇。中间体(N)化合物的类似物记载于文献、尤其是PCT申请95/05427中。
本发明还涉及作为新型工业产物、尤其是用于制备式I和II产物的新工业产物的上述式I’和M产物。
本发明的某些化合物可按照常规方法制备成可药用盐的形式。可药用盐作为非限制性实例包括无机酸加成盐如盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、二磷酸盐、氢溴酸盐和硝酸盐，或者有机酸加成盐如乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、pamoate、水杨酸盐、草酸盐和硬脂酸盐。由碱如氢氧化钠或钾形成的盐也适用于本发明范围内。对于其它可药用盐的实例，请参见“药用盐”，药物科学杂志661(1977)。
本发明的化合物具有有益的药理学特性。即本发明化合物具备抑制拓扑异构酶I和/或II的作用并具有抗肿瘤活性。本发明的化合物表现出抗寄生虫和/或抗病毒活性。本发明的化合物可用于不同的治疗领域。
对患者例如哺乳动物(如人)施用有效治疗量的式(I)或式(II)化合物，可抑制患者的如I和/或II型拓扑异构酶。
本发明的化合物还具有抗肿瘤活性。对患者施用治疗有效量的式(I)或式(II)化合物，可以治疗患者的肿瘤如拓扑异构酶表达的肿瘤。肿瘤或癌症的实例包括食管、胃、小肠、直肠、口腔、咽、喉、肺、结肠、乳腺、子宫颈、子宫内膜体、卵巢、前列腺、睾丸、膀胱、肾、肝、胰腺、骨、结缔组织、皮肤、眼、脑和中枢神经系统的癌症，以及甲状腺癌、白血病、何杰金氏病、除何杰金氏病以外的淋巴瘤和多发性骨髓瘤等。
它们不仅通过抑制血鞭毛虫(如在锥虫或利什曼原虫感染中)或通过抑制疟原虫(例如在疟疾中)用于治疗寄生虫感染，还可用于治疗病毒感染和疾病。
这些特性使得式I和II产物适于药用。这些如上定义的式I和II产物、所述式I和II产物与可药用有机或无机酸的加成盐及含有至少一种如上定义的药物作为活性成分的药物组合物作为药物的应用也是本发明的主题。
本发明涉及含有本发明化合物或其可药用酸的加成盐和可药用载体的药物组合物，所述载体的选择取决于给药方法(例如口服、静脉内、腹膜内、肌内、经皮或皮下)。药物组合物(例如治疗用)可以呈固体、液体、脂质体或脂质小球形式。
药物组合物可以是固体形式的，例如粉末、丸剂、颗粒、片剂、脂质体、胶囊或栓剂。丸剂、片剂或胶囊可用使组合物免受患者胃中胃酸或酶的作用的物质包衣，以使组合物有足够的时间通过胃，在不经消化的情况下进入小肠。化合物可局部给药，如相邻肿瘤植入。化合物还可以缓释给药(例如缓释组合物或输注泵)。适宜固体载体可以是例如磷酸钙、硬脂酸镁、碳酸镁、滑石、蔗糖、乳糖、糊精、淀粉、明胶、纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮和蜡。含有本发明化合物的药物组合物可以呈液体如溶液、乳液、悬浮液或控释制剂形式。适宜的液体载体是例如水、有机溶剂如甘油或二元醇如聚乙二醇、以及它们以各种比例在水中的混合物。
本发明的主题还有如上定义的式I和II产物在制备用于抑制拓扑异构酶，尤其是I型和II型拓扑异构酶的药物；用于治疗肿瘤的药物；用于治疗寄生虫感染的药物以及用于治疗病毒感染或疾病的药物中的用途。
对于治疗上述疾病或病症，本发明化合物的剂量依给药方法、患者的年龄和体重以及疾病的症状的不同而不同，当然由治疗医师或兽医最终确定所谓“治疗有效量”。
在下面的实验部分说明化合物的药理学特性。
本文采用的所有技术和科学术语除非另有特别说明，它们具有本发明相关领域的普通专业人员通常所理解的含义。同样，所提及的出版物、专利申请、专利和其它文献均引入本文以供参考。
下面的参考实例旨在说明上面的方法，而不应理解为以任何方式限定本发明的范围。实验部分实施例1β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯1.a.4-乙基-3，4-二羟基-1H-吡喃并[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-14(4H，12H)-酮将硼氢化钠(14g，370mmol)分批加到可从不同市售途径如AldrichChemical Co.(Milwaukee，WI)获得的(S)-(+)-喜树碱(14g，40mmol)的甲醇(750ml)悬浮液中，将所得混合物缓慢加热到55℃得到澄清溶液，将该溶液在室温搅拌16小时。减压蒸发溶剂，在水(250ml)中溶解残余物，加入乙酸(21ml)中和，在4℃放置2小时。将所得悬浮液过滤并依次用冷水、丙酮和乙醚洗涤，减压干燥后，获得白色固体状目的化合物。熔点280℃。1.b.8-甲酰氧甲基-7-丙酰基中氮茚并[1，2-b]喹啉-9(11H)-酮将偏高碘酸钠(14g，65mmol)的水(140ml)溶液滴加到4-乙基-3，4-二羟基-1H-吡喃[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-14(4H，12H)-酮(13.4g，38mmol)的冰醋酸(720ml)悬浮液中，将所得溶液在室温搅拌1小时。然后将该反应混合物倾入冰/水混合物(650ml)中，所得悬浮液搅拌半小时后过滤并依次用水、异丙醇和乙醚洗涤，减压干燥后，获得浅黄色固体状目的化合物(11.5g)。熔点＞200℃(分解)。1.c.β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯通过在氩气氛下向用磁力搅拌器搅拌的锌(6.5g，100mmol)的无水乙醚(50ml)悬浮液中滴加氯代三甲基硅烷(0.75ml，5.7mmol)使其活化。在室温再搅拌15分钟后加热至回流。然后移走加热浴，以确保维持回流的速率滴加溴乙酸叔丁酯(15ml，100mmol)。重新进行外部加热并维持1小时。将由Reformatsky试剂得到的醚溶液冷却到室温，然后借助引流管在氩气氛下将其转移至8-甲酰氧甲基-7-丙酰基中氮茚并[1，2-b]喹啉-9(11H)-酮(1.6g，4.7mmol)的无水四氢呋喃(40ml)悬浮液中。该反应混合物在室温下被搅拌回流1小时，然后冷却到室温，加入饱和氯化铵溶液(100ml)使反应停止，用氯仿萃取(3×100ml)。合并的氯仿萃取液经硫酸钠干燥，蒸发，残余物经硅胶色谱纯化(1-2％甲醇/二氯甲烷)，可获得0.64g浅黄色固体状目的产物(31％)。熔点146-149℃。RMN-1H(CDC13)0,93(t，3H)；1,37(s，9H)；1,99(m，2H)；2,97(dd，2H)；3,5(se，1H)；5,10(s，2H)；5,24(s，2H)；7,40(s，1H)；7,59(t，1H)；7,83(t，1H)；7,90(d，1H)；8,20(d，1H)8,34(s，1H).RMN-C13(CDCl3)8,18；27,9034,59；45,34；49,9158,55；77,39；82,42；100,52；127,67；127,97；128,10；128,64；129,44；129,79；130,42；130,99；142,86；148,69；152,75；155,16；162,38；172,24.IR(KBr)764；1016；1157；1580；1651；1726.实施例2β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9氧代(11H)-中氮茚并[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸乙酯在氩气氛下，将含有10mg氢醌的锌(500mg，7.64mmol)和8-甲酰氧甲基-7-丙酰中氮茚并[1，2-b]喹啉-9(11H)-酮(400mg，1.15mmol)的无水四氢呋喃(20ml)悬浮液加热至回流。移走加热浴，通过加入一滴溴乙酸乙酯和一小颗碘结晶引发放热反应，通过滴加溴乙酸乙酯(500μl，4.48mmol)保持回流，然后该反应混合物再加热回流1小时。待冷却至室温后，加入饱和氯化铵(10ml)和甲醇(30ml)使反应停止。将所得混合物搅拌5分钟，然后过滤并蒸发。残余物溶于二氯甲烷(30ml)，用水洗涤并经硫酸钠干燥。之后除去溶剂并经柱色谱纯化(二氧化硅，二氯甲烷/甲醇98/2)，得到230mg(49％)黄色固体状目的化合物。熔点157-161℃。RMN-1H(CDCl3)0,93(t，3H)；1,20(t，3H)；2,02(m，2H)；3,07(dd，2H)；4,11(q，2H)；4,9(se，1H)；5,08(s，2H)；5,23(s，2H)；7,45(s，1H)；7,62(t，1H)；7,80(t，1H)；7,90(d，1H)；8,22(d，1H)；8,36(s，1H).RMN-C13(CDCl3)；8,09；14.01；34,67；44,85；49,94；58,31；61,09；77,21；100,78；127,78；127,96；128,11；128,72；129,16；129,65；130,60；131,32；142,76；148,28；152,55；155,09；162,22；172,59.IR(KBr)766；1009；1184；1582；1647；1750.实施例35-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮将β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯(1.45g，3.32mmol)溶于无水二氯甲烷(25ml)并用饱和盐酸的二氯甲烷(100ml)溶液处理。使所得混合物在-20℃保持16小时。将沉淀过滤并用甲醇洗涤，减压干燥，得到662mg(55％)黄色固体状目的化合物。熔点＞300℃。RMN-1H(DMSO)0,90(t，3H)；1,20(q，2H)；3,27(dd，2H)；5,29(s，2H)；5,49(dd，2H)；7,42(s，1H)；7,73(t，1H)；7,90(t，1H)；8,16(t，2H)；8,71(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,45；36,48；42,54；50,68；61,44；73,34；99,78；122,71；127,83；128,15；128,75；129,08；130,07；130,61；131,81；144,66；148,04；152,80；155,91；159,26；172,08.IR(KBr)761；1127；1204；1285；1580；1653；1757.实施例4β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸将氢氧化钾水溶液(0.1N，30ml)加到5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮(500mg，1.38mmol)中，室温下将所得悬浮液搅拌16小时，得到基本上澄清的溶液，过滤。用1N盐酸将滤液酸化到pH3.5，过滤收集黄色沉淀，用水和丙酮洗涤，然后减压干燥。得到415mg(79％)呈一水合物形式的目的化合物。熔点165-167℃。RMN-1H(DMSO)0,82(t，3H)；2,10(m，2H)；2,83 (d，2H)；3,12(d，2H)；3,25(se，1H)；4,81(s，2H)；5,26 (s，2H)；5,76(se，1H)；7,38(s，1H)；7,71(t，1H)；7,84(t，1H)；8,10(d，1H)；8,18(d，1H)；8,34(s，1H)；12,15(se，1H).RMN-C13(DMSO)8,16；34,80；46,71；50,36；55,73；76,53；100,17；127,50；128,00；128,26；128,69；129,06；130,01；130,45；131,63；142,57；148,09；153,19；156,07；161,22；172,27.1R(KBr)；1020；1188；1413；1586；1651；1694.实施例5β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸甲酯将5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并-[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮(180mg，0.5mmol)的甲醇(50ml)悬浮液用6N干燥氯化氢的甲醇(0.5ml)溶液处理，并保持回流直至完全溶解(4小时)为止。蒸发挥发性化合物，将残余物溶于二氯甲烷(50ml)，用稀氢氧化钠溶液(0.05N，15ml)和盐水(15ml)洗涤。有机馏分经硫酸钠干燥并蒸发。残留的固体经硅胶柱色谱纯化(3％甲醇/二氯甲烷)，纯化产物被溶解于乙醚之中，过滤并干燥，得到120mg(58％)浅黄色固体状目的化合物，熔点163-166℃。RMN-1H(CDCl3)0,93(t，3H)；2,2(m，2H)；3,05(dd，2H)；3,49(s，3H)；3,62(s，3H)；4,93(s，2H)；5,22(d，2H)；5,52(s，1H)；7,21(s，1H)；7,62(t，1H)；7,81(t，1H)；7,91(d，1H)；8,22(d，1H)；8,36(s，1H).RMN-C13(CDCl3)7,74；35,54；46,82；50,15；51,67；58,10；65,33；78,03；100,17；125,57；127,70；128,04；128,10；128,35；129,53；130,39；130,94；143,87；148,75；152,94；157,83；161,74；171,35.IR(KBr)1207；1595；2655；1709.实施例6β-乙基-α，α-二氟-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧代-(11H)-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸乙酯将总量溴二氟乙酸乙酯(1.8ml，14mmol)的约一半和如实施例1.b.)获得的8-甲酰氧甲基-7-丙酰中氮茚并[1，2-b]喹啉-9-(11H)-酮(2.0g，5.75mmol)的无水THF(10ml)悬浮液在氩气氛下滴加到回流的锌(1.25g，17.2mmol)的无水THF(40ml)悬浮液中，然后加入剩余的溴二氟乙酸乙酯。将该反应混合物再回流半小时。冷却至室温后，通过加入饱和氯化铵溶液(20ml)使反应停止，该反应混合物用二氯甲烷萃取(3×20ml)。将合并的有机萃取物干燥并浓缩。残余物被溶解到乙醚(10ml)中，过滤并经柱色谱纯化(二氧化硅，二氯甲烷/甲醇98/2)，得到664mg(26％)黄色固体状目的化合物。熔点208-209℃。RMN-1H(CDCl3)0,91(t，3H)；1,38(t，3H)；2,32(m，2H)；4,8(se，1H)；4,38(q，2H)；5,09(d-2H)；5,13(dd，2H)；7,42(s，1H)；7,55(t，1H)；7,72(t，1H)；7,79(d，1H)；8,08(d，1H)；8,22(s，1H)RMN-C13(CDCl3)6,97；13,93；28,63；50,18；56,27；63,15；77,20；81,96(t)；101,27；116,40(t)；127,67；127,77；127,97；128,31；129,26；130,33；130,94；131,23；143,16；148,34；150,20；151,91；161,21；163,21(t).IR(KBr)1124；1308；1591；1647；1748.实施例7β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸乙酯将锌(1.25g，19.1mmol)、8-甲基-7-丙酰基中氮茚并[1，2-b]喹啉-9-(11H)-酮(500mg，1.43mmol，例如按照Kingsbery，W.D.，四面体通讯296847(1988)获得)和乙酸银(250mg，1.50mmol)的无水四氢呋喃(10ml)悬浮液在室温、氩气氛下搅拌。10分钟后，滴加氯二乙基铝摩尔溶液(10ml，10mmol)，然后滴加溴乙酸乙酯(1.25ml，11.3mmol)活化反应混合物，使所得混合物再反应5小时。依次加入乙醇(10ml)和饱和酒石酸钾钠溶液(10ml)使反应停止。将所得混合物再搅拌1小时，过滤并减压浓缩。残余物回收到二氯甲烷(30ml)中，用水洗涤，干燥，浓缩并经柱色谱纯化(二氧化硅，二氯甲烷/甲醇98/2)，得到93mg(15％)浅黄色固体状目的化合物。熔点185-188℃。RMN-1H(CDCl3)0,91(t，3H)；1,17(t，3H)；1,99(m，2H)；2,49(s，3H)；3,10(dd，2H)；4,11(q，2H)；4,6(se，1H)；5,25(s，2H)；7,65(t，1H)；7,67(s，1H)；7,80(t，1H)；7,90(d，1H)；8,22(d，1H)；8,34(s，1H).RMN-C13(CDCl3)8,02；13,39；14,72；33,14；43,97；50,02；61,0；76,54；101,90；127,65；127,84；128,08；128,81；128,88；130,74；131,59；131,65；140,33；147,64；152,96；153,61；162,11；172,91.IR(KBr)762；1192；1576；1653；1740.实施例8β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯将乙酐(70μl，0.7mmol)滴加到β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯(200mg，0.46mmol)和三乙胺(140μl，1mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中，将所得混合物在室温搅拌21小时。蒸发挥发性组分，残余物经硅胶柱色谱纯化(1-2％甲醇/二氯甲烷)，得到152mg黄色固体状的目的化合物。熔点195-196℃。RMN-1H(CDCl3)0,88(t，3H)；1,32(s，9H)；1,93(m，2H)；2,07(s，3H)；2,97(dd，2H)；4,8(se，1H)；5,28 (s，2H)；5,59(dd，2H)；7,39(s，1H)；7,63(t，1H)；7,80(t，1H)；7,90(d，1H)；8,23(d，1H)；8,34(s，1H).RMN-C13(CDCl3)8,02；21,06；27,91；35,05；45,58；50,16；59,23；77,52；82,26；100,59；124,21；127,91；128,10；128,14；128,97；129,18；130,68；131,46；142,85；148,29；152,43；158,49；161,83；171,13；171,90.实施例95，12-二乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮除在1.a.步骤中使用7-乙基喜树碱(Sawada等，Chem.Pharm，Bull.392574(1991))代替喜树碱外，用类似于实施例1的方法制备该化合物。获得亮黄色固体状目的化合物，熔点＞270℃。RMN-1H(DMSO)0,92(t，3H)；1,39(t，3H)；1,93(q，2H)；3,08(d，2H)；3,25(q，2H)；3,51(d,2H)；5,32(s，2H)；5,52(dd，2H)；7,42(s，1H)；7,76(t，1H)；7,89(t，1H)；8,18(d，1H)B.32(d，1H).RMN-C13(DMSO)8,46；14,15；22,42；36,50；42,54；49,95；61,45；73,35；99,68；122,61；124,27126,76；127,70；128,27；129,92；130,18；145,17；145,82；148,57；152,15；155,89；159,26；172,08.实施例10β-乙基-γ-(12-乙基-8-羟甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-β-羟基-丙酸除使用5，12-二乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮代替5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮外，以类似于实施例4的方法制备该化合物。获得近乎白色的固体，熔点238-239℃。RMN-1H(DMSO)；0,82(t，3H)；1,35(t，3H)；2,01(m，2H)；2,85(d，2H)；3,18(d，2H)；3,22(q，2H)；4,81(s，2H)；5,00(se，1H)；5,24(s，2H)；5,78(se，1H)；7,38(s，1H)；7,77(t，1H)；7,86(t，1H)；8,18(d，1H)；8,28(d，1H)；12,10(se，1H).RMN-C13(DMSO)8,12；14,15；22,41；34,78；46,74；49,65；55,71；76,51；100,04；124,22；126,63；127,48；128,12；128,21；129,94；130,02；143,10；145,59；148,69；152,62；156,03；161,22；172,22.实施例118-乙基-2，3，8，9-四氢-8-羟基-10H，12H-[1，4]二氧杂环乙二烯并[2，3-g]庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-10，13(15H)-二酮11.a.2-乙基-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-1，3-二氧戊环(F)借助迪安-斯达克装置用一整夜时间从2-氯-4-丙酰吡啶(10g，59mmol)(如Lamattina，J.L.，杂环化学杂志20，553页(1983)获得的)，乙二醇(20ml)和对甲苯磺酸(250mg)在甲苯(150ml)中的混合物中以共沸方式蒸馏出水。然后减压蒸除溶剂，用饱和碳酸氢钠水溶液(100ml)中和酸，产物用乙醚萃取。将合并的醚萃取液用盐水洗涤、经硫酸钠干燥并蒸发，得到13.3g(96％)羰基保护的粗产物，将该粗产物与3当量甲醇钠的乙腈溶液回流直至反应完毕(用薄层色谱检测；二氧化硅，叔丁基甲基醚/己烷TBMO/HX 50/50)。然后将该乙腈溶液过滤、并蒸发，将残余物溶于乙醚，用水与盐水洗涤，用硫酸钠干燥、蒸发，得到棕色油，将该油蒸馏(70-75℃，0.04毫巴)；回收得到10.7g(总收率81％)澄清液体状产物(F)。11.b.2-乙基-2-(3-羟甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)-1，3-二氧戊环(G)在-78℃、氩气氛下，使用引流管将叔丁基锂(1.7M戊烷溶液，100ml，170mmol)滴加到溴代米(13ml，85mmol)的无水四氢呋喃(300ml)溶液中。将所得白色沉淀在-78℃搅拌一小时，然后加入2-乙基-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-1，3-二氧戊环(10g，44.8mmol)并将该反应混合物在-78℃搅拌15分钟，在0℃搅拌1小时和在室温搅拌1小时。再冷却至-78℃后，加入无水N，N-二甲基甲酰胺(100mmol)，将该反应混合物加热到室温，然后搅拌16小时，进行薄层色谱分析(二氧化硅，TBMO/HX 50/50)确定原料化合物是否耗尽。加入饱和氯化铵使反应停止，该反应混合物用乙醚萃取(200ml，50ml，50ml)。合并的萃取液经硫酸钠干燥并蒸发，得到黄色油，该油经柱色谱纯化(二氧化硅，TBMO/HX以0/100-5/95比例洗脱衍生物，然后用20/80-50/50洗脱产物)，得到中间体醛(7g)。将醛溶于甲醇(100ml)并用硼氢化钠(5g，132mmol)处理，搅拌所得混合物直至中间体醛完全耗尽为止(约1小时，通过薄层色谱分析确定)。然后蒸发溶剂，将残余物溶于乙醚中，用水和盐水洗涤，干燥并蒸发溶剂。残余物经柱色谱纯化(二氧化硅，TBMO/HX10/90-50/50)，得到7g(总收率62％)黄色油状产物(G)。11.c.2-(3-苄氧甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)-2-乙基-1，3-二氧戊环(H)将2-乙基-2-(3-羟甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)-1，3-二氧戊环(7g，30mmol)和苄基氯(5ml，45mmol)的无水四氢呋喃(50ml)溶液滴加到氢化钠(80％的矿物油分散液，1.85g，61mmol)的无水四氢呋喃(100ml)悬浮液中，将该反应混合物回流16小时。然后使反应混合物冷却到室温，用水(50ml)使反应停止并减压浓缩反应混合物。将残余物溶于乙醚(150ml)并用水和盐水洗涤，干燥并蒸发。经柱色谱纯化(二氧化硅，TBMO/HX 5/95-20/80)，得到9g(87％)澄清油状的苄基保护的产物(H)。11.d.1-(3-苄氧甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)-丙烷-1-酮(I’)在120℃浴温下，将2-(3-苄氧甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)-2-乙基-1，3-二氧戊环(9g，27mmol)用三氟乙酸(10ml)和水(5ml)处理3小时。将反应混合物减压浓缩，加入饱和碳酸氢钠水溶液中和残余的痕量酸。乙醚萃取后，经柱色谱纯化(二氧化硅，TBMO/HX 10/90)，得到5.5g(70％)产物(I)。11.e.β-乙基-β-羟基-γ-(3-苄氧甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)丙酸叔丁酯(J)将溴乙酸叔丁酯(13ml，80mmol)滴加到回流的锌(5.3g，80mmol，预先用6N HCl处理10秒钟活化，然后用水洗涤至中性pH，再依次用丙酮和乙醚洗涤)的无水四氢呋喃(60ml)悬浮液中。添加完毕后，使该反应物再回流10分钟。加入1-(3-苄氧甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)-丙烷-1-酮(5.8g，20mmol)的无水四氢呋喃(20ml)溶液，将该反应混合物在回流下搅拌1个小时。在0℃使用饱和氯化铵水溶液(100ml)使反应停止并用乙醚萃取该反应混合物。合并的萃取液经硫酸钠干燥并蒸发，得到黄色油，经柱色谱纯化(二氧化硅，TBMO/HX 5/95-10/90)，得到澄清油状的叔丁酯(J)(7g，95％)。11.f.β-乙基-β-羟基-γ-(3-羟甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)丙酸叔丁酯(K)在大气压和室温下，用5％钯/炭(50mg)为催化剂和无水乙醇(10ml)为溶剂氢解β-乙基-β-羟基-γ-(3-苄氧甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)丙酸叔丁酯(1g，2.5mmol)。一旦反应完成(6小时)，过滤分离出催化剂并蒸发溶剂，得到纯度足够用于随后合成反应的0.7g(90％)产物(K)。11.g.5-乙基-1，5-二氢-5-羟基-9-甲氧基-庚英[3，4-c]吡啶-3(4H)-酮(L)在室温将β-乙基-β-羟基-γ-(3-羟甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)丙酸叔丁酯(8.8g，28mmol)用三氟乙酸(30ml)处理3小时。蒸发挥发性成分，残余物经柱色谱纯化(二氧化硅，二氯甲烷/甲醇100/0-98/2)，得到澄清的油，用甲苯处理后，得到5.9g白色结晶产物(L)(89％)，熔点97-98℃。11.h 5-乙基-1，5-二氢-5-羟基-庚英[3，4-c]吡啶-3，9(4H，8H)-二酮(M)将1N盐酸(20ml)和5-乙基-1，5-二氢-5-羟基-9-甲氧基-庚英[3，4-c]吡啶-3(4H)-酮(0.5g，2.1mmol)加热回流9小时。减压浓缩该反应混合物，残余物通过两次加入甲苯干燥并蒸发，然后在五氧化磷的存在下减压放置过夜。所得油溶于无水乙腈(5ml)并在氩气氛下搅拌24小时。将沉淀过滤并干燥，得到0.23g(49％)白色固体(M)，熔点118-119℃。11.i.6，7-亚乙二氧基-2-碘-3-喹啉-甲醇(N)采用Meth-Cohn等在J.Chem.Soc.Perkin Trans.I，p.1520(1981)；Meth-Cohn，J.Chem.Soc.Perkin Trans.I，P.2509(1981)和Nakasinman等在J.Chem.Soc.112，p4431(1990)上描述的方法。将3，4-亚乙二氧基-N-乙酰苯胺(22g，113mmol)加到Vilsmeyer试剂中，后者的试剂是通过将磷酰氧氯(71ml，0.77mol)滴加到无水二甲基甲酰胺(23ml，0.28mol)中形成的，再在氩气氛中在冰水浴中冷却0.5小时。将所得混合物在75℃加热16小时。待冷却到室温后，将反应混合物加到冰水混合物(300ml)中并用二氯甲烷萃取(5×200ml)。合并的有机萃取液经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将固体残余物悬浮于二氯甲烷(20ml)中，过滤并减压干燥，得到10g(35％)黄色固体状的2-氯-6，7-亚乙二氧基-3-甲醛，熔点222-224℃。该中间体用碘化钠(30g，0.2mol)和浓盐酸(1.5ml)在乙腈(150ml)中回流处理24小时。冷却至室温后，减压除去溶剂，残余物溶于50％四氢呋喃水溶液(200ml)中，过滤，用四氢呋喃洗涤并减压干燥，得到12g黄色固体状6，7-亚乙二氧基-2-碘代喹啉-3-甲醛，熔点155-157℃。将上述中间体用硼氢化钠(2g，52mmol)在甲醇(200ml)中室温下处理0.5小时。减压除去溶剂，将残余物溶于水中并过滤。将所得固体在五氧化磷存在下减压干燥，得到11g黄色固体状(6，7-亚乙二氧基-2-碘代喹啉-3-基)-甲醇，熔点178-180℃。11.j.5-乙基-8-(6，7-亚乙二氧基-2-碘代-3-喹啉甲基)-1，5-二氢-5-羟基-庚英[3，4-c]吡啶3，9(4H，8H)-二酮(O)用5分钟将偶氮二甲酸二乙酯(570μl，3.6mmol)滴加到5-乙基-1，5-二氢-5-羟基-庚英[3，4-c]吡啶3，9(4H，8H)-二酮(400mg，1.79mmol)、前面11.i.步骤获得的化合物(770mg，2.23mmol)和三苯基膦(934mg，3.58mmol)在无水THF/DMSO(8/1 v/v，45ml)中的溶液中，将所得混合物在氩气氛下在室温搅拌16小时，然后减压浓缩该反应混合物，将残余物溶于氯仿(100ml)。所得溶液用盐水洗涤(4×50ml)，硫酸钠干燥并蒸发。残余物经柱色谱纯化(二氧化硅，二氯甲烷/甲醇；99/1-98/2)，得到650mg(66％)白色固体状的产物(O)，熔点165-167℃。11.k.8-乙基-2，3，8，9-四氢-8-羟基-10H，12H-[1，4]二氧杂环乙二烯并[2，3-g]庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-10，13(15H)-二酮在氩气氛下，将5-乙基-8-(6，7-亚乙二氧基-2-碘代喹啉-3-基)甲基-4，5-二氢-5-羟基(1H，3H)庚英[3，4-c]吡啶-3-二酮(600mg，1.1mmol)、四丁基溴化铵(352mg，1.1mmol)、乙酸钠(359mg，4.4mmol)和乙酸钯II(98mg，0.43mmol)溶于无水乙腈(40ml)并在90℃加热16小时。待冷却到室温后，将白色沉淀与红色溶液分离。将沉淀过滤并减压干燥。将粗产物悬浮于水中，过滤并在五氧化二磷存在下减压干燥，得到250mg透明的黄色固体状目的产物，m.p，＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,91(t，3H)；1,87(m，2H)；3,08(d，1H)；3,51(d，1H)；4,45(s，4H)；5,19(s，2H)；5,47(dd，2H)；6,02(se，1H)；7,33(s，1H)；7,54(s，1H)；7,55(s，1H)；8,43 (s，1H).RMN-C13(DMSO)8,43；36,47；42,54；50,52；61,43；64,43(2C)；73,31；99,07；112,27；113,14；122,00；124,24；128,18；129,74；144,59；145,01；145,33；147,63；150,88；155,88；159,23；172,07.实施例1210-苄氧基-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮12.a.(6-苄氧基-2-碘代-3-喹啉)-甲醇以类似于实施例11的11.i.步骤描述的方法，但使用4-苄氧基-N-乙酰苯胺代替3，4-亚乙二氧基-N-乙酰苯胺制备该化合物。经硅胶柱色谱纯化，使用二氯甲烷为洗脱液分离(8％回收率)得到足够纯度的中间体6-苄氧基-2-氯代喹啉-3-甲醛，熔点180-182℃。然后，通过卤素置换得到熔点为155～157℃的6-苄氧-2-碘代喹啉-3-甲醛，用硼氢化钠还原，得到(6-苄氧基-2-碘代喹啉-3-基)-甲醇，熔点147-149℃。12.b.8-(6-苄氧基-2-碘代-3-喹啉甲基)-1，5-二羟基-5-乙基-5-羟基-庚英[3，4-c]吡啶-3，9(4H，8H)-二酮以类似于实施例11的11.j.步骤描述的方法，但使用(6-苄氧基-2-碘代喹啉-3-基)-甲醇代替(6，7-亚乙二氧基-2-碘代喹啉-3-基)-甲醇制备该化合物。该化合物呈白色固体状，熔点197-199℃。12.c.10-苄氧基-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮以类似于实施例11的11.k.步骤所示的方法，但使用8-(6-苄氧基-2-碘代-3-喹啉甲基)-1，5-二羟基-5-乙基-5-羟基-庚英[3，4-c]吡啶-3，9(4H，8H)-二酮代替5-乙基-8-(6，7-亚乙二氧基-2-碘代喹啉-3-基)甲基-4，5-二氢-5-羟基-(1H，3H)庚英[3，4-c]吡啶-3-二酮制备该化合物。该目的化合物呈透明黄色固体状，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,90(t，3H)；1,85(m，2H)；3,08 (d，1H)；3,50(d，1H)；5,25(s，2H)；5,30(s，2H)；5,50(dd，2H)；6,05(s，1H)；7,30-7,70(m，8H)；8,10(d，1H)；8,55(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,43；36,48；38,28；50,65；61,42；70,00；73,32；99,05；107,71；122,05；123,42；128,1812826；128,70；129,40；130,19；130,48；130,63；136,65；144,18；144,90；150,53；155,91；157,31；159,24；172,06.实施例13γ-(12-苄氧基-8-羟甲基-9-氧代(11H)-中氧茚并[1，2-h]喹啉-7-剂)-β-乙基-β-羟基-丙酸(E)以类似于实施例4描述的方法，但使用10-苄氧基-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮代替5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮制备该化合物。该化合物呈黄色固体状，熔点171-173℃。RMN-1H(DMSO)0,80(t，3H)；2,00(m，2H)；2,85(d，1H)；3,15(d，1H)；4,80(s，2H)；5,25(s，2H)；5,30(s，2H)；5,75(se，1H)；7,30(s，1H)；7,35-7,70(m，7H)；8,10(d，1H)；8,55(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,11；34,75；46,68；50,35；55,70；69,97；76,51；99,45；107,78；123,28；127,64128,18(2C)；128,26；128,70(2C)；129,33；130,17；130,47；130,57；136,69；142,79；144,17；150,93；156,03；157,19；161,20.实施例145-乙基-4，5-二氢-5，10-二羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮在大气压、室温下，使用10％钯/炭(60mg)为催化剂和三氟乙酸(15ml)为溶剂，用氢处理10-苄氧基-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮(370mg，0.79mmol)。待反应结束(16小时)，往反应混合物中加入二氯甲烷(50ml)和甲醇(50ml)，滤除催化剂并减压蒸发挥发性成分，获得含有痕量三氟乙酸的目的化合物粗品。通过与1，4-二恶烷共蒸馏除去痕量酸。获得的产物呈橙色固体状，熔点150℃(分解)，其纯度足以用于下步合成反应。RMN-1H(DMSO)0,89(t，3H)；1,85(q，2H)；3,02(d，1H)；3,45(d，1H)；5,19(s，2H)；5,37(d，1H)；5,50(d，1H)；5,98(se，1H)；7,26(s 1H)；7,31(s，1H)；7,40(d，1H)；8,00(d，1H)；8,42(s，1H)；10,32(s，lH).RMN-C13(DMSO)8,47；36,50；42,61；50,57；61,46；73,35；98,84；109,02；121,83；123,18；129,50；129,85；130,12；130,80；143,39；145,10；149,69；155,97；156,82；159,30；172,11.实施例1511-(二甲氨基)甲基-5-乙基-4，5-二氢-5，10-二羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮15.a.11-(二甲氨基)甲基-5-乙基-4，5-二氢-5，10-二羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮将10-苄氧基-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮(260mg，0.69mmol)的乙酸(15ml)悬浮液用37％甲醛水溶液(500μl)和40％二甲胺水溶液(500μl)处理，所得混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物浓缩至干，残余物经柱色谱纯化(二氧化硅，二氯甲烷/甲醇；100/0-90/10)，然后用乙腈结晶，得到102mg目的产物。15.b.11-(二甲氨基)甲基-5-乙基-4，5-二氢-5，10-二羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮盐酸盐将1N稀盐酸滴加到11-(二甲氨基)甲基-5-乙基-4，5-二氢-5，10-二羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮(102mg)的水悬浮液中直至完全溶解为止。减压蒸发水，将残余物悬浮在乙腈(5ml)中，过滤，得到103mg目的盐，熔点248℃(分解)。RMN-1H(DMSO)；0,88(t，3H)；1,85(m，2H)；2,84(s，6H)；3,08(d，1H)；3,5(d，1H)；4,73(s，2H)；5,25(s，2H)；5,47(dd，2H)；7,33(s，1H)；7,38(s，1H)；7,72(d，1H)；8,19(d，1H)；8,99(s，1H)；9,92(se，1H)；11,45(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,46；34,36；42,44(3C)；50,61(2C)；61,42；73,35；99,19；108,63；122,21；122,36；126,86；129,13；130,61；133,09；143,53；144,70；149,76；155,98；157,17；159,27；172,06.实施例165-乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例11的11.i.、11.j.和11.k.步骤描述的方法，由3-氟-4-甲氧基苯胺制备该化合物。获得黄色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)；0,89(t，3H)；1,85(q，2H)；3,08(d，1H)；3,49(d，1H)；4,00(s，3H)；5,25(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d，1H)；6,00(s，1H)；7,32(s，1H)；7,72(d，1H)；7,91(d，1H)；8,58(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,43；36,48；42,51；50,68；56,60；61,42；73,29；99,25；108,68；113,52；122,23；126,33；129,99；130,30；143,79；144,70；148,42；151,18；153,19；155,81；159,20；172,06.IR(KBr)1259；1503；1602；1737.实施例179-氯-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-10-甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例11的11.i.、11.j.和11.k.步骤描述的方法，由3-氯-4-甲氧基苯胺制备该化合物。获得黄色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)1,85(q，2H)；2,55(s，3H)；3,07(d，1H)；3,45(d，1H)；5,25(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d，1H)；6,05(s，1H)；7,39(s，1H)；8,10(s，1H)；8,20(s，1H)；8,60(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,43；20,20；36,47；42,49；50,67；61,41；73,28；99,87；122,82；126,98；127,99；129,60；130,53；131,08；135,64；136,56；144,39；147,11；153,10；155,85；159,18；172,03.IR(KBr)；1208；1479；1606；1656；1724.实施例185-乙基-9，10-二氟-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例11的11.i.、11.j.和11.k.步骤描述的方法，由3，4-二氟苯胺制备该化合物。获得黄色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,47(d，1H)；5,25(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d，1H)；6,05(s，1H)；7,39(s，1H)；8,15(q，1H)；8,25(q，1H)；8,68(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,41；36,45；42,48；50,68；61,40；73,25；99,92；114,44；115,42；115,58；122,96；125,52；130,56；131,46；144,21；145,25；142,36；153,41；155,85；159,15；172,00.IR(KBr)1266；1512；1581；1618；1751.实施例197-乙基-7，8-二氢-7-羟基-9H，11H-[1，3]间二氧杂环戊烯并[4，5-g]庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-9，12(14H)-二酮按照实施例11的11.i.、11.j.和11.k.步骤描述的方法，由3，4-亚甲二氧基苯胺制备该化合物。获得乳白色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,45(d，1H)；5,20(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d，1H)；6,00(s，1H)；6,30(s，2H)；7,30(s，1H)；7,49(d，2H)8,45(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,43；36,49；42,56；50,58；61,42；73,31；98,87；102,75；103,33；104,92；121,76；125,74；128,59；130,33；145,08；146,69；148,78；150,19；151,49；155,90；159,24；172,08.IR(KBr)1248；1459；1606；1731.实施例209-氯-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例11的11.i.、11.j.和11.k.步骤描述的方法，由3-氯-4-甲氧基苯胺制备该化合物。获得白色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,45(d，1H)；4,01(s，3H)；5,22(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d，1H)；6,02(s，1H)；7,31(s，1H)；7,68(s，1H)；8,20(s，1H)；8,55(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,22；36,27；42,30；50,48；56,69；61,23；73,08；99,16；107,44；122,16；127,12；128,12；129,25；130,02；130,53；143,29；144,37；151,12；153,29；155,71；158,98；171,84.1R(KBr)；1056；1256；1483；1592；1657；1747.实施例215-乙基-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例11的11.i.、11.j.和11.k.步骤描述的方法，由4-甲氧基苯胺制备该化合物。获得黄色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,45(d、1H)；3,95(s，3H)；5,28(s，2H)；5,40(d，1H)；5,51(d，1H)；6,00(s，1H)；7,38(s，1H)；7,51(d，2H) 8,07(d，1H)；8,55(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,45；36,48；42,51；50,64；55,92；61,42；73,33；99,01；106,49；122,02；123,19；129,59；130,20；130,43；144,17；144,94；150,40；155,92；158,31；159,26；172,07.IR(KBr)1251；1604；1655；1735.实施例229，11-二氯-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例11的11.i.、11.j.和11.k.步骤描述的方法，由3，5-二氯苯胺制备该化合物。获得黄色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,45(d，1H)；5,30(s，2H)5,41(d，1H)；5,55(d，1H)；6,08(s，1H)；7,41(s，1H)；8,05(s，1H)；8,21(s，1H)；8,91(s,1H).RMN-C13(DMSO)8,39；36,45；42,51；51,03；61,39；73,25；100,62；123,55；124,63；127,60；128,08；128,56；132,06；132,19；134,53；143,77；148,80；154,88；155,82；159,13；171,98.IR(KBr)；1064；1275；1586；1651；1743.实施例235-乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-10-甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例11的11.i.、11.j.和11.k.步骤描述的方法，由3-氟-4-甲基苯胺制各该化合物。获得黄色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,89(t，3H)；1,85(q，2H)；2,49(s，3H)；3,08(d，1H)；3,49(d，1H)；5,21(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d,1H)；6,05(s，1H)；7,39(s，1H)；7,87(d，1H)；8,05(d，1H)；8,61(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,40；15,14；36,45；42,52；50,60；61,41；73,28；99,71；112,00；122,66；125,38；127,66；129,59；130,28；144,49；147,88；152,88；155,85；159,18；162,25；172,02.IR(KBr)；1054；1580；1651；1760.实施例245-乙基-10-氟-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例11的11.i.、11.i.和11.k.步骤描述的方法，由4-氟苯胺制备该化合物.获得白色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)；0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,45(d，1H)；5,29(s，2H)；5,39(d，1H)5,55(d，1H)；6,30(s，1H)7,39(s，1H)；7,80(q，1H)；7,99(q，1H)；8,23(q，1H)；8,68(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,40；36,46；42,48；50,66；61,41；73,31；99,68；111,83；122,75；128,93；130,93；131,22；131,93；144,46；145,27；152,60；155,89；159,21；172,04.IR(KBr)1209；1589；1659；1739.实施例2510-氯-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例11的11.i.、11.j.和11.k.步骤描述的方法，由4-氯苯胺制备该化合物。获得黄色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,47(d，1H)；5,25(s，2H)；5,39(d,1H)；5,51(d，1HD；6,05(s，1H)；7,39(s，1H)；7,89(d，1H)；8.19(d，1H)；8,29(s，1H)；8,67(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,40；36,46；42,47；50,70；61,42；73,31；100,000；122,96；127,31；127,42；128,87；131,11；132,12；144,34；146,53；153,38；155,88；159,20；172,04.IR(KBr)1069；1483；1606；1741.实施例2610-氯-5-乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例11的11.i.、11.j.和11.k.步骤描述的方法，由4-氯-3-氟苯胺制备该化合物。获得黄色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,45(d，1H)；5,25(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d，1H)；6,05(s，1H)；7,40(s，1H)；8,20(d，1H)；8,40(d，1H)；8,68(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,38；36,47；42,58；50,71；61,40；73,26；99,99；113,59；123,09；124,28；127,74；130,64；131,31；144,13；145,08；153,57；154,13；155,84；156,61；159,14；172,00.IR(KBr)1488；1583；1655；1743.实施例275，12-二乙基-4，5-二氢-5，10-二羟基-11-吗啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例15.a.描述的方法，由吗啉制备该化合物。获得白色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,87(q，2H)；2,53(s，4H)；3,03(d，1H)；3,45(d，1H)；3,57(s，4H)；4,02(s，2H)；5,01(s，2H)；5,38(d，1H)；5,52(d，1H)；6,0(se，1H)；7,30(s，1H)；7,42(d，1H)；7,95(d，1H)；8,82(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,45；3,49；42,58；53,04；61,44；66,33；73,33；98,81；113,78；121,81；122,74；126,80；129,05；129,91；143,72；145,07；149,24；155,06；156,92；159,28；172,08.IR(KBr)；1515；1595；1654；1736.实施例285，12-二乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮28.a.5-氟-4-甲氧基-2-丙酰苯胺(该产物可按照Sugasawa T.；Toyoda T.；Adachi M.；Saskura K.，美国化学会志，100(1978)，p4842-4852所述的方法获得)。在氩气氛和0℃下，将3-氟-4-甲氧基苯胺(20g，142mmol)的无水二氯甲烷(200ml)溶液滴加到三氯化硼(1M庚烷溶液；156ml，156mmol)中。将如此获得的粉色悬浮液搅拌5分钟。然后分多次滴加丙腈(33ml，420mmol)和三氯化铝(20.8g，156mmol)。将该反应物加热回流3小时，冷却到0℃，小心地加入2N盐酸(100ml)使其水解，然后加热回流45分钟。冷却到0℃后，过滤得到的沉淀，用二氯甲烷洗涤，然后回收到水(300ml)中。水相碱化为碱性pH，依次用二氯甲烷和乙酸乙酯萃取。将有机相干燥(MgSO4)并蒸发，得到粗产物，经柱色谱纯化(二氧化硅，乙酸乙酯/庚烷1/99-20/80)。获得15.3g黄色固体。RMN-1H(CDCl3)1,20(t，3H)；2,92(q，2H)；3,83(s，3H)；6,2(s，2H)；6,40(d，2H)；7,32(d，2H).IR(KBr)85,7；1148；1240；1561；1583；1662.28.b.4-乙基-7-氟-2-羟基-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯在氩气氛和0℃下，将5-氟-4-甲氧基-2-丙酰苯胺(15.3g，77.5mmol)和三乙胺(13.9ml，100mmol)的无水乙腈(110ml)溶液滴加到乙基丙二酰氯(12.9ml，100mmol)的无水乙腈(30ml)溶液中。使该反应物升至室温，用引流管氩气氛下加乙醇钠溶液(用1.8g，78mmol钠在80ml乙醇中获得)，然后将其在室温搅拌12小时。将该反应混合物倾入冰水(100ml)中并搅拌2小时，然后将沉淀过滤并用水、乙醇和乙醚洗涤。获得19.4g白色固体。RMN-1H(DMSO)1,25(m，6H)；2,78(q，2H)；3,92(s，3H)；4,30(q，2H)；7,15(d，2H)；7,40(d，2H)；11,93(s，1H).IR(KBr)；786；1083；1410；1521；1644；1725.28.c.2-氯-4-乙基-7-氟-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯将4-乙基-7-氟-2-羟基-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯(19.4g，0.066mol)在磷酰氯(243ml)中的悬浮液加热回流6小时。蒸馏该磷酰氯。将反应混合物倾入冰水中。用二氯甲烷溶解。有机相用水洗涤，然后用饱和氯化钠溶液洗涤。有机相经硫酸镁干燥并蒸发溶剂。将残余物悬浮在乙醚中，过滤除去未转化的原料(4g)。蒸发滤液，残余物经柱色谱纯化(二氧化硅，乙酸乙酯/庚烷5/95-20/80)。获得10.9g白色固体。RMN-1H(DMSO)1,30(t，3H)；1,39(t，3H)；3,08(q，2H)；4,09(s，3H)；4,49(q，2H)；7,64(d，2H)；7,86(d，2H).IR(KBr)865；1016；1082；1190；1224；1253；1272；1508；1571；1732.28.d.2-氯-4-乙基-7-氟-6-甲氧基-3-喹啉甲醇在室温和惰性气体氛围下，往2-氯-4-乙基-7-氟-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯(10.8g，35mmol)的无水二氯甲烷(200ml)溶液中滴加二异丁基氢化铝(1M二氯甲烷溶液，65ml，65mmol)，然后在40℃加热4小时。冷却到0℃，小心地加入20％(105ml)洒石酸钾钠盐的水溶液和二氯甲烷(200ml)并搅拌1小时。滗析，用水洗涤三次，用硫酸镁干燥有机相并蒸发溶剂。残余物经柱色谱纯化(二氧化硅，乙酸乙酯/庚烷5/95-50/50)。获得6g白色固体。RMN-1H(DMSO)1,28(t 3H)；3,25(q，2H)；4,04(s，3H)；4,77(d，2H)；5,27(t，1H)；7,55(d，2H)；7,73(d，2H).IR(KBr)；840；864；1023；1232；1267；1317；1444；1511；1569.28.e.5，12-二乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮如实施例11的11.j.步骤所述，将2-氯-4-乙基-7-氟-6-甲氧基-3-喹啉甲醇与化合物(M)偶合。按照11.k.步骤的方法环化所得的偶合产物。获得黄色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(CF3COOD)1,07(m，3H)；1,62(m，3H)；2,27(m，2H)；3,44(d，1H)；3,54(m，2H)；3,91(d，1H)；4,25(s，3H)；5,60(d，1H)；5,74(s，2H)；5,98(d，1H)；7,85(m，1H)；8,16(m，1H)；8,31(s，1H).RMN-C13(CF3COOD)；9,03；14,20；26,68；38,77；43,98；53,79；58,27；64,73；77,93；106,85；109,24；110,15；128,99；129,20；131,61；137,32；141,23；144,13；154,79；158,32；160,25；160,81；179,30.IR(KBr)1013；1068；1265；1466；1514；1601；1655；1748.实施例295-乙基-4，5-二氢-5-羟基-12-甲基-1H-庚英[3’，4’；6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮使用实施例28.b.，28.c.和28.d.所述的方法，由2-乙酰苯胺得到2-氯-4-甲基-3-喹啉甲醇。如实施例11的11.j.步骤所述，将后者与化合物(M)偶合。按照11.k.步骤的方法环化所得的偶合产物。获得黄色固体，熔点＞260℃。RMN1H(DMSO)；0,87(t，3H)；1,87(q，2H)；2,78(s，3H)；2,80(d，1H)；3,55(d，1H)；5,27(s，2H)；5,42(d，1H)；5,52(d，1H)；6,04(s，1H)；7,39(s，1H)；7,75(t，1H)；7,88(t，1H)；8,13(d，1H)；8,25(d，1H).RMN-C13(DMSO)8,23；36,26；42,36；62,00；73,11；78,65；79,13；79,25；99,52；122,36；124,30；127,67；129,54；129,55；129,56；140,11；145,06；148,07；152,00；155,79；159,09；171,89.IR(KBr)；1649；1751；3404.实施例309-氯-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮30.a.5-氯-2-氯乙酰基-4-甲氧基苯胺该产物按照Sugasawaa T.；Toyoda T.；Adachi M.；Sasakura K.在美国化学会志，100(1978)，p4842-4852描述的方法获得。在惰性气体氛围和0℃下，将三氯化硼的己烷摩尔溶液(164ml，164mmol)、氯乙腈(11.4ml，180mmol)和二乙基氯化铵的己烷摩尔溶液(164ml，164mmol)依次滴加到3-氯-4-甲氧基苯胺(23.6g，150mmol)的溶液中。将该反应物加热回流1小时，然后冷却到0℃，小心地加入2N盐酸(90ml)使其水解，然后继续回流1小时。再次冷却并加入浓碳酸氢钠溶液直至pH达14。该溶液用乙酸乙酯萃取；有机相用水、然后用盐水洗涤。经硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。将残余物溶于异戊烷中，滗析，然后将不溶物溶于最少量异丙醚中，通过加入异戊烷沉淀产物。过滤并真空干燥。获得17.26g棕色固体。RMN-1H(CDCl3)3,82(s，3H)；4,60(s，2H)；6,11(s，2H)；6,78(s，1H)；7,11(s，1H).30.b.7-氯-4-氯代甲基-2-羟基-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯在氩气氛和0℃下，将乙基丙二酰氯溶液(17ml，131mmo1)滴加到5-氯-2-氯乙酰基-4-甲氧基苯胺(17g，73mmol)和三乙胺(18.5ml，131mmol)的无水乙腈(310ml)溶液中。在室温搅拌2小时，然后在0℃滴加乙醇钠的乙醇溶液(由1.88g，80mmol钠在90ml乙醇中获得)。在室温搅拌12小时。加入300ml水后，再搅拌20分钟。过滤沉淀；用水、乙醇和乙醚洗涤。真空干燥后，获得16.7g黄色固体。RMN-1H(DMSO)1,31(t，3H)；3,95(s，3H)；4,36(q，2H)；4,95(s，2H)；7,46(s，1H)；7,49(s，1H).30.c.2，7-二氯-4-氯甲基-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯将7-氯-4-氯代甲基-2-羟基-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯(116.7g，50mmol)在磷酰氯(100ml)中的悬浮液加热回流6小时。蒸发磷酰氯。将残余物溶于水中，搅拌30分钟。过滤沉淀并用水洗涤至中性为止。将沉淀溶于二氯甲烷并用饱和氯化钠溶液洗涤。经硅藻土层过滤，滗析滤液。有机相再次用饱和氯化钠溶液洗涤。经硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。获得15.88g棕色油。RMN-1H(CDC13)1,47(t，3H)；4,08(t，3H)；4,55(q，2H)；4,87(s，2H)；7,35(s，1H)；8,09(s，1H).30.d.2，7-二氯-6-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪甲基)-3-喹啉羧酸乙酯将2，7-二氯-4-氯甲基-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯(6.9g，20mmol)和N-甲基哌嗪(9ml，80mmol)的混合物在60℃加热30分钟。该反应物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。滗析，有机相用水洗涤。经硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。将残余物溶于水中，搅拌15分钟，过滤，用水洗涤并真空干燥。残余物经柱色谱纯化(二氧化硅，甲醇/二氯甲烷；5/95-8/92)。获得6.7g米色固体产物。RMN-1H(CDCl3)1,45(t，3H)；2,28(s，3H)；2,35-2,70(m，8H)；3,86(s，2H)；4,04(s，3H)；4,48(q，2H)；7,77(s，1H)；8,05(s，1H).30.e.2，7-二氯-6-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪甲基)-3-喹啉甲醇将2，7-二氯-6-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪甲基)-3-喹啉羧酸乙酯(6g，14.5mmol)溶于二氯甲烷(120ml)。缓慢地加入二异丁基氢化铝的二氨甲烷摩尔溶液(60ml，60mmol)。在室温搅拌1小时。将反应物缓慢地倾入300ml20％洒石酸钾钠盐溶液中。搅拌1小时；滤过硅藻土；滗析，有机相用饱和氯化钠溶液洗涤。经硫酸镁干燥，过滤并进行减压蒸发。获得4.3g黄色固体状的目的产物。RMN-1H(CDCl3)2,27(s，3H)；2,30-2,80(m，8H)；4,03(s，3H)；4,08(s，2H)；4,96(s，2H)；5,95(s，1H)；7,37(s，1H)；8,05(s，1H).30.f.9-氯-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮如实施例11的11.j.步骤描述的方法将2，7-二氯-6-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪甲基)-3-喹啉甲醇与化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法将所得偶合产物环化。获得黄色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,87(t，3H)；1,84(q，2H)；2,53(s，4H)；3,08(d，1H)；3,47(d，1H)；3,58(s，4H)；4,06(s，5H)；5,30(s，2H)；5,42(q，2H)；6,03(s，1H)；7,31(s，1H)；7,91(s，1H)；8,16(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,42；36,53；50,65；5330；56,67；62,00；66,50；73,32；99,31；104,86；122,32；126,94；127,70；129,83；130,44；138,89；144,22；144,85；151,05；153,17；155,92；159,19；172,06.IR(KBr)；862；1063；1116；1248；1595；1655；1744；3449.实施例319-氯-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-12-吗啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由3-氯-4-甲氧基苯胺获得2，7-二氯-6-甲氧基-4-氯代甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照实施例30.d的方法用吗啉代替N-甲基哌嗪处理所得产物，然后按照实施例30.e.的方法还原，获得相应的喹啉甲醇。如实施例11的11.j.步骤所述，将后者与化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，将所得偶合产物环化。获得米色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,87(t，3H)；1,84(q，2H)；2,15(s，3H)；2,32(s，4H)；2,50(s，4H)；3,08(d，1H)；3,47(d，1H)；4,06(s，5H)；5,29(s，2H)；5,46(q，2H)；6,06(s，1H)；7,31(s，1H)；7,92(s，1H)；8，17(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,42；36,51；42,57；45,93；50,66；52,83；55,05；56,09；56,72；61,44；73,29；99,30；104,89；122,32；126,89；127,63；129,85；130,16；138,78；144,18；144,81；151,03；153,10；155,10；159,17；172,07.IR(KBr)1055；1252；1596；1655；1747；3449.实施例325-乙基-4,5-二氢-5-羟基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由苯胺获得2-氯-4-氯代甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照实施例30.d的方法用N-甲基哌嗪处理所得产物，然后按照实施例30.e.的方法还原，获得相应的喹啉甲醇。如实施例11的11.j.步骤所述，将后者与化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，将所得偶合产物环化。获得黄色固体，熔点＞260℃。RMN-1H(DMSO)0,86(t，3H)；1,87(q，2H)；2,14(s，3H)；2,32-2,60(m，8H)；3,05(d，1H)；3,48(d，1H)；4,09(q，2H)；5,42(d，1H)；5,52(d，1H)；6,03(se，1H)；7,40(s，1H)；7,72(t，1H)；7,85(t，1H)；8,16(d，1H)；8,45(d，1H).IR(KBr)1652；1735；3424.实施例335-乙基-4，5-二氢-5-羟基-12-哌啶子基甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由苯胺获得2-氯-4-氯代甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照实施例30.d的方法用哌啶代替N-甲基哌嗪处理所得产物，然后按照实施例30.e.的方法还原，获得相应的喹啉甲醇。如实施例11的11.j.步骤所述，将后者与化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，将所得偶合产物环化。获得黄色固体，熔点＞260℃。RMN-1H(DMSO)0,86(t，3H)；1,40(se，2H)；1,48(se，4H)；1,87(q，2H)；2,50(s，4H)；3,05(d，1H)；3,48(d，1H)；4,04(q，2H)；5,33(s，2H)；5,42(d，1H)；5,51(d，1H)；6,07(se，1H)；7,75(t，1H)；7,85(t，1H)；8,15(d，1H)；8,45(d，1H).RMN-C13(DMSO)8,47；23,50；25,82；36,50；42,50；50,68；54,47；58,00；61,42；73,35；99,55；122,61；125,31；127,58；129,54；129,55；129,56；129,57；140,49；144,95；148,63；152,41；155,90；159,23；172,07.IR(KBr)1659；1727；3408.实施例34；5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-12-吗啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由苯胺获得2-氯-4-氯代甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照实施例30.d的方法用吗啉代替N-甲基哌嗪处理所得产物，然后按照实施例30.e.的方法还原，获得相应的喹啉甲醇。如实施例11的11.j.步骤所述，将后者与化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，将所得偶合产物环化。获得黄色固体，熔点＞260℃。RMN-1H(DMSO)0,86(t，3H)；1,87(q，2H)；3,05(d，1H)；3,30(s，4H)；3,49(d，1H)；3,55(se，4H)；4,10(q，2H)；5,35(s，2H)；5,40(d，1H)；5,54(d，1H)；6,04(s，1H)；7,72(t，1H)；7,85(t，1H)；8,16(d，1H)；8,47(d，1H).RMN-C13(DMSO)8,42；36,51；42,57；50,68；53,51；56,06；61,42；66,41；73,34；99,56；122,64；125,25；127,56；129,81；139,55；144,92；148,62；152,39；155,89；159,21；172,05.IR(KBr)1657；1729；3347.实施例355-乙基-10-氟-4，5-二氢-5-羟基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由4-氟苯胺获得2-氯-4-氯代甲基-6-氟-3-喹啉羧酸乙酯，按照实施例30.d的方法用N-甲基哌嗪处理所得产物，然后按照实施例30.e.的方法还原，获得相应的喹啉甲醇。如实施例11的11.j.步骤所述，将后者与化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，将所得偶合产物环化。获得黄色固体，熔点＞275℃。RMN-1H(DMSO)0,87(t，3H)；1,85(q，2H)；2,15(s，3H)；2,31(m，4H)；2,50(m，4H)；3,07(d，1H)；3,48(d，1H)；4,04(m，2H)；5,31(s,2H)；5,40(d,1H)；5,53(d,1H)；6,05(s,1H)；7,38(s,1H)；7,77(m，1H)；8,19(m,2H).RMN-C13(DMSO)；8,43；36,51；42,54；45,89；50,67；52,92；54,93；55,92；73,32；99,56；122,69；130,43；132,40；139,69；144,70；145,84；152,19；155,90；159,17；172,05.IR(KBr)836；1051；1217；1291；1612；1662；1726.实施例365-乙基-10-氟-4，5-二氢-5-羟基-12-吗啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由4-氟苯胺获得2-氯-4-氯代甲基-6-氟-3-喹啉羧酸乙酯，按照实施例30.d的方法用吗啉代替N-甲基哌嗪处理所得产物，然后按照实施例30.e.的方法还原，获得相应的喹啉甲醇。如实施例11的11.j.步骤所述，将后者与化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，将所得偶合产物环化。获得米色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,87(m,3H)；1,85(m,2H)；2,51(m,4H)；3,06(d，1H)；3,48(d，1H)；3,56(m，4H)；4,05(m，2H)；5,34(s,2H)；5,40(d，1H)；5,53(d，1H)；6,04(s，1H)；7,38(s，1H)；7,77(m，1H)；8,21(m，2H).RMN-C13(DMSO)8,40；36,47；42,52；50,59；53,40；56,14；61,44；66,41；73,29；99,58；109,05；109,28；120,11；120,37；122,68；128,53；130,53；132,43；139,13；144,62；145,79；152,07；155,94；159,14；161,59；172,04.IR(KBr)834；860；1061；1118；1215；1286；1516；1609；1658；1734.实施例375-乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-10-甲基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由3-氟-4-甲基苯胺获得2-氯-4-氯代甲基-7-氟-6-甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照实施例30.d的方法用N-甲基哌嗪处理所得产物，然后按照实施例30.e.的方法还原，获得相应的喹啉甲醇。如实施例11的11.j.步骤所述，将后者与化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，将所得偶合产物环化。获得黄色固体，熔点＞260℃。RMN-1H(CDCl3)1,00(t，3H)；2,00(q，2H)；2,35(s，3H)；2,50(s，3H)；2,61(m，8H)；3,33(d，1H)；3,39(d，1H)；3,97(d，1H)；4,07(d，1H)；5,17(d，1H)；5,38(d，1H)；5.52(d，1H)；5,63(d，1H)；7,13(d，1H)；7,28(s，1H)；7,99(d，1H).IR(KBr)；1652；1747；3430.实施例385-乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-10-甲基-12-吗啉代甲基-1H-庚英[3’，4’；6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由3-氟-4-甲基苯胺获得2-氯-4-氯代甲基-7-氟-6-甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照实施例30.d的方法用吗啉代替N-甲基哌嗪处理所得产物，然后按照实施例30.e.的方法还原，获得相应的喹啉甲醇.如实施例11的11.j.步骤所述，将后者与化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，将所得偶合产物环化。获得黄色固体，熔点＞260℃。RMN-1H(DMSO+CDCl3)1,00(t，3H)；2,02(q，2H)；2,57(s，3H)；2,60(s，4H)；3,23(d，1H)；3,45(d，1H)；3,75(s，4H)；4,11(s，2H)；5,44(s，2H)；5,47(d，1H)；5,65(d，1H)；7,62(s，1H)；7,73(d，1H)；8，24(d，1H).RMN-C13(CF3CO2D)8,35；13,93；16,01；22,24；25,29；38,18；43,42；54,19；56,04；56,74；64,16；65,09；77,48；108,29；108,57；128,07；128,70；129,90；135,64；138,03；139,86；141,10；141,56；147,78；158,30；161,87；178,72.IR(KBr)；117；1609；1654；1750；3437.实施例395-乙基-9-氟-4，5-二氢-5-羟基-10-甲基-12-哌啶子基甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由3-氟-4-甲基苯胺获得2-氯-4-氯代甲基-7-氟-6-甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照实施例30.d的方法用哌啶代替N-甲基哌嗪处理所得产物，然后按照实施例30.e.的方法还原，获得相应的喹啉甲醇。如实施例11的11.j.步骤所述，将后者与化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，将所得偶合产物环化。获得黄色固体，熔点＞260℃。RMN-1H(CF3CO2D)1,09(s，3H)；1,70(t，1H)；2,03(m，5H)；2,25(s，2H)；2,70(s，3H)；3,54(d，3H)；3,88(d，1H)；4,01(se，2H)；5,30(q，2H)；5,65(d，1H)；5,96(d，1H)；6,10(s，2H)；8,16(d，1H)；8,35(s，1H)；8,61(s，1H).RMN-C13(CF3CO2D)8,47；16,07；20,93；22,18；24,76；38,28；43,53；54,30；56,12；58,33；64,24；77,56；108,37；111,30；128,20；129,02；129,98；135,60；138,29；139,90；141,60；142,26；147,57；158,28；161,90；167,63；170,31；178,82.IR(KBr)1605；1657；1728；3399.实施例408-乙基-2，3，8，9-四氢-8-羟基-16-(4-甲基哌嗪甲基)-10H，12H-(1，4)二氧杂环乙烯并(2，3-g)庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-10，13(15H)-二酮按照实施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由3，4-亚乙二氧基苯胺获得2-氯-4-氯代甲基-6，7-亚乙二氧基-3-喹啉羧酸乙酯，按照实施例30.d的方法用N-甲基哌嗪处理所得产物，然后按照实施例30.e.的方法还原，获得相应的喹啉甲醇。如实施例11的11.j.步骤所述，将后者与化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，将所得偶合产物环化。获得黄色固体，熔点＞260℃。RMN-1H(DMSO)；0,92(t，3H)；1,89(q，2H)；2,16(s，3H)；2,50(m，8H)；3,12(d，1H)；3,50(d，1H)；3,95(s，2H)；4,47(s，4H)；5,19(q，2H)；5,43(d，1H)；5,56(d，1H)；7,35(s，1H)；7,54(s，1H)；7,76(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,45；24,80；36,51；42,4g；45,90；50,45；52,98；54,91；56,10；61,44；64,43；73,30；99,03；109,46；113,51；121,95；123,51；127,76；137,99；145,00；145,14；145,27；147,24；150,53；155,99；159,18；172,27；177,00.IR(KBr)1656；1743；3422.实施例419-氯-5-乙基-10-氟-4，5-二氢-5-羟基-12-吗啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照实施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由3-氯-4-氟苯胺获得2，7-二氯-4-氯代甲基-6-氟-3-喹啉羧酸乙酯，按照实施例30.d的方法用吗啉代替N-甲基哌嗪处理所得产物，然后按照实施例30.e.的方法还原，获得相应的喹啉甲醇。如实施例11的11.j.步骤所述，将后者与化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，将所得偶合产物环化。获得米色固体，熔点＞250℃。RMN-1H(CF3COOD)；1,09(t，3H)；2,30(m，2H)；3,50(d，1H)；3,90(d，1H)；3,98(d，4H)；4,36(s，4H)；5,38(q，2H)；5,64(d，1H)；5,96(d，1H)；6,23(q，2H)；8,57(d，1H)；8,60(s，1H)；8,85(d，1H).RMN-C13(CF3COOD)；8,10；37,80；43,11；54,31；55,78；63,75；65,11；77,06；128,28；129,55；130,33；136,26；137,11；138,40；139,67；139,85；148,58；157,54；159,74；161,31；178,00.IR(KBr)848；1042；1230；1609；1658；1750；3310；3387.实施例425-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮的拆分将β-乙基-β-羟基-γ-(8-羟甲基中氮茚并[1，2-b]喹啉-9-(11H)-酮-7-基)-丙酸(19.5g，52mmol)和L-(-)-α-甲基苄胺(12.12g，100mmol)在无水乙醇(11)中的混合物加热到沸腾，趁热过滤并使其放置68小时。将沉淀过滤并用乙醇和乙醚洗涤，得到9.8g白色固体。经手性固定相高压液相色谱分析(Chiral-AGP柱(Chromthech，Stochkholm，瑞典)“HPLC”手性，100×4mm，以2％乙腈的10mM、pH6.9磷酸缓冲液洗脱，峰洗脱时间为4.5和7.5分钟)显示了两个完整的峰，两个峰的总面积分别为24％和76％。将固体溶解于回流的93％乙醇(350ml)中，然后放置48小时。过滤沉淀，然后用乙醇和乙醚洗涤，得到4.8g白色固体，经手性HPLC分析得到两个完整的峰，两个峰的总面积分别为9％和91％。将固体回收到回流的50％乙醇(48ml)中，然后放置48小时。过滤沉淀，然后用乙醇和乙醚洗涤，获得2.7g白色固体，经手性HPLC分析得到两个完整的峰，两个峰的总面积分别为3％和97％。将该固体溶于50％(22ml)回流乙醇，随后放置48小时。过滤沉淀用乙醇和乙醚洗涤，得到1.6g白色固体，经手性HPLC分析得到两个完整的峰，总面积分别为1％和99％。将所得盐用乙酸(0.35ml，6.4mmol)处理15分钟，使其以非对映异构体形式富集，并将其溶于蒸馏水(20ml)中。过滤获得的沉淀，用水、丙酮和乙醚洗涤，然后在80℃真空干燥，得到1.1g白色固体。将其溶于加有浓盐酸(11.5N，11ml)的无水乙醇(55ml)中，得到黄色溶液，将其在室温搅拌68小时。过滤所得的沉淀并用水、乙醇和乙醚洗涤，然后在80℃真空干燥，得到770mg以对映体形式富集的5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮。经手性HPLC分析(Chiral-AGP柱，以2％-5％乙腈的10mM、pH6.9磷酸缓冲液梯度洗脱，峰洗脱时间为15和20分钟)显示对映体含量超过98％。将L-(-)-α-甲基苄胺用D-(+)-α-甲基苄胺代替，重复上述方法。如此获得5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮的另一种对映体。
采用上述方法制备下列产物，它们也是本发明一部分且是优选产物10-苄氧基-5，12-二乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；5，12-二乙基-4，5-二氢-5，10-二羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；5，12-二乙基-4，5-二氢-5，10-二羟基-11-二甲氨基甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-9，10-二甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；10-溴-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；11-溴-5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；5-乙基-12-二乙氨基甲基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H，3H-环戊烷并[g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，16(14H)-二酮；7-乙基-7，8-二氢-7-羟基-16-(4-甲基哌嗪甲基)-9H，11H-[1，3]间二氧杂环戊烯并[4，5-g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-9，12(14H)-二酮；5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-12-(1-咪唑基甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；8-乙基-8，9-二氢-8-羟基-10H，12H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]吡啶并[2，3-g]喹啉-10，13(15H)-二酮；5-乙基-4，5，9，10，11，12-六氢-5-羟基-1H，3H-苯并[g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，17(15H)-二酮；8-乙基-8，9-二氢-8-羟基-14H，10H，12H-[1，3]-二氧杂环乙烯并[4，5-g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-10，13(15H)-二酮；7-乙基-7，8-二氢-7-羟基-1H，9H，11H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]吡咯并[2，3-g]喹啉-9，12(14H)-二酮；7-乙基-7，8-二氢-7-羟基-1H，9H，11H-味唑并[4，5-g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-9，12(14H)-二酮；7-乙基-7，8-二氢-7-羟基-1H，9H，11H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]1，2，3-三唑并[4，5-g]喹啉-9，12(14H)-二酮；7-乙基-7，8-二氢-7-羟基-9H，11H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]噻唑并[4，5-g]喹啉-9，12(14H)-二酮；7-乙基-7，8-二氢-7-羟基-9H，11H-恶唑并[4，5-g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-bl喹啉-9，12(14H)-二酮。本发明产物的药理学研究1.由拓扑异构酶1诱导的DNA松弛活性的活性试验。
所有反应均在20μl反应缓冲液中进行，所述反应缓冲液由含或不含确定浓度待试验化合物的50mM tris-HCl(pH7.5)，50mM KCl，0.5mM二硫苏糖醇，10mM MgCl2，0.1mM乙二胺四乙酸(EDTA)，30μl/ml牛血清白蛋白和300ng螺旋pUC19(Pharmacia Biotech，Orsay，法国)组成。将所有待试验化合物先以50mM浓度溶于二甲亚砜(DMSO)，其它稀溶液用蒸馏水配制。在DMSO中的终浓度不超过1％(v/v)。通过加入一单位纯化牛胸腺DNA的拓扑异构酶I(Gibco-BRL，Paisley，英国)引发反应并使其在37℃进行15分钟。通过加入3μl下列组成的混合物使反应停止1％十二烷基硫酸钠，20mM EDTA和500μg/ml蛋白激酶K(Boehringer Mannheim，Meylan，法国)。再于37℃培养30分钟后，往样品中加入2μl含10mMNa2HPO4，0.3％溴酚蓝和16％Ficoll的电荷分布缓冲液，然后在含36mMpH7.8 Tris-HCl，30mM Na2HPO4，1mM EDTA和2μg/ml氯喹的缓冲液中进行1.2％、1V/cm琼脂糖凝胶电泳20小时。凝胶用2μg/ml啡啶溴红染色，在312nm U.V.光下用显影设备成像，用生物Profil照相机(VilberLourmat，Lyon，法国)测定荧光强度，由此确定松弛DNA的百分数。每个试验重复进行至少三次。
在每个试验中，将螺旋DNA质粒单独或与拓扑异构酶I一起培养。反应需15分钟完成，对于每种待试验化合物或对照化合物而言，在500μM待试验化合物存在下，与酶一起培养螺旋DNA质粒或者在无酶的条件下培养螺旋DNA质粒和浓度为10μM，100μM，200μM和500μM的待测试化合物。如表1所示，实施例2、3、4、9、10和11以剂量依赖方式抑制得益于拓扑异构酶I的松弛活性。
表I
2.细胞增殖试验在该研究中试验八个肿瘤细胞系L1210(小鼠淋巴白血病)，HCT15和LOVO(人结肠的腺癌细胞系)，A549(人肺癌)，A217，U373，U87(人成胶质细胞瘤)。所有这些细胞系均得自American Type CollectionCultures(ATCC)，Rockville，Md。将L1210细胞的悬浮培养物培养于改性Dulbecco的Eagle培养基(DMEM)(Bio Whitaker，Verviers，比利时)中，其中补充有加热灭活的10％胎牛血清，2mM谷氨酰胺，50U/ml青霉素和50μg/ml链酶素。将HT29细胞以单层培养基培养于5aMcCoy培养基(Bibco，Paisley，英国)中，其中补充有加热灭活的10％胎牛血清，然后加入2mM谷氨酰胺和50μg/ml庆大霉素。其它细胞在改性的Earle基本培养基(EMEM；Gibco，Paisley，英国)中培养，其中补充有加热灭活的5％胎牛血清，2mM谷氨酰胺，50U/ml青霉素和50μg/ml链酶素。所有这些细胞系均在37℃、含95％空气和5％二氧化碳的潮湿气氛中培养。
通过MTT试验测定肿瘤细胞系的抑制作用，在用待测试化合物处理前24小时，将培养基(所需的细胞培养基)中1500个L1210细胞接种到微滴定板(组织培养水平96孔，平底)的孔中。为进行剂量响应研究，将细胞与终浓度为1.10-10-1.10-4M的各种待试验化合物或其相应的溶剂(对照物)一起培养48小时。临用前将所有化合物均以50mM浓度溶于二甲亚砜(DMSO)。用培养基进一步稀释药物。DMSO的终浓度不超过0.2％(v/v)。用溶剂代替药物溶液作为对照物，并以与待试验化合物相同的方式依次稀释。
培养后，以0.3mg/ml的终浓度向每孔中加入标记试剂MTT(3-[4，5-二甲基噻唑-2-基]-2，5-二苯基四唑翁溴化物；噻唑蓝，Sigma M 565，Sigma，St.Louis MO)。将细胞在37℃、潮湿气氛中培养4小时。该步骤使活细胞的线粒体脱氢酶将黄色四唑翁盐MTT转化为紫色甲结晶。除去上清液，将形成的甲结晶溶于DMSO。对所得的有色溶液使用扫描多池分光光度计测定570nm处的吸收度。与增殖有关的数据以处理孔的活细胞除以对照孔的活细胞的百分数表示。每个点表示三次独立试验的平均值，每个试验测定六次。
对于其它细胞系(HCT15，LOVO，A549，A172，U373，U87)，在用药物处理前24小时，将1000-2000个细胞接种到培养板的微孔中。将它们与终浓度为1.10-10-1.10-6M的各种待试验化合物或其相应的溶剂(对照物)一起培养72小时。
结果以增殖百分数表示，该百分数由用药物处理的细胞的旋光密度除以对照细胞(用DMSO处理的细胞)的OD计算得到。如表II所示，待试验化合物对细胞增殖的抑制作用与剂量有关。
(P56-表II)
表II
1.体内发育试验使用小鼠的成淋巴细胞白血病L1210细胞系在体内试验本发明的化合物。通过对小鼠(DBA/2 Lafacedu，Lyon，法国)系列腹膜内注射维持肿瘤细胞。在试验中，对雌性B6D2F1小鼠腹膜内注射106个细胞/0.2ml。在与白血病细胞培养后第1天开始处理并持续到第4或第8天。腹膜内或静脉注射不同浓度的待试验化合物，将注射体积调整到0.1ml/10g体重。未处理的小鼠在注射成淋巴细胞白血病L1210细胞后的第9-14天死亡，在长达60天的时间内观察处理过小鼠的存活。
该试验用5-乙基-4，5-二氢-5-羟基-1H-庚英[3’，4’6.7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮化合物进行。该化合物以0.32和2.5mg/kg的浓度腹膜内给药4天和以0.32和5.0mg/kg的浓度静脉给药8天可将小鼠的寿命延长50％。
权利要求
1.具有下式M结构的吡啶酮化合物， 其中R1是低级烷基，低级链烯基，低级炔基，低级卤代烷基，低级烷氧基低级烷基或低级烷硫基低级烷基；R18和R19独立地表示H，卤素，低级烷基，低级烷氧基或羟基；并且R20表示H或卤素。
2.权利要求2的化合物，其特征在于R1表示乙基并且R18、R19和R20表示H。
3.权利要求1的化合物的制备方法，其特征在于-下式所示吡啶的羰基 其中R1和R20如权利要求1所定义并且R2表示卤原子或低级烷氧基，用醛缩醇官能团保护，得到通式F化合物 其中Z和Z’独立地表示低级烷基或一起形成含2-4个碳原子的饱和烃链；-向通式F化合物中引入羟甲基官能团，得到通式G化合物 其中R1、R20、R22、Z和Z’具有上述含义，-随后保护通式G化合物的醇官能团，得到通式H化合物 其中R1、R20、R22、Z和Z’具有上述含义且R23表示醇官能团保护基；-通式H的醛缩醇化合物脱保护，得到通式I’化合物 其中R1、R20、R22和R23具有上述含义，-用官能烷基化试剂处理式I’化合物，得到通式J的β-羟基酯 其中R1、R20、R22和R23具有上述含义，R18和R19如权利要求1所定义且R17表示OR6，其中R6表示低级烷基、环烷基、环烷基低级烷基、低级链烯基、低级烷氧基低级烷基、或者芳基或芳基低级烷基；-除去通式J化合物的保护基R23，得到通式K化合物 其中R1、R18、R19、R20和R22具有上述含义且R17表示OR6，其中R6表示低级烷基、环烷基、环烷基低级烷基、低级链烯基、低级烷氧基低级烷基、或者芳基或芳基低级烷基；-通式K化合物环合形成通式L化合物 其中其中R1、R18、R19、R20和R22具有上述含义并且最后-将L化合物的基团R22转化为羰基，得到通式M化合物 其中R1、R18、R19和R20具有上述含义。
全文摘要
本发明公开了具有下式M结构的新型吡啶酮化合物，及其制备方法，所述吡啶酮化合物可以用于制备成外消旋形式、对映体形式或其组合形式的式(I)化合物或其水解产物(II)的喜树碱类似物。
文档编号C07D491/22GK1432571SQ0215045
公开日2003年7月30日 申请日期1996年6月21日 优先权日1995年6月21日
发明者D·比格, O·拉弗吉尼, F·普拉罗达斯, J·波迈尔, G·尤里巴里 申请人:科学研究与运用咨询公司