专利名称：制备考布他汀的方法
技术领域：
本发明涉及制备考布他汀及其衍生物的新方法。
术语“考布他汀”或“1，2-二苯乙烯衍生物”意指下列通式的衍生物及其药学上可接受的盐 其中A代表羟基或氨基。
在这些盐中，值得注意的是盐酸盐、乙酸盐、磷酸盐或甲磺酸盐。当化合物中的A为氨基时，它也可以与氨基酸偶合为酰胺，以及其药学上可接受的盐。
可以以药学上可接受的盐的形式存在的1，2-二苯乙烯衍生物或考布他汀的合成方法以及含有它们的药物组合物公开于下列专利文献US 4 996237、US 5 525 632、US 5 731 353以及US 5 674 906。这些专利中公开了考布他汀和它们的代谢物，同时也公开了它们在体外的抗肿瘤活性。
根据这些专利，考布他汀可以这样制备将(3，4，5-三甲氧基苄基)三苯鏻与3-硝基-或3-羟基-4-甲氧基苯甲醛(其中羟基被保护)在氢化钠或锂衍生物存在下缩合，如果得到的衍生物是硝化的话，则在锌存在下将其还原。随后将混合物进行光处理或层析分离来制备具有顺式构型的异构体。
本发明涉及制备考布他汀或它们的衍生物的新方法以及对已有方法的改良。
首先被发现的第一个方法的途径V0 1是用于制备其中A代表氨基的式(I)衍生物，该方法是对上述专利中所述方法的改良，该方法包括在(3，4，5-三甲氧基苄基)三苯鏻溴化物或氯化物和3-硝基-4-甲氧基苯甲醛存在下，进行Wittig缩合，并且用铁代替以前所述的锌，进行还原反应，这使得就采用的醛而言，产率可达到60％，而在专利US 5 525 632中，以采用的醛计，产率仅为21％-33％。
第一个方法的途径V0 2包括将3，4，5-三甲氧基苯甲醛与(4-甲氧基-3-硝基苄基)三苯鏻溴化物或氯化物缩合。在前述途径V0 1和V0 2中，反应在碱存在下进行，所述碱特别是指叔-丁醇钾、叔-戊醇钠、氢化钠、丁基锂、LDA(二异丙基氨化锂)、甲醇钠、碳酸钾或六甲基二硅氮烷的碱性衍生物。
该反应可以在各种不同的溶剂中进行，例如醚(THF)、极性非质子溶剂(乙腈、NMP、DMF、DMSO等)、醇、芳族溶剂或水，反应温度则可以由本领域技术人员根据所采用的碱和溶剂来调整。
第一个方法途径V0 2所述的反应，在K.G.Piney的Bioorg.Med.Chem.，8(2000)，2417-2425中有详尽描述。
按照本发明改良的方法，采用铁还原2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]硝基苯。如果需要原料完全转化，则优选采用过量的铁。所述过量最好为每摩尔的硝基衍生物加入2当量以上的铁。
已经证实，在锌存在的条件下在乙酸中进行相同的反应，采用常规的溶剂进行锌还原反应，不能使其完全反应(专利US 5 525 632，纯Z异构体的还原产率为46-66％)，此外，锌的用量很大，因此在工业上造成极大的消耗。另外，在该方法中，还原反应中形成的氨基和亚硝基中间体发生偶合产生了大量的“偶氮”化合物。
采用自甲酸铵得到的新生的氢，在常规催化剂(例如钯或铂)存在下进行还原，可以使不需要的E异构体的双键产生高异构化并使双键发生部分饱和。
上述Piney出版物中描述了通过将纯硝基Z异构体用亚硫酸氢钠还原，经层析及结晶后得到氨基Z异构体的方法，但是产率只有37％。
经铂或钯催化采用分子氢进行氢化作用，反应极少可以完全，并且还使乙烯双键饱和。
已经发现了第二个方法，该方法避免了以硝基衍生物作为原料时的中间体的还原步骤。因此，这种方法使缩合变得更加经济，可以使(3，4，5-三甲氧基苄基)三苯鏻溴化物或氯化物与3-氨基-4-甲氧基苯甲醛缩合，也可以使3，4，5-三甲氧基苯甲醛与(3-氨基-4-甲氧基苄基)三苯鏻盐缩合。
第二个方法的两种备选途径与第一个方法的途径V0 1及V0 2相比，其所需步骤可以产生更少的CMR(致癌、致突变或致畸)产物，因此，这个方法在工业安全性及产出成本上的优点均是显而易见的。
根据第二个方法的途径V0 3，为实现本发明，使(3，4，5-三甲氧基苄基)三苯鏻盐与3-氨基-4-甲氧基苯甲醛反应，反应优选在碱存在的条件下进行，所述碱特别是指叔-丁醇钾、叔-戊醇钠、氢化钠、丁基锂、LDA、甲醇钠、碳酸钾或六甲基二硅氮烷的碱性衍生物。优选采用甲醇钠。
该反应可以在不同的溶剂(例如醚(THF)、极性非质子溶剂(乙腈、NMP、DMF、DMSO)、醇、芳族溶剂或水)中进行，至于温度则可以由本领域技术人员根据所使用的碱及溶剂进行调节。
如上所述，反应温度可以由本领域技术人员根据所用碱来调节。当采用甲醇盐时，优选温度为0-10℃。反应后，用酸的水溶液中和碱，洗涤并浓缩有机相，层析粗品浓缩液后得到目标产物。
按照第二个方法的途径V0 4，为实现本发明，使(3-氨基-4-甲氧基苄基)三苯鏻盐及3，4，5-三甲氧基苯甲醛反应，反应优选在碱存在的条件下进行，所述碱特别是指叔-丁醇钾、叔-戊醇钠、氢化钠、丁基锂、LDA、甲醇钠、碳酸钾或六甲基二硅氮烷的碱性衍生物。优选采用甲醇钠。
该反应可以在不同的溶剂(例如醚(THF)、极性非质子溶剂(乙腈、NMP、DMF、DMSO)、醇、芳族溶剂或水)中进行，至于温度则可以由本领域技术人员根据所使用的碱及溶剂进行调节。
如上所述，反应温度可以由本领域技术人员根据所用碱来调节。当采用甲醇盐时，优选温度为0-10℃。反应后，用酸的水溶液中和碱，洗涤并浓缩有机相，层析粗品浓缩液后得到目标产物。
根据第二个方法的途径V0 3或V0 4或第一个方法的途径V0 1或V0 2获得下式衍生物
式(IIa)当需要使丝氨酸与式(IIa)化合物偶合时，优选采用在通式(IIb)的丝氨酸氮上和羟基官能基团上双保护的L-丝氨酸作为原料 其中PG代表一个本领域技术人员已知的胺官能团的保护基团，得到新的下列通式的中间体 随后将该中间体裂解，优选根据本领域技术人员已知的脱保护反应，同时通过酸水解进行开环反应。优选地，式(IIb)或(III)的PG基团代表选自下列的保护基团叔-丁氧基羰基、苄氧基羰基(CBZ)或9-芴基甲氧基羰基(FMOC)。
上述式(III)化合物为新化合物并且在此要求进行保护。
缩合优选在EDCl(1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺氯化物)存在或DCC(二环己基碳二亚胺)和HOBT(羟基苯并三唑)存在或DCC(二环己基碳二亚胺)及HOSU(N-羟基琥珀酰亚胺)存在，或者，最终，TOTU(O-[(乙氧基羰基)氰基亚甲基氨基]-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓四氟代硼酸盐)或HBTU(O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐)或N，N-羰基二咪唑存在的条件下进行。反应优选在一个对反应惰性的溶剂中进行，该溶剂特别可选自极性非质子溶剂，例如乙腈、二甲基甲酰胺、四氢呋喃或氯化脂族溶剂，例如二氯甲烷或酯。
当然，式(IIa)衍生物的偶合也可以通过混合酐进行，所述混合酐可以通过使氯代甲酸酯或酰氯(例如新戊酰氯)与双保护的式(IIb)的L-丝氨酸反应就地合成，并且该反应在各种对反应惰性的溶剂中在NMM(N-甲基吗啉)型的叔碱存在的条件下进行，所述溶剂包括酯、醚、氯化溶剂、乙腈等。混合酐优选在温度0-10℃下制备，然后反应在室温下进行。反应后，反应混合物用水溶液水解，然后沉淀分离混合物，得到的有机相用羟基化的碱洗涤。
式(III)化合物的双脱保护采用有机或无机酸进行。优选采用醇介质中的浓盐酸溶液。根据本发明的优选实施方案，反应温度为50-70℃。
下列实施例将更详尽地阐述本发明，但这些实施例不以任何方式限制本发明的范围。
混合物的组成、反应的监测和进展，以及未分离产物/中间体的产率及它们的测定通过HPLC(高效液相层析法)来进行。
实施例1-本发明的第一个方法的途径V0 2(Z)-N-[2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基]-L-丝氨酰胺盐酸盐通用合成方法新的“反向维悌希(Wittig inverse)”方法，采用(4-甲氧基-3-硝基苄基)三苯鏻溴化物及3，4，5-三甲氧基苯甲醛作为原料，可以得到2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]硝基苯的Z和E异构体混合物，其Z/E比率为75/25。
Z硝基异构体的比率足够高，因此可以直接对Z/E混合物进行还原，并且通过使盐酸盐结晶获得Z氨基异构体，经HPLC测定为97％(内标)。
(4-甲氧基-3-硝基苄基)三苯鏻溴化物(4)可以根据下列实施例制备 3-硝基-4-甲氧基苄基醇(2)将90.5g的3-硝基-4-甲氧基苯甲醛(1)、450ml的THF及90ml的乙醇顺次加入装有一个机械搅拌器、一个温度计、一个Y型管、一个固体加料漏斗和一个装有计泡计的回流冷凝器的2-升的三颈烧瓶中。将得到的淡黄色溶液冷却至10℃，然后于10/15℃、40分钟内，加入10g硼氢化钠(反应放热，所以必须用冰/丙酮浴保持温度)；加入完成后，棕色溶液变为深蓝色。于10℃，搅拌溶液30分钟，经TLC(薄层层析)监测反应的完成，于10℃，再搅拌溶液1小时，然后温热至室温。
用一个500ml等压滴液漏斗(ampoule de coulée isobare)代替加液漏斗，通过该滴液漏斗，在30分钟内滴加300ml蒸馏水，同时保持混合物温度为20℃。加入水的同时观察气体的变化。
将混合物在旋转蒸发仪(50℃/20mmHg)上浓缩至2/3，白色产物自浓缩溶液中以块状形式结晶。
冷却的水相先用250ml、然后用150ml二氯甲烷提取，然后将合并的有机相用250ml蒸馏水洗涤，经硫酸镁干燥。
过滤后，二氯甲烷溶液可用于下列溴化反应。
该步骤的产率为100％。
注意醇(2)可自商业获得，但很难处理。
3-硝基-4-甲氧基苄基溴(3)将3-硝基-4-甲氧基苄基醇(2)的二氯甲烷溶液加入装有一个机械搅拌器、一个温度计、一个Y型管、一个固体加料漏斗和一个装有计泡计的回流冷凝器的1-升的三颈烧瓶中，加入100ml二氯甲烷。将搅拌的溶液冷却至5℃，然后滴加入135.4g的三溴化磷，同时保持温度5℃。
于5℃，将溶液搅拌1小时30分钟，经TLC(薄层层析法)监测反应的完成，然后保持在温度15℃，滴加入250ml饱和的碳酸氢钠溶液。稍后有大量气体产生。
从漏斗中分离的有机相顺次用250ml蒸馏水及200ml饱和的碳酸氢钠溶液洗涤。经硫酸镁干燥有机相，过滤并于旋转蒸发器(50℃/20mmHg)上浓缩。
经两个步骤得到119g黄绿色针状固体，化学产率97％。
注意产物(3)也可以按照在出版物K.G.Piney等，Bioorg.Med.Chem.，8(2000)，2417-2425中描述的方法制备。
(3-硝基-4-甲氧基苄基)三苯鏻溴化物(4)在搅拌下，将119g的3-硝基-4-甲氧基苄基溴(3)加入装有一个机械搅拌器、一个温度计、一个Y型管、一个可以加入固体的漏斗和一个装有计泡计的回流冷凝器的1000ml甲苯的2-升的三颈烧瓶中，温热至25℃，变为溶液。然后加入126.5g三苯膦，随后将获得的溶液逐渐加热至60℃；自30℃开始形成沉淀物。将混合物保持于60/65℃ 4小时，然后冷却至30℃并用烧结玻璃过滤器过滤。过滤后的残留物用300ml甲苯在过滤器上洗涤2次，在烘箱中干燥(35℃/20mmHg/20小时)。
得到217g(4-甲氧基-3-硝基苄基)三苯鏻溴化物，化学产率为88％。
合成方法在下列出版物中有所描述(溶剂二氯甲烷)K.G.Piney等，Bioorg.Med.Chem.，8(2000)，2417-2425。色谱No.＝4865-V1H N.M.R.色谱(300MHz，(CD3)2SO，δ为ppm)3.90(s，3H)，5.26(d，J＝15Hz，2H)，7.33(mt，2H)，7.41(mt，1H)，7.65-8.05(mt，15H)。质谱No.212217，m＝428EI m/z＝262 [PPh3]+基峰DCI m/z＝445 MNH3+m/z＝428 M+m/z＝263 [PPh3H]+基峰IR色谱426469 KBr2869，2843，2776，1619，1527，1438，1362，1287，1270，1111，752，692及502cm-12-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]硝基苯(6)及(7)的Z和E混合物 于20℃、氮气氛下，将54.7g 3，4，5-三甲氧基苯甲醛(5)、148.6g(4-甲氧基-3-硝基苄基)三苯鏻溴化物(4)及1300ml甲苯加入装有一个机械搅拌器、一个温度计、一个Y型管、一个加液漏斗和一个装有计泡计的回流冷凝器的2-升的三颈烧瓶中。
采用冰浴将搅拌的悬浮液冷却至5℃，然后于5℃、用40分钟，加入63.2g 25％w/w的甲醇钠的甲醇溶液。
在加入过程中，悬浮液的颜色由灰白变为黄色、然后又变为棕色。
于5℃，搅拌混合物1小时，用HPLC监测反应完成(醛完全消耗)。然后加入3g(0.05mol)乙酸。
加热悬浮液至40℃，并保持于40℃30分钟。在该温度下，只有盐未溶解。于40℃，经过烧结玻璃过滤器No.3过滤混合物，盐在过滤器上，用100ml甲苯洗涤3次。
再将滤液放入装有250ml蒸馏水的圆底烧瓶中，于40℃，搅拌双相混合物20分钟，然后通过分液漏斗分离。再用250ml蒸馏水洗涤甲苯层2次，然后在旋转蒸发器上浓缩至干。
于40℃，将残留物溶于600ml异丙醇和12ml甲苯，目标产物开始结晶，在缓慢搅拌下，温热至室温过夜。
搅拌的悬浮液冷却至5℃并持续1小时，然后经过烧结玻璃过滤器过滤，过滤垫用125ml异丙醇洗涤2次，于真空下在烘箱中蒸发至干(35℃/30mmHg/18小时)。
得到91.7g Z和E异构体(6)和(7)的混合物，Z/E比率为75/25(ISHPLC)，产率为95％。
合成方法在下列出版物中有所描述(溶剂二氯甲烷碱NaH)K.G.Piney等，Bioorg.Med.Chem.，8(2000)，2417-2425。
注意反应条件分别为例如溶剂THF、乙腈、甲醇和其它醇、二氯甲烷、NMP、DMF、DMSO等。
碱叔丁醇钾、叔戊醇钠、氢氧化钠、NaH、BuLi/LDA、碳酸钾等。
温度自-10℃至溶剂的回流温度。
Z-2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯胺盐酸盐(8)
于20℃、在氮气氛下、将80g 2-甲氧基-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]硝基苯(6)和(7)的75/25的Z及E混合物、640ml无水乙醇和160ml蒸馏水加入装有一个机械搅拌器、一个温度计、一个Y型管、一个可加入固体的漏斗、一个装有计泡计的回流冷凝器和热浴的2-升的三颈烧瓶中。
迅速搅拌混合物并在油浴上加热，于50℃，向悬浮液中加入7.8ml 6N盐酸，然后将混合物的温度提高至77±2℃。混合物全部溶解。
用5分钟，逐份加入52g铁粉。加入后，混合物变为溶液，随后在圆底烧瓶壁上形成黑色沉淀。
将混合物保持于77±2℃ 2小时并用HPLC监测原料硝基化合物(6)和(7)的消失。
混合物冷却至40℃并经覆有clarcel的烧结玻璃过滤器过滤，滤垫用160ml的80/20乙醇/水的混合物清洗2次。
在旋转蒸发器上浓缩滤液、母液以及洗涤液。共沸水合物一经洗涤，即在残留的液相中形成油沉淀。
在分液漏斗中用300ml二氯甲烷提取水相2次，然后将有机相用半-饱和的氯化钠水溶液及300ml蒸馏水洗涤2次。
在旋转蒸发器上将有机相浓缩至干，得到76g油状物，该油经HPLC测定显示Z/E比率为80/20。将油溶于591ml甲醇并在搅拌下转入1升的圆底烧瓶中，然后加入100ml的2.32N甲醇制盐酸溶液，开始形成沉淀，于搅拌下，将混合物沉淀过夜。
甲醇+甲醇制盐酸溶液的量使Z异构体终浓度(经HPLC测定)为8.8％w/v。
清晨，混合物经一个烧结玻璃过滤器过滤。干燥的垫重8.2g，并只含E异构体(HPLC)。
在旋转蒸发器上将滤液(693g)(Z/E比率＝86/14(IS HPLC))浓缩至一半，将400ml乙腈加入347g浓缩液并将混合物再浓缩至得到347g浓缩液。然后加入1000ml乙腈并将混合物浓缩至结晶形成。然后于60℃，将浓缩液转入搅拌的含有1500ml乙腈的4升圆底烧瓶中。混合物大量沉淀。
于60℃，继续搅拌混合物2.5小时并用约1小时冷却至30℃。用烧结玻璃过滤器过滤浆状物(E异构体(9)溶于滤液)。将垫用200ml乙腈洗涤两次并在烘箱中干燥(35℃/30mmHg/18小时)。
得到45.7g Z-2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯胺(8)，经ISHPLC测定为97％，产率为56％，即相对于加入72％的Z异构体的Z异构体产率。
实施例2-根据本发明按照第二个方法的途径V0 3进行合成相对于第一个“反向维悌希”方法的途径V0 2，第二个方法的途径V0 3的优点是在已还原的产物即氨基醛(1a)及鏻(2a)之间进行维悌希反应，因此可以消除产生CMR产物的化学步骤。
(Z)-N-[2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基]-L-丝氨酰胺盐酸盐通用合成方法
3-氨基-4-甲氧基苯甲醛(1a) 将20g 3-硝基-4-甲氧基苯甲醛(1)和350ml无水乙醇装入2升充有惰性气体氩气的三颈烧瓶中，该烧瓶装有一个机械搅拌器、一个温度计、一个Y型管、一个可以加入固体的漏斗、一个装有计泡计的回流冷凝器和加热浴。搅拌并于60℃加热混合物，混合物变为溶液。
于60℃，滴加115ml蒸馏水，随后再加入14ml 2N盐酸。然后分份加入24.7g铁粉。
用2小时，将混合物的温度升至室温。至此，反应完成(TLC)。
混合物经硅藻土垫过滤，并真空浓缩，残留物溶于二氯甲烷，有机溶液用蒸馏水洗涤两次，然后经硫酸镁干燥、过滤并真空浓缩至干。
获得16g粗品(1a)并经硅胶柱层析纯化，洗脱液为二氯甲烷。
获得2份含有纯目标产物的流分，经浓缩后，得到11.5g纯化合物(1a)，即产率69％。
1H N.M.R.色谱No.2810-V(300MHz，(CD3)2SO，δin ppm)3.88(s，3H)，5.11(mf，2H)，7.01(d，J＝8Hz，1H)，7.14(d，J＝2Hz，1H)，7.18(d，J＝8Hz，1H)，9.53(s，1H)。
质谱No.210112，m＝151EI m/z＝151 M+.基峰m/z＝136 [M-CH3]+m/z＝108 [136-CO]+m/z＝80 [108-CO]+IR色谱425135 KBr3464，3437，3367，3349，1675，1655，1582，1513，1293，1241，1139，1023，803及640cm-1Z-及E-2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯胺(8’)及(9’) 注意鏻盐(2a)作为原料，并已经被公开于专利Ajinomoto Co.Ltd，US 5525 632及WO 01/12579 A2中。
先将8.0g鏻盐(2a)、随后将2.20g氨基苯甲醛(1a)及100ml甲苯装入充有惰性气体氮气的250ml三颈烧瓶中，该烧瓶装有一个机械搅拌器、一个温度计、一个Y型管、一个加液漏斗、一个装有计泡计的回流冷凝器和冷浴。将搅拌的悬浮液冷却至5℃，并用15分钟通入3.51ml 25％w/w甲醇钠的甲醇溶液。于5℃，2.5小时后，反应仍未完成(TT45％)，但未进一步变化(HPLC)，Z/E比率为61/39。然后通入用50ml水稀释的0.2ml乙酸，温度升至13℃，搅拌混合物30分钟，然后倾入分液漏斗中分离。在旋转蒸发器上真空浓缩有机相，得到8g黄色油状物。
经HPLC检测，该油状物含有原料醛、膦氧化物，并且所需Z/E混合物的比率为61/39。
该油状物经硅胶柱层析(40份w/w)，洗脱液为环己烷/乙酸乙酯/三乙胺(50/50/2)的混合物。
将合并的2个系列的流分浓缩至干第一提取物干燥后为360mg，含有93％Z异构体+不明杂质；第二部分为2.09g，经IS HPLC测定含有39和37.5％的原料醛及Z/E混合物。
Z异构体(8’)的重量，经IS HPLC测定，为1.15g，相对于采用的2.20g醛，产率为24％。
实施例3-根据本发明按照第二个方法的途径V0 3进行合成如途径V0 2，相对于第一个“反向维悌希”方法的途径V0 2，第二个方法的途径V0 3的优点是在已还原的产物即(3-氨基-4-甲氧基苄基)三苯鏻溴化物(1b)及3，4，5-三甲氧基苯甲醛(5)之间进行维悌希反应，因此可以消除产生CMR产物的化学步骤。
(Z)-N-[2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基]-L-丝氨酰胺盐酸盐通用合成方法
(4-甲氧基-3-氨基苄基)三苯鏻溴化物(1b) 将30g(4)、240ml乙醇及60ml蒸馏水装入装有一个机械搅拌器、一个温度计、一个Y型管、一个可加入固体的漏斗、一个装有计泡计的回流冷凝器和加热浴的1-升的三颈烧瓶中。
将1.76ml的6N盐酸加入搅拌的悬浮液中，加热至70℃。
然后用15分钟，分份加入9.9g铁粉，混合物仍然不溶。将混合物保持于75℃2小时；有机物缓慢变为溶液，同时形成褐色铁沉淀和铁氧化物。
经HPLC监测，仍残留了5％的原料；再加入2g铁并继续加热1小时；TT完全。
将混合物冷却至40℃并经clarcel过滤，过滤残留物用100ml含有20％水的乙醇清洗，将滤液在旋转蒸发器上真空浓缩至干。
残留物溶于300ml异丙醇并自混合物中结晶，搅拌并加热至50℃，再次变为溶液。然后通入14ml的5N盐酸的异丙醇溶液，混合物沉淀，并于50℃持续1小时后恢复至室温。
浆状物经烧结玻璃过滤器过滤并用50ml异丙醇洗涤垫，在真空烤箱中充分干燥。
得到27.3g(1b)，产率为89.9％。
1H N.M.R.色谱No.4584-V(300MHz，(CD3)2SO，δin ppm)3.78(s，3H)，5.03(宽峰d，J＝15Hz，2H)，6.43(mf，1H)，6.62(宽峰s，1H)，6.82(宽峰d，J＝8Hz，1H)，7.60-8.00(mt，15H).
质谱 No.211915，m＝397EIm/z＝397 M+m/z＝382 [M-CH3]+m/z＝262 [PPh3]+基峰DCI m/z＝398 MNH4+M/z＝263 [PPh3H]+基峰IR色谱426386KBr3254，2474，1920，1628，1520，1439，1433，1279，1110，736，690，527及511cm-1Z-和E-2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯胺(8’)和(9’) 将11.02g(1b)、4g(5)和70ml甲苯装入250ml充有惰性气体氮气的三颈烧瓶中，该烧瓶装有一个机械搅拌器、一个温度计、一个Y型管、一个固体加料漏斗、一个装有计泡计的回流冷凝器和冷浴。
将搅拌的悬浮液冷却至5℃，然后用15分钟，通入4.92ml 25％w/w的甲醇钠的甲醇溶液。于5℃，搅拌悬浮液2.5小时，然后加入用50ml水稀释的0.2ml乙酸，升温至14℃，混合物变浓。用10ml甲苯及10ml水稀释。得到棕色不溶物。
混合物经clarcel过滤，用50ml甲苯(洗涤液最终只含有原料醛，不加至双相滤液中)洗涤垫3次，澄清的滤液(pH 12)通过转移至分液漏斗中进行分离，于40℃，真空浓缩有机相至干。经HPLC测定Z/E的比率为43/57。
获得棕色油状物(4g)，经硅胶柱层析(100份w/w)，洗脱液为环己烷/乙酸乙酯/三乙胺(50/50/2)混合物。
将2个系列的流分合并并浓缩至干第一份1.1g，含有14％的E异构体和59％的Z异构体；第二份为1.08g，含有86％的E异构和7％的Z异构体。
经IS HPLC测定，Z异构体(8’)的重量为0.725g，相对于采用的4g醛，产率为11.3％。
Z-4-{2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基氨甲酰基}-2，2-二甲基噁唑烷-3-甲酸叔-丁酯(11) 自盐酸盐(8)中释出碱(8’)先将44g(8)、16g碳酸氢钠，然后再将200ml蒸馏水和375ml二氯甲烷装入1升的厄伦美厄烧瓶中。于室温下，搅拌混合物20分钟，获得澄清的双相。
分离有机相，经硫酸钠干燥并过滤。
获得约400ml含有(8’)的二氯甲烷溶液。
2，2-二甲基噁唑烷-3，4-二甲酸3-叔-丁酯(10)的制备尽管可以从商业获得，但该产物很难处理。因此可以根据J.Org.Chem.，63(12)，第3983页(1998)所述的方法，通过将甲酯用氢氧化锂皂化制备1H N.M.R.色谱(300MHz，(CD3)2SO，δppm)1.38(s，3H)，1.45(s，9H)，1.55(s，3H)，3.95(mt，1H)，4.16(mt，1H)，4.31(mt，1H)，12.50-13.10(宽峰mf，1H)。
质谱No.213135，m＝245DCI m/z＝263 MNH4+m/z＝246 MH+m/z＝207 [MNH4-t-Bu]+基峰m/z＝146 [MH-BOC]+IR色谱426759KBr1744，1704，1638，1407，1368，1164，1104，856，836和623cm-1偶合将溶液(8’)装入2升的装有一个机械搅拌器、一个温度计、一个Y型管、一个可以加入固体的漏斗、一个装有计泡计的回流冷凝器和冰浴的三颈烧瓶中，加入600ml二氯甲烷，搅拌下冷却混合物。
于5℃，加入42.9g的2，2-二甲基噁唑烷-3，4-二甲酸3-叔-丁酯(10)，变为溶液，然后于5-10℃，分份加入48g的1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCl)。
用冰浴融化过夜，使混合物缓慢恢复至室温。
清晨，再加入330ml蒸馏水，剧烈搅拌混合物。经30分钟，混合物变得浑浊(EDCl水解)。再持续搅拌30分钟。
用分液漏斗分离混合物，顺次用280ml的0.55N氢氧化钠溶液和300ml蒸馏水洗涤有机相2次。
在旋转蒸发器(50℃/50mmHg)上将有机相浓缩至干。
获得79.4g粘性油状物(11)，该油于20℃变硬，产率为117％，以所使用的(8)计。
色谱No.＝5578-V
1H N.M.R.色谱(400MHz，(CD3)2SO，温度373K，δppm)1.41(s，9H)，1.53(s，3H)，1.64(s，3H)，3.64(s，6H)，3.71(s，3H)，3.86(s，3H)，3.99(dd，J＝9和3Hz，1H)，4.19(dd，J＝9和7Hz，1H)，4.52(dd，J＝7和3Hz，1H)，6.48(d，J＝12.5Hz，1H)，6.55(d，J＝12.5Hz，1H)，6.58(s，2H)，7.02(mt，2H)，8.13(宽峰s，1H)，8.82(宽峰s，1H)。
质谱No.213565，m＝542DCI m/z＝560MNH4+基峰m/z＝543MH+m/z＝504[MNH4-t-Bu]+m/z＝443[MH-BOC]+IR色谱425857 CCl43409，2982，2938，2837，1712，1698，1534，1363，1249，1133，1092及851cm-1其它所采用的偶合条件如-混合酐(新戊酰氯/(10))。
-DCC/HOBT、DCC/HOSU、TOTU、N，N-羰基二咪唑等。
-在乙腈、DMF、THF、二氯甲烷、酯等中。
效果最好的是采用二氯甲烷中的EDCl·HCl。
(Z)-N-[2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基]-L-丝氨酰胺盐酸盐 于20℃，将在54ml甲醇中的61.8g(11)溶液装入1升的装有一个机械搅拌器、一个温度计、一个Y型管、一个装有计泡计的回流冷凝器和加热浴的三颈烧瓶中，加入150ml乙酸异丙酯、99ml的2.3N甲醇制盐酸溶液和8.2ml蒸馏水。搅拌混合物并于60℃加热3小时。冷却溶液至40℃，经烧结玻璃过滤器No.4过滤，用40ml甲醇洗涤。滤液再装入三颈烧瓶中搅拌，加入194ml乙酸异丙酯，再次加热混合物至40℃，加入0.2g(12)使溶液开始反应，然后用1小时，滴加入194ml乙酸异丙酯。加入乙酸异丙酯的同时，混合物开始缓慢结晶。
混合物恢复至室温，然后冷却并保持于5℃过夜。
清晨，将浆状物经烧结玻璃过滤器过滤，并将垫干燥，用50ml乙酸异丙酯洗涤4次，在烤箱中充分干燥至稳定重量(35℃/10mmHg)。
得到28g(12)，经过2个步骤(偶合后脱保护处理)后的产率为56％，ISHPLC测定＞98％，根据第一个方法的途径V0 2进行合成，总产率为30％[得到的(12)相对于使用的(5)]。
权利要求
1.制备下列通式(I)的考布他汀的方法 其中A代表氨基，该方法的特征在于，在(3，4，5-三甲氧基苄基)三苯鏻溴化物或氯化物与3-硝基-4-甲氧基苯甲醛或3，4，5-三甲氧基苯甲醛与(4-甲氧基-3-硝基苄基)三苯鏻盐存在的条件下进行维悌希缩合反应，然后将硝基在铁存在的条件下还原。
2.根据权利要求1的方法，其特征是使用过量的铁。
3.根据权利要求2的方法，其特征是所述过量指对于每1mol硝基衍生物原料使用大于2当量的铁。
4.制备下列通式(I)的考布他汀的方法 其中A代表一个氨基，该方法的特征在于，按照第二个方法，使(3，4，5-三甲氧基苄基)三苯鏻盐与3-氨基-4-甲氧基苯甲醛缩合或者使(3-氢基-4-甲氧基苄基)三苯鏻盐与3，4，5-三甲氧基苯甲醛缩合。
5.根据权利要求4的方法，其特征在于，使(3，4，5-三甲氧基苄基)三苯鏻盐与3-氨基-4-甲氧基苯甲醛缩合。
6.根据权利要求4或权利要求5的方法，其特征在于所述反应优选在碱存在的条件下进行，所述碱选自叔-丁醇钾、叔-戊醇钠、氢化钠、丁基锂、LDA(二异丙基氨化锂)、甲醇钠、碳酸钾或六甲基二硅氮烷的碱性衍生物。
7.根据权利要求4或权利要求5的方法，其特征在于采用甲醇钠。
8.根据权利要求4或权利要求5的方法，其特征在于所述反应溶剂对该反应呈惰性，所述溶剂选自醚(THF)、极性非质子溶剂(乙腈、NMP、DMF、DMSO等)、醇、芳族溶剂或水。
9.根据权利要求7的方法，其特征在于所述反应温度优选为0-10℃。
10.制备丝氨酸盐形式的式(I)化合物的方法，所述方法包括使式(IIa)衍生物 与式(IIb)的保护的丝氨酸环状衍生物偶合 其中PG代表一个胺官能团的保护基团，从而得到新的下列通式的中间体 随后脱保护。
11.氨基考布他汀和保护的丝氨酸状环衍生物偶合的中间体，其特征在于具有下式 其中PG为保护基团。
12.根据权利要求11的中间体，其特征在于PG代表选自下列的保护基团叔-丁氧基羰基、苄氧基羰基(CBZ)或9-芴基甲氧基羰基(FMOC)。
全文摘要
本发明涉及通过使硝基甲氧基苯甲醛与三甲氧基苄基鏻或使硝基甲氧基苄基鏻与三甲氧基苯甲醛发生维悌希缩合反应或者使它们的衍生物发生维悌希反应从而将其中的硝基官能团还原为氨基官能团来制备考布他汀的新方法。
文档编号C07C217/84GK1646476SQ03807566
公开日2005年7月27日 申请日期2003年4月9日 优先权日2002年4月11日
发明者S·穆蒂, M·拉维涅, I·马莱约诺克, J－P·卡齐米尔 申请人:安万特医药股份有限公司