专利名称：作为药剂的亚芳基－羧酸(2－氨基－苯基)－酰胺衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新型亚芳基-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺衍生物，它们的制备方法，含有它们的药物和及它们制备，以及这些化合物作为药物活性剂的应用。
EP-A 0 847 992描述了作为细胞分化诱导剂的单酰化的邻苯二胺衍生物。相同类型的化合物也是EP-A 0 242 851的主题。在这些申请中描述的化合物几乎全都是被苯甲酸衍生物单酰化的邻苯基衍生物。然而，仍有需要提供具有改善性能如增加的耐受性，更小的毒性和更小的副作用的化合物。
单酰化的邻苯二胺在本领域已知是制备相应的苯并咪唑的前体，该制备方法例如在DE-A 2 062 265；FR 2 167 954；Rastogi，R.，和Sharma，S.，Indian J.Chem.，Sect.B，21B(5)(1982)485-487；Moll，R.，等，Z.Chem.17(1977)133-134；和Hassan，H.，等，Indian J.Chem.39B(2000)764-768中描述。
本发明的衍生物是新的通式I的化合物及其药用盐， 其中A表示噻吩-二基，亚苯基或吡啶-二基；R1表示烷基，链烯基，炔基，其全都任选地被取代；或-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-烷基；
-(CH2)n-O-烷基；-(CH2)n-C(O)-NH-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)烷基；-(CH2)n-C(O)-O-烷基；或-(CH2)n-O-C(O)-烷基；或基团-NR3R4，其中R3和R4独立地表示氢；烷基，链烯基或炔基，其全都任选地被取代；或-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-烷基；-(CH2)n-(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)-NH-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)烷基；-(CH2)n-C(O)-O-烷基；或-(CH2)n-O-C(O)-烷基；n为1-6；m为1-4。
按照本发明的化合物是组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)的抑制剂，因此显示抗增殖和诱导分化的活性，这导致抑制肿瘤细胞增殖，诱导编程性细胞死亡和抑制侵入。
转录调节是细胞分化，增殖和编程性细胞死亡过程中的主要事件。一组基因的转录活化确定了细胞的终点，并且由于这个原因，转录被多种因子严格调节。在这个过程中涉及的它的调节机制之一是DNA三级结构的改变，其通过调节转录因子对它们的靶DNA片段的可接近性来影响转录。通过核心组蛋白的乙酰化状况来调节核小体的完整性。在低乙酰化状态下，核小体是紧密结合的，因此不能转录。另一方面，通过核心组蛋白的乙酰化松弛核小体，结果可以进行转录。组蛋白的乙酰化状态由组蛋白乙酰转移酶(HAT)和组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)的活性的平衡来控制。近来，已经发现HDAC抑制剂在几种类型的癌细胞，包括结肠癌、T-细胞淋巴瘤和红白血病细胞中抑制生长和编程性细胞死亡。考虑到编程性细胞死亡是癌症发展的关键因素，作为编程性细胞死亡的有效诱导剂，HDAC抑制剂是治疗癌症的有前途的药剂(Koyama，Y.，等.，Blood 96(2000)1490-1495)。
许多抗癌药的另一缺点是缺乏选择性。它们不能充分区分肿瘤细胞和正常细胞，因此在正常细胞中表现出来的有害反应限制了它们在治疗中的应用。迄今，还未发现令人满意的药物，因此急切需要具有降低的毒性、更好的耐受性和高疗效的抗癌药。本发明的化合物令人惊奇地显示低毒性，以及有效的抗增殖和细胞分化活性。
本发明的目的是式I的化合物及其药用盐和它们的对映体形式，上述化合物的制备，含有它们的药物和它们的制备，以及上述化合物在控制或预防疾病、特别是上述疾病和病症中的应用，或在制备相应药物中的应用。
如此处所用的，术语“烷基”是指含有1-14个，优选1-8个碳原子的直链或支链烃基，如甲基，乙基，正丙基，异丙基，1-丁基，异-丁基，仲-丁基，叔-丁基，正戊基，正己基，正庚基以及它们的异构体。烷基任选地被下列基团取代一次或数次卤素，羟基，氰基，硝基，氨基，-NH-烷基或-N(烷基)2。优选地，烷基被氟单取代或多取代，或者被-NH-烷基或-N(烷基)2单取代。氟化烷基的实例有全氟甲基，2，2，2-三氟乙基，全氟乙基。-N(烷基)2取代基中的烷基是相同或不同的烷基并且具有与上述定义相同的含义。-NH-烷基或-N(烷基)2取代基的实例有甲基氨基，乙基氨基，丙基氨基，异丙基氨基，1-丁基氨基，2-丁基氨基，叔-丁基氨基，二甲基氨基，二-乙基氨基，二-丙基氨基，二-异丙基氨基，二-1-丁基氨基，二-2-丁基氨基，二-叔-丁基氨基，乙基-甲基氨基，乙基-丙基氨基。
术语“链烯基”是指不饱和的如上定义的烷基链，含有一个或两个分离的双键，优选一个双键。实例有1-丙烯基，2-丙烯基，1-丁烯基，2-丁烯基，1-戊烯基或1-己烯基。
术语“炔基”是指不饱和的如上定义的烷基链，含有三键。实例有1-丙炔基，2-丙炔基，1-丁炔基，2-丁炔基，1-戊炔基或1-己炔基。
此处与链烯基或炔基结合使用的术语“任选取代的”是指在任何上述基团处用卤素，羟基，氰基，硝基，氨基，氧代，-NH烷基或-N(烷基)2取代一个或数个氢原子。
术语“卤素”是指氟，氯，溴或碘。
本发明的一个实施方案是式I的化合物及其药用盐，其中A表示噻吩-二基，亚苯基或吡啶-二基；R1表示烷基，链烯基，炔基，其全都任选地被取代；或-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-烷基；-(CH2)n-O-烷基；-(CH2)n-C(O)-NH-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)烷基；-(CH2)n-C(O)-O-烷基；或-(CH2)n-O-C(O)-烷基；n为1-6；m为1-4。
本发明还有另一个实施方案是式I的化合物及其药用盐，其中A表示噻吩-2，5-二基；R1表示链烯基；-(CH2)n-O-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；或-(CH2)n-C(O)烷基；n为1-6。
这些化合物例如为5-[(2-乙氧基-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-(戊-4-烯酰氨基-甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-乙酰氨基-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-({2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰氨基}-甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(4-氧代-戊酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺。
本发明还有另一个实施方案是式I的化合物及其药用盐，其中A表示噻吩-2，5-二基；R1是基团-NR3R4，其中
R3是氢；R4是链烯基；炔基；-(CH2)n-(O)-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；或-(CH2)n-C(O)-O-烷基；n为1-6。
这些化合物例如为5-[3-(3-乙氧基-丙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(3-丙-2-炔基-脲基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(2-乙酰氨基-乙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(2-甲氧基-乙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(3-烯丙基-脲基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(3-丁氧基-丙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，4-{3-[5-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-噻吩-2-基甲基]-脲基}-丁酸乙酯。
本发明还有另一个实施方案是式I的化合物及其药用盐，其中A表示1，4-亚苯基；R1表示链烯基；-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-CH3；-(CH2)n-O-烷基；或-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；n为1-6；m为1-4。
这些化合物例如为N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-乙氧基-乙酰氨基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(戊-4-烯酰氨基-甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-({2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰氨基}-甲基)-苯甲酰胺，4-[(2-乙酰氨基-乙酰氨基)-甲基]-N-(2-氨基-苯基)-苯甲酰胺。
本发明还有另一个实施方案是式I的化合物及其药用盐，其中
A表示1，4-亚苯基；R1是基团-NR3R4，其中R3是氢；R4是链烯基；炔基；-(CH2)n-(O)-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；或-(CH2)n-C(O)-O-烷基；n为1-6。
这些化合物例如为4-[3-(2-乙酰氨基-乙基)-脲基甲基]-N-(2-氨基-苯基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(2-甲氧基-乙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(3-丁氧基-丙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(3-乙氧基-丙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，4-[(3-烯丙基-脲基)-甲基]-N-(2-氨基-苯基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(3-异丙氧基-丙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(3-丙-2-炔基-脲基)-甲基]-苯甲酰胺，4-{3-[4-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-苄基]-脲基}-丁酸甲酯。
本发明还有另一个实施方案是式I的化合物及其药用盐，其中A表示吡啶-2，5-二基；R1是基团-NR3R4，其中R3是氢，和R4是-(CH2)n-(O)-烷基；n为1-6。
这些化合物例如为N-(2-氨基-苯基)-6-[3-(3-丁氧基-丙基)-脲基甲基]-烟酰胺。
本发明还有另一个实施方案是式I的化合物及其药用盐，其中A表示吡啶-2，5-二基；R1表示链烯基；或-(CH2)n-O-烷基；
n为1-6。
这些化合物例如为N-(2-氨基-苯基)-6-[(2-甲氧基-乙酰氨基)-甲基]-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-(戊-4-烯酰氨基-甲基)-烟酰胺。
本发明还有另一个实施方案是式I的化合物及其药用盐，其中A表示噻吩-2，5-二基；吡啶-2，5-二基；或1，4-亚苯基；R1是基团-NR3R4，其中R3是氢，和R4是未取代的或被以下基团取代一次或数次的烷基卤素；-NH-烷基；或-N(烷基)2。
这些化合物例如为5-[3-(2-二甲基氨基-乙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(2-二异丙基氨基-乙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(3-二乙基氨基-丙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(3-二甲基氨基-2，2-二甲基-丙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(1-甲基-己基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-(3-仲-丁基-脲基甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(2-甲基-丁基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-(3-异丁基-脲基甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(3-二丁基氨基-丙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(3-苯基-脲基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(3-二乙基氨基-丙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(3-二甲基氨基-2，2-二甲基-丙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，
N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(1-甲基-己基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(3-二丁基氨基-丙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(2-二甲基氨基-乙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(2-二异丙基氨基-乙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(2-甲基-丁基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(3-异丁基-脲基甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(3-仲-丁基-脲基甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(3-戊基-脲基)-甲基]-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[3-(1-甲基-己基)-脲基甲基]-烟酰胺。
本发明还有另一个实施方案是式I的化合物及其药用盐，其中A表示噻吩-2，5-二基；吡啶-2，5-二基；或1，4-亚苯基；R1表示烷基；其中所述烷基是未取代的或被以下基团取代一次或数次卤素；-NH-烷基；或-N(烷基)2。
这些化合物例如为5-[(4-甲基-戊酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-(丙酰氨基-甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-(丁酰氨基-甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-(异丁酰氨基-甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2，2，3，3，3-五氟-丙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-乙基-丁酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2，2，2-三氟-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(4-二甲基氨基-丁酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(3-甲基-丁酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-二丙基氨基-丙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-二甲基氨基-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，
5-[(3-甲基-戊酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(丙酰氨基-甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(异丁酰氨基-甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(4-甲基-戊酰氨基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-乙基-丁酰氨基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(丁酰氨基-甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(4-甲基-戊酰氨基)-甲基]-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(3-甲基-戊酰氨基)-甲基]-烟酰胺。
本发明还有另一个实施方案是式I的化合物及其药用盐，其中A表示噻吩-二基，亚苯基或吡啶-二基；R1表示基团-NR3R4，其中R3和R4独立地表示烷基，链烯基，或炔基，其全都任选地被取代；或-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-烷基；-(CH2)n-(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)-NH-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)烷基；-(CH2)n-C(O)-O-烷基；或-(CH2)n-O-C(O)-烷基；n为1-6；m为1-4。
本发明还有另一个实施方案是式I的化合物及其药用盐，其中A表示1，4-亚苯基；R1是基团-NR3R4，其中R3和R4独立地表示烷基。
这些化合物例如为N-(2-氨基-苯基)-4-(3-丁基-3-甲基-脲基甲基)-苯甲酰胺。
本发明还有另一个实施方案是式I-A的化合物及其药用盐
其中A表示噻吩-2，5-二基；吡啶-2，5-二基；或1，4-亚苯基；R5表示-(CH2)k-环丙基；-(CH2)k-环戊基；-(CH2)k-环己基；-(CH2)k-环戊-2-烯基；-(CH2)k-(5-氧代-吡咯烷-2-基)；-(CH2)k-(2-氧代-吡咯烷-1-基)；-NH-(CH2)k-环丙基；-NH-(CH2)k-环戊基；-NH-(CH2)k-环己基；-NH-(CH2)k-环戊-2-烯基；-NH-(CH2)k-(5-氧代-吡咯烷-2-基)；或-NH-(CH2)k-(2-氧代-吡咯烷-1-基)；k是0-6。
这些化合物例如是5-[(环戊烷羰基-氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-环戊-2-烯基-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-氧代-吡咯烷-2-羧酸[5-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-噻吩-2-基甲基]-酰胺，
5-[(3-环戊基-丙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(3-环己基-丙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-环戊基-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-环丙基-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-{3-[3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基]-脲基甲基}-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(环戊烷羰基-氨基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-环戊-2-烯基-乙酰氨基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(3-环戊基-丙酰氨基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-{3-[3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基]-脲基甲基}-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(3-环丙基甲基-脲基甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(3-环戊基-丙酰氨基)-甲基]-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-{3-[3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基]-脲基甲基}-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(2-环戊-2-烯基-乙酰氨基)-甲基]-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(2-环戊基-乙酰氨基)-甲基]-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(3-环己基-丙酰氨基)-甲基]-烟酰胺。
本发明另一个实施方案是制备本发明式I的(酰氨基-甲基)-亚芳基-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺衍生物或其药用盐的方法，该方法通过(a)使式II的化合物与通式III的化合物反应， 在式II中，A具有以上定义的含义，且Y表示适宜的保护基，
在式III中R1是烷基，链烯基，炔基，其全都任选地被取代；或-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-烷基；-(CH2)n-O-烷基；-(CH2)n-C(O)-NH-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)烷基；-(CH2)n-C(O)-O-烷基；或-(CH2)n-O-C(O)-烷基；或者使所述式II的化合物与式X的化合物反应 在式X中，R3和R4独立地表示卤素；烷基，链烯基，炔基，其全都任选地被取代；或-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-烷基；-(CH2)n-O-烷基；-(CH2)n-C(O)-NH-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)烷基；-(CH2)n-C(O)-O-烷基；或-(CH2)n-O-C(O)-烷基；n为1-6；m为1-4；
(b)随后断裂所述保护基；和(c)如果需要，通过加入适宜酸或碱将产物转化为药用盐。
可用有机化学的标准程序来获得用于上面所述方法所必需的起始物质。这类起始物质的制备描述于后附的非限制性的实施例中。备选地，起始物质通过那些在有机化学家的普通技术范围内的与所举例说明的程序相似的程序来获得。
处理步骤(a)中氨基的保护基及它们的断裂方法(处理步骤(b))从肽化学中已知。实例有苄氧基羰基(通过氢化或在乙酸中的氢溴酸断裂)，叔-丁氧羰基(通过强酸如三氟乙酸，纯的或在二氯甲烷中，或在二噁烷中的盐酸(HCl)断裂)，9-芴甲氧羰基(通过仲胺如哌啶断裂)。
现在将详细地和根据基团A的性质描述通式I的化合物的制备，以及其中R1是或不是如上定义的-NR3R4基团的情形。
式II的化合物与其中R1不是基团-NR3R4的式III的化合物的反应涉及三步一罐(three-step one-pot)程序。在第一步中，式III的羧酸酯被活化。在活化剂的存在下，在惰性溶剂或稀释剂中，例如在二氯甲烷，二噁烷或四氢呋喃(THF)中进行该反应。合适的酸的活性衍生物是例如，酰卤，例如通过酸与无机酰基氯反应形成的酰氯，所述无机酰基氯例如亚硫酰氯或草酰氯；混合的酸酐，例如通过酸与氯甲酸酯如氯甲酸异丁酯反应形成的酸酐；活性酯，例如通过酸与酚如五氟苯酚反应形成的酯；通过酸和N-羟基苯并三唑的反应形成的酯；酰叠氮，例如通过酸与叠氮化物如二苯基磷酰基叠氮化物反应形成的叠氮化物；酰腈，例如通过酸与氰化物如二乙基磷酰氰反应形成的氰化物；或酸和碳二亚胺如N-3-二甲基氨基丙基-N-乙基碳二亚胺或二环己基碳二亚胺反应的产物，或酸与N，N’-碳酰二咪唑反应的产物；或酸与脲鎓盐(uronium)如O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓四氟硼酸盐反应的产物；或酸与基于磷的试剂如双-(2-氧代-3-噁烷基)-磷酰氯反应的产物。
在第二步中，将式II的化合物加入至溶液中。这些方法是本领域技术人员公知的。原则上，如在例如Houben-Weyl，″Methoden der organischenChemie″，Vol.XV/1和XV/2中描述的在肽化学中用于合成酰胺的所有方法也可以适用。
如果Y是叔-丁氧羰基，它可以最终在第三步中通过将三氟乙酸加入反应混合物而断裂，产生式I的化合物。备选地，在第二步后分离酰胺产物，在上述反应条件下以单独的步骤进行保护基Y的断裂。
在文献例如EP 0 847 992中描述了其中A是苯基且Y是叔-丁氧羰基的化合物II叔-丁([2-(4-氨基甲基-苯甲酰氨基)-苯基]-氨基甲酸叔-丁酯)的制备。
一种优选的制备其中A是2，5-噻吩的式II的化合物的方法涉及去除化合物IV的烯丙基基团。
烯丙基基团的断裂可以例如在作为烯丙基清除剂的亚磺酸，羧酸，吗啉，双甲酮或N，N’-二甲基巴比妥酸的存在下，通过钯催化反应来完成。
式IV的化合物可以通过化合物V， 与式VI的化合物反应来获得 在式VI中Y表示如上定义适宜的保护基。
该反应典型地涉及二步一罐程序。在第一步中，式V的羧酸酯被活化。在活化剂的存在下，在惰性溶剂或稀释剂中，例如在二氯甲烷，二噁烷或THF中进行该反应。合适的酸的活性衍生物是例如，酰卤，例如通过酸与无机酰基氯反应形成的酰氯，所述无机酰基氯例如亚硫酰氯或草酰氯；混合的酸酐，例如通过酸与氯甲酸酯如氯甲酸异丁酯反应形成的酸酐；活性酯，例如通过酸与酚如五氟苯酚反应形成的酯；通过酸和N-羟基苯并三唑的反应形成的活性酯；酰叠氮，例如通过酸与叠氮化物如二苯基磷酰基叠氮化物反应形成的叠氮化物；酰腈，例如通过酸与氰化物如二乙基磷酰氰反应形成的氰化物；或酸和碳二亚胺如N-3-二甲基氨基丙基-N-乙基碳二亚胺或二环己基碳二亚胺反应的产物，或酸与N，N’-碳酰二咪唑反应的产物；或酸与脲鎓盐如O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓四氟硼酸盐反应的产物；或酸与基于磷的试剂，例如双-(2-氧代-3-噁烷基)-磷酰氯反应的产物。
在第二步中，将化合物VI加入至溶液中以产生化合物IV。这些方法是本领域技术人员公知的。原则上，如在例如Houben-Weyl，″Methoden derorganischen Chemie″，Vol.XV/1和XV/2中描述的在肽化学中用于合成酰胺的所有方法也可以适用。
通过水解由式VII的化合物制备式V的化合物。
在式VII中，R2是烷基或任选取代的苄基。此处所用的烷基具有以上提供的意义。R2的实例有甲基，乙基，叔-丁基，苄基或对甲氧基苄基。进行水解的条件取决于基团R2的性质。当R2是甲基或乙基时，在碱(例如氢氧化锂，氢氧化钠，或氢氧化钾)存在下，在惰性溶剂或稀释剂中，例如在甲醇，乙醇，二噁烷，THF，水中进行该反应。当R2是叔-丁基时，该反应在酸存在下进行，所述酸例如在惰性溶剂如二乙醚或二噁烷中的盐酸或二氯甲烷中的三氟乙酸溶液。当R2是苄基时，该反应通过在适宜载体如碳上的贵金属催化剂如钯或铂的存在下氢解进行。
在文献例如Millot，N.，等，Synthesis 7(2000)941-948中描述了5-二烯丙基氨基甲基-噻吩-2-羧酸酯。
一种优选的制备其中A是2，5-吡啶的式II的化合物的方法涉及将化合物VIII的氰基还原。
腈的还原可以例如通过在催化剂例如碳上钯或阮内镍的存在下，在适宜的溶剂例如THF、甲醇、乙醇或二甲基甲酰胺(DMF)中，任选地在例如HCl，三乙胺，氨或羟胺的存在下完成。
一种优选的制备式VIII的化合物的方法涉及使化合物IX， 与式VI的化合物反应 在式VI中，Y表示如上定义适宜的保护基。反应可以在如制备化合物IV所述的条件下进行。6-氰基-烟酸描述在文献中，例如在Vorbrueggen，H.，和Krolikiewicz，K.，Synthesis 4(1983)316-319中。
其中R1是上文定义的基团-NR3R4的通式I的脲基甲基衍生物可以通过已知适用于制备化学相关化合物的任何方法制备。这些方法通过下列代表性的实施例举例说明。必需的起始物质可以通过有机化学的标准方法获得。这些起始物质的制备在后附的非限制性的实施例中描述。备选地必需的起始物质可以通过与举例说明的那些类似的方法获得，这些方法在有机化学家的常规技术范围内。
一种优选的制备所述式I的脲基甲基衍生物的方法涉及将其中Y优选为叔-丁氧羰基的式II的化合物与式X的胺反应， 在式X中，R3和R4具有上述定义的含义。
该反应典型地涉及三步一罐程序。在第一步中，化合物X与碳酰二咪唑在适宜的溶剂例如THF中反应。在第二步中，将化合物II加入反应性中间体以形成相应的脲基衍生物。最后，通过将三氟乙酸加入至反应混合物中断裂Y，产生式I的脲基甲基衍生物。
备选地，在第二步后分离脲基产物，在上述反应条件下，在单独的步骤中进行保护基Y的断裂。
如果Y是叔-丁氧羰基，通过将三氟乙酸加入反应混合物中，它可以最终在第三步中断裂，产生所述式I的衍生物。
通式I的化合物可以含有一个或几个手性中心，于是可以以外消旋或以旋光形式存在。外消旋物可以根据已知方法分离成对映体。例如，通过与旋光酸如例如D-或L-酒石酸，扁桃酸，苹果酸，乳酸或樟脑磺酸反应从外消旋混合物中形成可以通过结晶分离的非对映体盐。备选地，对映体的分离也可以通过在可商购的手性高效液相色谱(HPLC)-相上使用色谱法实现。
按照本发明的化合物可以以其药用盐的形式存在。术语“药用盐”是指常规的保留式I化合物的生物有效性和性能并且由适宜非毒性有机或无机酸或有机或无机碱形成的酸加成盐或碱加成盐。加成盐包括例如衍生于无机酸的那些和衍生于有机酸的那些，所述无机酸如盐酸，氢溴酸，氢碘酸，硫酸，氨基磺酸，磷酸和硝酸，所述有机酸如对甲苯磺酸，水杨酸，甲磺酸，草酸，琥珀酸，柠檬酸，苹果酸，乳酸，富马酸等。碱加成盐包括衍生于铵，钾，钠和氢氧化季铵，如例如四甲基氢氧化铵的那些。将药物化合物化学修饰成盐是药物化学家公知的技术，是为了获得化合物改善的物理和化学稳定性，吸湿性，流动性和溶解性。它例如在Ansel，H.，等，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems，6th ed.，1995，pp.196和1456-1457中描述。
按照本发明的化合物及其药用盐可以用作药物，例如以药物制剂的形式。药物制剂可以口服给药，例如以片剂，包衣片剂，糖锭剂，硬和软明胶胶囊，溶液，乳剂或混悬剂的形式。然而，给药也可以通过直肠进行，例如以栓剂的形式，或者通过肠胃外给药，例如以注射液的形式。
上述药物制剂可以通过将按照本发明的化合物与药物惰性的无机或有机载体加工来获得。可以将乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石，硬脂酸或其盐等例如用作片剂、包衣片剂、糖锭剂、硬明胶胶囊的这种载体。软明胶胶囊的适宜载体例如是植物油，蜡，脂肪，半固体和液体多元醇等。然而，取决于活性物质的性质，在软明胶胶囊的情形中通常不需要载体。生产溶液和糖浆的适宜载体例如是水，多元醇，甘油，植物油等。栓剂的适宜载体例如是天然或硬化油，蜡，脂肪，半液体或液体多元醇等。
此外药物制剂可以含有防腐剂，增溶剂，稳定剂，湿润剂，乳化剂，甜味剂，着色剂，调味剂，改变渗透压的盐，缓冲液，掩蔽剂或抗氧化剂。它们还可以含有其它治疗上有价值的物质。
本发明一目的还在于含有作为活性成分的一种或多种按照本发明的化合物和药用辅药的药物。
本发明另一目的是该药物在治疗癌症中的应用，其特征在于由于在肿瘤细胞中诱导组蛋白乙酰化而抑制所述肿瘤细胞的增殖。
本发明还有一个目的是抑制肿瘤细胞增殖的方法，其特征在于由于向肿瘤细胞施用治疗有效量的一种或多种按照本发明的化合物，在所述肿瘤细胞中诱导组蛋白乙酰化。
使用细胞乙酰化测定来证明按照本发明的化合物作为HDAC抑制剂的活性。其中，在PC3细胞中监视组蛋白的乙酰化。高度乙酰化意味着化合物抑制组蛋白脱乙酰基酶。平行监视细胞生存力，以评估化合物的细胞毒性。
PC3细胞，人前列腺癌细胞，以1800个细胞/孔接种于384-孔微量滴定板中的RPMI 1640(包括5％FCS，2mM谷氨酰胺和青霉素/链霉素)。
在37℃48小时后，以终浓度为1μM加入预稀释的化合物。将化合物以1∶10预稀释在二甲亚砜(DMSO)或培养基中，导致DMSO终浓度为0.5％。
在24小时温育后，通过加入细胞增殖试剂WST1测定细胞生存力。另外60分钟后，测量光密度(OD)(450nm比690nm)。
在WST1测定后，准备细胞层用于ELISA反应。给培养基通气，在-20℃下将细胞固定在乙醇中60分钟。在用PBS/吐温洗涤后，加入封闭溶液(PBS/5％ FCS/吐温)，再次洗涤细胞层。以1∶200的稀释度加入针对组蛋白H3或H4的抗体(抗乙酰化组蛋白(兔多克隆IgG)，UpstateBiotechnologie)，37℃60分钟。作为第二抗体使用山羊抗兔IgG(H+L)人IgG吸附-HRP偶联物(Dako)(1∶2000稀释)。洗涤细胞3次，使过氧化物酶底物ABTS在37℃反应30-60分钟。草酸终止反应，在405nm测量OD。
在减去空白O.D.以后，计算乙酰化的百分比平均O.D.乙酰化平均O.D.DMSO对照*100％平均O.D.WSTI平均O.D.DMSO对照
按照本发明的化合物的效果可以进一步通过下列试验评估
方法将雄性NMRI nu/nu-小鼠(每组n＝15)，8-10周龄，皮下注射5*106 PC-3前列腺癌细胞。在第10天，将肿瘤体积约为150mm3的动物随机分配为治疗组。将试验化合物作为7.5％明胶-0.22％NaCl-混悬剂的微混悬剂给药，基于实际体重施用体积为10ml/kg。在每周5-7次的治疗方案上从约第10天至第27天进行一天一次的口服治疗。
从下列方程确定肿瘤体积肿瘤体积＝1/2ab2，其中“a”和“b”分别是肿瘤的长和短直径。
除非另外说明，本发明现在将在下列非限制性的实施例中举例说明i)在真空中通过旋转蒸发进行蒸发，在通过过滤去除残余固体如干燥剂后进行后处理程序；(ii)在18-25℃的环境温度下和在惰性气体如氩气或氮气的气氛下进行操作；(iii)在获自德国达姆施塔特E.Merck的Merck Kieselgel二氧化硅或Merck Lichroprep RP-18反向二氧化硅上进行柱色谱法(通过快速程序)和高压液相色谱(HPLC)；(iv)提供产率仅为了举例说明和不一定是可获得的最大值；(v)使用Mettler SP62自动熔点装置，油浴装置或Kohler电热板装置测定熔点。
(vi)通过核(通常质子)磁共振(NMR)和质谱技术(使用APCI的Micromass Platform II机器或使用电喷雾的Micromass Platform ZMD)证实式I的终产物的结构；(vii)中间体通常没有完全表征，且纯度通过薄层色谱法评估；(viii)使用下列缩略词DMF N，N-二甲基甲酰胺；DMSO二甲亚砜；THF 四氢呋喃；MeOH 甲醇；
HCl 盐酸；NaH 氢化钠；CH2Cl2二氯甲烷；H2SO4硫酸sat. 饱和的sol. 溶液rt室温eq当量实验MW 分子量(通过质谱法测定的)计算MW 分子量(由化学式计算的)实施例1步骤1{2-[(6-氰基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁酯向-20℃的444mg(3.0mmol)6-氰基-烟酸和354mg(3.5mmol)N-甲基吗啉在7ml DMF中的溶液中，加入450mg(3.3mmol)氯甲酸异丁酯。将反应混合物升温至5℃，加入625mg(3.0mmol)单-叔-丁氧羰基-邻苯二胺。将反应混合物升温至室温过夜，然后倒入至50ml 5％的柠檬酸水溶液中。用乙酸乙酯萃取水相，用碳酸氢盐和盐水洗涤合并的有机相，通过Na2SO4干燥。蒸发溶剂，将剩余物进行硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯2∶1)，产生795mg(2.35mmol){2-[(6-氰基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁酯；mp.183-184℃。
步骤2{2-[(6-氨基甲基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁酯在烧瓶中，在氮气下，放入2920mg(8.72mmol){2-[(6-氰基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁酯和1000mg Pd(碳上10％)，加入10mlTHF和120ml甲醇。将起始物质在大气压和室温下氢化3.5小时。滤去催化剂。蒸发溶剂和将剩余物进行硅胶色谱法(甲苯/异丙醇/NH3(浓)16∶20∶1)，产生2600mg(7.6mmol){2-[(6-氨基甲基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁酯；精确MW[M+H]计算值343.18；实验MW[M+H]343.2。
实施例2步骤15-二烯丙基氨基甲基-噻吩-2-羧酸向4.5g(17.9mmol)5-二烯丙基氨基甲基-噻吩-2-羧酸甲酯在45ml甲醇中的溶液中，加入17.9ml 1N KOH水溶液(17.9mmol)。将反应混合物在50℃搅拌16小时和在回流下搅拌1小时。蒸发溶剂，将20ml水加入至剩余物和9ml 2N HCl水溶液中。用乙酸乙酯萃取水相，通过Na2SO4干燥合并的有机相。蒸发溶剂，将剩余物进行硅胶色谱法(乙酸乙酯)，产生4.05g(17.06mmol)5-二烯丙基氨基甲基-噻吩-2-羧酸；精确MW[M+H]计算值238.09；实验MW[M+H]238.3。
步骤2{2-[(5-二烯丙基氨基甲基-噻吩-2-羰基)-氨基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁酯向2.70g(11.38mmol)5-二烯丙基氨基甲基-噻吩-2-羧酸在50ml THF中的溶液中，加入2.03g(12.51mmol)碳酰二咪唑。在室温下45分钟后，将2.48g(11.95mmol)单-叔-丁氧羰基-邻苯二胺加入至反应混合物中，室温下搅拌3小时。蒸发溶剂，将剩余物溶解在乙酸乙酯中。用饱和NaHCO3洗涤有机相两次，用水洗涤一次，通过Na2SO4干燥。蒸发溶剂，将剩余物进行硅胶色谱法(乙酸乙酯/庚烷2∶8)，产生4.10g(9.59mmol){2-[(5-二烯丙基氨基甲基-噻吩-2-羰基)-氨基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁酯；精确MW[M+H]计算值428.20；实验MW[M+H]428.3。
步骤3{2-[(5-氨基甲基-噻吩-2-羰基)-氨基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁酯向22.35g(143.13mmol)N，N′-二甲基巴比妥酸和0.55g(0.477mmol)四(三苯膦)钯(0)在200ml CH2Cl2中的溶液中，加入10.20g(23.86mmol)二烯丙基氨基甲基-噻吩-2-羰基)-氨基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁酯。在35℃下1小时后，蒸发溶剂，将0.1N HCl水溶液加入至剩余物中。用二乙醚萃取水相三次，用饱和NaHCO3萃取合并的有机相。用饱和NaHCO3中和酸性水相，用CH2Cl2萃取合并的水相三次。用Na2SO4干燥有机相。蒸发溶剂，将剩余物进行硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇9∶1)，产生4.63g(13.32mmol){2-[(5-氨基甲基-噻吩-2-羰基)-氨基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁酯；精确MW[M+H]计算值348.14；实验MW[M+H]348.1。
实施例35-[(3-甲基-戊酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基苯基)-酰胺向33.43mg(0.288mmol)3-甲基戊酸在1ml THF中的溶液中，加入46.67mg(0.288mmol)1，1’-碳酰二咪唑。在室温下1小时后，加入100mg(0.288mmol){2-[(5-氨基甲基-噻吩-2-羰基)-氨基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁酯，在室温下搅拌反应混合物3小时。加入1.7ml三氟乙酸，在室温下2小时后，小心加入饱和NaHCO3水溶液，用乙酸乙酯萃取水相三次。用Na2SO4干燥合并的有机相。蒸发溶剂，将剩余物进行硅胶色谱法(乙酸乙酯/庚烷6∶4)，产生59.3mg(0.171mmol)5-[(3-甲基-戊酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺；精确MW[M+H]计算值346.16；实验MW[M+H]346.4。
实施例4类似于实施例3所述方式，且使用文献中(例如在标准著作如Houben-Weyl，″Methoden der Organischen Chemie，Georg Thieme Verlag″，Stuttgart；Organic Reactions，John Wiley & Sons，Inc.，New York中)所述的已知方法，制备下列化合物
实施例5
5-[(3-丙-2-炔基-脲基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基苯基)-酰胺向15.8mg(0.288mmol)在1ml THF中的溶液中，加入46.7mg(0.288mmol)1，1’-碳酰二咪唑。在室温下1小时后，加入100mg(0.288mmol){2-[(5-氨基甲基-噻吩-2-羰基)-氨基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁酯，在室温下搅拌反应混合物1小时。加入1.7ml三氟乙酸，在室温下16小时后，小心加入饱和NaHCO3水溶液，用乙酸乙酯萃取水相三次。用Na2SO4干燥合并的有机相，蒸发溶剂。通过HPLC/MS纯化剩余物，产生75mg(0.228mmol 5-[(3-丙-2-炔基-脲基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺；精确MW[M+H]计算值329.11；实验MW[M+H]329.3。
实施例6以类似于实施例5中所述的方式，且使用文献中(例如在标准著作如Houben-Weyl，″Methoden der Organischen Chemie，Georg Thieme Verlag″，Stuttgart；Organic Reactions，John Wiley & Sons，Inc.，New York中)所述的已知方法，制备下列化合物
参考文献列表Ansel，H.，等，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems，6th ed.，1995，第196和1456-1457页DE-A 2 062 265EP-A 0 242 851EP-A 0 847 992FR 2 167 954Hassan，H.，等，Indian J.Chem.39B(2000)764-768Houben-Weyl，″Methoden der organischen Chemie″Vol.XV/1和XV/2
Koyama，Y.，等，Blood 96(2000)1490-1495Millot，N.，等，Synthesis 7(2000)941-948Moll，R.，等，Z.Chem.17(1977)133-134Organic Reactions，John Wiley & Sons，Inc.，New YorkRastogi，R.，和Sharma，S.，Indian J.Chem.，Sect.B，21B(5)(1982)485-487Vorbrueggen，H.，和Krolikiewicz，K.，Synthesis 4(1983)316-319
权利要求
1.一种通式I的化合物及其药用盐， 其中A表示噻吩-二基，亚苯基或吡啶-二基；R1表示烷基，链烯基，炔基，其全都任选地被取代；或-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-烷基；-(CH2)n-O-烷基；-(CH2)n-C(O)-NH-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)烷基；-(CH2)n-C(O)-O-烷基；或-(CH2)n-O-C(O)-烷基；或基团-NR3R4，其中R3和R4独立地表示氢；烷基，链烯基或炔基，其全都任选地被取代；或-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-烷基；-(CH2)n-O-烷基；-(CH2)n-C(O)-NH-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)烷基；-(CH2)n-C(O)-O-烷基；或-(CH2)n-O-C(O)-烷基；n为1-6；m为1-4。
2.按照权利要求1的化合物及其药用盐，其中A表示噻吩-二基，亚苯基或吡啶-二基；R1是基团-NR3R4，其中R3是氢，R4如权利要求1所定义。
3.按照权利要求1的化合物及其药用盐，其中A表示噻吩-二基，亚苯基或吡啶-二基；R1表示烷基，链烯基，烷基，其全都任选地被取代；或-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-烷基；-(CH2)n-O-烷基；-(CH2)n-C(O)-NH-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)烷基；-(CH2)n-C(O)-O-烷基；或-(CH2)n-O-C(O)-烷基；n为1-6；m为1-4。
4.按照权利要求1或3的化合物及其药用盐，其中A表示噻吩-2，5-二基；R1表示链烯基；-(CH2)n-O-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；或-(CH2)n-C(O)烷基；n为1-6。
5.按照权利要求4的化合物，其中所述化合物是5-[(2-乙氧基-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-(戊-4-烯酰氨基-甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-乙酰氨基-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-({2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰氨基}-甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(4-氧代-戊酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺。
6.按照权利要求1或2的化合物及其药用盐，其中A表示噻吩-2，5-二基；R1是基团-NR3R4，其中R3是氢；R4是链烯基；炔基；-(CH2)n-(O)-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；或-(CH2)n-C(O)-O-烷基；n为1-6。
7.按照权利要求6的化合物，其中所述化合物是5-[3-(3-乙氧基-丙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(3-丙-2-炔基-脲基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(2-乙酰氨基-乙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(2-甲氧基-乙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(3-烯丙基-脲基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(3-丁氧基-丙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，4-{3-[5-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-噻吩-2-基甲基]-脲基}-丁酸乙酯。
8.按照权利要求1或3的化合物及其药用盐，其中A表示1，4-亚苯基；R1表示链烯基；-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-CH3；-(CH2)n-O-烷基；或-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；n为1-6；m为1-4。
9.按照权利要求8的化合物，N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-乙氧基-乙酰氨基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(戊-4-烯酰氨基-甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-({2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰氨基}-甲基)-苯甲酰胺，4-[(2-乙酰氨基-乙酰氨基)-甲基]-N-(2-氨基-苯基)-苯甲酰胺。
10.按照权利要求1或2的化合物及其药用盐，其中A表示1，4-亚苯基；R1是基团-NR3R4，其中R3是氢；R4是链烯基；炔基；-(CH2)n-(O)-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；或-(CH2)n-C(O)-O-烷基；n为1-6。
11.按照权利要求10的化合物，4-[3-(2-乙酰氨基-乙基)-脲基甲基]-N-(2-氨基-苯基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(2-甲氧基-乙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(3-丁氧基-丙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(3-乙氧基-丙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，4-[(3-烯丙基-脲基)-甲基]-N-(2-氨基-苯基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(3-异丙氧基-丙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(3-丙-2-炔基-脲基)-甲基]-苯甲酰胺，4-{3-[4-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-苄基]-脲基}-丁酸甲酯。
12.按照权利要求1或2的化合物及其药用盐，其中A表示吡啶-2，5-二基；R1是基团-NR3R4，其中R3是氢，和R4是-(CH2)n-(O)-烷基；n为1-6。
13.按照权利要求12的化合物，N-(2-氨基-苯基)-6-[3-(3-丁氧基-丙基)-脲基甲基]-烟酰胺。
14.按照权利要求1或3的化合物及其药用盐，其中A表示吡啶-2，5-二基；R1表示链烯基；或-(CH2)n-O-烷基；n为1-6。
15.按照权利要求14的化合物，N-(2-氨基-苯基)-6-[(2-甲氧基-乙酰氨基)-甲基]-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-(戊-4-烯酰氨基-甲基)-烟酰胺。
16.按照权利要求1或2的化合物及其药用盐，其中A表示噻吩-2，5-二基；吡啶-2，5-二基；或1，4-亚苯基；R1是基团-NR3R4，其中R3是氢，和R4是未取代的或被以下基团取代一次或数次的烷基卤素；-NH-烷基；或-N(烷基)2。
17.按照权利要求16的化合物，5-[3-(2-二甲基氨基-乙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(2-二异丙基氨基-乙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(3-二乙基氨基-丙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(3-二甲基氨基-2，2-二甲基-丙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(1-甲基-己基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-(3-仲-丁基-脲基甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(2-甲基-丁基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-(3-异丁基-脲基甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[3-(3-二丁基氨基-丙基)-脲基甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(3-苯基-脲基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(3-二乙基氨基-丙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(3-二甲基氨基-2，2-二甲基-丙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(1-甲基-己基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(3-二丁基氨基-丙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(2-二甲基氨基-乙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(2-二异丙基氨基-乙基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(2-甲基-丁基)-脲基甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(3-异丁基-脲基甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(3-仲-丁基-脲基甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(3-戊基-脲基)-甲基]-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[3-(1-甲基-己基)-脲基甲基]-烟酰胺。
18.按照权利要求1或3的化合物及其药用盐，其中A表示噻吩-2，5-二基；吡啶-2，5-二基；或1，4-亚苯基；R1表示烷基；其中所述烷基是未取代的或被以下基团取代一次或数次卤素；-NH-烷基；或-N(烷基)2。
19.按照权利要求18的化合物，5-[(4-甲基-戊酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-(丙酰氨基-甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-(丁酰氨基-甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-(异丁酰氨基-甲基)-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2，2，3，3，3-五氟-丙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-乙基-丁酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2，2，2-三氟-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(4-二甲基氨基-丁酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(3-甲基-丁酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-二丙基氨基-丙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-二甲基氨基-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(3-甲基-戊酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(丙酰氨基-甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(异丁酰氨基-甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(4-甲基-戊酰氨基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-乙基-丁酰氨基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(丁酰氨基-甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(4-甲基-戊酰氨基)-甲基]-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(3-甲基-戊酰氨基)-甲基]-烟酰胺。
20.按照权利要求1的化合物及其药用盐，其中A表示噻吩-二基，亚苯基或吡啶-二基；R1表示基团-NR3R4，其中R3和R4独立地表示烷基，链烯基，或炔基，其全都任选地被取代；或-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-烷基；-(CH2)n-(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)-NH-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)烷基；-(CH2)n-C(O)-O-烷基；或-(CH2)n-O-C(O)-烷基；n为1-6；m为1-4。
21.按照权利要求1或20的化合物及其药用盐，其中A表示1，4-亚苯基；R1是基团-NR3R4，其中R3和R4独立地表示烷基。
22.按照权利要求21的化合物，其中所述化合物是N-(2-氨基-苯基)-4-(3-丁基-3-甲基-脲基甲基)-苯甲酰胺。
23.一种式I-A的化合物及其药用盐， 其中A表示噻吩-2，5-二基；吡啶-2，5-二基；或1，4-亚苯基；R5表示-(CH2)k-环丙基；-(CH2)k-环戊基；-(CH2)k-环己基；-(CH2)k-环戊-2-烯基；-(CH2)k-(5-氧代-吡咯烷-2-基)；-(CH2)k-(2-氧代-吡咯烷-1-基)；-NH-(CH2)k-环丙基；-NH-(CH2)k-环戊基；-NH-(CH2)k-环己基；-NH-(CH2)k-环戊-2-烯基；-NH-(CH2)k-(5-氧代-吡咯烷-2-基)；或-NH-(CH2)k-(2-氧代-吡咯烷-1-基)；k是0-6。
24.按照权利要求23的化合物，5-[(环戊烷羰基-氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-环戊-2-烯基-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-氧代-吡咯烷-2-羧酸[5-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-噻吩-2-基甲基]-酰胺，5-[(3-环戊基-丙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(3-环己基-丙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-环戊基-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-[(2-环丙基-乙酰氨基)-甲基]-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，5-{3-[3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基]-脲基甲基}-噻吩-2-羧酸(2-氨基-苯基)-酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(环戊烷羰基-氨基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-环戊-2-烯基-乙酰氨基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-[(3-环戊基-丙酰氨基)-甲基]-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-{3-[3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基]-脲基甲基}-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-4-(3-环丙基甲基-脲基甲基)-苯甲酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(3-环戊基-丙酰氨基)-甲基]-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-{3-[3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基]-脲基甲基}-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(2-环戊-2-烯基-乙酰氨基)-甲基]-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(2-环戊基-乙酰氨基)-甲基]-烟酰胺，N-(2-氨基-苯基)-6-[(3-环己基-丙酰氨基)-甲基]-烟酰胺。
25.一种制备按照权利要求1的化合物的方法，其特征在于(a)使式II的化合物与通式III的化合物反应， 在式II中，A具有权利要求1中所定义的含义，Y表示适宜的保护基， 在通式III中R1是烷基，链烯基，炔基，其全都任选地被取代；或-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-烷基；-(CH2)n-O-烷基；-(CH2)n-C(O)-NH-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)烷基；-(CH2)n-C(O)-O-烷基；或-(CH2)n-O-C(O)-烷基；或者使所述式II的化合物与式X的化合物反应 在式X，R3和R4独立地表示卤素；烷基，链烯基，炔基，其全都任选地被取代；或-CH2-(O-CH2-CH2-)mO-烷基；-(CH2)n-O-烷基；-(CH2)n-C(O)-NH-烷基；-(CH2)n-NH-C(O)-烷基；-(CH2)n-C(O)烷基；-(CH2)n-C(O)-O-烷基；或-(CH2)n-O-C(O)-烷基；n为1-6；m为1-4；(b)随后断裂所述保护基；和(c)如果需要，通过加入适宜酸或碱将产物转化为药用盐。
26.一种含有一种或多种作为活性成分的按照权利要求1-24中任何一项的化合物以及药用辅药的药物。
27.按照权利要求26的药物，其通过在肿瘤细胞中诱导组蛋白乙酰化而用于抑制所述肿瘤细胞增殖。
28.按照权利要求26的药物，用于治疗癌症。
29.一种或多种按照权利要求1-24中任何一项的化合物在制备药物中的应用，所述药物通过在肿瘤细胞中诱导组蛋白乙酰化而用于抑制所述肿瘤细胞增殖。
30.一种或多种按照权利要求1-24中任何一项的化合物在治疗癌症中的应用。
31.一种抑制肿瘤细胞增殖的方法，该方法由于向肿瘤细胞施用有效量的一种或多种按照权利要求1-24中任何一项的化合物而在所述肿瘤细胞中诱导组蛋白乙酰化。
32.一种通过权利要求25所要求的方法或通过等价方法制备的按照权利要求1-22中任何一项的化合物。
33.如上所述的本发明。
全文摘要
本发明描述了通式(I)的化合物，它们的制备方法，含有它们的药物和它们的制备，以及这些化合物作为药剂的应用。按照本发明的化合物显示抗增殖和诱导分化的活性，这导致抑制肿瘤细胞增殖，诱导编程性细胞死亡和抑制侵入。
文档编号C07D333/38GK1723192SQ200380105497
公开日2006年1月18日 申请日期2003年12月9日 优先权日2002年12月10日
发明者格奥尔·费尔蒂希, 弗兰克·赫廷, 马蒂亚斯·克尔纳, 曼弗雷德·库比斯, 安雅·林贝格, 乌尔丽克·赖夫, 米夏埃尔·魏德纳 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司