Akt活性抑制剂的制作方法

专利名称：Akt活性抑制剂的制作方法
背景技术：
本发明涉及含有杂环三嗪的化合物，该化合物为一种或多种丝氨酸/苏氨酸激酶即Akt同工型的活性抑制剂(Akt亦称PKB，在下文称为“Akt”)。本发明还涉及含有此类化合物的药物组合物以及使用本发明化合物治疗癌症的方法。
细胞凋亡(程序性细胞死亡)在胚胎发育，以及在例如变性性神经元疾病、心血管疾病和癌症等多种疾病的发病机理中扮演重要角色。近期的研究导致了对参与程序性细胞死亡调节或执行的各种促凋亡基因产物和抗凋亡基因产物的确认。抗凋亡基因例如Bc12或Bc1-xL的表达，抑制被各种刺激诱导的凋亡性细胞死亡。另一方面，促凋亡基因例如Bax或Bad的表达会导致程序性细胞死亡(Aams等，Science，2811322-1326(1998))。程序性细胞死亡的执行是由与胱天蛋白酶(caspase)-1相关蛋白酶介导的，包括胱天蛋白酶-3、胱天蛋白酶-7、胱天蛋白酶-8和胱天蛋白酶-9等(Thornberry等，Science，2811312-1316(1998))。
磷脂酰肌醇3’-OH激酶(PI3K)/Akt途径对调节细胞存活/细胞死亡显得很重要(Kulik等，Mol.Cell.Biol.171595-1606(1997)；Franke等，Cell，88435-437(1997)；Kauffmann-Zeh等，Nature 385544-548(1997)；Hemmings Science，275628-630(1997)；Dudek等，Science，275661-665(1997))。存活因子，例如血小板衍生生长因子(PDGF)、神经生长因子(NGF)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)，通过诱导PI3K的活性，促进各种条件下细胞的存活(Kulik等，1997，Hemmings1997)。活化PI3K导致磷脂酰肌醇(3，4，5)-三磷酸(PtdIns(3，4，5)-P3)产生，磷脂酰肌醇(3，4，5)-三磷酸继而与含有血小板白细胞C激酶底物同系(PH)结构域的丝氨酸/苏氨酸激酶Akt结合，并促进其活化(Franke等，Cell，81727-736(1995)；Hemmings Science，277534(1997)；Downward，Curr.Opin.Cell Biol.10262-267(1998)；Alessi等，EMBOJ.156541-6551(1996))。PI3K特异性抑制剂或显性失活Akt突变体破坏了这些生长因子或细胞因子促进存活的活性。早已披露PI3K抑制剂(LY294002或渥曼青霉素)通过上游激酶阻断Akt的活化。另外，在细胞正常经历凋亡性细胞死亡的条件下，组成型活性PI3K或Akt突变体的导入可促进细胞存活(Kulik等，1997，Dudek等，1997)。
已鉴别出第二信使调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Akt亚家族的3个成员，并分别称之为Akt1/PKBα、Akt2/PKBβ和Akt3/PKBγ(在下文称为“Akt1”、“Akt2”和“Akt3”)。同工型是同源的，特别是在编码催化结构域的区域。Akt被在响应PI3K信号时发生的磷酸化作用激活。PI3K使膜肌醇磷脂磷酸化，产生第二信使磷脂酰-肌醇3，4，5-三磷酸和磷脂酰肌醇3，4-二磷酸，磷脂酰-肌醇3，4，5-三磷酸和磷脂酰肌醇3，4-二磷酸结合到Akt的PH结构域上。Akt激活的最新模型提示，通过3’-磷酸化磷酸肌醇将酶募集到膜上，并在膜上通过上游激酶，产生Akt调节位点的磷酸化作用(B.A.Hemmings，Science275628-630(1997)；B.A.Hemmings，Science 276534(1997)；J.Downward，Science 279673-674(1998))。
Akt1磷酸化发生在两个调节位点，即催化结构域活化环上的Thr308和靠近羧基端的Ser473(D.R.Alessi等，EMBO J.156541-6551(1996)和R.Meier等，J.Biol.Chem.27230491-30497(1997))。同等的调节磷酸化位点也发生在Akt2和Akt3上。在活化环位点使Akt磷酸化的上游激酶被克隆，被称为3’-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)。PDK1不仅使Akt磷酸化，而且可使p70核糖体S6激酶、p90RSK、血清及糖皮质素调节激酶(SGK)和蛋白激酶C磷酸化。上游激酶对近羧基端的Akt调节位点的磷酸化尚未得到证实，但近期的报告提示该酶对于整联蛋白偶联性激酶(ILK-1)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶或自身磷酸化的作用。
对人类肿瘤中Akt水平的分析表明，在为数众多的卵巢癌(J.Q.Cheng等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.899267-9271(1992))和胰腺癌(J.Q.Cheng等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.933636-3641(1996))中，Akt2过量表达。同样还发现在乳腺癌细胞系和前列腺癌细胞系中，Akt3过量表达(Nakatani等，J.Biol.Chem.27421528-21532(1999))。
肿瘤抑制剂PTEN，一种特异性去除PtdIns(3，4，5)-P3中3’磷酸的蛋白质和脂质磷酸酶，是PI3K/Akt途径的负调节蛋白(Li等，Science2751943-1947(1997)，Stambolic等，Cell9529-39(1998)，Sun等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.966199-6204(1999))。PTEN的种系突变是造成人类癌症综合征的原因，例如Cowden病(Liaw等，NatureGenetics 1664-67(1997))。很大比例的人类肿瘤中的PTEN缺失，且无功能性PTEN的肿瘤细胞系显示活化Akt的水平升高(Li等，出处同上，Guldberg等，Cancer Research 573660-3663(1997)，Risinger等，Cancer Research 574736-4738(1997))。
这些观察结果表明，在肿瘤发生中，PI3K/Akt途径在调节细胞存活或细胞凋亡中扮演重要角色。
通过使用例如LY294002和渥曼青霉素等抑制剂抑制PI3K，可获得对Akt活化和Akt活性的抑制。但是，PI3K抑制可能不加区别地影响不仅所有3个Akt同工酶，而且影响依赖于PdtIns(3，4，5)-P3的含有其它PH结构域的信号分子，例如酪氨酸激酶的Tec家族。另外，曾有报道披露Akt可被与PI3K无关的生长信号激活。
或者，可通过阻断上游激酶PDK1的活性抑制Akt活性。尚无特异性PDK1抑制剂的报道。再者，抑制PDK1可能导致抑制其活性依赖于PDK1的许多蛋白激酶，例如，非典型PKC同工型、SGK和S6激酶(Williams等，Curr.Biol.10439-448(2000))。
本发明的一个目的是提供新型化合物，该化合物为Akt抑制剂。
本发明的另一个目的是提供药物组合物，该组合物包含是Akt抑制剂的新型化合物。
本发明的又一个目的是提供一种治疗癌症的方法，该方法包括给予此类Akt活性抑制剂。
发明概述本发明提供含有抑制Akt活性的杂环三嗪的化合物。具体地讲，所公开的化合物选择性抑制一种或两种Akt同工型。本发明也提供含有此类抑制性化合物的组合物，以及通过给予需要治疗癌症的患者所述化合物以抑制Akt活性的方法。
发明详述本发明的化合物用于抑制丝氨酸/苏氨酸激酶Akt的活性。在本发明的第一实施方案中，Akt活性的抑制剂是由下式A表示的化合物或其药物可接受的盐或立体异构体 其中 选自CR1＝N、N＝CR1、 或 a为0或1；b为0或1；m为0、1或2；p为0、1或2；q为0、1、2或3；r为0或1；s为0或1；t为2、3、4、5或6；Q选自H、-NR6R7、芳基和杂环基，所述芳基和杂环基任选被1-3个Rz取代；R1独立选自1)H，2)(C＝O)aObC1-C10烷基，3)(C＝O)aOb芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)(C＝O)aOb杂环基，7)(C＝O)aObC3-C8环 烷基，8)CO2H，9)卤基，10)CN，11)OH，12)ObC1-C6全氟烷基，13)Oa(C＝O)bNR6R7，14)NRc(C＝O)NR6R7，15)S(O)mRa，16)S(O)2NR6R7，17)NRcS(O)mRa，18)氧代，19)CHO，20)NO2，21)NRc(C＝O)ObRa，22)O(C＝O)ObC1-C10烷基，23)O(C＝O)ObC3-C8环烷基，24)O(C＝O)Ob芳基，25)O(C＝O)Ob-杂环，和26)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自Rz的取代基取代；R1’独立选自1)H，2)(C＝O)aObC1-C10烷基，3)(C＝O)aOb芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)(C＝O)aOb杂环基，7)(C＝O)aObC3-C8环烷基，8)CO2H，9)卤基，10)CN，11)OH，12)ObC1-C6全氟烷基，13)Oa(C＝O)bNR6R7，14)S(O)mRa，15)S(O)2NR6R7，16)氧代，17)CHO，18)O(C＝O)ObC1-C10烷基，19)O(C＝O)ObC3-C8环烷基，20)O(C＝O)Ob芳基，21)O(C＝O)Ob-杂环，和22)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自Rz的取代基取代；R2独立选自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb杂环基，6)(C＝O)aObC3-C8环烷基，7)CO2H，8)卤基，9)CN，10)OH，11)ObC1-C6全氟烷基，12)Oa(C＝O)bNR6R7，13)NRc(C＝O)NR6R7，14)S(O)mRa，15)S(O)2NR6R7，16)NRcS(O)mRa，17)CHO，18)NO2，19)NRc(C＝O)ObRa，20)O(C＝O)ObC1-C10烷基，21)O(C＝O)ObC3-C8环烷基，22)O(C＝O)Ob芳基，23)O(C＝O)Ob-杂环，和24)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被1、2或3个选自Rz的取代基取代；R3和R4独立选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-全氟烷基，或者R3和R4结合在一起形成-(CH2)t-，其中一个碳原子任选被选自O、S(O)m、-N(Rb)C(O)-和-N(CORa)-的部分取代；R5独立选自1)H，2)(C＝O)aObC1-C10烷基，3)(C＝O)aOb芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)(C＝O)aOb杂环基，7)(C＝O)aObC3-C8环烷基，8)CO2H，9)卤基，10)CN，11)OH，12)ObC1-C6全氟烷基，13)Oa(C＝O)bNR6R7，14)NRc(C＝O)NR6R7，15)S(O)mRa，16)S(O)2NR6R7，17)NRcS(O)mRa，18)氧代，19)CHO，20)NO2，21)O(C＝O)ObC1-C10烷基，22)O(C＝O)ObC3-C8环烷基，和23)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自Rz的取代基取代；R6和R7独立选自1)H，2)(C＝O)ObRa，3)C1-C10烷基，4)芳基，5)C2-C10烯基，6)C2-C10炔基，7)杂环基，8)C3-C8环烷基，9)SO2Ra，10)(C＝O)NRb2，11)OH，和12)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和炔基任选被一个或多个选自Rz的取代基取代，或者R6和R7可以和与之连接的氮结合在一起形成单环杂环或双环杂环，每个环4-7元，除该氮以外，任选还含有一个或多个选自N、O和S的额外杂原子，所述单环杂环或双环杂环任选被一个或多个选自Rz的取代基取代；Rz选自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)(C0-C6)亚烷基-S(O)mRa，4)氧代，5)OH，6)卤基，7)CN，8)(C＝O)rOs(C2-C10)烯基，9)(C＝O)rOs(C2-C10)炔基，10)(C＝O)rOs(C3-C6)环烷基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-芳基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-杂环基，13)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2，14)C(O)Ra，15)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra，16)C(O)H，17)(C0-C6)亚烷基-CO2H，18)C(O)N(Rb)2，19)S(O)mRa，20)S(O)2N(Rb)2，21)NRc(C＝O)ObRa，22)O(C＝O)ObC1-C10烷基，23)O(C＝O)ObC3-C8环烷基，24)O(C＝O)Ob芳基，25)O(C＝O)Ob-杂环，和26)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被至多三个选自以下的取代基取代Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代、N(Rb)2和Oa-P＝O(OH)2；Ra为取代或未取代的(C1-C6)烷基、取代或未取代的(C2-C6)烯基、取代或未取代的(C2-C6)炔基、取代或未取代的(C3-C6)环烷基、取代或未取代的芳基、(C1-C6)全氟烷基、2，2，2-三氟乙基或者取代或未取代的杂环基；Rb为H、(C1-C6)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的杂环基、(C3-C6)环烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；Rc选自1)H，2)C1-C10烷基，3)芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)杂环基，7)C3-C8环烷基，和8)(C1-C6)全氟烷基，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和炔基任选被一个或多个选自Rz的取代基取代。
本发明的第二实施方案为由下式B表示的化合物、或其药物可接受的盐或立体异构体 其中W＝Y选自CR1＝N、N＝CR1；所有取代基与变量的定义同第一实施方案。
本发明的第三实施方案为由式B表示的化合物、或其药物可接受的盐或立体异构体，其中Q选自任选被1-3个Rz取代的-NR6R7、苯基和杂环基；Ra为(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基或杂环基；和Rb为H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；所有其它取代基与变量的定义同第二实施方案。
本发明的第四实施方案为由下式C表示的化合物，或其药物可接受的盐或其立体异构体
其中Q为杂环基，所述杂环基任选被1-3个Rz取代；R2独立选自1)C1-C6烷基，2)芳基，3)杂环基，4)CO2H，5)卤基，6)CN，7)OH，8)S(O)2NR6R7，和9)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、芳基和杂环基任选被1、2或3个选自Rz的取代基取代；所有其它取代基与变量的定义同第三实施方案。
本发明的具体化合物包括1)1-(1-{4-[3-(1，3-噁唑-2-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；2)1-{1-[4-(6-苯基-3-嘧啶-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；3)1-(1-{4-[3-(1H-咪唑-2-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；4)1-(1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；5)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-吡唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；6)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-吡唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；7)1-(1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；8)1-(1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；
9)1-{1-[4-(6-苯基-3-四氢呋喃-3-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；10)1-{1-[4-(6-苯基-3-四氢呋喃-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；11)1-{1-[4-(6-苯基-3-噻吩-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；12)1-(1-{4-[3-(4-甲基吗啉-3-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；13)1-(1-{4-[3-(1-乙酰基氮杂环丁烷-3-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；14)1-{1-[4-(6-苯基-3-吡啶-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；15)1-{1-[4-(6-苯基-3-吡啶-3-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；16)1-{1-[4-(6-苯基-3-吡啶-4-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；17)1-(1-{4-[3-(吗啉-4-基甲基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；18)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-2-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；19)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；20)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；21)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-4-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；22)1-(1-{4-[3-(1，1’-联苯-4-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；
23)1-{1-[4-(2-甲基-3-氧代-6-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；24)1-{1-[4-(2-甲基-3-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-6-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；和25)1-(1-{4-[3-(甲硫基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；或其药物可接受的盐或其立体异构体。
本发明化合物具体的三氟乙酸盐包括1)1-(1-{4-[3-(1，3-噁唑-2-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；2)1-{1-[4-(6-苯基-3-嘧啶-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；3)1-(1-{4-[3-(1H-咪唑-2-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；4)1-(1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；5)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-吡唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；6)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-吡唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；7)1-(1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；8)1-(1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；9)1-{1-[4-(6-苯基-3-四氢呋喃-3-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；10)1-{1-[4-(6-苯基-3-四氢呋喃-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；
11)1-{1-[4-(6-苯基-3-噻吩-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；12)1-(1-{4-[3-(4-甲基吗啉-3-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；13)1-(1-{4-[3-(1-乙酰基氮杂环丁烷-3-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；14)1-{1-[4-(6-苯基-3-吡啶-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；15)1-{1-[4-(6-苯基-3-吡啶-3-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；16)1-{1-[4-(6-苯基-3-吡啶-4-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；17)1-(1-{4-[3-(吗啉-4-基甲基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；18)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-2-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；19)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；20)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮21)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-4-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；22)1-(1-{4-[3-(1，1’-联苯-4-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；23)1-{1-[4-(2-甲基-3-氧代-6-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；24)1-{1-[4-(2-甲基-3-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-6-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；和
25)1-(1-{4-[3-(甲硫基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；或其立体异构体。
在又一个实施方案中，本发明的具体化合物包括1)1-{1-[4-(6-苯基-3-嘧啶-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；2)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；3)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-4-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；和4)1-(1-{4-[3-(1，1’-联苯-4-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；或其药物可接受的盐或其立体异构体。
本发明的化合物可以有不对称中心、手性轴和手性面(参见E.L.Eliel和S.H.Wilen，Stereochemistry of Carbon Compounds，John Wiley&Sons，New York，1994，第1119-1190页)，并和包括旋光异构体在内的所有可能的异构体及其混合物一起，以外消旋体、外消旋混合物以及单一非对映异构体的形式存在，所有这些立体异构体都包含在本发明中。
另外，本文所公开的化合物可以互变异构体的形式存在，虽然只描述了一种互变结构，但互变异构体的两种形式都包括在本发明的范围内。例如，任何下述化合物A的权利要求中都被认为包括了互变结构B，反之亦然，还包括其混合物。以下苯并咪唑酮基部分的两种互变形式也在本发明的范围之内。
四唑以1H/2H互变异构体混合物的形式存在。以下四唑部分的互变形式也在本发明的范围内。
任何变量(例如R1、R2、Rz等)在任何组成中出现的次数超过一次时，其每次出现时的定义都独立于其它各次出现时的定义。还允许取代基与变量的组合，只要这种组合可以产生稳定的化合物。由取代基画进环系内的线条表示，所表示的键可与任何可取代的环原子相连接。如果环系是多环的，则指该键仅与最接近的环中的任何合适的碳原子相连接。
不用说本领域技术人员可选择本发明化合物的取代基及取代方式，以提供化学上稳定的化合物，而且通过本领域已知的技术以及下述方法，可由容易得到的原材料方便地合成该化合物。如果取代基自身被不止一个基团取代，则认为只要产生稳定结构，这些多个基团可在相同或不同的碳上。短语“任选被一个或多个取代基取代”可视为等同于短语“任选被至少一个取代基取代”，在这种情况下，一个实施方案可能有0-4个取代基，另一个实施方案则可能有0-3个取代基。
本文所用的“烷基”是指包括支链和直链的含有规定碳原子数的饱和脂族烃基团。例如，“C1-C10烷基”中的C1-C10是指包括在直链或支链排列上含有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的基团。例如，“C1-C10烷基”具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。术语“环烷基”是指含有规定碳原子数的单环饱和脂族烃基团。例如，“环烷基”包括环丙基、甲基-环丙基、2，2-二甲基-环丁基、2-乙基-环戊基、环己基等。
“烷氧基”表示通过氧桥连接的标明碳原子数的环烷基或非环烷基。因此，“烷氧基”包括上述烷基和环烷基的定义。
如果没有说明碳原子的数目，术语“烯基”则指含有2-10个碳原子和至少1个碳碳双键的直链、支链或环状的非芳香烃基。在一个实施方案中，存在1个碳碳双键，且可能存在至多4个非芳族碳碳双键。因此，“C2-C6烯基”是指含有2-6个碳原子的烯基。烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基丁烯基和环己烯基。烯基的直链、支链或环状部分可包含双键，如果说明是取代烯基，则可被取代。
术语“炔基”是指含有2-10个碳原子和至少1个碳碳三键的直链、支链或环状的烃基。可能存在至多三个碳-碳三键。因此，“C2-C6炔基”是指含有2-6个碳原子的炔基。炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、3-甲基丁炔基等。炔基的直链、支链或环状部分可包含三键，如果说明是取代炔基，则可被取代。
在某些情况下，可用包括零在内的碳的范围定义取代基，例如(C0-C6)亚烷基-芳基。如果芳基是指苯基，则该定义可包括苯基本身以及-CH2Ph、-CH2CH2Ph、CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph等。
本文所用的“芳基”是指其各环中有至多7个原子的任何稳定的单环碳环或双环碳环，其中至少一个环为芳环。此类芳基的实例包括苯基、萘基、四氢-萘基、茚满基和联苯基。在芳基取代基为双环且一个环为非芳环的情况下，一般认为是通过芳环连接的。
本文所用的术语“杂环”或“杂环基”是指含有1-4个选自O、N和S的杂原子的3-10元芳族杂环或非芳族杂环，还包括双环基团。因此，“杂环基”包括上述的杂芳基，以及其二氢类似物和四氢类似物。“杂环基”的其它实例包括但不限于下述基团苯并咪唑基、苯并咪唑酮基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、吲嗪基(indolazinyl)、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、萘吡啶基(naphthpyridinyl)、噁二唑基、噁唑基、噁唑啉、异噁唑啉、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢吡喃基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮杂环丁烷基、1，4-二噁烷基、六氢氮杂基、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并噁唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异噁唑基、二氢异噻唑基、二氢噁二唑基、二氢噁唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁烷基、亚甲二氧基苯甲酰基、四氢呋喃基和四氢噻吩基，以及它们的N-氧化物。杂环基取代基可通过碳原子或杂原子连接。
在一个实施方案中，当Q为杂环基时，所述杂环基选自2-氮杂酮(azepinone)、苯并咪唑基、苯并咪唑酮基、2-二氮杂酮(diazapinone)、咪唑基、2-咪唑烷酮、吲哚基、异喹啉基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、2-哌啶酮、2-嘧啶酮、2-吡咯烷酮、喹啉基、四唑基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基和噻吩基。
正如本领域技术人中所知，本文所用的“卤基”或“卤素”包括氯、氟、溴和碘。
除非另有说明，否则本文所用的取代烷基、取代环烷基、取代芳酰基、取代芳基、取代杂芳酰基、取代杂芳基、取代芳基磺酰基、取代杂芳基-磺酰基和取代杂环基，除与化合物其余部分的连接点之外，还包括含有1-4个取代基(在另一个实施方案为1-3个取代基)的部分。此类取代基选自但不限于下述基团F、Cl、Br、CF3、NH2、N(C1-C6烷基)2、NO2、CN、(C1-C6烷基)O-、(芳基)O-、-OH、Oa-P＝O(OH)2、(C1-C6烷基)S(O)m-、(C1-C6烷基)C(O)NH-、H2N-C(NH)-、(C1-C6烷基)C(O)-、(C1-C6烷基)OC(O)-、(C1-C6烷基)OC(O)NH-、苯基、吡啶基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、四唑基、噻唑基、噻吩基、呋喃基、异噻唑基和C1-C20烷基。例如，(C1-C6)烷基可任选被1、2、3或4个选自以下的取代基(在另一个实施方案则为1、2或3个取代基)取代OH、氧代、卤素、烷氧基、二烷基氨基或杂环基，例如吗啉基、哌啶基等。在这种情况下，如果一个取代基为氧代，另一个则为OH，下述基团也包括在该定义中-(C＝O)CH2CH(OH)CH3、-(C＝O)OH、-CH2(OH)CH2CH(O)等。
在式A中，由下式表示的部分 包括下列结构，该结构仅是说明性的，并不限于此 在同一碳原子上的R3和R4的定义中，如果结合在一起形成-(CH2)t-的部分，则所形成的部分由下式表示 另外，此类环部分可任选包括一个或多个杂原子。这些含杂原子环部分的实例包括但不限于 在某些情况下，R6和R7定义为它们可以和与之连接的氮结合在一起形成单环杂环或双环杂环，每个环4-7元，除该氮以外，任选还含有一个或多个选自N、O和S的额外杂原子，所述杂环任选被一个或多个选自Rz的取代基取代。这些如此形成的杂环的实例包括但不限于下列杂环，要记住杂环任选被一个或多个(在另一个实施方案为1、2或3个)选自Rz的取代基取代。
在另一个实施方案中，p为0。
在另一个实施方案中，Ra为(C1-C6)烷基。
在另一个实施方案中，Rb独立为H、(C1-C6)烷基、(C＝O)O(C1-C6)烷基、(C＝O)(C1-C6)烷基或S(O)2Ra。
在另一个实施方案中，Rz选自卤素、CN、OH、Oa-P＝O(OH)2、氧代、C1-C6烷基、S(O)mRa、(C＝O)rOs(C1-C6)烷基和苯基。
在另一个实施方案中，R1’选自C1-C6烷基和S(O)mRa。
在另一个实施方案中，R1选自C1-C6烷基、C1-C6烷基-杂环基、卤素、CN、苯基、OH、Oa-P＝O(OH)2、氧代和杂环基，所述杂环基选自 其任选被1-3个选自Rz的取代基取代，其中Rz选自C1-C6烷基、苯基和-(C＝O)(C1-C6)烷基。
在另一个实施方案中，R3和R4选自H和-CH3。
在另一个实施方案中，R3和R4选自H。
在另一个实施方案中，R6和R7选自H、C1-C6烷基和芳基，其任选被1-2个选自Rz的取代基取代，或者R6和R7与它们所连接的氮一起形成单环杂环或双环杂环，其任选被1-2个选自Rz的取代基取代。
在另一个实施方案中，R6和R7选自H或C1-C6烷基，或者R6和R7与它们所连接的氮一起形成单环杂环或双环杂环，其任选被1-2个选自Rz的取代基取代。
在另一个实施方案中，Q选自 包含在本发明的为式A化合物的游离形式以及其药物可接受的盐和立体异构体。本文所列举的一些分离的具体化合物为胺化合物的质子化盐。术语“游离形式”是指非盐形式的胺化合物。所包含的药物可接受的盐不仅包括用于举例说明本文描述的具体化合物的离析盐，而且包括式A化合物游离形式的所有典型的药物可接受的盐。可用本领域已知的技术分离所述具体盐化合物的游离形式。例如，用合适的稀碱水溶液，例如稀NaOH、碳酸钾、氨和碳酸氢钠水溶液，处理盐使所述游离形式再生。游离形式可与它们各自的盐形式在某些物理性质上略有不同，例如在极性溶剂中的溶解度，但对于本发明，酸式盐和碱式盐与它们各自的游离形式在药学上是等同的。
可以通过常规的化学方法，由含有碱性部分或酸性部分的本发明化合物，合成本发明化合物的药物可接受的盐。通常，或者通过离子交换色谱法制备，或者在合适的溶剂或各种混合溶剂中，使游离碱与化学计量的或过量的所需成盐无机酸或有机酸反应，制备碱性化合物的盐。同样，通过与合适的无机碱或有机碱反应，形成酸性化合物的盐。
因此，本发明化合物的药物可接受的盐包括本发明化合物常规的无毒盐，该盐通过将碱性本发明的化合物与无机酸或有机酸反应而制备，例如，常规无毒盐包括衍生自无机酸的盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等，以及通过有机酸制备的盐，所述有机酸例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酸基-苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸、羟乙磺酸、三氟乙酸(TFA)等。
当本发明的化合物呈酸性时，适当的“药物可接受的盐”是指从药物可接受的无毒碱(包括无机碱和有机碱)制备的盐。衍生自无机碱的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、三价锰盐、锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。特别优选的为铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。衍生自药物可接受的有机无毒碱的盐包括伯胺盐、仲胺盐和叔胺盐；取代胺盐，包括天然取代胺盐、环胺盐和碱性阳离子交换树脂，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N1-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺(glucamine)、氨基葡萄糖(glucosamine)、组氨酸、海巴胺(hydrabamine)、异丙胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。
上述药物可接受盐和其它典型的药物可接受盐的制备在Berg等，“Pharmaceutical Salts，”J.Pharm.Sci.，1977661-19中有更详尽的描述。
还要注意的是，本发明的化合物可能为内盐或两性离子，因为在生理条件下，化合物中例如羧基的去质子化酸性部分可以为阴离子，这种电子电荷继而可被质子化碱性部分或烷基化碱性部分的阳离子电荷在内部平衡掉，例如季氮原子。
用途本发明的化合物是Akt活性抑制剂，因此用于治疗癌症，特别是治疗与Akt活性异常及Akt下游细胞靶有关的癌症。这些癌症包括但不限于卵巢癌、胰腺癌、乳癌和前列腺癌，以及肿瘤抑制剂PTEN发生突变部位的癌症(包括成胶质细胞瘤)(Cheng等，Proc.Natl.Acad.Sci.(1992)899267-9271；Cheng等，Proc.Natl.Acad.Sci.(1996)933636-3641；Bellacosa等，Int.J.Cancer(1995)64280-285；Nakatani等，J.Biol.Chem.(1999)27421528-21532；Graff，Expert.Opin.Ther.Targets(2002)6(1)103-113；及Yamada和Araki，J.Cell Science.(2001)1142375-2382；Mischel和Cloughesy，Brain Pathol.(2003)13(1)52-61)。
本文所提供的化合物、组合物和方法，被视为特别用于治疗包括实体瘤在内的癌症，例如皮肤癌、乳癌、脑癌、宫颈癌、睾丸癌等。更具体地讲，本发明的化合物、组合物和方法可治疗的癌症包括但不限于心脏癌肉瘤(血管肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肪肉瘤)、粘液瘤、横纹肌瘤、纤维瘤、脂肪瘤和畸胎瘤；肺癌支气管癌(鳞状细胞癌、未分化小细胞癌、未分化大细胞癌、腺癌)、蜂窝状癌(细支气管肺泡癌)、支气管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、软骨瘤性错构瘤、间皮瘤；胃肠癌食管癌(鳞状细胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃癌(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺癌(导管腺癌、胰岛瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、类癌瘤(carcinoid tumors)、血管活性肠多肽瘤)、小肠癌(腺癌、淋巴瘤、类癌瘤、Karposi肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神经纤维瘤、纤维瘤)、大肠癌(腺癌、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、错构瘤、平滑肌瘤)；泌尿生殖道癌肾癌(腺癌、Wilm瘤[肾母细胞瘤]、淋巴瘤、白血病)、膀胱癌和尿道癌(鳞状细胞癌、移行细胞癌、腺癌)、前列腺癌(腺癌、肉瘤)、睾丸癌(精原细胞瘤、畸胎瘤、胚性癌、恶性畸胎瘤、绒膜癌、肉瘤、间质细胞癌、纤维瘤、纤维腺瘤、腺瘤样瘤、脂肪瘤)；肝癌肝细胞瘤(肝细胞癌)、胆管癌、肝胚细胞瘤、血管肉瘤、肝细胞腺瘤、血管瘤；骨癌骨肉瘤(osteogenic sarcoma)(骨肉瘤(osteosarcoma))、纤维肉瘤、恶性皮肤纤维瘤、软骨肉瘤、Ewing肉瘤、恶性淋巴瘤(网状细胞肉瘤)、多发性骨髓瘤、恶性骨巨细胞瘤、脊索瘤、骨软骨瘤(骨软骨外生骨疣)、良性软骨瘤、成软骨细胞瘤、软骨粘液纤维瘤、骨样骨瘤和巨细胞瘤；神经系统癌颅骨癌(骨瘤、血管瘤、肉芽瘤、黄瘤、畸形性骨炎)、脑膜癌(脑膜瘤、脑膜肉瘤、神经胶质瘤病)、脑癌(星形细胞瘤、成神经管细胞瘤、神经胶质瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤[松果体瘤]、多形性成胶质细胞瘤、少突神经胶质细胞瘤、神经鞘瘤、成视网膜细胞瘤、先天性肿瘤)、脊髓癌(神经纤维瘤、脑膜瘤、神经胶质瘤、肉瘤)；妇科癌症子宫癌(子宫内膜癌)、宫颈癌(宫颈癌、肿瘤发生前宫颈发育异常、卵巢癌(卵巢癌[浆液性囊腺癌、粘蛋白囊腺癌、未分类癌]、粒层-泡膜细胞瘤、Sertoli-Leydig细胞瘤、无性细胞瘤、恶性畸胎瘤)、外阴癌(鳞状细胞癌、上皮内癌、腺癌、纤维肉瘤、黑素瘤)、阴道癌(明细胞癌、鳞状细胞癌、葡萄状肉瘤(胚胎横纹肌肉瘤)、输卵管(癌)；血液癌血癌(髓细胞性白血病[急性和慢性]、急性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴性白血病、骨髓组织增生性疾病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征)、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤[恶性淋巴瘤]；皮肤癌恶性黑素瘤、基底细胞癌、鳞状细胞癌、卡波西肉瘤、发育不良性痣(moles dysplastic nevi)、脂肪瘤、血管瘤、皮肤纤维瘤、瘢痕瘤、牛皮癣；以及肾上腺癌成神经细胞瘤。因此，本文所用的术语“癌细胞”包括患上述任何一种已确定症状的细胞。
Akt信号调节血管生成的多个关键步骤(Shiojima和Walsh，Circ.Res.(2002)901243-1250)。血管生成抑制剂在治疗癌症中的应用在文献资料已有记载，参见例如J.Rak等，Cancer Research，554575-4580，1995和Dredge等，Expert Opin.Biol.Ther.(2002)2(8)953-966。已在下述多种癌症类型和组织类型中揭示了血管生成在癌症中的作用乳癌(G.Gasparini和A.L.Harris，J.Clin.Oncol.，1995，13765-782；M.Toi等，Japan.J.Cancer Res.，1994，851045-1049)；膀胱癌(A.J.Dickinson等，Br.J.Urol.，1994，74762-766)；结肠癌(L.M.Ellis等，Surgery，1996，120(5)871-878)及口腔肿瘤(J.K.Williams等，Am.J.Surg.，1994，168373-380)。其它癌症包括晚期肿瘤、毛细胞白血病、黑素瘤、晚期头颈部癌、转移性肾细胞癌、非霍奇金淋巴瘤、转移性乳癌、乳腺癌，晚期黑素瘤、胰腺癌、胃癌、成胶质细胞瘤、肺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、肾细胞癌、各种实体瘤、多发性骨髓瘤、转移性前列腺癌、恶性神经胶质瘤、肾癌、淋巴瘤、顽固性转移性疾病、顽固性多发性骨髓瘤、宫颈癌、卡波西肉瘤、复发性间变神经胶质瘤和转移性结肠癌(Dredge等，Expert Opin.Biol.Ther.(2002)2(8)953-966)。因此，本申请所公开的Akt抑制剂也用于治疗与这些血管生成有关的癌症。
已经历新血管形成的肿瘤表明，转移的可能性增加。事实上，血管生成对肿瘤生长和转移是必需的(S.P.Cunningham等，Can.Research，613206-3211(2001))。因此，本申请所公开的Akt抑制剂也用于预防或减少肿瘤细胞的转移。
还包含在本发明范围的是治疗或预防涉及血管生成的疾病的方法，该方法是向需要此类治疗的哺乳动物给予治疗有效量的本发明化合物。眼新血管形成病是这类症状的一个实例，该病引起眼内组织损害的大部分原因可归咎于眼内血管的异常浸润(参见WO00/30651，2000年6月2日公布)。不需要的浸润可由局部缺血性视网膜病或变性疾病所引起，局部缺血性视网膜病例如由糖尿病性视网膜病、早熟儿视网膜病、视网膜静脉闭塞等，变性疾病例如在年龄相关性黄斑变性中观察到的脉胳膜新血管形成。因此，通过给予本发明的化合物抑制血管的生长，可预防血管浸润，并预防或治疗涉及血管生成的疾病，例如视网膜血管化、糖尿病性视网膜病、年龄相关性黄斑变性等。
还包含在本发明范围的是治疗或预防涉及血管生成的非恶性疾病的方法，包括但不限于眼疾(例如视网膜血管化、糖尿病性视网膜病和年龄相关性黄斑变性)、动脉粥样硬化、关节炎、牛皮癣、肥胖症和阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease)(Dredge等，Expert Opin.Biol.Ther.(2002)2(8)953-966)。在另一个实施方案中，治疗或预防涉及血管生成的疾病的方法包括眼疾(例如视网膜血管化、糖尿病性视网膜病和年龄相关性黄斑变性)、动脉粥样硬化、关节炎和牛皮癣。
还包含在本发明范围的是治疗过度增殖性疾病(hyperproliferativedisorders)的方法，例如再狭窄、炎症、自身免疫病和变态反应/哮喘。
还包含在本发明范围的是治疗高胰岛素血症的方法。
在本发明的一个实施方案中，本发明的化合物为选择性抑制剂，其抑制功效依赖于PH结构域。在该实施方案中，该化合物对缺乏PH结构域的截短Akt蛋白表现出体外抑制活性降低或无体外抑制活性降低。
在又一个实施方案中，本发明的化合物选自选择性Akt1抑制剂、选择性Akt2抑制剂及Akt1和Akt2两者的选择性抑制剂。
在另一个实施方案中，本发明的化合物选自选择性Akt1抑制剂、选择性Akt2抑制剂、选择性Akt3抑制剂及上述三种Akt同工型中两种Akt的选择性抑制剂。
在另一个实施方案中，本发明的化合物为所有三种Akt同工型的选择性抑制剂，但不是经过缺失PH结构域、缺失铰链区或既缺失PH结构域又缺失铰链区两者修饰后的1种、2种或所有这些Akt同工型的抑制剂。
本发明还涉及抑制Akt活性的方法，该方法包括给予有需要的哺乳动物药用有效量的本发明化合物。
本发明的化合物还可根据标准药物实践，向包括人在内的哺乳动物给药，或单独给药，或以药物组合物的形式，其中加有药物可接受的载体、赋形剂或稀释剂。该化合物可以口服给药或胃肠外给药，包括静脉内、肌内、腹膜内、皮下、直肠内和局部等给药途径。
含有活性成分的药物组合物可为适于口服的形式，例如，片剂、糖锭剂、锭剂、水性混悬剂或油性混悬剂、分散粉剂或颗粒剂、乳剂、硬质胶囊剂或软质胶囊剂、糖浆剂或酏剂。用于口服的组合物可以根据本领域已知的任何制备药物组合物的方法制备，这些组合物可以包含一种或多种选自甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂的成分组成，以提供美观适口的药物制剂。片剂包含与无毒的药物可接受的赋形剂混合的活性成分，该赋形剂适于片剂的制备。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂，例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒剂和崩解剂，例如微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯树胶；以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可以不包衣，或者可用已知技术包衣以掩盖药物的不适味道，或延迟在胃肠道中的崩解和吸收，从而在较长时间内提供持续作用。例如，可以使用水溶性味道掩饰材料，例如羟丙基甲基纤维素或羟丙基纤维素，或者，可以使用延时材料例如乙基纤维素、醋酸丁酸纤维素。
口服制剂还可为硬明胶胶囊剂，其中活性成分与碳酸钙、磷酸钙或高岭土等惰性固体稀释剂混合；或者为软明胶胶囊剂，其中活性成分与聚乙二醇等水可溶性载体混合，或与花生油、液体石蜡或橄榄油等油性介质混合。
水性混悬剂含有与赋形剂混合的活性材料，该赋形剂适于水性混悬剂的制备。此类赋形剂为悬浮剂、分散剂或湿润剂，悬浮剂例如羧甲基纤维素纳、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄芪树胶和阿拉伯树胶；分散剂或湿润剂可为天然磷脂，例如卵磷脂，或烯化氧与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如十七碳乙烯氧基十六醇，或环氧乙烷与脂肪酸和己糖醇衍生的偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯，或环氧乙烷与脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯。水性混悬剂也可以包含一种或多种防腐剂、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂及一种或多种甜味剂；防腐剂例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯，甜味剂例如蔗糖、糖精或天冬甜素。
油性混悬剂可以通过将活性成分悬浮在植物油或矿物油中制备，植物油例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油，矿物油例如液体石蜡等。油性混悬剂可包含增稠剂，例如蜂蜡、固体石蜡或鲸蜡醇。还可加入甜味剂和矫味剂以提供适口的口服制剂，该甜味剂如上所述。这些组合物可通过加入例如丁羟茴醚或α-生育酚等抗氧化剂予以保存。
向适于制备水性混悬剂的分散粉剂和颗粒剂中加入水，提供与分散剂或湿润剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂混合的活性成分。合适的分散剂或湿润剂，以及悬浮剂已在上述示例中加以说明。还可存在另外的赋形剂，例如甜味剂、矫味剂和着色剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸予以保存。
本发明的药物组合物还可以是水包油乳剂的形式。油相可以为植物油、矿物油或其混合物，植物油例如橄榄油或花生油，矿物油例如液体石蜡。合适的乳化剂可为天然磷脂，例如大豆卵磷脂，也可为从脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或偏酯，例如脱水山梨糖醇单油酸酯，还可为所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯。乳剂还可包含甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧化剂。
糖浆剂和酏剂可用甜味剂制备，例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖。这些制剂还可包含缓和剂、防腐剂、矫味剂和着色剂，以及抗氧化剂。
药物组合物可以是无菌注射水溶液剂的形式。在可以使用的可接受的载体和溶剂中，包括了水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。
无菌注射制剂还可是无菌注射水包油微乳剂，其中活性成分溶于油相中。例如，活性成分可先溶于大豆油和卵磷脂的混合物中。然后，将油性溶液掺入水和甘油混合物中，制备形成微乳剂。
通过局部快速浓注，可将注射液或注射微乳注射到患者血管中。还可选择用溶液剂或微乳剂以有利的给药方法，以维持本发明化合物恒定的循环浓度。为了维持这种恒定浓度，可以使用恒定静脉递药装置。这种装置的一个实例为Deltec CADD-PLUSTM5400型静脉泵。
药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水性混悬剂或油性混悬剂。可根据已知技术，用上述这些合适的分散剂或湿润剂及悬浮剂制备这种混悬剂。无菌注射制剂还可以是无菌注射溶液剂或混悬剂，其中含有无毒胃肠外可接受的稀释剂或溶剂，例如1，3-丁二醇的溶液剂。另外，无菌固定油可方便地用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用任何温和的固定油，包括合成甘油单酯或合成甘油二酯。另外，油酸等脂肪酸也用于制备注射剂。
式A化合物也可以栓剂的形式用于直肠内给药。通过将药物与合适的无刺激赋形剂混合，可制备这些组合物，其中赋形剂在常温下为固体，但在直肠温度下为液体，因此可在直肠中熔化释放药物。这类材料包括可可脂、甘油化明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇混合物和聚乙二醇脂肪酸酯。
含有式A化合物的乳膏剂、软膏剂、凝胶剂、溶液剂或混悬剂等用于局部使用(对于本申请，局部使用应包括漱口水和含漱剂)。
通过合适的鼻内载体和递药装置的局部运用，以鼻内形式给予本发明的化合物，或通过经皮途径，用本领域普通技术人员熟知的经皮皮肤贴剂的形式给予本发明的化合物。在整个给药方案中，通过经皮递药系统给药形式的剂量释放当然将是连续的而不是间歇性的。当使用基料时，本发明的化合物还可以栓剂给药，该基料例如可可脂、甘油化明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇的混合物和聚乙二醇脂肪酸酯。
当给予受治疗病人本发明的组合物时，通常由处方医师根据剂量一般随年龄、体重和具体患者的反应以及患者症状的严重程度的变化，确定日剂量。
在一个实施方案中，给予正在接受癌症治疗的哺乳动物适量的Akt抑制剂。抑制剂给药量的范围每日约0.1mg/kg体重至约60mg/kg体重，或每日约0.5mg/kg体重至约40mg/kg体重。另一个含有本发明组合物的治疗药物量含有Akt抑制剂约0.01mg至约1000mg。在另一个实施方案中，含有Akt抑制剂的剂量约1mg至约1000mg。
本发明的化合物也可以与已知的治疗药物和抗癌药联合使用。例如，本发明的化合物与已知的抗癌药联合使用。因此所公开的化合物与其它抗癌药或化疗药物的联合使用也在本发明的范围内。此类治疗药物的实例可参见Cancer Principles and Practice of Oncology，V.T.Devita和S.Hellman(编著)，第6版(2001年2月15日)，LippincottWilliams & Wilkins Publishers。本领域普通技术人员能够理解，药剂的配伍是基于药物的特殊性质和所涉及癌症的具体性质。此类抗癌药包括雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒剂/细胞抑制剂、抗增殖药、异戊烯基蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂和其它血管生成抑制剂、细胞增殖和存活信号抑制剂以及干扰细胞周期关卡的药剂。如果与放射治疗同时给药，本发明的化合物尤为有益。
在一个实施方案中，本发明的化合物也可与已知的包括以下的抗癌药联合使用雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒剂、抗增殖药、异戊烯基蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、反转录酶抑制剂和其它血管生成抑制剂。
“雌激素受体调节剂”是指不论通过何种机理干扰或抑制雌激素与受体结合的化合物。雌激素受体调节剂的实例包括但不限于他莫昔芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、氟维司群、2，2-二甲基丙酸4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基)]-苯酯、4，4’-二羟基二苯甲酮-2，4-二硝基苯腙和SH646。
“雄激素受体调节剂”是指不论通过何种机理干扰或抑制雄激素与受体结合的化合物。雄激素受体调节剂的实例包括非那雄胺和其它5α-还原酶抑制剂、尼鲁米特、氟他胺、比卡鲁胺、利阿唑和醋酸阿比特龙。
“类视黄醇受体调节剂”是指不论通过何种机理干扰或抑制类视黄醇与受体结合的化合物。这些类视黄醇受体调节剂的实例包括贝沙罗汀、维A酸、13-顺-视黄酸、9-顺-视黄酸、α-二氟甲基鸟氨酸、ILX23-7553、反-N-(4’-羟基苯基)视黄酰胺(retinamide)和N-4-羧基苯基视黄酰胺。
“细胞毒剂/细胞抑制剂”是指主要通过直接干扰细胞功能引起细胞死亡或抑制细胞增殖、或者抑制或干扰细胞减数分裂的化合物，包括烷化剂、肿瘤坏死因子、嵌入剂、低氧可激活化合物、微管抑制剂/微管稳定剂、有丝分裂驱动蛋白抑制剂、参与有丝分裂进程的激酶抑制剂、参与生长因子和细胞因子信号转导途径的激酶抑制剂、抗代谢药、生物反应调节剂、激素/抗激素治疗药物、造血生长因子、单克隆抗体定向治疗药、拓扑异构酶抑制剂、蛋白体抑制剂和遍在蛋白连接酶抑制剂。
细胞毒剂/细胞抑制剂的实例包括但不限于sertenef、恶液质素(cachectin)、异环磷酰胺、他索纳明、氯尼达明、卡铂、六甲蜜胺、泼尼莫司汀、二溴卫矛醇、雷莫司汀、福莫司汀、奈达铂、奥沙利铂、替莫唑胺、heptaplatin、雌莫司汀、托西酸英丙舒凡、曲磷胺、尼莫司汀、二溴螺氯铵、嘌嘧替派、洛铂、沙铂、泊非霉素(profiromycin)、顺铂、依罗夫文、右异环磷酰胺、顺-胺二氯(2-甲基-吡啶)合铂、苄基鸟嘌呤、葡磷酰胺、GPX100、四氯化(反，反，反)-双-μ-(己烷-1，6-二胺)-μ-[二胺-铂(II)]双[二胺(氯)铂(II)]、二吖丙啶基精氨、三氧化二砷、1-(11-十二烷基氨基-10-羟基十一烷基)-3，7-二甲基黄嘌呤、佐柔比星、伊达比星、柔红霉素、比生群、米托蒽醌、吡柔比星、吡萘非特、戊柔比星、氨柔比星、抗瘤酮、3’-脱氨基-3’-吗啉代-13-脱氧代-10-羟基洋红霉素、脂质体蒽环霉素(annamycin)、加柔比星、依利奈法德、MEN10755、4-脱甲氧基-3-脱氨基-3-吖丙啶基-4-甲基磺酰基-柔红霉素(参见WO 00/50032)、Raf激酶抑制剂(例如Bay43-9006)和mTOR抑制剂(例如Wyeth公司的CCI-779)。
低氧可激活化合物的一个实例为替拉扎明。
蛋白体抑制剂的实例包括但不限于乳胞素和MLN-341(Velcade)。
微管抑制剂/微管稳定剂的实例包括紫杉醇、硫酸长春地辛、3’，4’-二脱氢-4’-脱氧-8’-去甲长春碱、多西他赛、根霉素、多拉司他汀、依西酸米伏布林、auristatin、西马多丁、RPR109881、BMS184476、长春氟宁、缩酚酸肽类抗肿瘤药(cryptophycin)、2，3，4，5，6-五氟N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脱水长春碱、N，N-二甲基-L-缬氨酰-L-缬氨酰-N-甲基-L-缬氨酰-L-脯氨酰-L-脯氨酸-叔丁酰胺、TDX258、大环内酯类抗肿瘤药(epothilone)(参见例如美国专利号6,284,781和6,288,237)和BMS188797。在一个实施方案中，微管抑制剂/微管稳定剂不包括大环内酯类抗肿瘤药。
拓扑异构酶抑制剂的一些实例为托泊替康、hycaptamine、伊立替康、卢比替康、6-乙氧基丙酰基-3’，’-O-外-亚苄基-教酒菌素、9-甲氧基-N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-k1]吖啶-2-(6H)丙酰胺、1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氢-9-羟基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]呋喃并[3’，4’b，7]-吲嗪并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)二酮、勒托替康、7-[2-(N-异丙氨基)乙基]-(20S)喜树碱、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索布佐生、2’-二甲氨基-2’-脱氧-依托泊苷、GL331、N-[2-(二甲氨基)乙基]-9-羟基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-甲酰胺、asulacrine、(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲氨基)乙基]-N-甲氨基]乙基]-5-[4-羟基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氢呋喃并(3’，4’6，7)萘并(2，3-d)-1，3-二氧杂环戊烯-6-酮、2，3-(亚甲二氧基)-5-甲基-7-羟基-8-甲氧基苯并[c]-菲啶鎓、6，9-双[(2-氨乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮、5-(3-氨基丙氨基)-7，10-二羟基-2-(2-羟乙基氨甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2(二乙氨基)乙氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻吨-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺、6-[[2-(二甲氨基)乙基]氨基]-3-羟基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮和地美司钠。
在下列文献中描述了有丝分裂驱动蛋白抑制剂的实例，特别是人有丝分裂驱动蛋白KSPPCT公布说明书WO 01/30768和WO01/98278，以及待审的美国专利号60/338,779(2003年12月6日申请)、60/338,344(2001年12月6日申请)、60/338,383(2001年12月6日申请)、60/338,380(2001年12月6日申请)、60/338,379(2001年12月6日申请)和60/344,453(2001年11月7日申请)。在一个实施方案中，有丝分裂驱动蛋白的抑制剂包括但不限于KSP抑制剂、MKLP1抑制剂、CENP-E抑制剂、MCAK抑制剂和Rab6-KIFL抑制剂。
“参与有丝分裂进程的激酶抑制剂”包括但不限于aurora激酶抑制剂、Polo样激酶抑制剂(PLK；特别是PLK-1抑制剂)、bub-1抑制剂和bub-R1抑制剂。
“抗增殖药”包括反义RNA寡核苷酸和反义DNA寡核苷酸，例如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001，还包括抗代谢药，例如依诺他滨、卡莫氟、替加氟、喷司他丁、去氧氟尿苷、三甲曲沙、氟达拉滨、卡培他滨、加洛他滨、阿糖胞苷ocfosfate、fosteabine钠水合物、雷替曲塞、paltitrexid、乙嘧替氟、噻唑呋啉、地西他滨、诺拉曲塞、培美曲塞、nelzarabine、2’-脱氧-2’-亚甲基胞苷、2’-氟亚甲基-2’-脱氧胞苷、N-[5-(2，3-二氢-苯并呋喃基)磺酰基]-N’-(3，4-二氯苯基)脲、N6-[4-脱氧-4-[N2-[2(E)，4(E))-十四烷二烯酰]甘氨酰氨基]-L-甘油基-B-L-甘露糖基-吡喃庚糖基]腺嘌呤、aplidine、海鞘素(ecteinascidin)、曲沙他滨、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8-四氢-3H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩甲酰基-L-谷氨酸、氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿拉诺新、乙酸11-乙酰基-8-(氨甲酰基氧基甲基)-4-甲酰基-6-甲氧基-14-氧杂-1，11-二氮杂四环(7.4.1.0.0)-十四烷-2，4，6-三烯-9-基酯、八氢吲嗪三醇、洛美曲索、右雷佐生、甲硫氨酸酶(methioninase)、2’-氰基-2’-脱氧-N4-棕榈酰-1-B-D-阿糖呋喃糖基胞嘧啶、3-氨基吡啶-2-甲醛缩氨基硫脲和曲妥单抗。
单克隆抗体定向治疗药物的实例包括那些具有与癌细胞特异性单克隆抗体或靶细胞特异性单克隆抗体连接的细胞毒剂或放射性同位素的治疗药物。实例包括托西莫单抗(Bexxar)。
“HMG-CoA还原酶抑制剂”是指3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂。可以使用的HMG-CoA还原酶抑制剂的实例包括但不限于洛伐他汀(MEVACOR，参见美国专利号4,231,938、4,294,926和4,319,039)、辛伐他汀(ZOCOR，参见美国专利号4,444,784、4,820,850和4,916,239)、普伐他汀(PRAVACHOL，参见美国专利号4,346,227、4,537,859、4,410,629、5,030,447和5,180,589)、氟伐他汀(LESCOL，参见美国专利号5,354,772、4,911,165、4,929,437、5,189,164、5,118,853、5,290,946和5,356,896)、阿托伐他汀(LIPITOR，参见美国专利号5,273,995、4,681,893、5,489,691和5,342,952)以及西立伐他汀(亦称rivastatin和BAYCHOL，参见美国专利号5,177,080)。M.Yalpani，“Cholesterol Lowering Drugs”，Chemistry& Industry，第85-89页(1996年2月5日)中的第87页，以及美国专利号4,782,084和4,885,314中描述了这些HMG-CoA还原酶抑制剂和其它可用于本发明使用方法的HMG-CoA还原酶抑制剂的结构式。本文所用的术语HMG-CoA还原酶抑制剂包括所有药物可接受的内酯和开链酸(即其内酯环打开形成游离酸)的形式，还包括具有HMG-CoA还原酶抑制活性的化合物的盐和酯的形式，因而此类盐、酯、开链酸和内酯形式的用途都包括在本发明的范围内。
“异戊烯基蛋白转移酶抑制剂”是指抑制任何一种或任何组合的异戊烯基蛋白转移酶的化合物，包括法尼基蛋白转移酶(FPTase)、牻牛儿基牻牛儿基蛋白转移酶I型(GGPTase-I)和牻牛儿基牻牛儿基蛋白转移酶II型(GGPTaseII，亦称Rab GGPTase)。
异戊烯基蛋白转移酶抑制剂的实例可参照下列公布说明书和专利WO 96/30343、WO 97/18813、WO 97/21701、WO 97/23478、WO97/38665、WO 98/28980、WO 98/29119、WO 95/32987、美国专利号5,420,245、美国专利号5,523,430、美国专利号5,532,359、美国专利号5,510,510、美国专利号5,589,485、美国专利号5,602,098、欧洲专利公布号0 618 221、欧洲专利公布号0 675 112、欧洲专利公布号0 604181、欧洲专利公布号0 696 593、WO 94/19357、WO 95/08542、WO95/11917、WO 95/12612、WO 95/12572、WO 95/10514、美国专利号5,661,152、WO 95/10515、WO 95/10516、WO 95/24612、WO 95/34535、WO 95/25086、WO 96/05529、WO 96/06138、WO 96/06193、WO96/16443、WO 96/21701、WO 96/21456、WO 96/22278、WO 96/24611、WO 96/24612、WO 96/05168、WO 96/05169、WO 96/00736、美国专利号5,571,792、WO 96/17861、WO 96/33159、WO 96/34850、WO96/34851、WO 96/30017、WO 96/30018、WO 96/30362、WO 96/30363、WO 96/31111、WO 96/31477、WO 96/31478、WO 96/31501、WO97/00252、WO 97/03047、WO 97/03050、WO 97/04785、WO 97/02920、WO 97/17070、WO 97/23478、WO 97/26246、WO 97/30053、WO97/44350、WO 98/02436和美国专利号5,532,359。异戊烯基蛋白转移酶抑制剂对血管生成的作用的一个实例参见European J.of Caner，第35卷，第9期，第1394-1401页(1999年)。
“血管生成抑制剂”是指不论通过何种机理抑制新血管形成的化合物。血管生成抑制剂的实例包括但不限于例如酪氨酸激酶受体Flt-1(VEGFR1)和Flk-1/KDR(VEGFR2)抑制剂等酪氨酸激酶抑制剂、表皮衍生生长因子抑制剂、成纤维细胞衍生生长因子抑制剂或血小板衍生生长因子抑制剂、MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂、整联蛋白阻滞剂、干扰素-α、白介素-12、聚硫酸戊聚糖、环加氧酶抑制剂、甾体抗炎药(例如皮质甾类、盐皮质甾类固醇、地塞米松、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、培他米松)、羧基酰胺基三唑、考布他汀A-4、角鲨胺、6-O-氯乙酰-羰基-烟曲霉醇、沙利度胺、血管生长抑素、肌原蛋白-1、血管紧张素II拮抗剂(参见Fernandez等，J.Lab.Clin.Med.105141-145(1985))和抗VEGF抗体(参见Nature Biotechnology，第17卷，第963-968页(1999年10月)；Kim等，Nature，362，841-844(1993)；WO 00/44777和WO 00/61186)；其中环加氧酶抑制剂包括如阿斯匹林和布洛芬等非甾体抗炎药(NSAID)以及如塞来考昔和罗非考昔等选择性环加氧酶-2抑制剂(PNAS，第89卷，第7384页(1992年)；JNCI，第69卷，第475页(1982年)；Arch.Opthalmol.，第108卷，第573页(1990年)；Anat.Rec.，第238卷，第68页(1994年)；FEBSLetters，第372卷，第83页(1995年)；Clin，Orthop.第313卷，第76页(1995年)；J.Mol.Endocrinol.，第16卷，第107页(1996年)；Jpn.J.Pharmacol.，第75卷，第105页(1997年)；Cancer Res.，第57卷，第1625页(1997年)；Cell，第93卷，第705页(1998年)；Intl.J.Mol.Med.，第2卷，第715页(1998页)；J.Biol..Chem.，第274，第9116页(1999年))。
其它调节或抑制血管生成的治疗药物，以及也可以与本发明的化合物联合使用的治疗药物，包括调节或抑制凝固系统和纤维蛋白溶解系统的药物(参见Clin.Chem.La.Med.38679-692(2000)中的综述)。此类调节或抑制凝固途径和纤维蛋白溶解途径的药物实例包括但不限于肝素(参见Thromb.Haemost.8010-23(1998))、低分子量肝素和羧肽酶U抑制剂(亦称活性凝血酶激活的纤维蛋白溶解抑制剂[TAFIa]抑制剂)(参见Thrombosis Res.101329-354(2001))。美国专利编号60/310,927(2001年8月8日申请)和60/349,925(2002年1月18日申请)中描述了TAFIa抑制剂。
“干扰细胞周期关卡的药物”是指抑制转导细胞周期关卡信号的蛋白激酶，因而致敏癌细胞成为DNA损伤剂的化合物。此类药剂包括ATR抑制剂、ATM抑制剂、Chk1和Chk2激酶抑制剂、及cdk和cdc激酶抑制剂，其中以7-羟基星孢素、黄酮类抗肿瘤药(flavopiridol)、CYC202(Cyclace1)和BMS-387032为具体实例。
“细胞增殖和生存信号转导途径抑制剂”是指抑制细胞表面受体信号转导级联系统下游的化合物。此类抑制剂包括丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂(包括但不限于例如在WO 02/083064、WO 02/083139、WO02/083140和WO 02/083138中描述的Akt抑制剂)、Raf激酶抑制剂(例如BAY-43-9006)、MEK抑制剂(例如CI-1040和PD-098059)、mTOR抑制剂(例如Wyeth CCI-779)和PI3K抑制剂(例如LY294002)。
如上所述，与NSAID的组合涉及NSAID的应用，该NSAID为有效的COX-2抑制剂。对于本说明书，如果通过细胞或微粒体测定，测得NSAID对COX-2抑制的IC50为1μM或更低，则是有效的。
本发明也包括与是选择性COX-2抑制剂的NSAID的组合。对于本说明书，当NSAID具有抑制COX-2比抑制COX-1超过至少100倍的特异性时，该NSAID被定义为选择性COX-2抑制剂，该特异性可通过细胞或微粒体测定，测出COX-2的IC50与COX-1的IC50之比来评价。此类化合物包括但不限于以下文献所公开的化合物美国专利5,474,995、美国专利5,861,419、美国专利6,001,843、美国专利6,020,343、美国专利5,409,944、美国专利5,436,265、美国专利5,536,752、美国专利5,550,142、美国专利5,604,260、美国专利5,698,584、美国专利5,710,140、WO 94/15932、美国专利5,344,991、美国专利5,134,142、美国专利5,380,738、美国专利5,393,790、美国专利5,466,823、美国专利5,633,272和美国专利5,932,598，所有这些文献通过引用结合到本文中。
具体用于本发明治疗方法的COX-2抑制剂为3-苯基-4-(4-(甲磺酰基)苯基)-2-(5H)-呋喃酮和5-氯-3-(4-甲磺酰)苯基-2-(2-甲基-5-吡啶基)吡啶，或其药物可接受的盐。
被描述为特异性COX-2抑制剂并因而用于本发明的化合物包括但不限于帕瑞考昔、BEXTRA和CELEBREX或其药物可接受的盐。
血管生成抑制剂的其它实例包括但不限于内皮生长抑素、ukrain、豹蛙酶、IM862、(氯乙酰基)氨基甲酸5-甲氧基-4-[2-甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)环氧乙烷基]-1-氧杂螺[2，5]辛-6-基酯、acetyldinanaline、5-氨基-1-[[3，5-二氯-4-(4-氯苯甲酰基)苯基]甲基]-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺、CM 101、角鲨胺、考布他汀、RPI4610、NX31838、硫酸化磷酸甘露戊糖、7，7-(羰基-二[亚氨基-N-甲基-4，2-吡咯并羰基亚氨基[N-甲基-4，2-吡咯]-羰基亚氨基]-双-(1，3-萘二磺酸酯)和3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基]-2-二氢吲哚酮(SU5416)。
上文所用的“整联蛋白阻滞剂”是指下述化合物选择性拮抗、抑制或对抗生理配体与αvβ3整联蛋白结合的化合物；选择性拮抗、抑制或对抗生理配体与αvβ5整联蛋白结合的化合物；拮抗、抑制或对抗生理配体与αvβ3整联蛋白和αvβ5整联蛋白两者结合的化合物；以及拮抗、抑制或对抗毛细血管内皮细胞表达的特殊整联蛋白活性的化合物。该术语也指αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整联蛋白的拮抗剂。该术语也可指αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整联蛋白中任何组合的拮抗剂。
酪氨酸激酶抑制剂的一些具体实例包括N-(三氟甲基苯基)-5-甲基异噁唑-4-甲酰胺、3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)甲基茚基]二氢吲哚-2-酮、17-(烯丙基氨基)-17-去甲氧格尔德霉素、4-(3-氯-4-氟苯氨基)-7-甲氧-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]喹唑啉、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-双(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺、BIBX1382、2，3，9，10，11，12-六氢-10-(羟甲基)-10-羟基-9-甲基-9，12-环氧-1H-二吲哚并[1，2，3-fg3’，2’，1’-k1]吡咯并[3，4-i][1，6]苯并二吖辛因-1-酮、SH268、金雀异黄素、STI571、CEP2563、4-(3-氯苯基氨基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶基甲磺酸酯、4-(3-溴-4-羟苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、4-(4’-羟苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、SU6668、STI571A、N-4-氯苯基-4-(4-吡啶基甲基)-1-二氮杂萘胺和EMD121974。
与除抗癌化合物外的其它化合物的组合也包括在本发明的方法内。例如，本申请要求保护的化合物与PPAR-γ激动剂和PPAR-δ激动剂的组合用于治疗某些恶性肿瘤。PPAR-γ和PPAR-δ为核过氧化物酶体增殖物激活受体γ和核过氧化物酶体增殖物激活受体δ。文献中已对内皮细胞中PPAR-γ的表达及其参与血管生成进行过报告(参见J.Cardiovasc.Pharmacol.1998；31909-913；J.Biol.Chem.1999；2749116-9121；Invest.Ophthalmol Vis.Sci.2000；412309-2317)。最近，有报告说明PPAR-γ激动剂在体外抑制血管生成对VEGF的反应；在小鼠中，马来酸曲格列酮和马来酸罗西格列酮两者都抑制视网膜新血管形成的发育(Arch.Ophthamol.2001；119709-717)。PPAR-γ激动剂和PPAR-γ/α激动剂的实例包括但不限于噻唑烷二酮(例如DRF2725、CS-011、曲格列酮、罗西格列酮和吡格列酮)、非诺贝特、吉非贝齐、氯贝丁酯、GW2570、SB219994、AR-H039242、JTT-501、MCC-555、GW2331、GW409544、NN2344、KRP297、NP0110、DRF4158、NN622、GI262570、PNU182716、DRF552926、2-[(5，7-二丙基-3-三氟甲基-1，2-苯基异噁唑-6-基)氧基]-2-甲基丙酸(公开于USSN 09/782,856)和2(R)-7-(3-(2-氯-4-(4-氟苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基苯并二氢吡喃-2-甲酸(公开于USSN 60/235,708和60/244,697)。
本发明的另一个实施方案为目前已公开的化合物与用于治疗癌症的基因治疗的联合应用。有关治疗癌症的基因策略的概况可参考Hall等(Am.J.Hum.Genet.61785-789，1997)和Kufe等(CancerMedicine，第五版，第876-889页，BC Decker，Hamilton 2000)。基因治疗可用于传递任何肿瘤抑制基因。此类基因的实例包括但不限于p53，p53可通过重组病毒介导的基因转移进行传递(参见例如美国专利号6,069,134)、uPA/uPAR拮抗剂(“Adenovirus-Mediated Delivery of auPA/uPAR Antagonist Suppresses Angiogenesis-Dependent TumorGrowth and Dissemination in Mice”，Gene Therapy，1998年8月5(8)1105-13)和干扰素γ(J.Immunol.2000；164217-222)。
本发明的化合物也可与固有多药耐药性(MDR)抑制剂，特别是与转运蛋白高水平表达有关的MDR抑制剂联合用药。此类MDR抑制剂包括p-糖蛋白(P-gp)的抑制剂，例如LY335979、XR9576、OC144-093、R101922、VX853和PSC833(伐司朴达)。
本发明的化合物可与治疗恶心或呕吐的止吐药联合使用，该呕吐可能是因单独使用本发明的化合物或与放疗一起使用时引起的，包括急性呕吐、延迟呕吐、晚期呕吐和先期呕吐。为了预防或治疗呕吐，本发明的化合物可与其它止吐药联合使用，特别是与下述止吐药联合使用神经激肽-1受体拮抗剂；5HT3受体拮抗剂，例如昂丹司琼、格拉司琼、托烷司琼和zatisetron；GABAB受体激动剂，例如巴氯芬；皮质甾类，例如地塞米松(Decadron)、Kenalog、曲安西龙(Aristocort)、鼻松(Nasalide)、布地奈德(Preferid)、Benecorten或其它公开于美国专利号2,789,118、2,990,401、3,048,581、3,126,375、3,929,768、3,996,359、3,928,326和3,749,712中的皮质甾类，例如吩噻嗪(如丙氯拉嗪、氟奋乃静、硫利达嗪和美索达嗪)、甲氧氯普胺或屈大麻酚等抗多巴胺能药。在另一个实施方案中，公开了与选自神经激肽-1受体拮抗剂、5HT3受体拮抗剂和皮质甾类等止吐药的联合疗法，用于治疗或预防由于给予本发明的化合物而引起的哎吐。
以下专利全面描述了与本发明化合物联用的神经激肽-1受体拮抗剂的用途，例如，美国专利号5,162,339、5,232,929、5,242,930、5,373,003、5,387,595、5,459,270、5,494,926、5,496,833、5,637,699、5,719,147；欧洲专利公布号EP 0 360 390、0 394 989、0 428 434、0 429366、0 430 771、0 436 334、0 443 132、0 482 539、0 498 069、0 499 313、0 512 901、0 512 902、0 514 273、0 514 274、0 514 275、0 514 276、0 515 681、0 517 589、0 520 555、0 522 808、0 528 495、0 532 456、0 533 280、0 536 817、0 545 478、0 558 156、0 577 394、0 585 913、0 590 152、0 599 538、0 610 793、0 634 402、0 686 629、0 693 489、0 694 535、0 699 655、0 699 674、0 707 006、0 708 101、0 709 375、0 709 376、0 714 891、0 723 959、0 733 632和0 776 893；PCT国际专利公布号WO 90/05525、90/05729、91/09844、91/18899、92/01688、92/06079、92/12151、92/15585、92/17449、92/20661、92/20676、92/21677、92/22569、93/00330、93/00331、93/01159、93/01165、93/01169、93/01170、93/06099、93/09116、93/10073、93/14084、93/14113、93/18023、93/19064、93/21155、93/21181、93/23380、93/24465、94/00440、94/01402、94/02461、94/02595、94/03429、94/03445、94/04494、94/04496、94/05625、94/07843、94/08997、94/10165、94/10167、94/10168、94/10170、94/11368、94/13639、94/13663、94/14767、94/15903、94/19320、94/19323、94/20500、94/26735、94/26740、94/29309、95/02595、95/04040、95/04042、95/06645、95/07886、95/07908、95/08549、95/11880、95/14017、95/15311、95/16679、95/17382、95/18124、95/18129、95/19344、95/20575、95/21819、95/22525、95/23798、95/26338、95/28418、95/30674、95/30687、95/33744、96/05181、96/05193、96/05203、96/06094、96/07649、96/10562、96/16939、96/18643、96/20197、96/21661、96/29304、96/29317、96/29326、96/29328、96/31214、96/32385、96/37489、97/01553、97/01554、97/03066、97/08144、97/14671、97/17362、97/18206、97/19084、97/19942和97/21702；以及英国专利公布号2 266 529、2 268 931、2 269 170、2 269 590、2 271774、2 292 144、2 293 168、2 293 169和2 302 689。上述专利和公布说明书中全面描述了此类化合物的制备，所述文献通过引用结合到本文中。
在一个实施方案中，用于与本发明化合物联用的神经激肽-1受体拮抗剂选自2-(R)-(1-(R)-(3，5-双(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟苯基)-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑并)甲基)吗啉，或其药物可接受的盐，有关内容记载于美国专利号5,719,147中。
本发明的化合物也可与治疗贫血的药物一起给药。此类贫血治疗药物为例如，连续红血球生成(continuous eythropoiesis)受体激活剂(例如阿法依泊汀)。
本发明的化合物还可与用于治疗中性粒细胞减少症的药物一起给药。此类中性粒细胞减少症的治疗药物为例如造血生长因子，可调节例如人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)等嗜中性粒细胞的产生及功能。G-CSF的实例包括非格司亭。
本发明的化合物还可与例如左旋咪唑、异丙肌苷和日达仙(Zadaxin)等免疫增强药一起给药。
因此，本发明的范围包括本申请要求保护的化合物与第二种化合物的联合使用，第二种化合物选自1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)类视黄醇受体调节剂，4)细胞毒剂/细胞抑制剂，5)抗增殖药，6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制剂，8)HIV蛋白酶抑制剂，9)反转录酶抑制剂，10)血管生成抑制剂，11)PPAR-γ激动剂，12)PPAR-δ激动剂，13)固有多药耐药性抑制剂，14)止吐药，15)用于治疗贫血的药物，16)用于治疗中性粒细胞减少症的药物，17)免疫增强药，18)细胞增殖和存活信号抑制剂，和19)干扰细胞周期关卡的药物。
关于本发明化合物的术语“给药”和其变体(例如“给予”化合物)是指将化合物或化合物的前体药物给予需要治疗的动物的系统中。如果将本发明化合物或其前体药物与一种或多种其它活性剂(例如细胞毒剂等)联合提供，“给药”和“给予”等可各自理解为包括同时和序贯提供化合物或其前体药物及其它药剂。
本文所用的术语“组合物”是指含有规定剂量的规定成分的产品，也指直接或间接与规定剂量的规定成分组合生产的产品。
本文所用的术语“治疗有效量”是指由研究人员、兽医、医学博士或其它临床医师所确定的活性化合物或药物在组织、系统、动物或人中引发生物反应或药物反应的量。
术语“治疗癌症”或“癌症治疗”是指向患有癌症的哺乳动物给药，通过杀死癌细胞以减轻癌症的效果，以及使癌的生长和/或转移受到抑制的效果。
在一个实施方案中，作为第二种化合物使用的血管生成抑制剂选自酪氨酸激酶抑制剂、表皮衍生生长因子抑制剂、成纤维细胞衍生生长因子抑制剂、血小板衍生生长因子抑制剂、MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂、整联蛋白阻滞剂、干扰素-α、白介素-12、聚硫酸戊聚糖、环加氧酶抑制剂、羧基酰胺三唑、考布他汀A-4、角鲨胺、6-O-氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇、沙利度胺、血管生长抑素、肌原蛋白-1或抗VEGF抗体。在一个实施方案中，雌激素受体调节剂为他莫昔芬或雷洛昔芬。
包括在权利要求范围的还有治疗癌症的方法，该方法包括给予治疗有效量的式A化合物与放射治疗和/或与第二种化合物联用，第二种化合物选自1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)类视黄醇受体调节剂，4)细胞毒剂/细胞抑制剂，5)抗增殖药，6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制剂，8)HIV蛋白酶抑制剂，9)反转录酶抑制剂，10)血管生成抑制剂，11)PPAR-γ激动剂，12)PPAR-δ激动剂，13)固有多药耐药性抑制剂，14)止吐药，15)用于治疗贫血的药物，16)用于治疗中性粒细胞减少症的药物，17)免疫增强药，18)细胞增殖和存活信号抑制剂，和19)干扰细胞周期关卡的药物。
本发明的又一个实施方案为治疗癌症的方法，该方法包括将治疗有效量的式A的化合物与紫杉醇或曲妥单抗联用。
本发明还包括治疗或预防癌症的方法，该方法包括将治疗有效量的式A化合物与COX-2抑制剂联用。
本发明也包括用于治疗或预防癌症的药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的式A化合物以及选自以下的第二种化合物1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)类视黄醇受体调节剂，4)细胞毒剂/细胞抑制剂，5)抗增殖药，6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制剂，8)HIV蛋白酶抑制剂，9)反转录酶抑制剂，10)血管生成抑制剂，11)PPAR-γ激动剂，12)PPAR-δ激动剂，13)细胞增殖和存活信号抑制剂，和14)干扰细胞周期关卡的药物。
所有专利、公布说明书和已确定的待审专利申请都通过引用结合到本文中。
用于化学说明和实施例中的缩写词如下AEBSF(对氨乙基苯磺酰氟)；BSA(牛血清白蛋白)；CuI(碘化亚铜)；CuSO4(硫酸铜)；DMSO(二甲亚砜)；DTT(二硫苏糖醇)；EDTA(乙二胺四乙酸)；EGTA(乙二醇四乙酸)；EtOAc(乙酸乙酯)；EtOH(乙醇)；HOAc(乙酸)；HPLC(高效液相色谱法)；LCMS(液相色谱-质谱联用仪)；MeOH(甲醇)；NaHCO3(碳酸氢钠)；Na2SO4(硫酸钠)；NH4OAc(乙酸铵)；NBS(N-溴代琥珀酰亚胺)；NMR(核磁共振)；PBS(磷酸缓冲盐溶液)；PCR(聚合酶链式反应)；PS-DIEA(聚苯乙烯二异丙基乙胺)；THF(四氢呋喃)和TFA(三氟乙酸)。
除了文献资料已知的以及在实验流程中所列举的其他标准操作外，可用下述反应方案所使用的反应，制备本发明的化合物。因此，下面是说明性反应方案并不受用于说明目的中所列化合物或者任何具体取代基的限制。反应方案所示的取代基编号不必与权利要求中的编号相一致，通常为了清楚起见，当上述式A定义的化合物允许具有多个取代基时，可以用与化合物相连的一个取代基表示。
除了正如文献资料已知的或实验流程中所列举的例如酯水解、保护基的裂解等其他标准操作外，可通过反应方案I-IV所说明的反应，制备本发明的化合物。
可以线性链区运用这些反应以提供本发明的化合物，也可运用反应合成片段，随后用反应方案所描述的烷基化反应连接起来。
反应方案概述所需要的中间体在某些情况下是市售的，或者可按文献中的方法制备。如反应方案I中所示，适当取代的苯乙炔化物可与碘化亚铜反应形成相应的铜乙炔化物I-1(参见例如Sonogashira，K.；Toda，Y.；Hagihara，N.Tetrahedron Lett.1975，4467)。然后，中间体I-1可与适当取代的亲电苯基部分反应，得到不对称取代的二苯基乙炔I-2。与NBS反应，随后通过水解，得到取代偶苯酰I-3(参见例如YusyboV，M.S.；Filimonov，V.D.；Synthesis 1991，2131)。各种取代和未取代的偶苯酰也可购买获得。
反应方案II说明从适当取代的溴甲基偶苯酰II-1开始，制备本发明的化合物。该中间体可与合适的胺反应，得到中间体II-2。
反应方案III说明杂环三嗪的合成，该合成是将三组分与合适的偶苯酰III-1、乙酸铵和取代甲酰肼III-2缩合反应生成的(注意 表示多个环状取代基或非环状取代基，包括但不限于取代芳基和取代杂环基，该取代基可由本领域普通技术人员容易地合成)。本领域普通技术人员可容易地合成合适取代的甲酰肼，取代甲酰肼包括但不限于多个取代环状部分或取代非环状部分。
反应方案IV说明杂环三嗪的合成，该合成是用各种烷化剂(为本领域普通技术人员所熟知，例如(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷)产生多次取代的环状R1基团和多次取代非环状R1基团(如IV-3A及IV-3B中所示)。
反应方案I 反应方案II
反应方案III 反应方案IV
实施例所提供的实施例旨在帮助进一步理解本发明。所使用的具体原料、种类和条件旨在对本发明进行进一步的说明，并不是对本发明的合理范围的限制。下表描述的用于所述化合物合成的试剂既有市售的，也可通过本领域普通技术人员容易地合成。
方案1 1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(1-3)向5ml带搅棒的史密斯(Smith)反应瓶中加入偶苯酰(1-1)(44mg，0.1mol)、乙酸铵(39mg，1mmol，10当量)、1，3-噻唑-5-甲酰肼(1-2)(13mg，0.1mol)和1ml冰醋酸。在180℃温度下，反应容器在SmithSynthesizerTM中加热5分钟。5分钟后，通过装置，将反应容器迅速冷却至40℃。反应产物在Genevac HTII-12中浓缩得到嫩黄胶状物。LCMS分析表明(1-3∶1-4)混合物的比例为2.5∶1。随后将胶状物溶于1ml DMSO中，通过质量触发的HPLC纯化。经浓缩和干燥后，得到标题化合物(1-3)，为嫩黄固体，不含任何(1-4)杂质。
1H NMR(300MHz，CDCl3)9.59(s，1H)，9.04(s，1H)，8.93(s，1H)，7.27(m，1H)，7.66(m，1H)，7.52(m，3H)，7.39(m，3H)，7.06(s，4H)，4.31(s，2H)，3.73(m，1H)，2.91(m，4H)，1.97(m，4H)；对于C31H27N7OS(M+H)HRMS，计算值546.2067；实测值546.2061。
方案2 1-{1-[4-(3-氧代-6-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(2-2)和1-{1-[4-(3-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-6-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(2-3)向1-(4-{[4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)哌啶-1-基]甲基}苯基)-2-苯乙烷-1，2-二酮(1-1)(0.129g，0.29mmol)的85％HOAc水溶液(2ml)的溶液中，加入氨基脲盐酸盐(2-1)(0.033g，0.29mmol)。将反应物加热至125℃达2小时，然后冷却至室温。真空浓缩反应物，得到黄色油状物。将所得油状物溶于水(50ml)中，用饱和NaHCO3水溶液从pH4调至pH6。将所形成的黄色沉淀物溶于EtOAc中，分离各层。水层用EtOAc(2×50ml)进一步萃取。合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩，得到黄色油状物。所得油状物用快速柱色谱法纯化(梯度，5-10％MeOH/CH2Cl2)。将含所需产物的流分合并，浓缩得到浅黄色固体。经1H NMR(CHCl3)测定，固体为标题化合物的混合物(比例1∶1.5)。[M+H]+＝479.2183。
1-{1-[4-(2-甲基-3-氧代-6-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(2-4)和1-{1-[4-(2-甲基-3-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-6-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(2-5)向1-{1-[4-(3-氧代-6-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(2-2)和1-{1-[4-(3-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-6-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(2-3)(1∶1.5未确定区域异构体(regioisomer)的混合物，0.034g，0.07mmol)的2∶1CH2Cl2∶MeOH(1.5ml)的溶液中，加入(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷(2M的己烷溶液，0.036ml，0.07mmol)。将反应物在环境温度下搅拌1.5小时。滴加HOAc直到停止起泡。真空浓缩反应物，得到黄色油状物。油状物用反相色谱法纯化(梯度，5-100％CH3CN/H2O+0.1％TFA)。分别合并含有分离的区域异构体的流分，浓缩，得到标题化合物的三氟乙酸盐(TFA盐)。1-{1-[4-(2-甲基-3-氧代-6-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(2-4)1H NMR(CDCl3)δ8.34(bs，1H)，7.56(d，2H，J＝8.06Hz)，7.44-7.27(m，7H)，7.14-7.05(m，4H)，4.68(m，1H)，4.26(s，2H)，3.96(s，3H)，3.72(d，2H，J＝11.97Hz)，2.94-2.81(m，4H)，1.99(m，2H).[M+H]+＝493.2352.
1-{1-[4-(2-甲基-3-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-6-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(2-5)
1H NMR(CDCl3)δ8.06(bs，1H)，7.48-7.40(m，8H)，7.33-7.30(m，2H)，7.14-7.05(m，3H)，4.69(m，1H)，4.26(s，2H)，3.95(s，3H)，3.73(d，2H，J＝11.96Hz)，2.96-2.91(m，2H)，2.85-2.81(m，2H)，2.00(d，2H，J＝13.43Hz).(M+H]+＝493.2318.
表1化合物的合成如方案1所示，但用合适取代的甲酰肼代替方案1化合物(1-2)。除非另有说明，否则所示化合物的三氟乙酸盐通过Mass Guided HPLC纯化进行分离。
虽然表1中只描述了一种区域异构体，但两种异构体均被合成(如方案1所示)。
表1



表2化合物的合成如方案2所示，但用合适的取代氨基脲代替方案2化合物(2-1)。除非另有说明，否则所示化合物的三氟乙酸盐通过Mass Guided HPLC纯化进行分离。
虽然表2中只描述了一种区域异构体，但两种异构体均被合成(如方案2所示)。
表2 实施例1人Akt同工型和ΔPH-Akt1的克隆pS2neo载体(于2001年4月3日保藏于ATCC，保藏号为ATCCPTA-3253)按下述方法制备用BglII切割pRmHA3载体(按照Nucl.Acid Res.161043-1061(1988)中介绍的方法制备)，分离出2734bp片段。也用BglII切割pUChsneo载体(按照EMBO J.4167-171(1985)中介绍的方法制备)，分离出4029bp片段。将所分离出的这两个片段连接起来产生载体，被称为pS2neo-1。该质粒在金属硫蛋白启动子和醇脱氢酶聚腺苷酸添加位点间含有多接头。它还有一个受热激启动子驱动的neo抗性基因。用Psp5II和BsiWI切割pS2neo-1载体。合成两个互补寡核苷酸，然后退火(CTGCGGCCGC(SEQ.ID.NO.1)和GTACGCGGCCGCAG(SEQ.ID.NO.2))。将经切割的pS2neo-1与经退火的寡核苷酸连接起来产生第二个载体，即pS2neo。这一基因转变加入了NotI位点，有助于在转染到S2细胞前线性化。
用以下引物将人脾cDNA(Clontech)通过PCR(Clontech)扩增人Akt1基因5’引物5’CGCGAATTCAGATCTACCATGAGCGACGTGGCTATTGTG 3’(SEQ.ID.NO.3)，和3’引物5’CGCTCTAGAGGATCCTCAGGCCGTGCTGCTGGC3’(SEQ.ID.NO.4).
5’引物包括EcoRI和BglH位点。3’引物包括用于克隆目的的XbaI和BamHI位点。所得的PCR产物作为EcoRI/Xba I片段亚克隆到pGEM3Z(Promega)中。为了表达/纯化目的，用PCR引物5’GTACGATGCTGAACGATATCTTCG 3’(SEQ.ID.NO.5)在全长Akt1基因的5’末端加上中间T标记。所得的PCR产物包含5’KpnI位点和3’BamHI位点，用于与含有昆虫细胞表达载体pS2neo的生物素标记一起符合读框地亚克隆所述片段。
为了表达Akt1的血小板白细胞C激酶底物同系结构域(PH)缺失模型(Δaa 4-129，其中包括Akt1铰链区部分的缺失)，用pS2neo载体中的全长Akt1基因作为模板，进行PCR缺失诱变。用重叠内部引物(5’GAATACATGCCGATGGAAAGCGACGGGGCTGAAGAGATGGAGGTG 3’(SEQ.ID.NO.6).和5’CCCCTCCATCTCTTCAGCCCCGTCGCTTTCCATCGGCATGTATTC 3’(SEQ.ID.NO.7))，分两步进行PCR，该重叠内部引物包含缺失，以及5’侧翼引物和3’侧翼引物，该5’侧翼引物和3’侧翼引物在5’端具有KpnI位点和中间T标记。最终的PCR产物用KpnI和SmaI消化，并连接成为pS2neo全长Akt1KpnI/SmaI切割载体，用缺失形式有效地替换克隆的5’端。
用氨基端寡聚引物5’GAATTCAGATCTACCATGAGCGATGTTACCATTGTG 3’(SEQ.ID.NO.8)；和羧基端寡聚引物5’TCTAGATCTTATTCTCGTCCACTTGCAGAG 3’(SEQ.ID.NO.9).
通过成体脑cDNA(Clontech)的PCR，扩增人Akt3基因。这些引物包括用于克隆目的的5’EcoRI/BglII位点和3’XbaI/BglII位点。将所得的PCR产物克隆到pGEM4Z(Promega)的EcoRI和XbaI位点。为了表达/纯化目的，用PCR引物将中间T标记加到全长Akt3克隆的5’端，该PCR引物为5’GGTACCATGGAATACATGCCGATGGAAAGCGATGTTACCATTGTGAAG3’(SEQ.ID.NO.10)。所得的PCR产物包含5’KpnI位点，允许用含有昆虫细胞表达载体pS2neo的生物素标记进行符合读框地克隆。
用以下引物，通过人胸腺cDNA(Clontech)的PCR扩增人Akt2基因氨基端寡聚引物5’AAGCTTAGATCTACCATGAATGAGGTGTCTGTC 3’(SEQ.ID.NO.11)；和羧基端寡聚引物5’GAATTCGGATCCTCACTCGCGGATGCTGGC 3’(SEQ.ID.NO.12).这些引物包括用于克隆目的的5’HindIII/BglII位点和3’EcoRI/BamHI位点。所得的PCR产物可亚克隆到pGem3Z(Promega)的HindIII/EcoRI位点。为了表达/纯化目的，用PCR引物5’GGTACCATGGAATACATGCCGATGGAAAATGAGGTGTCTGTCATCAAAG3’(SEQ.ID.NO.13)，将中间T标记加到全长Akt2的5’端。所得的PCR产物亚克隆到上述的pS2neo载体上。
实施例2人Akt同工型和ΔPH-Akt1的表达用磷酸钙方法，将pS2neo表达载体中含有经克隆的Akt1、Akt2、Akt3和ΔPH-Akt1基因的DNA纯化，并转染果蝇(Drosophila)S2细胞(ATCC)。选出抗生素(G418，500μg/ml)抗性细胞集合体。将细胞稀释至1.0L体积(约7.0×106/ml)，加入生物素和CuSO4，使之终浓度分别为50μM和50mM。细胞在27℃下生长72小时，通过离心收获。细胞沉淀物置于-70℃冷藏待用。
实施例3人Akt同工型和ΔPH-Akt1的纯化将实施例2中描述的由1L S2细胞中得到的细胞沉淀物，在50ml1％CHAPS的缓冲液A(50mM Tris pH 7.4、1mM EDTA、1mMEGTA、0.2mM AEBSF、10μg/ml苯甲脒、亮抑酶肽、抑蛋白酶肽和抑胃酶肽各5μg/ml、10％甘油和1mM DTT)中，用超声处理进行裂解。可溶性部分用装有9mg/ml抗中间T单克隆抗体的G蛋白琼脂糖凝胶(Sepharose)快流(Pharmacia)柱纯化，用75μM EYMPME(SEQ.ID.NO.14)肽的含25％甘油的缓冲液A洗脱。合并含有Akt的流分，通过SDS-PAGE对蛋白质纯度进行评价。使用标准Bradford方案定量测定纯化蛋白质。用液氮快速冷冻纯化蛋白质，并贮藏于-70℃。
需要活化从S2细胞中纯化的Akt和Akt血小板白细胞C激酶底物同系结构域缺失。Akt和Akt血小板白细胞C激酶底物同系结构域缺失在含有下述成分的反应物中被激活(Alessi等，Current Biology7261-269)10nM PDK1(Upstate Biotechnology，Inc.)、脂囊泡(10μM磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸(Metreya，Inc.)、100μM磷脂酰胆碱和100μM磷脂酰丝氨酸(Avanti Polar lipids，Inc.))以及激活缓冲液(50mM TrispH7.4、1.0mM DTT、0.1mM EGTA、1.0μM微囊藻素-LR、0.1mMATP、10mM MgCl2、333μg/ml BSA和0.1mM EDTA)。反应物在22℃下孵育4小时。将等分试样在液氮中快速冷冻。
实施例4Akt激酶测定用GSK衍生生物素化肽底物，对活化Akt同工型和血小板白细胞C激酶底物同系结构域缺失构建体进行测定。可使用对磷酸肽特异性的镧螯合物(Lance)偶联的单克隆抗体，以及可在肽上与生物素部分结合的链霉抗生物素蛋白连接的别藻蓝蛋白(SA-APC)荧光团，通过均相时间分辨荧光(HTRF)测定肽磷酸化的程度。当镧螯合物和APC接近时(即与同一磷酸肽分子结合)，从镧螯合物到APC产生无辐射能量转移，随后在665nm从APC发出发射光。
测定所需的材料A.活化Akt同工酶或血小板白细胞C激酶底物同系结构域缺失构建体；B.Akt肽底物GSK3α(S21)肽#3928生物素-GGRARTSSFAEPG(SEQ.ID.NO.15)，MacromolecularResources；C.镧螯合物标记的抗磷酸GSK3α单克隆抗体(Cell SignalingTechnology，克隆#27)；D.SA-APC(Prozyme目录号PJ25S批号896067)；E.MicrofluorB U形底微量滴定板(Dynex Technologies，目录号7205)；F.DiscoveryHTRF微型板分析仪，Packard InstrumentCompany；G.100X蛋白酶抑制剂混合物(Protease Inhibitor Cocktail)(PIC)1mg/ml苯甲脒，0.5mg/ml抑胃酶肽，0.5mg/ml亮抑酶肽，0.5mg/ml抑蛋白酶肽；H.10X测定缓冲液500mM HEPES，pH7.5，1％PEG，mMEDTA，1mM EGTA，1％BSA，20mMθ-磷酸甘油；I.猝灭缓冲液50mM HEPES pH7.3，16.6mM EDTA，0.1％BSA，0.1％Triton X-100，0.17nM镧螯合物标记的单克隆抗体克隆#27，0.006mg/ml SA-APC；J.ATP/MgCl2使用液1X测定缓冲液，1mM DTT，1X PIC，125mM KCl，5％甘油，25mM MgCl2，375TM ATP；K.酶使用液1X测定缓冲液，1mM DTT，1X PIC，5％甘油，活性Akt。选择最终的酶浓度，使得测定在线性反应范围内；L.肽使用液1X测定缓冲液，1mM DTT，1X PIC，5％甘油，2TM GSK3生物素化肽#3928。
在96孔微量滴定板适当的孔中加入16TL ATP/MgCl2使用液，反应即开始。加入抑制剂或溶媒(1.0Tl)，随后加入10Tl肽使用液。加入13Tl酶使用液并混合，反应即开始。反应进行50分钟，然后加入60Tl HTRF猝灭缓冲液停止反应。在室温下，孵育停止反应的反应物至少30分钟，然后在Discovery仪器上读数。
PKA测定每个单独的PKA测定由下列成分组成A.5X PKA测定缓冲液(200mM Tris pH7.5，100mM MgCl2，5mM θ-巯基乙醇，0.5mM EDTA)；B.50μM用水稀释的肯普肽(Kemptide)(Sigma)贮液；C.通过将1.0μl33P-ATP[10mCi/ml]稀释成200Tl 50μM未标记ATP贮液制备的33P-ATP；D.10μl稀释至0.5mg/ml BSA的70nM PKA催化亚基(UBI目录#14-114)贮液；E.PKA/肯普肽使用液等体积的5X PKA测定缓冲液，肯普肽溶液和PKA催化亚基。
在96深孔测定板中进行反应。向10Tl33P-ATP溶液中加入抑制剂或溶媒(10Tl)。向各孔中加入30Tl PKA/肯普肽使用液，反应即开始。反应物经混合，在室温下孵育20分钟。加入50Tl 100mM EDTA和100mM焦磷酸钠，混合，反应停止。
用p81磷酸纤维素96孔滤板(Millipore)收集酶反应产物(磷酸化肯普肽)。向p81滤板各孔中加入75mM磷酸以制板。通过板底抽真空，经过滤，排空各孔。向各孔中加入磷酸(75mM，170μl)。在含磷酸滤板的相应孔中，加入30μl等分的各已停止反应的PKA反应物。抽真空后，肽被截留在滤板上，用75mM磷酸洗涤滤板5次。最后一次洗涤后，将滤板风干。向各孔中加入闪烁液(30μl)，在TopCount(Packard)上对滤板进行计数。
PKC测定每个PKC测定都由下列成分组成A.10X PKC辅激活缓冲液2.5mM EGTA、4mM CaCl2；B.5X PKC激活缓冲液1.6mg/ml磷脂酰丝氨酸，0.16mg/ml二酰甘油，100mM Tris pH7.5，50mM MgCl2，5mMθ-巯基乙醇；C.在将1.0μl33P-ATP[10mCi/ml]稀释成100μl 100μM未标记的ATP贮液制备的33P-ATP；D.用水稀释的髓鞘碱性蛋白(350μg/ml，UBI)；E.稀释至0.5mg/ml BSA的PKC(50ng/ml，UBI目录#14-115)；F.PKC/髓鞘碱性蛋白使用液将PKC辅激活缓冲液和髓鞘碱性蛋白各5倍体积与PKC激活缓冲液和PKC各10倍体积混合而制得。
在96深孔测定板中进行测定。在5.0μl33P-ATP中加入抑制剂或溶媒(10Tl)。加入PKC/髓鞘碱性蛋白使用液，混合，开始即反应。反应物在30℃下孵育20分钟。加入50Tl 100mM EDTA和100mM焦磷酸钠，混合后，停止反应。在96孔滤板的PVDF膜上收集磷酸化髓鞘碱性蛋白，用闪烁计数进行定量测定。
用上述测定法，对本发明的具体化合物进行测定，发现所述化合物对一种或多种Aktl、Akt2和Akt3的IC50≤50μM。
实施例5基于细胞的测定确定Akt的抑制将细胞(例如具活化Akt的LnCaP或PTEN(-/-)肿瘤细胞系)接种到100mM培养皿中。当细胞生长至约70-80％汇合时，再补加5ml新培养基和试验化合物溶液并继续培养细胞。对照包括未处理细胞、经溶媒处理的细胞和分别用20μM或者200nM LY294002(Sigma)或渥曼青霉素(Sigma)处理的细胞。细胞孵育2、4或6小时，弃培养基。细胞用PBS洗涤，刮出，并转移到离心管中。使细胞沉淀，再次用PBS洗涤。最后，将细胞沉淀物重悬于裂解缓冲液(20mM Tris pH8、140mM NaCl、2mM EDTA、1％Triton、1mM焦磷酸钠、10mMθ-磷酸甘油、10mM NaF、0.5mM NaVO4、1μM Microsystine和1x蛋白酶抑制剂混合物)中，在冰上放置15分钟，温和涡旋使细胞裂解。将裂解液放入Beckman台式超速离心机中，在4℃以100,000xg离心20分钟。通过标准Bradford方案(BioRad)对上清液中的蛋白质进行定量分析，贮藏于-70℃待用。
按下述方法，对澄清裂解液中的蛋白质进行免疫沉淀(IP)对于Aktl，将裂解液与NETN(100mM NaCl、20mM Tris pH8.0、1mMEDTA、0.5％NP-40)中的Santa Cruz sc-7126(D-17)混合，加入A/G蛋白琼脂糖凝胶(Santa Cruz sc-2003)。对于Akt2，将裂解液与NETN中的抗Akt-2琼脂糖(Upstate Biotechnology#16-174)混合，至于kt3，将裂解液与NETN中的抗Akt3琼脂糖(Upstate Biotechnology#16-175)混合。免疫沉淀物(IP)在4℃下孵育过夜，洗涤，用SDS-PAGE进行分离。
使用蛋白质印迹分析总Akt、pThr308Aktl、pSer473Aktl以及Akt2和Akt3相应的磷酸化位点，并用特异性抗体(Cell SignalingTechnology)分析Akt下游目标抗总Akt(目录号9272)、抗磷酸Akt丝氨酸473(目录号9271)和抗磷酸Akt苏氨酸308(目录号9275)。在4℃下，与用PBS+0.5％脱脂奶粉(NFDM)稀释的合适第一抗体孵育过夜后，洗涤印迹，在室温下，与PBS+0.5％NFDM中的辣根过氧化物酶(HRP)标记的第二抗体孵育1小时。用ECL试剂(Amersham/Pharmacia Biotech RPN2134)检测蛋白质。
实施例6调蛋白刺激的Akt活化将MCF7细胞(为PTEN+/+的一种人乳癌系)以1×106细胞/100mM板接种到培养板中。当细胞为70-80％汇合时，再补加5ml无血清培养基并孵育过夜。次日上午，加入化合物，孵育细胞1-2小时，然后加入调蛋白(诱导Akt的活化)30分钟，用上述方法对细胞进行分析。
实施例7肿瘤生长的抑制癌细胞生长抑制剂的体内功效，可通过几种本领域众所周知的方案加以确定。
第0天，在6-10周龄的雌性无胸腺小鼠(Harlan)左胁处，皮下注射人肿瘤细胞系，该细胞系具有PI3K途径(例如LnCaP、PC3、C33a、OVCAR-3、MDA-MB-468等)失调。随机将小鼠分为溶媒组、化合物组或联合治疗组。从第一天起，每天经皮下给药，并在实验过程中连续给药。或者，可选用连续输注泵，给予抑制剂试验化合物。化合物、化合物联合药物或溶媒以总体积为0.2ml给药。通常注射细胞后4-5.5周，当所有溶媒治疗的动物的损害直径为0.5-1.0cm时，切除肿瘤并称重。计算每一治疗组每一细胞系肿瘤的平均重量。
序列表<110>Merck & Co..Inc.
Bilodeau，Mark T.
Lindsley.Craig W.
Zhao，Zhijian<120>Akt活性抑制剂<130>21300Y<150>60/465，124<151>2003-04-24<160>15<170>FastSEQ for Windows Version 4.0<210>1<211>10<212>DNA<213>人工序列<220>
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<223>完全合成的氨基酸序列<400>15Gly Gly Arg Ala Arg Thr Ser Ser Phe Ala Glu Pro Gly1 5 10
权利要求
1.一种下式A的化合物、或其药物可接受的盐或立体异构体 其中 选自CR1＝N、N＝CR1、 或 a为0或1；b为0或1；m为0、1或2；p为0、1或2；q为0、1、2或3；r为0或1；s为0或1；t为2、3、4、5或6；Q选自H、-NR6R7、芳基和杂环基，所述芳基和杂环基任选被1-3个Rz取代；R1独立选自1)H，2)(C＝O)aObC1-C10烷基，3)(C＝O)aOb芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)(C＝O)aOb杂环基，7)(C＝O)ObC3-C8环烷基，8)CO2H，9)卤基，10)CN，11)OH，12)ObC1-C6全氟烷基，13)Oa(C＝O)bNR6R7，14)NRc(C＝O)NR6R7，15)S(O)mRa，16)S(O)2NR6R7，17)NRcS(O)mRa，18)氧代，19)CHO，20)NO2，21)NRc(C＝O)ObRa，22)O(C＝O)ObC1-C10烷基，23)O(C＝O)ObC3-C8环烷基，24)O(C＝O)Ob芳基，25)O(C＝O)Ob-杂环，和26)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自Rz的取代基取代；R1’独立选自1)H，2)(C＝O)aObC1-C10烷基，3)(C＝O)aOb芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)(C＝O)aOb杂环基，7)(C＝O)aObC3-C8环烷基，8)CO2H，9)卤基，10)CN，11)OH，12)ObC1-C6全氟烷基，13)Oa(C＝O)bNR6R7，14)S(O)mRa，15)S(O)2NR6R7，16)氧代，17)CHO，18)O(C＝O)ObC1-C10烷基，19)O(C＝O)ObC3-C8环烷基，20)O(C＝O)Ob芳基，21)O(C＝O)Ob-杂环，和22)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自R2的取代基取代；R2独立选自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb杂环基，6)(C＝O)aObC3-C8环烷基，7)CO2H，8)卤基，9)CN，10)OH，11)ObC1-C6全氟烷基，12)Oa(C＝O)bNR6R7，13)NRc(C＝O)NR6R7，14)S(O)mRa，15)S(O)2NR6R7，16)NRcS(O)mRa，17)CHO，18)NO2，19)NRc(C＝O)ObRa，20)O(C＝O)ObC1-C10烷基，21)O(C＝O)ObC3-C8环烷基，22)O(C＝O)Ob芳基，23)O(C＝O)Ob-杂环，和24)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被1、2或3个选自Rz的取代基取代；R3和R4独立选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-全氟烷基，或者R3和R4结合在一起形成-(CH2)t-，其中一个碳原子任选被选自O、S(O)m、-N(Rb)C(O)-和-N(CORa)-的部分取代；R5独立选自1)H，2)(C＝O)aObC1-C10烷基，3)(C＝O)aOb芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)(C＝O)aOb杂环基，7)(C＝O)aObC3-C8环烷基，8)CO2H，9)卤基，10)CN，11)OH，12)ObC1-C6全氟烷基，13)Oa(C＝O)bNR6R7，14)NRc(C＝O)NR6R7，15)S(O)mRa，16)S(O)2NR6R7，17)NRcS(O)mRa，18)氧代，19)CHO，20)NO2，21)O(C＝O)ObC1-C10烷基，22)O(C＝O)ObC3-C8环烷基，和23)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自Rz的取代基取代；R6和R7独立选自1)H，2)(C＝O)ObRa，3)C1-C10烷基，4)芳基，5)C2-C10烯基，6)C2-C10炔基，7)杂环基，8)C3-C8环烷基，9)SO2Ra，10)(C＝O)NRb2，11)OH，和12)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和炔基任选被一个或多个选自Rz的取代基取代，或者R6和R7可以和与之连接的氮结合在一起形成单环杂环或双环杂环，每个环4-7元，除该氮以外，任选还含有一个或多个选自N、O和S的额外杂原子，所述单环杂环或双环杂环任选被一个或多个选自Rz的取代基取代；Rz选自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)(C0-C6)亚烷基-S(O)mRa，4)氧代，5)OH，6)卤基，7)CN，8)(C＝O)rOs(C2-C10)烯基，9)(C＝O)rOs(C2-C10)炔基，10)(C＝O)rOs(C3-C6)环烷基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-芳基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-杂环基，13)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2，14)C(O)Ra，15)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra，16)C(O)H，17)(C0-C6)亚烷基-CO2H，18)C(O)N(Rb)2，19)S(O)mRa，20)S(O)2N(Rb)2，21)NRc(C＝O)ObRa，22)O(C＝O)ObC1-C10烷基，23)O(C＝O)ObC3-C8环烷基，24)O(C＝O)Ob芳基，25)O(C＝O)Ob-杂环，和26)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被至多三个选自以下的取代基取代Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代、N(Rb)2和Oa-P＝O(OH)2；Ra为取代或未取代的(C1-C6)烷基、取代或未取代的(C2-C6)烯基、取代或未取代的(C2-C6)炔基、取代或未取代的(C3-C6)环烷基、取代或未取代的芳基、(C1-C6)全氟烷基、2，2，2-三氟乙基、或取代或未取代的杂环基；和Rb为H、(C1-C6)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的杂环基、(C3-C6)环烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；Rc选自1)H，2)C1-C10烷基，3)芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)杂环基，7)C3-C8环烷基，和8)(C1-C6)全氟烷基，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和炔基任选被一个或多个选自Rz的取代基取代。
2.权利要求1的化合物，所述化合物为下式B化合物、或其药物可接受的盐或立体异构体 其中 选自CR1＝N、N＝CR1。
3.权利要求2的化合物、或其药物可接受的盐或立体异构体，其中Q选自任选被1-3个Rz取代的-NR6R7、苯基和杂环基；Ra为(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基或杂环基；和Rb为H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
4.权利要求3的化合物，所述化合物为下式C化合物、或其药物可接受的盐或立体异构体 其中Q为杂环基，所述杂环基任选被1-3个Rz取代；R2独立选自1)C1-C6烷基，2)芳基，3)杂环基，4)CO2H，5)卤基，6)CN，7)OH，8)S(O)2NR6R7，和9)Oa-P＝O(OH)2，所述烷基、芳基和杂环基任选被1、2或3个选自Rz的取代基取代。
5.一种化合物，所述化合物选自1)1-(1-{4-[3-(1，3-噁唑-2-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；2)1-{1-[4-(6-苯基-3-嘧啶-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；3)1-(1-{4-[3-(1H-咪唑-2-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；4)1-(1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；5)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-吡唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；6)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-吡唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；7)1-(1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；8)1-(1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；9)1-{1-[4-(6-苯基-3-四氢呋喃-3-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；10)1-{1-[4-(6-苯基-3-四氢呋喃-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；11)1-{1-[4-(6-苯基-3-噻吩-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；12)1-(1-{4-[3-(4-甲基吗啉-3-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；13)1-(1-{4-[3-(1-乙酰基氮杂环丁烷-3-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；14)1-{1-[4-(6-苯基-3-吡啶-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；15)1-{1-[4-(6-苯基-3-吡啶-3-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；16)1-{1-[4-(6-苯基-3-吡啶-4-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；17)1-(1-{4-[3-(吗啉-4-基甲基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；18)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-2-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；19)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；20)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；21)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-4-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；22)1-(1-{4-[3-(1，1’-联苯-4-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；23)1-{1-[4-(2-甲基-3-氧代-6-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；24)1-{1-[4-(2-甲基-3-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-6-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；和25)1-(1-{4-[3-(甲硫基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；或其药物可接受的盐或立体异构体。
6.权利要求1化合物的三氟乙酸盐，所述化合物为1)1-(1-{4-[3-(1，3-噁唑-2-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；2)1-{1-[4-(6-苯基-3-嘧啶-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；3)1-(1-{4-[3-(1H-咪唑-2-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；4)1-(1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；5)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-吡唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；6)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-吡唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；7)1-(1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；8)1-(1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；9)1-{1-[4-(6-苯基-3-四氢呋喃-3-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；10)1-{1-[4-(6-苯基-3-四氢呋喃-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；11)1-{1-[4-(6-苯基-3-噻吩-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；12)1-(1-{4-[3-(4-甲基吗啉-3-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；13)1-(1-{4-[3-(1-乙酰基氮杂环丁烷-3-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；14)1-{1-[4-(6-苯基-3-吡啶-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；15)1-{1-[4-(6-苯基-3-吡啶-3-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；16)1-{1-[4-(6-苯基-3-吡啶-4-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；17)1-(1-{4-[3-(吗啉-4-基甲基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；18)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-2-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；19)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；20)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；21)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-4-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；22)1-(1-{4-[3-(1，1’-联苯-4-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；23)1-{1-[4-(2-甲基-3-氧代-6-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；24)1-{1-[4-(2-甲基-3-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1，2，4-三嗪-6-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；和25)1-(1-{4-[3-(甲硫基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；或其立体异构体。
7.权利要求5的化合物，所述化合物选自1)1-{1-[4-(6-苯基-3-嘧啶-2-基-1，2，4-三嗪-5-基)苄基]哌啶-4-基}-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；2)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-5-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；3)1-(1-{4-[6-苯基-3-(1，3-噻唑-4-基)-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；和4)1-(1-{4-[3-(1，1’-联苯-4-基)-6-苯基-1，2，4-三嗪-5-基]苄基}哌啶-4-基)-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮；或其药物可接受的盐或立体异构体。
8.一种药物组合物，所述组合物包含药用载体，以及分散在其中的治疗有效剂量的权利要求1的化合物。
9.一种药物组合物，所述组合物包含药用载体，以及分散在其中的治疗有效量的权利要求5的化合物。
10.一种抑制哺乳动物体内一种或多种Akt同工型的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物治疗有效量的权利要求1的化合物。
11.一种抑制哺乳动物体内一种或多种Akt同工型的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物治疗有效量的权利要求5的化合物。
12.一种治疗癌症的方法，所述方法包括给予需要治疗的哺乳动物治疗有效量的权利要求1的化合物。
13.一种治疗癌症的方法，所述方法包括给予需要治疗的哺乳动物治疗有效量的权利要求5的化合物。
14.一种治疗涉及血管生成的非恶性疾病的方法，所述方法包括给予需要治疗的哺乳动物治疗有效量的权利要求1的化合物。
15.一种治疗涉及血管生成的非恶性疾病的方法，所述方法包括给予需要治疗的哺乳动物治疗有效量的权利要求5的化合物。
16.权利要求8的组合物，所述组合物还包含选自以下的第二种化合物1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)类视黄醇受体调节剂，4)细胞毒剂，5)抗增殖药、6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂，8)HIV蛋白酶抑制剂、9)反转录酶抑制剂，10)血管生成抑制剂，11)核过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-γ激动剂，12)PPAR-δ激动剂，13)细胞增殖和存活信号抑制剂，和14)干扰细胞周期关卡的药物。
17.一种治疗癌症的方法，所述方法包括给予治疗有效量的权利要求1的化合物以及放射疗法。
18.一种治疗过度增殖性疾病的方法，所述疾病选自再狭窄、炎症、自身免疫病和变态反应/哮喘，所述方法包括给予需要治疗的哺乳动物治疗有效量的权利要求1的化合物。
19.一种治疗高胰岛素血症的方法，所述方法包括给予需要治疗的哺乳动物治疗有效量的权利要求1的化合物。
全文摘要
本发明涉及含有杂环三嗪部分的化合物，该化合物抑制Akt即丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的活性。本发明还涉及包含本发明化合物的化疗组合物，以及包括给予本发明的化合物以治疗癌症的方法。
文档编号C07D401/14GK1809540SQ200480017117
公开日2006年7月26日 申请日期2004年4月20日 优先权日2003年4月24日
发明者M·T·比洛多, C·W·林德斯利, Z·赵 申请人:麦克公司