专利名称：改进的2－取代腺苷的合成的制作方法
技术领域：
本发明涉及2-取代腺苷，例如海绵核苷(2-甲氧基腺苷)的合成，以及用于合成这种化合物的中间产物的合成。
1945年从佛罗里达海岸收集的海绵，隐南瓜海绵(Cryptotthiacrypta)中首次分离出天然产物海绵核苷(Bergmann和Feeney，J.Org.Chem.1951，16，981；Ibid 1956，21，226)。海绵核苷被认为是一种不寻常的核苷的原因是它不仅是在自然界发现的第一种甲氧基嘌呤，而且是从动物组织中分离的第一种O-甲基化合物之一。
已报道多种合成海绵核苷的方法。第一种方法由Bergmann和Stempien公开(J.Org.Chem.1957，22，1575)，其中海绵核苷是通过氯代汞2-甲氧基腺嘌呤与2，3，5-三-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖氯化物偶合形成的。这种简单的偶合反应提供粗产率为31％的海绵核苷，然后用热水将其重结晶得到熔点显示为191-191.5℃并且旋光度为-43.5°(NaOH)的海绵核苷。
Ojha等人使用该主题的变体(Nucleosides和Nucleotides(1995，14，1889)，他们首先将2-乙基硫代腺嘌呤与适宜保护的核糖偶合。然后调节保护基并进行氧化得到一种底物，该底物与甲醇钠反应得到海绵核苷，最后步骤的产率为87％。通过元素分析和熔点(189-190℃)证明柱色谱处理后的目标海绵核苷的纯度。
一种最常见的海绵核苷的分离方法通过用甲醇盐代替2-取代的氯原子
已通过多种基团成功地应用这种方法得到不同产率和纯度的海绵核苷Schaeffer等人，J.Am.Chem.Soc.1958，80，3738(35％产率，mpt.190-192℃)；Bartlett等人，J.Med.Chem.1981，24，947(未提供产率和纯度)；Sato等人，Synth.Proceed.NucleicAcid Chem.1968，1，264。但是，这种方法的缺点在于2-氯代腺苷原料难以合成，因此生产成本高。
Cook等人报道海绵核苷(J.Org.Chem.1980，45，4020)为通过碘甲烷使异鸟嘌呤核苷发生甲基化反应的副产物。期望的1-甲基异鸟嘌呤核苷和海绵核苷的粗产率较差(分别为19和30％)。首先通过硅胶柱色谱法(洗脱剂氯仿/甲醇)纯化粗海绵核苷部分，然后用水重结晶得到在189-192℃下熔解的样品(7％产率纯)。
Deghati等人(Tetrahedron Letters 41(2000)1291-1295)和Wanner等人(Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 10(2000)2141-2144)描述了通过用在甲醇中用氰化钾处理2-硝基腺苷五乙酸形成作为在2-硝基腺苷的合成中重要副产物的海绵核苷。所得的2-硝基腺苷产率仅为10％，海绵核苷产率为47％产率(Deghati等人)。通过用四丁基硝酸铵/三氟乙酸酐(TBAN/TFAA)硝化五乙酸腺苷产生2-硝基腺苷五乙酸，并且(Wanner等人)通过用乙酸酐和DMAP处理腺苷来形成腺苷五乙酸(adenosine pentaacetate)
根据Wanner等人的海绵核苷(2-甲氧基腺苷)的合成根据Wanner等人的海绵核苷(2-甲氧基腺苷)的合成这种方法的缺点是海绵核苷的产率或纯度不高。另一种缺点是它涉及使用毒性试剂氰化钾。因此，期望提供合成海绵核苷的替代方法，并改善产生的海绵核苷的产率和纯度。
我们已经认识到，由Deghati等人和Wanner等人的方法产生的海绵核苷的产率和纯度受多种因素限制i)2-硝基腺苷五乙酸被TBAN污染。其干扰随后的2-硝基腺苷五乙酸的甲氧基化和脱保护(如果使用四甲基硝酸铵(TMAN)代替TBAN情况也是如此)，并不利地影响海绵核苷产物的纯度和产率。这一情况特别有问题，因为TBAN是两性的，且不能通过水处理除去。此外，由于2-硝基腺苷五乙酸在水层的部分溶解度，其中的一些可能已通过水处理丧失。
ii)仅以低产率和纯度产生腺苷五乙酸中间产物。我们发现，四乙酰化前体作为主要副产物存在。
iii)五乙酰基化合物的第五乙酸酯基是易变化的，这导致这些化合物分解成为四乙酰基化合物。例如，我们通过柱色谱法纯化腺苷五乙酸，但有证据表明该化合物在此过程中分解。将此化合物重结晶的尝试没有成功，并且其本质上是无定形的而不是结晶。
我们已令人惊奇地发现，可以通过使用苯甲酰基保护基大大改善海绵核苷和其它2-取代腺苷的纯度和产率。
根据本发明，提供一种式I的2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括将2-硝基五苯甲酰基腺苷转化成2-取代腺苷 其中R＝C1-6烷氧基(直链或支链)、苯氧基(未被取代，或者被卤素、氨基、CF3-、氰基、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基一或二取代)、苄氧基(未被取代，或者被卤素、氨基、CF3-、氰基、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基一或二取代)，或苯甲酰基(未被取代，或者被卤素、氨基、CF3-、氰基、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基一或二取代)。
优选R＝甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基、苯氧基、苄氧基或苯甲酰基。
我们已发现，与2-硝基腺苷五乙酸相比，2-硝基-五苯甲酰基腺苷增加了有机溶解度、稳定性和结晶性。因此，2-硝基-五苯甲酰基腺苷比2-硝基腺苷五乙酸容易处理，并可以以比该化合物更高的产率和纯度制备。因此所产生的海绵核苷的产率和纯度也得到改善。使用2-硝基-五苯甲酰基腺苷作为中间产物也可以高产率和纯度生产其它2-取代腺苷。
优选通过使2-硝基-五苯甲酰基腺苷与适宜的阴离子(例如C1-6醇盐阴离子或酚盐阴离子)，或者通过将2-硝基-五苯甲酰基腺苷脱保护并与适宜的阴离子(例如C1-6醇盐阴离子或酚盐阴离子)反应将2-硝基-五苯甲酰基腺苷转化成2-取代腺苷。为合成海绵核苷，可以通过与氰化钾和甲醇反应来实现，如Deghati等人和Wanner等人描述。但是，优选使用毒性较小的甲醇盐阴离子来源。优选来源为MeOH/NaOMe、MeOH/n-BuLi、MeOH/NaOH、MeOH/NaH或MeOH/KOtBu。
优选的甲氧基化2-硝基-五苯甲酰基腺苷的方法在以下实施例4中作了描述。
其它式I的2-取代腺苷可以通过用氢氧化钠、氢化钠、丁基锂或KOtBu和适宜的醇(例如C1-6醇或酚)处理2-硝基-五苯甲酰基腺苷来制备。KOtBu可以与酚一起使用。
根据本发明，还提供2-硝基五苯甲酰基腺苷。
本发明还提供2-硝基五苯甲酰基腺苷在式I的2-取代腺苷合成中的应用。
本发明的优选方法还包括将五苯甲酰基腺苷转化成2-硝基-五苯甲酰基腺苷。
根据本发明的另一方面，提供2-硝基-五苯甲酰基腺苷或式I的2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括将五苯甲酰基腺苷转化成2-硝基-五苯甲酰基腺苷。
可以通过用适宜的硝化试剂，例如四丁基硝酸铵(TBAN)或四甲基硝酸铵(TMAN)将五苯甲酰基腺苷转化成2-硝基-五苯甲酰基腺苷。
优选使用TBAN或TMAN和三氟乙酸酐(TBAN/TFAA或TMAN/TFAA)进行硝化。优选TBAN/TFAA或TMAN/TFAA处于二氯甲烷(DCM)中。
与2-硝基腺苷五乙酸相比，2-硝基-五苯甲酰基腺苷使有机溶解度和结晶度提高。这些性质的一个特定优势是与2-硝基腺苷五乙酸相比，通过水处理、优选随后进行重结晶可以从2-硝基-五苯甲酰基腺苷中除去许多或所有的TBAN或TMAN。优选使用TMAN而不是TBAN作为硝化剂，因为我们已经发现TMAN比TBAN更容易除去。优选在水处理中进行3-5次洗涤，并优选进行2或3次重结晶。
例如，可以通过将化合物溶于有机溶剂(例如乙酸乙酯或DCM)，并用水洗涤所得的溶液来水处理产生的2-硝基-五苯甲酰基腺苷。通常，已发现除去大比例TBAN或TMAN最少需要三次洗涤。但是，通常进行5次洗涤以确保尽可能多地除去TBAN或TMAN。
在用水洗涤溶液，将2-硝基-五苯甲酰基腺苷溶于EtOAc/乙醇或二氯甲烷/乙醇，并从此溶液重结晶2-硝基-五苯甲酰基腺苷之后可以通过除去有机溶剂来进行重结晶。
我们已发现，用TBAN/TFAA进行硝化反应的粗产物不可能重结晶，因为存在大量的TBAN。但是，在水处理之后可以用EtOAc或CH2Cl2和乙醇的混合物容易地将化合物重结晶。在处理工艺之后混合物中也可能存在除TBAN之外的杂质，这些杂质可以通过重结晶除去。最少一次重结晶可能是足够的，但有时可能需要两次或三次重结晶以令人满意地除去这些杂质。
与五乙酰基化合物相比，五苯甲酰基化合物有机溶解度的增加确保通过水处理和重结晶仅有少量化合物丧失。
优选的硝化五苯甲酰基腺苷的方法在以下实施例2和3中作了描述。
本发明的优选方法还包括将腺苷转化成五苯甲酰基腺苷。
本发明还提供五苯甲酰基腺苷、2-硝基-五苯甲酰基腺苷或式I的2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括将腺苷转化成五苯甲酰基腺苷。
可以通过用适宜的苯甲酰化试剂，例如苯甲酰氯将腺苷转化成五苯甲酰基腺苷。还应该使用适宜的碱，例如吡啶。二甲基甲酰胺(DMF)可以用作溶剂，但优选将腺苷溶解/悬浮于吡啶中，因为这得到较清洁的结果。
优选的苯甲酰化腺苷的方法在以下实施例1中作了描述。
使用五苯甲酰基腺苷的一个优点是它可以比腺苷五乙酸更容易纯化。例如通过水处理，然后重结晶纯化五苯甲酰基腺苷。这比涉及柱色谱的腺苷五乙酸的纯化更可取，在所述的柱色谱过程中，发生产物的某些分解或丧失。
本发明还提供五苯甲酰基腺苷在2-硝基五苯甲酰基腺苷或式I的2-取代腺苷合成中的应用。
本发明还提供苯甲酰化试剂在式I的2-取代腺苷合成中的应用。
本发明还提供通过本发明方法合成的2-取代腺苷、2-硝基五苯甲酰基腺苷或五苯甲酰基腺苷。
与使用乙酰基保护基的Deghati等人和Wanner等人的已知方法相比，本发明的方法允许更容易地合成产物，且产率和纯度更高。我们已经认识到，其原因为本发明中所使用的化合物的有机溶解度、稳定性和结晶性增加。
根据本发明的一个可替代的方面，提供一种式I的2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括用TBAN或TMAN硝化腺苷五乙酸以产生2-硝基腺苷五乙酸；降低污染2-硝基腺苷五乙酸的TBAN或TMAN的量；然后由2-硝基腺苷五乙酸产生2-取代腺苷 其中R＝C1-6烷氧基(直链或支链)、苯氧基(未被取代，或者被卤素、氨基、CF3-、氰基、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基一或二取代)、苄氧基(未被取代，或者被卤素、氨基、CF3-、氰基、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基一或二取代)，或苯甲酰基(未被取代，或者被卤素、氨基、CF3-、氰基、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基一或二取代)。
优选R为甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基、苯氧基、苄氧基或苯甲酰基。
已令人惊奇地发现，一种有效的降低TBAN和TMAN污染物的方法是用异丙醇研磨2-硝基腺苷五乙酸，然后用水洗涤。这可以显著地改善海绵核苷或其它2-取代腺苷的纯度和产率。
本发明还提供一种降低污染2-硝基腺苷五乙酸的TBAN或TMAN的量的方法，所述的2-硝基腺苷五乙酸是由用TBAN或TMAN硝化腺苷五乙酸形成的，所述方法包括用异丙醇研磨2-硝基腺苷五乙酸，并用水洗涤研磨的2-硝基腺苷五乙酸以降低TBAN或TMAN的量。
本发明还提供由这种方法产生的2-硝基腺苷五乙酸。
优选用TBAN或TMAN和三氟乙酸酐(TBAN/TFAA或TMAN/TFAA)进行硝化。优选TBAN/TFAA或TMAN/TFAA在二氯甲烷(DCM)中。优选的腺苷五乙酸的硝化方法在以下实施例5中作了描述。
可以通过将2-硝基腺苷五乙酸脱保护，并与适宜的阴离子(例如C1-6醇盐阴离子或酚盐阴离子)反应将2-硝基腺苷五乙酸转化成2-取代腺苷。为合成海绵核苷，可以通过与氰化钾和甲醇反应来实现，如Deghati等人和Wanner等人描述的。但是，优选使用毒性较小的甲醇盐阴离子来源。优选来源为MeOH/NaOMe、MeOH/n-BuLi、MeOH/NaOH、MeOH/NaH或MeOH/KOtBu。优选的将2-硝基腺苷五乙酸转化成海绵核苷的方法在以下实施例5中作了描述。据信可以通过用适宜的C2-6醇或酚和氢氧化钠处理2-硝基腺苷五乙酸来合成其它2-取代腺苷。
本发明的另一方面提供合成海绵核苷的方法，所述方法包括用MeOH/NaOMe、MeOH/n-BuLi、MeOH/NaOH或MeOH/NaH处理2-硝基腺苷五乙酸以形成海绵核苷。
本发明还提供一种式I的2-取代腺苷，不包括海绵核苷的合成方法，所述方法包括将2-硝基腺苷五乙酸脱保护，并与C2-6醇盐阴离子或酚盐阴离子反应。据信，这可以通过与适宜的C2-6醇或酚和氢氧化钠(或NaH、BuLi或KOtBu)反应来实现。
本发明的方法还包括将腺苷转化成腺苷五乙酸。这可以通过Deghati等人和Wanner等人描述的方法实现。但是，我们已经认识到，使用这种方法仅产生低产率和纯度的腺苷五乙酸，并且四乙酰化前体作为主要副产物存在。
我们已经发现，如果本发明的方法还包括将腺苷酰化以形成腺苷的O-三乙酰基和/或四乙酰基衍生物，分离衍生物，并将分离的衍生物酰化以产生腺苷五乙酸中间产物，则可以改善2-取代腺苷产物的产率和纯度。
本发明的另一方面提供一种腺苷五乙酸、2-硝基腺苷五乙酸或式I的2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括以下步骤酰化腺苷以形成腺苷的O-三乙酰基和/或四乙酰基衍生物，分离衍生物，并将分离的衍生物酰化产生腺苷五乙酸。
可以用柱色谱法分离O-三乙酰基和/或四乙酰基衍生物。
然后可以硝化腺苷以形成2-硝基腺苷五乙酸。然后可以将2-硝基腺苷五乙酸转化成式I的2-取代腺苷，例如使用本发明的方法。
我们还已发现，五乙酰基化合物的第五个乙酸酯基是易变的，这导致这些化合物分解成为四乙酰基化合物。例如，我们通过柱色谱法纯化腺苷五乙酸，但有证据表明该化合物在此过程中分解。将此化合物重结晶的尝试没有成功，并且其本质上是无定形的而不是结晶。
我们已经认识到，如果本发明的方法还可选地或额外地包括洗涤腺苷五乙酸中间产物以降低污染性腺苷四乙酸的量，然后硝化洗涤的腺苷五乙酸，则可以改善2-取代腺苷产物的产率和纯度。
本发明的另一方面还提供一种腺苷五乙酸、2-硝基腺苷五乙酸或式I的2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括以下步骤将腺苷或腺苷的酰化衍生物酰化以形成腺苷五乙酸；并洗涤腺苷五乙酸以降低污染性腺苷四乙酸的量。
为洗涤腺苷五乙酸，优选将其溶于氯仿，并用乙酸溶液(优选1M)洗涤。
然后将腺苷五乙酸硝化以形成2-硝基腺苷五乙酸。然后将2-硝基腺苷五乙酸转化成式I的2-取代腺苷，例如使用本发明的方法。
据信，2-硝基腺苷五乙酸可能是有毒的。因此，可能期望确保由2-硝基腺苷五乙酸产生的2-取代腺苷被尽可能少的2-硝基腺苷五乙酸污染。根据本发明，这可以通过将2-硝基腺苷五乙酸转化成2-氯代腺苷五乙酸、然后将2-氯代腺苷五乙酸转化成2-取代腺苷来实现。
据信，2-硝基腺苷五乙酸至2-氯代腺苷五乙酸的转化可以通过用适宜的氯化试剂、例如氯化铵将2-硝基腺苷五乙酸氯化来实现。
本发明的另一方面提供一种式I的2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括将2-氯代腺苷五乙酸转化成2-取代腺苷。
本发明还提供五乙酰化2-氯代腺苷在2-取代腺苷的合成中的应用。
据信，可以通过将2-氯代腺苷五乙酸脱保护，并与适宜的阴离子(例如C1-6醇盐阴离子或酚盐阴离子)反应而将2-氯代腺苷五乙酸转化成2-取代腺苷。为合成海绵核苷，据信其可以通过与氰化钾和甲醇反应来实现，如Deghati等人和Wanner等人描述。但是，优选使用毒性较小的甲醇盐阴离子来源。优选的来源为MeOH/NaOMe、MeOH/n-BuLi、MeOH/NaOH或MeOH/NaH。据信可以使用适宜的C2-6醇或酚和氢氧化钠(或BuLi、NaH或KOtBu)合成其它2-取代腺苷。
本发明还提供式I的2-取代腺苷，或用于合成式I的2-取代腺苷的中间产物，它们由本发明的方法生产。
本发明的方法可以用于以高产率和纯度合成2-取代腺苷。例如，我们已经能够合成纯度＞96％的海绵核苷。
现在以例举的方式，仅参照所附的显示优选的合成2-甲氧基腺苷(海绵核苷)的方法的方案1和2来描述本发明的实施方案。
实施例1五苯甲酰基腺苷的制备 向在吡啶(20cm3)中的腺苷(2.00g，7.47mmol)的悬浮液/溶液加入苯甲酰氯(7.35g，6.07cm3，52.29mmol)。在65℃下加热4小时，将反应混合物倾入乙醇(20cm3)。真空下除去溶剂。用DCM(300cm3)分配剩余物，用水(100cm3)洗涤，用DCM(3×50cm3)洗涤水层，合并有机层，并用水(2×100cm3)、盐水(100cm3)洗涤，干燥(MgSO4)。真空下除去溶剂，用丙酮/EtOH重结晶来纯化残余物，得到目标产物(5.660g，96.2％)，为一种无色固体。LCMS788(M+H)。
实施例2使用TMAN/TFAA作为硝化试剂的2-硝基-五苯甲酰基腺苷的制备 向在DCM(40cm3)中的四甲基硝酸铵(1.37g，11.4mmol)的悬浮液加入三氟乙酸酐(2.40g，1.62cm3，11.4mmol)。室温下搅拌1.5小时，冷却至0℃，并加入在DCM(50cm3)中的五苯甲酰基腺苷(6.00g，7.62mmol)的溶液。在14小时内加热至室温后，在真空下除去溶剂[旋转蒸发器水浴温度保持在30℃或更低]。将剩余物溶于EtOAc(200cm3)，用水(3×150cm3)、盐水(50cm3)洗涤，干燥(MgSO4)。在真空下除去溶剂，用DCM/EtOH重结晶(两次)来纯化残余物，得到目标产物(5.59g，88.2％)，为一种灰白色固体。1HNMR(400MHz，CDCl3)4.79dd，J＝11.5，4.2Hz)，4.92(2H，m)，6.08(1H，J＝5.6Hz)，6.16(1H，dd，J＝5.8，4.4Hz)，6.57(1H，J＝5.4Hz)，7.39(10H，m)，7.55m)，7.85(4H，m)，7.92(2H，m)，8.04(4H，m)和8.44(1H，s).LCMS833(M+H)和855(M+Na)。
实施例3使用TBAN/TFAA作为硝化试剂的2-硝基-五苯甲酰基腺苷的制备 向在DCM(20cm3)中的四丁基硝酸铵(1.16g，3.81mmol)的溶液加入三氟乙酸酐(0.80g，0.538cm3，3.81mmol)。0℃下搅拌0.5小时，然后在0℃下加入在DCM(20cm3)中的五苯甲酰基腺苷(2.00g，2.54mmol)的溶液(任选用银箔覆盖反应容器)。室温下加热14小时，将反应混合物倾入冰/水，分离水层，并用DCM(40cm3)萃取，合并有机层，在真空下除去溶剂[将旋转蒸发器水浴温度保持在30℃或更低]。将残余物溶于EtOAc(150cm3)，用水(5×75cm3)、盐水(50cm3)洗涤，干燥(MgSO4)。在真空下除去溶剂，用DCM/EtOH重结晶(两次)来纯化残余物，得到目标产物(1.604g，75.9％)，为一种灰黄色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)4.79(1H，dd，J＝11.5，4.2Hz)，4.92(2H，m)，6.08(1H，t，J＝5.6Hz)，6.16(1H，dd，J＝5.8，4.4Hz)，6.57(1H，d，J＝5.4Hz)，7.39(10H，m)，7.55(5H，m)，7.85(4H，m)，7.92(2H，m)，8.04(4H，m)和8.44(1H，s).LCMS833(M+H)和855(M+Na)。
实施例42-甲氧基腺苷(海绵核苷)的制备
向在MeOH(10cm3)中的2-硝基-五苯甲酰基腺苷(0.52g，0.62mmol)的悬浮液中加入在MeOH(10cm3)中的NaOH(0.15g，3.70mmol)的溶液。室温下搅拌16小时，得到一种红色溶液。在真空下除去溶剂，将残余物溶于水，用0.2MHCl中和(滴加以防止过度酸化及其导致的脱嘌呤作用)。在真空下除去溶剂，将残余物溶于MeOH∶Water(1∶1)(大约40cm3)[需要加热]，将反应混合物在冷却器中放置过夜(-20℃)。目标产物从反应混合物中沉淀出来，过滤得到标题化合物(0.100g，54％)，为一种灰黄色固体。LCMS298(M+H)，少量杂质329(M+H)。可以用反相色谱法进行进一步的纯化。1HNMR(400MHz，CDCl3)3.52(1H，m)，3.60(1H，m)，3.78(3H，s)，3.89(1H，dd，J＝7.2，3.9Hz)，4.12(1H，m)，4.56(1H，dd，J＝11.3，6.1Hz)，5.10(1H，m)，5.11(1H，d，J＝4.7Hz)，5.35(1H，d，J＝6.2Hz)，5.75(1H，d，J＝6.2Hz)，7.27(2H，br.s)和8.11(1H，s)。
实施例5腺苷五乙酸的制奋 向在乙酸酐(10mL)中的腺苷(1.0g，3.74mmol)的溶液加入氢化钠(60％，在矿物油中，0.9g，22.5mmol)，并将混合物于110℃下加热20小时。将反应混合物冷却至室温，然后倾入冰/NaHCO3(250mL)。加入EtOAc(150mL)，并用水(3×100cm3)洗涤有机层，干燥(MgSO4)，并在真空下除去溶剂。用硅胶色谱法(硅胶60)纯化粗产物，用EtOAc∶庚烷(1∶1)，增加至EtOAc洗脱，得到目标产物(0.6g，31％)。
2-硝基-腺苷五乙酸的制备 向在DCM(10mL)中的四甲基硝酸铵(642mg，4.72mmol)的悬浮液中加入三氟乙酸酐(0.68mL，4.72mmol)，并将所得的悬浮液在室温下搅拌1小时，然后冷却至0℃。加入在DCM(10mL)中的腺苷五乙酸(1.50g，3.14mmol)的溶液，并在2.5小时内将溶液加热至室温。用盐水洗涤粗产物，干燥(MgSO4)，并在真空下除去溶剂得到目标产物，为一种灰褐色固体泡沫(1.36g，83％)。
2-甲氧基腺苷(海绵核苷)的制奋 室温下向在2-硝基-腺苷五乙酸(275mg.0.53mmol)的溶液(在MeOH中)加入NaOMe(71mg，1.3mmol)，并将混合物搅拌3小时。加入氯化铵(70mg，1.3mmol)，并将反应混合物在真空下浓缩得到一种黄色油。用硅胶色谱法纯化粗产物，用EtOAc，增加至EtOAc∶MeOH(15∶1)洗脱，然后用异丙醇重结晶得到目标产物，为一种白色固体(70mg，47％)。
可以优选使用柠檬酸溶液或0.2HCL代替氯化铵。
方案1
方案权利要求
1.式I的2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括将2-硝基-五苯甲酰基腺苷转化成2-取代腺苷 其中R＝C1-6烷氧基(直链或支链)、苯氧基(未被取代，或者被卤素、氨基、CF3-、氰基、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基一或二取代)、苄氧基(未被取代，或者被卤素、氨基、CF3-、氰基、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基一或二取代)，或苯甲酰基(未被取代，或者被卤素、氨基、CF3-、氰基、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基一或二取代)。
2.根据权利要求1的方法，其中R＝甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基、苯氧基、苄氧基或苯甲酰基。
3.根据权利要求1或2的方法，其中通过脱保护并与C1-6醇盐阴离子或酚盐阴离子反应将2-硝基-五苯甲酰基腺苷转化成2-取代腺苷。
4.根据权利要求3的方法，其中所述阴离子为由MeOH/NaOMe、MeOH/n-BuLi、MeOH/NaOH、MeOH/NaH或MeOH/KOtBu生产的甲醇盐阴离子。
5.根据任何前述权利要求的方法，所述方法还包括将五苯甲酰基腺苷转化成2-硝基-五苯甲酰基腺苷。
6.2-硝基-五苯甲酰基腺苷的合成方法，所述方法包括将五苯甲酰基腺苷转化成2-硝基-五苯甲酰基腺苷。
7.根据权利要求5或6的方法，其中使用四丁基硝酸铵(TBAN)或四甲基硝酸铵(TMAN)作为硝化试剂将五苯甲酰基腺苷转化成2-硝基-五苯甲酰基腺苷。
8.根据权利要求7的方法，所述方法还包括在硝化反应之后降低污染2-硝基-五苯甲酰基腺苷的TBAN或TMAN的量。
9.根据权利要求8的方法，其中通过用水洗涤2-硝基-五苯甲酰基腺苷来降低TBAN或TMAN的量。
10.根据权利要求9的方法，所述方法还包括在用水洗涤后将2-硝基-五苯甲酰基腺苷重结晶。
11.根据权利要求5-10之任意项的方法，所述方法还包括将腺苷转化成五苯甲酰基腺苷。
12.五苯甲酰基腺苷或2-硝基-五苯甲酰基腺苷的合成方法，所述方法包括将腺苷转化成五苯甲酰基腺苷。
13.根据权利要求11或12的方法，其中用苯甲酰氯将腺苷苯甲酰化。
14.2-硝基五苯甲酰基腺苷。
15.2-硝基五苯甲酰基腺苷在式I的2-取代腺苷合成中的应用。
16.五苯甲酰基腺苷在2-硝基-五苯甲酰基腺苷或式I的2-取代腺苷合成中的应用。
17.苯甲酰基化试剂在式I的2-取代腺苷合成中的应用。
18.降低污染2-硝基五苯甲酰基腺苷的TBAN或TMAN的量的方法，所述2-硝基五苯甲酰基腺苷是由使用TBAN或TMAN硝化五苯甲酰基腺苷形成的，所述方法包括用水洗涤2-硝基-五苯甲酰基腺苷。
19.根据权利要求18的方法，所述方法还包括在用水洗涤后将2-硝基-五苯甲酰基腺苷重结晶。
20.式I的2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括用四丁基硝酸铵(TBAN)或四甲基硝酸铵(TMAN)硝化腺苷五乙酸产生2-硝基腺苷五乙酸；降低污染2-硝基腺苷五乙酸的TBAN或TMAN的量；然后由2-硝基腺苷五乙酸生产2-取代腺苷 其中R＝C1-6烷氧基(直链或支链)、苯氧基(未被取代，或者被卤素、氨基、CF3-、氰基、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基一或二取代)、苄氧基(未被取代，或者被卤素、氨基、CF3-、氰基、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基一或二取代)，或苯甲酰基(未被取代，或者被卤素、氨基、CF3-、氰基、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基一或二取代)。
21.根据权利要求20的方法，其中通过用异丙醇研磨2-硝基腺苷五乙酸并用水洗涤研磨的2-硝基腺苷五乙酸来降低TBAN或TMAN污染物的量。
22.根据权利要求20或21的方法，其中通过将2-硝基腺苷五乙酸脱保护并与C1-6醇盐阴离子或酚盐阴离子反应由2-硝基腺苷五乙酸生产2-取代腺苷。
23.根据权利要求20-22之任意项的方法，其中该2-取代腺苷为2-甲氧基腺苷，并且它是通过与来自甲醇/NaOMe、甲醇/n-BuLi、甲醇/NaOH、甲醇/NaH或甲醇/KOtBu的甲醇盐阴离子反应，由2-硝基腺苷五乙酸生产的。
24.根据权利要求20-23之任意项的方法，所述方法还包括通过酰化腺苷来合成腺苷五乙酸。
25.根据权利要求24的方法，其中将腺苷酰化形成腺苷的O-三乙酰基和/或四乙酰基衍生物，将该衍生物分离，并将分离的衍生物酰化产生腺苷五乙酸。
26.根据权利要求24或25的方法，所述方法还包括洗涤腺苷五乙酸以除去污染性腺苷四乙酸，然后硝化洗涤的腺苷五乙酸以形成2-硝基腺苷五乙酸。
27.式I的2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括将腺苷酰化形成腺苷的O-三乙酰基和/或四乙酰基衍生物，分离该衍生物，酰化分离的衍生物以产生腺苷五乙酸，并由腺苷五乙酸生产2-取代腺苷。
28.根据权利要求27的方法，所述方法还包括洗涤腺苷五乙酸以降低污染性腺苷四乙酸的量，然后由该洗涤的腺苷五乙酸生产2-取代腺苷。
29.式I的2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括酰化腺苷或腺苷的酰化衍生物以形成腺苷五乙酸，洗涤腺苷五乙酸以降低污染性腺苷四乙酸的量，并由该洗涤的腺苷五乙酸生产2-取代腺苷。
30.根据权利要求27-29之任意项的方法，所述方法还包括将腺苷五乙酸硝化产生2-硝基腺苷五乙酸，并由2-硝基腺苷五乙酸生产2-取代腺苷。
31.根据权利要求30的方法，其中2-取代腺苷为2-甲氧基腺苷，并且其通过使来自甲醇/NaOMe、甲醇/n-BuLi、甲醇/NaOH、甲醇/NaH或甲醇/KOtBu的甲醇盐阴离子与2-硝基腺苷五乙酸反应产生。
32.根据权利要求20、21或30之任意项的方法，所述方法还包括将2-硝基腺苷五乙酸转化成2-氯代腺苷五乙酸，然后由2-氯代腺苷五乙酸生产2-取代腺苷。
33.2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括将2-氯代腺苷五乙酸转化成2-取代腺苷。
34.根据权利要求33的方法，所述方法还包括由2-硝基腺苷五乙酸生产2-氯代腺苷五乙酸。
35.根据权利要求32-34之任意项的方法，其中该2-取代腺苷为2-甲氧基腺苷，并通过与来自甲醇/NaOMe、甲醇/n-BuLi、甲醇/NaOH或甲醇/NaH的甲醇盐阴离子与2-硝基腺苷五乙酸反应而将2-氯代腺苷五乙酸转化成2-甲氧基腺苷。
36.通过根据权利要求20-35之任意项的方法合成的2-取代腺苷。
37.2-甲氧基腺苷的合成方法，所述方法包括使来自甲醇/NaOMe、甲醇/n-BuLi、甲醇/NaOH、甲醇/NaH或甲醇/KOtBu的甲醇盐阴离子与2-硝基腺苷五乙酸反应。
38.2-甲氧基腺苷的合成方法，所述方法包括在方案1或2中所示的步骤。
39.2-甲氧基腺苷的合成方法，所述方法基本上如所述。
40.纯度＞96％的2-甲氧基腺苷。
41.2-硝基腺苷五乙酸的合成方法，所述方法包括用TBAN或TMAN硝化腺苷五乙酸产生2-硝基腺苷五乙酸，并降低污染2-硝基腺苷五乙酸的TBAN或TMAN的量。
42.根据权利要求41的方法，其中通过用异丙醇研磨2-硝基腺苷五乙酸，并用水洗涤研磨的2-硝基腺苷五乙酸来降低TBAN或TMAN污染物的量。
43.腺苷五乙酸、2-硝基腺苷五乙酸或式I的2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括以下步骤酰化腺苷以形成腺苷的O-三乙酰基和/或四乙酰基衍生物，分离该衍生物，并酰化分离的衍生物以产生腺苷五乙酸。
44.腺苷五乙酸、2-硝基腺苷五乙酸或式I的2-取代腺苷的合成方法，所述方法包括以下步骤酰化腺苷或腺苷的酰化衍生物以形成腺苷五乙酸；并洗涤腺苷五乙酸以降低污染性腺苷四乙酸的量。
全文摘要
描述了使用2－硝基五苯甲酰基腺苷或2－硝基五乙酰基腺苷作为中间产物的式(I)的2－取代腺苷的合成，式(I)中R＝C
文档编号C07H19/16GK1886414SQ200480035597
公开日2006年12月27日 申请日期2004年12月3日 优先权日2003年12月5日
发明者G·A·布朗, E·D·萨沃里, J·V·A·奥兹曼, A·M·斯托达特 申请人:比奥维特罗姆股份公司