专利名称：取代二苯并[a,kl]呫吨化合物及其应用的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，具体的说涉及一类取代二苯并[a，kl]呫吨化合物及其应用。
背景技术：
恶性肿瘤的危害已成为全球性的卫生问题，它是一种死亡率仅次于心脑血管疾病的高危疾病。但对许多实体瘤如肝癌等恶性肿瘤仍缺乏疗效明显的药物，因此，寻找选择性强、毒副作用小而价格低廉的特效抗癌药物仍是化学界、生物学界、医学界、药物学界的一个重要课题。
Tan D-M等(Tan D-M，Li H-H，Wang B，Liu H-B，Xu Z-L，Chin.J.Chem.，2001，1991)在进行模拟氧化酶的研究中，发现1，1’-联-2-萘酚在铜胺络合物的催化下，被氧气氧化为取代二苯并[a，kl]呫吨化合物。
发明内容
本发明的目的是针对现有恶性肿瘤治疗药物存在的问题，提供一类取代二苯并[a，kl]呫吨化合物。
本发明的另一个目的是提供上述取代二苯并[a，kl]呫吨化合物在制备抗癌药物中的应用。
本发明的取代二苯并[a，kl]呫吨化合物，其结构如(I)式
R1为甲基或乙基；R2和R4为H、CH2OH、CONH2、CONHCH2CH2OH或COOCH3中的任一种；R3和R5为H或NO2中的任一种；R2、R3、R4、R5不同时为H。
本发明分别用3位和6位带不同取代基的1，1’-联-2-萘酚在Cu(II)-胺络合物催化下进行仿生氧化反应，当它们在各种低级醇溶剂中反应时，生成相应的取代二苯并[a，kl]呫吨化合物，如下所示 R1R2R3R4R5Ia CH3CH2OH HCH2OH HIb CH2CH3CH2OH H HHIc CH3H NO2HNO2Id CH3H HHNO2Ie CH3H HCONH2HIf CH3H HCOOCH3HIg CH3H HCONH(CH2)2OH HIh CH3CONH(CH2)2OH H H
上述取代二苯并[a，kl]呫吨化合物的优选化合物为Ia、Ib、Ic、Id、Ie、If、Ig或Ih。
本发明的有益效果本发明合成的取代二苯并[a，kl]呫吨化合物具有显著的抗癌活性，其选择性强、毒副作用小且价格低廉，应用前景广阔。
具体实施例方式
实施例1 取代二苯并[a，kl]呫吨化合物的合成1.取代二苯并[a，kl]呫吨化合物的通用合成方法一定量的取代联萘酚加入到反应的醇溶剂中，加入二氧六环作为助溶剂，再加入由等摩尔量的乙醇胺与CuCl2·2H2O组成的催化剂，在氧气的存在下100℃以下反应，反应结束后减压蒸去大部分溶剂，加入稀氨水洗去铜胺络合物，并用乙酸乙酯萃取有机物，所得有机物用柱层析的方法提纯，得到相应的化合物I。
2.化合物Ia的合成取0.346克(1.0mmol)3，3’-二羟甲基-1，1’-联-2-萘酚加入到15毫升甲醇中，加入5毫升二氧六环作为助溶剂，再加入由等摩尔量的乙醇胺与CuCl2·2H2O组成的催化剂，在氧气的存在下室温反应，反应结束后减压蒸去大部分溶剂，加入15毫升稀氨水洗去铜胺络合物，并用乙酸乙酯萃取有机物，所得萃取液浓缩后用柱层析的方法提纯，得到0.300克相应的化合物Ia，产率为84％，熔点112～114℃，1HNMR(500MHz，CD3OD)d8.030(s，1H)，8.008(d，J＝8.5Hz，1H)，7.834(d，J＝7.5Hz，1H)，7.445(t，J＝7.5Hz 8.5Hz，1H)，7.392(dt，J＝8.0Hz 9.0Hz，J＝1.5Hz，1H)，7.330(dt，J＝8.0Hz 9.0Hz，J＝1.0Hz，1H)，7.180～7.128(m，3H)，4.974(s，2H)，4.547(dd，J＝15Hz，J＝1.5Hz，1H)，4.398(dd，J＝15Hz，J＝1.5Hz，1H)，2.772(s，3H)；IR(KBr，cm-1)ν3529，3383，3058，2926，1703，1582，1429，1286，1053，753；FAB-MS，m/z(％)357([M-OH]+，4)，343([M-OCH3]+，30)，312([M-OCH3-CH2OH]+，14).Anal.calcd for C23H18O5C73.79，H4.85；found C 74.15，H4.94.
3.Ib的合成取0.316克(1.0mmol)3-羟甲基-1，1’-联-2-萘酚加入到15毫升乙醇中，加入5毫升二氧六环作为助溶剂，再加入由等摩尔量的乙醇胺与CuCl2·2H2O组成的催化剂，在氧气的存在下室温反应，反应结束后减压蒸去大部分溶剂，加入15毫升稀氨水洗去铜胺络合物，并用乙酸乙酯萃取有机物，所得萃取液浓缩后用柱层析的方法提纯，得到0.339克相应的化合物，产率94.8％，熔点140～142℃，1H NMR(300MHz，DMSO-d6)d8.05(d，J＝9.0Hz，1H)，8.01～7.98(m，1H)，7.96～7.89(m，1H)，7.51(d，J＝7.4Hz，1H)，7.46～7.38(m，3H)，7.28(d，J＝7.0Hz，1H)，7.18(1H，s)，7.15(d，J＝9.0Hz，1H)，4.43～4.30(m，2H)，2.85～2.80(m，1H)，2.78～2.64(m，1H)，0.80(t，J＝7.0Hz，3H)；IR(KBr，cm-1)ν3408，3059，2968，1701，1571，1428，1236，1051，754；FAB-MS，m/z(％)358([M]+，9)，329([M-C2H5]+，10)，313([M-OC2H5]+，57).Anal.calcd for C23H18O4C 77.08，H 5.06；found C 77.11，H 4.94.
4.Ic的合成4mmol的CuCl2·2H2O加入到30mL甲醇溶剂中，溶解后加入等摩尔量的乙醇胺，形成铜胺络合物溶液。然后加入1mmol的6，6’-二硝基-1，1’-联-2-萘酚，再加入二氧六环直至刚好能把6，6’-二硝基-1，1’-联-2-萘酚溶解完全为止。搅拌下加热到50～70℃，在氧气的存在下反应。薄层色谱跟踪至原料消失。反应结束后减压蒸馏回收大部分溶剂，加入5％氨水，再加入乙酸乙酯抽提，有机层用水洗至中性，加入无水硫酸钠干燥，减压旋转蒸发回收乙酸乙酯，用140～200目硅胶柱层析(石油醚-乙酸乙酯洗脱)得到0.263克产品。产率65％，熔点289～291℃。1H NMR(500MHz，DMSO-d6/TMS)δ2.80(s，3H，)，6.50(d，J＝10Hz，1H)，7.64(d，J＝10Hz，1H)，7.69(d，J＝9.0Hz，1H)，8.12(d，J＝2.0Hz，1H)，8.13(d，J＝9.5Hz，1H)，8.14(s，1H，6-H)，8.18(d，3J＝9.5Hz，J＝2.5Hz，1H)，8.48(d，J＝9.0Hz，1H)，9.02(s，1H)；IR(KBr，cm-1)ν2926，1730，1613，1538，1340，817；FAB-MS，m/z405([M+H]+，2.5)，404(M+，2)，389(M+-CH3，1.5)，373(M+-OCH3，1)；Anal.ForC21H12N2O7CalcdC，62.38，H，2.97，N，6.93.FoundC，62.48，H，2.96，N，6.95.
5.Id的合成取0.347克(1.0mmo1)6-硝基-1，1’-联-2-萘酚加入到15毫升甲醇中，加入5毫升二氧六环作为助溶剂，再加入由等摩尔量的乙醇胺与CuCl2·2H2O组成的催化剂，在氧气的存在下50～70℃反应，反应结束后减压蒸去大部分溶剂，加入15毫升稀氨水洗去铜胺络合物，并用乙酸乙酯萃取有机物，所得萃取液浓缩后用柱层析的方法提纯，得到0.339克相应的化合物Id，产率94.5％，熔点168～169℃。1H NMR(500MHz，DMSO-d6/TMS)δ2.73(s，3H)6.33(d，J＝10Hz，1H)，7.30(d，J＝8.5Hz，1H)，7.35(d，J＝7.5Hz，1H)，7.47(d，J＝10Hz，1H)，7.57(dd，J＝8.0Hz，J＝7.5Hz，1H)，7.66(d，J＝9.5Hz，1H)，8.13～8.17(m，2H)，8.32(d，J＝9.0Hz，1H)，9.00(s，1H)；IR(KBr，cm-1)ν2924，1800，1575，1339，812；FAB-MS，m/z360([M+H]+，1)，359(M+，0.8)，344(M+-CH3，2)，328(M+-OCH3，4)，313(M+-NO2，3)；Anal.For C21H13NO5CalcdC，70.19，H，3.62，N，3.90.FoundC，70.25，H，3.64，N，3.92.
6.Ie的合成取0.329克(1.0mmol)3-酰胺基-1，1’-联-2-萘酚加入到15毫升甲醇中，加入5毫升二氧六环作为助溶剂，再加入由等摩尔量的乙醇胺与CuCl2·2H2O组成的催化剂，在氧气的存在下室温反应，反应结束后减压蒸去大部分溶剂，加入15毫升稀氨水洗去铜胺络合物，并用乙酸乙酯萃取有机物，所得萃取液浓缩后用柱层析的方法提纯，得到0.250克相应的化合物Ie，产率，70％，熔点＞320℃，1H NMR(300MHz，DMSO-d6)d8.53(s，1H)，8.13(d，J＝9.0Hz，1H)，7.95(d，J＝9.0Hz，1H)，7.70(2H)，7.56(t，J＝9.0Hz 9.0Hz，1H)，7.52～7.43(m，2H)，7.40(d，J＝10Hz，1H)，7.32(d，J＝7.0Hz，1H)，7.21(d，J＝8.0Hz，1H)，6.16(d，J＝10Hz，1H)，2.82(s，3H)；IR(KBr，cm-1)ν3478，3054，2928，1705，1674，1575，1384，1263，1055，810，750；FAB-MS，m/z(％)358([M+H]+，7).Anal.calcd for C22H15NO4.H2OC 70.40，H 4.53，N 3.73；found C 71.18，H 4.42，N 3.62..
7.If的合成
取0.344克(1.0mmol)3-甲氧酰基-1，1’-联-2-萘酚加入到15毫升甲醇中，加入5毫升二氧六环作为助溶剂，再加入由等摩尔量的乙醇胺与CuCl2·2H2O组成的催化剂，在氧气的存在下室温反应，反应结束后减压蒸去大部分溶剂，加入15毫升稀氨水洗去铜胺络合物，并用乙酸乙酯萃取有机物，所得萃取液浓缩后用柱层析的方法提纯，得到0.342克相应的化合物If，产率92％，熔点124～126℃，1H NMR(300MHz，Acetone-d6)d8.49(s，1H)，8.31～8.04(m，1H)，8.03～8.01(m，1H)，7.57～7.48(m，3H)，7.39(d，J＝10Hz，1H)，7.29(d，J＝7.5Hz，1H)，7.23(dd，J＝8.6Hz，J＝1.0Hz，1H)，6.27(d，J＝10Hz，1H)，3.99(s，3H)，2.81(s，3H)；IR(KBr，cm-1)ν3381，3334，3062，2931，2886，2816，1708，1635，1456，1347，1052，750；FAB-MS，m/z(％)373([M+H]+，30)，341([M-OCH3]+，95)，313([M-CO2CH3]+，25)，282([M-CO2CH3-OCH3]+，43).Anal.calcd for C23H16O5C 74.19，H 4.33；found C 74.56，H 4.49.
8.Ig的合成取0.373克(1.0mmol)3-(N-羟乙基酰胺基)-1，1’-联-2-萘酚加入到15毫升甲醇中，加入5毫升二氧六环作为助溶剂，再加入由等摩尔量的乙醇胺与CuCl2·2H2O组成的催化剂，在氧气的存在下室温反应，反应结束后减压蒸去大部分溶剂，加入15毫升稀氨水洗去铜胺络合物，并用乙酸乙酯萃取有机物，所得萃取液浓缩后用柱层析的方法提纯，得到0.120克相应的化合物Ig，产率30％，熔点156～158℃，1H NMR(500MHz，CD3OD)d8.069(d，J＝9.0Hz，1H)，7.910(d，J＝7.5Hz，1H)，7.486～7.413(m，3H)，7.290(d，J＝10.0Hz，1H)，7.245(d，J＝9.0Hz，1H)，7.204(d，J＝7.0Hz，1H)，6.212(d，J＝10.0Hz，1H)，3.821(t，J＝5.5Hz 5.5Hz，2H)，3.672(dt，J＝7.5Hz，7.5Hz，J＝2.0Hz，2H)，2.820(s，3H)；IR(KBr，cm-1)v3421，3380，3053，2925，1708，1620，1532，1425，1226，1048，756；FAB-MS，m/z(％)401([M]+，3)，371([M-OCH3]+，23)；Anal.calcd for C24H19NO5C 71.81，H 4.77，N 3.49；found C 71.43，H 4.87，N 3.34.
9.Ih的合成取0.373克(1.0mmol)3-(N-羟乙基酰胺基)-1，1’-联-2-萘酚加入到15毫升甲醇中，加入5毫升二氧六环作为助溶剂，再加入由等摩尔量的乙醇胺与CuCl2·2H2O组成的催化剂，在氧气的存在下室温反应，反应结束后减压蒸去大部分溶剂，加入15毫升稀氨水洗去铜胺络合物，并用乙酸乙酯萃取有机物，所得萃取液浓缩后用柱层析的方法提纯，得到0.146克相应的化合物Ig，产率36.3％，熔点158～160℃，1H NMR(500MHz，CD3OD)d8.056(s，1H)，8.041～8.031(m，1H)，7.983(d，J＝8.0Hz，1H)，7.864～7.845(m，1H)，7.531(t，J＝7.0Hz 8.5Hz，1H)，7.427～7.406(m，2H)，7.390～7.372(m，2H)，7.268(dd，J＝8.5HzJ＝1.0Hz，1H)，3.699(dt，J＝7.5Hz 6.5Hz，J＝2.0Hz，2H)，3.542～3.478(m，2H)，2.775(s，3H)；IR(KBr，cm-1)ν3381，3334，3062，2931，2886，2816，1708，1635，1456，1052，750；FAB-MS，m/z(％)401([M]+，3)，370([M-OCH3]+，23).Anal.calcd for C24H19NO5C 71.81，H 4.77，N3.49；found C 71.50，H 4.80，N 3.31.
实施例2 取代二苯并[a，kl]呫吨化合物的体外抗癌试验和细胞毒性试验(MTT比色法)。
以Ia～Ih这八个化合物为例，其中，MCG803为胃癌细胞、HEPG2为肝癌细胞、GLC82为肺癌细胞、CNE-2为鼻咽癌细胞、KB-3-1为口腔上皮癌细胞。
把3×104/mL的细胞株7402接种于96孔培养板中，每孔加入200μL，用10％MEM培养基培养。温箱中培养24h后去掉培养液，加入新配制培养液，并分别加入一系列浓度的待测药物的DMSO溶液，每孔加入200μL，每剂量组设三个平行样本，培养48h后每孔加入2mg/mL的MTT溶液20μL，培养40h。完全吸出孔内培养液，各加入150μL的DMSO，震荡10分钟使结晶物溶解。用酶联检测仪检测各孔OD值(＝490nm)；以OD值对药物浓度的对数作图，从图上求出令半数细胞死亡的药物浓度即IC50。
结果见表1。
表1 抗肿瘤活性测试结果化合物IC50(μg/mL) IC50(μg/mL) IC50(μg/mL) IC50(μg/mL) IC50(μg/mL)(MCG8030) (CNE-2) (HEPG2) (GLC82) (KB-3-1)Ia25.8 ＞100 15.5 24.3__Ib17.4 22.4 11.2 14.2__Ic4.0 5.5 __ __ 5.0Id7.5 9.6 __ __ 8.8Ie4.4 6.4 11.4 6.1 __If17.2 16.7 8.97.1 __Ig6.1 21.5 9.16.2 __Ih28.4 36.1 16.3 23.0__以上实验结果表明，Ia～Ih这八个化合物分别对胃癌细胞(MCG803)、肝癌细胞(HEPG2)、肺癌细胞(GLC82)、鼻咽癌细胞(CNE-2)和口腔上皮癌细胞(KB-3-1)具有明显的抗癌活性。
权利要求
1.取代二苯并[a，kl]呫吨化合物，其结构如(I)式 R1为甲基或乙基；R2和R4为H、CH2OH、CONH2、CONHCH2CH2OH或COOCH3中的任一种；R3和R5为H或NO2中的任一种；R2、R3、R4、R5不同时为H。
2.如权利要求1所述的取代二苯并[a，kl]呫吨化合物，其特征在于所述的化合物为Ia、Ib、Ic、Id、Ie、If、Ig或Ih。
3.权利要求1或2所述的取代二苯并[a，kl]呫吨化合物在制备抗癌药物中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的抗癌为抗胃癌、抗肝癌、抗肺癌、抗鼻咽癌或抗口腔上皮癌。
全文摘要
本发明公开了一类取代二苯并[a，k1]呫吨化合物及其应用。本发明的取代二苯并[a，k1]呫吨化合物具有显著的抗癌活性，其选择性强、毒副作用小且价格低廉，应用前景广阔。
文档编号C07D311/00GK1687055SQ200510034130
公开日2005年10月26日 申请日期2005年4月15日 优先权日2005年4月15日
发明者许遵乐, 冼励坚, 王秀珍, 蒲兴祥, 陈泳, 庞冀燕, 汪波 申请人:中山大学