专利名称：一种五味子醇甲的提取工艺的制作方法
技术领域：
本发明所要保护的技术方案属于提取五味子醇甲工艺的技术领域。
背景技术：
五味子中包括五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子醇乙等多种成分。五味子为中医常用的收敛固涩，益气生津，补肾宁心、止咳镇静的药物。五味子中主要含有挥发油，木脂素等成分，五味子醇甲(schisandrin)是一种藏于五味子中的全天然成分，属于木脂素类固体粉末物质，《中国药典》(2000年版中药一部)规定药用五味子中五味子醇甲的重量含量不低于0.4％。随着纯度的增高，颜色由深变浅，直至白色粉末。通过研究发现并经实验证明五味子醇甲可以用作保健食品的功能添加剂以及药品开发的原料，因此对五味子醇甲提取工艺的研究也越来越迫切，而目前国内外对五味子醇甲的提取方法报道极少。现已知五味子醇甲的提取有以下二种方法一种为化学溶剂提取法，将五味子粉碎，加乙醇浸泡并在恒温水浴上回流数小时，溶液过滤，回收溶剂，即可获得五味子醇甲。以五味子醇甲重量含量在0.4％的五味子原药为例，(以下同)此种方法从五味子原药中提取五味子醇甲的提取率一般在0.2％左右，但是纯度仅在2％左右，颜色为淡褐色。另一种为超临界流体萃取方法，将五味子粉碎后用CO2超临界设备直接进行萃取，即可获得五味子醇甲，其原药中五味子醇甲的提取率接近0.4％，但是纯度也仅在10％左右，颜色为深绿色。同时萃取设备复杂，投资大，操作要求严格，运行成本高。综合以上两种方法，它们共同存在的缺陷在于所得五味子醇甲的纯度都不高。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种具有较高提取率、同时能提高品质纯度、工艺简单经济的五味子醇甲提取方法。
解决上述技术问题的方案是一种五味子醇甲的提取工艺，五味子在经过溶剂法提取后，将含有五味子醇甲的提取液进行萃取，再将含有五味子醇甲的萃取物经过柱层析分离后，将含有五味子醇甲的洗脱液中的洗脱溶剂回收，所得浓缩物即为五味子醇甲。对于原药中五味子醇甲重量含量达到0.4％五味子而言采用上述方法获得五味子醇甲的纯度可达到50％或50％以上，为淡绿色粉末，而且收率不低于0.2％。
上述层析过程中，使用的吸附剂为硅胶粉末，在层析柱中，吸附剂与上样量重量比不小于0.5，较佳的重量比为吸附剂∶上样量＝0.8-1.2∶1；洗脱液为石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂，二者混合的体积比为石油醚∶乙酸乙酯＝10-5∶1，较佳的体积比为8.5-7.5∶1，洗脱收集至无醇甲时，停止洗脱，五味子醇甲包含在洗脱液中。
上述层析过程还可以设定成两道层析过程，即首先将含有五味子醇甲的萃取物，按照萃取物硅胶不大于1.5的重量比添加硅胶混合均匀后，将混合物上层析柱用石油醚进行洗脱，洗脱至石油醚无颜色时，停止洗脱，取出含五味子醇甲的吸附剂部分，将该部分上第二道层析柱，第二道层析柱使用的洗脱液为石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂，二者混合的体积比为石油醚∶乙酸乙酯＝10-5∶1，洗脱收集至无醇甲时，停止洗脱，五味子醇甲包含在洗脱液中里。两道层析柱中的吸附剂为硅胶粉末，在层析柱中，吸附剂与上样量的重量比不小于0.5。这一过程的优化方案是五味子醇甲的萃取物按照萃取物∶硅胶＝0.8-1.2∶1的重量比添加硅胶混合均匀，两次层析按照吸附剂∶上样量＝0.8-1.2∶1的重量比装柱，第二道层析洗脱液为石油醚∶乙酸乙酯＝8.5-7.5∶1的体积比混合而成。
第一道层析洗脱时，由于石油醚的极性低，因此五味子醇甲不易被洗脱而包含在硅胶中，使一些极性低的杂质被洗脱，第二道层析洗脱时，由于洗脱剂中增加了乙酸乙酯，改善了洗脱剂的极性，从而将五味子醇甲洗脱下来。
五味子醇甲的溶剂法提取过程为将五味子粉碎加入乙醇(40％-95％V/V)后进行不少于两次的回流、冷却、过滤；首次回流加入3-4倍五味子重量的乙醇，将冷却、过滤所得药渣再加入2-3倍量的乙醇进行一次或一次以上的回流、冷却、过滤；合并所得的乙醇提取液，回收乙醇，得到浸膏状的五味子醇甲提取物。
将含有五味子醇甲的提取液进行萃取的过程为将五味子提取液与不小于其0.8倍体积的水混合，再加入石油醚，所用石油醚的体积不小于五味子提取液和水混合后的总体积的0.8倍，最好为0.8-1.2倍体积萃取后取其分离水层，将分离出的水层按照初次萃取的方法同样再至少萃取2次合并所得的石油醚提取液，回收石油醚，即可得到五味子醇甲萃取物。
将含有五味子醇甲的洗脱液中的洗脱溶剂回收过程是指将含有五味子醇甲的洗脱液中用水浴等设备通过常压蒸馏法回收，根据石油醚与乙酸乙酯的沸点与醇甲不一样而分别进行蒸馏回收。
经过实验发现硅胶对五味子醇甲的吸附专属性特别强，吸附层的分界尤为明显清晰。此外层析滤出液的其它有用成分损失少，可以作为提取五味子甲素、五味子乙素的原料。
本发明的积极效果体现在1、以原药中五味子醇甲重量含量达到0.4％五味子为例，本发明采用吸附层析法来提取五味子醇甲，具有很高的提取率和纯度，五味子醇甲的提取率最高可接近0.4％，纯度可达到50％以上。2、本发明同时还具有工艺简单经济、五味子醇甲性质稳定优点。3、本发明特别之处是采用硅胶作为吸附剂，它对五味子醇甲的吸附专属性特别强，因此提取的纯度也高，提取后的五味子可作为提取五味子甲素、五味子乙素的原料，经济效益更具显著。
具体实施例方式具体实施方式
1是一种优选的五味子醇甲的提取工艺，其工艺过程如下1、将甘肃产北五味子5000克粉碎到10-30目之间，加入15升的95％V/V的食用乙醇(以下同)，用回流提取罐中回流120分钟，冷却至室温，抽滤，滤液另置。
2、将抽滤所得药渣再加入10升乙醇，回流120分钟，冷却至室温，进行第二次抽滤，滤液另置。
3、将第二次抽滤所得药渣再加入10升乙醇，回流120分钟，冷却至室温，进行第三次抽滤。合并三次所得的无水乙醇滤液，蒸馏回收乙醇，使滤液浓缩得到浸膏状五味子醇甲提取物。
4、将上述浸膏用同重量的蒸馏水混合，混合物中加入与混合物重量相同的沸程为60-90℃上海恒源牌(以下同)石油醚，剧烈振摇30分钟，分离水层。
5、将上述过程4所得的水层加入与过程4重量相同沸程为60-90℃石油醚，剧烈振摇30分钟，分离水层。
6、重复试验步骤5二次，并与实验步骤4和5四次所得的石油醚提取液合并，回收石油醚，即可得到五味子醇甲萃取物150克。
7、首先将含有五味子醇甲的萃取物，按照萃取物∶硅胶＝1∶1的重量比添加硅胶混合均匀后待用。混合物重量为300克。
8、设置2个层析柱，柱高均为30cm，柱径为10cm，吸附剂为青岛海洋牌目数为100目硅胶，硅胶装填量为15cm，重量约合为300克。
9、将步骤7所制得的300克混合物上第1个层析柱，用60-90℃石油醚进行洗脱，洗脱液流速为3ml/分钟洗脱至石油醚无色时，停止洗脱，取出含五味子醇甲的吸附剂部分。该部分吸附剂位于层析柱的上层。
10、将步骤9所制得的五味子醇甲的吸附剂部分上第2个层析柱，洗脱液为石油醚和上海荣润牌乙酸乙酯(的混合溶剂，二者混合的体积比为石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1，洗脱液流速为3ml/分钟洗脱至醇甲出现时开始收集，收集至无醇甲时，收集至无醇甲时(TLC薄层层析鉴别法判定)停止洗脱。取洗脱液，该洗脱液中含有五味子醇甲。
11、将含有五味子醇甲的洗脱液用水浴加热，通过常压蒸馏回收石油醚和乙酸乙酯，到石油醚、乙酸乙酯收集完毕后停止(TLC薄层层析鉴别法判定)，得到五味子醇甲，其性状为淡绿色粉末的结晶粉末。天平称重得重量17.5克。
12、对五味子醇甲进行检验五味子原药中五味子醇甲的重量含量为0.8％，检验方法是利用高效液相色谱法测得五味子。
得到其收率为0.35％。取中国药品生物制品鉴定所提供的五味子醇甲纯品对照品(用于含量测定用)，精密称取五味子醇甲对照品10mg，置50ml容量瓶中，用甲醇稀释到刻度，摇匀。精密取五味子醇甲对照液3ml置10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得作为对照品溶液。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(13∶7)为流动相；检测波长为250nm。理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制造备取五味子醇甲对照品15mg，精密称定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml含五味子醇甲0.3mg)。
供试品溶液的制备取本法所得提取物约30mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇约18ml，超声处理20分钟，取出，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定纯度为55.6％。
具体实施例方式
2本实施方式与具体实施方式
1的不同处在于合并具体实施方式
1中的步骤8、9、10，其它相同，不同处具体为设置1个层析柱，将步骤7所制得的300克混合物上直接上这一个层析柱，洗脱液为石油醚和乙酸乙酯，洗脱至醇甲出现时开始收集，收集至无醇甲时，收集至无醇甲时(TLC薄层层析鉴别法判定)停止洗脱。取洗脱液，该洗脱液中含有五味子醇甲。
按同样方法测得重量19.1g，收率0.38％，纯度48.7％。
权利要求
1.一种五味子醇甲的提取工艺，五味子在经过溶剂法提取后，其特征在于将含有五味子醇甲的提取液进行萃取，将含有五味子醇甲的萃取物经过柱层析分离后，将含有五味子醇甲的洗脱液中的洗脱溶剂回收，所得浓缩物即为五味子醇甲。
2.根据权利要求1所述一种五味子醇甲的提取工艺，其特征在于层析过程中，使用的吸附剂为硅胶粉末，在层析柱中，吸附剂与上样量重量比不小于0.5，洗脱液为石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂，二者混合的体积比为石油醚∶乙酸乙酯＝10-5∶1。
3.根据权利要求2所述一种五味子醇甲的提取工艺，其特征在于吸附剂与上样量的重量比为吸附剂∶上样量＝0.8-1.2∶1；石油醚和乙酸乙酯的体积比为8.5-7.5∶1。
4.根据权利要求1所述一种五味子醇甲的提取工艺，其特征在于层析过程设定成两道层析过程，首先将含有五味子醇甲的萃取物，按照萃取物硅胶不大于1.5的重量比添加硅胶混合均匀后，将混合物上层析柱用石油醚进行洗脱，洗脱至石油醚无颜色时，停止洗脱，取出含五味子醇甲的吸附剂部分，将该部分上第二道层析柱，第二道层析柱使用的洗脱液为石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂，二者混合的体积比为石油醚∶乙酸乙酯＝10-5∶1，两道层析柱中的吸附剂为硅胶粉末，在层析柱中，吸附剂与上样量的重量比不小于0.5。
5.根据权利要求4所述一种五味子醇甲的提取工艺，其特征在于五味子醇甲的萃取物按照萃取物∶硅胶＝0.8-1.2的重量比添加硅胶混合均匀，两次层析按照吸附剂∶上样量＝0.8-1.2∶1的重量比装柱，第二道层析洗脱液为石油醚∶乙酸乙酯＝8.5-7.5∶1的体积比混合而成。
6.根据权利要求1至5任一所述一种五味子醇甲的提取工艺，其特征在于五味子醇甲的溶剂法提取过程为将五味子粉碎加入40％-95％V/V乙醇后进行不少于两次的回流、冷却、过滤；首次回流加入3-4倍五味子重量的乙醇，将冷却、过滤所得药渣再加入2-3倍量的乙醇进行一次或一次以上的回流、冷却、过滤；合并所得的乙醇提取液，回收乙醇，得到浸膏状的五味子醇甲提取物。
7.根据权利要求1至5任一所述一种五味子醇甲的提取工艺，其特征在于将含有五味子醇甲的提取液进行萃取的过程为将五味子提取液与不小于其0.8倍体积的水混合，再加入石油醚，所用石油醚的体积不小于五味子提取液和水混合后的总体积的0.8倍，萃取后取其分离水层，将分离出的水层按照初次萃取的方法同样再至少萃取2次合并所得的石油醚提取液。
8.根据权利要求1至5任一所述一种五味子醇甲的提取工艺，其特征在于将含有五味子醇甲的洗脱液中的洗脱溶剂回收过程是指将含有五味子醇甲的洗脱液中用水浴等设备通过常压蒸馏法回收。
全文摘要
本发明公开了一种五味子醇甲的提取工艺，该工艺为五味子在经过溶剂法提取后，将含有五味子醇甲的提取液进行萃取，其特征在于将含有五味子醇甲的萃取物经过柱层析分离后，将含有五味子醇甲的洗脱液中的洗脱溶剂回收，所得浓缩物即为五味子醇甲。本发明具有五味子醇甲纯度高、收率高、品质稳定、提取工艺简单经济的等特点。
文档编号C07C41/00GK1817839SQ20051005236
公开日2006年8月16日 申请日期2005年2月8日 优先权日2005年2月8日
发明者朱萧俊 申请人:朱萧俊