人g蛋白偶联受体的内源形式和非内源形式的制作方法

专利名称：人g蛋白偶联受体的内源形式和非内源形式的制作方法
技术领域：
本专利申请文件所公开的发明涉及跨膜受体；具体地讲，涉及与人G蛋白偶联的受体，特别是内源人GPCR；尤其强调的是已被改变从而具有或增强了受体的组成性活性的GPCR的非内源形式。优选将该被改变的GPCR用于作为有可能成为治疗剂的受体激动剂、反激动剂或部分激动剂的候选化合物的直接识别。
背景技术：
尽管在人体内有很多种类的受体，但到目前为止最丰富和最与治疗有关的是G蛋白偶联受体(GPCR)。据估计，在人类基因组内有大约100,000个基因，它们中的大约2％即2,000个基因被估计用来编码GPCR。包括GPCR在内，其内源配体己被认识的受体被称为“已知”受体，内源配体尚不知晓的受体被称为“孤儿”受体。GPCR代表着药物产品开发的一个重要领域60％的处方药物开发自100个已知GPCR中的大约20个。
GPCR都具有一个相同的基元(motif)。所有这些受体具有七个由22到24个疏水氨基酸组成的序列，它们组成七个α螺旋，每个α螺旋都跨过膜(每个跨度都以数字表示，例如，跨膜-1(TM-1)、跨膜-2(TM-2)等)。跨膜螺旋通过氨基酸链连接，在细胞膜的外部即“细胞外”一边的氨基酸链分别在跨膜-2和跨膜-3、跨膜-4和跨膜-5、跨膜-6和跨膜-7之间(这些分别被称为“细胞外”区1、2和3(EC-1、EC-2和EC-3))。在细胞膜内部即“细胞内”一边，跨膜螺旋也通过氨基酸链进行连接，这些氨基酸链分别在跨膜-1和跨膜-2、跨膜-3和跨膜-4、跨膜-5和跨膜-6之间(这些分别被称为“细胞内”区1、2和3(IC-1、IC-2和IC-3))。受体的“羧基”(“C”)端是在细胞内的区域，受体的“氨基”(“N”)端在细胞外的区域。
一般来说，当内源配体与受体结合时(经常被称为受体的“活化”)，细胞内区域的构象发生变化，以容许细胞内区域和细胞内“G-蛋白”进行偶联。据报道，GPCR对于G蛋白而言是“混杂的”，也就是说，可与不只一个G蛋白相互作用。参见，Kenakin，T.，43，生命科学(LifeSciences)1095(1988)。尽管存在其他G蛋白，但当前已被识别的G蛋白是Gq、Gs、Gi、Gz和Go。内源配体活化的GPCR与G-蛋白的偶联引发一个信号级联过程(被称为“信号传导”)。在通常情形下，信号传导最终导致细胞活化或细胞抑制。据认为，受体的IC-3环与羧基端都和G蛋白相互作用。
在生理条件下，GPCR存在于细胞膜上，并在“非活化”状态和“活化”状态这两种不同构象之间保持平衡。在非活性状态下的受体不能与细胞内信号传导途径相偶联以产生生物学反应。受体构象向活性状态的转变就使它与传导途径相偶联(通过G-蛋白)并产生生物学反应。
可通过内源配体或化合物如药物将受体稳定在其活性状态。近来的发现提供了除内源配体或药物之外能够促进和稳定受体到活性状态构象的方法，这包括但不限于对受体的氨基酸序列的修饰。这些方法通过模仿与受体结合的内源配体的作用来有效地稳定活性状态的受体。通过如此的配体非依赖性方法形成的稳定被称为“组成型受体活化”。
发明概述这里公开的是人GPCR的内源和非内源形式及其应用。
附图的简要描述

图1显示了在与对照(“CMV”)相比下内源形式的RUP12(‘RUP12’)产生的第二信使IP3。
图2是基于细胞的第二信使环AMP分析结果的图形，显示内源形式RUP13(“RUP13”)与对照载体(“CMV”)的组成型信号发送的比较结果。
图3是比较CMV、内源形式RUP13(“RUP13wt”)和非内源形式组成型活化的RUP13(“RUP13(A268K)”)信号测量结果的图示，其中使用以8XCRE-Luc报告质粒。
图4是[35S]GTPγS分，析结果的示意图，显示RUP13Gs融合蛋白(“RUP13-Gs”)和对照载体(“CMV”)的组成型信号发送的比较结果。
图5是比较CMV、内源形式RUP14(“RUP14wt”)和非内源形式组成型活化的RUP13(“RUP14(L246K)”)信号测量结果的图示，其中使用8XCRE-Luc报告质粒。
图6是比较CMV、内源形式RUP15(“RUP15wt”)和非内源形式组成型活化的RUP15(“RUP15(A398K)”)信号测量结果的图示，其中使用8XCRE-Luc报告质粒。
图7是基于细胞的第二信使环AMP分析结果的图形，显示内源形式RUP15(“RUP15wt”)、非内源形式组成型活化的RUP15(“RUP15(A398K)”)与对照载体(“CMV”)的组成型信号发送的比较结果。
图8是[35S]GTPγS分析结果的示意图，显示RUP15Gs融合蛋白(“RUP15-Gs”)和对照载体(“CMV”)的组成型信号发送的比较结果。
图9显示与对照(“CMV”)相比之下内源形式的RUP17(“RUP17”)中产生的第二信使IP3。
图10显示与对照(“CMV”)相比之下内源形式的RUP21(“RUP21”)中产生的第二信使IP3。
图11是比较CMV、内源形式RUP23(“RUP23wt”)和非内源形式组成型活化的RUP23(“RUP23(W275K)”)信号测量结果的图示，其中使用8XCRE-Luc报告质粒。
图12是几种针对RUP13的侯选化合物的初步筛选结果示意图；孔A2中提供了“化合物A”的结果，孔G9中提供了“化合物B”的结果。
详细描述本科学文献涉及受体并采用一些术语来描述对受体具有不同作用的配体。为了清楚和前后一致，在本发明文献中将由始至终使用下列定义。在这些定义与这些词语的其他定义冲突时，选择下列定义激动剂 意味着激活细胞内反应的物质(例如，配体、候选化合物)，此时它们结合受体或促进GTP与膜结合。
在此应用的氨基酸缩写列于下表A表A
部分激动剂 意味着这样的物质(例如，配体、候选化合物)，它们与受体结合时，激活细胞内反应或者促进GTP与膜结合的程度低于激动剂。
拮抗剂 意味着这样的物质(例如，配体、候选化合物)，它和激动剂在同一位点与受体竞争性地结合，但不激活由受体的活性形式引起的细胞内反应，并可因此抑制由激动剂或部分激动剂促进的细胞内反应。拮抗剂在没有激动剂或部分激动剂的情形下并不削弱基本细胞内反应。
候选化合物 意味着一个将经受筛选技术检验的分子(例如但不限于化学化合物)。优选的“候选化合物”并不包括对公众来说已知选自受体的反激动剂、激动剂或拮抗剂的化合物，它们以前已通过非直接的识别方法被确定(“非直接识别的化合物”)；更优选不包括先前已经确定至少在一种哺乳动物中具有治疗效果的已被非直接识别的化合物；并且，最优选不包括先前已经确定的在人体中具有治疗用途的已被非直接识别的化合物。
组合物 是指至少包含一种成分的物质；药物组合物即是组合物的一个例子。
化合物效应 意味着一个化合物抑制或者刺激受体功能的能力的量度，它与受体结合亲和力相对。测定化合物效应的典型方法在本专利申请的实施例部分中进一步公开。
密码子 是指三个一组的核苷酸(或与核苷酸相当的词)，核苷酸通常由一个核苷(腺苷(A)、鸟苷(G)、胞苷(C)、尿苷(U)和胸苷(T))偶联一个磷酸基团组成，翻译时一个密码子编码一个氨基酸。
被组成型活化的受体 意味着易受组成型受体活化的受体。被组成型活化的受体可以是内源的也可以是非内源的。
组成型受体活化 意味着不利用它的内源配体或其化学等价物与受体结合的方法而使在活性状态下的受体稳定。
接触 意味着把至少两部分放在一起，无论是在体外系统还是在体内系统中。
直接识别或被直接识别，与术语“候选化合物”相联系，意味着筛选针对组成型活化的受体、优选针对组成型活化的孤儿受体、最优选针对组成型活化的与G蛋白偶联的细胞表面孤儿受体的候选化合物。本术语在任何情形下都不应被解释或被理解为被包括或包括术语“非直接地识别”或“非直接地被识别”。
内源 意味着由哺乳动物天然产生的物质。这些只作为例证但却不是限制。与之相对比，术语“非内源”在本文中意味着不是由哺乳动物(例如但不限于人)或病毒天然产生的。相反，本文中术语“非内源”意味着并非由哺乳动物(例如但不限于人)或病毒天然产生的物质。例如，在其内源形式下并非组成型活化的受体，当对之进行操作而使之组成型活化时，此受体被最优选地指称为“非内源的被组成型活化的受体”，这只作为例证而不是限制。两个用语都可被用来描述“体内”和“体外”系统。例如，在筛选过程中，内源的或非内源的受体可被用于体外筛选系统，这也只作为例证而不是限制。作为进一步的例子而不是限制，当操作哺乳动物的基因组以包括非内源组成型活化受体时，可以通过体内系统筛选候选化合物。
在本文的上下文中，“G蛋白偶联受体融合蛋白”和“GPCR融合蛋白”是指包含着内源的组成型活化的GPCR的非内源蛋白，或与至少一个G蛋白、优选G蛋白的α亚基(它是与GTP结合的亚基)融合的非内源组成型活化的GPCR，其中的G蛋白的类型优选与在天然情况下和内源孤儿GPCR偶联的G蛋白的类型是一致的。例如(但不限制)，在内源状态，如果G蛋白“Gsα”是与GPCR偶联的主要的G蛋白，基于这一具体GPCR的GPCR融合蛋白就是包含与Gsα融合的GPCR的非内源蛋白。在某些情况下，正如下文将要描述的那样，非主要的G蛋白也可以和GPCR融合。G蛋白与组成型活化的GPCR的C末端可直接融合，也可在其两者之间存在间隔子。
宿主细胞 意味着能在其中插入质粒和/或载体的细胞。在原核宿主细胞情形下，当宿主细胞复制时质粒典型地以自主分子方式复制(在一般情况下，质粒在复制后被分离出来以被引入真核宿主细胞中)；在真核宿主细胞情形下，质粒被整合进宿主细胞的细胞DNA中，因而，当真核细胞复制时，质粒复制。为在此公开的本发明的目的，宿主细胞优选是真核细胞，更优选是哺乳动物细胞，最优选地是从293、293T和COS-7细胞中选择出来的细胞。
非直接地识别或非直接地被识别 意味着发现药物的传统方法，该方法涉及对内源受体特异的内源配体的识别、筛选针对受体的候选化合物、确定那些干扰或竞争配体-受体相互反应的化合物、测量化合物对至少一个与活化受体相关的第二信使途径影响的效率。
抑制，与用语“反应”相联系，意味着在一个化合物存在时一个反应被降低或阻止，这正好与该化合物不存在时相反。
反激动剂 意味着这样的物质(例如，配体、候选化合物)，它们与内源受体或受体的组成型活化形式结合，并且将由受体的活性形式引发的基本细胞内反应抑制到正常基础水平以下，该活性水平是在没有激动剂或部分激动剂的情况下观察的，或者它们降低GTP与膜的结合。与在没有反激动剂情况下的基本反应相比，基本细胞内反应在反激动剂的存在下优选被抑制至少30％、更优选至少50％、最优选至少75％。。
已知受体 意味着其特异的内源配体已被识别的内源受体。
配体 意味着对内源的天然产生的受体特异的内源的天然产生的分子。
关于内源受体的核苷酸和/或氨基酸序列的突变 意味着这些内源序列的特定改造，从而使内源的非组成型活化受体的突变型能造成受体的组成型活化。对于特定序列的等价物，人受体的后续突变型被认为是人受体的首次突变的等价物，如果(a)后续突变型受体的组成型活化水平与受体的首次突变所表明的在本质上一样；和(b)在后续突变型受体和受体的首次突变之间的序列同源性的百分数是至少80％，更优选地是至少90％，最优选地是至少95％。在理想的情况下，考虑到在此公开的用于进行组成型活化的最优选的盒包括在内源和非内源型GPCR之间发生变化的单一氨基酸和/或密码子，序列同源性的百分数应是至少98％。
非孤儿受体 是指天然存在的内源分子，对天然存在的内源配体表现出特异性，配体与受体的结合使胞内信号途经得以活化。
孤儿受体 意味着这样的内源受体，其特异的内源配体尚未被识别或尚未知。
药物组合物 意味着包括至少一种活性成分的组合物，借助此活性成分可以研究该组合物可在哺乳动物(例如但不限于人体)中特定的效果。本领域的那些普通技术人员将能够理解和正确评价那些适于确定活性成分是否具有基于技术人员需要的预期效果的技术。
质粒 意味着载体和cDNA的结合体。一般，为cDNA复制和/或表达蛋白质的目的将质粒引进宿主细胞。
第二信使意味着受体激活所产生的细胞内应答。例如，第二信使包括三磷酸肌醇(IP3)，二酰甘油(DAG)，环AMP(cAMP)，和环GMP(cGMP)。对第二信使应答的检测可以确定是否存在受体活化。此外，对第二信使应答的检测可以直接识别侯选化合物，例如包括反激动剂，激动剂，部分激动剂和拮抗剂。
刺激，与术语“反应”相联系，意味着当一种化合物存在时比当它不存在时反应增强。
针对cDNA的载体 意味着能够将至少一个cDNA掺入其中且能导入到宿主细胞中的环形DNA。
下面部分的顺序安排是为了表达效果，而不能被解释为对下面的公开或权利要求的限制。
A.引言受体的传统研究一直是基于这样的前置假定(基于历史)，即内源配体必须首先被识别，然后才能发现可以作用于受体的拮抗剂和其他分子。甚至在拮抗剂被首先发现的情况下，搜索的目光也立即延伸到查找内源配体上去。即使在发现组成型活化受体之后，这种思维模式也一直在受体研究中持续。在此之前没有被认识到的是，是受体的活性状态对发现受体的激动剂、部分激动剂和反激动剂是最有用的。对于那些因为受体的过度活化和不够活化而导致的疾病来说，希望得到的治疗药物是能分别用来减少受体的活性状态或增强受体活性的化合物，而并不需要是对抗内源配体的拮抗剂。这是因为，一个降低或增强活化态受体活性的化合物并不需要结合在和内源配体一样的位点上。因而，正如本发明的一个方法所说的那样，对治疗性化合物的任何搜索可通过筛选针对配体非依赖性活性态的化合物而开始。
B.人GPCR的识别人类基因组计划的实施导致位于人类基因组内有关核酸序列的大量信息的识别，经过这种努力，事实上，我们无需了解或认识任何特定的基因组序列是否包含翻译人类蛋白的可读框信息，即可获得遗传序列信息，几种识别人类基因组中核酸序列的方法都是本领域普通技术人员所熟悉的，比如(但不限定)，此处公开的大量人类GPCR，即是通过回顾GenBankTM数据库而发现的。下面的表B，列出了几个被我们发现的内源GPCR，以及与所公开的GPCR同源的其他GPCR。
表B
受体同源性对于进一步了解受体在人体中的作用是有用的，在本专利申请文件的下文中，我们将公开使这些受体产生突变的技术，以便建立这些受体的非内源组成型活化的形式。
此处公开的这些技术还已经应用到本领域已知的人其他的孤儿GPCR，随着本专利申请文件的进一步描述，该技术会更加明显。
C.受体筛选筛选出对应于此处公开的人GPCR的非内源组成型活化形式的候选化合物，可直接识别在这个细胞表面受体上起作用的候选化合物，而不需要使用受体的内源配体。利用常规的、经常是商业可得的技术，可以确定此处公开的人GPCR的内源形式在体内表达和/或过表达的区域。也有可能利用这些技术确定与受体表达和/或过表达关联的相关疾病/紊乱，这种方法在本专利申请文件中得以公开。
制造可以证明此处公开的人GPCR组成型活化的突变的技术，是基于与脯氨酸残基的距离，据估计此残基位于GPCR的TM6内部，这一算法规则公开在2000年4月20日以WO00/22129公布的普通转让的审查未决的PCT申请PCT/US99/23938中，该申请和其它此处罗列的专利文献一并引入此文作参考。该算法规则不是依据传统的序列比对来预测，而是依据与上述TM6脯氨酸残基(或也可能是这种脯氨酸残基的内源组成型替代物)的特定距离。通过使距该残基(估计位于受体的IC3区)16个氨基酸残基处的氨基酸残基发生突变，最好是突变为赖氨酸，可以获得这种活化。其他氨基酸在此位置上的突变可用来达到此目的。
D.疾病/紊乱识别和/或选择正如下文将要详细描述的，最优选用本发明的方法识别针对非内源的组成型活化的GPCR的反激动剂和激动剂。如此的反激动剂和激动剂是治疗与这些受体有关的疾病的药物探索中先导化合物的理想候选者。因为可直接识别针对这些受体的反激动剂，因此有可能开发和搜索针对与这些受体有关的疾病和紊乱的药物组合物。例如，检查患病和正常组织样品中这些GPCR的存在，现在不仅仅是学术研究的问题，也是在识别特定GPCR的内源配体的研究道路上所致力解决的问题。可在健康和患病组织的宽广范围内进行组织检查。如此的组织检查提供了把特异受体与疾病/紊乱相联系的优选第一步骤。
优选人GPCR的DNA序列被用来制作探针，用于进行(a)针对组织mRNA的斑点印迹和(b)组织样品中所述受体表达的RT-PCR识别。在组织或疾病组织中受体的存在，或者与正常组织相比在疾病组织中受体的浓度提高，可被优选地用来识别治疗方法(包括但不限于)与那种疾病的关联。用这种方法也可很好地把受体定位于器官的区域。基于受体被定位于其中的特定组织的己知功能，受体假想的功能性角色可被推导出来。
E.候选化合物的筛选1.一般的GPCR筛选测定技术当一种G蛋白受体变为组成型活化时，它与G蛋白(例如，Gq、Gs、Gi、Gz、Go)偶联并刺激GTP与G蛋白结合。接着，借助受体在正常情况下失活，G蛋白作为GTP酶慢慢地把GTP水解为GDP，然而，组成型活化的受体继续把GDP转化为GTP。GTP不可水解的类似物[35S]GTPγS，可被用来监测与表达组成型活化受体的膜的结合。据报道，[35S]GTPγS可被用来监测在配体存在或不存在的情形下G蛋白与膜的偶联。在本领域中著名和可行的其他例证中有此种监测的一个例证，它由Traynor和Nahorski在1995年所报道。本测定系统的一个优选的应用是为了初步筛选候选化合物，因为本系统对所有蛋白-偶联受体一般可行，而不考虑与受体的细胞内结构域相互作用的那一种特别的G蛋白。
2.特定的GPCR筛选测定技术一旦应用“一般”G蛋白偶联的受体测定方法(即筛选是激动剂、部分激动剂或反激动剂的化合物的方法)识别出候选化合物，优选进一步筛选以确认作用在受体位点的化合物。例如，应用“一般”测定方法识别的化合物可以不与受体结合，但也可以仅仅从细胞内结构域与G蛋白“解偶联”。
a.Gs，Gz和GiGs刺激腺苷酸环化酶。另一方面，Gi(和Gz和Go)抑制该酶。腺苷酸环化酶催化ATP向cAMP的转化；因此，与Gs蛋白偶联的组成型活化的GPCR与升高的细胞内cAMP水平相关联。在另一方面，与Gi(和Gz或Go)蛋白偶联的组成型活化的GPCR与降低的细胞内cAMP水平相关联。一般情况参见“突触传导的非直接机制(IndirectMechanisms of Synaptic Transmission)”，第8章，从神经到大脑(FromNeuron To Brain)(第三版)，Nichols，J.G.等编，Sinauer Associates，Inc.(1992)。因此，检测cAMP的方法可被用来确定一个竞争性的化合物是否是受体的反激动剂(即这样的一个化合物将能降低cAMP的水平)等。本领域已知的测定cAMP的不同方法可以被利用；最优选的方法依赖于在基于ELISA的方法中应用抗-cAMP的抗体。可被应用的另一类测定方法是一种全细胞第二信使报告基因系统测定法。基因上的启动子驱动由一个特别的基因所编码的蛋白质的表达。环AMP通过以下步骤促进基因的表达，即它响应促进cAMP的DNA结合蛋白或转录因子(CREB)的结合，转录因子接着在被称为cAMP效应元件的特别位点与启动子结合并驱动基因表达。报告基因系统可被构建为具有一个启动子，该启动子在报告基因的前面含有多个cAMP效应元件，例如β-半乳糖苷酶或荧光素酶。因而，一个被组成型活化的连接Gs的受体引起cAMP的积累，cAMP接着激活报告蛋白质的基因和表达。β-半乳糖苷酶或荧光素酶等报告蛋白质可用标准生化方法检测到(Chen等，1995)。
b.Go和GqGo和Gq与磷脂酶C的活化相联系，磷脂酶随后水解磷酸酯PIP2，并释放两种细胞内信使二酰甘油(DAG)和肌醇-1，4，5-三磷酸(IP3)。积累增加的IP3与Gq-和Go-关联的受体相关联。一般情况参见“突触传导的非直接机制(Indirect Mechanisms of Synaptic Transmission)”，第8章，从神经到大脑(From Neuron To Brain)(第三版)，Nichols，J.G.等编，Sinauer Associates，Inc.(1992)。测定IP3积累的方法可被用来确定一个候选化合物是否是例如针对Gq-或Go-关联受体等的反激动剂(即如此的化合物能降低IP3的水平)。Gq关联受体也可用AP1报告基因测定方法来检测，因为Gq依赖的磷脂酶C引起含有AP1元件的基因活化；因而，活化的Gq关联受体将导致如此基因的表达增高，而其反激动剂将导致如此表达的降低，激动剂将导致如此表达的升高。进行如此测定的商业可得的方法是可得的。
3.GPCR融合蛋白内源组成型活化的孤儿GPCR或非内源组成型活化的孤儿GPCR，用于筛选候选化合物，直接识别反激动剂、激动剂和部分激动剂，提出了一个有意思的筛选难题，确切地说，在没有内源配体结合的情况下，受体仍有活性。因此，为了区分候选化合物存在或不存在时的非内源受体，这种区分的目的是要了解这种化合物是否是所述受体的反激动剂、激动剂、部分激动剂或对该受体根本没有影响，最好的办法就是加强这种差异，使用GPCR融合蛋白就是这样一种方法。
一般来讲，应用上述分析技术(还有其它的技术)一旦确定非内源孤儿GPCR为组成型活化的，就可能确定与内源GPCR偶联的优势G蛋白，G蛋白与GPCR的偶联提供了可被估计的信号途径。因为最好是使用哺乳动物表达系统进行筛选，就希望在这个系统中有内源G蛋白存在，确切来说，非内源组成型活化的孤儿GPCR在这个系统中持续产生信号。从这点上，优选使信号得到加强，从而在(例如)受体的反激动剂存在时，很可能更方便地区分与反激动剂接触的不同受体，特别是在筛选的整个过程中。
GPCR融合蛋白的作用是增加G蛋白与非内源GPCR偶联的效应，GPCR融合蛋白优选用于筛选非内源组成型活化的GPCR，因为这种方法增强对这样的筛选技术非常有用的信号，重要的是有助于产生很大的“信噪”比，这种大信噪比对筛选此处公开的候选化合物是特别优选的。
用于GPCR融合蛋白表达的构建体的构建技术是本领域普通技术人员所熟悉，商业可获得的表达载体和系统为实验者提供了各种可以满足特殊需要的方法，这种GPCR融合蛋白构建体重要的衡量标准，就是内源GPCR序列与G蛋白序列都符合读框(最好是，内源GPCR的序列位于G蛋白序列上游)，以及必须去除或替代GPCR的“终止”密码子，从而随着GPCR的表达，G蛋白也能表达。GPCR可以直接连到G蛋白上，或在两者之间存在间隔残基(最好不超过12个，虽然本领域的普通技术人员可以很方便得知这一数字)。我们喜欢使用间隔子(基于方便)，表达中不被有效利用的限制位点组成了间隔子。在制造GPCR融合蛋白构建体之前，优选首先确认与非内源GPCR偶联的G蛋白，因为只有很少的G蛋白已被识别，所以优选包含G蛋白序列(如通用G蛋白构建体)的构建体可在其中插入内源GPCR序列，这样可有效地大规模筛选大量具有不同序列的内源GPCR。
如上所述，预计与Gi、Gz和Go偶联的组成型活化GPCR抑制cAMP的形成，这就需要人们找到基于这些类型GPCR的分析方法(如，cAMP信号随活化降低，这样使得直接识别(例如)反激动剂(进一步减弱这种信号)更加有趣，正如本文所公开的，我们已经证实，对于这些类型的受体，有可能制造不基于内源GPCR的内源G蛋白的GPCR融合蛋白，尽力建立可行的以环化酶为基础的分析方法。举例来说，内源Gi偶联受体可以与Gs蛋白融合-我们相信这样的融合构建体在表达时，“驱动”或“推动”内源GPCR与如Gs而不是“天然”的Gi蛋白偶联，从而能够建立以环化酶为基础的分析方法。对与Gi、Gz、Go偶联的受体，当使用GPCR融合蛋白并且分析是以腺苷酸环化酶活性测定为基础时，我们优选用Gs(或刺激腺苷酸环化酶形成的G蛋白类似物)来建立融合构建体。
Gq蛋白与Gs、Gi、Gz或Go蛋白融合的G蛋白融合构建体也同样有效。更优选的是Gq蛋白缺失G蛋白α亚单位(“Gαq”)的前六个氨基酸，并且Gαq的C末端后五个氨基酸被目的G蛋白α亚单位的相应氨基酸替代所获得的融合构建体。例如，融合构建体可能是Gq(缺失6个氨基酸)和Gi蛋白的融合，产生“Gq/Gi融合构建体”。我们相信该融合构建体可以推动内源Gi偶联受体与其非内源G蛋白-Gq偶联，从而可对第二信使(例如，三磷酸肌醇或二酰甘油)而非cAMP的产生进行检测。
4.与靶Gi偶联的GPCR和与信号增强子Gs偶联的GPCR共转染(基于cAMP的分析)已知Gi偶联的受体抑制腺苷酸环化酶，并因此降低cAMP的产量，这导致难以评估cAMP的水平。检测作为在激活时主要偶联Gi的受体组成型活化指示的cAMP产量的降低可以通过偶联GPCR的Gi与一个信号增强子(如在激活时主要偶联Gs的非内源性组成型活化受体，如以下公布的TSHR-A623I)共转染得以实现。显然，Gs偶联受体的组成型活化可基于cAMP产量的增加而判定。Gi偶联受体的组成型活化导致cAMP的产量降低。因此，这种共转染的方法意在有效地利用这些“相对立”的效果。例如，Gs偶联的非内源组成型活化受体(“信号增强子”)和内源性Gi偶联受体(“靶受体”)共转染提供了基本的cAMP信号(即，尽管Gi偶联的受体降低cAMP的水平，但这种降低的效果与组成型活化的Gs偶联的信号增强子所导致cAMP的显著增加相关联)。从而，通过信号增强子与组成型活化的靶受体共转染，Gi靶的活性增加(即，降低cAMP水平)，预计cAMP水平将进一步降低(相对于基本水平)。
然后，利用基于cAMP的分析对侯选化合物进行分析将成为可能，但有两个限制性条件首先相对于Gi偶联的靶受体，可产生“相反”的效应，即，Gi偶联靶受体的反激动剂将增强被测定的cAMP信号，而Gi偶联靶受体的激动剂将降低该信号；第二，在以下也会表现，利用这种方法直接识别的侯选化合物应单独地评估，以确保其对信号增强性受体无靶向作用(这可在针对共转染受体进行筛选之前或以后进行)。
F.药物化学在一般但并非经常的情况下对候选化合物直接识别与通过组合化学技术产生的化合物联合使用，其中随机制备几千种化合物用于此分析。如此筛选的结果一般将是具有独特中心结构的化合物；其后，这些化合物围绕着一个优选的中心结构而被优选进行额外的化学修饰，以进一步加强其药用性质。这样的技术在该领域中是已知的，并不需要在本专利文件中详细描述。
G.药物组合物为进一步开发而选择出的候选化合物可应用本领域周知的技术制剂成药物组合物。适宜的药物可接受的载体在本领域中是可得的；例如，参见Remington’s Pharmaceuctical Sciences，第16版，1980，MackPublishing Co.(Oslo等编)。
H.其他应用尽管公开的非内源人GPCR的一个优选的应用是为了直接识别作为反激动剂、激动剂或部分激动剂(优选地作为药物使用)的候选化合物，人GPCR的这些形式也可被用于研究之用。例如，带有GPCR的体外或体内系统可被用来阐释和理解这些受体在正常和患病的人体状况中的作用，也可理解当它应用于理解信号级联反应时组成型活化的角色。这些非内源的人GPCR的价值由于其独特的特点是它们作为研究工具的用途被强化，公开的受体可被用来理解这些受体在人体中的作用，即使在其内源配体被识别之前。公开的受体的其他应用对于本领域的技术人员将是明显的，特别是当他们阅读了本申请文件之后。
实施例下面提供的实施例，目的是要阐明而不是限制本发明。特异的核酸序列和氨基酸序列在此公开时，本领域的普通技术人员能够对这些序列进行较小的修饰，并且得到与下面报告的相同或基本相似的结果。使用或了解一个又一个序列框(如从鼠的受体到人的受体或从人的受体A到人的受体B)的传统方式一般是基于序列对比技术，通过把序列排列对比来尽量确定共同的区域。此处公开的突变方法不依赖于这种方式，而是基于算法规则和与位于人GPCR TM6区中保守脯氨酸残基相隔的位置距离。一但这种方式可靠，相信本领域的普通技术人员能够进行较小修饰以便得到与此处公开的基本相同的结果(如组成型活化)。认为这些修饰均在本公开的范围内。实施例1内源人GPCR1人GPCR的识别在浏览GenBankTM数据库信息的基础上，识别了一些已公开的内源人GPCR。在检索数据库的同时，下列cDNA克隆也得以识别，列表如下(表C)。
表C
2.全长克隆a.hRUP8(Seq.Id.Nos.1&2)公布的人RUP8通过使用EST数据库信息(dbEST)得以识别。在dbEST中搜索时发现一个入藏号为AL121755的cDNA克隆编码一个新的GPCR。以下的PCR引物用于以人睾丸Marathon-Ready cDNA(Clontech)为模板的RT-PCR克隆5’-CTTGCAGACATCACCATGGCAGCC-3’(SEQ.ID.NO.41；正义)和5’-GTGATGCTCTGAGTACTGGACTGG-3’(SEQ.ID.NO.42；反义)用Advantage cDNA多聚酶(Clontech；按商家说明进行操作)在50μl反应液中进行PCR，程序为
94℃30秒；94℃10秒；65℃20秒，72℃1.5分钟，72℃7分钟，从第二步到第四步循环35次。
分离出一个1.2kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Terminator试剂盒(P.E.Biosystem)测序。见SEQ.ID.NO.1，可能的RUP8氨基酸序列在SEQ.ID.NO.2中表现。
b.hRUP9(Seq.Id.Nos.3&4)公布的人RUP9基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC011375的cDNA克隆来自5号染色体的人基因组序列。该全长RUP9通过以下引物进行PCR克隆5’-GAAGCTGTGAAGAGTGATGC-3’(SEQ.ID.NO.43；正义)和5’-GTCAGCAATATTGATAAGCAGCAG-3’(SEQ.ID.NO.44；反义)，并以人基因组DNA(Promega)作为模板。使用Taq Plus Precision多聚酶(Stratagene)在含有5％DMSO的100μl反应液中扩增。程序为94℃1分钟；94℃30秒；56℃30秒；72℃2分钟；72℃5分钟，从第二步到第四步循环35次。
从1％的琼脂糖凝胶中分离1.3kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Terminator试剂盒(P.E.Biosystem)完全测序。见SEQ.ID.NO.3，可能的RUP8氨基酸序列在SEQ.ID.NO.4中表现。从人基因组DNA分离的RUP9克隆的序列与从信息库中所获序列相符。
c.hRUP10(Seq.Id.Nos.5&6)公布的人RUP10基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC008754的cDNA克隆为来自19号染色体的人基因组序列。该全长RUP10通过以下引物进行PCR克隆
5’-CCATGGGGAACGATTCTGTCAGCTACG-3’(SEQ.ID.NO.45；正义)和5’-GCTATGCCTGAAGCCAGTCTTGTG-3’(SEQ.ID.NO.46；反义)，并以人白细胞Marathon-Ready cDNA(Clontech)为模板。用Advantage cDNA多聚酶(Clontech)在50μl反应液中进行PCR。程序为94℃30秒；94℃10秒；62℃20秒，72℃1.5分钟，72℃7分钟，从第二步到第四步循环35次。分离出1.0kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Terminator试剂盒(P.E.Biosystem)测序。这种新的人受体RUP10的核酸序列在SEQ.ID.NO.5中进行阐明，其可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.6。
d.hRUP11(Seq.Id.Nos.7&8)公布的人RUP11基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC013396的cDNA克隆为来自2号染色体的人基因组序列。该全长RUP11克隆通过以下引物进行PCR克隆5’-CCAGGATGTTGTGTCACCGTGGTGGC-3’(SEQ.ID.NO.47；正义)和5’-CACAGCGCTGCAGCCCTGCAGCTGGC-3’(SEQ.ID.NO.48；反义)，并以人基因组DNA(Clontech)为模板。使用TaqPlus Precision DNA多聚酶(Stratagene)在50μl反应液中扩增。程序为94℃3分钟；94℃20秒；67℃20秒；72℃1.5分钟；72℃7分钟，从第二步到第四步循环35次。分离出1.3kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Terminator试剂盒(P.E.Biosystem)测序。这种新的人受体RUP11的核酸序列在SEQ.ID.NO.7中进行阐明，其可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.8。
e.hRUP12(Seq.Id.Nos.9&10)公布的人RUP12基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AP000808的cDNA克隆编码一个新的GPCR，其具有与大鼠RTA和人mas1癌基因GPCR的显著同源性。该全长RUP12通过以下引物进行PCR克隆5’-CTTCCTCTCGTAGGGATGAACCAGAC-3’(SEQ.ID.NO.49；正义)和5’-CTCGCACAGGTGGGAAGCACCTGTGG-3’(SEQ.ID.NO.50；反义)，并以人基因组cDNA(Clontech)为模板。使用TaqPlus PrecisionDNA多聚酶(Stratagene)扩增。程序为94℃3分钟；94℃20秒；65℃20秒；72℃2分钟；72℃7分钟，从第二步到第四步循环35次。分离出1.0kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Terminator试剂盒(P.E.Biosystem)完全测序(其核苷酸序列在SEQ.ID.NO.9中进行阐明，其可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.10)。
f.hRUP13(Seq.Id.Nos.11&12)公布的人RUP13基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC011780的cDNA克隆编码一个新的GPCR，其具有与GPCR鱼GPRX-ORYLA的显著同源性。该全长RUP13通过以下引物进行PCR克隆5’-GCCTGTGACAGGAGGTACCCTGG-3’(SEQ.ID.NO.51；正义)和5’-CATATCCCTCCGAGTGTCCAGCGGC-3’(SEQ.ID.NO.52；反义)，并以人基因组cDNA(Clontech)为模板。使用TaqPlus PrecisionDNA多聚酶(Stratagene)扩增。程序为94℃3分钟；94℃20秒；65℃20秒；72℃2分钟；72℃7分钟，从第二步到第四步循环35次。分离出1.35kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Terminator试剂盒(P.E.Biosystem)完全测序(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.11，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.12)。
g.hRUP14(Seq.Id.Nos.13&14)公布的人RUP14基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AL137118的cDNA克隆为来自第13号染色体的人基因组序列。该全长RUPl4通过以下引物进行PCR克隆5’-GCATGGAGAGAAAATTTATGTCCTTGCAACC-3’(SEQ.ID.NO.53；正义)和5’-CAAGAACAGGTCTCATCTAAGAGCTCC-3’(SEQ.ID.NO.54；反义)，并以人基因组DNA(Promega)为模板。使用TaqPlus Precision多聚酶(Stratagene)和5％DMSO扩增。程序为94℃3分钟；94℃20秒；58℃2分钟；72℃10分钟，从第二步到第三步循环35次。
分离出1.1kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Terminator试剂盒(P.E.Biosystem)测序。(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.13，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.14。)从人基因组DNA中分离的RUP14克隆序列与从信息库中获得的序列相符。
h.hRUP15(Seq.Id.Nos.15&16)公布的人RUP15基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC016468的cDNA克隆为人基因组序列。该全长RUP15通过以下引物进行PCR克隆5’-GCTGTTGCCATGACGTCCACCTGCAC-3’(SEQ.ID.NO.55；正义)和5’-GGACAGTTCAAGGTTTGCCTTAGAAC-3’(SEQ.ID.NO.56；反义)，并以人基因组DNA(Promega)为模板。使用TaqPlus Precision多聚酶(Stratagene)扩增。程序为94℃3分钟；94℃20秒；65℃20秒；72℃2分钟；72℃7分钟，从第二步到第四步循环35次。
分离出1.5kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Terminator试剂盒(P.E.Biosystem)完全测序。(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.15，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.16。)从人基因组DNA中分离的RUP15克隆序列与从信息库中获得的序列相符。
i.hRUP16(Seq.Id.Nos.17&18)公布的人RUP16基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AL136106的cDNA克隆为来自第13号染色体的人基因组序列。该全长RUP16通过以下引物进行PCR克隆5’-CTTTCGATACTGCTCCTATGCTC-3’(SEQ.ID.NO.57；正义，启始密码子的5’端)和5’-GTAGTCCACTGAAAGTCCAGTGATCC-3’(SEQ.ID.NO.58；反义，终止密码子的3’端)，并以人骨骼肌Marathon-Ready cDNA(Clontech)为模板。用Advantage cDNA多聚酶试剂盒在50μl反应液中进行PCR(Clontech)。程序为94℃30秒；94℃5秒；69℃15秒；72℃1分钟；72℃5分钟，从第二步到第四步循环35次。
分离出1.1kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用T7测序酶试剂盒(Amsham)完全测序。(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.17，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.18)。RUP16克隆序列与AL136106的四个非顺序区段相符，表明RUP16的cDNA含有4个外显子。
j.hRUP17(Seq.Id.Nos.19&20)公布的人RUP17基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC023078的cDNA克隆为来自第11号染色体的人基因组序列。该全长RUP17通过以下引物进行PCR克隆
5’-TTTCTGAGCATGGATCCAACCATCTC-3’(SEQ.ID.NO.59；正义，含启始密码子)和5’-CTGTCTGACAGGGCAGAGGCTCTTC-3’(SEQ.ID.NO.60；反义链，终止密码子的3’端)，并以人基因组DNA(Promega)为模板。用Advantage cDNA多聚酶混合物与5％DMSO在100μl反应液中进行PCR(Clontech)。程序为94℃1分钟；94℃15秒；67℃20秒；72℃1分钟又30秒；72℃5分钟，从第二步到第四步循环30次。
从1％琼脂糖凝胶中分离出970bp的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Termiantor试剂盒(P.E.Biosystem)测序。(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.19，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.20)。
k.hRUP18(Seq.Id.Nos.21&22)公布的人RUP18基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC008547的cDNA克隆为来自第5号染色体的人基因组序列。该全长RUP18通过以下引物进行PCR克隆5’-GGAACTCGTATAGACCCAGCGTCGCTCC-3’(SEQ.ID.NO.61；正义，启始密码子的5’端)和5’-GGAGGTTGCGCCTTAGCGACAGATGACC-3’(SEQ.ID.NO.62；反义，终止密码子的3’端)，并以人基因组DNA(Promega)为模板。用TaqPlus精确DNA多聚酶(Stratagene)与5％DMSO在100μ1反应液中进行PCR(Clontech)。程序为95℃5分钟；95℃30秒；65℃30秒；72℃2分钟；72℃5分钟，从第二步到第四步循环35次。
从1％琼脂糖凝胶中分离出1.3kb的PCR片段，克隆到pCRI-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Termiantor试剂盒(P.E.Biosystem)测序。(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.21，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.22)。
1.hRUP19(Seq.Id.Nos.23&24)公布的人RUP19基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC026331的cDNA克隆为来自第12号染色体的人基因组序列。该全长RUP19通过以下引物进行PCR克隆5’-CTGCACCCGGACACTTGCTCTG-3’(SEQ.ID.NO.63；正义，启始密码子的5’端)和5’-GTCTGCTTGTTCAGTGCCACTCAAC-3’(SEQ.ID.NO.64；反义，含终止密码子)，并以人基因组DNA(Promega)为模板。用TaqPlus Precision DNA多聚酶(Stratagene)与5％DMSO在100μl反应液中进行扩增。程序为94℃1分钟；94℃15秒；70℃20秒；72℃1分钟30秒；72℃5分钟，从第二步到第四步循环35次。
从1％琼脂糖凝胶中分离出1.1kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Termiantor试剂盒(P.E.Biosystem)完全测序。其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.23，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.24)。
m.hRUP20(Seq.Id.Nos.25&26)公布的人RUP20基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AL161458的cDNA克隆为来自第1号染色体的人基因组序列。该全长RUP20通过以下引物进行PCR5’-TATCTGCAATTCTATTCTAGCTCCTG-3’(SEQ.ID.NO.65；正义，启始密码子5’端)和5’-TGTCCCTAATAAAGTCACATGAATGC-3’(SEQ.ID.NO.66；反义，终止密码子3’端)，并以人基因组DNA(Promega)为模板。用Advantage cDNA多聚酶混合物(Clonetech)与5％DMSO进行扩增。程序为94℃1分钟；94℃15秒；60℃20秒；72℃1分钟30秒；72℃5分钟，从第二步到第四步循环35次。
从1％琼脂糖凝胶中分离出1.0kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Termiantor试剂盒(P.E.Biosystem)测序。(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.25，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.26)。
n.hRUP21(Seq.Id.Nos.27&28)公布的人RUP21基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC026756的cDNA克隆为来自第13号染色体的人基因组序列。该全长RUP21通过以下引物进行PCR克隆5’-GGAGACAACCATGAATGAGCCAC-3’(SEQ.ID.NO.67；正义)和5’-TATTTCAAGGGTTGTTTGAGTAAC-3’(SEQ.ID.NO.68；反义链)，并以人基因组DNA(Promega)为模板。用TaqPlus Precision多聚酶(Stratagene)与5％DMSO在100μl反应液中进行扩增。程序为94℃1分钟；94℃15秒；55℃20秒；72℃1分钟30秒；72℃5分钟，从第二步到第四步循环30次。
从1％琼脂糖凝胶中分离出1014bp的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Termiantor试剂盒(P.E.Biosystem)测序。(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.27，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.28)。
o.hRUP22(Seq.Id.Nos.29&30)公布的人RUP22基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC027026的cDNA克隆为来自第11号染色体的人基因组序列。该全长RUP22通过以下引物进行PCR克隆
5’-GGCACCAGTGGAGGTTTTCTGAGCATG-3’(SEQ.ID.NO.69；正义，含启始密码子)和5’-CTGATGGAAGTAGAGGCTGTCCATCTC-3’(SEQ.ID.NO.70；反义，终止密码子3’端)，并以人基因组DNA(Promega)为模板。用TaqPlus Precision DNA多聚酶(Stratagene)与5％DMSO在100μl反应液中进行扩增。程序为94℃1分钟；94℃15秒；55℃20秒；72℃1分钟30秒；72℃5分钟，从第二步到第四步循环30次。
从1％琼脂糖凝胶中分离出970bp的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Termiantor试剂盒(P.E.Biosystem)完全测序。(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.29，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.30)。
p.hRUP23(Seq.Id.Nos.31&32)公布的人RUP23基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC007104的cDNA克隆为来自第4号染色体的人基因组序列。该全长RUP23通过以下引物进行PCR5’-CCTGGCGAGCCGCTAGCGCCATG-3’(SEQ.ID.NO.71；正义，ATG为启始密码子)和5’-ATGAGCCCTGCCAGGCCCTCAGT-3’(SEQ.ID.NO.72；反义，TCA为终止密码子)，并以人胎盘Marathon-Ready cDNA(Clontech)为模板。用Advantage cDNA多聚酶(Clontech)在50μl反应液中进行扩增。程序为95℃30秒；95℃15秒；66℃20秒；72℃1分钟20秒；72℃5分钟，从第二步到第四步循环35次。
从1％琼脂糖凝胶中分离出1.0kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Terminator试剂盒(P.E.Biosystem)完全测序。(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.31，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.32)。
q.HRUP24(Seq.Id.Nos.33&34)公布的人RUP25基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC026331的cDNA克隆为来自第12号染色体的人基因组序列。该全长RUP25通过以下引物进行PCR克隆5’-GCTGGAGCATTCACTAGGCGAG-3’(SEQ.ID.NO.73；正义，启始密码子5’端)和5’-AGATCCTGGTTCTTGGTGACAATG-3’(SEQ.ID.NO.74；反义，终止密码子3’端)，并以人基因组DNA(Promega)为模板。用Advantage cDNA多聚酶混合物(Clontech)与5％DMSO在100μl反应液中进行PCR。程序为94℃1分钟；94℃15秒；56℃20秒；72℃1分钟30秒；72℃5分钟，从第二步到第四步循环35次。
从1％琼脂糖凝胶中分离出1.2kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Terminator试剂盒(P.E.Biosystem)完全测序。(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.33，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.34)。
r.hRUP25(Seq.Id.Nos.35&36)公布的人RUP25基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC026331的cDNA克隆为来自第12号染色体的人基因组序列。该全长RUP25通过以下引物进行PCR克隆5’-GCTGGAGCATTCACTAGGCGAG-3’(SEQ.ID.NO.75；正义，启始密码子5’端)和5’-AGATCCTGGTTCTTGGTGACAATG-3’(SEQ.ID.NO.76；反义，终止密码子3’端)，并以人基因组DNA(Promega)为模板。用Advantage cDNA多聚酶混合物(Clontech)与5％DMSO进行扩增，程序为94℃1分钟；94℃15秒；56℃20秒；72℃1分钟30秒；72℃5分钟，从第二步到第四步循环35次。
从1％琼脂糖凝胶中分离出1.2kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Terminator试剂盒(P.E.Biosystem)完全测序。(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.35，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.36)。
s.hRUP 26(Seq.Id.Nos.37&38)公布的人RUP26基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC023040的cDNA克隆为来自第2号染色体的人基因组序列。该全长RUP26通过RUP26特异性引物进行RT-PCR克隆5’-AGCCATCCCTGCCAGGAAGCATGG-3’(SEQ.ID.NO.77；正义，含启始密码子)和5’-CCAGACTGTGGACTCAAGAACTCTAGG-3’(SEQ.ID.NO.78；反义，含终止密码子)，并以人胰脏Marathon-Ready cDNA(Clontech)为模板。用Advantage cDNA多聚酶混合物(Clontech)与5％DMSO在100μl反应液中进行PCR(Clontech)。程序为94℃5分钟；95℃30秒；65℃30秒；72℃2分钟；72℃5分钟，从第二步到第四步循环35次。
从1％琼脂糖凝胶中分离出1.1kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Termiantor试剂盒(P.E.Biosystem)完全测序。(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.37，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.38)。
t.hRUP27(Seq.Id.Nos.39&40)公布的人RUP27基于GenBank的信息得以识别。搜索数据库中发现一个入藏号为AC027643的cDNA克隆为来自第12号染色体的人基因组序列。该全长RUP27用RUP27特异性引物进行PC R克隆
5’-AGTCCACGAACAATGAATCCATTTCATG-3’(SEQ.ID.NO.79；正义，含启始密码子)和5’-ATCATGTCTAGACTCATGGTGATCC-3’(SEQ.ID.NO.80；反义，终止密码子3’端)，并以成人脑Marathon-Ready cDNA(Clontech)为模板。用Advantage eDNA多聚酶混合物(Clontech)与5％DMSO在50μl反应液中进行PCR。程序为94℃1分钟；94℃10秒；58℃20秒；72℃1分钟30秒；72℃5分钟，从第二步到第四步循环35次。
从1％琼脂糖凝胶中分离出1.1kb的PCR片段，克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Termiantor试剂盒(P.E.Biosystem)完全测序。(其核苷酸序列见SEQ.ID.NO.35，可能的氨基酸序列见SEQ.ID.NO.36)。从人脑中分离的RUP27的cDNA克隆序列被判定与AC027643的五个非顺序区段相符，表明RUP27的cDNA含有5个外显子。
实施例2制备非内源组成型活化的GPCR相信本领域的普通技术人员有能力选择用于核酸序列突变的技术，下面提供的就是用于制造以上所公开的几种人GPCR非内源形式的方法。下面公开的突变是基于算法规则方法，由此第16位氨基酸(位于GPCR的IC3区域)由保守的脯氨酸(或其内源保守替代物)残基(位于GPCR的TM6区域，接近TM6/IC3交界处)发生突变，更优选突变为丙氨酸、组氨酸、精氨酸或赖氨酸残基，最优选突变为赖氨酸残基。
1.Transformer Sited-DirectedTM诱变利用Transformer Sited-DirectedTM诱变试剂盒按商家说明，由人GPCR制备非内源人GPCR可得以实现。使用两个诱变引物，首先优选的是产生赖氨酸突变的赖氨酸诱变寡核苷酸，及一个选择标记寡核苷酸。出于方便的原因，掺入人GPCR中的密码子突变用标准方式标示出来(表D)表D
2.QuikChangeTMSite-DirectedTM诱变利用QuikChangeTMSited-DirectedTM诱变试剂盒(Stratagene，按商家说明)，制备非内源人GPCR可得以实现。优选以内源GPCR为模板并使用两个诱变引物，同样优选的是赖氨酸诱变寡核苷酸及一个选择标记寡核苷酸(试剂盒中自带)。出于方便的原因，掺入新的人GPCR中的密码子突变及个别的寡核苷酸用标准方式标示出来(表E)
表E
然后对非内源人GPCR测序，将获得并证实的核酸和氨基酸序列列入本专利申请文件所附的“序列表”中，并以下面的表F作为概括。
表F
实施例3受体表达尽管在本领域中有多种细胞可用于蛋白质的表达，但最优选应用的是哺乳动物细胞。据预测，其基本原因是实用性，即例如表达GPCR的酵母细胞的应用，有可能把一种非哺乳动物细胞引入到程序中，此细胞可能不(其实，对于酵母来说，是不)包括偶联受体、遗传机制和分泌途径，而这些是经过进化用于哺乳动物系统的。因此，在非哺乳动物细胞中得到的结果，尽管是可能有用的，但并不如从哺乳动物细胞中得到的结果优选。在哺乳动物细胞中，COS-7、293和293T细胞是特别优选的，尽管应用的特定哺乳动物细胞可按技术人员的特别需要而被判定。
a.瞬时转染第一天，将6×106个293细胞接种到10cm的培养板上。第二天，准备两支试管(比例是每板用于一支试管)通过混合4μg DNA(例如pCMV载体、带有受体cDNA的pCMV载体等)在0.5ml无血清的DMEM(Gibco BRL)中来制备试管A；通过混合24μl lipofectamine(Gibco BRL)在0.5ml无血清DMEM中制备试管B。把试管A和B互倾混合(几次)，然后在室温下温育30-45分钟。组合物被称为“转染组合物”。植出的293T细胞用1XPBS洗涤，然后加入5ml无血清的DMEM。把1ml转染组合物加入到细胞中去，然后在37℃/5％ CO2下温育4小时。接着通过抽吸移去转染组合物，然后加入10ml的DMEM/10％胎牛血清。接着细胞在37℃/5％ CO2温育。48小时后收获细胞并用来进行分析。
b.稳定的细胞系Gs融合蛋白将约12×106个293细胞接种到15cm的组织培养平板上。在含有10％胎牛血清和1％丙酮酸钠，L-谷氨酰胺，抗生素的DME高葡萄糖培养基中生长。293细胞铺板后24小时其汇合水平达到～80％，细胞用12μg DNA进行转染。该12μg DNA与60μl lipofectamine和2ml无血清的DME高葡萄糖培养基混合。从培养平板中吸去培养基，用无血清培养基润洗细胞一次。DNA，lipofectamine和培养基的混合物与10ml无血清培养基一同加入平板。37℃培养4-5小时后，吸去培养基，加入25ml含血清的培养基。转染24小时后，又一次吸去培养基，加入新鲜的含血清培养基。转染48小时后，吸去培养基，加入含遗传霉素(G418药物，终浓度为500μg/ml)的培养基。含有G418抗性基因的阳性转染细胞在这时受到选择。选择时每4到5小时替换一次培养基。选择过程中，细胞生长并产生稳定的细胞组，或细胞分裂进行稳定的克隆选择。
实施例4确定非内源GPCR组成型活性的分析多种方法可用来评估非内源人GPCR的组成型活性，下面的举例是说明性的；本领域的普通技术人员有能力决定那些对他们所需最有益的技术。
1.细胞膜结合分析[35S]GTPγS分析当G蛋白偶联受体在其活性状态，并作为配体结合或者作为组成型活化的结果时，受体与G蛋白偶联并刺激GDP的释放和其后GTP与G蛋白的结合。G蛋白-受体复合物的α亚基作为GTP酶并慢慢地水解GTP为GDP，在此点受体通常发生失活。组成型活化受体继续把GDP转化为GTP。不可水解的GTP类似物[35S]GTPγS，可被用来展示[35S]GTPγS与表达组成型活化受体的膜的增强的结合。应用[35S]GTPγS结合测定组成型活化的优点是(a)它对所有G蛋白偶联受体是普遍适用的；(b)它邻近细胞膜表面，在此处较少可能拣到遇到影响细胞内级联反应的分子。
此试验利用G蛋白偶联受体的刺激[35S]GTPγS与表达相关受体的细胞膜结合的能力。因此本测定可用于直接识别法去筛选针对已知、孤儿和组成型活化G蛋白偶联受体的候选化合物。本测定是普遍的并可用于针对所有G蛋白偶联受体的药物发现。GTPγS试验在20mM HEPES、1至大约20mM的MgCl2(尽管20mM是优选的，但这个剂量可针对结果的最优化进行调整)、pH7.4、含有在0.3和1.2nM之间的[35S]GTPγS(尽管1.2是优选的，但这个剂量可针对结果的最优进行调整)、12.5到75μg膜蛋白(例如，表达Gs融合蛋白的293细胞；本剂量可为最优化进行调整)和10μM GDP(这个剂量可针对结果的最优化进行改造)的结合缓冲液中温育一小时。接着加入麦胚凝集素小珠(25μl，Amersham)，组合物在室温下再温育30分钟，然后试管在1500×g、室温下离心5分钟，并在闪烁计数器上记数。
2.腺苷酸环化酶设计用来进行基于细胞的测定的Flash PlateTM腺苷酸环化酶试剂盒(New England Nuclear；目录号SMP004A)被改进以应用于未加工的质膜。闪烁板的孔含有闪烁剂包被层，其中含有识别cAMP的特异抗体。在孔中产生的cAMP可通过直接和放射性cAMP示踪物竞争与cAMP抗体结合而被定量。下面是对测量表达受体的整个细胞中cAMP水平变化程序的简短描述。
在瞬时转染后大约24小时收获转染的细胞。小心抽吸培养液并弃去。向各细胞培养皿中轻缓加入10ml PBS，然后小心地抽吸。每板加入1ml Sigma细胞解离缓冲液和3ml PBS。将细胞从平板中吸出，将收获的细胞悬液加入50毫升的锥型离心管，然后在室温1100rpm离心5分钟。以适当量的PBS小心地重悬细胞沉淀(每板约3ml)。细胞用血细胞计数器计数，并用额外的PBS调整到适当的细胞数量(最终的体积约为每孔50μl)。
按照制造商的指令制备和维持cAMP标准品和检测缓冲液(含有1μCi示踪物[125IcAMP(50μl)]的11ml检测缓冲液)。为筛选用的分析缓冲液被新鲜制备，它含有50μl刺激缓冲液，3μl的实验化合物(终浓度为12mM)和50μl的细胞；分析缓冲液可在冰上贮存备用。首先向合适的孔中加入50μl的cAMP标准品、接着加入50μl PBSA到孔H-11和H-12。在所有的孔内加入50μl刺激缓冲液，使用可分散3μl化合物落液的针形工具将DMSO(或选定的侯选化合物)加入适当的孔中，实验化合物的终浓度为12mM，实验总体积为100μl。然后将细胞加入孔中，室温培养60分钟，然后加入100μl含示踪cAMP的检测混合物。培养板接着再温育2小时，然后用Wallac MicroBeta液闪计数器记数。cAMP/孔的数值从标准cAMP曲线外推，该曲线包括在每个测定板之内。
3.Gi偶联靶GPCR的基于细胞的cAMP分析TSHR是一种Gs偶联的GPCR，当活化时引起cAMP的累积。将氨基酸残基623突变(即，将丙氨酸残基变为异亮氨酸残基)可使TSHR组成型活化。预期Gi偶联受体抑制腺苷酸环化酶，并因此降低cAMP的水平，从而使cAMP水平的评估有难度。检测作为组成型活化Gi偶联受体指示的cAMP产量的降低，一种有效手段是通过共转染来实现的，更优选的，是通过以非内源的组成型活化TSHR(TSHR-A623I)(或一个内源组成型活化的Gs偶联受体)为“信号增强子”，和Gi偶联的靶GPCR共转染，确立cAMP的基准水平。在产生非内源性Gi偶联受体后，非内源的靶GPCR与信号增强子共转染，并用做筛选的材料。在使用cAMP分析时，我们将利用这一方法有效地产生信号；该方法优选地用于针对Gi偶联受体的侯选化合物的直接识别。要注意的是，对于Gi偶联GPCR，使用该方法时，该靶GPCR的反激动剂会增加cAMP信号而激动剂会降低cAMP信号。
第一天，293和293细胞以每孔2×104个细胞的密度植于板上。第二天，准备两支试管(比例是每板用于一支试管)通过混合总共4μgDNA的各受体DNA 2μg(例如pCMV载体；带有突变THSR的pCMV载体(TSHR-A623I)；TSHR-A623和GPCR等)在1.2ml无血清的DMEM(Irvine Scientific，Irvine，CA)中来制备试管A；通过混合120μllipofectamine(Gibco BRL)在1.2ml无血清DMEM中制备试管B。把试管A和B互倾混合(几次)，然后在室温下温育30-45分钟。组合物被称为“转染组合物”。植出的293细胞用1XPBS洗涤，然后加入10ml无血清的DMEM。把2.4ml转染组合物加入到细胞中去，然后在37℃/5％ CO2下温育4小时。接着通过抽吸移去转染组合物，然后加入25ml的DMEM/10％胎牛血清。接着细胞在37℃/5％ CO2温育。24小时后收获细胞并用来进行分析。
设计用来基于细胞进行测定的Flash PlateTM腺苷酸环化酶试剂盒(New England Nuclear；目录号SMP004A)，可根据本领域熟练技术人员的需要，被改进以应用于未加工的质膜。闪烁板的孔含有闪烁剂包被层，其中含有识别cAMP的特异抗体。在孔中产生的cAMP通过直接和放射性cAMP示踪物竞争与cAMP抗体结合而被定量。下面是对测量在表达受体的全细胞中cAMP水平变化程序的简短描述。
在瞬时转染后大约24小时，收获转染的细胞。小心抽吸培养液并弃去。向每一细胞培养皿中轻缓加入10ml PBS。每板加入1ml Sigma细胞解离缓冲液和3ml PBS。将细胞从平板中吸出，将收获的细胞悬液加入50毫升的锥型离心管，然后在室温1100rpm离心5分钟。以适当量的PBS小心地重悬细胞沉淀(每板约3ml)。用血细胞计数器计数，并用额外的PBS调整到适当的细胞数量(最终的体积约为每孔50μl)。
按照制造商的指令制备和维持cAMP标准品和检测缓冲液(含有1μCi示踪物[1251cAMP(50μl)]的11ml检测缓冲液)。为筛选用的分析缓冲液被新鲜制备，它含有50μl刺激缓冲液，3μl的实验化合物(终浓度为12mM)和50μl的细胞；分析缓冲液可在冰上贮存备用。首先向适当的孔中加入50μl的cAMP标准品、接着加入50μl PBSA到孔H-11和H-12。在所有的孔内加入50μl刺激缓冲液，使用可分散3μl混合液的针具将选定的化合物(如TSH)加入适当的孔中，实验化合物的终浓度为12μM，实验总体积为100μl。然后将细胞加入孔中，室温培养60分钟，然后加入100μl含示踪cAMP的检测混合物。培养板接着再温育2小时，然后用Wallac MicroBeta液闪计数器记数。cAMP/孔的数值从标准cAMP曲线外推，该曲线包括在每个测定板之内。
4.基于报告基因的测定a.CRE-Luc报告基因测定(Gs相关的受体)293和293T细胞以每孔2×104个细胞的密度植于96孔板上，第二天按商家说明用Lipofectamine试剂(BRL)进行转染，每6孔转染制备DNA/脂质混合物如下100μl DMEM中的260ng质粒DNA温和地与100μl DMEM中的2μl脂质混和(260ng质粒DNA由以下组成，200ng8×CRE-Luc报告质粒，50ng包含内源受体或非内源受体的pCMV，或单独的pCMV，以及10ng GPRS表达质粒(GPRS在pcDNA3(Invitrogen)中))。8×CRE-Luc报告质粒的制备如下在pβgal-基本载体(Clontech)的BglV-HindIII位点克隆鼠促生长素抑制素的启动子(-71/+51)，获得SRIF-β-gal载体，8拷贝的cAMP应答元件通过PCR由腺病毒模板AdpCFl26CCRE8获得(参见，7人基因疗法(Human GeneTherapy)1883(1996))，将之克隆到SRIF-β-gal载体的Kpn-BglV位点中，产生8×CRE-β-gal报告载体，用荧光素酶基因取代8×CRE-β-gal报告载体中的β-半乳糖苷酶基因，产生8×CRE-Luc报告质粒，所述荧光素酶基因取自pGL3-基本载体(Promega)的HindIII-BamHI位点。室温下放置30分钟后，DNA/脂质混合物用400μl DMEM稀释，每孔加入100μl稀释的混合物，在细胞培养箱中培养4小时后每孔中加入100μl含10％FCS的DMEM。第二天，转染的细胞每孔换成200μl含10％FCS的DMEM，8小时后，用PBS清洗一次，各样品孔改为100μl不含酚红的DMEM。次日按商家说明用LucLiteTM报告基因分析试剂盒(Packard)测定荧光素酶活性并在1450 MicroBetaTM闪烁发光计数器(Wallac)上读数。
b.AP1报告基因分析(Gq相关受体)测定Gq刺激依赖的方法依赖于Gq依赖的磷脂酶C已知的特性，即它可引起在其启动子含有AP1元件的基因活化。按照上述CREB报告基因测定所说的程序，使用PathdetectTMAP-1 cis-Reporting System(Stratagene，Catalogue #219073)，其中只是将磷酸钙沉淀的组分改为410ng pAP1-Luc、80ng pCMV-受体表达质粒和20ng CMV-SEAP。
c.SRF-Luc报告基因分析(Gq相关受体)检测Gq刺激的一个方法凭借Gq依赖性磷脂酶C的已知特性，引起启动子中包含血清应答因子的基因活化。PathdetectTMSRF-Luc报告系统(Stratagene)可用来分析Gq偶联的活性，比如在COS7细胞中分析Gq偶联的活性。应用Mammalian TransfectionTM试剂盒(Stratagene，Catalogue# 200285)，用该系统中各种质粒及标明的编码内源或非内源GPCR的表达质粒，按商家说明转染细胞。简单地讲，410ng SRF-Luc、80ng pCMV受体表达质粒和20ng CMV-SEAP(分泌碱性磷酸酶的表达质粒；测定转染细胞培养基中碱性磷酸酶活性以控制样品间转染效率的差别)，依各个商家的说明与磷酸钙沉淀组合在一起，一半的沉淀物等量地分配到96孔板的3个孔中，使细胞在无血清培养基中保持24小时。按要求，在最后5个小时细胞与1μM血管紧张素一起培养，然后溶解细胞，使用LucLiteTM试剂盒(Packard，cat# 6016911)和“Trilax1450 Microbeta”液体闪烁发光计数器(Wallac)，按各个商家的说明分析荧光素酶活性，数据用GraphPad PrismTM2.0a软件分析(GraphPadSoftware Inc.)。
d.胞内IP3积累分析(Gq相关受体)在第一天，含有该受体(内源的和/或非内源的)的细胞被接种于24孔培养板上，一般是1×105细胞/孔(虽然该数还可优化)。在第二天转染细胞，首先混合在50μl/孔无血清DMEM中的0.25μg DNA和在50μl/孔无血清DMEM中的2μl lipofectamine。轻轻地混合溶液并在室温下温育15-30分钟。用0.5ml PBS洗涤细胞，把400μl无血清培养基与转染培养基混合并加到细胞中。然后在37℃/5％ CO2下温育细胞3-4小时，再移去转染培养基，替换为1ml/孔常规培养基。在第三天，用3H-肌醇标记细胞。简短地说，移去培养基，细胞用0.5ml PBS洗涤，接着加入0.5ml/孔无肌醇/无血清培养基(GIBCO BRL)和0.25μCi/孔3H-肌醇，在37℃/5％CO2下温育细胞16-18小时。在第四天，用0.5ml PBS洗涤细胞，加入0.45ml试验培养基，其中含有无肌醇/无血清培养基10μM巴吉林10mM氯化锂或0.4ml试验培养基和50μl 10×ketaserin(ket)以得到10μM的终浓度。然后在37℃温育细胞30分钟。用0.5mlPBS洗涤细胞，加入200μl/孔新鲜的/冰冷的终止液(1M KOH、18mM硼酸钠、3.8mM EDTA)。溶液在冰上放置5-10分钟或直到细胞被溶解，然后用200μl新鲜的/冰冷的中和液(7.5％HCl)中和。然后把裂解物转移到1.5ml离心管中，加入lml/管氯仿/甲醇(1∶2)。然后使溶液涡旋15秒钟，把上层上样至Biorad AG1-X8TM阴离子交换树脂(100-200目)。首先，树脂以1∶1.25 W/V的比例用水洗涤，向柱中加载0.9ml的上层溶液。用10ml 5mM肌醇和10ml 5mM的硼酸钠/60mM甲酸钠洗涤柱子。肌醇三磷酸酯被洗提入液闪管中，其中含有10ml液闪鸡尾，它有2ml 0.1M甲酸/1M甲酸铵。通过用10ml 0.1M甲酸/3M甲酸铵洗涤和用ddH2O洗涤两次来再生交换柱，柱子贮存在4℃的水中。
典型的结果列入下面表G表G N/A＝未应用如以上实施例4(1)所示，GTPγS检测组成型活化分析的典型结果是利用人RUP13和人RUP15上的Gs融合蛋白构建体得以实现的。以下表H中列出了该分析所产生的信号以及信号间的差异
表H 实施例5融合蛋白的制备a.GPCR:Gs融合构建体组成型活化的GPCR-G蛋白融合构建体的设计如下完成建造大鼠G蛋Gsα(长式；ltoch，H.等，83 PNAS 3776(1986))的5′和3′端，使之包括HindIII(5′-AAGCTT-3′)序列。正确的序列(包括HindIII的侧翼序列)确认之后，通过利用该载体的HindIII限制性位点进行亚克隆，将完整的序列插入pcDNA3.1(-)(Invitrogen，cat.no.V795-20)。亚克隆进入pcDNA3.1(-)之后，确认Gsα序列的正确方向，然后证实在HindIII序列上带有大鼠Gsα基因的该经修饰的pcDNA3.1(-)，该载体现在可用作“通用的”Gsα蛋白载体。pcDNA3.1(-)载在HindIII位点的上游含有一系列已知的限制性位点，这样能够有利地在Gs蛋白上游插入内源组成型活化GPCR的编码序列。可以应用同样的方法创造其他“通用的”G蛋白载体，当然，可以应用其他可买到的或本领域技术人员已知的载体----重要的标准是GPCR序列处G蛋白序列的上游并与G蛋白序列符合读框。
RUP13经Gs偶联，对于下列典型的GPCR融合蛋白，实现了与Gsα的融合。
RUP13-Gsα融合蛋白构建体的制备如下引物设计如下5′-gatc[TCTAGAAT]GGAGTCCTCACCCATCCCCCAG-3′(SEQ.ID.NO.97；有义)5′-gcta[GATATC]CGTGACTCCAGCCGGGGTGAGGCGGC-3′(SEQ.ID.NO.98，反义)小写的核苷酸作为间隔子包含在G蛋白与RUP13间的限制性位点(方括号)中，有义和反义引物分别包含了XbaI和EcoRV限制性位点，间隔子(对限制性位点有贡献)存在于该G蛋白和RUP15之间。
然后应用PCR得到各个受体序列，用于上面公开的Gsα通用载体中的融合，各PCR使用以下程序100ng RUP15 cDNA加到不同的管中，其中各管含有每个引物(有义和反义)2μl，3μl 10mM dNTP，10μl10×TaqPlusTM精确缓冲液，1μl TaqPlμsTM精确聚合酶(Stratagene#600211)，及80μl水。用于RUP15的反应温度和循环时间如下在94℃下进行1分钟，然后进行94℃30秒；62℃20秒；72℃1分钟40秒；72℃下进行5分钟，从第2步到第4步循环35次。PCR产物走1％琼脂糖凝胶，然后纯化(数据未显示)，纯化产物用XbaI的EcoRV酶切，所需的插入片段经纯化连接到Gs通用载体中各自的限制性位点。转化后分离阳性克隆并用限制性酶酶切确认；用293细胞按下述程序实现表达，对RUP15-Gs融合蛋白的每个阳性克隆进行测序以证实正确性。(核酸序列见SEQ.ID.NO.99，氨基酸序列见SEQ.ID.NO.100)。
RUP15经Gs偶联，对于下列典型的GPCR融合蛋白，实现了与Gsα的融合。
RUP15-Gsα融合蛋白构建体的制备如下引物设计如下5′-TCTAGAATGACGTCCACCTGCACCAACAGC-3′(SEQ.ID.NO.101；有义)5′-gatatcGCAGGAAAAGTAGCAGAATCGTAGGAAG-3′(SEQ.ID.NO.102，反义)小写的核苷酸作为间隔子包含在G蛋白与RUP15间的限制性位点中，有义和反义引物分别包含了EcoRV和XbaI限制性位点，间隔子(对限制性位点有贡献)存在于该G蛋白和RUP15之间。
然后应用PCR得到各个受体序列，用于上面公开的Gsα通用载体中的融合，各PCR使用以下程序100ng RUP15 cDNA加到不同的管中，其中各管含有每个引物(有义和反义)2μl，3μl 10mM dNTP，10μl10×TaqPlusTM精确缓冲液，1μl TaqPlusTM精确聚合酶(Stratagene#600211)，及80μl水。用于RUP15的反应温度和循环时间如下在94℃下进行1分钟，然后进行94℃30秒；62℃20秒；72℃1分钟40秒；72℃下进行5分钟，从第2步到第4步循环35次。PCR产物走1％琼脂糖凝胶，然后纯化(数据未显示)。消化经纯化的产物。纯化产物用EcoRV和XbaI酶切，所需的插入片段经纯化连接到Gs通用载体中各自的限制性位点。转化后分离阳性克隆并用限制性酶酶切确认；用293细胞按下述程序实现表达，对RUP15-Gs融合蛋白的每个阳性克隆进行测序以证实正确性。(核苷酸序列见SEQ.ID.NO.103，氨基酸序列见SEQ.ID.NO.104)。
b.Gq(6个氨基酸缺失)/Gi融合构建体Gq(缺失)/Gi融合构建体的设计如下Gαq亚单位的N末端6个氨基酸(从2到7位的氨基酸，序列为TLESIM(SEQ.ID.NO.129))被缺失，其C末端的5个氨基酸(序列为EYNLV，SEQ.ID.NO.130)被Gαi蛋白的相应氨基酸(序列为DCGLF，SEQ.ID.NO.131)替代。该融合构建体用以下引物进行PCR克隆
5′-gatcaagcttcCATGGCGTGCTGCCTGAGCGAGGAG-3′(SEQ.ID.NO.132)和5′-gatcggatccTTAGAACAGGCCGCAGTCCTTCAGGTTCAGCTGCAGGATGGTG-3′(SEQ.ID.NO.133)以及带有血凝素标签的小鼠野生型Gαq的质粒63313为模板。小写的核苷酸是间隔子。
使用TaqPlus精确DNA聚合酶(Stratagene)进行以下循环扩增反应95℃2分钟；95℃20秒；56℃20秒；72℃2分钟；72℃下进行7分钟，从第2步到第4步循环35次。PCR产物克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，并用ABI Big Dye Terminator试剂盒(P.E.Biosystem)测序。来自含有该融合构建体序列的TOPO克隆的插入片段，通过两步克隆，可被穿梭地转移到表达载体pcDNA3.1(+)的HindIII/BamHI位点处。
实施例6公开的人GPCR的组织分布RT-PCR应用RT-PCR确证是否表达，以及几种新的人GPCR在组织中的分布。使用的寡核苷酸是GPCR特异性的，以人多种组织cDNA作为模板(MTC，Clontech)。使用Taq DNA多聚酶(Stratagene)在40μl反应液中进行扩增，依照生产商的说明使用。将20μl反应液进行1.5％的琼脂糖凝胶电泳，分析RT-PCR产物。以下的表J列出了受体，循环反应条件以及使用的引物。
表J
实施例7规程直接识别反激动剂和激动剂A[35S]GTPγS分析虽然我们已将内源组成型活性的GPCR用于直接识别(例如)作为如反激动剂的候选化合物，由于不完全了解的原因，分析内的误差会变得加重。那么，如上公开的GPCR融合蛋白也优选与非内源组成型活化的GPCR一起应用。我们已经确定使用这样的蛋白，分析内误差看起来基本稳定，因此获得有效的信噪比。这有利于对候选化合物进行更加充分的识别。因此，对于直接识别，比较好的是使用GPCR融合蛋白，并且在用时，优选用到下面的分析规程。
1.膜制备包含目的组成型活性孤儿GPCR融合蛋白的膜和用于直接识别作为反激动剂、激动剂或部分激动剂的候选化合物的膜，优选按如下步骤制备如下a.材料“膜提取缓冲液”由20mM HEPES和10mM EDTA组成，pH7.4；“膜清洗缓冲液”由20mM HEPES和0.1mM EDTA组成，pH7.4；“结合缓冲液”由20mM HEPES、100mM NaCl及10mM MgCl2组成，pH7.4。
b.步骤整个过程中所有材料均置于冰上。首先，将培养基从汇合的单层细胞中吸去，随后用10ml冷的PBS清洗，随后吸掉，这之后将5ml膜提取缓冲液加到提取细胞上，随后将细胞提取物转移到50ml离心管中(4℃下20,000rpm离心17分钟)，这之后吸出上清液，将沉淀重悬于30ml膜清洗缓冲液，随后4℃下20,000rpm离心17分钟，然后吸出上清液，沉淀重悬于结合缓冲液中，然后用Brinkman polytronTM均化器进行均化(15-20秒剧烈振动直到所有材料处悬浮状态)，此处称之为“膜蛋白”。
2.Bradford蛋白分析均化以后，这些膜的蛋白浓度用Bradford蛋白分析确定。(蛋白可以稀释成大约1.5mg/ml，等份分装和冷冻(-80℃)备用；冷冻状态下，所用规程如下分析的当天，将冷冻的膜蛋白室温下溶化，随后用涡旋振荡器，然后用polytron以大约12×1000rpm均化约5～10秒；请注意，对于多次制备，不同制备物的均化之间应该彻底洗净均化器。
a.材料结合缓冲液(如上)；Bradford染色试剂，Bradford蛋白标准物，按商家说明使用(Biorad，cat.no.500-0006)。
b.步骤准备两个试管，一个含有膜，一个作为“空白”对照。每管装入800μl结合缓冲液，之后将10μl Bradford蛋白标准物(1mg/ml)加到每个试管中，然后10μl膜蛋白只加到一个试管中(空白管中不加)，这之后200μl Bradford染色试剂加到每个试管中，随后每个试管经涡旋振荡，5分钟后，试管再次涡旋振荡，将其中的材料转移到比色杯中，然后比色杯用CECIL 3041分光光度计在595波长下读数。
3.直接识别分析a.材料GDP缓冲液由37.5ml结合缓冲液和2mg GDP(Sigma，cat.no.G.7127)组成，随后用结合缓冲液作一系列稀释以得到0.2μM GDP(每孔中GDP的终浓度为0.1μM GDP)；每孔含有一种候选化合物，终体积为200μl，其中有100μl GDP缓冲液(终浓度0.1μM GDP)，50μl悬浮于结合缓冲液中的膜蛋白，及50μl溶于结合缓冲液中的[35S]GTPγS(0.6nM)(每10ml结合缓冲液2.5μl[35S]GTPγS)。
b.步骤候选化合物最是用96-孔板筛选(可以在-80℃冷冻)，将膜蛋白(或带有除了GPCR融合蛋白的表达载体的膜，作为对照)简单地均化至悬浮状态，然后用上述的Bradford蛋白分析确定蛋白浓度。然后膜蛋白(和对照)用结合缓冲液稀释成0.25mg/ml(最终分析浓度，12.5μg/孔)，这之后，100μl GDP缓冲液加到Wallac ScintistripTM(Wallac)的每个样品孔中，然后用5μl针具将5μl候选化合物转移到这些样品孔中(5μl在200μl总分析体积中为1∶40比例因而候选化合物最终的筛选浓度10μM)。再有，为避免污染，每次转移步骤后，针具应该清洗三次包括水(1X)，乙醇(1X)和水(2X)----多余液体在每次清洗后甩掉，用纸和kimwipe干燥。这之后50μl膜蛋白加到每个样品孔中(对照样品孔含有不带GPCR融合蛋白的膜)，室温下预育5-10分钟，这之后，50μl结合缓冲液中的[35S]GTPγS(0.6nM)加到每个样品孔中，随后室温下于摇床上温育60分钟(再有，本实施例中，培养板用金属箔盖住。然后将板以4000RPM22℃下旋转15分钟终止分析，然后用8道支管吸净板，用板盖盖住，最后板用设置在“Prot.#37”档(依各商家说明)的Wallac 1450读数。
B.环AMP分析另一种直接识别侯选化合物的分析方法是基于环化酶的分析。除了直接识别以外，这种方法也可用做独立的方法，证实上述[35S]GTPγS分析所得的结果。
最好是应用经改进的Flash PlateTM腺苷酸环化酶试剂盒(NewEngland Nuclear；Cat.no.SMP004A)，按下面的规程直接识别出候选化合物为组成型活化的孤儿GPCR的反激动剂和激动剂。
转染后大约三天收集转染细胞，在含有20mM HEPES(pH7.4)和10mM MgCl2的缓冲液中，通过将悬浮的细胞均化来制备膜，用Brinkman PolytronTM在冰上进行均化大约10秒，产生的匀浆4℃下49,000×g离心15分钟，然后产生的沉淀重悬于含有20mM HEPES(pH7.4)和0.1mM EDTA的缓冲液中，均化10秒，随后4℃下49,000×g离心15分钟，产生的沉淀-80℃保存备用。直接识别筛选当天，将膜沉淀于室温下缓慢融化，并重悬于含有20mM HEPES(pH7.4)和10mMMgCl2的缓冲液中，产生0.6mg/ml的最终蛋白浓度(重悬的膜置于冰上备用)。
cAMP标准物和测定缓冲液(2μCi示踪物[125I cAMP 100μl]加到11ml测定缓冲液中)，根据商家说明制备并保管。制备新鲜的分析缓冲液用于筛选，其中包含20mM HEPES(pH7.4)，10mM MgCl2，20mM磷酸肌酸(Sigma)，0.1单位/ml肌酸磷酸激酶(Sigma)，50μM GTP(Sigma)，及0.2mM ATP(Sigma)；分析缓冲液可在冰上保存备用。
优选将以上识别的候选化合物(如冷冻，室温下融化)加到96孔板的样品孔中(3μl/孔，12μM的分析终浓度)，与40μl膜蛋白(30μg/孔)和50μl分析缓冲液合在一起。然后将该混合物在室温下温育30分钟，同时轻轻摇动。
温育完成后，100μl测定缓冲液加到每个样品孔中，随后放置2～4小时，然后板在Wallac MicroBetaTM读板器中用“Prot.#31”档计数(依各商家说明操作)。
在图12中显示了一个具有代表性的筛选分析平板(96孔板)。每条代表各孔中不同化合物，和以上实施例5(a)中制备的RUP13-Gsα融合蛋白构建体的结果。图12中的典型结果也提供了标准偏差，其获得是基于各平板平均值(“m”)，平均值连同两个从初步筛选过程中随机选取作为“先导”的反激动剂，包括选择出这样的候选化合物，其反应降低率至少为平均反应值减去两倍的标准偏差。相反的，从初步筛选过程中任意优先选取作为“先导”的激动剂，包括选择出这样的候选化合物，其反应增加率至少为平均反应值加两倍的标准偏差。基于以上的选择程序，以下孔中的侯选化合物可分别作为孔A2和G9中RUP13的可能的反激动剂(化合物A)和激动剂(化合物B)被直接识别。参见图12。为了清楚起见特别说明这些化合物在未知该GPCR内源配体的情况下被直接识别。通过这种基于受体功能而非化合物的结合亲和性的分析技术，我们可以确认能够降低受体功能活性的化合物(化合物A)，也能确认可增加受体功能活性的化合物(化合物B)。基于这些受体在肺部的定位(见，例如实施例6中的hRUP13和hRUP21)，可以发明对治疗肺癌有潜在疗效的药剂。
本专利申请文件中提到的每个文献，包括共同未决的申请及相关专利申请在内，除非有特别说明，均以其全文引入本申请作参考。在本领域技术人员理解范围内的针对所公开之发明进行的修改和延伸均在上述公开及所附权利要求的范围之内。
虽然本领域的普通技术人员可以得到许多不同的载体为内源和非内源GPCR的目的使用，但最好是用pCMV载体。按照国际承认用于专利程序的微生物保藏布达佩斯条约，该载体于1998年10月13日保藏在美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection)(ATCC)(University Blvd，Manassas，VA20110-2209 USA7)。其DNA经ATCC测定并经确认处于存活状态，ATCC为pCMV给出了下列保藏号ATCC#203351。
序列表<110>阿瑞那制药公司(Arena Pharmaceuticals，Inc.)陈若平(Ruoping CHEN)；邓杭(Huong T.DANG)；凯文·P·洛斯(Kevin P.LOWITZ)<120>非内源组成型活化的人G蛋白偶联受体(Non-Endogenous，ConstitutivelyActivated Human G Protein-Coupled Receptors)<130>AREN0087<150>60/166,088<151>1999-11-17<150>60/166,369<151>1999-11-17<150>60/166,099<151>1999-11-17<150>61/171,902<151>1999-12-23<150>60/171,901<151>1999-12-23<150>60/171,900<151>1999-12-23<150>60/181,749<151>2000-02-11<150>60/189,258<151>2000-03-14<150>60/189,259<151>2000-03-14<150>60/195,899<151>2000-04-10<150>60/196,078<151>2000-04-10<150>60/195,898<151>2000-04-10<150>60/200,419<151>2000-04-28<150>60/203,630<151>2000-05-12<150>60/210,741<151>2000-06-12<150>60/210,982<151>2000-06-12<150>60/226,760<151>2000-08-21<150>60/235,779<151>2000-09-26
<150>60/235,418<151>2000-09-26<150>60/242,332<151>2000-10-20<150>60/242,343<151>2000-10-20<150>60/243,019<151>2000-10-24<160>133<170>PatentIn version 3.0<210>1<211>1155<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>1atggcagccc agaatggaaa caccagtttc acacccaact ttaatccacc ccaagaccat 60gcctcctccc tctcctttaa cttcagttat ggtgattatg acctccctat ggatgaggat 120gaggacatga ccaagacccg gaccttcttc gcagccaaga tcgtcattgg cattgcactg 180gcaggcatca tgctggtctg cggcatcggt aactttgtct ttatcgctgc cctcacccgc 240tataagaagt tgcgcaacct caccaatctg ctcattgcca acctggccat ctccgacttc 300ctggtggcca tcatctgctg ccccttcgag atggactact acgtggtacg gcagctctcc 360tgggagcatg gccacgtgct ctgtgcctcc gtcaactacc tgcgcaccgt ctccctctac 420gtctccacca atgccttgct ggccattgcc attgacagat atctcgccat cgttcacccc 480ttgaaaccac ggatgaatta tcaaacggcc tccttcctga tcgccttggt ctggatggtg 540tccattctca ttgccatccc atcggcttac tttgcaacag aaacggtcct ctttattgtc 600aagagccagg agaagatctt ctgtggccag atctggcctg tggatcagca gctctactac 660aagtcctact tcctcttcat ctttggtgtc gagttcgtgg gccctgtggt caccatgacc 720ctgtgctatg ccaggatctc ccgggagctc tggttcaagg cagtccctgg gttccagacg 780gagcagattc gcaagcggct gcgctgccgc aggaagacgg tcctggtgct catgtgcatt 840ctcacggcct atgtgctgtg ctgggcaccc ttctacggtt tcaccatcgt tcgtgacttc 900ttccccactg tgttcgtgaa ggaaaagcac tacctcactg ccttctacgt ggtcgagtgc 960atcgccatga gcaacagcat gatcaacacc gtgtgcttcg tgacggtcaa gaacaacacc1020atgaagtact tcaagaagat gatgctgctg cactggcgtc cctcccagcg ggggagcaag1080tccagtgctg accttgacct cagaaccaac ggggtgccca ccacagaaga ggtggactgt1140atcaggctga agtga 1155<210>2<211>384
<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>2Met Ala Ala Gln Asn Gly Asn Thr Ser Phe Thr Pro Asn Phe Asn Pro1 5 10 15Pro Gln Asp His Ala Ser Ser Leu Ser Phe Asn Phe Ser Tyr Gly Asp20 25 30Tyr Asp Leu Pro Met Asp Glu Asp Glu Asp Met Thr Lys Thr Arg Thr35 40 45Phe Phe Ala Ala Lys Ile Val Ile Gly Ile Ala Leu Ala Gly Ile Met50 55 60Leu Val Cys Gly Ile Gly Asn Phe Val Phe Ile Ala Ala Leu Thr Arg65 70 75 80Tyr Lys Lys Leu Arg Asn Leu Thr Asn Leu Leu Ile Ala Asn Leu Ala85 90 95Ile Ser Asp Phe Leu Val Ala Ile Ile Cys Cys Pro Phe Glu Met Asp100 105 110Tyr Tyr Val Val Arg Gln Leu Ser Trp Glu His Gly His Val Leu Cys115 120 125Ala Ser Val Asn Tyr Leu Arg Thr Val Ser Leu Tyr Val Ser Thr Asn130 135 140Ala Leu Leu Ala Ile Ala Ile Asp Arg Tyr Leu Ala Ile Val His Pro145 150 155 160Leu Lys Pro Arg Met Asn Tyr Gln Thr Ala Ser Phe Leu Ile Ala Leu165 170 175Val Trp Met Val Ser Ile Leu Ile Ala Ile Pro Ser Ala Tyr Phe Ala180 185 190Thr Glu Thr Val Leu Phe Ile Val Lys Ser Gln Glu Lys Ile Phe Cys195 200 205Gly Gln Ile Trp Pro Val Asp Gln Gln Leu Tyr Tyr Lys Ser Tyr Phe210 215 220Leu Phe Ile Phe Gly Val Glu Phe Val Gly Pro Val Val Thr Met Thr225 230 235 240Leu Cys Tyr Ala Arg Ile Ser Arg Glu Leu Trp Phe Lys Ala Val Pro245 250 255Gly Phe Gln Thr Glu Gln Ile Arg Lys Arg Leu Arg Cys Arg Arg Lys260 265 270Thr Val Leu Val Leu Met Cys Ile Leu Thr Ala Tyr Val Leu Cys Trp275 280 285Ala Pro Phe Tyr Gly Phe Thr Ile Val Arg Asp Phe Phe Pro Thr Val290 295 300Phe Val Lys Glu Lys His Tyr Leu Thr Ala Phe Tyr Val Val Glu Cys305 310 315 320
Ile Ala Met Ser Asn Ser Met Ile Asn Thr Val Cys Phe Val Thr Val325 330 335Lys Asn Asn Thr Met Lys Tyr Phe Lys Lys Met Met Leu Leu His Trp340 345 350Arg Pro Ser Gln Arg Gly Ser Lys Ser Ser Ala Asp Leu Asp Leu Arg355 360 365Thr Asn Gly Val Pro Thr Thr Glu Glu Val Asp Cys Ile Arg Leu Lys370 375 380<210>3<211>1260<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>3atgctggcag ctgcctttgc agactctaac tccagcagca tgaatgtgtc ctttgctcac 60ctccactttg ccggagggta cctgccctct gattcccagg actggagaac catcatcccg 120gctctcttgg tggctgtctg cctggtgggc ttcgtgggaa acctgtgtgt gattggcatc 180ctccttcaca atgcttggaa aggaaagcca tccatgatcc actccctgat tctgaatctc 240agcctggctg atctctccct cctgctgttt tctgcaccta tccgagctac ggcgtactcc 300aaaagtgttt gggatctagg ctggtttgtc tgcaagtcct ctgactggtt tatccacaca 360tgcatggcag ccaagagcct gacaatcgtt gtggtggcca aagtatgctt catgtatgca 420agtgacccag ccaagcaagt gagtatccac aactacacca tctggtcagt gctggtggcc 480atctggactg tggctagcct gttacccctg ccggaatggt tctttagcac catcaggcat 540catgaaggtg tggaaatgtg cctcgtggat gtaccagctg tggctgaaga gtttatgtcg 600atgtttggta agctctaccc actcctggca tttggccttc cattattttt tgccagcttt 660tatttctgga gagcttatga ccaatgtaaa aaacgaggaa ctaagactca aaatcttaga 720aaccagatac gctcaaagca agtcacagtg atgctgctga gcattgccat catctctgct 780ctcttgtggc tccccgaatg ggtagcttgg ctgtgggtat ggcatctgaa ggctgcaggc 840ccggccccac cacaaggttt catagccctg tctcaagtct tgatgttttc catctcttca 900gcaaatcctc tcatttttct tgtgatgtcg gaagagttca gggaaggctt gaaaggtgta 960tggaaatgga tgataaccaa aaaacctcca actgtctcag agtctcagga aacaccagct1020ggcaactcag agggtcttcc tgacaaggtt ccatctccag aatccccagc atccatacca1080gaaaaagaga aacccagctc tccctcctct ggcaaaggga aaactgagaa ggcagagatt1140cccatccttc ctgacgtaga gcagttttgg catgagaggg acacagtccc ttctgtacag1200gacaatgacc ctatcccctg ggaacatgaa gatcaagaga caggggaagg tgttaaatag1260<210>4<211>419<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)
<400>4Met Leu Ala Ala Ala Phe Ala Asp Ser Asn Ser Ser Ser Met Asn Val1 5 10 15Ser Phe Ala His Leu His Phe Ala Gly Gly Tyr Leu Pro Ser Asp Ser20 25 30Gln Asp Trp Arg Thr Ile Ile Pro Ala Leu Leu Val Ala Val Cys Leu35 40 45Val Gly Phe Val Gly Asn Leu Cys Val Ile Gly Ile Leu Leu His Asn50 55 60Ala Trp Lys Gly Lys Pro Ser Met Ile His Ser Leu Ile Leu Asn Leu65 70 75 80Ser Leu Ala Asp Leu Ser Leu Leu Leu Phe Ser Ala Pro Ile Arg Ala85 90 95Thr Ala Tyr Ser Lys Ser Val Trp Asp Leu Gly Trp Phe Val Cys Lys100 105 110Ser Ser Asp Trp Phe Ile His Thr Cys Met Ala Ala Lys Ser Leu Thr115 120 125Ile Val Val Val Ala Lys Val Cys Phe Met Tyr Ala Ser Asp Pro Ala130 135 140Lys Gln Val Ser Ile His Asn Tyr Thr Ile Trp Ser Val Leu Val Ala145 150 155 160Ile Trp Thr Val Ala Ser Leu Leu Pro Leu Pro Glu Trp Phe Phe Ser165 170 175Thr Ile Arg His His Glu Gly Val Glu Met Cys Leu Val Asp Val Pro180 185 190Ala Val Ala Glu Glu Phe Met Ser Met Phe Gly Lys Leu Tyr Pro Leu195 200 205Leu Ala Phe Gly Leu Pro Leu Phe Phe Ala Ser Phe Tyr Phe Trp Arg210 215 220Ala Tyr Asp Gln Cys Lys Lys Arg Gly Thr Lys Thr Gln Asn Leu Arg225 230 235 240Asn Gln Ile Arg Ser Lys Gln Val Thr Val Met Leu Leu Ser Ile Ala245 250 255Ile Ile Ser Ala Leu Leu Trp Leu Pro Glu Trp Val Ala Trp Leu Trp260 265 270Val Trp His Leu Lys Ala Ala Gly Pro Ala Pro Pro Gln Gly Phe Ile275 280 285Ala Leu Ser Gln Val Leu Met Phe Ser Ile Ser Ser Ala Asn Pro Leu290 295 300Ile Phe Leu Val Met Ser Glu Glu Phe Arg Glu Gly Leu Lys Gly Val305 310 315 320Trp Lys Trp Met Ile Thr Lys Lys Pro Pro Thr Val Ser Glu Ser Gln325 330 335
Glu Thr Pro Ala Gly Asn Ser Glu Gly Leu Pro Asp Lys Val Pro Ser340 345 350Pro Glu Ser Pro Ala Ser Ile Pro Glu Lys Glu Lys Pro Ser Ser Pro355 360 365Ser Ser Gly Lys Gly Lys Thr Glu Lys Ala Glu Ile Pro Ile Leu Pro370 375 380Asp Val Glu Gln Phe Trp Hls Glu Arg Asp Thr Val Pro Ser Val Gln385 390 395 400Asp Asn Asp Pro Ile Pro Trp Glu His Glu Asp Gln Glu Thr Gly Glu405 410 415Gly Val Lys<210>5<211>1014<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>5atggggaacg attctgtcag ctacgagtat ggggattaca gcgacctctc ggaccgccct 60gtggactgcc tggatggcgc ctgcctggcc atcgacccgc tgcgcgtggc cccgctccca 120ctgtatgccg ccatcttcct ggtgggggtg ccgggcaatg ccatggtggc ctgggtggct 180gggaaggtgg cccgccggag ggtgggtgcc acctggttgc tccacctggc cgtggcggat 240ttgctgtgct gtttgtctct gcccatcctg gcagtgccca ttgcccgtgg aggccactgg 300ccgtatggtg cagtgggctg tcgggcgctg ccctccatca tcctgctgac catgtatgcc 360agcgtcctgc tcctggcagc tctcagtgcc gacctctgct tcctggctct cgggcctgcc 420tggtggtcta cggttcagcg ggcgtgcggg gtgcaggtgg cctgtggggc agcctggaca 480ctggccttgc tgctcaccgt gccctccgcc atctaccgcc ggctgcacca ggagcacttc 540ccagcccggc tgcagtgtgt ggtggactac ggcggctcct ccagcaccga gaatgcggtg 600actgccatcc ggtttctttt tggcttcctg gggcccctgg tggccgtggc cagctgccac 660agtgccctcc tgtgctgggc agcccgacgc tgccggccgc tgggcacagc cattgtggtg 720gggttttttg tctgctgggc accctaccac ctgctggggc tggtgctcac tgtggcggcc 780ccgaactccg cactcctggc cagggccctg cgggctgaac ccctcatcgt gggccttgcc 840ctcgctcaca gctgcctcaa tcccatgctc ttcctgtatt ttgggagggc tcaactccgc 900cggtcactgc cagctgcctg tcactgggcc ctgagggagt cccagggcca ggacgaaagt 960gtggacagca agaaatccac cagccatgac ctggtctcgg agatggaggt gtag 1014<210>6<211>337<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)
<400>6Met Gly Asn Asp Ser Val Ser Tyr Glu Tyr Gly Asp Tyr Ser Asp Leu1 5 10 15Ser Asp Arg Pro Val Asp Cys Leu Asp Gly Ala Cys Leu Ala Ile Asp20 25 30Pro Leu Arg Val Ala Pro Leu Pro Leu Tyr Ala Ala Ile Phe Leu Val35 40 45Gly Val Pro Gly Asn Ala Met Val Ala Trp Val Ala Gly Lys Val Ala50 55 60Arg Arg Arg Val Gly Ala Thr Trp Leu Leu His Leu Ala Val Ala Asp65 70 75 80Leu Leu Cys Cys Leu Ser Leu Pro Ile Leu Ala Val Pro Ile Ala Arg85 90 95Gly Gly His Trp Pro Tyr Gly Ala Val Gly Cys Arg Ala Leu Pro Ser100 105 110Ile Ile Leu Leu Thr Met Tyr Ala Ser Val Leu Leu Leu Ala Ala Leu115 120 125Ser Ala Asp Leu Cys Phe Lau Ala Leu Gly Pro Ala Trp Trp Ser Thr130 135 140Val Gln Arg Ala Cys Gly Val Gln Val Ala Cys Gly Ala Ala Trp Thr145 150 155 160Leu Ala Leu Leu Leu Thr Val Pro Ser Ala Ile Tyr Arg Arg Leu His165170 175Gln Glu His Phe Pro Ala Arg Leu Gln Cys Val Val Asp Tyr Gly Gly180 185 190Ser Ser Ser Thr Glu Asn Ala Val Thr Ala Ile Arg Phe Leu Phe Gly195 200 205Phe Leu Gly Pro Leu Val Ala Val Ala Ser Cys His Ser Ala Leu Leu210 215 220Cys Trp Ala Ala Arg Arg Cys Arg Pro Leu Gly Thr Ala Ile Val Val225 230 235 240Gly Phe Phe Val Cys Trp Ala Pro Tyr His Leu Leu Gly Leu Val Leu245 250 255Thr Val Ala Ala Pro Asn Ser Ala Leu Leu Ala Arg Ala Leu Arg Ala260 265 270Glu Pro Leu Ile Val Gly Leu Ala Leu Ala His Ser Cys Leu Asn Pro275 280 285Met Leu Phe Leu Tyr Phe Gly Arg Ala Gln Leu Arg Arg Ser Leu Pro290 295 300Ala Ala Cys His Trp Ala Leu Arg Glu Ser Gln Gly Gln Asp Glu Ser305 310 315 320Val Asp Ser Lvs Lys Ser Thr Ser His Asp Leu Val Ser Glu Met Glu325 330 335
Val<210>7<211>1272<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>7atgttgtgtc accgtggtgg ccagctgata gtgccaatca tcccactttg ccctgagcac 60tcctgcaggg gtagaagact ccagaacctt ctctcaggcc catggcccaa gcagcccatg 120gaacttcata acctgagctc tccatctccc tctctctcct cctctgttct ccctccctcc 180ttctctccct caccctcctc tgctccctct gcctttacca ctgtgggggg gtcctctgga 240gggccctgcc accccacctc ttcctcgctg gtgtctgcct tcctggcacc aatcctggcc 300ctggagtttg tcctgggcct ggtggggaac agtttggccc tcttcatctt ctgcatccac 360acgcggccct ggacctccaa cacggtgttc ctggtcagcc tggtggccgc tgacttcctc 420ctgatcagca acctgcccct ccgcgtggac tactacctcc tccatgagac ctggcgcttt 480ggggctgctg cctgcaaagt caacctcttc atgctgtcca ccaaccgcac ggccagcgtt 540gtcttcctca cagccatcgc actcaaccgc tacctgaagg tggtgcagcc ccaccacgtg 600ctgagccgtg cttccgtggg ggcagctgcc cgggtggccg ggggactctg ggtgggcatc 660ctgctcctca acgggcacct gctcctgagc accttctccg gcccctcctg cctcagctac 720agggtgggca cgaagccctc ggcctcgctc cgctggcacc aggcactgta cctgctggag 780ttcttcctgc cactggcgct catcctcttt gctattgtga gcattgggct caccatccgg 840aaccgtggtc tgggcgggca ggcaggcccg cagagggcca tgcgtgtgct ggccatggtg 900gtggccgtct acaccatctg cttcttgccc agcatcatct ttggcatggc ttccatggtg 960gctttctggc tgtccgcctg ccgatccctg gacctctgca cacagctctt ccatggctcc1020ctggccttca cctacctcaa cagtgtcctg gaccccgtgc tctactgctt ctctagcccc1080aacttcctcc accagagccg ggccttgctg ggcctcacgc ggggccggca gggcccagtg1140agcgacgaga gctcctacca accctccagg cagtggcgct accgggaggc ctctaggaag1200gcggaggcca tagggaagct gaaagtgcag ggcgaggtct ctctggaaaa ggaaggctcc1260tcccagggct ga1272<210>8<211>423<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>8Met Leu Cys His Arg Gly Gly Gln Leu Ile Val Pro Ile Ile Pro Leu1 5 10 15Cys Pro Glu His Ser Cys Arg Gly Arg Arg Leu Gln Asn Leu Leu Ser
20 25 30Gly Pro Trp Pro Lys Gln Pro Met Glu Leu His Asn Leu Ser Ser Pro35 40 45Ser Pro Ser Leu Ser Ser Ser Val Leu Pro Pro Ser Phe Ser Pro Ser50 55 60Pro Ser Ser Ala Pro Ser Ala Phe Thr Thr Val Gly Gly Ser Ser Gly65 70 75 80Gly Pro Cys His Pro Thr Ser Ser Ser Leu Val Ser Ala Phe Leu Ala85 90 95Pro Ile Leu Ala Leu Glu Phe Val Leu Gly Leu Val Gly Asn Ser Leu100 105 110Ala Leu Phe Ile Phe Cys Ile His Thr Arg Pro Trp Thr Ser Asn Thr115 120 125Val Phe Leu Val Ser Leu Val Ala Ala Asp Phe Leu Leu Ile Ser Asn130 135 140Leu Pro Leu Arg Val Asp Tyr Tyr Leu Leu His Glu Thr Trp Arg Phe145 150 155 160Gly Ala Ala Ala Cys Lys Val Asn Leu Phe Met Leu Ser Thr Asn Arg165 170 175Thr Ala Ser Val Val Phe Leu Thr Ala Ile Ala Leu Asn Arg Tyr Leu180 185 190LyS Val Val Gln Pro His His Val Leu Ser Arg Ala Ser Val Gly Ala195 200 205Ala Ala Arg Val Ala Gly Gly Leu Trp Val Gly Ile Leu Leu Leu Asn210 215 220Gly His Leu Leu Leu Ser Thr Phe Ser Gly Pro Ser Cys Leu Ser Tyr225 230 235 240Arg Val Gly Thr Lys Pro Ser Ala Ser Leu Arg Trp His Gln Ala Leu245 250 255Tvr Leu Leu Glu Phe Phe Leu Pro Leu Ala Leu Ile Leu Phe Ala Ile260 265 270Val Ser Ile Gly Leu Thr Ile Arg Asn Arg Gly Leu Gly Gly Gln Ala275 280 285Gly Pro Gln Arg Ala Met Arg Val Leu Ala Met Val Val Ala Val Tyr290 295 300Thr Ile Cys Phe Leu Pro Ser Ile Ile Phe Gly Met Ala Ser Met Val305 310 315 320Ala Phe Trp Leu Ser Ala Cys Arg Ser Leu Asp Leu Cys Thr Gln Leu325 330 335Phe His Gly Ser Leu Ala Phe Thr Tyr Leu Asn Ser Val Leu Asp Pro340 345 350Val Leu Tyr Cys Phe Ser Ser Pro Asn Phe Leu His Gln Ser Arg Ala355 360 365
Leu Leu Gly Leu Thr Arg Gly Arg Gln Gly Pro Val Ser Asp Glu Ser370 375 380Ser Tyr Gln Pro Ser Arg Gln Trp Arg Tyr Arg Glu Ala Ser Arg Lys385 390 395 400Ala Glu Ala Ile Gly Lys Leu Lys Val Gln Gly Glu Val Ser Leu Glu405 410 4l5Lys Glu Gly Ser Ser Gln Gly420<210>9<211>966<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>9atgaaccaga ctttgaatag cagtgggacc gtggagtcag ccctaaacta ttccagaggg 60agcacagtgc acacggccta cctggtgctg agctccctgg ccatgttcac ctgcctgtgc120gggatggcag gcaacagcat ggtgatctgg ctgctgggct ttcgaatgca caggaacccc180ttctgcatct atatcctcaa cctggcggca gccgacctcc tcttcctctt cagcatggct240tccacgctca gcctggaaac ccagcccctg gtcaatacca ctgacaaggt ccacgagctg300atgaagagac tgatgtactt tgcctacaca gtgggcctga gcctgctgac ggccatcagc360acccagcgct gtctctctgt cctcttccct atctggttca agtgtcaccg gcccaggcac420ctgtcagcct gggtgtgtgg cctgctgtgg acactctgtc tcctgatgaa cgggttgacc480tcttccttct gcagcaagtt cttgaaattc aatgaagatc ggtgcttcag ggtggacatg540gtccaggccg ccctcatcat gggggtctta accccagtga tgactctgtc cagcctgacc600ctctttgtct gggtgcggag gagctcccag cagtggcggc ggcagcccac acggctgttc660gtggtggtcc tggcctctgt cctggtgttc ctcatctgtt ccctgcctct gagcatctac720tggtttgtgc tctactggtt gagcctgccg cccgagatgc aggtcctgtg cttcagcttg780tcacgcctct cctcgtccgt aagcagcagc gccaaccccg tcatctactt cctggtgggc840agccggagga gccacaggct gcccaccagg tccctgggga ctgtgctcca acaggcgctt900cgcgaggagc ccgagctgga aggtggggag acgcccaccg tgggcaccaa tgagatgggg960gcttga 966<210>10<211>321<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>10Met Asn Gln Thr Leu Asn Ser Ser Gly Thr Val Glu Ser Ala Leu Asn1 5 10 15Tyr Ser Arg Gly Ser Thr Val His Thr Ala Tyr Leu Val Leu Ser Ser20 25 30
Leu Ala Met Phe Thr Cys Leu Cys Gly Met Ala Gly Asn Ser Met Val35 40 45Ile Trp Leu Leu Gly Phe Arg Met His Arg Asn Pro Phe Cys Ile Tyr50 55 60Ile Leu Asn Leu Ala Ala Ala Asp Leu Leu Phe Leu Phe Ser Met Ala65 70 75 80Ser Thr Leu Ser Leu Glu Thr Gln Pro Leu Val Asn Thr Thr Asp Lys85 90 95Val His Glu Leu Met Lys Arg Leu Met Tyr Phe Ala Tyr Thr Val Gly100 105 110Leu Ser Leu Leu Thr Ala Ile Ser Thr Gln Arg Cys Leu Ser Val Leu115 120 125Phe Pro Ile Trp Phe Lys Cys His Arg Pro Arg His Leu Ser Ala Trp130 135 140Val Cys Gly Leu Leu Trp Thr Leu Cys Leu Leu Met Asn Gly Leu Thr145 150 155 160Ser Ser Phe Cys Ser Lys Phe Leu Lys Phe Asn Glu Asp Arg Cys Phe165 170 175Arg Val Asp Met Val Gln Ala Ala Leu Ile Met Gly Val Leu Thr Pro180 185 190Val Met Thr Leu Ser Ser Leu Thr Leu Phe Val Trp Val Arg Arg Ser195 200 205Ser Gln Gln Trp Arg Arg Gln Pro Thr Arg Leu Phe Val Val Val Leu210 215 220Ala Ser Val Leu Val Phe Leu Ile Cys Ser Leu Pro Leu Ser Ile Tyr225 230 235 240Trp Phe Val Leu Tyr Trp Leu Ser Leu Pro Pro Glu Met Gln Val Leu245 250 255Cys Phe Ser Leu Ser Arg Leu Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Ala Asn260 265 270Pro Val Ile Tyr Phe Leu Val Gly Ser Arg Arg Ser His Arg Leu Pro275 280 285Thr Arg Ser Leu Gly Thr Val Leu Gln Gln Ala Leu Arg Glu Glu Pro290 295 300Glu Leu Glu Gly Gly Glu Thr Pro Thr Val Gly Thr Asn Glu Met Gly305 310 315 320Ala<210>11<211>1356<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>11atggagtcct cacccatccc ccagtcatca gggaactctt ccactttggg gagggtccct 60
caaaccccag gtccctctac tgccagtggg gtcccggagg tggggctacg ggatgttgct 120tcggaatctg tggccctctt cttcatgcrc ctgctggact tgactgctgt ggctggcaat 180gccgctgtga tggccgtgat cgccaagacg cctgccctcc gaaaatttgt cttcgtcttc 240cacctctgcc tggtggacct gctggctgcc ctgaccctca tgcccctggc catgctctcc 300agctctgccc tctttgacca cgccctcttt ggggaggtgg cctgccgcct ctacttgttt 360ctgagcgtgt gctttgtcag cctggccatc ctctcggtgt cagccatcaa tgtggagcgc 420tactattacg tagtccaccc catgcgctac gaggtgcgca tgacgctggg gctggtggcc 480tctgtgctgg tgggtgtgtg ggtgaaggcc ttggccatgg cttctgtgcc agtgttggga 540agggtctcct gggaggaagg agctcccagt gtccccccag gctgttcact ccagtggagc 600cacagtgcct actgccagct ttttgtggtg gtctttgctg tcctttactt tctgttgccc 660ctgctcctca tacttgtggt ctactgcagc atgttccgag tggcccgcgt ggctgccatg 720cagcacgggc cgctgcccac gtggatggag acaccccggc aacgctccga atctctcagc 780agccgctcca cgatggtcac cagctcgggg gccccccaga ccaccccaca ccggacgttt 840gggggaggga aagcagcagt ggttctcctg gctgtggggg gacagttcct gctctgttgg 900ttgccctact tctctttcca cctctatgtt gccctgagtg ctcagcccat ttcaactggg 960caggtggaga gtgtggtcac ctggattggc tacttttgct tcacttccaa ccctttcttc1020tatggatgtc tcaaccggca gatccggggg gagctcagca agcagtttgt ctgcttcttc1080aagccagctc cagaggagga gctgaggctg cctagccggg agggctccat tgaggagaac1140ttcctgcagt tccttcaggg gactggctgt ccttctgagt cctgggtttc ccgaccccta1200cccagcccca agcaggagcc acctgctgtt gactttcgaa tcccaggcca gatagctgag1260gagacctctg agttcctgga gcagcaactc accagcgaca tcatcatgtc agacagctac1320ctccgtcctg ccgcctcacc ccggctggag tcatga 1356<210>12<211>451<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>12Met Glu Ser Ser Pro Ile Pro Gln Ser Ser Gly Asn Ser Ser Thr Leu1 5 10 15Gly Arg Val Pro Gln Thr Pro Gly Pro Ser Thr Ala Ser Gly Val Pro20 25 30Glu Val Gly Leu Arg Asp Val Ala Ser Glu Ser Val Ala Leu Phe Phe35 40 45Met Leu Leu Leu Asp Leu Thr Ala Val Ala Gly Asn Ala Ala Val Met50 55 60
Ala Val Ile Ala Lys Thr Pro Ala Leu Arg Lys Phe Val Phe Val Phe65 70 75 80His Leu Cys Leu Val Asp Leu Leu Ala Ala Leu Thr Leu Met Pro Leu85 90 95Ala Met Leu Ser Ser Ser Ala Leu Phe Asp His Ala Leu Phe Gly Glu100 105 110Val Ala Cys Arg Leu Tyr Leu Phe Leu Ser Val Cys Phe Val Ser Leu115 120 125Ala Ile Leu Ser Val Ser Ala Ile Asn Val Glu Arg Tyr Tyr Tyr Val130 135 140Val His Pro Met Arg Tyr Glu Val Arg Met Thr Leu Gly Leu Val Ala145 150 155 160Ser Val Leu Val Gly Val Trp Val Lys Ala Leu Ala Met Ala Ser Val165 170 175Pro Val Leu Gly Arg Val Ser Trp Glu Glu Gly Ala Pro Ser Val Pro180 185 190Pro Gly Cys Ser Leu Gln Trp Ser His Ser Ala Tyr Cys Gln Leu Phe195 200 205Val Val Val Phe Ala Val Leu Tyr Phe Leu Leu Pro Leu Leu Leu Ile210 215 220Leu Val Val Tyr Cys Ser Met Phe Arg Val Ala Arg Val Ala Ala Met225 230 235 240Gln His Gly Pro Leu Pro Thr Trp Met Glu Thr Pro Arg Gln Arg Ser245 250 255Glu Ser Leu Ser Ser Arg Ser Thr Met Val Thr Ser Ser Gly Ala Pro260 265 270Gln Thr Thr Pro His Arg Thr Phe Gly Gly Gly Lys Ala Ala Val Val275 280 285Leu Leu Ala Val Gly Gly Gln Phe Leu Leu Cys Trp Leu Pro Tyr Phe290 295 300Ser Phe His Leu Tyr Val Ala Leu Ser Ala Gln Pro Ile Ser Thr Gly305 310 315 320Gln Val Glu Ser Val Val Thr Trp Ile Gly Tyr Phe Cys Phe Thr Ser325 330 335Asn Pro Phe Phe Tyr Gly Cys Leu Asn Arg Gln Ile Arg Gly Glu Leu340 345 350Ser Lys Gln Phe Val Cys Phe Phe Lys Pro Ala Pro Glu Glu Glu Leu355 360 365Arg Leu Pro Ser Arg Glu Gly Ser Ile Glu Glu Asn Phe Leu GLn Phe370 375 380Leu Gln Gly Thr Gly Cys Pro Ser Glu Ser Trp Val Ser Arg Pro Leu385 390 395 400Pro Ser Pro Lys Gln Glu Pro Pro Ala Val Asp Phe Arg Ile Pro Gly405 410 415
Gln Ile Ala Glu Glu Thr Ser Glu Phe Leu Glu Gln Gln Leu Thr Ser420 425 430Asp Ile Ile Met Ser Asp Ser Tyr Leu Arg Pro Ala Ala Ser Pro Arg435 440 445Leu Glu Ser450<210>13<211>1041<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>13atggagagaa aatttatgtc cttgcaacca tccatctccg tatcagaaat ggaaccaaat 60ggcaccttca gcaataacaa cagcaggaac tgcacaattg aaaacttcaa gagagaattt 120ttcccaattg tatatctgat aatatttttc tggggagtct tgggaaatgg gttgtccata 180tatgttttcc tgcagcctta taagaagtcc acatctgtga acgttttcat gctaaatctg 240gccatttcag atctcctgtt cataagcacg cttcccttca gggctgacta ttatcttaga 300ggctccaatt ggatatttgg agacctggcc tgcaggatta tgtcttattc cttgtatgtc 360aacatgtaca gcagtattta tttcctgacc gtgctgagtg ttgtgcgttt cctggcaatg 420gttcacccct ttcggcttct gcatgtcacc agcatcagga gtgcctggat cctctgtggg 480atcatatgga tccttatcat ggcttcctca ataatgctcc tggacagtgg ctctgagcag 540aacggcagtg tcacatcatg cttagagctg aatctctata aaattgctaa gctgcagacc 600atgaactata ttgccttggt ggtgggctgc ctgctgccat ttttcacact cagcatctgt 660tatctgctga tcattcgggt tctgttaaaa gtggaggtcc cagaatcggg gctgcgggtt 720tctcacagga aggcactgac caccatcatc atcaccttga tcatcttctt cttgtgtttc 780ctgccctatc acacactgag gaccgtccac ttgacgacat ggaaagtggg tttatgcaaa 840gacagactgc ataaagcttt ggttatcaca ctggccttgg cagcagccaa tgcctgcttc 900aatcctctgc tctattactt tgctggggag aattttaagg acagactaaa gtctgcactc 960agaaaaggcc atccacagaa ggcaaagaca aagtgtgttt tccctgttag tgtgtggttg1020agaaaggaaa caagagtata a 1041<210>14<211>346<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>14Met Glu Arg Lys Phe Met Ser Leu Gln Pro Ser Ile Ser Val Ser Glu1 5 10 15Met Glu Pro Asn Gly Thr Phe Ser Asn Asn Asn Ser Arg Asn Cys Thr20 25 30
Ile Glu Asn Phe Lys Arg Glu Phe Phe Pro Ile Val Tyr Leu Ile Ile35 40 45Phe Phe Trp Gly Val Leu Gly Asn Gly Leu Ser Ile Tyr Val Phe Leu50 55 60Gln Pro Tyr Lys Lys Ser Thr Ser Val Asn Val Phe Met Leu Asn Leu65 70 75 80Ala Ile Ser Asp Leu Leu Phe Ile Ser Thr Leu Pro Phe Arg Ala Asp85 90 95Tyr Tyr Leu Arg Gly Ser Asn Trp Ile Phe Gly Asp Leu Ala Cys Arg100 105 110Ile Met Ser Tyr Ser Leu Tyr Val Asn Met Tyr Ser Ser Ile Tyr Phe115 120 125Leu Thr Val Leu Ser Val Val Arg Phe Leu Ala Met Val His Pro Phe130 135 140Arg Leu Leu His Val Thr Ser Ile Arg Ser Ala Trp Ile Leu Cys Gly145 150 155 160Ile Ile Trp Ile Leu Ile Met Ala Ser Ser Ile Met Leu Leu Asp Ser165 170 175Gly Ser Glu Gln Asn Gly Ser Val Thr Ser Cys Leu Glu Leu Asn Leu180 185 190Tyr Lys Ile Ala Lys Leu Gln Thr Met Asn Tyr Ile Ala Leu Val Val195 200 205Gly Cys Leu Leu Pro Phe Phe Thr Leu Ser Ile Cys Tyr Leu Leu Ile210 215 220Ile Arg Val Leu Leu Lys Val Glu Val Pro Glu Ser Gly Leu Arg Val225 230 235 240Ser His Arg Lys Ala Leu Thr Thr Ile Ile Ile Thr Leu Ile Ile Phe245 250 255Phe Leu Cys Phe Leu Pro Tyr His Thr Leu Arg Thr Val His Leu Thr260 265 270Thr Trp Lys Val Gly Leu Cys Lys Asp Arg Leu His Lys Ala Leu Val275 280 285Ile Thr Leu Ala Leu Ala Ala Ala Asn Ala Cys Phe Asn Pro Leu Leu290 295 300Tyr Tyr Phe Ala Gly Glu Asn Phe Lys Asp Arg Leu Lys Ser Ala Leu305 310 315 320Arg Lys Gly His Pro Gln Lys Ala Lys Thr Lys Cys Val Phe Pro Val325 330 335Ser Val Trp Leu Arg Lys Glu Thr Arg Val340 345<210>15<211>1527<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)
<400>15atgacgtcca cctgcaccaa cagcacgcgc gagagtaaca gcagccacac gtgcatgccc 60ctctccaaaa tgcccatcag cctggcccac ggcatcatcc gctcaaccgt gctggttatc 120ttcctcgccg cctctttcgt cggcaacata gtgctggcgc tagtgttgca gcgcaagccg 180cagctgctgc aggtgaccaa ccgttttatc tttaacctcc tcgtcaccga cctgctgcag 240atttcgctcg tggccccctg ggtggtggcc acctctgtgc ctctcttctg gcccctcaac 300agccacttct gcacggccct ggttagcctc acccacctgt tcgccttcgc cagcgtcaac 360accattgtcg tggtgtcagt ggatcgctac ttgtccatca tccaccctct ctcctacccg 420tccaagatga cccagcgccg cggttacctg ctcctctatg gcacctggat tgtggccatc 480ctgcagagca ctcctccact ctacggctgg ggccaggctg cctttgatga gcgcaatgct 540ctctgctcca tgatctgggg ggccagcccc agctacacta ttctcagcgt ggtgtccttc 600atcgtcattc cactgattgt catgattgcc tgctactccg tggtgttctg tgcagcccgg 660aggcagcatg ctctgctgta caatgtcaag agacacagct tggaagtgcg agtcaaggac 720tgtgtggaga atgaggatga agagggagca gagaagaagg aggagttcca ggatgagagt 780gagtttcgcc gccagcatga aggtgaggtc aaggccaagg agggcagaat ggaagccaag 840gacggcagcc tgaaggccaa ggaaggaagc acggggacca gtgagagtag tgtagaggcc 900aggggcagcg aggaggtcag agagagcagc acggtggcca gcgacggcag catggagggt 960aaggaaggca gcaccaaagt tgaggagaac agcatgaagg cagacaaggg tcgcacagag1020gtcaaccagt gcagcattga cttgggtgaa gatgacatgg agtttggtga agacgacatc1080aatttcagtg aggatgacgt cgaggcagtg aacatcccgg agagcctccc acccagtcgt1140cgtaacagca acagcaaccc tcctctgccc aggtgctacc agtgcaaagc tgctaaagtg1200atcttcatca tcattttctc ctatgtgcta tccctggggc cctactgctt tttagcagtc1260ctggccgtgt gggtggatgt cgaaacccag gtaccccagt gggtgatcac cataatcatc1320tggcttttct tcctgcagtg ctgcatccac ccctatgtct atggctacat gcacaagacc1380attaagaagg aaatccagga catgctgaag aagttcttct gcaaggaaaa gcccccgaaa1440gaagatagcc acccagacct gcccggaaca gagggtggga ctgaaggcaa gattgtccct1500tcctacgatt ctgctacttt tccttga1527<210>16<211>508<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>16Met Thr Ser Thr Cys Thr Asn Ser Thr Arg Glu Ser Asn Ser Ser His1 5 10 15
Thr Cys Met Pro Leu Ser Lys Met Pro Ile Ser Leu Ala His Gly Ile20 25 30Ile Arg Ser Thr Val Leu Val Ile Phe Leu Ala Ala Ser Phe Val Gly35 40 45Asn Ile Val Leu Ala Leu Val Leu Gln Arg Lys Pro Gln Leu Leu Gln50 55 60Val Thr Asn Arg Phe Ile Phe Asn Leu Leu Val Thr Asp Leu Leu Gln65 70 75 80Ile Ser Leu Val Ala Pro Trp Val Val Ala Thr Ser Val Pro Leu Phe85 90 95Trp Pro Leu Asn Ser His Phe Cys Thr Ala Leu Val Ser Leu Thr His100 105 110Leu Phe Ala Phe Ala Ser Val Asn Thr Ile Val Val Val Ser Val Asp115 120 125Arg Tyr Leu Ser Ile Ile His Pro Leu Ser Tyr Pro Ser Lys Met Thr130 135 140Gln Arg Arg Gly Tyr Leu Leu Leu Tyr Gly Thr Trp Ile Val Ala Ile145 150 155 160Leu Gln Ser Thr Pro Pro Leu Tyr Gly Trp Gly Gln Ala Ala Phe Asp165 170 175Glu Arg Asn Ala Leu Cys Ser Met Ile Trp Gly Ala Ser Pro Ser Tyr180 185 190Thr Ile Leu Ser Val Val Ser Phe Ile Val Ile Pro Leu Ile Val Met195 200 205Ile Ala Cys Tyr Ser Val Val Phe Cys Ala Ala Arg Arg Gln His Ala210 215 220Leu Leu Tyr Asn Val Lys Arg His Ser Leu Glu Val Arg Val Lys Asp225 230 235 240Cys Val Glu Asn Glu Asp Glu Glu Gly Ala Glu Lys Lys Glu Glu Phe245 250 255Gln Asp Glu Ser Glu Phe Arg Arg Gln His Glu Gly Glu Val Lys Ala260 265 270Lys Glu Gly Arg Met Glu Ala Lys Asp Gly Ser Leu Lys Ala Lys Glu275 280 285Gly Ser Thr Gly Thr Ser Glu Ser Ser Val Glu Ala Arg Gly Ser Glu290 295 300Glu Val Arg Glu Ser Ser Thr Val Ala Ser Asp Gly Ser Met Glu Gly305 310 315 320Lys Glu Gly Ser Thr Lys Val Glu Glu Asn Ser Met Lys Ala Asp Lys325 330 335Gly Arg Thr Glu Val Asn Gln Cys Ser Ile Asp Leu Gly Glu Asp Asp340 345 350Met Glu Phe Gly Glu Asp Asp Ile Asn Phe Ser Glu Asp Asp Val Glu355 360 365
Ala Val Asn Ile Pro Glu Ser Leu Pro Pro ser Arg Arg Asn Ser Asn370 375 380Ser Asn Pro Pro Leu Pro Arg Cys Tyr Gln Cys Lys Ala Ala Lys Val385 390 395 400Ile Phe Ile Ile Ile Phe Ser Tyr Val Leu Ser Leu Gly Pro Tyr Cys405 410 415Phe Leu Ala Val Leu Ala Val Trp Val Asp Val Glu Thr Gln Val Pro420 425 430Gln Trp Val Ile Thr Ile Ile Ile Trp Leu Phe Phe Leu Gln Cys Cys435 440 445Ile His Pro Tyr Val Tyr Gly Tyr Met His Lys Thr Ile Lys Lys Glu450 455 460Ile Gln Asp Met Leu Lys Lys Phe Phe Cys Lys Glu Lys Pro Pro Lys465 470 475 480Glu Asp Ser His Pro Asp Leu Pro Gly Thr Glu Gly Gly Thr Glu Gly485 490 495Lys Ile Val Pro Ser Tyr Asp Ser Ala Thr Phe Pro500 505<210>17<211>1068<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>17atgcccttga cggacggcat ttcttcattt gaggacctct tggctaacaa tatcctcaga 60atatttgtct gggttatagc tttcattacc tgctttggaa atctttttgt cattggcatg120agatctttca ttaaagctga aaatacaact cacgctatgt ccatcaaaat cctttgttgc180gctgattgcc tgatgggtgt ttacttgttc tttgttggca ttttcgacat aaaataccga240gggcagtatc agaagtatgc cttgctgtgg atggagagcg tgcagtgccg cctcatgggg300ttcctggcca tgctgtccac cgaagtctct gttctgctac tgacctactt gactttggag360aagttcctgg tcattgtctt ccccttcagt aacattcgac ctggaaaacg gcagacctca420gtcatcctca tttgcatctg gatggcggga tttttaatag ctgtaattcc attttggaat480aaggattatt ttggaaactt ttatgggaaa aatggagtat gtttcccact ttattatgac540caaacagaag atattggaag caaagggtat tctcttggaa ttttcctagg tgtgaacttg600ctggcttttc tcatcattgt gttttcctat attactatgt tctgttccat tcaaaaaacc660gccttgcaga ccacagaagt aaggaattgt tttggaagag aggtggctgt tgcaaatcgt720ttctttttta tagtgttctc tgatgccatc tgctggattc ctgtatttgt agttaaaatc780ctttccctct tccgggtgga aataccagac acaatgactt cctggatagt gatttttttc840cttccagtta acagtgcttt gaatccaatc ctctatactc tcacaaccaa cttttttaag900gacaagttga aacagctgct gcacaaacat cagaggaaat caattttcaa aattaaaaaa960
aaaagtttat ctacatccat tgtgtggata gaggactcct cttccctgaa acttggggtt1020ttgaacaaaa taacacttgg agacagtata atgaaaccag tttcctag 1068<210>18<212>355<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>18Met Pro Leu Thr Asp Gly Ile Ser Ser Phe Glu Asp Leu Leu Ala Asn1 5 10 15Asn Ile Leu Arg Ile Phe Val Trp Val Ile Ala Phe Ile Thr Cys Phe20 25 30Gly Asn Leu Phe Val Ile Gly Met Arg Ser Phe Ile Lys Ala Glu Asn35 40 45Thr Thr His Ala Met Ser Ile Lys Ile Leu Cys Cys Ala Asp Cys Leu50 55 60Met Gly Val Tyr Leu Phe Phe Val Gly Ile Phe Asp Ile Lys Tyr Arg65 70 75 80Gly Gln Tyr Gln Lys Tyr Ala Leu Leu Trp Met Glu Ser Val Gln Cys85 90 95Arg Leu Met Gly Phe Leu Ala Met Leu Ser Thr Glu Val Ser Val Leu100 105 110Leu Leu Thr Tyr Leu Thr Leu Glu Lys Phe Leu Val Ile Val Phe Pro115 120 125Phe Ser Asn Ile Arg Pro Gly Lys Arg Gln Thr Ser Val Ile Leu Ile130 135 140Cys Ile Trp Met Ala Gly Phe Leu Ile Ala Val Ile Pro Phe Trp Asn145 150 155 160Lys Asp Tyr Phe Gly Asn Phe Tyr Gly Lys Asn Gly Val Cys Phe Pro165 170 175Leu Tyr Tyr Asp Gln Thr Glu Asp Ile Gly Ser Lys Gly Tyr Ser Leu180 185 190Gly Ile Phe Leu Gly Val Asn Leu Leu Ala Phe Leu Ile Ile Val Phe195 200 205Ser Tyr Ile Thr Met Phe Cys Ser Ile Gln Lys Thr Ala Leu Gln Thr210 215 220Thr Glu Val Arg Asn Cys Phe Gly Arg Glu Val Ala Val Ala Asn Arg225 230 235 240Phe Phe Phe Ile Val Phe Ser Asp Ala Ile Cys Trp Ile Pro Val Phe245 250 255Val Val Lys Ile Leu Ser Leu Phe Arg Val Glu Ile Pro Asp Thr Met260 265 270Thr Ser Trp Ile Val Ile Phe Phe Leu Pro Val Asn Ser Ala Leu Asn
275 280 285Pro Ile Leu Tyr Thr Leu Thr Thr Asn Phe Phe Lys Asp Lys Leu Lys290 295 300Gln Leu Leu His Lys His Gln Arg Lys Ser Ile Phe Lys Ile Lys Lys305 310 315 320Lys Ser Leu Ser Thr Ser Ile Val Trp Ile Glu Asp Ser Ser Ser Leu325 330 335Lys Leu Gly Val Leu Asn Lys Ile Thr Leu Gly Asp Ser Ile Met Lys340 345 350Pro Val Ser355<210>19<211>969<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>19atggatccaa ccatctcaac cttggacaca gaactgacac caatcaacgg aactgaggag 60actctttgct acaagcagac cttgagcctc acggtgctga cgtgcatcgt ttcccttgtc120gggctgacag gaaacgcagt tgtgctctgg ctcctgggct gccgcatgcg caggaacgcc180ttctccatct acatcctcga cttggccgca gcagacttcc tcttcctcag cggccgcctt240atatattccc tgttaagctt catcagtatc ccccatacca tctctaaaat cctctatcct300gtgatgatgt tttcctactt tgcaggcctg agctttctga gtgccgtgag caccgagcgc360tgcctgtccg tcctgtggcc catctggtac cgctgccacc gccccacaca cctgtcagcg420gtggtgtgtg tcctgctctg ggccctgtcc ctgctgcgga gcatcctgga gtggatgtta480tgtggcttcc tgttcagtgg tgctgattct gcttggtgtc aaacatcaga tttcatcaca540gtcgcgtggc tgattttttt atgtgtggtt ctctgtgggt ccagcctggt cctgctgatc600aggattctct gtggatcccg gaagataccg ctgaccaggc tgtacgtgac catcctgctc660acagtactgg tcttcctcct ctgtggcctg ccctttggca ttcagttttt cctattttta720tggatccacg tggacaggga agtcttattt tgtcatgttc atctagtttc tattttcctg780tccgctctta acagcagtgc caaccccatc atttacttct tcgtgggctc ctttaggcag840cgtcaaaata ggcagaacct gaagctggtt ctccagaggg ctctgcagga cgcgtctgag900gtggatgaag gtggagggca gcttcctgag gaaatcctgg agctgtcggg aagcagattg960gagcagtga969<210>20<211>322<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>20
Met Asp Pro Thr Ile Ser Thr Leu Asp Thr Glu Leu Thr Pro Ile Asn1 5 10 15Gly Thr Glu Glu Thr Leu Cys Tyr Lys Gln Thr Leu Ser Leu Thr Val20 25 30Leu Thr Cys Ile Val Ser Leu Val Gly Leu Thr Gly Asn Ala Val Val35 40 45Leu Trp Leu Leu Gly Cys Arg Met Arg Arg Asn Ala Phe Ser Ile Tyr50 55 60Ile Leu Asn Leu Ala Ala Ala Asp Phe Leu Phe Leu Ser Gly Arg Leu65 70 75 80Ile Tyr Ser Leu Leu Ser Phe Ile Ser Ile Pro His Thr Ile Ser Lys85 90 95Ile Leu Tyr Pro Val Met Met Phe Ser Tyr Phe Ala Gly Leu Ser Phe100 105 110Leu Ser Ala Val Ser Thr Glu Arg Cys Leu Ser Val Leu Trp Pro Ile115 120 125Trp Tyr Arg Cys His Arg Pro Thr His Leu Ser Ala Val Val Cys Val130 135 140Leu Leu Trp Ala Leu Ser Leu Leu Arg Ser Ile Leu Glu Trp Met Leu145 150 155 160Cys Gly Phe Leu Phe Ser Gly Ala Asp Ser Ala Trp Cys Gln Thr Ser165 170 175Asp Phe Ile Thr Val Ala Trp Leu Ile Phe Leu Cys Val Val Leu Cys180 185 190Gly Ser Ser Leu Val Leu Leu Ile Arg Ile Leu Cys Gly Ser Arg Lys195 200 205Ile Pro Leu Thr Arg Leu Tyr Val Thr Ile Leu Leu Thr Val Leu Val210 215 220Phe Leu Leu Cys Gly Leu Pro Phe Gly Ile Gln Phe Phe Leu Phe Leu225 230 235 240Trp Ile His Val Asp Arg Glu Val Leu Phe Cys His Val His Leu Val245 250 255Ser Ile Phe Leu Ser Ala Leu Asn Ser Ser Ala Asn Pro Ile Ile Tyr260 265 270Phe Phe Val Gly Ser Phe Arg Gln Arg Gln Asn Arg Gln Asn Leu Lys275 280 285Leu Val Leu Gln Arg Ala Leu Gln Asp Ala Ser Glu Val Asp Glu Gly290 295 300Gly Gly Gln Leu Pro Glu Glu Ile Leu Glu Leu Ser Gly Ser Arg Leu305 310 315 320Glu Gln<210>21<211>1305
<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>21atggaggatc tctttagccc ctcaattctg ccgccggcgc ccaacatttc cgtgcccatc 60ttgctgggct ggggtctcaa cctgaccttg gggcaaggag cccctgcctc tgggccgccc 120agccgccgcg tccgcctggt gttcctgggg gtcatcctgg tggtggcggt ggcaggcaac 180accacagtgc tgtgccgcct gtgcggcggc ggcgggccct gggcgggccc caagcgtcgc 240aagatggact tcctgctggt gcagctggcc ctggcggacc tgtacgcgtg cgggggcacg 300gcgctgtcac agctggcctg ggaactgctg ggcgagcccc gcgcggccac gggggacctg 360gcgtgccgct tcctgcagct gctgcaggca tccgggcggg gcgcctcggc ccacctcgtg 420gtgctcatcg ccctcgagcg ccggcgcgcg gtgcgtcttc cgcacggccg gccgctgccc 480gcgcgtgccc tcgccgccct gggctggctg ctggcactgc tgctggcgct gcccccggcc 540ttcgtggtgc gcggggactc cccctcgccg ctgccgccgc cgccgccgcc aacgtccctg 600cagccaggcg cgcccccggc cgcccgcgcc tggccggggg agcgtcgctg ccacgggatc 660ttcgcgcccc tgccgcgctg gcacctgcag gtctacgcgt tctacgaggc cgtcgcgggc 720ttcgtcgcgc ctgttacggt cctgggcgtc gcttgcggcc acctactctc cgtctggtgg 780cggcaccggc cgcaggcccc cgcggctgca gcgccctggt cggcgagccc aggtcgagcc 840cctgcgccca gcgcgctgcc ccgcgccaag gtgcagagcc tgaagatgag cctgctgctg 900gcgctgctgt tcgtgggctg cgagctgccc tactttgccg cccggctggc ggccgcgtgg 960tcgtccgggc ccgcgggaga ctgggaggga gagggcctgt cggcggcgct gcgcgtggtg1020gcgatggcca acagcgctct caatcccttc gtctacctct tcttccaggc gggcgactgc1080cggctccggc gacagctgcg gaagcggctg ggctctctgt gctgcgcgcc gcagggaggc1140gcggaggacg aggaggggcc ccggggccac caggcgctct accgccaacg ctggccccac1200cctcattatc accatgctcg gcgggaaccg ctggacgagg gcggcttgcg cccaccccct1260ccgcgcccca gacccctgcc ttgctcctgc gaaagtgcct tctag1305<210>22<211>434<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>22Met Glu Asp Leu Phe Ser Pro Ser Ile Leu Pro Pro Ala Pro Asn Ile1 5 10 15Ser Val Pro Ile Leu Leu Gly Trp Gly Leu Asn Leu Thr Leu Gly Gln20 25 30Gly Ala Pro Ala Ser Gly Pro Pro Ser Arg Arg Val Arg Leu Val Phe35 40 45
Leu Gly Val Ile Leu Val Val Ala Val Ala Gly Asn Thr Thr Val Leu50 55 60Cys Arg Leu Cys Gly Gly Gly Gly Pro Trp Ala Gly Pro Lys Arg Arg65 70 75 80Lys Met Asp Phe Leu Leu Val Gln Leu Ala Leu Ala Asp Leu Tyr Ala85 90 95Cys Gly Gly Thr Ala Leu Ser Gln Leu Ala Trp Glu Leu Leu Gly Glu100 105 110Pro Arg Ala Ala Thr Gly Asp Leu Ala Cys Arg Phe Leu Gln Leu Leu115 120 125Gln Ala Ser Gly Arg Gly Ala Ser Ala His Leu Val Val Leu Ile Ala130 135 140Leu Glu Arg Arg Arg Ala Val Arg Leu Pro His Gly Arg Pro Leu Pro145 150 155 160Ala Arg Ala Leu Ala Ala Leu Gly Trp Leu Leu Ala Leu Leu Leu Ala165 170 175Leu Pro Pro Ala Phe Val Val Arg Gly Asp Ser Pro Ser Pro Leu Pro180 185 190Pro Pro Pro Pro Pro Thr Ser Leu Gln Pro Gly Ala Pro Pro Ala Ala195 200 205Arg Ala Trp Pro Gly Glu Arg Arg Cys His Gly Ile Phe Ala Pro Leu210 215 220Pro Arg Trp His Leu Gln Val Tyr Ala Phe Tyr Glu Ala Val Ala Gly225 230 235 240Phe Val Ala Pro Val Thr Val Leu Gly Val Ala Cys Gly His Leu Leu245 250 255Ser Val Trp Trp Arg His Arg Pro Gln Ala Pro Ala Ala Ala Ala Pro260 265 270Trp Ser Ala Ser Pro Gly Arg Ala Pro Ala Pro Ser Ala Leu Pro Arg275 280 285Ala Lys Val Gln Ser Leu Lys Met Ser Leu Leu Leu Ala Leu Leu Phe290 295 300Val Gly Cys Glu Leu Pro Tyr Phe Ala Ala Arg Leu Ala Ala Ala Trp305 310 315 320Ser Ser Gly Pro Ala Gly Asp Trp Glu Gly Glu Gly Leu Ser Ala Ala325 330 335Leu Arg Val Val Ala Met Ala Asn Ser Ala Leu Asn Pro Phe Val Tyr340 345 350Leu Phe Phe Gln Ala Gly Asp Cys Arg Leu Arg Arg Gln Leu Arg Lys355 360 365Arg Leu Gly Ser Leu Cys Cys Ala Pro Gln Gly Gly Ala Glu Asp Glu370 375 380Glu Gly Pro Arg Gly His Gln Ala Leu Tyr Arg Gln Arg Trp Pro His385 390 395 400
Pro His Tyr His His Ala Arg Arg Glu Pro Leu Asp Glu Gly Gly Leu405 410 415Arg Pro Pro Pro Pro Arg Pro Arg Pro Leu Pro Cys Ser Cys Glu Ser420 425 430Ala Phe<210>23<211>1041<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>23atgtacaacg ggtcgtgctg ccgcatcgag ggggacacca tctcccaggt gatgccgccg 60ctgctcattg tggcctttgt gctgggcgca ctaggcaatg gggtcgccct gtgtggtttc120tgcttccaca tgaagacctg gaagcccagc actgtttacc ttttcaattt ggccgtggct180gatttcctcc ttatgatctg cctgcctttt cggacagact attacctcag acgtagacac240tgggcttttg gggacattcc ctgccgagtg gggctcttca cgttggccat gaacagggcc300gggagcatcg tgttccttac ggtggtggct gcggacaggt atttcaaagt ggtccacccc360caccacgcgg tgaacactat ctccacccgg gtggcggctg gcatcgtctg caccctgtgg420gccctggtca tcctgggaac agtgtatctt ttgctggaga accatctctg cgtgcaagag480acggccgtct cctgtgagag cttcatcatg gagtcggcca atggctggca tgacatcatg540ttccagctgg agttctttat gcccctcggc atcatcttat tttgctcctt caagattgtt600tggagcctga ggcggaggca gcagctggcc agacaggctc ggatgaagaa ggcgacccgg660ttcatcatgg tggtggcaat tgtgttcatc acatgctacc tgcccagcgt gtctgctaga720ctctatttcc tctggacggt gccctcgagt gcctgcgatc cctctgtcca tggggccctg780cacataaccc tcagcttcac ctacatgaac agcatgctgg atcccctggt gtattatttt840tcaagcccct cctttcccaa attctacaac aagctcaaaa tctgcagtct gaaacccaag900cagccaggac actcaaaaac acaaaggccg gaagagatgc caatttcgaa cctcggtcgc960aggagttgca tcagtgtggc aaatagtttc caaagccagt ctgatgggca atgggatccc1020cacattgttg agtggcactg a 1041<210>24<211>346<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>24Met Tyr Asn Gly Ser Cys Cys Arg Ile Glu Gly Asp Thr Ile Ser Gln1 5 10 15Val Met Pro Pro Leu Leu Ile Val Ala Phe Val Leu Gly Ala Leu Gly20 25 30
Asn Gly Val Ala Leu Cys Gly Phe Cys Phe His Met Lys Thr Trp Lys35 40 45Pro Ser Thr Val Tyr Leu Phe Asn Leu Ala Val Ala Asp Phe Leu Leu50 55 60Met Ile Cys Leu Pro Phe Arg Thr Asp Tyr Tyr Leu Arg Arg Arg His65 70 75 80Trp Ala Phe Gly Asp Ile Pro Cys Arg Val Gly Leu Phe Thr Leu Ala85 90 95Met Asn Arg Ala Gly Ser Ile Val Phe Leu Thr Val Val Ala Ala Asp100 105 110Arg Tyr Phe Lys Val Val His Pro His His Ala Val Asn Thr Ile Ser115 120 125Thr Arg Val Ala Ala Gly Ile Val Cys Thr Leu Trp Ala Leu Val Ile130 135 140Leu Gly Thr Val Tyr Leu Leu Leu Glu Asn His Leu Cys Val Gln Glu145 150 155 160Thr Ala Val Ser Cys Glu Ser Phe Ile Met Glu Ser Ala Asn Gly Trp165 170 175His A5p Ile Met Phe Gln Leu Glu Phe Phe Met Pro Leu Gly Ile Ile180 185 190Leu Phe Cys Ser Phe Lys Ile Val Trp Ser Leu Arg Arg Arg Gln Gln195 200 205Leu Ala Arg Gln Ala Arg Met Lys Lys Ala Thr Arg Phe Ile Met Val210 215 220Val Ala Ile Val Phe Ile Thr Cys Tyr Leu Pro Ser Val Ser Ala Arg225 230 235 240Leu Tyr Phe Leu Trp Thr Val Pro Ser Ser Ala Cys Asp Pro Ser Val245 250 255His Gly Ala Leu His Ile Thr Leu Ser Phe Thr Tyr Met Asn Ser Met260 265 270Leu Asp Pro Leu Val Tyr Tyr Phe Ser Ser Pro Ser Phe Pro Lys Phe275 280 285Tyr Asn Lys Leu Lys Ile Cys Ser Leu Lys Pro Lys Gln Pro Gly His290 295 300Ser Lys Thr Gln Arg Pro Glu Glu Met Pro Ile Ser Asn Leu Gly Arg305 310 315 320Arg Ser Cys Ile Ser Val Ala Asn Ser Phe Gln Ser Gln Ser Asp Gly325 330 335Gln Trp Asp Pro His Ile Val Glu Trp His340 345<210>25<211>1011<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)
<400>25atgaacaaca atacaacatg tattcaacca tctatgatct cttccatggc tttaccaatc 60atttacatcc tcctttgtat tgttggtgtt tttggaaaca ctctctctca atggatattt120ttaacaaaaa taggtaaaaa aacatcaacg cacatctacc tgtcacacct tgtgactgca180aacttacttg tgtgcagtgc catgcctttc atgagtatct atttcctgaa aggtttccaa240tgggaatatc aatctgctca atgcagagtg gtcaattttc tgggaactct atccatgcat300gcaagtatgt ttgtcagtct cttaatttta agttggattg ccataagccg ctatgctacc360ttaatgcaaa aggattcctc gcaagagact acttcatgct atgagaaaat attttatggc420catttactga aaaaatttcg ccagcccaac tttgctagaa aactatgcat ttacatatgg480ggagttgtac tgggcataat cattccagtt accgtatact actcagtcat agaggctaca540gaaggagaag agagcctatg ctacaatcgg cagatggaac taggagccat gatctctcag600attgcaggtc tcattggaac cacatttatt ggattttcct ttttagtagt actaacatca660tactactctt ttgtaagcca tctgagaaaa ataagaacct gtacgtccat tatggagaaa720gatttgactt acagttctgt 9aaaagacat cttttggtca tccagattct actaatagtt780tgcttccttc cttatagtat ttttaaaccc attttttatg ttctacacca aagagataac840tgtcagcaat tgaattattt aatagaaaca aaaaacattc tcacctgtct tgcttcggcc900agaagtagca cagaccccat tatatttctt ttattagata aaacattcaa gaagacacta960tataatctct ttacaaagtc taattcagca catatgcaat catatggttg a1011<210>26<211>336<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>26Met Asn Asn Asn Thr Thr Cys Ile Gln Pro Ser Met Ile Ser Ser Met1 5 10 15Ala Leu Pro Ile Ile Tyr Ile Leu Leu Cys Ile Val Gly Val Phe Gly20 25 30Asn Thr Leu Ser Gln Trp Ile Phe Leu Thr Lys Ile Gly Lys Lys Thr35 40 45Ser Thr His Ile Tyr Leu Ser His Leu Val Thr Ala Asn Leu Leu Val50 55 60Cys Ser Ala Met Pro Phe Met Ser Ile Tyr Phe Leu Lys Gly Phe Gln65 70 75 80Trp Glu Tyr Gln Ser Ala Gln Cys Arg Val Val Asn Phe Leu Gly Thr85 90 95Leu Ser Met His Ala Ser Met Phe Val Ser Leu Leu Ile Leu Ser Trp100 105 110
Ile Ala Ile Ser Arg Tyr Ala Thr Leu Met Gln Lys Asp Ser Ser Gln115 120 125Glu Thr Thr Ser Cys Tyr Glu Lys Ile Phe Tyr Gly His Leu Leu Lys130 135 140Lys Phe Arg Gln Pro Asn Phe Ala Arg Lys Leu Cys Ile Tyr Ile Trp145 150 155 160Gly Val Val Leu Gly Ile Ile Ile Pro Val Thr Val Tyr Tyr Ser Val165 170 175Ile Glu Ala Thr Glu Gly Glu Glu Ser Leu Cys Tyr Asn Arg Gln Met180 185 190Glu Leu Gly Ala Met Ile Ser Gln Ile Ala Gly Leu Ile Gly Thr Thr195 200 205Phe Ile Gly Phe Ser Phe Leu Val Val Leu Thr Ser Tyr Tyr Ser Phe210 215 220Val Ser His Leu Arg Lys Ile Arg Thr Cys Thr Ser Ile Met Glu Lys225 230 235 240Asp Leu Thr Tyr Ser Ser Val Lys Arg His Leu Leu Val Ile Gln Ile245 250 255Leu Leu Ile Val Cys Phe Leu Pro Tyr Ser Ile Phe Lys Pro Ile Phe260 265 270Tyr Val Leu His Gln Arg Asp Asn Cys Gln Gln Leu Asn Tyr Leu Ile275 280 285Glu Thr Lys Asn Ile Leu Thr Cys Leu Ala Ser Ala Arg Ser Ser Thr290 295 300Asp Pro Ile Ile Phe Leu Leu Leu Asp Lys Thr Phe Lys Lys Thr Leu305 310 315 320Tyr Asn Leu Phe Thr Lys Ser Asn Ser Ala His Met Gln Ser Tyr Gly325 330 335<210>27<211>1014<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>27atgaatgagc cactagacta tttagcaaat gcttctgatt tccccgatta tgcagctgct 60tttggaaatt gcactgatga aaacatccca ctcaagatgc actacctccc tgttatttat120ggcattatct tcctcgtggg atttccaggc aatgcagtag tgatatccac ttacattttc180aaaatgagac cttggaagag cagcaccatc attatgctga acctggcctg cacagatctg240ctgtatctga ccagcctccc cttcctgatt cactactatg ccagtggcga aaactggatc300tttggagatt tcatgtgtaa gtttatccgc ttcagcttcc atttcaacct gtatagcagc360atcctcttcc tcacctgttt cagcatcttc cgctactgtg tgatcattca cccaatgagc420tgcttttcca ttcacaaaac tcgatgtgca gttgtagcct gtgctgtggt gtggatcatt480tcactggtag ctgtcattcc gatgaccttc ttgatcacat caaccaacag gaccaacaga540
tcagcctgtc tcgacctcac cagttcggat gaactcaata ctattaagtg gtacaacctg600attttgactg caactacttt ctgcctcccc ttggtgatag tgacactttg ctataccacg660attatccaca ctctgaccca tggactgcaa actgacagct gccttaagca gaaagcacga720aggctaacca ttctgctact ccttgcattt tacgtatgtt ttttaccctt ccatatcttg780agggtcattc ggatcgaatc tcgcctgctt tcaatcagtt gttccattga gaatcagatc840catgaagctt acatcgtttc tagaccatta gctgctctga acacctttgg taacctgtta900ctatatgtgg tggtcagcga caactttcag caggctgtct gctcaacagt gagatgcaaa960gtaagcggga accttgagca agcaaagaaa attagttact caaacaaccc ttga 1014<210>28<211>337<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>28Met Asn Glu Pro Leu Asp Tyr Leu Ala Asn Ala Ser Asp Phe Pro Asp1 5 10 15Tyr Ala Ala Ala Phe Gly Asn Cys Thr Asp Glu Asn Ile Pro Leu Lys20 25 30Met His Tyr Leu Pro Val Ile Tyr Gly Ile Ile Phe Leu Val Gly Phe35 40 45Pro Gly Asn Ala Val Val Ile Ser Thr Tyr Ile Phe Lys Met Arg Pro50 55 60Trp Lys Ser Ser Thr Ile Ile Met Leu Asn Leu Ala Cys Thr Asp Leu65 70 75 80Leu Tyr Leu Thr Ser Leu Pro Phe Leu Ile His Tyr Tyr Ala Ser Gly85 90 95Glu Asn Trp Ile Phe Gly Asp Phe Met Cys Lys Phe Ile Arg Phe Ser100 105 110Phe His Phe Asn Leu Tyr Ser Ser Ile Leu Phe Leu Thr Cys Phe Ser115 120 125Ile Phe Arg Tyr Cys Val Ile Ile His Pro Met Ser Cys Phe Ser Ile130 135 140His Lys Thr Arg Cys Ala Val Val Ala Cys Ala Val Val Trp Ile Ile145 150 155 160Ser Leu Val Ala Val Ile Pro Met Thr Phe Leu Ile Thr Ser Thr Asn165 170 175Arg Thr Asn Arg Ser Ala Cys Leu Asp Leu Thr Ser Ser Asp Glu Leu180 185 190Asn Thr Ile Lys Trp Tyr Ash Leu Ile Leu Thr Ala Thr Thr Phe Cys195 200 205Leu Pro Leu Val Ile Val Thr Leu Cys Tyr Thr Thr Ile Ile His Thr
210 215 220Leu Thr His Gly Leu Gln Thr Asp Ser Cys Leu Lys Gln Lys Ala Arg225 230 235 240Arg Leu Thr Ile Leu Leu Leu Leu Ala Phe Tyr Val Cys Phe Leu Pro245 250 255Phe His Ile Leu Arg Val Ile Arg Ile Glu Ser Arg Leu Leu Ser Ile260 265 270Ser Cys Ser Ile Glu Asn Gln Ile His Glu Ala Tyr Ile Val Ser Arg275 280 285Pro Leu Ala Ala Leu Asn Thr Phe Gly Asn Leu Leu Leu Tyr Val Val290 295 300Val Ser Asp Asn Phe Gln Gln Ala Val Cys Ser Thr Val Arg Cys Lys305 310 315 320Val Ser Gly Asn Leu Glu Gln Ala Lys Lys Ile Ser Tyr Ser Asn Asn325 330 335Pro<210>29<211>993<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>29atggatccaa ccaccccggc ctggggaaca gaaagtacaa cagtgaatgg aaatgaccaa 60gcccttcttc tgctttgtgg caaggagacc ctgatcccgg tcttcctgat ccttttcatt120gccctggtcg ggctggtagg aaacgggttt gtgctctggc tcctgggctt ccgcatgcgc180aggaacgcct tctctgtcta cgtcctcagc ctggccgggg ccgacttcct cttcctctgc240ttccagatta taaattgcct ggtgtacctc agtaacttct tctgttccat ctccatcaat300ttccctagct tcttcaccac tgtgatgacc tgtgcctacc ttgcaggcct gagcatgctg360agcaccgtca gcaccgagcg ctgcctgtcc gtcctgtggc ccatctggta tcgctgccgc420cgccccagac acctgtcagc ggtcgtgtgt gtcctgctct gggccctgtc cctactgctg480agcatcttgg aagggaagtt ctgtggcttc ttatttagtg atggtgactc tggttggtgt540cagacatttg atttcatcac tgcagcgtgg ctgatttttt tattcatggt tctctgtggg600tccagtctgg ccctgctggt caggatcctc tgtggctcca ggggtctgcc actgactagg660ctgtacctga ccatcctgct cacagtgctg gtgttcctcc tctgcggcct gccctttggc720attcagtggt tcctaatatt atggatctgg aaggattctg atgtcttatt ttgtcatatt780catccagttt cagttgtcct gtcatctctt aacagcagtg ccaaccccat catttacttc840ttcgtgggct cttttaggaa gcagtggcgg ctgcagcagc cgatcctcaa gctggctctc900cagagggctc tgcaggacat tgctgaggtg gatcacagtg aaggatgctt ccgtcagggc960accccggaga tgtcgagaag cagtctggtg tag 993
<210>30<211>330<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>30Met Asp Pro Thr Thr Pro Ala Trp Gly Thr Glu Ser Thr Thr Val Asn1 5 10 15Gly Asn Asp Gln Ala Leu Leu Leu Leu Cys Gly Lys Glu Thr Leu Ile20 25 30Pro Val Phe Leu Ile Leu Phe Ile Ala Leu Val Gly Leu Val Gly Asn35 40 45Gly Phe Val Leu Trp Leu Leu Gly Phe Arg Met Arg Arg Asn Ala Phe50 55 60Ser Val Tyr Val Leu Ser Leu Ala Gly Ala Asp Phe Leu Phe Leu Cys65 70 75 80Phe Gln Ile Ile Asn Cys Leu Val Tyr Leu Ser Asn Phe Phe Cys Ser85 90 95Ile Ser Ile Asn Phe Pro Ser Phe Phe Thr Thr Val Met Thr Cys Ala100 105 110Tyr Leu Ala Gly Leu Ser Met Leu Ser Thr Val Ser Thr Glu Arg Cys115 120 125Leu Ser Val Leu Trp Pro Ile Trp Tyr Arg Cys Arg Arg Pro Arg His130 135 140Leu Ser Ala Val Val Cys Val Leu Leu Trp Ala Leu Ser Leu Leu Leu145 150 155 160Ser Ile Leu Glu Gly Lys Phe Cys Gly Phe Leu Phe Ser Asp Gly Asp165 170 175Ser Gly Trp Cys Gln Thr Phe Asp Phe Ile Thr Ala Ala Trp Leu Ile180 185 190Phe Leu Phe Met Val Leu Cys Gly Ser Ser Leu Ala Leu Leu Val Arg195 200 205Ile Leu Cys Gly Ser Arg Gly Leu Pro Leu Thr Arg Leu Tyr Leu Thr210 215 220Ile Leu Leu Thr Val Leu Val Phe Leu Leu Cys Gly Leu Pro Phe Gly225 230 235 240Ile Gln Trp Phe Leu Ile Leu Trp Ile Trp Lys Asp Ser Asp Val Leu245 250 255Phe Cys His Ile His Pro Val Ser Val Val Leu Ser Ser Leu Asn Ser260 265 270Ser Ala Asn Pro Ile Ile Tyr Phe Phe Val Gly Ser Phe Arg Lys Gln275 280 285Trp Arg Leu Gln Gln Pro Ile Leu Lys Leu Ala Leu Gln Arg Ala Leu290 295 300
Gln Asp Ile Ala Glu Val Asp His Ser Glu Gly Cys Phe Arg Gln Gly305 310 315 320Thr Pro Glu Met Ser Arg Ser Ser Leu Val325 330<210>31<211>1092<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>31atgggccccg gcgaggcgct gctggcgggt ctcctggtga tggtactggc cgtggcgctg 60ctatccaacg cactggtgct gctttgttgc gcctacagcg ctgagctccg cactcgagcc120tcaggcgtcc tcctggtgaa tctgtcgctg ggccacctgc tgctggcggc gctggacatg180cccttcacgc tgctcggtgt gatgcgcggg cggacaccgt cggcgcccgg cgcatgccaa240gtcattggct tcctggacac cttcctggcg tccaacgcgg cgctgagcgt ggcggcgctg300agcgcagacc agtggctggc agtgggcttc ccactgcgct acgccggacg cctgcgaccg360cgctatgccg gcctgctgct gggctgtgcc tggggacagt cgctggcctt ctcaggcgct420gcacttggct gctcgtggct tggctacagc agcgccttcg cgtcctgttc gctgcgcctg480ccgcccgagc ctgagcgtcc gcgcttcgca gccttcaccg ccacgctcca tgccgtgggc540ttcgtgctgc cgctggcggt gctctgcctc acctcgctcc aggtgcaccg ggtggcacgc600agccactgcc agcgcatgga caccgtcacc atgaaggcgc tcgcgctgct cgccgacctg660caccccagtg tgcggcagcg ctgcctcatc cagcagaagc ggcgccgcca ccgcgccacc720aggaagattg gcattgctat tgcgaccttc ctcatctgct ttgccccgta tgtcatgacc780aggctggcgg agctcgtgcc cttcgtcacc gtgaacgccc agtggggcat cctcagcaag840tgcctgacct acagcaaggc ggtggccgac ccgttcacgt actctctgct ccgccggccg900ttccgccaag tcctggccgg catggtgcac cggctgctga agagaacccc gcgcccagca960tccacccatg acagctctct ggatgtggcc ggcatggtgc accagctgct gaagagaacc 1020ccgcgcccag cgtccaccca caacggctct gtggacacag agaatgattc ctgcctgcag 1080cagacacact ga 1092<210>32<211>363<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>32Met Gly Pro Gly Glu Ala Leu Leu Ala Gly Leu Leu Val Met Val Leu1 5 10 15Ala Val Ala Leu Leu Ser Asn Ala Leu Val Leu Leu Cys Cys Ala Tyr20 25 30
Ser Ala Glu Leu Arg Thr Arg Ala Ser Gly Val Leu Leu Val Asn Leu35 40 45Ser Leu Gly His Leu Leu Leu Ala Ala Leu Asp Met Pro Phe Thr Leu50 55 60Leu Gly Val Met Arg Gly Arg Thr Pro Ser Ala Pro Gly Ala cys Gln65 70 75 80Val Ile Gly Phe Leu Asp Thr Phe Leu Ala Ser Asn Ala Ala Leu Ser85 90 95Val Ala Ala Leu Ser Ala Asp Gln Trp Leu Ala Val Gly Phe Pro Leu100 105 110Arg Tyr Ala Gly Arg Leu Arg Pro Arg Tyr Ala Gly Leu Leu Leu Gly115 120 125Cys Ala Trp Gly Gln Ser Leu Ala Phe Ser Gly Ala Ala Leu Gly Cys130 135 140Ser Trp Leu Gly Tyr Ser ser Ala Phe Ala Ser cys ser Leu Arg Leu145 150 155 160Pro Pro Glu Pro Glu Arg Pro Arg Phe Ala Ala Phe Thr Ala Thr Leu165 170 175His Ala Val Gly Phe Val Leu Pro Leu Ala Val Leu Cys Leu Thr Ser180 185 190Leu Gln Val His Arg Val Ala Arg Ser His Cys Gln Arg Met Asp Thr195 200 205Val Thr Met Lys Ala Leu Ala Leu Leu Ala Asp Leu His Pro Ser Val210 215 220Arg Gln Arg Cys Leu Ile Gln Gln Lys Arg Arg Arg His Arg Ala Thr225 230 235 240Arg Lys Ile Gly Ile Ala Ile Ala Thr Phe Leu Ile Cys Phe Ala Pro245 250 255Tyr Val Met Thr Arg Leu Ala Glu Leu Val Pro Phe Val Thr Val Asn260 265 270Ala Gln Trp Gly Ile Leu Ser Lys Cys Leu Thr Tyr Ser Lys Ala Val275 280 285Ala Asp Pro Phe Thr Tyr Ser Leu Leu Arg Arg Pro Phe Arg Gln Val290 295 300Leu Ala Gly Met Val His Arg Leu Leu Lys Arg Thr Pro Arg Pro Ala305 310 315 320Ser Thr His Asp Ser Ser Leu Asp Val Ala Gly Met Val His Gln Leu325 330 335Leu Lys Arg Thr Pro Arg Pro Ala Ser Thr His Asn Gly Ser Val Asp340 345 350Thr Glu Asn Asp Ser Cys Leu Gln Gln Thr His355 360<210>33<211>1125
<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>33atgcccacac tcaatacttc tgcctctcca cccacattct tctgggccaa tgcctccgga 60ggcagtgtgc tgagtgctga tgatgctccg atgcctgtca aattcctagc cctgaggctc120atggttgccc tggcctatgg gcttgtgggg gccattggct tgctgggaaa tttggcggtg180ctgtgggtac tgagtaactg tgcccggaga gcccctggcc caccttcaga caccttcgtc240ttcaacctgg ctctggcgga cctgggactg gcactcactc tccccttttg ggcagccgag300tcggcactgg actttcactg gcccttcgga ggtgccctct gcaagatggt tctgacggcc360actgtcctca acgtctatgc cagcatcttc ctcatcacag cgctgagcgt tgctcgctac420tgggtggtgg ccatggctgc ggggccaggc acccacctct cactcttctg ggcccgaata480gccaccctgg cagtgtgggc ggcggctgcc ctggtgacgg tgcccacagc tgtcttcggg540gtggagggtg aggtgtgtgg tgtgcgcctt tgcctgctgc gtttccccag caggtactgg600ctgggggcct accagctgca gagggtggtg ctggctttca tggtgccctt gggcgtcatc660accaccagct acctgctgct gctggccttc ctgcagcggc ggcaacggcg gcggcaggac720agcagggtcg tggcccgctc tgtccgcatc ctggtggctt ccttcttcct ctgctggttt780cccaaccatg tggtcactct ctggggtgtc ctggtgaagt ttgacctggt gccctggaac840agtactttct atactatcca gacgtatgtc ttccctgtca ctacttgctt ggcacacagc900aatagctgcc tcaaccctgt gctgtactgt ctcctgaggc gggagccccg gcaggctctg960gcaggcacct tcagggatct gcggtcgagg ctgtggcccc agggcggagg ctgggtgcaa 1020caggtggccc taaagcaggt aggcaggcgg tgggtcgcaa gcaacccccg ggagagccgc 1080ccttctaccc tgctcaccaa cctggacaga gggacacccg ggtga 1125<210>34<211>374<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>34Met Pro Thr Leu Asn Thr Ser Ala Ser Pro Pro Thr Phe Phe Trp Ala1 5 10 15Asn Ala Ser Gly Gly Ser Val Leu Ser Ala ASp Asp Ala Pro Met Pro20 25 30Val Lys Phe Leu Ala Leu Arg Leu Met Val Ala Leu Ala Tyr Gly Leu35 40 45Val Gly Ala Ile Gly Leu Leu Gly Asn Leu Ala Val Leu Trp Val Leu50 55 60Ser Asn Cys Ala Arg Arg Ala Pro Gly Pro Pro Ser Asp Thr Phe Val65 70 75 80
Phe Asn Leu Ala Leu Ala Asp Leu Gly Leu Ala Leu Thr Leu Pro Phe85 90 95Trp Ala Ala Glu Ser Ala Leu Asp Phe His Trp Pro Phe Gly Gly Ala100 105 110Leu Cys Lys Met Val Leu Thr Ala Thr Val Leu Asn Val Tyr Ala Ser115 120 125Ile Phe Leu Ile Thr Ala Leu Ser Val Ala Arg Tyr Trp Val Val Ala130 135 140Met Ala Ala Gly Pro Gly Thr His Leu Ser Leu Phe Trp Ala Arg Ile145 150 155 160Ala Thr Leu Ala Val Trp Ala Ala Ala Ala Leu Val Thr Val Pro Thr165 170 175Ala Val Phe Gly Val Glu Gly Glu Val Cys Gly Val Arg Leu Cys Leu180 185 190Leu Arg Phe Pro Ser Arg Tyr Trp Leu Gly Ala Tyr Gln Leu Gln Arg195 200 205Val Val Leu Ala Phe Met Val Pro Leu Gly Val Ile Thr Thr Ser Tyr2l0 215 220Leu Leu Leu Leu Ala Phe Leu Gln Arg Arg Gln Arg Arg Arg Gln Asp225 230 235 240Ser Arg Val Val Ala Arg Ser Val Arg Ile Leu Val Ala Ser Phe Phe245 250 255Leu Cys Trp Phe Pro Asn His Val Val Thr Leu Trp GLy Val Leu Val260 265 270Lys Phe Asp Leu Val Pro Trp Asn Ser Thr Phe Tyr Thr Ile Gln Thr275 280 285Tyr Val Phe Pro Val Thr Thr Cys Leu Ala His Ser Asn Ser Cys Leu290 295 300Asn Pro Val Leu Tyr Cys Leu Leu Arg Arg Glu Pro Arg Gln Ala Leu305 310 315 320Ala Gly Thr Phe Arg Asp Leu Arg Ser Arg Leu Trp Pro Gln Gly Gly325 330 335Gly Trp Val Gln Gln Val Ala Leu Lys Gln Val Gly Arg Arg Trp Val340 345 350Ala Ser Asn Pro Arg Glu Ser Arg Pro Ser Thr Leu Leu Thr Asn Leu355 360 365Asp Arg Gly Thr Pro Gly370<210>35<211>1092<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>35atgaatcggc accatctgca ggatcacttt ctggaaatag acaagaagaa ctgctgtgtg60
ttccgagatg acttcattgt caaggtgttg ccgccggtgt tggggctgga gtttatcttc 120gggcttctgg gcaatggcct tgccctgtgg attttctgtt tccacctcaa gtcctggaaa 180tccagccgga ttttcctgtt caacctggca gtggctgact ttctactgat catctgcctg 240cccttcctga tggacaacta tgtgaggcgt tgggactgga agtttgggga catcccttgc 300cggctgatgc tcttcatgtt ggctatgaac cgccagggca gcatcatctt cctcacggtg 360gtggcggtag acaggtattt ccgggtggtc catccccacc acgccctgaa caagatctcc 420aatcggacag cagccatcat ctcttgcctt ctgtggggca tcactattgg cctgacagtc 480cacctcctga agaagaagat gccgatccag aatggcggtg caaatttgtg cagcagcttc 540agcatctgcc ataccttcca gtggcacgaa gccatgttcc tcctggagtt cttcctgccc 600ctgggcatca tcctgttctg ctcagccaga attatctgga gcctgcggca gagacaaatg 660gaccggcatg ccaagatcaa gagagccatc accttcatca tggtggtggc catcgtcttt 720gtcatctgct tccttcccag cgtggttgtg cggatccgca tcttctggct cctgcacact 780tcgggcacgc agaattgtga agtgtaccgc tcggtggacc tggcgttctt tatcactctc 840agcttcacct acatgaacag catgctggac cccgtggtgt actacttctc cagcccatcc 900tttcccaact tcttctccac tttgatcaac cgctgcctcc agaggaagat gacaggtgag 960ccagataata accgcagcac gagcgtcgag ctcacagggg accccaacaa aaccagaggc1020gctccagagg cgttaatggc caactccggt gagccatgga gcccctctta tctgggccca1080acctctcctt aa1092<210>36<211>363<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>36Met Asn Arg His His Leu Gln Asp His Phe Leu Glu Ile Asp Lys Lys1 5 10 15Asn Cys Cys Val Phe Arg Asp ASp Phe Ile Val Lys Val Leu Pro Pro20 25 30Val Leu Gly Leu Glu Phe Ile Phe Gly Leu Leu Gly Asn Gly Leu Ala35 40 45Leu Trp Ile Phe Cys Phe His Leu Lys Ser Trp Lys Ser Ser Arg Ile50 55 60Phe Leu Phe Asn Leu Ala Val Ala Asp Phe Leu Leu Ile Ile Cys Leu65 70 75 80Pro Phe Leu Met Asp Asn Tyr Val Arg Arg Trp Asp Trp Lys Phe Gly85 90 95Asp Ile Pro Cys Arg Leu Met Leu Phe Met Leu Ala Met Asn Arg Gln100 105 110
Gly Ser Ile Ile Phe Leu Thr Val Val Ala Val Asp Arg Tyr Phe Arg115 120 125Val Val His Pro His His Ala Leu Asn Lys Ile Ser Asn Arg Thr Ala130 135 140Ala Ile Ile Ser Cys Leu Leu Trp Gly Ile Thr Ile Gly Leu Thr Val145 150 155 160His Leu Leu Lys Lys Lys Met Pro Ile Gln Asn Gly Gly Ala Asn Leu165 170 175Cys Ser Ser Phe Ser Ile Cys His Thr Phe Gln Trp His Glu Ala Met180 185 190Phe Leu Leu Glu Phe Phe Leu Pro Leu Gly Ile Ile Leu Phe Cys Ser195 200 205Ala Arg Ile Ile Trp Ser Leu Arg Gln Arg Gln Met Asp Arg His Ala210 215 220Lys Ile Lys Arg Ala Ile Thr Phe Ile Met Val Val Ala Ile Val Phe225 230 235 240Val Ile Cys Phe Leu Pro Ser Val Val Val Arg Ile Arg Ile Phe Trp245 250 255Leu Leu His Thr Ser Gly Thr Gln Asn Cys Glu Val Tyr Arg Ser Val260 265 270Asp Leu Ala Phe Phe Ile Thr Leu Ser Phe Thr Tyr Met Asn Ser Met275 280 285Leu Asp Pro Val Val Tyr Tyr Phe Ser Ser Pro Ser Phe Pro Asn Phe290 29S 300Phe Ser Thr Leu Ile Asn Arg Cys Leu Gln Arg Lys Met Thr Gly Glu305 310 315 320Pro Asp Asn Asn Arg Ser Thr Ser Val Glu Leu Thr Gly Asp Pro Asn325 330 335Lys Thr Arg Gly Ala Pro Glu Ala Leu Met Ala Asn Ser Gly Glu Pro340 345 350Trp Ser Pro Ser Tyr Leu Gly Pro Thr Ser Pro355 360<210>37<211>1044<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>37atgggggatg agctggcacc ttgccctgtg ggcactacag cttggccggc cctgatccag 60ctcatcagca agacaccctg catgccccaa gcagccagca acacttcctt gggcctgggg120gacctcaggg tgcccagctc catgctgtac tggcttttcc ttccctcaag cctgctggct180gcagccacac tggctgtcag ccccctgctg ctggtgacca tcctgcggaa ccaacggctg240cgacaggagc cccactacct gctcccggct aacatcctgc tctcagacct ggcctacatt300ctcctccaca tgctcatctc ctccagcagc ctgggtggct gggagctggg ccgcatggcc360
tgtggcattc tcactgatgc tgtcttcgcc gcctgcacca gcaccatcct gtccttcacc 420gccattgtgc tgcacaccta cctggcagtc atccatccac tgcgctacct ctccttcatg 480tcccatgggg ctgcctggaa ggcagtggcc ctcatctggc tggtggcctg ctgcttcccc 540acattcctta tttggctcag caagtggcag gatgcccagc tggaggagca aggagcttca 600tacatcctac caccaagcat gggcacccag ccgggatgtg gcctcctggt cattgttacc 660tacacctcca ttctgtgcgt tctgttcctc tgcacagctc tcattgccaa ctgtttctgg 720aggatctatg cagaggccaa gacttcaggc atctgggggc agggctattc ccgggccagg 780ggcaccctgc tgatccactc agtgctgatc acattgtacg tgagcacagg ggtggtgttc 840tccctggaca tggtgctgac caggtaccac cacattgact ctgggactca cacatggctc 900ctggcagcta acagtgaggt actcatgatg cttccccgtg ccatgctccc atacctgtac 960ctgctccgct accggcagct gttgggcatg gtccggggcc acctcccatc caggaggcac1020caggccatct ttaccatttc ctag 1044<210>38<211>347<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>38Met Gly Asp Glu Leu Ala Pro Cys Pro Val Gly Thr Thr Ala Trp Pro1 5 10 15Ala Leu Ile Gln Leu Ile Ser Lys Thr Pro Cys Met Pro Gln Ala Ala20 25 30Ser Asn Thr Ser Leu Gly Leu Gly Asp Leu Arg Val Pro Ser Ser Met35 40 45Leu Tyr Trp Leu Phe Leu Pro Ser Ser Leu Leu Ala Ala Ala Thr Leu50 55 60Ala Val Ser Pro Leu Leu Leu Val Thr Ile Leu Arg Asn Gln Arg Leu65 70 75 80Arg Gln Glu Pro His Tyr Leu Leu Pro Ala Asn Ile Leu Leu Ser Asp85 90 95Leu Ala Tyr Ile Leu Leu His Met Leu Ile Ser Ser Ser Ser Leu Gly100 105 110Gly Trp Glu Leu Gly Arg Met Ala Cys Gly Ile Leu Thr Asp Ala Val115 120 125Phe Ala Ala Cys Thr Ser Thr Ile Leu Ser Phe Thr Ala Ile Val Leu130 135 140His Thr Tyr Leu Ala Val Ile His Pro Leu Arg Tyr Leu Ser Phe Met145 150 155 160Ser His Gly Ala Ala Trp Lys Ala Val Ala Leu Ile Trp Leu Val Ala165 170 175
Cys Cys Phe Pro Thr Phe Leu Ile Trp Leu Ser Lys Trp Gln Asp Ala180 185 190Gln Leu Glu Glu Gln Gly Ala Ser Tyr Ile Leu Pro Pro Ser Met Gly195 200 205Thr Gln Pro Gly Cys Gly Leu Leu Val Ile Val Thr Tyr Thr Ser Ile210 215 220Leu Cys Val Leu Phe Leu Cys Thr Ala Leu Ile Ala Asn Cys Phe Trp225 230 235 240Arg Ile Tyr Ala Glu Ala Lys Thr Ser Gly Ile Trp Gly Gln Gly Tyr245 250 255Ser Arg Ala Arg Gly Thr Leu Leu Ile His Ser Val Leu Ile Thr Leu260 265 270Tyr Val Ser Thr Gly Val Val Phe Ser Leu Asp Met Val Leu Thr Arg275 280 285Tyr His His Ile Asp Ser Gly Thr His Thr Trp Leu Leu Ala Ala Asn290 295 300Ser Glu Val Leu Met Met Leu Pro Arg Ala Met Leu Pro Tyr Leu Tyr305 310 315 320Leu Leu Arg Tyr Arg Gln Leu Leu Gly Met Val Arg Gly His Leu Pro325 330 335Ser Arg Arg His Gln Ala Ile Phe Thr Ile Ser340 345<210>39<211>1023<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>39atgaatccat ttcatgcatc ttgttggaac acctctgccg aacttttaaa caaatcctgg 60aataaagagt ttgcttatca aactgccagt gtggtagata cagtcatcct cccttccatg120attgggatta tctgttcaac agggctggtt ggcaacatcc tcattgtatt cactataata180agatccagga aaaaaacagt ccctgacatc tatatctgca acctggctgt ggctgatttg240gtccacatag ttggaatgcc ttttcttatt caccaatggg cccgaggggg agagtgggtg300tttggggggc ctctctgcac catcatcaca tccctggata cttgtaacca atttgcctgt360agtgccatca tgactgtaat gagtgtggac aggtactttg ccctcgtcca accatttcga420ctgacacgtt ggagaacaag gtacaagacc atccggatca atttgggcct ttgggcagct480tcctttatcc tggcattgcc tgtctgggtc tactcgaagg tcatcaaatt taaagacggt540gttgagagtt gtgcttttga tttgacatcc cctgacgatg tactctggta tacactttat600ttgacgataa caactttttt tttccctcta cccttgattt tggtgtgcta tattttaatt660ttatgctata cttgggagat gtatcaacag aataaggatg ccagatgctg caatcccagt720gtaccaaaac agagagtgat gaagttgaca aagatggtgc tggtgctggt ggtagtcttt780
atcctgagtg ctgcccctta tcatgtgata caactggtga acttacagat ggaacagccc 840acactggcct tctatgtggg ttattacctc tccatctgtc tcagctatgc cagcagcagc 900attaaccctt ttctctacat cctgctgagt ggaaatttcc agaaacgtct gcctcaaatc 960caaagaagag cgactgagaa ggaaatcaac aatatgggaa acactctgaa atcacacttt1020tag 1023<210>40<2ll>340<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>40Met Asn Pro Phe His Ala Ser Cys Trp Asn Thr Ser Ala Glu Leu Leu1 5 10 15Asn Lys Ser Trp Asn Lys Glu Phe Ala Tyr Gln Thr Ala Ser Val Val20 25 30Asp Thr Val Ile Leu Pro Ser Met Ile Gly Ile Ile Cys Ser Thr Gly35 40 45Leu Val Gly Asn Ile Leu Ile Val Phe Thr Ile Ile Arg Ser Arg Lys50 55 60Lys Thr Val Pro Asp Ile Tyr Ile Cys Asn Leu Ala Val Ala Asp Leu65 70 75 80Val His Ile Val Gly Met Pro Phe Leu Ile His Gln Trp Ala Arg Gly85 90 95Gly Glu Trp Val Phe Gly Gly Pro Leu Cys Thr Ile Ile Thr Ser Leu100 105 110Asp Thr Cys Asn Gln Phe Ala Cys Ser Ala Ile Met Thr Val Met Ser115 120 125Val Asp Arg Tyr Phe Ala Leu Val Gln Pro Phe Arg Leu Thr Arg Trp130 135 140Arg Thr Arg Tyr Lys Thr Ile Arg Ile Asn Leu Gly Leu Trp Ala Ala145 150 155 160Ser Phe Ile Leu Ala Leu Pro Val Trp Val Tyr Ser Lys Val Ile Lys165 170 175Phe Lys Asp Gly Val Glu Ser Cys Ala Phe Asp Leu Thr Ser Pro Asp180 185 190Asp Val Leu Trp Tyr Thr Leu Tyr Leu Thr Ile Thr Thr Phe Phe Phe195 200 205Pro Leu Pro Leu Ile Leu Val Cys Tyr Ile Leu Ile Leu Cys Tyr Thr210 215 220Trp Glu Met Tyr Gln Gln Asn Lys Asp Ala Arg Cys Cys Asn Pro Ser225 230 235 240Val Pro Lys Gln Arg Val Met Lys Leu Thr Lys Met Val Leu Val Leu
245 250 255Val Val Val Phe Ile Leu Ser Ala Ala Pro Tyr His Val Ile Gln Leu260 265 270Val Asn Leu Gln Met Glu Gln Pro Thr Leu Ala Phe Tyr Val Gly Tyr275 280 285Tyr Leu Ser Ile Cys Leu Ser Tyr Ala Ser Ser Ser Ile Asn Pro Phe290 295 300Leu Tyr Ile Leu Leu Ser Gly Asn Phe Gln Lys Arg Leu Pro Gln Ile305 310 315 320Gln Arg Arg Ala Thr Glu Lys Glu Ile Asn Asn Met Gly Asn Thr Leu325 330 335Lys Ser His Phe340<210>41<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>41cttgcagaca tcaccatggc agcc 24<210>42<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>miac_feature<223>新序列<400>42gtgatgctct gagtactgga ctgg 24<210>43<211>20<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>43gaagctgtga agagtgatgc 20<210>44<211>24<212>DNA
<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>44gtcagcaata ttgataagca gcag 24<210>45<211>27<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>45ccatggggaa cgattctgtc agctacg 27<210>46<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_featute<223>新序列<400>46gctatgcctg aagccagtct tgtg 24<210>47<211>26<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>47ccaggatgtt gtgtcaccgt ggtggc 26<210>48<211>26<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_featute<223>新序列<400>48cacagcgctg cagccctgca gctggc 26
<210>49<211>26<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>49cttcctctcg tagggatgaa ccagac 26<210>50<211>26<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>50ctcgcacagg tgggaagcac ctgtgg 26<210>51<211>23<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_featute<223>新序列<400>51gcctgtgaca ggaggtaccc tgg 23<210>52<211>25<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_featute<223>新序列<400>52catatccctc cgagtgtcca gcggc25<210>53<211>31<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature
<223>新序列<400>53gcatggagag aaaatttatg tccttgcaac c 31<210>54<211>27<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>54caagaacagg tctcatctaa gagctcc 27<210>55<211>26<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>55gctgttgcca tgacgtccac ctgcac 26<210>56<211>26<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>56ggacagttca aggtttgcct tagaac 26<210>57<211>23<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>57ctttcgatac tgctcctatg ctc 23<210>58<211>26
<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>58gtagtccact gaaagtccag tgatcc 26<210>59<211>26<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>59tttctgagca tggatccaac catctc 26<210>60<211>25<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>60ctgtctgaca gggcagaggc tcttc25<210>61<211>28<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>61ggaactcgta tagacccagc gtcgctcc 28<210>62<211>28<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>62
ggaggttgcg ccttagcgac agatgacc 28<210>63<211>22<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>Novel Sequence<400>63ctgcacccgg acacttgctc tg 22<210>64<211>25<212>DNA<213>工序列<220>
<221>misc_feature<223>Novel Sequence<400>64gtctgcttgt tcagtgccac tcaac25<210>65<211>26<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>65tatctgcaat tctattctag ctcctg 26<210>66<211>26<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>66tgtccctaat aaagtcacat gaatgc 26<210>67<211>23<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>67ggagacaacc atgaatgagc cac 23<210>68<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>68tatttcaagg gttgtttgag taac 24<210>69<211>27<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>69ggcaccagtg gaggttttct gagcatg 27<210>70<211>27<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>70ctgatggaag tagaggctgt ccatctc 27<210>71<211>23<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>71cctggcgagc cgctagcgcc atg 23<210>72
<211>23<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>72atgagccctg ccaggccctc agt 23<210>73<211>27<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>73ctgcgatgcc cacactcaat acttctg 27<210>74<211>27<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>74aaggatccta cacttggtgg atctcag 27<210>75<211>22<212>DNA<213>人工序列<400>75gctggagcat tcactaggcg ag 22<210>76<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>76agatcctggt tcttggtgac aatg 24<210>77
<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>77agccatccct gccaggaagc atgg 24<210>78<211>27<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>78ccagactgtg gactcaagaa ctctagg 27<210>79<211>28<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>79agtccacgaa caatgaatcc atttcatg 28<210>80<211>25<212>DNA<213>人工序列 ence<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>80atcatgtcta gactcatggt gatcc25<210>81<211>30<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列
<400>81ggggagggaa agcaaaggtg gtcctcctgg 30<210>82<211>30<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>82ccaggagaac cacctttgct ttccctcccc 30<210>83<211>1356<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>83atggagtcct cacccatccc ccagtcatca gggaactctt ccactttggg gagggtccct 60caaaccccag gtccctctac tgccagtggg gtcccggagg tggggctacg ggatgttgct 120tcggaatctg tggccctctt cttcatgctc ctgctggact tgactgctgt ggctggcaat 180gccgctgtga tggccgtgat cgccaagacg cctgccctcc gaaaatttgt cttcgtcttc 240cacctctgcc tggtggacct gctggctgcc ctgaccctca tgcccctggc catgctctcc 300agctctgccc tctttgacca cgccctcttt ggggaggtgg cctgccgcct ctacttgttt 360ctgagcgtgt gctttgtcag cctggccatc ctctcggtgt cagccatcaa tgtggagcgc 420tactattacg tagtccaccc catgcgctac gaggtgcgca tgacgctggg gctggtggcc 480tctgtgctgg tgggtgtgtg ggtgaaggcc ttggccatgg cttctgtgcc agtgttggga 540agggtctcct gggaggaagg agctcccagt gtccccccag gctgttcact ccagtggagc 600cacagtgcct actgccagct ttttgtggtg gtctttgctg tcctttactt tctgttgccc 660ctgctcctca tacttgtggt ctactgcagc atgttccgag tggcccgcgt ggctgccatg 720cagcacgggc cgctgcccac gtggatggag acaccccggc aacgctccga atctctcagc 780agccgctcca cgatggtcac cagctcgggg gccccccaga ccaccccaca ccggacgttt 840gggggaggga aagcaaaggt ggttctcctg gctgtggggg gacagttcct gctctgttgg 900ttgccctact tctctttcca cctctatgtt gccctgagtg ctcagcccat ttcaactggg 960caggtggaga gtgtggtcac ctggattggc tacttttgct tcacttccaa ccctttcttc1020tatggatgtc tcaaccggca gatccggggg gagctcagca agcagtttgt ctgcttcttc1080aagccagctc cagaggagga gctgaggctg cctagccggg agggctccat tgaggagaac1140ttcctgcagt tccttcaggg gactggctgt ccttctgagt cctgggtttc ccgaccccta1200cccagcccca agcaggagcc acctgctgtt gactttcgaa tcccaggcca gatagctgag1260
gagacctctg agttcctgga gcagcaactc accagcgaca tcatcatgtc agacagctac1320ctccgtcctg ccgcctcacc ccggctggag tcatga 1356<210>84<211>451<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>84Met Glu Ser Ser Pro Ile Pro Gln Ser Ser Gly Asn Ser Ser Thr Leu1 5 10 15Gly Arg Val Pro Gln Thr Pro Gly Pro Ser Thr Ala Ser Gly Val Pro20 25 30Glu Val Gly Leu Arg Asp Val Ala Ser Glu Ser Val Ala Leu Phe Phe35 40 45Met Leu Leu Leu Asp Leu Thr Ala Val A1a Gly Asn Ala Ala Val Met50 55 60Ala Val Ile Ala Lys Thr Pro Ala Leu Arg Lys Phe Val Phe Val Phe65 70 75 80His Leu Cys Leu Val Asp Leu Leu Ala Ala Leu Thr Leu Met Pro Leu85 90 95Ala Met Leu Ser Ser Ser Ala Leu Phe Asp His Ala Leu Phe Gly Glu100 105 110Val Ala Cys Arg Leu Tyr Leu Phe Leu Ser Val Cys Phe Val Ser Leu115 120 125Ala Ile Leu Ser Val Ser Ala Ile Ash Val Glu Arg Tyr Tyr Tyr Val130 135 140Val His Pro Met Arg Tyr Glu Val Arg Met Thr Leu Gly Leu Val Ala145 150 155 160Ser Val Leu Val Gly Val Trp Val Lys Ala Leu Ala Met Ala Ser Val165 170 175Pro Val Leu Gly Arg Val Ser Trp Glu Glu Gly Ala Pro Ser Val Pro180 185 190Pro Gly Cys Ser Leu Gln Trp Ser His Ser Ala Tyr Cys Gln Leu Phel95 200 205Val Val Val Phe Ala Val Leu Tyr Phe Leu Leu Pro Leu Leu Leu Ile210 215 220Leu Val Val Tyr Cys Ser Met Phe Arg Val Ala Arg Val Ala Ala Met22S 230 235 240Gln His Gly Pro Leu Pro Thr Trp Met Glu Thr Pro Arg Gln Arg Ser245 250 255Glu Ser Leu Ser Ser Arg Ser Thr Met Val Thr Ser Ser Gly Ala Pro260 265 270Gln Thr Thr Pro His Arg Thr Phe Gly Gly Gly Lys Ala Lys Val Val
275 280 285Leu Leu Ala Val Gly Gly Gln phe Leu Leu Cys Trp Leu Pro Tyr Phe290 295 300Ser Phe His Leu Tyr Val Ala Leu Ser Ala Gln Pro Ile Ser Thr Gly305 310 315 320Gln Val Glu Ser Val Val Thr Trp Ile Gly Tyr Phe Cys Phe Thr Ser325 330 335Asn Pro Phe Phe Tyr Gly Cys Leu Asn Arg Gln Ile Arg Gly Glu Leu340 345 350Ser Lys Gln Phe Val Cys Phe Phe Lys Pro Ala Pro Glu Glu Glu Leu355 360 365Arg Leu Pro Ser Arg Glu Gly Ser Ile Glu Glu Asn Phe Leu Gln Phe370 375 380Leu Gln Gly Thr Gly Cys Pro Ser Glu Ser Trp Val Ser Arg Pro Leu385 390 395 400Pro Ser Pro Lys Gln Glu Pro Pro Ala Val Asp Phe Arg Ile Pro Gly405 410 415Gln Ile Ala Glu Glu Thr Ser Glu Phe Leu Glu Gln Gln Leu Thr Ser420 425 430Asp Ile Ile Met Ser Asp Ser Tyr Leu Arg Pro Ala Ala Ser Pro Arg435 440 445Leu Glu Ser450<2110>85<211>28<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>85caggaaggca aagaccacca tcatcatc 28<210>86<211>28<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>86gatgatgatg gtggtctttg ccttcctg 28<210>87<211>1041<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>87atggagagaa aatttatgtc cttgcaacca tccatctccg tatcagaaat ggaaccaaat 60ggcaccttca gcaataacaa cagcaggaac tgcacaattg aaaacttcaa gagagaattt120ttcccaattg tatatctgat aatatttttc tggggagtct tgggaaatgg gttgtccata180
tatgttttcc tgcagcctta taagaagtcc acatctgtga acgttttcat gctaaatctg 240gccatttcag atctcctgtt cataagcacg cttcccttca gggctgacta ttatcttaga 300ggctccaatt ggatatttgg agacctggcc tgcaggatta tgtcttattc cttgtatgtc 360aacatgtaca gcagtattta tttcctgacc gtgctgagtg ttgtgcgttt cctggcaatg 420gttcacccct ttcggcttct gcatgtcacc agcatcagga gtgcctggat cctctgtggg 480atcatatgga tccttatcat ggcttcctca ataatgctcc tggacagtgg ctctgagcag 540aacggcagtg tcacatcatg cttagagctg aatctctata aaattgctaa gctgcagacc 600atgaactata ttgccttggt ggtgggctgc ctgctgccat ttttcacact cagcatctgt 660tatctgctga tcattcgggt tctgttaaaa gtggaggtcc cagaatcggg gctgcgggtt 720tctcacagga aggcaaagac caccatcatc atcaccttga tcatcttctt cttgtgtttc 780ctgccctatc acacactgag gaccgtccac ttgacgacat ggaaagtggg tttatgcaaa 840gacagactgc ataaagcttt ggttatcaca ctggccttgg cagcagccaa tgcctgcttc 900aatcctctgc tctattactt tgctg9ggag aattttaagg acagactaaa gtctgcactc 960agaaaaggcc atccacagaa ggcaaagaca aagtgtgttt tccctgttag tgtgtggttg1020agaaaggaaa caagagtata a 1041<210>88<211>346<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)<400>88Met Glu Arg Lys Phe Met Ser Leu Gln Pro Ser Ile Ser Val Ser Glu1 5 10 15Met Glu Pro Asn Gly Thr Phe Ser Asn Asn Asn Ser Arg Asn Cys Thr20 25 30Ile Glu Asn Phe Lys Arg Glu Phe Phe Pro Ile Val Tyr Leu Ile Ile35 40 45Phe Phe Trp Gly Val Leu Gly Asn Gly Leu Ser Ile Tyr Val Phe Leu50 55 60Gln Pro Tyr Lys Lys Ser Thr Ser Val Ash Val Phe Met Leu Asn Leu65 70 75 80Ala Ile Ser Asp Leu Leu Phe Ile Ser Thr Leu Pro Phe Arg Ala Asp85 90 95Tyr Tyr Leu Arg Gly Ser Asn Trp Ile Phe Gly Asp Leu Ala Cys Arg100 105 110Ile Met Ser Tyr Ser Leu Tyr Val Asn Met Tyr Ser Ser Ile Tyr Phe115 120 125Leu Thr Val Leu Ser Val Val Arg Phe Leu Ala Met Val His Pro Phe130 135 140
Arg Leu Leu His Val Thr Ser Ile Arg Ser Ala Trp Ile Leu Cys Gly145 150 155 160Ile Ile Trp Ile Leu Ile Met Ala Ser Ser Ile Met Leu Leu Asp Ser165 l70 175Gly Ser Glu Gln Asn Gly Ser Val Thr Ser Cys Leu Glu Leu Asn Leu180 185 190Tyr Lys Ile Ala Lys Leu Gln Thr Met Asn Tyr Ile Ala Leu Val Val195 200 205Gly Cys Leu Leu Pro Phe Phe Thr Leu Ser Ile Cys Tyr Leu Leu Ile210 215 220Ile Arg Val Leu Leu Lys Val Glu Val Pro Glu Ser Gly Leu Arg Val225 230 235 240Ser His Arg Lys Ala Lys Thr Thr Ile Ile Ile Thr Leu Ile Ile Phe245 250 255Phe Leu Cys Phe Leu Pro Tyr His Thr Leu Arg Thr Val His Leu Thr260 265 270Thr Trp Lys Val Gly Leu Cys Lys Asp Arg Leu His Lys Ala Leu Val275 280 285Ile Thr Leu Ala Leu Ala Ala Ala Asn Ala Cys Phe Asn Pro Leu Leu290 295 300Tyr Tyr Phe Ala Gly Glu Asn Phe Lys Asp Arg Leu Lys Ser Ala Leu305 310 315 320Arg Lys Gly His Pro Gln Lys Ala Lys Thr Lys Cys Val Phe Pro Val325 330 335Ser Val Trp Leu Arg Lys Glu Thr Arg Val340 345<210>89<211>28<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>89ccagtgcaaa gctaagaaag tgatcttc 28<210>90<211>28<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>90gaagatcact ttcttagctt tgcactgg 28
<210>91<211>1527<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)<400>91atgacgtcca cctgcaccaa cagcacgcgc gagagtaaca gcagccacac gtgcatgccc 60ctctccaaaa tgcccatcag cctggcccac ggcatcatcc gctcaaccgt gctggttatc 120ttcctcgccg cctctttcgt cggcaacata gtgctggcgc tagtgttgca gcgcaagccg 180cagctgctgc aggtgaccaa ccgttttatc tttaacctcc tcgtcaccga cctgctgcag 240atttcgctcg tggccccctg ggtggtggcc acctctgtgc ctctcttctg gcccctcaac 300agccacttct gcacggccct ggttagcctc acccacctgt tcgccttcgc cagcgtcaac 360accattgtcg tggtgtcagt ggatcgctac ttgtccatca tccaccctct ctcctacccg 420tccaagatga cccagcgccg cggttacctg ctcctctatg gcacctggat tgtggccatc 480ctgcagagca ctcctccact ctacggctgg ggccaggctg cctttgatga gcgcaatgct 540ctctgctcca tgatctgggg ggccagcccc agctacacta ttctcagcgt ggtgtccttc 600atcgtcattc cactgattgt catgattgcc tgctactccg tggtgttctg tgcagcccgg 660aggcagcatg ctctgctgta caatgtcaag agacacagct tggaagtgcg agtcaaggac 720tgtgtggaga atgaggatga agagggagca gagaagaagg aggagttcca ggatgagagt 780gagtttcgcc gccagcatga aggtgaggtc aaggccaagg agggcagaat ggaagccaag 840gacggcagcc tgaaggccaa ggaaggaagc acggggacca gtgagagtag tgtagaggcc 900aggggcagcg aggaggtcag agagagcagc acggtggcca gcgacggcag catggagggt 960aaggaaggca gcaccaaagt tgaggagaac agcatgaagg cagacaaggg tcgcacagag1020gtcaaccagt gcagcattga cttgggtgaa gatgacatgg agtttggtga agacgacatc1080aatttcagtg aggatgacgt cgaggcagtg aacatcccgg agagcctccc acccagtcgt1140cgtaacagca acagcaaccc tcctctgccc aggtgctacc agtgcaaagc taagaaagtg1200atcttcatca tcattttctc ctatgtgcta tccctggggc cctactgctt tttagcagtc1260ctggccgtgt gggtggatgt cgaaacccag gtaccccagt gggtgatcac cataatcatc1320tggcttttct tcctgcagtg ctgcatccac ccctatgtct atggctacat gcacaagacc1380attaagaagg aaatccagga catgctgaag aagttcttct gcaaggaaaa gcccccgaaa1440gaagatagcc acccagacct gcccggaaca gagggtggga ctgaaggcaa gattgtccct1500tcctacgatt ctgctacttt tccttga1527<210>92<211>508<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)
<400>92Met Thr Ser Thr Cys Thr Asn Ser Thr Arg Glu Ser Asn Ser Ser His1 5 10 15Thr Cys Met Pro Leu Ser Lys Met Pro Ile Ser Leu Ala His Gly Ile20 25 30Ile Arg Ser Thr Val Leu Val Ile Phe Leu Ala Ala Ser Phe Val Gly35 40 45Asn Ile Val Leu Ala Leu Val Leu Gln Arg Lys Pro Gln Lau Leu Gln50 55 60Val Thr Asn Arg Phe Ile Phe Asn Leu Leu Val Thr Asp Leu Leu Gln65 70 75 80Ile Ser Leu Val Ala Pro Trp Val Val Ala Thr Ser Val Pro Leu Phe85 90 95Trp Pro Leu Asn Ser His Phe Cys Thr Ala Leu Val Ser Leu Thr His100 105 110Leu Phe Ala Phe Ala Ser Val Asn Thr Ile Val Val Val Ser Val Asp115 120 125Arg Tyr Leu Ser Ile Ile His Pro Leu Ser Tyr Pro Ser Lys Met Thr130 135 140Gln Arg Arg Gly Tyr Leu Leu Leu Tyr Gly Thr Trp Ile Val Ala Ile145 150 155 160Leu Gln Ser Thr Pro Pro Leu Tyr Gly Trp Gly Gln Ala Ala Phe Asp165 170 175Glu Arg Asn Ala Leu Cys Ser Met Ile Trp Gly Ala Ser Pro Ser Tyr180 185 190Thr Ile Leu Ser Val Val Ser Phe Ile Val Ile Pro Leu Ile Val Met195 200 205Ile Ala Cys Tyr Ser Val Val Phe Cys Ala Ala Arg Arg Gln His Ala210 215 220Leu Leu Tyr Asn Val Lys Arg His Ser Leu Glu Val Arg Val Lys Asp225 230 235 240Cys Val Glu Asn Glu Asp Glu Glu Gly Ala Glu Lys Lys Glu Glu Phe245 250 255Gln Asp Glu Ser Glu Phe Arg Arg Gln His Glu Gly Glu Val Lys Ala260 265 270Lys Glu Gly Arg Met Glu Ala Lys Asp Gly Ser Leu Lys Ala Lys Glu275 280 285Gly Ser Thr Gly Thr Ser Glu Ser Ser Val Glu Ala Arg Gly Ser Glu290 295 300Glu Val Arg Glu Ser Ser Thr Val Ala Ser Asp Gly Ser Met Glu Gly305 310 315 320Lys Glu Gly Ser Thr Lys Val Glu Glu Asn Ser Met Lys Ala Asp Lys325 330 335
Gly Arg Thr Glu Val Asn Gln Cys Ser Ile Asp Leu Gly Glu Asp Asp340 345 350Met Glu Phe Gly Glu Asp Asp Ile Asn Phe Ser Glu Asp Asp Val Glu355 360 365Ala Val Asn Ile Pro Glu Ser Leu Pro Pro Ser Arg Arg Asn Ser Asn370 375 380Ser Asn Pro Pro Leu Pro Arg Cys Tyr Gln Cys Lys Ala Lys Lys Val385 390 395 400Ile Phe Ile Ile Ile Phe Ser Tyr Val Leu Ser Leu Gly Pro Tyr Cys405 410 415Phe Leu Ala Val Leu Ala Val Trp Val Asp Val Glu Thr Gln Val Pro420 425 430Gln Trp Val Ile Thr Ile Ile Ile Trp Leu Phe Phe Leu Gln Cys Cys435 440 445Ile His Pro Tyr Val Tyr GLy Tyr Met His Lys Thr Ile Lys Lys Glu450 455 460Ile Gln ASp Met Leu Lys Lys Phe Phe Cys Lys Glu Lys Pro Pro Lys465 470 475 480Glu Asp Ser His Pro Asp Leu Pro Gly Thr Glu Gly Gly Thr Glu Gly485 490 495Lys Ile Val Pro Ser Tyr Asp Ser Ala Thr Phe Pro500 505<210>93<211>29<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>93gccgccaccg cgccaagagg aagattggc29<210>94<211>29<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>94gccaatcttc ctcttggcgc ggtggcggc29<210>95<211>1092<212>DNA
<213>智人(Homo sapiens)<400>95atgggccccg gcgaggcgct gctggcgggt ctcctggtga tggtactggc cgtggcgctg 60ctatccaacg cactggtgct gctttgttgc gcctacagcg ctgagctccg cactcgagcc 120rcaggcgtcc tcctggtgaa tctgtcgctg ggccacctgc tgctggcggc gctggacatg 180cccttcacgc tgctcggtgt gatgcgcggg cggacaccgt cggcgcccgg cgcatgccaa 240gtcattggct tcctggacac cttcctggcg tccaacgcgg cgctgagcgt ggcggcgctg 300agcgcagacc agtggctggc agtgggcttc ccactgcgct acgccggacg cctgcgaccg 360cgctatgccg gcctgctgct gggctgtgcc tggggacagt cgctggcctt ctcaggcgct 420gcacttggct gctcgtggct tggctacagc agcgccttcg cgtcctgttc gctgcgcctg 480ccgcccgagc ctgagcgtcc gcgcttcgca gccttcaccg ccacgctcca tgccgtgggc 540ttcgtgctgc cgctggcggt gctctgcctc acctcgctcc aggtgcaccg ggtggcacgc 600agccactgcc agcgcatgga caccgtcacc atgaaggcgc tcgcgctgct cgccgacctg 660caccccagtg tgcggcagcg ctgcctcatc cagcagaagc ggcgccgcca ccgcgccacc 720aggaagattg gcattgctat tgcgaccttc ctcatctgct ttgccccgta tgtcatgacc 780aggctggcgg agctcgtgcc cttcgtcacc gtgaacgccc agaagggcat cctcagcaag 840tgcctgacct acagcaaggc ggtggccgac ccgttcacgt actctctgct ccgccggccg 900ttccgccaag tcctggccgg catggtgcac cggctgctga agagaacccc gcgcccagca 960tccacccatg acagctctct ggatgtggcc ggcatggtgc accagctgct gaagagaacc1020ccgcgcccag cgtccaccca caacggctct gtggacacag agaatgattc ctgcctgcag1080cagacacact ga1092<210>96<211>363<212>PRT< 213>智人(Homo sapiens)<400>96Met Gly Pro Gly Glu Ala Leu Leu Ala Gly Leu Leu Val Met Val Leu1 5 10 15Ala Val Ala Leu Leu Ser Asn Ala Leu Val Leu Leu Cys Cys Ala Tyr20 25 30Ser Ala Glu Leu Arg Thr Arg Ala Ser Gly Val Leu Leu Val Asn Leu35 40 45Ser Leu Gly His Leu Leu Leu Ala Ala Leu Asp Met Pro Phe Thr Leu50 55 60Leu Gly Val Met Arg Gly Arg Thr Pro Ser Ala Pro Gly Ala Cys Gln65 70 75 80Val Ile Gly Phe Leu Asp Thr Phe Leu Ala Ser Asn Ala Ala Leu Ser
85 90 95Val Ala Ala Leu Ser Ala Asp Gln Trp Leu Ala Val Gly Phe Pro Leu100 105 110Arg Tyr Ala Gly Arg Leu Arg Pro Arg Tyr Ala Gly Leu Leu Leu Gly115 120 125Cys Ala Trp Gly Gln Ser Leu Ala Phe Ser Gly Ala Ala Leu Gly Cys130 135 140Ser Trp Leu Gly Tyr Ser Ser Ala Phe Ala Ser Cys Ser Leu Arg Leu145 150 155 160Pro Pro Glu Pro Glu Arg Pro Arg Phe Ala Ala Phe Thr Ala Thr Leu165 170 175His Ala Val Gly Phe Val Leu Pro Leu Ala Val Leu Cys Leu Thr Ser180 185 190Leu Gln Val His Arg Val Ala Arg Ser His Cys Gln Arg Met Asp Thr195 200 205Val Thr Met Lys Ala Leu Ala Leu Leu Ala Asp Leu His Pro Ser Val210 215 220Arg Gln Arg Cys Leu Ile Gln Gln Lys Arg Arg Arg His Arg Ala Thr225 230 235 240Arg Lys Ile Gly Ile Ala Ile Ala Thr Phe Leu Ile Cys Phe Ala Pro245 250 255Tyr Val Met Thr Arg Leu Ala Glu Leu Val Pro Phe Val Thr Val Asn260 265 270Ala Gln Lys Gly Ile Leu Ser Lys Cys Leu Thr Tyr Ser Lys Ala Val275 280 285Ala Asp Pro Phe Thr Tyr Ser Leu Leu Arg Arg Pro Phe Arg Gln Val290 295 300Leu Ala Gly Met Val His Arg Leu Leu Lys Arg Thr Pro Arg Pro Ala305 310 315 320Ser Thr His Asp Ser Ser Leu Asp Val Ala Gly Met Val His Gln Leu325 330 335Leu Lys Arg Thr Pro Arg Pro Ala Ser Thr His Asn Gly Ser Val Asp340 345 350Thr Glu Asn Asp Ser Cys Leu Gln Gln Thr His355 360<210>97<211>34<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>mist_featute<223>新序列<400>97gatctctaga atggagtcct cacccatccc ccag 34
<210>98<211>36<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>98gatcgatatc cgtgactcca gccggggtga ggcggc36<210>99<211>2610<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)和大鼠<400>99atggagtcct cacccatccc ccagtcatca gggaactctt ccactttggg gagggtccct 60caaaccccag gtccctctac tgccagtggg gtcccggagg tggggctacg ggatgttgct 120tcggaatctg tggccctctt cttcatgctc ctgctggact tgactgctgt ggctggcaat 180gccgctgtga tggccgtgat cgccaagacg cctgccctcc gaaaatttgt cttcgtcttc 240cacctctgcc tggtggacct gctggctgcc ctgaccctca tgcccctggc catgctctcc 300agctctgccc tctttgacca cgccctcttt ggggaggtgg cctgccgcct ctacttgttt 360ctgagcgtgt gctttgtcag cctggccatc ctctcggtgt cagccatcaa tgtggagcgc 420tactattacg tagtccaccc catgcgctac gaggtgcgca tgacgctggg gctggtggcc 480tctgtgctgg tgggtgtgtg ggtgaaggcc ttggccatgg cttctgtgcc agtgttggga 540agggtctcct gggaggaagg agctcccagt gtccccccag gctgttcact ccagtggagc 600cacagtgcct actgccagct ttttgtggtg gtctttgctg tcctttactt tctgttgccc 660ctgctcctca tacttgtggt ctactgcagc atgttccgag tggcccgcgt ggctgccatg 720cagcacgggc cgctgcccac gtggatggag acaccccggc aacgctccga atctctcagc 780agccgctcca cgatggtcac cagctcgggg gccccccaga ccaccccaca ccggacgttt 840gggggaggga aagcagcagt ggttctcctg gctgtggggg gacagttcct gctctgttgg 900ttgccctact tctctttcca cctctatgtt gccctgagtg ctcagcccat ttcaactggg 960caggtggaga gtgtggtcac ctggattggc tacttttgct tcacttccaa ccctttcttc1020tatggatgtc tcaaccggca gatccggggg gagctcagca agcagtttgt ctgcttcttc1080aagccagctc cagaggagga gctgaggctg cctagccggg agggctccat tgaggagaac1140ttcctgcagt tccttcaggg gactggctgt ccttctgagt cctgggtttc ccgaccccta1200cccagcccca agcaggagcc acctgctgtt gactttcgaa tcccaggcca gatagctgag1260gagacctctg agttcctgga gcagcaactc accagcgaca tcatcatgtc agacagctac1320
ctccgtcctg ccgcctcacc ccggctggag tcagcgatat ctgcagaatt ccaccacact1380ggactagtgg atccgagctc ggtaccaagc ttgggctgca ggtcgatggg ctgcctcggc1440aacagtaaga ccgaggacca gcgcaacgag gagaaggcgc agcgcgaggc caacaaaaag1500atcgagaagc agctgcagaa ggacaagcag gtctaccggg ccacgcaccg cctgctgctg1560ctgggtgctg gagagtctgg caaaagcacc attgtgaagc agatgaggat cctacatgtt1620aatgggttta acggagaggg cggcgaagag gacccgcagg ctgcaaggag caacagcgat1680ggtgagaagg ccaccaaagt gcaggacatc aaaaacaacc tgaaggaggc cattgaaacc1740attgtggccg ccatgagcaa cctggtgccc cccgtggagc tggccaaccc tgagaaccag1800ttcagagtgg actacattct gagcgtgatg aacgtgccaa actttgactt cccacctgaa1860ttctatgagc atgccaaggc tctgtgggag gatgagggag ttcgtgcctg ctacgagcgc1920tccaacgagt accagctgat cgactgtgcc cagtacttcc tggacaagat tgatgtgatc1980aagcaggccg actacgtgcc aagtgaccag gacctgcttc gctgccgcgt cctgacctct2040ggaatctttg agaccaagtt ccaggtggac aaagtcaact tccacatgtt cgatgtgggc2100ggccagcgcg atgaacgccg caagtggatc cagtgcttca atgatgtgac tgccatcatc2160ttcgtggtgg ccagcagcag ctacaacatg gtcatccggg aggacaacca gaccaaccgt2220ctgcaggagg ccctgaacct cttcaagagc atctggaaca acagatggct gcgtaccatc2280tctgtgatcc tcctcctcaa caagcaagat ctgcttgctg agaaggtcct cgctgggaaa2340tcgaagattg aggactactt tccagagttc gctcgctaca ccactcctga ggatgcgact2400cccgagcccg gagaggaccc acgcgtgacc cgggccaagt acttcatccg ggatgagttt2460ctgagaatca gcactgctag tggagatgga cgtcactact gctaccctca ctttacctgc2520gccgtggaca ctgagaacat ccgccgtgtc ttcaacgact gccgtgacat catccagcgc2580atgcatcttc gccaatacga gctgctctaa 2610<210>100<211>869<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)和大鼠<400>100Met Glu Ser Ser Pro Ile Pro Gln Ser Ser Gly Asn Ser Ser Thr Leu1 5 10 15Gly Arg Val Pro Gln Thr Pro Gly Pro Ser Thr Ala Ser Gly Val Pro20 25 30Glu Val Gly Leu Arg Asp Val Ala Ser Glu Ser Val Ala Leu Phe Phe35 40 45Met Leu Leu Leu Asp Leu Thr Ala Val Ala Gly Asn Ala Ala Val Met50 55 60
Ala Val Ile Ala Lys Thr Pro Ala Leu Arg Lys Phe Val Phe Val Phe65 70 75 80His Leu Cys Leu Val Asp Leu Leu Ala Ala Leu Thr Leu Met Pro Leu85 90 95Ala Met Leu Ser Ser Ser Ala Leu Phe Asp His Ala Leu Phe Gly Glu100 105 110Val Ala Cys Arg Leu Tyr Leu Phe Leu Ser Val Cys Phe Val Ser Leu115 120 125Ala Ile Leu Ser Val Ser Ala Ile Asn Val Glu Arg Tyr Tyr Tyr Val130 135 140Val His Pro Met Arg Tyr Glu Val Arg Met Thr Leu Gly Leu Val Ala145 150 155 160Ser Val Leu Val Gly Val Trp Val Lys Ala Leu Ala Met Ala Ser Val165 170 175Pro Val Leu Gly Arg Val Ser Trp Glu Glu Gly Ala Pro Ser Val Pro180 185 190Pro Gly Cys Ser Leu Gln Trp Ser His Ser Ala Tyr Cys Gln Leu Phe195 200 205Val Val Val Phe Ala Val Leu Tyr Phe Leu Leu Pro Leu Leu Leu Ile210 215 220Leu Val Val Tyr Cys Ser Met Phe Arg Val Ala Arg Val Ala Ala Met225 230 235 240Gln His Gly Pro Leu Pro Thr Trp Met Glu Thr Pro Arg Gln Arg Ser245 250 255Glu Ser Leu Ser Ser Arg Ser Thr Met Val Thr Ser Ser Gly Ala Pro260 265 270Gln Thr Thr Pro His Arg Thr Phe Gly Gly Gly Lys Ala Ala Val Val275 280 285Leu Leu Ala Val Gly Gly Gln Phe Leu Leu Cys Trp Leu Pra Tyr Phe290 295 300Ser Phe His Leu Tyr Val Ala Leu Ser Ala Gln Pro Ile Ser Thr Gly305 310 315 320Gln Val Glu Ser Val Val Thr Trp Ile Gly Tyr Phe Cys Phe Thr Ser325 330 335Asn Pro Phe Phe Tyr Gly Cys Leu Asn Arg Gln Ile Arg Gly Glu Leu340 345 350Ser Lys Gln Phe Val Cys Phe Phe Lys Pro Ala Pro Glu Glu Glu Leu355 360 365Arg Leu Pro Ser Arg Glu Gly Ser Ile Glu Glu Asn Phe Leu Gln Phe370 375 380Leu Gln Gly Thr Gly Cys Pro Ser Glu Ser Trp Val Ser Arg Pro Leu385 390 395 400Pro Ser Pro Lys Gln Glu Pro Pro Ala Val Asp Phe Arg Ile Pro Gly405 410 415
Gln Ile Ala Glu Glu Thr Ser Glu Phe Leu Glu Gln Gln Leu Thr Ser420 425 430Asp Ile Ile Met Ser Asp Ser Tyr Leu Arg Pro Ala Ala Ser Pro Arg435 440 445Leu Glu Ser Ala Ile Ser Ala Glu Phe His His Thr Gly Leu Val Asp450 455 460Pro Ser Ser Val Pro Ser Leu Gly Cys Arg Ser Met Gly Cys Leu Gly465 470 475 480Asn Ser Lys Thr Glu Asp Gln Arg Asn Glu Glu Lys Ala Gln Arg Glu485 490 495Ala Asn Lys Lys Ile Glu Lys Gln Leu Gln Lys Asp Lys Gln Val Tyr500 505 510Arg Ala Thr His Arg Leu Leu Leu Leu Gly Ala Gly Glu Ser Gly Lys515 520 525Ser Thr Ile Val Lys Gln Met Arg Ile Leu His Val Asn Gly Phe Asn530 535 540Gly Glu Gly Gly Glu Glu Asp Pro Gln Ala Ala Arg Ser Asn Ser Asp545 550 555 560Gly Glu Lys Ala Thr Lys Val Gln Asp Ile Lys Asn Asn Leu Lys Glu565 570 575Ala Ile Glu Thr Ile Val Ala Ala Met Ser Asn Leu Val Pro Pro Val580 585 590Glu Leu Ala Asn Pro Glu Asn Gln Phe Arg Val Asp Tyr Ile Leu Ser595 600 605Val Met Asn Val Pro Asn Phe Asp Phe Pro Pro Glu Phe Tyr Glu His610 615 620Ala Lys Ala Leu Trp Glu Asp Glu Gly Val Arg Ala Cys Tyr Glu Arg625 630 635 640Ser Asn Glu Tyr Gln Leu Ile Asp Cys Ala Gln Tyr Phe Leu Asp Lys645 650 655Ile Asp Val Ile Lys Gln Ala Asp Tyr Val Pro Ser Asp Gln Asp Leu660 665 670Leu Arg Cys Arg Val Leu Thr Ser Gly Ile Phe Glu Thr Lys Phe Gln675 680 685Val Asp Lys Val Asn Phe His Met Phe Asp Val Gly Gly Gln Arg Asp690 695 700Glu Arg Arg Lys Trp Ile Gln Cys Phe Asn Asp Val Thr Ala Ile Ile705 710 715 720Phe Val Val Ala Ser Ser Ser Tyr Asn Met Val Ile Arg Glu Asp Asn725 730 735Gln Thr Asn Arg Leu Gln Glu Ala Leu Asn Leu Phe Lys Ser Ile Trp740 745 750Asn Asn Arg Trp Leu Arg Thr Ile Ser Val Ile Leu Phe Leu Asn Lys
755 760 765Gln Asp Leu Leu Ala Glu Lys Val Leu Ala Gly Lys Ser Lys Ile Glu770 775 780Asp Tyr Phe Pro Glu Phe Ala Arg Tyr Thr Thr Pro Glu Asp Ala Thr785 790 795 800Pro Glu Pro Gly Glu Asp Pro Arg Val Thr Arg Ala Lys Tyr Phe Ile805 810 815Arg Asp Glu Phe Leu Arg Ile Ser Thr Ala Ser Gly Asp Gly Arg His820 825 830Tyr Cys Tyr Pro His Phe Thr Cys Ala Val Asp Thr Glu Asn Ile Arg835 840 845Arg Val Phe Asn Asp Cys Arg Asp Ile Ile Gln Arg Met His Leu Arg850 855 860Gln Tyr Glu Leu Leu865<210>101<211>30<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>101tctagaatga cgtccacctg caccaacagc 30<210>102<211>34<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>102gatatcgcag gaaaagtagc agaatcgtag gaag 34<210>103<211>2781<212>DNA<213>智人(Homo sapiens)和大鼠<400>103atgacgtcca cctgcaccaa cagcacgcgc gagagtaaca gcagccacac gtgcatgccc 60ctctccaaaa tgcccatcag cctggcccac ggcatcatcc gctcaaccgt gctggttatc120ttcctcgccg cctctttcgt cggcaacata gtgctggcgc tagtgttgca gcgcaagccg180cagctgctgc aggtgaccaa ccgttttatc tttaacctcc tcgtcaccga cctgctgcag240
atttcgctcg tggccccctg ggtggtggcc acctctgtgc ctctcttctg gcccctcaac 300agccacttct gcacggccct ggttagcctc acccacctgt tcgccttcgc cagcgtcaac 360accattgtcg tggtgtcagt ggatcgctac ttgtccatca tccaccctct ctcctacccg 420tccaagatga cccagcgccg cggttacctg ctcctctatg gcacctggat tgtggccatc 480ctgcagagca ctcctccact ctacggctgg ggccaggctg cctttgatga gcgcaatgct 540ctctgctcca tgatctgggg ggccagcccc agctacacta ttctcagcgt ggtgtccttc 600atcgtcattc cactgattgt catgattgcc tgctactccg tggtgttctg tgcagcccgg 660aggcagcatg ctctgctgta caatgtcaag agacacagct tggaagtgcg agtcaaggac 720tgtgtggaga atgaggatga agagggagca gagaagaagg aggagttcca ggatgagagt 780gagtttcgcc gccagcatga aggtgaggtc aaggccaagg agggcagaat ggaagccaag 840gacggcagcc tgaaggccaa ggaaggaagc acggggacca gtgagagtag tgtagaggcc 900aggggcagcg aggaggtcag agagagcagc acggtggcca gcgacggcag catggagggt 960aaggaaggca gcaccaaagt tgaggagaac agcatgaagg cagacaaggg tcgcacagag1020gtcaaccagt gcagcattga cttgggtgaa gatgacatgg agtttggtga agacgacatc1080aatttcagtg aggatgacgt cgaggcagtg aacatcccgg agagcctccc acccagtcgt1140cgtaacagca acagcaaccc tcctctgccc aggtgctacc agtgcaaagc tgctaaagtg1200atcttcatca tcattttctc ctatgtgcta tccctggggc cctactgctt tttagcagtc1260ctggccgtgt gggtggatgt cgaaacccag gtaccccagt gggtgatcac cataatcatc1320tggcttttct tcctgcagtg ctgcatccac ccctatgtct atggctacat gcacaagacc1380attaagaagg aaatccagga catgctgaag aagttcttct gcaaggaaaa gcccccgaaa1440gaagatagcc acccagacct gcccggaaca gagggtggga ctgaaggcaa gattgtccct1500tcctacgatt ctgctacttt tcctgcgata tctgcagaat tccaccacac tggactagtg1560gatccgagct cggtaccaag cttgggctgc aggtcgatgg gctgcctcgg caacagtaag1620accgaggacc agcgcaacga ggagaaggcg cagcgcgagg ccaacaaaaa gatcgagaag1680cagctgcaga aggacaagca ggtctaccgg gccacgcacc gcctgctgct gctgggtgct1740ggagagtctg gcaaaagcac cattgtgaag cagatgagga tcctacatgt taatgggttt1800aacggagagg gcggcgaaga ggacccgcag gctgcaagga gcaacagcga tggtgagaag1860gccaccaaag tgcaggacat caaaaacaac ctgaaggagg ccattgaaac cattgtggcc1920gccatgagca acctggtgcc ccccgtggag ctggccaacc ctgagaacca gttcagagtg1980gactacattc tgagcgtgat gaacgtgcca aactttgact tcccacctga attctatgag2040catgccaagg ctctgtggga ggatgaggga gttcgtgcct gctacgagCg ctccaacgag2100taccagctga tcgactgtgc ccagtacttc ctggacaaga ttgatgtgat caagcaggcc2160gactacgtgc caagtgacca ggacctgctt cgctgccgcg tcctgacctc tggaatcttt2220
gagaccaagt tccaggtgga caaagtcaac ttccacatgt tcgatgtggg cggccagcgc2280gatgaacgcc gcaagtggat ccagtgcttc aatgatgtga ctgccatcat cttcgtggtg2340gccagcagca gctacaacat ggtcatccgg gaggacaacc agaccaaccg tctgcaggag2400gctctgaacc tcttcaagag catctggaac aacagatggc tgcgtaccat ctctgtgatc2460ctcttcctca acaagcaaga tctgcttgct gagaaggtcc tcgctgggaa atcgaagatt2520gaggactact ttccagagtt cgctcgctac accactcctg aggatgcgac tcccgagccc2580ggagaggacc cacgcgtgac ccgggccaag tacttcatcc gggatgagtt tctgagaatc2640agcactgcta gtggagatgg acgtcactac tgctaccctc actttacctg cgccgtggac2700actgagaaca tccgccgtgt cttcaacgac tgccgtgaca tcatccagcg catgcatctt2760cgccaatacg agctgctcta a 2781<210>104<211>926<212>PRT<213>智人(Homo sapiens)和大鼠<400>104Met Thr Ser Thr Cys Thr Asn Ser Thr Arg Glu Ser Asn Ser Ser His1 5 10 15Thr Cys Met Pro Leu Ser Lys Met Pro Ile Ser Leu Ala His Gly Ile20 25 30Ile Arg Ser Thr Val Leu Val Ile Phe Leu Ala Ala Ser Phe Val Gly35 40 45Asn Ile Val Leu Ala Leu Val Leu Gln Arg Lys Pro Gln Leu Leu Gln50 55 60Val Thr Asn Arg Phe Ile Phe Asn Leu Leu Val Thr Asp Leu Leu Gln65 70 75 80Ile Ser Leu Val Ala Pro Trp Val Val Ala Thr Ser Val Pro Leu Phe85 90 95Trp Pro Leu Asn Ser His Phe Cys Thr Ala Leu Val Ser Leu Thr His100 105 110Leu Phe Ala Phe Ala Ser Val Asn Thr Ile Val Val Val Ser Val Asp115 120 125Arg Tyr Leu Ser Ile Ile His Pro Leu Ser Tyr Pro Ser Lys Met Thr130 135 140Gln Arg Arg Gly Tyr Leu Leu Leu Tyr Gly Thr Trp Ile Val Ala Ile145 150 155 160Leu Gln Ser Thr Pro Pro Leu Tyr Gly Trp Gly Gln Ala Ala Phe Asp165 170 175Glu Arg Asn Ala Leu Cys Ser Met Ile Trp Gly Ala Ser Pro Ser Tyr180 185 190
Thr Ile Leu Ser Val Val Ser Phe Ile Val Ile Pro Leu Ile Val Met195 200 205Ile Ala Cys Tyr Ser Val Val Phe Cys Ala Ala Arg Arg Gln His Ala210 215 220Leu Leu Tyr Asn Val Lys Arg His Ser Leu Glu Val Arg Val Lys Asp225 230 235 240Cys Val Glu Asn Glu Asp Glu Glu Gly Ala Glu Lys Lys Glu Glu Phe245 250 255Gln Asp Glu Ser Glu Phe Arg Arg Gln His Glu Gly Glu Val Lys Ala260 265 270Lys Glu Gly Arg Met Glu Ala Lys Asp Gly Ser Leu Lys Ala Lys Glu275 280 285Gly Ser Thr Gly Thr Ser Glu Ser Ser Val Glu Ala Arg Gly Ser Glu290 295 300Glu Val Arg Glu Ser Ser Thr Val Ala Ser Asp Gly Ser Met Glu Gly305 310 315 320Lys Glu Gly Ser Thr Lys Val Glu Glu Asn Ser Met Lys Ala Asp Lys325 330 335Gly Arg Thr Glu Val Asn Gln Cys Ser Ile Asp Leu Gly Glu Asp Asp340 345 350Met Glu Phe Gly Glu Asp Asp Ile Asn Phe Ser Glu Asp Asp Val Glu355 360 365Ala Val Asn Ile Pro Glu Ser Leu Pro Pro Ser Arg Arg Asn Ser Asn370 375 380Ser Asn Pro Pro Leu Pro Arg Cys Tyr Gln Cys Lys Ala Ala Lys Val385 390 395 400Ile Phe Ile Ile Ile Phe Ser Tyr Val Leu Ser Leu Gly Pro Tyr Cys405 410 415Phe Leu Ala Val Leu Ala Val Trp Val Asp Val Glu Thr Gln Val Pro420 425 430Gln Trp Val Ile Thr Ile Ile Ile Trp Leu Phe Phe Leu Gln Cys Cys435 440 445Ile His Pro Tyr Val Tyr Gly Tyr Met His Lys Thr Ile Lys Lys Glu450 455 460Ile Gln Asp Met Leu Lys Lys Phe Phe Cys Lys Glu Lys Pro Pro Lys465 470 475 480Glu Asp Ser His Pro Asp Leu Pro Gly Thr Glu Gly Gly Thr Glu Gly485 490 495Lys Ile Val Pro Ser Tyr Asp Ser Ala Thr Phe Pro Ala Ile Ser Ala500 505 510Glu Phe His His Thr Gly Leu Val Asp Pro Ser Ser Val Pro Ser Leu515 520 525Gly Cys Arg Ser Met Gly Cys Leu Gly Asn Ser Lys Thr Glu Asp Gln530 535 540
Arg Asn Glu Glu Lys Ala Gln Arg Glu Ala Asn Lys Lys Ile Glu Lys545 550 555 560Gln Leu Gln Lys Asp Lys Gln Val Tyr Arg Ala Thr His Arg Leu Leu565 570 575Leu Leu Gly Ala Gly Glu Ser Gly Lys Ser Thr Ile Val Lys Gln Met580 585 590Arg Ile Leu His Val Asn Gly Phe Asn Gly Glu Gly Gly Glu Glu Asp595 600 605Pro Gln Ala Ala Arg Ser Asn Ser Asp Gly Glu Lys Ala Thr Lys Val610 615 620Gln Asp Ile Lys Asn Asn Leu Lys Glu Ala Ile Glu Thr Ile Val Ala625 630 635 640Ala Met Ser Asn Leu Val Pro Pro Val Glu Leu Ala Asn Pro Glu Asn645 650 655Gln Phe Arg Val Asp Tyr Ile Leu Ser Val Met Asn Val Pro Asn Phe660 665 670Asp Phe Pro Pro Glu Phe Tyr Glu His Ala Lys Ala Leu Trp Glu Asp675 680 685Glu Gly Val Arg Ala Cys Tyr Glu Arg Ser Asn Glu Tyr Gln Leu Ile690 695 700Asp Cys Ala Gln Tyr Phe Leu Asp Lys Ile Asp Val Ile Lys Gln Ala705 710 715 720Asp Tyr Val Pro Ser Asp Gln Asp Leu Leu Arg Cys Arg Val Leu Thr725 730 735Ser Gly Ile Phe Glu Thr Lys Phe Gln Val Asp Lys Val Asn Phe His740 745 750Met Phe Asp Val Gly Gly Gln Arg Asp Glu Arg Arg Lys Trp Ile Gln755 760 765Cys Phe Asn Asp Val Thr Ala Ile Ile Phe Val Val Ala Ser Ser Ser770 775 780Tyr Asn Met Val Ile Arg Glu Asp Asn Gln Thr Asn Arg Leu Gln Glu785 790 795 800Ala Leu Asn Leu Phe Lys Ser Ile Trp Asn Asn Arg Trp Leu Arg Thr805 810 815Ile Ser Val Ile Leu Phe Leu Asn Lys Gln Asp Leu Leu Ala Glu Lys820 825 830Val Leu Ala Gly Lys Ser Lys Ile Glu Asp Tyr Phe Pro Glu Phe Ala835 840 845Arg Tyr Thr Thr Pro Glu Asp Ala Thr Pro Glu Pro Gly Glu Asp Pro850 855 860Arg Val Thr Arg Ala Lys Tyr Phe Ile Arg Asp Glu Phe Leu Arg Ile865 870 875 880Ser Thr Ala Ser Gly Asp Gly Arg His Tyr Cys Tyr Pro His Phe Thr
885 890 895Cys Ala Val Asp Thr Glu Asn Ile Arg Arg Val Phe Asn Asp Cys Arg900 905 910Asp Ile Ile Gln Arg Met His Leu Arg Gln Tyr Glu Leu Leu915 920 925<210>105<211>23<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>105catgtatgcc agcgtcctgc tcc 23<210>106<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>106gctatgcctg aagccagtct tgtg 24<210>107<211>25<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>107gcacctgctc ctgagcacct tctcc25<210>108<211>26<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>108cacagcgctg cagccctgca gctggc 26<210>109
<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>109ccagtgatga ctctgtccag cctg 24<210>110<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>110cagacacttg gcagggacga ggtg 24<210>111<211>26<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>111cttgtggtct actgcagcat gttccg 26<210>112<211>25<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>112catatccctc cgagtgtcca gcggc25<210>113<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列
<400>113atggatcctt atcatggctt cctc 24<210>114<211>27<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>114caagaacagg tctcatctaa gagctcc 27<210>115<211>26<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>115ctctgatgcc atctgctgga ttcctg 26<210>116<211>26<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>116gtagtccact gaaagtccag tgatcc 26<210>117<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misi_featute<223>新序列<400>117tggtggcgat ggccaacagc gctc24<210>118<211>24<212>DNA<213>人工序列
<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>118gttgcgcctt agcgacagat gacc 24<210>119<211>23<212>DNA<213>工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>119tcaacctgta tagcagcatc ctc 23<210>120<211>23<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>120aaggagtagc agaatggtta gcc 23<210>121<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>121gacacctgtc agcggtcgtg tgtg 24<210>122<211>27<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>122ctgatggaag tagaggctgt ccatctc 27
<210>123<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>123gcgctgagcg cagaccagtg gctg 24<210>124<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_featute<223>新序列<400>124cacggtgacg aagggcacga gctc 24<210>125<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>125agccatccct gccaggaagc atgg 24<210>126<211>25<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_featute<223>新序列<400>126ccaggtaggt gtgcagcaca atggc25<210>127<211>25<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列
<400>127ctgttcaaca gggctggttg gcaac25<210>128<211>25<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>128atcatgtcta gactcatggt gatcc25<210>129<211>6<212>PRT<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>129Thr Leu Glu Ser Ile Met1 5<210>130<211>5<212>PRT<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>130Glu Tyr Asn Leu Val1 5<210>131<211>5<212>PRT<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>131Asp Cys Gly Leu Phe1 5<210>132
<211>36<212>PRT<213>人工序列<220>
<221>misc_feature<223>新序列<400>132Gly Ala Thr Cys Ala Ala Gly Cys Thr Thr Cys Cys Ala Thr Gly Gly1 5 10 15Cys Gly Thr Gly Cys Thr Gly Cys Cys Thr Gly Ala Gly Cys Gly Ala20 25 30Gly Gly Ala Gly35<210>133<211>53<212>PRT<213>人工序列<220>
<222>misc_feature<223>新序列<400>133Gly Ala Thr Cys Gly Gly Ala Thr Cys Cys Thr Thr Ala Gly Ala Ala1 5 10 15Cys Ala Gly Gly Cys Cys Gly Cys Ala Gly Thr Cys Cys Thr Thr Cys20 25 30Ala Gly Gly Thr Thr Cys Ala Gly Cys Thr Gly Cys Ala Gly Gly Ala35 40 45Thr Gly Gly Thr Gly50
权利要求
1.一种分离的多核苷酸，其中该多核苷酸选自(a)包含编码含有SEQ.ID.NO.16所示氨基酸序列的多肽的核苷酸序列的多核苷酸；(b)包含编码SEQ.ID.NO.16所示多肽的核苷酸序列的多核苷酸；(c)包含SEQ.ID.NO.15所示核苷酸序列的多核苷酸；(d)基本上由编码含有SEQ.ID.NO.16所示氨基酸序列的多肽的核苷酸序列组成的多核苷酸；(e)基本上由编码SEQ.ID.NO.16所示多肽的核苷酸序列组成的多核苷酸；(f)基本上由SEQ.ID.NO.15所示的核苷酸序列组成的多核苷酸；(g)由编码含有氨基酸序列SEQ.ID.NO.16的多肽的核苷酸序列组成的多核苷酸；(h)由编码SEQ.ID.NO.16所示多肽的核苷酸序列组成的多核苷酸；和(i)由SEQ.ID.NO.15所示的核苷酸序列组成的多核苷酸。
2.一种分离的多肽，其中该多肽选自(a)含有SEQ.ID.NO.16所示氨基酸序列的多肽；和(b)SEQ.ID.NO.16所示的多肽。
3.一种表达载体，其包含权利要求1所述的多核苷酸。。
4.一种宿主细胞，其含有权利要求3所述的表达载体。
5.一种分离的多肽，其中该多肽选自(a)包含SEQ.ID.NO.16所示氨基酸序列的多肽，其中SEQ.ID.NO.16中的第398位的丙氨酸被除丙氨酸以外的其他氨基酸所代替；和(b)SEQ.ID.NO.16所示的多肽，其中SEQ.ID.NO.16中的第398位的丙氨酸被除丙氨酸以外的其他氨基酸所代替。
6.权利要求5的多肽，其中所述其他氨基酸是赖氨酸。
7.一种分离的多核苷酸，其选自(a)含有编码权利要求5的多肽的核苷酸序列的多核苷酸；(b)基本上由编码权利要求5的多肽的核苷酸序列组成的多核苷酸；和(c)由编码权利要求5的多肽的核苷酸序列组成的多核苷酸。
8.包含权利要求7的多核苷酸的表达载体。
9.包含权利要求8的表达载体的宿主细胞。
全文摘要
本发明申请文件所公开的发明涉及跨膜受体；具体地讲，涉及人G蛋白偶联受体，其内源配体是未知的(孤儿GPCR受体)；进一步具体地讲，涉及用于提供组成型活性证据的人GPCR的突变(非内源性)形式。
文档编号C07K14/435GK1847396SQ200610009339
公开日2006年10月18日 申请日期2000年11月16日 优先权日1999年11月17日
发明者陈若平, 邓杭 申请人:阿瑞那制药公司