专利名称：：缺乏岩藻糖残基的抗前列腺特异性膜抗原(psma)单克隆抗体的制作方法缺乏岩藻糖残基的抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)单克隆抗体发明背景前列腺病是男性发病率和死亡率的主要原因。对于前列腺癌的治疗包括手术、激素、》丈射疗法和化学疗法。对于转移性前列腺疾病几乎没有有效治疗。因此，代表诊断和预后标记的基因和/或基因产物以及治疗靶标的鉴定是关键的。前列腺特异性抗原(PSA)是一种在前列腺癌的临床诊断和分期中有用的这样的癌标记。但是，在4-10ng/ml范围内PSA不能区别良性前列腺增生(BPH)和前列腺炎或者前列腺癌，因此，需要细胞学和/或组织学评价来证实正确的诊断(Barren,R.J.等人(1998)Prostate36:181—188)。前列腺特异性膜抗原(PSMA)是与转铁蛋白受体具有5同源性的大约110kD的II型跨膜糖蛋白，具有750个氨基酸。PSMA具有三个结构域，包括一个19个氨基酸的胞内结构域，一个24个氨基酸的跨膜结构域，和一个707个氨基酸的胞外结构域。PSMA蛋白质显示神经羧肽酶和叶酸水解酶活性，据才艮道参与前列腺生长和分化的神经内分泌调节(Heston，W,D.(1996)Urologe-AusgabeA.35:400-407)。PSM，是位于细胞质中的PSMA的一种可变剪接形式。PSMA主要由前列腺上皮细胞表达。在前列腺癌中，特别是在低分化的、转移的和激素难以治疗的癌中，PSMA的表达增加(Gregorakis，A.K.等人(1998)SeminarsinUrologicOncology16:2—12;Silver,D.A.(1997)ClinicalCancerResearch3:85-515)。在前列腺外组织例知小肠、唾液腺、十二指肠粘膜、近端肾小管和脑中发现^氐水平PSMA表达(Silver,D.A.(1997)ClinicalCancerResearch3:85-515)。在一些恶性肿瘤(包括肾细胞癌和结肠癌)的肿瘤外周和肿瘤内区域中的毛细血管的内皮细胞中也表达PSMA,但是在正常组织的血管中不表达。另外，据报道PSMA与肿瘤血管生成相关(Silver,D.A.(1997)ClinicalCancerResearch3:81-85)。最近，已经证明PSMA在结肠癌、乳腺癌、膀胱癌、胰腺癌、肾癌和黑素瘤中的肿瘤相关新血管系统的内皮细胞中表达(Chang,S.S.(2004)Curr0pinInvestigDrugs5:61H)。抗PSMA胞外域抗体已经描述(参见，例如，Liu，H.等人(1997)CancerRes.57:3629-3634;Murphy，G.P.等人(1998)J.Urol.160:2396-2401;Wang，S.等人(2001)Int.J.Cancer92:871-876;Kato,K.等人(2003)Int.J.Urol.10:439-444;美国专利No.6,150，508和美国专利No.6,107,090)。最近，与PSMA结合的人和人源化抗体已经描述(参见，例如，Bander,N.H.等人(2003)Semin.Oncol.30:667-676;PCT/>布WO02/098897;PCT/>布WO01/09192;PCT/>布W003/064606;PCT7>布WO03/034903;和美国申请No.2004/0033229)。这些抗体已经用于对前列腺癌细胞成傳、(参见，例如，Yao,D.等人(2002)Semin.Urol.Oncol.20:211-218;Bander,N.H.等人(2003)J.Urol.170:1717—1721)。抗-PSMA抗体也已经在前列腺癌治疗中用于治疗性干预，一般与化疗剂或放射性同位素联合使用(参见，例如，Nanus,D.M,等人(2003)J.Urol.170:S84-89;Milowsky,M.I.等人(2004)J.Clin.Oncol.22:2522—2531;Henry，M.D.等人(2004)CancerRes.64:7995-8001)。有效治疗和/或预防PSMA表达相关疾病的改进的治疗性抗PSMA抗体，特别是不需与化疗剂或放射性同位素偶联即具有细胞毒性效应的抗体，是期望的。
发明内容本发明提供分离的脱岩藻糖基化抗体(即缺乏岩藻糖残基的抗体)，其可与人PSMA结合，并且与该抗体的非脱岩藻糖基化形式(即含有岩藻糖残基的抗体)相比，表现出增强的对表达PSMA的细胞的抗体引导的细胞毒性(ADCC)杀伤。还提供了使用本发明的抗体和组合物治疗与PSMA表达有关的多种疾病的方法。本发明的脱岩藻糖基化抗体与PSMA结合，并且与该抗体的岩藻糖基化形式相比，在人效应细胞(例如单核细胞或单个核细胞)的存在下通过增强抗体依赖性细胞毒性(ADCC)抑制表达PSMA的细胞的生长。因此，本发明的抗体提供了治疗以PSMA表达为特征的疾病的改进的手段。因此，在一个方面，本发明涉及一种分离的抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)抗体，其缺乏岩藻糖残基。优选地，该抗体与含有岩藻糖残基的抗体形式相比增强了表达细胞表面PSMA的细胞的抗体依赖性细胞毒性。在优选的实施方案中，缺乏岩藻糖残基的抗体对LNCaP前列腺癌细胞的ADCC活性的ECs。为0.05叫/ml或更低，或0.04jLig/ml或更叶氐，或0.03)ug/ml或更低，或0.02|ag/ml或更低，或大约0.018j^g/ml或更低。在其他优选的实施方案中，缺乏岩藻糖残基的抗体对LNCaP前列腺癌细胞的ADCC活性的ECs。比含有岩藻糖残基的抗体形式对LNCaP前列腺癌细胞的ADCC活性的ECw至少低3倍(或者至少低4倍，或者至少低5倍，或者至少低6倍)。优选地，本发明的脱岩藻糖基化抗体为单克隆抗体。在一方面，本发明涉及人源化或嵌合单克隆抗体。优选地，本发明的人源化或嵌合抗体由选自3F5.4G6、3D7.1.1、4E10-1.14、3E11、4D8、3E6、3C9、2C7、1G3、3C4、3C6、4D4、1G9、5C8B9、3G6、4C8B9、E99、J415、J533和J591的小鼠抗-PSMA抗体制备。在另一方面，本发明涉及人单克隆抗体。在一个优选实施方案中，人单克隆抗体包括人重链可变区和人轻链可变区，其中(a)人重链可变区包含选自SEQIDNO:1-9的氨基酸序列；(b)人轻链可变区包含选自SEQIDNO:10-18的氨基酸序列。在各种实施方案中，优选以下的重链和轻链组合人重链可变区包含SEQIDNO:1的氨基酸序歹'区包含SEQIDNO:10的氨基酸序列人重链可变区包含SEQIDNO:区包含SEQIDNO:11的氨基酸序列人重《连可变区包含SEQIDNO:区包含SEQIDNO:12的氨基酸序列人重《连可变区包含SEQIDNO:区包含SEQIDNO:13的氨基酸序列人重链可变区包含SEQIDNO:区包含SEQIDNO:14的氨基酸序列人重链可变区包含SEQIDNO:区包含SEQIDNO:15的氨基酸序列人重链可变区包含SEQIDNO:区包含SEQIDNO:16的氨基酸序列人重《连可变区包含SEQIDNO:区包含SEQIDNO:17的氨基酸序列人重链可变区包含SEQIDNO:9的氨基酸序歹i区包含SEQIDNO:18的氨基酸序列。在另一实施方案中，本发明的单克隆抗体包括(a)包含选自SEQIDNO:19-27的氨基酸序歹'CDR1;(b)包含选自SEQIDNO:28-36的氨基酸序歹'CDR2;(c)包含选自SEQIDNO:37-45的氨基酸序歹'CDR3;(d)包含选自SEQIDNO:46-54的氨基酸序歹'CDR1;(e)包含选自SEQIDNO:55-63的氨基酸序歹'CDR2;和2的氨基酸序歹3的氨基酸序歹4的氨基酸序歹5的氨基酸序歹6的氨基酸序歹7的氨基酸序歹'8的氨基酸序歹'且人轻链可变且人轻链可变且人轻链可变且人轻链可变且人轻链可变且人轻链可变且人轻链可变且人轻链可变且人轻链可变的人重链可变区的人重链可变区的人重链可变区的人轻链可变区的人轻链可变区(f)包含选自SEQIDNO:64-72的氨基酸序列的人轻链可变区CDR3,在各种实施方案中，优选以下重链和轻链CDR1、CDR2和CDR3的组合:(a(b(c(d(e(f或(a(b(c(d(e(f或(a(b(c(d(e(f或(a(b(c(d包含SEQIDNO包含SEQID冊包含SEQIDNO包含SEQIDNO包含SEQIDNO包含SEQIDNO19的人重链可变区CDRl28的人重链可变区CDR237的人重《连可变区CDR346的人轻《连可变区CDRl55的人轻链可变区CDR264的人轻链可变区CDR3包含SEQIDNO:20的人重链可变区CDRl包含SEQIDNO:29的人重链可变区CDR2包含SEQIDNO:38的人重链可变区CDR3包含SEQIDNO:47的人轻链可变区CDRl包含SEQIDNO56的人轻链可变区CDR2包含SEQIDNO65的人轻链可变区CDR3包含SEQIDNO21的人重链可变区CDRl包含SEQIDNO30的人重链可变区CDR2包含SEQIDNO39的人重链可变区CDR3包含SEQIDNO48的人轻链可变区CDRl包含SEQIDNO57的人轻链可变区CDR2包含SEQIDNO.66的人轻链可变区CDR3包含SEQIDNO:22的人重链可变区CDRl包含SEQIDNO:31的人重链可变区CDR2包含SEQIDNO:40的人重链可变区CDR3包含SEQIDNO:49的人轻链可变区CDRl和禾:口和包含SEQIDNO(f)包含SEQIDNO或(a)包含SEQIDNO(b)包含SEQIDNO(c)包含SEQIDNO(d)包含SEQIDNO(e)包含SEQIDNO(f)包含SEQIDNO或(a)包含SEQIDNO(b)包含SEQIDNO(c)包含SEQIDNO(d)包含SEQIDNO(e)包含SEQIDNO(f)包含SEQIDNO或(a)包含SEQIDNO(b)包含SEQIDNO(c)包含SEQIDNO(d)包含SEQIDNO(e)包含SEQIDNO(f)包含SEQIDNO或(a)包含SEQIDNO(b)包含SEQIDNO(c)包含SEQIDNO(d)包含SEQIDNO(e)包含SEQIDNO58的人轻链可变区CDR2;67的人轻《连可变区CDR3;23的人重链可变区CDR1;32的人重链可变区CDR2;41的人重链可变区CDR3;50的人轻链可变区CDR1;59的人轻链可变区CDR2;68的人轻链可变区CDR3;24的人重《连可变区CDR1;33的人重链可变区CDR2;42的人重链可变区CDR3;51的人轻链可变区CDR1;60的人轻链可变区CDR2;69的人轻链可变区CDR3;25的人重链可变区CDR1;34的人重《连可变区CDR2;43的人重4连可变区CDR3;52的人轻链可变区CDR1;61的人轻链可变区CDR2;70的人轻链可变区CDR3;26的人重链可变区CDR1;35的人重链可变区CDR2;44的人重链可变区CDR3;53的人轻链可变区CDR1;62的人轻链可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO:71的人轻链可变区CDR3;(a)包含SEQIDNO:27的人重链可变区CDR1(b)包含SEQIDNO:36的人重链可变区CDR2(c)包含SEQIDNO:45的人重链可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO:54的人轻链可变区CDR1(e)包含SEQIDNO:63的人轻链可变区CDR2;和(f)包含SEQIDNO:72的人轻链可变区CDR3。在另一方面，本发明提供一种脱岩藻糖基化人抗-PSMA抗体，其包含产自或来源于人VH5-51或VH3-30.3基因的重链可变区。本发明还提供一种脱岩藻糖基化人抗-PSMA抗体，其包含产自或来源于人VkL6、04/014或L18基因的轻链可变区。本发明还提供一种脱岩藻糖基化人抗-PSMA抗体，其包含产自或来源于人VH5-51或V,,3-30.3基因的重链可变区，和产自或来源于人VkL6、04/014或L18基因的轻链可变区。另一方面，本发明涉及一种嵌合鸡，其包含编码抗-PSMA抗体的免疫球蛋白重链和轻链基因，使得在该嵌合鸡的鸡蛋中表达抗-PSMA抗体，其中在该嵌合鸡的鸡蛋中表达的抗-PSMA抗体缺乏岩藻糖残基。优选地，该免疫球蛋白重链和轻链基因是人免疫球蛋白重链和轻链基因。另一方面，本发明涉及包含编码抗-PSMA抗体的免疫球蛋白重链和轻链基因的宿主细胞，其中所述宿主细胞缺乏岩藻糖基转移酶，使得所述宿主细胞表达的抗-PSMA抗体缺乏岩藻糖残基。优选地，该免疫球蛋白重链和轻链基因是人免疫球蛋白重链和轻链基因。优选地，该岩藻糖基转移酶是FUT8。优选地，该宿主细胞是CHO细胞。另一方面，本发明提供一种抑制PSMA+细胞生长的方法。该方法包括使所述细胞与脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体在足以诱导所述细胞的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)的条件下接触。所述细胞可以是，例如肿瘤细l包。优选地，所述抗-PSMA抗体是人抗体。本发明还提供一种抑制受试者中胂瘤细胞生长的方法，其中该胂瘤细胞或靠近该肿瘤细胞的血管内皮细胞表达PSMA。该方法包括给受试者施用有效抑制受试者中肿瘤细胞生长的量的脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体。优选地，所述抗-PSMA抗体是人抗体。在优选实施方案中，所述肿瘤细胞是前列腺癌肿瘤细胞。本发明的其他特征和优点通过下面的详述和实施例将是显而易见的，该详述和实施例不应理解为限制性的。贯穿本申请中引用的所有参考文献、Genbank项、专利和公布的专利申请的内容均在此处特别引入作为参考。图1显示4A3、7F12、8C12、8A11和16F9的重《连可变区氨基酸序列(分别为SEQIDN0s:l-5)与人种系VH5-51氨基酸序列(SEQIDNO:73)的比对。图2显示4A3、7F12和8C12的轻链可变区氨基酸序列(分别为SEQIDN0s:10-12)与人种系VkL6氨基酸序列(SEQIDNO:74)的比对。图3显示8A11和16F9的轻链可变区氨基酸序列(分别为SEQIDNOs:13和14)与人种系Vk04/014氨基酸序列(SEQIDNO:75)的比对。图4A显示1C3人单克隆抗体重链可变区的核苷酸序列(SEQIDNO:78)和氨基酸序列(SEQIDNO:9)。勾画出了CDR1(SEQIDNO:27)、CDR2(SEQIDNO:36)和CDR3(SEQIDNO:45)区，并指出了V、D和J的种系来源。图4B显示1C3人单克隆抗体轻链可变区的核苷酸序列(SEQIDNO:82)和氨基酸序列(SEQIDNO:18)。勾画出了CDR1(SEQIDNO:54)、CDR2(SEQIDNO:63)和CDR3(SEQIDNO:72)区，并指出了V和J的种系来源。图5A显示2A10人单克隆抗体重链可变区的核普酸序列(SEQIDNO:79)和氨基酸序列(SEQIDNO:6)。勾画出了CDRl(SEQIDNO:24)、CDR2(SEQIDNO:33)和CDR3(SEQIDNO:42)区，并指出了V和J的种系来源。图5B显示2A10人单克隆抗体轻链可变区的核苷酸序列(SEQIDNO:83)和氨基酸序列(SEQIDNO:15)。勾画出了CDRl(SEQIDNO:51)、CDR2(SEQIDNO:60)和CDR3(SEQIDNO:69)区，并指出了V和J的种系来源。图6A显示2C6人单克隆抗体重链可变区的核苷酸序列(SEQIDNO:80)和氨基酸序列(SEQIDNO:7)。勾画出了CDRl(SEQIDNO:25)、CDR2(SEQIDNO:34)和CDR3(SEQIDNO:43)区，并指出了V、D和J的种系来源。图6B显示2C6人单克隆抗体轻链可变区的核苷酸序列(SEQIDNO:84)和氨基酸序列(SEQIDNO:16)。勾画出了CDRl(SEQIDNO:52)、CDR2(SEQIDNO:61)和CDR3(SEQIDNO:70)区，并指出了V和J的种系来源。图7A显示2F5人单克隆抗体重链可变区的核苷酸序列(SEQIDNO:81)和氨基酸序列(SEQIDNO:8)。勾画出了CDRl(SEQIDNO:26)、CDR2(SEQIDNO:35)和CDR3(SEQID冊44)区，并指出了V、D和J的种系来源。图7B显示2F5人单克隆抗体轻链可变区的核苷酸序列(SEQIDNO:85)和氨基酸序列(SEQIDNO:17)。勾画出了CDRl(SEQIDNO:53)、CDR2(SEQIDNO:62)和CDR3(SEQIDNO:71)区，并指出了V和J的种系来源。图8显示2A10、2C6和2F5的重链可变区氨基酸序列(分别为SEQIDNOs:6-8)与人种系VH5-51氨基酸序列(SEQIDNO:73)的比对。图9显示1C3的重链可变区氨基酸序列(SEQIDNO:9)与人种系VH3-30.3氨基酸序列(SEQIDNO:76)和JH6b种系(SEQIDNO:86)的比对。图10显示2C6的轻链可变区氨基酸序列(SEQIDNO:16)与人种系VkL6氨基酸序列(SEQIDNO:74)和JK3种系(SEQIDNO:87)的比对。图11显示1C3、2A10和2F5的轻链可变区氨基酸序列(SEQIDNO:18、15、17)与人种系VkL18氨基酸序列(SEQIDNO:77)和JK4种系(SEQIDNO:88)的比对。图12是Ov7.5和Ovl5表达载体的图示。标出了Ov的5，和3，调节序列的位置。在该载体的3'末端包括由启动子(Cx)驱动的具有EGFP和嘌呤霉素(Puro)的盒，该盒在所有细胞型中起作用，以利于被稳定转染的cES细胞的分离和cES细胞对嵌合体贡献的鉴定。MAb盒的细节在该图的下部示出。细黑线表示来源于人L和H链的内含子序列或非翻译序列(尽管内含子序列在Ovl5Mab7F12构建体中不存在)。SiG礼L链的信号肽的序列，VL:L链的V基因的序列。Ck:kl链的恒定区的序列，IRES:内部核糖体进入序列，SiGv:H链的信号肽的序列，VH:H链的V基因的序列，CH1、H、和C3:ylH链的CHI、铰链、CH2和C,i3域的编码序列。图13A-13B是通过MALDITOF质谦法测定的在鸡蛋中表达的7F12抗-PSMA抗体的寡糖结构的概况。黑色圆形表示甘露糖；空心圆形表示己糖(甘露糖或半乳糖)，黑色正方形表示N-乙酰基葡糖胺。垂直线表示最后一个己糖能够与甘露糖或N-乙酰基葡糖胺残基中的任一个沿该线连接。图14A-14B显示与同种型对照相比，使用CHO细胞表达的7F12("7F12")和鸡表达的7F12的ADCC测定结果。结果表示为％裂解。图14A显示使用IL-2刺激的效应细胞的结果。图14B显示使用新鲜人外周血效应细胞的结果。图l5是显示实验结果的条图，其中与同种型对照相比，CH0细胞表达的7F12('"F12")和鸡表达的7F12的ADCC活性被抗CD16抗体阻断。图16A-16C显示与岩藻糖基化2A10mAb("亲本")和同种型对照相比，使用脱岩藻糖基化2A10mAb("脱岩藻糖")的ADCC测定结果。图16A和16B代表使用LNCaP-C42b靶细胞和IL-2刺激的效应细胞的两个独立的实验。图16C代表使用LNCaP-C42b輩巴细胞和新鲜人外周血效应细胞的实马全。图17是与岩藻糖基化2A10mAb("亲本")和同种型对照或者无抗体对照相比，脱岩藻糖基化2A10mAb("脱岩藻糖")的ADCC测定结果的条图，其中ADCC活性被抗CD16抗体阻断。发明详述本发明提供用于治疗和诊断与PSMA表达和/或PSMA表达细胞有关的多种疾病的抗体组合物和改进的基于抗体的治疗。本发明的抗体在抗体的碳水化合物链上缺乏岩藻糖残基。此外，该抗体表现出增强的对PSMA+细胞的抗体引导的细胞毒性(ADCC)杀伤。在一个具体实施方案中，本发明的抗体是人源化或完全人抗体，并且特别可用于治疗人类与PSMA表达细胞有关的疾病。本发明还包括使用缺乏岩藻糖残基的抗-PSMA抗体进行治疗(例如治疗和/或预防与PSMA的表达有关的疾病)的方法。为了使本发明更容易理解，首先定义了一些术语。其他的定义在发明详述内容中说明。术语"前列腺特异性膜抗原"和"PSMA"在本文中可以互换使8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5和1C3结合的人PSMA的任何变体、同种型和物种同源物。人PSMA蛋白的完整的氨基酸序列的Genbank登录号为NP—004467。编码人PSMA蛋白的完整的cDNA序列的Genbank登录号为NM_004476。本文所用的术语"缺乏岩藻糖残基的抗体，，和"脱岩藻糖基化抗体"可以互换使用，是指抗体的碳水化合物部分不含岩藻糖残基或已经从中除去岩藻糖残基的抗体。缺乏岩藻糖残基的抗体可以如下产生，例如在使岩藻糖残基不与抗体的碳水化合物链连接或者这种连接最小化的细胞或表达系统中表达抗体，或者化学修饰该抗体以从碌_水化合物链上除去岩藻糖残基(例如用岩藻糖苷酶处理抗体)。因此，术语"缺乏岩藻糖残基"和"脱岩藻糖基化"不受制备具有改变的碳水化合物结构的抗体的机制所限制。本文所用的术语"表达岩藻糖残基的抗体"和"岩藻糖基化抗体"可以互换使用，是指抗体的碳水化合物部分含有岩藻糖的抗体。术语"免疫应答"是指例如淋巴细胞、抗原呈递细胞、吞噬细胞、粒细胞和上述细胞或肝脏产生的可溶性大分子(包括抗体、细胞因子和补体)的作用，导致选择性损伤、破坏或从人体中清除侵入的病原体、纟皮病原体感染的细胞或组织、癌细胞，或(在自身免疫或病理性炎症的情况下)正常人细胞或组织。本文所用的术语"效应细胞"是指与免疫应答的效应阶段有关的免疫细胞，效应阶段与免疫应答的识别和激活阶段相反。免疫细胞的例子包括骨髓或淋巴来源的细胞，例如淋巴细胞(例如B细胞和T细胞，包括细胞毒性T细胞(CTL))、杀伤细胞、自然杀伤细胞、巨噬细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞、多形核细胞、粒细月包、肥大细胞和嗜碱性细胞。某些效应细胞表达特异性的Fc受体并且行使特异性的免疫功能。在优选实施方案中，效应细胞能够诱导抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC),例如能够诱导ADCC的嗜中性粒细月包。例如，表达FcR的单核细胞和巨噬细胞参与对靶细胞的特异性杀伤和向免疫系统的其他部分呈递抗原，或者与呈递抗原的细胞结合。在其他实施方案中，效应细胞能够吞噬靶抗原或靶细胞。效应细胞上特定FcR的表达可以用诸如细胞因子等体液因子来调节。例如，已经发现G-CSF或GM-CSF可以上调FcaRI的表达。这种增强的表达4是高了带有FcaRI的细胞对靶标的效应功能。效应细胞能够吞噬或裂解乾抗原或耙细胞。"靶细胞"是指如下任意的细胞或病原体，将其从受试者(例如人或动物)中消除是有益的，并且可以被本发明的组合物(例如抗体)耙向。例如，耙细胞可以是表达或过量表达PSMA的细胞。术语"抗体依赖性细胞毒性"或"ADCC，，是指细胞介导的细胞毒性反应，其中具有结合的抗-PSMA抗体的PSMA+耙细胞被带有Fc受体的效应细胞识别，随后裂解，而不需要补体的参与。本文使用的术语"增强ADCC"(例如指细胞时)包括，在效应细胞存在下(例如，靶细胞效应细胞比为1:50),与接触岩藻糖基化抗PSMA抗体的相同细胞的细胞杀伤相比，当接触缺乏岩藻糖残基的抗-PSMA抗体时，任何可测量的细胞裂解的增加，例如，细胞裂解增加至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90°/。、100%、150%、200%、250%、300%或325%。本文提到的术语"抗体"包括完整抗体及其任何抗原结合片段(即"抗原结合部分")或单链。"抗体，，是指包含通过二硫键互相连接在一起的至少两条重(H)链和两条轻(L)链的糖蛋白，或其抗原结合部分。每条重链由重链可变区(在此缩写为V,》和重链恒定区组成。重链恒定区由三个结构域C们、C^和CH3组成。每条轻链由轻链可变区(在此缩写为VJ和轻链恒定区组成。轻链恒定区由一个结构域"组成。Vh和VL区可进一步再分为高变区，称为互补决定区(CDR),CDR散布在被称为构架区(FR)的更加保守的区域中。每个Vh和Vl均由三个CDR和四个FR组成，它们从氨基端向羧基端以如下顺序排列FR1，CDR1，FR2，CDR2，FR3,CDR3，FR4。重链和轻链的可变区含有可与抗原相互作用的结合结构域。抗体的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主组织或因子的结合，该宿主组织或因子包括免疫系统的各种细胞(例如效应细胞)和经典补体系统的第一成分(Clq)。本文所用的术语抗体的"抗原结合部分"(或简称为"抗体部分")是指保留与抗原(例如PSMA)特异性结合的能力的抗体的一个或多个片段。已证明抗体的抗原结合功能可由全长抗体的片段来行使。术语抗体的"抗原结合部分"中所包括的结合片段的例子包括(i)Fab片段，即由VL、Vh、Cl和CH1结构域组成的单价片段；(ii)F(ab，)2片段，即包含在铰链区处通过二硫4建连接的两个Fab片段的双价片段；(iii)由L和C们结构域组成的Fd片段；(iv)由抗体单臂的^和V,i结构域组成的Fv片段；(v)由VH结构域组成的dAb片4殳(Ward等(1989)Nature341:544-546);和(vi)分离的互补决定区(CDR)。此外，尽管Fv片段的两个结构域Vl和VH由单独的基因编码，但是它们可以利用重组方法通过合成连接体连接在一起，该连4妻体使它们能够制成一条蛋白质链，其中l和VH区配对构成单价分子(称为单链Fv(scFv);参见，例如Bird等(1988)Science242:423-426;和Huston等(19S8)Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:5879-5883)。这种单链抗体也包括在术语抗体的"抗原结合部分"内。这相同的方法对这些片段的实用性进行筛选。本文使用的术语"重组人抗体"包括通过重组手段制备、表达、产生或分离的所有人抗体，例如(a)从对于人免疫球蛋白基因的转基因或转染色体动物(例如小鼠)或由其制备的杂交瘤(下文进一步描述)中分离的抗体，(b)从经转化表达人抗体的宿主细胞如转染瘤中分离的抗体，(c)从重组组合人抗体文库中分离的抗体，和(d)通过包括将人免疫球蛋白基因序列剪接为其他DNA序列的任何其他手段制备、表达、产生或分离的抗体。这些重组人抗体具有其中构架区和CDR区均来源于人种系免疫球蛋白序列的可变区。但是在某些实施方案中，这些重组人抗体可以经历体外诱变(或者，当使用人Ig序列的转基因动物时，经历体内体细胞诱变)，因此重组抗体的Vh和叭区的氨基酸序列尽管是来源于人种系Vh和叭序列并与之相关的序列，但可能不是在体内天然存在于人抗体种系的所有组成成分(repertoire)中。本文使用的术语"单克隆抗体"或"单克隆抗体组合物，，是指单一分子组成的抗体分子的制剂。单克隆抗体组合物表现出对特定表位的单一结合特异性和亲和性。本文使用的术语"人抗体，，是指具有的可变区中构架区和CDR区都来源于人种系免疫球蛋白序列的抗体。而且，如果该抗体含有恒定区，则恒定区也来源于人种系免疫球蛋白序列。本发明的人抗体可包含并非由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如，通过体外术语"人单克隆抗体"是指表现单一结合特异性的抗体，其具有其中构架区和CDR区均来源于人种系免疫球蛋白序列的可变区。在一个实施方案中，人单克隆抗体由杂交瘤产生，该杂交瘤包括与无限增殖化细胞融合的B细胞，该B细胞从具有含人重链转基因和轻链转基因的基因组的转基因非人动物(例如转基因小鼠)中获得。本文所用的术语"人单克隆抗体"也包括通过重组手段制备、表达、产生或分离的完全人抗体，例如(a)从对于人免疫球蛋白基因的转基因或转染色体动物(例如小鼠)或由其制备的杂交瘤(下文进一步描述)中分离的抗体，(b)从经转化表达人抗体的宿主细胞如转染瘤中分离的抗体，(c)从重组组合人抗体文库中分离的抗体，和(d)通过包括将人免疫球蛋白基因序列剪接为其他DNA序列的任何其他手段制备、表达、产生或分离的抗体。这些重组人抗体具有其中构架区和CDR区均来源于人种系免疫球蛋白序列的可变区。但是在某些实施方案中，这些重组人抗体可以经历体外诱变(或者，当使用人Ig序列的转基因动物时，经历体内体细胞诱变)，因此重组抗体的Vh和l区的氨基酸序列尽管是来源于人种系Vh和Vt序列并与之相关的序列，但可能不是在体内天然存在于人抗体种系的所有组成成分(repertoire)中。本文使用的"分离的抗体"是指基本不含具有不同抗原特异性的其他抗体的抗体(例如，与PSMA特异性结合的分离的抗体基本不含与除PSMA以外的抗原特异性结合的抗体)。但是，与人PSMA的表位、同种型或变体特异性结合的分离的抗体可以具有与诸如来自其他物种的其他相关抗原(例如PSMA种同源物)的交叉反应性。而且，分离的抗体可基本不含其他细胞材料和/或化学物质。在本发明的一个实施方案中，具有不同特异性的"分离的"单克隆抗体的组合以确定的组成组合。术语"人源化抗体，，是指其中来源于另外一种哺乳动物种(如小鼠)的种系的CDR序列已经被移植到人构架序列上的抗体。在人构架序列内也可以进行其它的构架区修饰。术语"嵌合抗体"是指其中可变区序列来源于一个物种而恒定区序列来源于另一个物种的抗体，例如其中可变区序列来源于小鼠抗体而恒定区序列来源于人抗体的抗体。术语"表位"指能够与抗体特异性结合或被抗体特异性结合的蛋白质决定簇。表位通常由分子的化学活性表面基团组成，如氨基酸或糖侧链，且通常具有特定的三维结构特征以及特定的电荷特征。构象和非构象表位的区别在于当存在变性溶剂时与前者的结合丧失，而与后者的结合不丧失。本文所用的术语"特异性结合"是指抗体与预定的抗原结合。典型地，抗体以10—'M或更低的解离常数(Kd)结合，并且与预定抗原结合的KD比与预定抗原或密切相关抗原以外的非特异性抗原(例如BSA、酪蛋白)结合的L至少低两倍。短语"识别抗原的抗体"和"抗原特异性抗体，，在此与术语"与抗原特异性结合的抗体"可互换使用。本文使用的术语"同种型"是指由重链恒定区基因编码的抗体类别(例如IgM或IgGl)。本文使用的术语"载体"是指能够转运与其连接的另一种核酸的核酸分子。一种载体类型是"质粒"，它是指环形双链DNA环，其中可以连接另外的DNA片段。另一种栽体类型是病毒载体，其中另外的DNA片段可以连接到病毒基因组内。某些载体能够在它所导入的宿主细胞中自主复制(例如具有细菌复制起点的细菌载体和附加型哺乳动物载体)。其他载体(例如非附加型哺乳动物载体)在导入宿主细胞后可以整合到宿主细胞的基因组中，由此随宿主基因组一起复制。另外，某些载体能够引导与它们有效连接的基因的表达。这些载体在本文中被称为"重组表达载体，，(或者筒称为"表达载体")。通常在重组DNA技术中使用的表达载体常常为质粒形式。在本说明书中，"质粒，，和"载体"可以互换使用，因为质粒是最常用的载体形式。但是，本发明也包括其他形式的表达载体，如病毒载体(例如复制缺陷型逆转录病毒、腺病毒和腺伴随病毒)，它们起等同的功能。本文使用的术语"重组宿主细胞"(或简称为"宿主细胞")是指已经导入了重组表达载体的细胞。应当理解，这些术语不仅指特定受试者的细胞，而且指该细胞的后代。因为由于突变或环境影响，某些修饰可能在后代中发生，这些后代实际上可能与亲本细胞不同，但是仍然包含在本文使用的术语"宿主细胞"中。重组宿主细胞包括，例如，CH0细胞、转染瘤和'淋巴细胞。本文使用的术语"受试者"包括任何人或非人类动物。术语"非人类动物，，包括所有脊推动物，例如哺乳动物和非哺乳动物，如非人灵长类动物、绵羊、狗、猫、马、牛、鸡、两栖类动物、爬行类动物等。术语"转基因非人类动物，，是指具有含有一种或多种人类重链和/或轻链转基因或转染色体(整合或者非整合到动物的天然基因组DNA内)的基因组并且能够表达全人类抗体的非人类动物。例如，转基因小鼠可能具有人轻链转基因和人重链转基因或人重链转染色体，使得该小鼠在用PSMA抗原和/或表达PSMA的细胞免疫时产生人抗-PSMA抗体。人重链转基因可以整合到小鼠的染色体DNA内，例如转基因(例如HuMAb)小鼠，或者人重链转基因可以保持在染色体外，如W002/43478所述的转染色体(例如KM)小鼠。这些转基因和转染色体小鼠通过经历V-D-J重组和同种型转换能够产生抗PSMA人单克隆抗体的多种同种型(例如IgG、IgA和/或IgE)。本发明的各个方面在下面的部分中进一步详细描述。缺乏岩藻糖残基并且具有增强的ADCC活性的抗-PSMA抗体本发明涉及与抗体的岩藻糖基化形式相比对表达PSMA的细胞具有增强的抗体引导的细胞毒性(ADCC)的脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体。在一个优选实施方案中，例如在0.1|jg/ml的抗体浓度和1:100的靶细胞效应细胞比例的条件下，与抗体的岩藻糖基化形式相比，本发明的脱岩藻糖基化抗体在体外诱导增强的LnCaP前列腺癌细胞(ATCCCRL-1740)的ADCC。优选地，使用的效应细胞是IL-2刺激的来自人外周血的效应细胞(例如，lxl(T人外周血单核细胞与10U/ml人IL-2在37。C下温育过夜)。优选地将抗体的脱岩藻糖基化形式与从哺乳动物宿主细胞如CHO细胞中表达获得的岩藻糖基化形式进行比较。在优选实施方案中，抗体的脱岩藻糖化形式的ADCC活性的ECso为0.05jag/ml或更低，更优选0.04jag/ml或更4氐，更优选0.03)ag/ml或更低，更优选0.02fig/ml或更低，更优选大约G.G18|Lig/nil。在其他优选的实施方案中，抗体的脱岩藻糖化形式的ADCC活性的EC5。为0.Ol^ig/ml或更低，更优选0.OO^g/ml或更低，更优选0,008|iig/ml或更低，更优选0.007pg/ml或更低，更优选0.005pg/ml或更低，更优选0.002jiig/ml。优选利用实施例4所述的测定法使用IL-2刺激的效应细胞，或者利用实施例4所述的测定法使用新鲜的人外周血效应细胞，测定ADCC活性的EC5。。在其他优选实施方案中，抗体的脱岩藻糖化形式的ADCC活性的EC5。比抗体的岩藻糖基化形式(例如CHO细胞表达的抗体形式)的EC5。至少低3倍，更优选至少低4倍，更优选至少低5倍，更优选至少低6倍，更优选至少低7倍，更优选至少低8倍，更优选至少低9倍，更优选至少低10倍。另外，优选利用实施例4所述的测定法使用IL-2刺激的效应细胞，或者利用实施例4所述的测定法使用新鲜的人外周血效应细胞，测定ADCC活性的EC5。。典型地，发现使用新鲜的人外周血效应细胞获得的EC5。(岩藻糖基化)EC5。(脱岩藻糖基化)的比例较高，但是发现使用新鲜的人外周血效应细胞获得的最大裂解百分比较低。本发明的脱岩藻糖基化抗体的增强的ADCC活性可以定量为，例如，当对于脱岩藻糖基化和岩藻糖基化形式在相同条件下(例如相同的抗体浓度和相同的靶细胞效应细胞比)测定ADCC活性时，与该抗体的岩藻糖基化形式相比细胞裂解百分比的增加。另外或者可替代地，本发明的脱岩藻糖基化抗体的增强的ADCC活性可以定量为，例如，与岩藻糖基化形式相比，脱岩藻糖基化形式的ECs。值降低所测定的增加的功效。这可以根据岩藻糖基化形式与脱岩藻糖基化形式的EC5。的比例来定量。可以在本发明的ADCC测定中使用并且本发明的脱岩藻糖基化抗体比该抗体的岩藻糖基化形式对其表现出增强的ADCC活性的PSMA+细胞系的例子包括LnCaP细胞、22Rvl细胞和/或PCa2b细胞。脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体获得的增强的ADCC效应可以导致，在使用该抗体的岩藻糖基化形式观察不到ADCC的抗体浓度下，脱岩藻糖基化形式只寸PSMA+细月包具有ADCC活'性。抗-PSMA抗体的脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体(例如鼠、嵌合、人源化和人抗体)是本领域公知的，并且可以在本发明中使用。本发明的抗-PSMA抗体经过修饰，使得该抗体缺乏岩藻糖残基。可以通过多种方法中的一种来制备缺乏岩藻糖残基的抗体。例如，可以使用重组DNA技术在具有改变的糖基化机制从而使岩藻糖残基向碳水化合物链上的添加受到抑制的细胞中表达抗体。另外或者可替代地，可以通过化学去除岩藻糖残基而使抗体脱岩藻糖基化。另外，在一个优选实施方案中，该抗体可以在嵌合鸡表达系统中表达，使得该抗体在嵌合鸡的鸡蛋中产生。在鸡蛋中表达抗-PSMA抗体的嵌合鸡的产生在实施例1中详细描述，这种鸡蛋表达的抗-PSMA抗体上缺乏岩藻糖残基在实施例3中得到证明。适用于在鸡蛋中表达蛋白质的嵌合鸡在PCT公开WO2004/015123中描述。因此，另一方面，本发明涉及一种嵌合鸡，其含有编码抗-PSMA抗体的免疫3求蛋白重链和轻链基因，使得在嵌合鸡的鸡蛋中表达抗-PSMA抗体，其中在嵌合鸡的鸡蛋中表达的抗-PSMA抗体缺乏岩藻糖残基。优选地，所述免疫球蛋白重链和轻链基因是人免疫球蛋白重链和轻链基因。在另一个实施方案中，在一种细胞中表达抗体，该细胞缺乏岩藻糖基转移酶，从而使得该细胞系产生在其碳水化合物中缺乏岩藻糖的蛋白质(见实施例5和6)。例如，细胞系Ms704、Ms705和Ms709缺乏岩藻糖基转移酶FUT8(a(1,6)岩藻糖基转移酶)，从而在Ms704、Ms705和Ms709细胞系中表达的抗体在其碳水化合物中缺乏岩藻糖。Ms704、Ms705和Ms709FUT8—/_细胞系是通过使用两种置换载体在CH0/DG44细胞中定向破坏FUT8基因而产生的(参见，Yamane等人的美国专利公开No.20040110704，和Yamane-Ohnuki等人.(2004)A/Wec力/70/5/de/^^2:614-22)。作为另一个例子，Hanai等人的EP1,176,195描述了一种细胞系，该细胞系的编码岩藻糖基转移酶的FUT8基因被功能破坏，使得在这种细胞系中表达的抗体由于减少或消除了cc1，6键相关的酶而表现出低岩藻糖基化。Hanai等人也描述了天然具有将岩藻糖添加到与抗体Fc区结合的N-乙酰葡糖胺上的低酶活性或者不具有该酶活性的细胞系，例如大鼠骨髓瘤细胞系YB2/0(ATCCCRL1662)。Presta的PCT公开WO03/035835描述了变异的CHO细胞系Lecl3细胞，其将岩藻糖添加到Asn(297)-连接的碳水化合物上的能力降低，也导致在该宿主细胞中表达的抗体的低岩藻糖化(参见，Shields,R.L,等人.(2002)/.C力e瓜277:26733-26740)。Umana等人的PCT公开WO99/54342描述了表达糖蛋白修饰的岩藻糖基转移酶的工程细胞系(例如P(1，4)-N-乙酰葡糖氨基转移酶III(GnTIII)),使得该工程细胞系中表达的抗体表现出增加的等分GlcNac结构，导致抗体的ADCC活性增强(参见Umana等人.(19")5/Wec力.17:176—180)。在另一个实施方案中，表达抗-PSMA抗体，并且使用岩藻糖苷酶切去岩藻糖残基。例如，岩藻糖苷酶a-L-岩藻糖苷酶从抗体上除去岩藻糖残基(Tarentino，A.L.等人.(1975)A/oc力e瓜M:5516-23)。另外，在其他实施方案中，也修饰抗体的其他形式的糖基化。例如，可以制备非糖基化的抗体(即缺乏糖基化的抗体)。这种碳水化合物修饰可以通过(例如)改变抗体序列内的一个或多个糖基化位点来实现。例如，可以进行一个或多个氨基酸取代，导致除去一个或多个可变区构架糖基化位点，由此消除了该位点的糖基化。这种非糖基化可以增强抗体对抗原的亲和力。这种方法在Co等人的美国专利Nos.5，714，350和6，350,861中详细描述。抗-PSMA抗体上不含岩藻糖残基的表征本发明的抗体缺乏岩藻糖残基，例如，在Fc部分碳水化合物链中。可以使用本领域^知的标准技术如APTS毛细管电泳激光诱导的焚光法来检测抗体中岩藻糖残基的不存在。简要地说，可以通过加入肽N-聚糖酶(Prozyme)并温育过夜来释放纯化的抗-PSMA抗体的N-连接的寡糖。重悬浮碳水化合物，在脱唾液酸化和岩藻糖残基的丢失最小的温和还原胺化条件下用8-氨基芘-1，3，6-三磺酸酯(APTS)衍生化。使用激光诱导的荧光4全测器(BeckmanCoulter)通过毛细管电泳分析反应加合物。根据电泳中与含有岩藻糖的相同抗体相比的位移观察岩藻糖的不存在。检测抗-PSMA抗体上不含岩藻糖残基的另外一种技术是使用HPLC的单糖分析。测定PSMA结合的合适的测定法在实施例中进一步描述。分析抗体的碳水化合物含量和结构的其他技术包括对表达的碳水化合物的MS序型分析(profiling)(糖组学)、对释放的完整聚糖的直接MALDI-T0F分析(提供碳水化合物类别的质量)、低CIDMSMS谱(提供聚糖的结构组成)、高CIDMSMS谱和MSn谱(提供关于聚糖连接的信息)和序贯外切糖苷酶消化(提供聚糖的结构连接信息)。检测抗体的碳水化合物含量的方法在实施例3中详细描述。PSMA+细胞的抗体依赖的细胞杀伤的表征可以检测脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体介导对表达PSMA的细胞的吞噬和杀伤的能力。在一个实施方案中，当在相同浓度下比较时，脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体与含有岩藻糖的相同抗体相比增强了对表达PSMA的细胞的杀伤。在另一实施方案中，脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体诱导对表达PSMA的细胞的杀伤，其中含有岩藻糖的相同抗体在相同浓度下不诱导细胞杀伤。单克隆4元体的ADCC活性可以利用建立的体外测定法;险测。一个例子是，可以采用铬释放ADCC测定。简要地说，来自健康供体的外周血单核细胞(PBMC)或者其他效应细胞通过FicollHypaque密度离心纯化，然后裂解掺杂的红细胞。洗涤后的PBMC可以悬浮在含有10%热灭活的胎牛血清的RPMI中，并以各种效应细胞肿瘤细胞比例下与51Cr标记的表达PSMA的细胞混合。然后加入各种浓度的抗-PSMA抗体。可以使用同种型匹配的抗体作为阴性对照。测定可以在37°C下进行4-18小时。通过测定"Cr向培养上清液中的释放来测定样品的细胞裂解。也可以将抗PSMA单克隆抗体互相组合4企测，以确定多种单克隆抗体是否增强细胞裂解。可以用于检测抗-PSMA抗体介导对表达PSMA的细胞的吞噬和杀伤能力的一种替代测定法是时间分辨荧光测定。简要地说，向表达PSMA的细胞加入焚光增强配体的乙酰氧基甲酯(BATDA),BATDA穿透细胞膜。在细胞内，酯键被水解，该化合物不再能够通过细胞膜。然后加入各种浓度的抗-PSMA抗体。细胞裂解后，加入铕溶液(PerkinElmer),任何游离的配体均与铕结合，形成高度荧光和稳定的螯合物(EuTDA)，该螯合物可以用微孔板读数器(PerkinElmer)读取。测定的信号与裂解的细力包量相关。用于斗全测本发明的抗-PSMA抗体的ADCC活性的优选ADCC测定法在实施例4中详细描述。抗-PSMA抗体也可以在体内模型(例如小鼠)上检测，以确定它们介导对表达PSMA的细胞(例如肿瘤细胞)的吞噬和杀伤的能力。例如，可以基于以下标准选择这些抗体，这些标准不是排除性的1)与表达PSMA的活细胞结合；2)与PSMA结合的高亲和力；3)与PSMA上的独特表位结合(以消除具有互补活性的单克隆抗体在组合使用时竟争结合相同表位的可能性)；4)被表达PSMA的细胞内化；5)在人效应细胞存在下对表达PSMA的细胞的生长抑制、吞噬和/或杀伤的体外介导。本发明优选的单克隆抗体满足这些标准中的一条或几条。在一个具体实施方案中，单克隆抗体组合使用，例如作为含有两种或多种抗PSMA单克隆抗体或其片段的药物组合物。例如，具有不同但是互补活性的抗PSMA单克隆抗体可以在一种治疗中组合，以达到所需的治疗或诊断效果。一种示例是如下一种组合物，其含有在效应细胞存在下介导高效的靶细胞杀伤的抗-PSMA单克隆抗体，和抑制表达PSMA的细胞生长的另一种抗PSMA单克隆抗体相组合。与PSMA结合的表征例如，通过本领i或/^知的标准测定，如EUSA、FACS分析和/或Biacore分析，可以检测本发明的抗体与PSMA的结合。在典型的ELISA测定中，简要地说，用在PBS中浓度为0.25jug/ml的纯化的PSMA包被樣么孔板，然后用在PBS中的5%牛血清白蛋白封闭。向每孔中加入抗体稀释液，在37。C下温育1-2小时。用PBS/Tween洗板，然后与偶联到^威性磷酸酶上的第二试剂(例如人抗体或山羊抗人IgGFc-特异性多克隆试剂)在37。C下一起温育1小时。洗涤后，板用pNPP底物(1mg/ml)显色，并在OD405-650下分析。为了证明单克隆抗体与表达PSMA的活细胞的结合，可以使用流式细胞术。在流式细胞术方案的一个典型(但非限定性的)实例中，表达PSMA的细胞系(在标准生长条件下生长)与在含有0.1%BSA和20%小鼠血清的PBS中的各种浓度的单克隆抗体相混合，并在37。C下温育1小时。洗涤后，细胞与荧光素标记的第二抗体(例如抗人IgG抗体)在与第一抗体染色相同的条件下反应。可以利用光散射和侧向散射性质通过FACScan仪分析样品，来对单细胞画门(gate)。(除了或替代)流式细胞测定，可以采用一种使用荧光显微镜的替代测定法。细胞可以完全如上所述染色，并用焚光显微镜检测。该方法允许显示单个细胞，但是根据抗原密度可能降低灵敏度。可以进一步通过Western印迹法进一步检测抗-PSMA抗体与PSMA抗原的反应性。例如，可以由表达PSMA的细胞制备细胞提取物，并进行十二烷基硫酸钠(SDS)聚丙烯酰胺凝胶电泳。电泳后，将分离的抗原转移到硝酸纤维素膜上，用20%小鼠血清封闭，并用待检测的单克隆抗体探针结合。可以用与碱性磷酸酶连接的抗物种特异性第二抗体检测抗体的结合，并用BCIP/NBT底物片(SigmaChem.Co.，St.Louis，MO)显色。评价抗体与PSMA结合能力的其他技术在本领域中公知，包括RIA和Biacore分析。用来测定PSMA结合的合适的测定法在实施例4中详细描述。嵌合或人源化抗-PSMA抗体在某些实施方案中，本发明的脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体是嵌合或人源化抗体。这些抗体可以用本领域中可以获得的小鼠抗-PSMA抗体和建立的将小鼠抗体转化为嵌合或人源化抗体的程序来制备。这些小鼠抗-PSMA抗体的非限定性例子包括3F5.4G6、3D7丄1、4E10-1.14、3E11、4D8、犯6、3C9、2C7、1G3、3C4、3C6、4D4、1G9、5C8B9、3G6、4C8B9、E99、J415、J533和J591单克隆抗体。分泌3F5.4G6、3D7.1.1、4E10—1.14、犯ll、4D8、3E6、3C9、2C7、1G3、3C4、3C6、4D4、1G9、5C8B9、3G6或4C8B9的杂交瘤已经公开保藏，并且在美国专利No.6,159,508中记载。分泌E99、J415、J533或J591的杂交瘤已经公开保藏，并且在美国专利No.6，107,090中记载。而且，人源化抗-PSMA抗体，包括J591的人源化形式，在PCT公开W002/098897中详细记载。此外，其他小鼠抗人PSMA抗体已经在本领域中描述，例如mAb107—1A4(Wang，S.等人.(2001)Int.J.Cancer92:871—876)和mAb2C9(Kato，L等人.(2003)Int.J.Urol.10:439-444)。人单克隆抗-PSMA抗体本发明优选的抗体包括人抗-PSMA单克隆抗体。人抗-PSMA单克隆抗体的例子包括如最初由PCT/^布WO03/01/09192和WO03/064606和2005年2月18日^是交的名称为"HumanMonoclonalAntibodiestoProstateSpecificMembraneAntigen(PSMA)，，的美国临时申i青No.60/654,125(其内容引入本文作为参考)中所述分离并结构表征的4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5和1C3抗体。4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5和1C3的Vi,氨基酸序列分别显示在SEQIDNO:l-9中。4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5和1C3的l氨基酸序列分别显示在SEQIDNO:10-18中。可以在本发明中使用的其他人抗-PSMA抗体包括在PCT公开WOO3/034903和美国申"i青No.2004/0033229中/>开的抗体。假定这些抗体中的每一个都能够与PSMA结合，则Vh和Vl序列可以"混合并匹配，，，从而产生本发明的其他的抗-PSMA结合分子。PSMA与这些"混合并匹配的，，抗体的结合可以用本领域公知的结合试验(例如FACS分析和ELISA测定)来检测。优选地，当Vh和l链混合并匹配时，来自特定VH/Vt配对的VH序列被替换为结构上相似的Vh序列。同样，优选地，来自特定VJ^配对的Vt序列被替换为结构上相似的Vl序列。例如，4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6和2F5的Vh序列特别适合混合并匹配，因为这些抗体使用来源于相同种系序列(V5-51)的Vh序列,因此它们表现出结构相似性。同样，4A3、7F12、8C12和2C6的Vt序列特别适合混合并匹配，因为这些抗体使用来源于相同种系序列(VLL6)的Vl序列，因此它们表现出结构相似性。同样，8A11和16F9的Vt序列特别适合混合并匹配，因为这些抗体使用来源于相同种系序列(VL04/014)的V^序列，因此它们表现出结构相似性。同样，1C3、2A10和2F5的W序列特别适合混合并匹配，因为这些抗体使用来源于相同神系序歹'J(VlL18)的Vl序列，因此它们表现出结构相似性。在具体实施方案中，本发明提供脱岩藻糖基化的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包括(a)包含选自SEQIDNO:1-9的氨基酸序列的重链可变区；和(b)包含选自SEQIDNO:10-18的氨基酸序列的轻链可变区；其中该抗体与人PSMA特异性结合。优选的重链和轻链组合包括(a)包含SEQIDNO:1的氨基酸序列的重链可变区；和(b)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的轻链可变区；或(a)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的重链可变区；和(b)包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的轻链可变区；或(a)包含SEQIDNO:3的氨基酸序列的重链可变区；和(b)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的轻链可变区。(a)包含SEQIDNO:4的氨基酸序列的重链可变区；和(b)包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的轻链可变区；或(a)包含SEQIDNO:5的氨基酸序列的重链可变区；和(b)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的轻链可变区；或(a)包含SEQIDNO:6的氨基酸序列的重链可变区；和(b)包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的轻《连可变区；或(a)包含SEQIDNO:7的氨基酸序列的重链可变区；和(b)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的轻链可变区；或(a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的重链可变区；和(b)包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的轻链可变区；或(a)包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重链可变区；和(b)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的轻链可变区。在另一方面，本发明提供包含4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5或1C3的重链和轻链CDR1、CDR2和CDR3或其组合的脱岩藻糖基化抗体。4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5和1C3的VHCDR1的氨基酸序列分别示于SEQIDNO:19-27中。4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5和1C3的VHCDR2的氨基酸序列分别示于SEQIDNO:28-36中。4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5和1C3的VHCDR3的氨基酸序列分别示于SEQIDNO:37-45中。4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5和1C3的VKCDR1的氨基酸序列分别示于SEQIDNO:46—54中。4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5和1C3的VKCDR2的氨基酸序列分别示于SEQIDNO:55-63中。4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5和1C3的VKCDR3的氨基酸序列分别示于SEQIDNO:64-72中。CDR区用Kabat系统(Kabat,E.A.等(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第五版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH出版号91—3242)勾画出。假如这些抗体均能与PSMA结合，并且抗原结合特异性主要是由C脂、CDR2和CDR3区提供的，则VHCDRl、CDR2和CDR3序列与VkCDRl、CDR2和CDR3序列可以"混合并匹配"(即来自不同抗体的CDR可以混合并匹配，但是每个抗体必须含有VHCDRl、CDR2和CDR3和VKCDRl、CDR2和CDR3),产生本发明的其他的抗-PSMA结合分子。PSMA与这些"混合并匹配的"抗体的结合可以用本领域公知的结合试-验(例如FACS分析、ELISA测定)#全测。优选地，当VCDR序列混合并匹配时，来自特定Vh序列的CDR1、CDR2和/或CDR3序列被替换为结构上相似的CDR序列。同样，当VKCDR序列混合并匹配时，来自特定Vk序列的CDR1、CDR2和/或CDR3序列优选地被替换为结构上相似的CDR序列。本领域技术人员容易理解，通过将一个或多个Vh和/或lCDR区序列替换为来自本文公开的单克隆抗体4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5和1C3的CDR序列的结构上相似的序列，可以产生新的Vh和I序列。因此，在另一个方面，本发明提供一种脱岩藻糖基化的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包括(a)包含选自SEQIDNOCDR1;(b)包含选自SEQIDNOCDR2;(c)包含选自SEQIDNOCDR3;(d)包含选自SEQIDNOCDR1;(e)包含选自SEQIDNOCDR2;和(f)包含选自SEQIDNOCDR3;其中该抗体与PSMA特异性结合。在一个优选实施方案中，该抗体包括(a)包含SEQIDNO:19的人重链可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO:28的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO:37的人重链可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO:46的人轻《连可变区CDR1;(e)包含SEQIDNO:55的人轻《连可变区CDR2;和(f)包含SEQIDNO:64的人轻链可变区CDR3。在另一优选实施方案中，该抗体包4舌(a)包含SEQIDNO:20的人重链可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO:29的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO:38的人重《连可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO:47的人轻链可变区CDR1;:19-27的氨基酸序列的人重链可变区:28-36的氨基酸序列的人重链可变区:37-45的氨基酸序列的人重链可变区:46-54的氨基酸序列的人轻链可变区:55-63的氨基酸序列的人轻链可变区:64-72的氨基酸序列的人轻链可变区(e)包含SEQIDNO:56的人轻链可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO:65的人轻链可变区CDR3。在另一优选实施方案中，该抗体包兮舌(a)包含SEQIDNO.21的人重链可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO'30的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO39的人重《连可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO48的人轻链可变区CDR1;(e)包含SEQIDNO57的人轻链可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO66的人轻链可变区CDR3。在另一优选实施方案中，该抗体包4舌(a)包含SEQIDNO.22的人重链可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO31的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO40的人重链可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO49的人轻链可变区CDR1;(e)包含SEQIDNO'58的人轻链可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO67的人轻链可变区CDR3。在另一优选实施方案中，该抗体包括(a)包含SEQIDNO23的人重链可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO32的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO41的人重链可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO50的人轻链可变区CDR1;(e)包含SEQIDNO59的人轻链可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO:68的人轻链可变区CDR3。在另一优选实施方案中，该抗体包括(a)包含SEQIDNO:24的人重链可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO:33的人重链可变区CM2;(c)包含SEQIDNO:42的人重链可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO:51的人轻链可变区CDR1;(e)包含SEQIDNO:60的人轻t连可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO:69的人轻链可变区CDR3。在另一优选实施方案中，该抗体包括(a)包含SEQIDNO:25的人重t连可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO34的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO43的人重链可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO52的人轻链可变区CDR1;(e)包含SEQIDNO61的人轻链可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO70的人轻链可变区CDR3。在另一优选实施方案中，该抗体包括(a)包含SEQIDNO26的人重链可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO'35的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO44的人重链可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO'53的人轻《连可变区CDR1;(e)包含SEQIDNO,62的人轻《连可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO71的人轻链可变区CDR3。在另一优选实施方案中，该抗体包括(a)包含SEQIDNO27的人重链可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO36的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO45的人重《连可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO54的人轻链可变区CDR1;(e)包含SEQIDNO63的人轻链可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO72的人轻《连可变区CDR3。具有特定种系序列的抗体在某些实施方案中，本发明的脱岩藻糖基化抗体包含来自特定种系重链免疫球蛋白基因的重链可变区和/或来自特定种系轻链免疫球蛋白基因的轻链可变区。例如，在一个优选实施方案中，本发明提供一种脱岩藻糖基化的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含产自或来源于人VH5-51基因的重链可变区，其中该抗体与人PSMA特异性结合。在另一优选实施方案中，本发明提供提供一种脱岩藻糖基化的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含产自或来源于人VH3-30.3基因的重链可变区，其中该抗体与PSMA特异性结合。在另一优选实施方案中，本发明提供一种脱岩藻糖基化的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含产自或来源于人VkL6基因的轻链可变区，其中该抗体与人PSMA特异性结合。在另一优选实施方案中，本发明提供一种脱岩藻糖基化的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含产自或来源于人VK04/014基因的轻链可变区，其中该抗体与人PSMA特异性结合。在另一优选实施方案中，本发明提供一种脱岩藻糖基化的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含产自或来源于人VyL18基因的轻链可变区，其中该抗体与人PSMA特异性结合。在另一优选实施方案中，本发明提供一种脱岩藻糖基化的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中该抗体(a)包含产自或来源于人VH5-51或3-30.3基因(该基因分别编码SEQIDNO:73和76所示的氨基酸序列)的重链可变区；(b)包含产自或来源于人V,L6、04/014或L18基因(该基因分别编码SEQIDNO:74、75和77所示的氨基酸序列)的轻《连可变区；且(c)与人PSMA特异性结合。一种优选的Vh和VK种系组合是V5-51和VKL6。分别具有VH5-51和VKL6的Vh和Vk的抗体的例子是4A3、7F12、8C12和2C6抗体。另一种优选的Vh和VK种系组合是VH5-51和VK04/014。分别具有5-51和VK04/014的Vh和Vk的抗体的例子是8A11和16F9抗体。另一种优选的Vh和VK种系组合是VH5-51和VKLI8。分别具有VH5-51和VKL18的Vh和Vk的抗体的例子是2A1Q和2F5抗体。另一种优选的Vh和VK种系组合是VH3-30.3和VKL18。分别具有VH3-30.3和VKL18的Vh和Vk的抗体的一个例子是1C3抗体。如此处所用的，如果一种人抗体的可变区是从使用人种系免疫球蛋白基因的系统中获得的，则该人抗体包含"产自"或"来源于，，特定种系序列的重链或轻链可变区。这样的系统包括用目标抗原免疫携带人免疫球蛋白基因的转基因小鼠，或者用目标抗原筛查展示在噬菌体上的人免疫球蛋白基因文库。"产自"或"来源于"人种系免疫球蛋白序列的人抗体可以这样鉴定将该人抗体的氨基酸序列与人种系免疫球蛋白的氨基酸序列进行比较(例如使用Vbase数据库)，选择在序列上最接近于该人抗体序列(即有最高％同一性)的人种系免疫球蛋白序列。"产自"或"来源于"特定人种系免疫球蛋白序列的人抗体与该种系序列相比可能包含氨基酸差异，例如由于天然发生的体细胞突变或有意引入定点突变而导致的。但是，选择的人抗体在氨基酸序列上与人种系免疫球蛋白基因编码的氨基酸序列一般至少90%相同，并且含有当与其他物种的种系免疫球蛋白氨基酸序列(例如鼠种系序列)相比较时确认该人抗体属于人类抗体的氨基酸残基。在某些情况下，人抗体在氨基酸序列上与该种系免疫球蛋白基因编码的氨基酸序列可以至少95%、或者甚至至少96%、97%、98%或99%相同。一般来说，来源于特定人种系序列的人抗体表现与该人种系免疫球蛋白基因编码的氨基酸序列有不超过10个氨基酸的差异。在某些情况下，该人抗体可能表现与该种系免疫球蛋白基因编码的氨基酸序列有不超过5个、或者甚至不超过4、3、2或1个氨基酸的差异。同源抗体在另一实施方案中，本发明的脱岩藻糖基化抗体包含的重链和轻链可变区含有与本文所述优选抗体的氨基酸序列同源的氨基酸序列，并且其中该抗体保留了本发明的抗-PSMA抗体的需要的功能特性。例如，本发明提供一种脱岩藻糖基化单克隆抗体或其抗原结合部分，包含重链可变区和轻链可变区，其中(a)重链可变区包含与选自SEQIDNO:1-9的氨基酸序列至少80%同源的氨基酸序列；(b)轻链可变区包含与选自SEQIDNO:10-18的氨基酸序列至少80%同源的氨基酸序列；且(c)该抗体与人PSMA特异性结合。在另外一些实施方案中，Vh和/或Vt氨基酸序列可以与上述序列85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%同源。具有与上述序列的Vh和V^区高度(即80%或更高)同源的Vh和Vl区的抗体可以如下荻得诱变(例如定点诱变或PCR介导的诱变)编码SEQIDNO:1-18的一种或多种核酸分子，然后用此处所述的结合试验检测编码的被改变抗体的保留的功能(即与PSMA结合)。编码SEQIDNO:6-9和15-18的核酸分子可见SEQIDNO:78-85。编码SEQIDNO:1-5和10-14的核酸分子可见PCT/>布WO03/064606图17A和17B。如此处所用的，两个氨基酸序列之间的百分同源性等同于两个序列之间的百分同一性。考虑为了两个序列之间进行最佳比对所需要引入的空位的数目和每个空位的长度后，两个序列之间的百分同一性是这两个序列共有的相同位点的数目的函数(即％同源性=相同位点的数目/位点的总数x100)。两个序列之间的序列比较和百分同一性的确定可以如下面的非限制性实施例中所述用数学算法实现。两个核苷酸序列之间的百分同一性可以用GCG软件包(可从http:〃www.gcg.com获得)中的GAP程序、使用NWSgapdna.CMP矩阵和40、50、60、70或80的空位权重和1、2、3、4、5或6的长度权重来确定。两个核苷酸或氨基酸序列之间的百分同一性也可以用已经整合入ALIGN程序(2.0版本)中的E.Meyers和W.Miller(Comput.Appl.Biosci.,4:11-17(1988))的算法来确定，其使用PAM120权重残基表，12的空位长度罚分，4的空位罚分。另外，两个氨基酸序列之间的百分同一性也可以用已经整合入GCG软件包(可从http://www.gcg.com获得)的GAP程序中的Needleman和Wimsch(J.Mol.Biol.48:444-453(1970))的算法来确定，其使用Blossum62矩阵或PAM250矩阵，16、14、12、10、8、6或4的空位权重，和1、2、3、4、5或6的长度片又重。两个氨基酸序列之间的百分同一性可以用已经整合入ALIGN程序(2.O版本)中的E.Meyers和W.Miller(Co，t.Appl.Biosci.，4:11-17("88))的算法来确定，其使用PAM120权重残基表，12的空位长度罚分，4的空位罚分。另外，两个氨基酸序列之间的百分同一性也可以用已经整合入GCG软件包(可/人http:〃www.gcg.com获得)的GAP程序中的Needleman和Wunsch(J.Mol.Biol.48:444—453(1970))的算法来确定，其使用Blossum62矩阵或PAM250矩阵，16、14、12、10、8、6或4的空位4又重，和1、2、3、4、5或6的长度权重。另外或者可替代地，本发明的蛋白质序列可以进一步用作"查询序列"来对公共数据库进行检索，例如用来鉴定相关序列。这种检索可以用Altschul等(1990)J.Mol,Biol.215:403—10的XBLAST程序(2.0版本)进行。BLAST蛋白质检索可以用XBLAST程序进行，得分=50,字长=3,以获得与本发明的抗体分子同源的氨基酸序列。为了获得用于比较目的的空位比对，可以采用如Altschul等(1997)NucleicAcidsRes.25(17):3389-3402所述的空位BLAST。当采用BLAST和空位BLAST程序时，可以使用各自程序(例如XBLAST和NBLAST)的缺省参数。参见http:〃www.ncbi.nlm.nih.gov。具有保守修饰的抗体在某些实施方案中，本发明的脱岩藻糖基化抗体包括含CDRl、CDR2和CDR3序列的重《连可变区和含CDRl、CDR2和CDR3序列的轻4连可变区，其中这些CDR序列中的一个或多个包含基于本文所述优选抗体(例如4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5或1C3)的特定氨基酸序列或其保守修饰，并且其中该抗体保留本发明抗-PSMA抗体的需要的功能特性。因此，本发明提供一种脱岩藻糖基化的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包括含CDR1、CDR2和CDR3序列的重4连可变区和含CDR1、CDR2和CDR3序列的轻链可变区，其中(a)重链可变区CDR3序列包含SEQIDNO:37-45的氨基酸序列及其保守修饰；(b)轻链可变区CDR3序列包含SEQIDNO:64-72的氨基酸序列及其保守修饰；且(c)该抗体与人PSMA特异性结合。在一个优选实施方案中，重链可变区CDR2序列包含SEQIDNO:28-36的氨基酸序列和其保守修饰；且轻链可变区CDR2序列包含SEQIDNO:55-63的氨基酸序列和其保守修饰。在另一优选实施方案中，重链可变区CDR1序列包含SEQIDNO:19-27的氨基酸序列和其保守修饰；且轻链可变区CDRl序列包含SEQIDNO:46-54的氨基酸序列和其保守修饰。本文所用的术语"保守序列修饰"是指不会显著影响或改变含该氨基酸序列的抗体的结合特性的氨基酸修饰。这样的保守修饰包括氨基酸置换、添加和缺失。可以通过本领域7>知的标准纟支术，如定点诱变和PCR介导的诱变，向本发明抗体中引入修饰。保守氨基酸置换是将氨基酸残基替换为具有相似侧链的氨基酸残基。具有相似侧链的氨基酸残基的家族在本领域中已经定义。这些家族包括具有碱性侧链(例如赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、酸性侧链(例如天冬氨酸、谷氨酸)、不带电荷极性侧链(例如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、色氨酸)、非极性侧链(例如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、曱硫氨酸)、(3-分支侧链(例如苏氨酸、纈氨酸、异亮氨酸)和芳族侧链(例如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)的氨基酸。因此，本发明抗体的CDR区内的一个或多个氨基酸残基可以被置换为来自相同侧链家族的其他氨基酸残基，并且可以用此处所述的功能试验;险测改变的抗体保留的功能(即以上(i)至(iv)所述的功能)。可替代地，在另一实施方案中，可以(例如通过饱和诱变)沿抗-PSMA抗体编码序列的全部或部分随才几引入突变，并且可以针对结合活性筛查产生的》务饰的抗-PSMA抗体。与本发明的抗-psma抗体结合相同表位的抗体在另一实施方案中，本发明提供与本文提供的本发明的各种抗-psma抗体结合相同表位的脱岩藻糖基化抗体，例如与本文描述的4a3、7f12、8c12、8a11、16f9、2a10、2c6、2f5或1c3抗体结合相同表位的其他人抗体。这些其他抗体可以根据它们在标准psma结合测定中与本发明的其他抗体(例如4a3、7f12、8c12、8a11、16f9、2a10、2c6、2f5或1c3)交叉竟争(例如以统计学显著性的方式竟争性抑制其结合)的能力来鉴定。被试抗体抑制例如4a3、7f12、8c12、8a11、16f9、2a10、2c6、2f5或1c3与人psma结合的能力证明，该被试抗体可以与该抗体竟争结合人psma;根据非限制性的理论，该抗体可以与人psma上与它所竟争的抗体相同或相关(例如结构上相似或空间上接近)的表位结合。在一个优选实施方案中，与4a3、7f12、8c12、8a11、16f9、2a10、2c6、2f5或1c3结合人psma上相同表位的脱岩藻糖基化抗体是人单克隆抗体。这些人单克隆抗体可以如pct/^布wo01/09192和wo03/064606所述制备和分离。工程化抗体和修饰的抗体本发明的脱岩藻糖基化抗体还可以如下制备用具有本文所公开的一种或多种v,i和/或^序列的抗体作为起始材料，改造一种修饰的抗体，该修饰的抗体可能具有与起始抗体相比改变的特性。可以通过^修饰一个或两个可变区(即Vh和/或vj例如一个或多个cdr区内和/或一个或多个构架区内的一个或多个氨基酸残基来改造抗体。另外或者可替代地，可以通过修饰恒定区内的残基来改造抗体，例如改变该抗体的效应功能。可以进行的一种类型的可变区改造是cdr移植。抗体主要是通过位于六个重链和轻链互补决定区(cdr)中的氨基酸残基与靶抗原相互作用。由于这个原因，cdr内的氨基酸序列比cdr外的序列在各个抗体之间更加多样化。由于cdr序列负责大多数抗体-抗原相互作用，因此通过构建如下的表达载体能够表达模拟特定天然存在抗体的特性的重组抗体该表达载体包含来自特定天然存在抗体的CDR序列，该CDR序列被移植到来自具有不同特性的不同抗体的构架序列上(参见，例如，Riechmann，L.等(1998)Nature332:323-327;Jones，P.等(1986)Nature321:522-525;Queen，C.等(1989)Proc,Natl,Acad.Sci.U.S.A.86:10029-10033;Winter的美国专利5,225,539,和Queen等人的美国专利5,530,101;5,585,089;5,693，762和6,180，370)。因此，本发明的另一个实施方案涉及一种脱岩藻糖基化的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包括重链可变区和轻链可变区，该重链可变区包括分别包含选自SEQIDNOs:19-27,SEQIDNOs:28-36，和SEQIDNOs:37-45的氨基酸序列的CDR1、CDR2和CDR3序列，该轻4连可变区分别包含选自SEQIDNOs:46-54，SEQIDNOs:55-63，和SEQIDNOs:64-72的氨基酸序列。因此，该抗体含有单克隆抗体4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5或1C3的V和VLCDR序列，但是可能含有与这些抗体不同的构架序列。这些构架序列可以从包括种系抗体基因序列的公共DNA数据库或发表的参考文献中获得。例如，人重链和轻链可变区基因的种系DNA序列可以在以下资源中发现"VBase，，人种系序列数据库(可从因特网上www.rare-cpe.cam.ac.uk/vbase获得)，以及Kabat，E.A.等(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第五版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH出版号91-3242;Tomlinson，I.M.等(1992)"TheRepertoireofHumanGermlineVhSequencesRevealsaboutFiftyGroupsofVHSegmentswithDifferentHypervariableLoops"J.Mol.Biol.227:776-798;和Cox，J.P.L.等(1994)"ADirectoryofHumanGerm-lineVHSegmentsRevealsaStrongBiasintheirUsage,，Eur.J.Immunol.24:827-836;其内容均在此引用作为参考。用于本发明抗体的优选构架序列在结构上类似于所选择的本发明抗体使用的构架序列，例如，类似于本发明的优选单克隆抗体使用的V5-51或3-30.3序列(分别为SEQIDNO:73或76)和/或VKL6、04/014或L18构架序列(分别为SEQIDNO:74、75或77)。VCDR1、2和3序列和VkCDRl、2和3序列可以被移植到与该构架序列的来源种系免疫球蛋白基因具有相同序列的构架区上，或者CDR序列可以被移植到与该种系序列相比含有一个或多个突变的构架区上。例如，已经发现，在某些情况中，将构架区内的残基进行突变对于保持或增强抗体的抗原结合能力是有利的(参见，例如，Queen等的美国专利5，530，101;5,585,089;5,693，762和6,180，370)。另一种类型的可变区修饰是突变V,,和/或VKCDR1、CDR2和/或CDR3区内的氨基酸残基，从而改善目标抗体的一种或多种结合特性(例如亲和力)。可以进行定点诱变或PCR介导的i秀变，以引入突变，对抗体结合的影响，或者其他目标功能特性，可以用此处所述和实施例中提供的体外或体内试验来评价。优选地引入(如上文所述的)保守修饰。这些突变可以是氨基酸置换、添加或缺失，但是优选置换。而且，一般改变CDR区内不超过1、2、3、4或5个残基。因此，在另一个实施方案中，本发明提供脱岩藻糖基化抗PSMA单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含的重链可变区含有(a)V"CDRl区，其包含选自SEQIDNO:19-27的氨基酸序列，或与选自SEQIDNO:19-27的氨基酸序列相比具有1、2、3、4或5个氨基酸置换、缺失或添加的氨基酸序列；(b)VHCDR2区，其包含选自SEQIDNO:28-36的氨基酸序列，或与选自SEQIDNO:28-36的氨基酸序列相比具有1、2、3、4或5个氨基酸置换、缺失或添加的氨基酸序列；(c)VHCDR3区，其包含选自SEQIDNO:37-45的氨基酸序列，或与选自SEQIDNO:37-45的氨基酸序列相比具有1、2、3、4或5个氨基酸置换、缺失或添加的氨基酸序列；(d)VKCDRl区，其包含选自SEQIDNO:46-54的氨基酸序列，或与选自SEQIDNO:46-54的氨基酸序列相比具有1、2、3、4或5个氨基酸置换、缺失或添加的氨基酸序列；(e)VKCDR2区，其包含选自SEQIDNO:55-63的氨基酸序列，或与选自SEQIDNO:55-63的氨基酸序列相比具有1、2、3、4或5个氨基酸置换、缺失或添加的氨基酸序列；和(f)VKCDR3区，其包含选自SEQIDNO:64-72的氨基酸序列，或与选自SEQIDNO:64-72的氨基酸序列相比具有1、2、3、4或5个氨基酸置换、缺失或添加的氨基酸序列。本发明的工程化抗体包括(例如)为了改善抗体特性而对其Vh和/或VK内的构架残基进行了修饰的抗体。进行这样的构架修饰一般是为了降低抗体的免疫原性。例如，一种方法是将一个或多个构架残基"回复突变"为相应的种系序列。更特别地，经历体细胞突变的抗体可含有与衍生该抗体的种系序列不同的构架残基。通过比4交抗体构架序列与衍生该抗体的种系序列，可以鉴定这些残基。例如，对于8C12和8A11，Vh的氛基酸残基H3(FRl内)是苏氨酸，而在相应的V5-51种系序列中该残基为赖氨酸。为了使构架区序列恢复为其种系构型，可以通过(例如)定点诱变或PCR介导的诱变，将该体细胞突变"回复突变，，为种系序列(例如，8C12或8A11的Vn的FR1的残基13可以从苏氨酸"回复突变，，为赖氨酸)。这些"回复突变"的抗体也包括在本发明中。另一种类型的构架修饰涉及对构架区内、乃至一个或多个CDR区内的一个或多个残基进行突变，以除去T细胞表位，从而降低该抗体的潜在的免疫原性。该方法也被称为"脱免疫，，，在Carr等人的公布号为20030153043的美国专利中详细记载。除了在构架区或CDR区内进行的修饰以外，或者作为它的替代方案，也可以将本发明的抗体改造为在Fc区内包括修饰，一般是为了改变该抗体的一种或多种功能特性，如血清半衰期、补体固定、Fc受体结合和/或抗原依赖性细胞毒性。此外，也可以将本发明的抗体化学修饰(例如一个或多个化学部分可以连接到该抗体上)，或者修饰以改变其糖基化，由此改变该抗体的一种或多种功能特性。这些实施方案均在下文详细描述。Fc区中残基的编号是Kabat的EU指数的编号。在一个实施方案中，修饰CH1的铰链区，使该铰链区中半胱氨酸残基的t:目改变，例如增加或减少。该方法在Bodmer等人的美国专利No.5，677，425中详细记载。改变CH1铰链区中半胱氨酸的数目是为了(例如)促进轻链和重链的装配，或提高或降低抗体的稳定性。在另一实施方案中，对抗体的Fc铰链区进行突变，以降低该抗体的生物半衰期。更具体地，向Fc-4交^i片萃殳的CH2-CH3结构域界面区引入一个或多个氨基酸突变，使得该抗体与葡萄球菌蛋白A(SpA)的结合比天然Fc-铰链结构域与SpA的结合减弱。该方法在Ward等人的美国专利No.6,165,745中详细记载。在另一实施方案中，修饰抗体以提高其生物半衰期。可以使用各种方法。例如，可以引入一个或多个如下突变T252L、T254S、T256F，如Ward的美国专利No.6，277，375所述。或者，为了提高生物半衰期，可以在CHI或CL区内改变该抗体，使之含有来自IgGFc区CH2结构域的两个环的补救受体结合表位，如Presta等人的美国专利No.5，869，046和6，121，022所述。在其他一些实施方案中，通过将至少一个氨基酸残基置换为不同的氨基酸残基来改变Fc区，以改变抗体的效应功能。例如，可以将选自氨基酸残基234、235、236、237、297、318、320、322的一个或多个氨基酸置换为不同的氨基酸残基，使得该抗体对效应配体的亲和力改变，但是保留亲本抗体的抗原结合能力。其亲和力被改变的效应配体可以是，例如，Fc受体或补体的CI成分。该方法在Winter等人的美国专利No.5，624，821和5,648，260中更详细地描述。在另外一个实例中，可以将选自氨基酸残基329、331和322的一个或多个氨基酸置换为不同的氨基酸残基，使得该抗体的Clq结合改变和/或补体依赖性细胞毒性(CDC)降低或消除。该方法在Idusogie等人的美国专利No.6,194，551中更详细地描述。在另外一个实例中，改变氨基酸位点231和239中的一个或多个氨基酸残基，从而改变该抗体固定补体的能力。该方法在Bodmer等人的PCT/^布W094/29351中进一步描述。在另外一个实例中，为了提高抗体介导抗体依赖性细胞毒性(ADCC)的能力和/或提高抗体对Fq受体的亲和力，通过在下列位点处修饰一个或多个氨基酸来修饰Fc区238、239、248、249、252、254、255、256、258、265、267、268、269、270、272、276、278、280、283、285、286、289、290、292、293、294、295、296、298、301、303、305、307、309、312、315、320、322、324、326、327、329、330、331、333、334、335、337、338、340、360、373、376、378、382、388、389、398、414、416、419、430、434、435、437、438或439。该方法在Presta的PCT/>布W000/42072中进一步描述。而且，人IgGl上对于FcyRI、FcyRII、FcyRIII和FcRn的结合位点已经作图，并且已经描述了具有改善的结合的变体(参见，Shields,R.L.等(2001)J.Biol.Chem.276:6591-6604)。位点256、290、298、333、334和339处的特定突变显示改善了与FqRIII的结合。另外，下列组合突变体显示改善了与FcyRIII的结合T256A/S298A,S298A/E333A,S298A/K224A和S298A/E333A/K334A。本发明涉及的抗体的另一种修饰是PEG化。例如，为了提高抗体的生物(例如血清)半衰期，可以将该抗体PEG化。为了PEG化一种抗体，一般在一个或多个PEG基团可与抗体或抗体片段连接的条件下，将该抗体或其片段与聚乙二醇(PEG)如PEG的反应性酯或醛衍生物进行反应。优选地，通过与反应性PEG分子(或类似的反应性水溶性聚合物)的酰化反应或烷基化反应进行PEG化。本文所用的术语"聚乙二醇，，包括用来衍生化其他蛋白质的任何PEG形式，如单(C1-CIO)烷氧基-或芳氧基-聚乙二醇或聚乙二醇-马来酰亚胺。在某些实施方案中，将要PEG化的抗体是非糖基化的抗体。将蛋白质PEG化的方法在本领域中公知，并且可以应用于本发明的抗体。参见，例如，Nishimura等人的EP0154316和Ishikawa等人的EP0401384。改造抗体的方法如上所述，能够利用具有此处公开的Vh和Vk序列的脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体，通过修饰Vh和/或Vk序列或与之連接的恒定区，产生新的抗-PSMA抗体。因此，在本发明的另一方面，利用本发明的抗-PSMA抗体例如4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5或1C3的结构特征，产生结构上相关的脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体，该抗体保留本发明抗体的至少一种功能特性，如与人PSMA结合。如上所述，例如，4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5或1C3的一个或多个CDR区或其突变可以与已知的构架区和/或其他CDR重组组合，从而产生另外的、重组改造的本发明的抗-PSMA抗体。其他类型的修饰包括以上部分所述的修饰。用于改造方法的起始材料是此处提供的一种或多种Vn和/或Vk序列，或其一个或多个CDR区。为了产生工程化抗体，不一定实际制备(即表达为蛋白质)具有此处提供的一种或多种Vn和/或Vk序列，或其一个或多个CDR区的抗体。而是利用该序列中所含的信息作为起始材料，产生由原始序列衍生的"第二代，，序列，然后制备该"第二代"序列，并将其表达为蛋白质。因此，在另一实施方案中，本发明提供一种制备抗-PSMA抗体的方法，包括(a)提供(i)重链可变区抗体序列，其包含选自SEQIDNO:19-27的CDR1序列、选自SEQIDNO:28-36的CDR2序列、和/或选自SEQIDNO:37-45的CDR3序列；和/或(H)轻《连可变区抗体序列，其包含选自SEQIDNO:46-54的CDRl序列、选自SEQIDNO:55-63的CDR2序列、和/或选自SEQIDNO'.64-72的CDR3序列；(b)改变重链可变区抗体序列和/或轻链可变区抗体序列内的至少一个氨基酸残基，从而产生至少一个改变的抗体序列；和(C)将所述改变的抗体序列表达为蛋白质。可以利用标准分子生物学技术制备和表达所述改变的抗体序列。藻糖基化的形式，以获得脱岩藻糖基化的改变的抗-PSMA抗体。改变的抗体的功能特性可以用本领域中使用的和/或此处所述的，如实施例中所述的标准试-验(例如流式细胞术、结合测定、ADCC测定)来评价。在改造本发明抗体的方法的某些实施方案中，可以沿全部或部分抗-PSMA抗体编码序列随机或选择性引入突变，并可以针对结合活性和/或如此处所述的其他功能特性，筛选获得的修饰的抗-PSMA抗体。突变方法在本领域中已经描述。例如，Short的PCT/>布冊02/092780记载了利用饱和诱变、合成连接装配或它们的组合产生和筛选抗体突变的方法。另外，Lazar等人的PCT公布W003/074679也记载了利用计算筛选方法优化抗体的生理化学性质的方法。编码本发明的抗体的核酸分子本发明的另一方面涉及编码本发明的抗体的核酸分子。本文使用的术语"核酸分子，，包括DNA分子和RNA分子。核酸分子可以是单链或双链的，^旦优选双《连DNA。这些核酸可以存在于完整细J包、细胞裂解物中，或以部分纯化或基本上纯的形式存在。当通过包括碱/SDS处理、CsCl显带、柱层析、琼脂糖凝胶电泳在内的标准技术和本领域公知的其他方法与其他细胞成分或其他掺杂物(例如其他细胞核酸或蛋白质)分离纯化时，核酸是"分离的"或"基本上纯的"。参见，F.Ausubel等ed.(1987)CurrentProtocolsinMolecularBiology,GreenePublishingandWileyInterscience,NewYork。本发明的核酸可以是(例如)DNA或RNA，并且可以含有或者可以不含内含子序列。在一个优选实施方案中，该核酸是cDNA分子。本发明的核酸可以利用标准分子生物学技术获得。对于杂交瘤(例如，由下文进一步描述的携带人免疫球蛋白基因的转基因小鼠制备的杂交瘤)表达的抗体，编码由杂交瘤制备的抗体轻链和重链的cDNA可以用标准PCR扩增或cDNA克隆技术获得。对于(例如使用嗟菌体展示技术)从免疫球蛋白基因文库中获得的抗体，可以从文库中回收编；马该纟元体的核酸。本发明优选的核酸分子是编码4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5或1C3单克隆抗体的VH和VL序列的核酸分子。编码4A3、7F12、8C12、8A11、16F9的VH和VL氨基酸序列的DNA序列在PCT/>布No.W003/064606中公开(见图17A和17B)，其内容引入本文作为参考。编码1C3的VH序列的DNA序列显示在SEQIDNO:78中。编码1C3的VL序列的DNA序列显示在SEQIDNO:82中。编码2A10的VH序列的DM序列显示在SEQIDNO:79中。编码2A10的VL序列的DNA序列显示在SEQIDNO:83中。编码2C6的VH序列的DNA序列显示在SEQIDNO:80中。编码2C6的VL序列的DNA序列显示在SEQIDNO:84中。编码2F5的VH序列的DNA序列显示在SEQIDNO:81中。编码2F5的VL序列的DNA序列显示在SEQIDNO:85中。一旦获得编码VH和VL片段的DNA片段，即可通过标准重组DNA技术进一步操作这些DM片段，例如将可变区基因转化为全长抗体链基因、Fab片段基因或scFv基因。在这些操作中，编码VL或VH的DNA片段与编码另外一种蛋白质如抗体恒定区或柔性连接体的另一个DNA片段有效连接。在本文中使用的术语"有效连接"意思是两个DNA片段连接在一起，使得这两个DNA片段编码的氨基酸序列保持在阅读才匡内。通过将编码VH的DNA与编码重链恒定区(CH1、CH2和CH3)的另外一种DNA分子有效连接，可以将分离的编码VH区的DNA转化为全长重链基因。人重链恒定区基因的序列在本领域中公知(参见，例如，Kabat，E.A.等(1991)SequencesofProteinsofImmunologiclInterest,第五版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH出版号91-3242),包括这些区域的DNA片段可以通过标准PCR扩增获得。重链恒定区可以是IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgE、IgM或IgD恒定区，但是最优选IgGl或IgG4恒定区。对于Fab片段重链基因来说，编码VH的DNA可以与只编码重《连CH1恒定区的另外一种DNA分子有效连接。通过将编码VL的DNA与编码轻链恒定区CL的另外一种DNA分子有效连接，可以将分离的编码VL区的DNA转化为全长轻链基因(以及Fab轻链基因)。人轻链恒定区基因的序列在本领域中^^知(参见，例如，Kabat,E.A.等(1991)SequencesofProteinsofImmunologiclInterest,第五版,U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH出版号91-3242),包括这些区域的DNA片段可以通过标准PCR扩增获得。轻链恒定区可以是K或X恒定区，但是最优选K恒定区。为了产生scFv基因，将编码VH和VL的DNA片段与编码柔性连接体例如编码氨基酸序列(Gly4_Ser)3(SEQIDNO:89)的另外一个片段有效连接，使得VH和VL序列可以表达为连续的单链蛋白质，其VL和VH区通过该柔性连接体连接(参见，例如Bird等(1988)Science242:423-426;Huston等(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:5879-5883;McCafferty等(1990)Nature348:552-554)。本发明的核酸组合物通常在来自于cDNA、基因组或其混合物的天然序列(除了修饰的限制性位点等以外)中可以根据标准技术进行突变，以提供基因序列。对于编码序列来说，这些突变可能影响氨基酸序列。具体地说，涉及基本同源于或来源于天然V、D、J、恒定、转换和本文所述的其他这些序列的DNA序列(其中"来源于"是指一种序列与另一种序列相同或由其改进而来)。本发明的单克隆抗体的产生通过多种技术能制备本发明的单克隆抗体(mAb),包括常规的单克隆抗体方法，例如，Kohler和Milstein(1975)Nature256:495所述的标准体细胞杂交技术。虽然优选体细胞杂交技术，但是原则上，能使用制备单克隆抗体的其他技术，例如B淋巴细胞的病毒或致癌转化。用于制备杂交瘤的优选的动物系统是鼠系统。用小鼠产生杂交瘤是一种完善建立的程序。免疫程序和分离用于融合的被免疫脾细胞的技术是本领域/>知的。融合配偶体(例如鼠骨髓瘤细胞)和融合程序也是公知的。在各种实施方案中，抗体可以是，例如，人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。本发明的嵌合或人源化抗体可以基于如上所述制备的鼠单克隆抗体的序列制备。编码重链和轻链免疫球蛋白的DNA可以从目标鼠杂交人类)免疫球蛋白序列。例如，为了产生嵌合抗体，可以利用本领域公知的方法将鼠可变区连接到人恒定区上(参见，例如，Cabilly等人的美国专利No.4,816,567)。为了产生人源化抗体，可以利用本领域公知的方法将鼠CDR区插入人构架内(参见，例如，Winter的美国专利No.5，225,539，和Queen等人的美国专利No.5，530，101;5,585,089;5，693，762和6,180,370)。在本领域中公知多种小鼠抗-PSMA抗体能够用来产生嵌合或人源化抗-PSMA抗体，例如3F5.4G6、3D7.1.1、4E10-1.14、3E11、4D8、3E6、3C9、2C7、1G3、3C4、3C6、4D4、1G9、5C8B9、3G6、4C8B9、E99、J415、J533和J591。在一个优选实施方案中，本发明的抗体是人单克隆抗体。这种抗PSMA人单克隆抗体能用携带部分人免疫系统而不是小鼠系统的转基因或转染色体小鼠产生。这些转基因和转染色体小鼠包括本文中分别称作HuMAb小鼠和KM小鼠的小鼠，并且在此通称为"人Ig小^,，氛。HuMAb小鼠⑧(Medarex,Inc.)包含编码未重排的人重链(|^和丫)和k轻链免疫球蛋白序列的人免疫球蛋白基因小基因座，和使内源p和K链基因座失活的定向突变(参见，例如，Lonberg等(1994)Nature368(6474):856-859)。因此，该小鼠表现为小鼠IgM或K表达降低，并且响应于免疫，导入的人重链和轻链转基因经历类别转换和体细胞突变，从而产生高亲和力人IgGK单克隆抗体(Lonberg,N.等(1994)，同上；综述Lonberg，N.(1994)HandbookofExperimentalPharmacology113:49-101;Lonberg,N.和Huszar，D.(1995)Intern.Rev.Immunol.Vol.13:65-93,和Harding,F.和Lonberg，N.(1995)Ann.N.Y.Acad.Sci764:536—546)。HuMab小鼠的制备和使用，以及该小鼠携带的基因组修饰，在下面的文献中详细描述Taylor,L.等(1992)NucleicAcidsResearch20:6287—6295;Chen,J.等(1993)InternationalIm,ology5:647—656;Tuaillon等(1993)Proc.Natl.Acad.SciUSA90:3720-3724;Choi等(1993)NatureGenetics4:117-123;Chen,J.等(1993)EMB0J.12:821-830;Tuaillon等(1994)J,Immunol.152:2912—2920;Taylor,L.等(1994)InternationalImmunology6:579-591;禾口Fishwild，D,等(1996)NatureBiotechnology14:845—851，这些文献的内容全文在此引入作为参考。进一步参见，Lonberg和Kay的美国专利No.5,545,806;5,569,825;5,625,126;5,633,425;5,789,650;5,877,397;5，661，016;5，814，318;5，874，299;和5，770，429;和Surani等人的美国专利No.5，545，807;Lonberg和Kay的PCT公布号W092/03918，WO93/12227，WO94/25585，WO97/13852，WO98/24884和WO99/45962;和Korman等人的PCIVA布号W001/14424。在另一实施方案中，可以用转基因和转染色体上携带人免疫球蛋白序列的小鼠，例如携带人重链转基因和人轻链转染色体的小鼠，产生本发明的人抗体。这种小鼠在此称为"KM小鼠，，，在Ishida等人的PCT/〉布W002/43478中详细描述。再者，表达人免疫球蛋白基因的替代转基因动物系统在本领域中可以获得，能够用来产生本发明的抗-PSMA抗体。例如，可以使用一种称作Xenomouse(Abgenix,Inc.)的替代转基因系统，这种小鼠在例如Kucherlapati等人的美国专利No.5,939,598;6，075，181;6，114,598;6,150，584和6，162，963中描述。而且，表达人免疫球蛋白基因的替代转染色体动物系统在本领域中可以获得，能够用来产生本发明的抗-PSMA抗体。例如，可以^使用携带人重链转染色体和人轻链转染色体的小鼠，其被称作"TC小鼠，，；这种小鼠在Tomizuka等(2000)Proc.Natl.Acad.Sci.USA97:722-727中描述。另外，本领域中已经描述了携带人重链和轻链转染色体的牛(Kuroiwa等(2002)NatureBiotechnology20:889-894),其能够用来产生本发明的抗-PSMA抗体。也可以使用筛查人免疫球蛋白基因文库的噬菌体展示方法制备本发明的人单克隆抗体。这种用于分离人抗体的噬菌体展示方法在本领域中已经建立。参见，例如，Ladner等人的美国专利No.5，223，409;5,403，484;和5，571，698;Dower等人的美国专利No.5，427，908和5,580,717;McCafferty等人的美国专利No.5,969,108和6，172，197;和Griffiths等人的美国专利No.5,885,793;6,521,404;6，544，731;6,555,313;6,582,915和6，593，081。也可以用SCID小鼠制备本发明的人单克隆抗体，该SCID小鼠中重构了人免疫细胞，因此在免疫时能够产生人抗体应答。这种小鼠在例如Wilson等人的美国专利No.5，476，996和5，698，767中描述。人Ig小鼠的免疫当使用人Ig小鼠产生本发明的人抗体时，可以根据Lonberg,N.等(1994)Nature368(6474):856—859;Fishwild,D,等(1996)NatureBiotechnology14:845-851;和PCT/>布W098/24884和W001/14424—般性所述，用表达PSMA的细胞系(例如LnCaP细胞，ATCCCRL-1740)、用纯化的或富集的PSMA抗原制品(例如LnCaP细胞膜)和/或用重组PSMA或重组PSMA融合蛋白免疫该小鼠。优选地，第一次输注时小鼠为6-16周龄。例如，可以使用LnCaP细胞的膜制品腹膜内免疫人Ig小鼠。产生抗PSMA完全人单克隆抗体的详细程序在PCT公布WO01/09192和WO03/064606中描述。应用各种抗原积累的经验证明，当最初使用弗氏完全佐剂中的抗原腹膜内(IP)免疫，接着隔周用弗氏不完全佐剂中的抗原腹膜内免疫(最多共六次)时，转基因小鼠产生应答。但是，发现除弗氏佐剂之外的佐剂也是有效的。另外，发现在没有佐剂时，全细胞具有高度免疫原性。在免疫方案进程中可以用眼眶后取血获得的血浆样品监测免疫应答。通过ELISA(如下所述)筛选血浆，用具有足够抗-PSMA人免疫球蛋白效价的小鼠进行融合。用抗原对小鼠进行静脉内加强免疫，3天后处死并且取出脾脏。预期每次免疫可能需要进行2-3次融合。每一种抗原一般免疫6-24只小鼠。通常HCo7和HCo12系都使用。另外，HCo7和HCo12转基因都可以杂交，产生具有两种不同人重链转基因(HCo7/HCo12)的一种小鼠。产生本发明的人单克隆抗体的杂交瘤的产生为了制备产生本发明的人单克隆抗体的杂交瘤，从被免疫的携带人免疫球蛋白基因的转基因小鼠中分离脾细胞和/或淋巴结细胞，并且与合适的无限增殖化细胞系(例如小鼠骨髓瘤细胞系)融合。针对抗原特异性抗体的产生筛选得到的杂交瘤。例如，使用50%PEG,将来自被免疫小鼠的脾淋巴细胞的单细胞悬液与六分之一数量的P3X63-Ag8.653非分泌小鼠骨髓瘤细胞(ATCC，CRL1580)融合。将细胞以大约2xl0'的密度接种于平底微量滴定板中，接着在含有20。/。胎克隆血清、18%"653"条件基质、5%0rigen(IGEN)、4mML-谷氨酰胺、1mM丙酮酸钠、5mMHEPES、0.055mM2-巯基乙醇、50单位/毫升青霉素、50mg/ml链霉素、50mg/ml庆大霉素和lxHAT(Sigma;融合后24小时加入HAT)的选择性培养基中温育两周。大约两周之后，在用HT替换了HAT的培养基中培养细胞。然后通过ELISA针对人单克隆IgM和IgG抗体筛选各孔。一旦发生广泛的杂交瘤生长，则通常在10-14天之后观察培养基。将分泌抗体的杂交瘤再次平板接种，再次筛选，如果对于人IgG仍然是阳性，则可以通过有限稀释将单克隆抗体至少亚克隆两次。然后体外培养稳定的亚克隆，以在组织培养基中产生少量抗体用于表征。为了纯化人单克隆抗体，选择的杂交瘤可以在用于单克隆抗体纯化的两升力走转摇弁瓦中生长。过滤上清液，浓缩，之后用蛋白A-sepharose(Pharmacia,Piscataway，N.J.)进^亍亲和层析。洗脱下来的IgG通过凝胶电泳和高效液相色谱法检查以确保纯度。将緩沖溶液换成PBS,用1.43的消光系数根据OD280确定浓度。可将单克隆抗体分成等份并且在-8(TC下保存。产生本发明单克隆抗体的转染瘤的产生利用(例如)众所周知的重组DNA技术和基因转染方法的组合(例如，Morrison,S.(1985)science229:1202)，也能在宿主细胞转染瘤中产生本发明的抗体。例如，为了表达抗体或其抗体片段，可通过标准分子生物学技术(例如，使用表达目标抗体的杂交瘤进行PCR扩增或cDNA克隆)，获得编码部分或全长轻链和重链的DNA,并将该DNA插入到表达载体中，使得基因与转录和翻译控制序列有效连接。在上下文中，术语"有效连接"意思是抗体基因连接到载体中，使得载体中的转录和翻译控制序列发挥它们调节该抗体基因的转录和翻译的预期功能。选择与所用的表达宿主细胞相匹配的表达载体和表达控制序列。抗体轻《连基因和抗体重《连基因可被插入到分开的载体中，或者，更通常地，将两个基因插入到同一表达载体中。通过标准方法将抗体基因插入到表达载体中(例如，抗体基因片段上一与载体上的互补限制性位点连接，或者如果不存在限制性位点的活，则平端连接)。通过将本文描述的抗体的轻链和重链可变区插入到已经编码期望的同种型的重链恒定区和轻链恒定区的表达载体中，使得Vh区段与栽体中的Ch区段有效連接，而Vk区段与栽体中的"区段有效连接，可以产生任意抗体同种型的全长抗体基因。另外，或者可替代的，重组表达载体可以编码有利于宿主细胞分泌抗体链的信号肽。可将抗体链基因克隆到载体中，使得信号肽与该抗体链基因的氨基末端符合阅读框地连接。信号肽可以是免疫球蛋白信号肽或异源信号肽(即，来自非免疫球蛋白的蛋白质的信号肽)。除了抗体链基因，本发明的重组表达载体还带有控制该抗体链基因在宿主细胞中表达的调节序列。术语"调节序列"包括启动子、增强子和控制抗体链基因转录或翻译的其他表达控制元件(例如，多腺香酸化信号)。这样的调节序歹'J例如在Goeddel(GeneExpressionTechnology.MethodsinEnzymology185,AcademicPress,SanDiego，CA(1990))中描述。本领域技术人员应当理解，表达载体的设计，包括调节序列的选择，取决于诸如要转化的宿主细胞的选择、期望的蛋白质表达水平等因素。用于哺乳动物宿主细胞表达的优选调节序列包括指导蛋白质在哺乳动物细胞中高水平表达的病毒元件，例如来源于巨细胞病毒(CMV)、猿病毒40(SV40)、腺病毒(例如，腺病毒主要晚期启动子(AdMLP))和多瘤病毒的启动子和/或增强子。可替代地可以使用非病毒调节序列，例如泛蛋白启动子或(3-珠蛋白启动子。另外，调节元件也可由来自诸如SRoc启动子系统等不同来源的序列组成，SRa启动子系统含有来自SV40早期启动子的序列和人1型T细胞白血病病毒的长末端重复序列(Takebe，Y.等(1988)Mol.Cell.Biol.8:466-472)。除了抗体链基因和调节序列以外，本发明的重组表达载体还可以携带另外的序列，例如调节载体在宿主细胞中复制的序列(例如，复制起点)和选择性标记基因。选择性标记基因有利于筛选载体已经导入其中的宿主细胞(参见，例如，Axel等人的美国专利No.4，399，n6,4,634，665和5，179,017)。例如，选择性标记基因一般给已经导入载体的宿主细胞带来抗药性，例如G41S、潮霉素或氨曱喋呤抗性。优选的选择性标记基因包括二氢叶酸还原酶(DHFR)基因(在dhfr-宿主细胞中用于氨曱喋呤选择/扩增)和neo基因(用于G418选择)。为了表达轻链和重链，通过标准技术将编码重链和轻链的表达载体转染到宿主细胞中。术语"转染"的各种形式包括常用于将外源DNA导入原核或真核宿主细胞中的各种技术，例如，电穿孔、磷酸钙沉淀、DEAE-葡聚糖转染等等。虽然在理论上可以在原核或真核宿主细胞中表达本发明的抗体，但是优选在真核细胞中表达，最优选在哺乳动物宿主细胞中表达该抗体，因为真核细胞，特别是哺乳动物细月包，比原核细月包更可能装配和分泌正确折叠并且具有免疫活性的抗体。据报道，抗体基因的原核表达无法高产率地产生活性抗体(Boss，M.A.和Wood，C.R.(1985)ImmunologyToday6:12-13)。用于表达本发明的重组抗体的优选宿主细胞包括改变所表达的抗体的岩藻糖基化的细胞。例如，该宿主细胞可以是缺乏岩藻糖基转移酶因此该宿主细胞产生在其碳水化合物中缺乏岩藻糖的蛋白质的细胞，或者是表达糖蛋白修饰的岩藻糖基转移酶因此在宿主细胞中表达的抗体具有增多的等分(bisecting)GlcNac结构(可阻止糖基化)的宿主细胞。用于表达重组抗体的其他哺乳动物宿主细胞包括中国仓鼠卵巢(CHO细月包)(包括Urlaub和Chasin,(1980)Proc.Natl.Acad.Sci.USA77:4216-4220中描述的dhfr-CH0细胞，和DHFR选择性标记一起使用，例如，如R.J.Kaufman和P.A.Sharp(1982)Mol.Biol.159:601-621所述)、NS0骨髓瘤细胞、COS细胞和SP2细胞。特别地，用于NS0骨髓瘤细胞的另一种优选表达系统是W087/04462、W089/01036和EP338,841公开的GS基因表达系统。当将编码抗体基因的重组表达载体导入哺乳动物宿主细胞中时，通过将宿主细胞培养足以使抗体在宿主细胞中表达的时间，或更优选地，培养足以使抗体分泌到宿主细胞所生长的培养基中的时间，而产生抗体。可应用标准蛋白质纯化方法从培养基中回收抗体。免疫偶联物另一方面，本发明涉及与诸如细胞毒素、药物(例如免疫抑制剂)或放射性毒素等治疗性部分偶联的脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体或其片段。这些偶联物在此被称为"免疫偶联物，，。包括一个或多个细胞毒素的免疫偶联物被称作"免疫毒素，，。细胞毒素或细胞毒剂包括对细胞有害(例如杀伤细胞)的任何试剂。实例包括紫杉醇、细胞松弛素B、短杆菌肽D、溴化乙啶、吐根碱、丝裂霉素、表鬼臼毒吡喃葡糖苷、表鬼臼毒噻吩糖苷、长春新碱、长春碱、秋水仙素、阿霉素、柔红霉素、二羟基炭疽菌素二酮、米托蒽醌、光辉霉素、放线菌素D、l-脱氢睾酮、糖皮质激素、普鲁卡因、丁卡因、利多卡因、普萘洛尔和嘌呤霉素和它们的类似物或同系物。治疗剂还包括，例如，抗代谢物(例如，氨曱喋呤、6-巯基噤呤、6-硫代鸟嘌呤、阿糖胞香、5-氟尿嘧啶、氨烯咪胺(decarbazine)),烷化剂(例如，氮芥、苯丁酸氮芥(thioepachlorambucil)、苯丙氨酸氮芥、卡莫司汀(BSNU)和洛莫司汀(CCNU)、环磷酰胺、白消安、二溴甘露糖醇、链唑霉素、丝裂霉素C和顺-二氯二胺合铂(II)(DDP)顺铂)，氨茴霉素类(例如，柔红菌素(以前称为道诺霉素)和阿霉素)，抗生素(例如，放线菌素D(以前称为放线菌素)、博来霉素、光辉霉素和安曲霉素(AMC)),抗有丝分裂剂(例如，长春新碱和长春碱)。能与本发明抗体偶联的治疗性细胞毒素的其他优选例子包括倍癌霉素、刺孢霉素、美坦生、auristatin、和它们的书f生物。刺孢霉素抗体偶联物的一个例子是可作为商品购得的(Mylotarg;Wyeth-Ayerst)。可以利用本领域中使用的连接体技术将细胞毒素与本发明的抗体偶联。已经用于将细胞毒素与抗体偶联的连接体类型的实例包括但不限于腙、硫醚、S旨、二硫化物和含肽的连接体。可以选择(例如)在溶酶体区室内易被低pH切割或易被蛋白酶切割的连接体，该蛋白酶例如是在肿瘤组织中优先表达的蛋白酶，如组织蛋白酶(例如组织蛋白酶B、C、D)。关于细胞毒素的类型、用于偶联治疗剂与抗体的连接体和方法的进一步讨论，参见Saito，G.等(2003)Adv.DrugDeliv.Rev.55:199-215;TraU，P.A.等(2003)Cancer.I醒廳l.Immunother.52:328-337;Payne,G.(2003)CancerCell3:207-212;Allen,T.M.(2002)Nat.Rev.Cancer2:750-763;Pastan，I.禾口Kreitman，R.J.(2002)Curr.Opin.Investig.Drugs3:1089-1091;Senter，P.D.和Springer,C.J.(2001)Adv.DrugDeliv.Rev.53:247-264。本发明的抗体也可以与》文射性同位素偶联，产生细胞毒性;故射性药物，也称作放射性免疫偶联物。能够与诊断或治疗性使用的抗体偶联的放射性同位素的例子包括但不限于碘131、铟m、钇"和镥177。制备放射性免疫偶联物的方法在本领域中已经建立。放射性免疫偶联物的例子可以作为商品获得，包括Zevalin(IDECPharmaceuticals)牙口Bexxar(CorixaPharmaceuticals),并且能够利用类似、的方;去使用本发明的抗体制备放射性免疫偶联物。分不应理解为局限于经典的化疗剂。例如，药物部分可以是具有需要的生物活性的蛋白质或多肽。这样的蛋白质包括，例如，具有酶活性的毒素或其活性片段，如相思豆毒蛋白、蓖麻毒蛋白A、假单胞菌外毒素或白喉毒素；蛋白质，如肿瘤坏死因子或千扰素"7;或生物反应调节物，如淋巴因子、白介素-1("IL-1")、白介素-2("IL-2")、白介素-6("IL-6")、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子("GM-CSF，，)、粒细胞集落刺激因子("G-CSF，，)或其他生长因子。将这种治疗性部分与抗体偶联的技术是众所周知的，参见，例如,Arnon等，"MonoclonalAntibodiesForI,imotargetingOfDrugsInCancerTherapy"，inMonoclonalAntibodiesAndCancerTherapy,Reisfeld等(ed.),卯.243-56(AlanR.Liss,Inc.1985);Hellstrom等，"AntibodiesForDrugDelivery",inControlledDrugDelivery(2ndEd.)，Robinson等(ed.),pp.623-53(MarcelDekker,Inc.1987);Thorpe，"AntibodyCarriersOfCytotoxicAgentsInCancerTherapy:AReview"，inMonoclonalAntibodies，84:BiologicalAndClinicalApplications,Pinchera等(ed.)，pp.475—506(1985);"Analysis,Results,AndFutureProspectiveOfTheTherapeuticUseOfRadiolabeledAntibodyInCancerTherapy"，inMonoclonalAntibodiesForCancerDetectionAndTherapy,Baldwin等(ed.),pp.303-16(AcademicPress1985)，和Thorpe等，"ThePreparationAndCytotoxicPropertiesOfAntibody-ToxinConjugates"，Immunol.Rev.，62:119-58(1982)。药物组合物另一方面，本发明提供一种组合物，例如药物组合物，其含有与药学上可接受的载体配制在一起的一种或组合的本发明的单克隆抗体或其抗原结合部分。这样的组合物可以包含一种或组合的(例如两种或多种不同的)本发明的抗体或免疫偶联物。例如，本发明的药物组(或免疫偶联物)。本发明的药物组合物也可以在联合治疗中施用，即与其他药剂联用。例如，联合治疗可包括本发明的脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体联合至少一种其他的抗肿瘤剂、抗炎剂或免疫抑制剂。这些治疗剂包括甾体和非甾体抗炎药(NSAIDS)，例如阿司匹林和其他水杨酸盐，如高剂量的布洛芬(Motrin,Advil)、萘普生(Naprosyn)、舒林酸(奇诺力)、双氯芬酸(Voltaren)、吡罗昔康(Feldene)、酮洛芬(0rudis)、二氟尼柳(Dolobid)、萘丁美酮(Relafen)、依托度酸(Lodine)、奥沙普秦(Daypro)、巧l咮美辛(Indocin)和阿司匹林。可在联合治疗中使用的治疗剂的其他例子在下面本发明抗体的应用一节中更详细地描述。本文所用的"药学上可接受的载体"包括生理学相容的任何和所有的溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。优选地，该载体适合于静脉内、肌内、皮下、肠胃外、脊柱或表皮给药(如通过注射或输注)。根据给药途径，可将活性化合物即抗体或免疫偶联物用一种材料包裹，以保护该化合物免受可使该化合物失活的酸和其他天然条件的作用。本发明的药物组合物可包含一种或多种药学上可接受的盐。"药学上可接受的盐，，是指保持了亲代化合物的所需生物活性而不引起任何不期望的毒理学作用的盐(参见如Berge,S.M.等(1977)J.Pharm.Sci.66:1-19)。这样的盐的例子包括酸加成盐和碱加成盐。酸加成盐包括那些由诸如盐酸、硝酸、磷酸、硫酸、氩溴酸、氢硤酸、亚磷酸等无毒性无机酸衍生的盐，以及由诸如脂族单羧酸和二羧酸、苯基取代的链烷酸、羟基链烷酸、芳族酸、脂族和芳族磺酸等无毒性有机酸衍生的盐。碱加成盐包括那些由诸如钠、钾、镁、4丐等碱土金属个;亍生的盐，以及由诸如N，N，-二节基乙二胺、N-曱基葡糖胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、普鲁卡因等无毒性有机胺衍生的盐。本发明的药物组合物也可含有药学上可接受的抗氧化剂。药学上可接受的抗氧化剂的例子包括(1)水溶性抗氧化剂，如抗坏血酸、盐酸半胱氨酸、辟u酸氢钠、焦亚碌u酸钠，亚硫酸钠等；(2)油溶性抗氧化剂，如棕榈酸抗坏血酸酯、丁羟茴醚(BHA)、丁羟甲苯(BHT)、卵磷脂、没食子酸丙酯、oc-生育酚等；和(3)金属螯合剂，如柠檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨糖醇、酒石酸、磷酸等。可用于本发明药物组合物中的适当的水性或非水性载体的例子包括水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)及其适当的混合物、才直物油如橄榄油、和注射用有才儿酯如油酸乙酯。例如通过应用谅-如卵磷脂等包被材料，在分散液的情况下通过维持所需的颗粒大小，以及通过应用表面活性剂，能够维持适当的流动性。这些组合物也可含有辅料，如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。可以通过上述的灭菌程序或通过包含诸如对羟基苯甲酸酯、氯代丁醇、苯酚山梨酸等各种抗细菌剂和抗真菌剂确保防止存在微生物。也可能需要在组合物中包含等渗剂，例如，糖、氯化钠等。另外，通过包含延迟吸收剂，例如单硬脂酸铝和明胶，可实现注射型药物延长的吸收。药学上可接受的载体包括无菌水溶液或分散液和用于临时制备无菌注射液或分散液的粉末剂。这些用于药学活性物质的介质和试剂的使用是本领域公知的。除了任何常规介质或试剂与活性化合物不相容以外，包括其在本发明的药物组合物中的应用。还可以向组合物中^参入补充的活性化合物。治疗性组合物一般必须是无菌的并且在制备和贮存条件下稳定的。可以将组合物配制成溶液、微乳状液、脂质体或其他适合高药物浓度的有序结构。载体可以是含有例如水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇和液态聚乙二醇等)及其合适的混合物的溶剂或分散剂。例如，通过使用诸如卵磷脂等包被材料，在分散液的情况下通过保持所需的颗粒大小，以及通过使用表面活性剂，可以保持适当的流动性。在很多情况下，组合物中优选包含等渗剂，例如，糖、多元醇例如甘露糖醇、山梨糖醇或氧化钠。通过在组合物中加入延迟吸收剂，例如单硬脂酸盐和明胶，可实现注射型药物延长的吸收。通过将活性化合物以需要的量混入合适的溶剂中，并且根据需要加入以上列举的成分中的一种或其组合，接着无菌微过滤，可制备无菌注射液。通常，通过将活性化合物掺入到含有基础分散介质和上面所列其他所需成分的无菌载体中制备分散剂。对于用于制备无菌注射液的无菌粉末剂，优选的制备方法是真空千燥和冷冻千燥(冻千)，由其预先无菌过滤的溶液得到活性成分加任何额外所需成分的粉末。可以与载体材料组合制备单一剂型的活性成分的量根据所治疗的受试者和特定给药方式而不同。可以与载体材料组合制备单一剂型的活性成分的量一般是产生治疗效果的组合物的量。通常，以100%计，这个量的范围是大约0.01%至大约99%的活性成分，优选大约0.1%至大约70%，最优选大约1%至大约30%的活性成分，与药学上可接受的载体相组合。调节剂量方案，以提供最佳的所需反应(例如，治疗反应)。例如，可以施用单一大丸剂，可以随时间施用几次分开的剂量，或者才艮据治疗状况的紧急情况所需，可以按比例减小或增加剂量。特别有利的是将肠胃外组合物配制成容易给药并且剂量均匀的剂量单位形式。此处使用的剂量单位形式是指适合作为单位剂量用于所治疗的受试者的物理不连续单位；每个单位含有预定量的活性化合物，经计算该预定量的活性化合物与需要的药物载体组合产生所需的治疗效果。对本发明剂量单位形式的具体说明取决于且直接依赖于(a)活性化合物的独特特性和要达到的特定治疗效果，和(b)本领域中固有的对于配制这种用于治疗个体敏感性的活性化合物的限制。对于抗体的^^药，剂量范围为约0.0001至100mg/kg,更通常为0.01至5mg/kg宿主体重。例如，剂量可以是0.3mg/kg体重、1mg/kg体重、3mg/kg体重、5mg/kg体重或10mg/kg体重，或在l-10mg/kg范围内。一个示例性的治疗方案需要每周给药一次、每两周一次、每三周一次、每四周一次、每月一次、每3个月一次、或每3-6个月一次。本发明的脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体的优选剂量方案包括经静脉内给予1mg/kg体重或3mg/kg体重，该抗体使用如下剂量方案之一给药(i)每4周一次，共6次，然后每3个月一次；(ii)每3周一次；(iii)3mg/kg体重一次，然后每3周1mg/kg体重。在某些方法中，同时施用具有不同结合特异性的两种或多种单克隆抗体，在该情况中，每种抗体的给药剂量落在所述范围内。抗体通常多次给药。单次给药之间的间隔可以是，例如，每周、每月、每三个月或每年。间隔也可以是不定期的，例如通过测定患者中抗靶抗原的抗体的血液水平来确定。在一些方法中，调节剂量以达到约1-1000|ag/ml的血浆抗体浓度，在一些方法中为约25_300ng/ml。可替代地，抗体也可以作为持续释放制剂来给药，在此情况下需要频率较低的给药。剂量和频率根据抗体在患者中的半衰期而不同。通常，人抗体表现出最长的半衰期，之后是人源化抗体、嵌合抗体和非人类抗体。给药剂量和频率根据处理是预防性的还是治疗性的而不同。在预防性应用中，在长时间内以较不频繁的间隔给予相对较低的剂量。有些患者在余生中持续接受处理。在治疗性应用中，有时需要以较短的间隔给予较高的剂量，直到疾病的进展减轻或停止，优选直到患者表现为疾病症状部分或完全改善。之后，可以以预防性方案给患者给药。本发明药物组合物中活性成分的实际剂量水平可能变化，以获得可有效实现对特定患者、组合物和给药方式的所需治疗反应、而对患者无毒性的活性成分的量。选择的剂量水平取决于多种药物代谢动力学因素，包括应用的本发明特定组合物或其酯、盐或酰胺的活性、纟会药途径、给药时间、所应用的特定化合物的排泄速率、治疗的持续时间、与应用的特定组合物联合应用的其他药物、化合物和/或材料，接受治疗的患者的年龄、性别、体重、状况、总体健康情况和病史、以及医学领域中公知的类似因素。本发明的抗-PSMA抗体的"治疗有效剂量"优选地导致疾病症状的严重程度降低、疾病无症状期的频率和持续时间增加、或者防止因疾病痛苦而引起的损伤或失能。例如，对于癌性肿瘤的治疗，相对于未接受治疗的受试者，"治疗有效剂量"优选地使细胞生长或肿瘤生长抑制至少约20%，更优选至少约40%，更优选至少约60%，更优选至少约80%。化合物抑制肿瘤生长的能力可以在预测对人类肿瘤的疗效的动物才莫型系统中评价。另外，也可以通过本领域4支术人员公知的i式验检查该化合物的体外抑制能力，来评价组合物的这种性能。治疗有效量的治疗性化合物能够减小肿瘤大小，或者以其他方式緩解受试者的症状。本领域技术人员可以根据如下因素确定该量，如受试者的大小、受试者症状的严重程度和选择的特定组合物或给药途径。本发明的组合物可以利用本领域^>知的一种或多种方法通过一种或多种给药途径给药。本领域技术人员应当理解，给药途径和/或方式根据期望的结果而不同。本发明抗体的优选给药途径包括静脉内、肌肉内、皮内、腹膜内、皮下、脊柱或其他肠胃外给药途径，例如注射或输注。本文所用的短语"肠胃外给药，，是指肠和局部给药以外的给药模式，通常是注射，包括但不限于静脉内、肌内、动脉内、鞘内、嚢内、眶内、心内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、嚢下、蛛网膜下、脊柱内、硬膜外和胸骨内注射和输注。可替代地，本发明的脱岩藻糖基化抗体也可以通过非肠胃外途径给药，如局部、表皮或粘膜途径给药，例如，鼻内、经口、阴道、直肠、舌下或局部。如控释制剂，包括植入物、透皮贴剂和微胶嚢递送系统。可以使用生物可降解的、生物相容的聚合物，例如乙烯乙酸乙烯酯、聚酐类、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。制备这样的制剂的很多方法受专利保护或者通常为本领域技术人员所公知。参见，例如，SustainedandcontrolledReleaseDrugDeliverySystems,J.R.Robinson,ed.，MarcelDekker,Inc.，NewYork,1978。治疗性组合物可应用本领域公知的医疗装置给药。例如，在一个优选实施方案中，本发明的治疗组合物可用无针皮下注射装置给药，如在美国专利No.5，399，163;5,383，851;5,312，335;5,064,413;4，941，880;4,790,824;或4,596,556中公开的装置。可用于本发明的公知的植入物和模块的例子包括美国专利No.4，487，603,该专利公开了用于以受控速率分散药物的可植入式微量输注泵；美国专利No.4,486,194，该专利公开了用于通过皮肤给药的治疗装置；美国专利No.4,447,233,该专利公开了用于以精确的输注速率递送药物的医用输注泵；美国专利No.4，447，224,该专利公开了用于连续递送药物的变流可植入式输注装置；美国专利No.4，439，196，该专利公开了具有多腔室的渗透药物递送系统和美国专利No.4,475,196，该专利^>开了一种渗透药物递送系统。这些专利在此引入作为参考。本领域技术人员公知许多其他这样的植入物、递送系统和模块。在某些实施方案中，可以配制本发明的脱岩藻糖基化抗体以确係:在体内的正确分布。例如，血-脑屏障(BBB)阻止了许多高度亲水性的化合物。为了确保本发明的治疗性化合物能够跨过BBB(如果需要时)，可将它们配制在如脂质体中。至于制备脂质体的方法，参见，例如，美国专利4，522，811;5,374,548;和5，399,331。脂质体可以包含可被选择性地转运入特定细胞或器官内的一个或多个部分，从而增强定向药物递送(参见，例如，V.V.Ranade(1989)J.CUn.Pharmacol.29:6M)。定向部分的例子包括叶酸或生物素(参见，例如，Low等人的美国专利5,416,016);甘露糖苷(Umezawa等(1988)Biochem.Biophys.Res.Commun.153:1038);抗体(P.G.Bloeman等(1995)FEBSLett.357:140;M.0wais等(1995)Antimicrob.AgentsChemother.39:180);表面活性剂蛋白A受体(Briscoe等(1995)Am.J.Physiol.1233:134);p120(Schreier等(1994)J.Biol.Chem.269:9090);也参见K.Keinanen;M.L.Laukkanen(1994)FEBSLett.346:123;J.J.Killion;I.J.Fidler(1994)Immunomethods4:273。本发明的应用和方法本发明的脱岩藻糖基化抗体、抗体组合物和方法具有涉及诊断和治疗与PSMA表达有关的疾病的许多体外和体内诊断和治疗应用。例如，这些分子可以施用于(例如)在体外或离体培养的细胞，或者例如在体内施用于人类受试者，从而治疗、预防或诊断多种疾病。本文使用的术语"受试者"包括人和非人动物。非人动物包括所有脊推动物，例如哺乳动物和非哺乳动物，例如非人灵长类动物、绵羊、狗、猫、牛、马、猪、鸡、乌类、两栖类动物和爬行类动物。优选的受试者包括患有与PSMA表达有关的疾病的人类患者。这些方法特别适合治疗患有异常PSMA表达相关疾病的人类患者。当抗-PSMA抗体与另一种药物一起给药时，这两种药物可以相继或同时给药。在体内和体外施用本发明的抗体组合物(例如抗体或免疫偶联物)的适当途径在本领域中公知，可以由本领域技术人员选择。例如，抗体组合物可以通过(例如静脉内或皮下)注射给药。使用的分子的适宜剂量将取决于受试者的年龄和体重以及抗体组合物的浓度和/或配方。在一个实施方案中，可以在开始时检测本发明的抗体与体外治疗或诊断应用有关的结合活性。例如，可以利用ELISA和流式细胞测定法检测本发明的组合物。而且，可以测定这些分子引发至少一种效应细胞介导的效应细胞活性(包括抑制表达PSMA的细胞的生长和/或杀伤)的活性。测定效应细胞介导的ADCC的方案在下面的实施例中描述。A.才企测方法在一个实施方案中，本发明的脱岩藻糖基化抗体可以用来检测PSMA的水平，或在膜表面上含有PSMA的细胞的水平，然后可以将这些水平与特定疾病症状相关联。在一个具体实施方案中，本发明提供4企测样品中PSMA抗原的存在或测定细胞表面上PSMA抗原的量的方法，包括在允许在抗体或其部分与PSMA之间形成复合物的条件下，将样品和对照样品与特异性结合PSMA的脱岩藻糖基化抗体或其抗原结合部分相接触。然后检测复合物的形成，其中样品与对照样品相比复合物形成的不同指示样品中知的标准;险测方法，如ELISA和流式细胞测定。因此，在一个方面，本发明进一步提供检测样品中PSMA(例如人PSMA抗原)的存在或测定PSMA的量的方法，包括在允许在抗体或其部分与PSMA之间形成复合物的条件下，将样品和对照样品与特异性结合PSMA的本发明的抗体或其抗原结合部分相接触。然后4全测复合物的形成，其中样品与对照样品相比复合物形成的不同指示样品中存在PSMA。本发明的组合物也可以用来靶向表达PSMA的细胞，例如用于标记这些细胞。为此应用，可以将结合剂与可被检测到的分子连接。因此，本发明提供用于离体或在体内定位表达PSMA的细胞的方法。可检测标记物可以是，如放射性同位素、荧光化合物、酶或酶辅因子。B.PSMA+细胞的生长的抑制该抗体可以用来抑制表达PSMA的细胞的生长，这又可以与PSMA表达相关的某些疾病症状的预防或緩解相关联。与非疾病状态相比疾病状态期间PSMA表达的差异可以如下确定在允许在抗体与PSMA之间形成复合物的条件下，使来自该疾病患者的试样和对照样品与抗-PSMA抗体接触。检测在抗体与PSMA之间形成的任何复合物，并对样品和对照进行比较。例如，该抗体可以用来在体内或在体外引起一种或多种下列生物活性抑制表达PSMA的细胞的生长和/或杀伤；在人效应细胞存在下介导表达PSMA的细胞的吞噬作用或ADCC;抑制可溶性PSMA的脱落。如本文所述，与岩藻糖基化形式的抗体相比，本发明的脱岩藻糖基化抗体表现出增强的ADCC活性。因此，在另一方面，本发明提供一种抑制PSMA+细胞的生长的方法，包括在足以诱导所述细胞的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)的条件下，使所述细胞接触脱岩藻糖基化的抗-PSMA抗体。例如，该细胞可以是肿瘤细胞。在一个优选实施方案中，抗-PSMA抗体是人抗体。在一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合部分可以用来调节靶细胞上的PSMA水平，例如通过对细胞表面上的受体加帽(capping)以及将其清除。抗-Fc受体抗体的混合物也可以用于该目的。耙标特异性效应细胞，例如与本发明的组合物连接的效应细胞，也可以用作治疗剂。用于靶向的效应细胞可以是人白细胞，如巨喧细胞、嗜中性粒细胞或单核细胞。其他细胞包括嗜酸性细胞、自然杀伤细胞和其他带有IgG或IgA受体的细胞。需要时，效应细胞可以从所治疗的受试者中获得。靶标特异性效应细胞可以作为在生理学可接受的溶液中的细胞悬浮液施用。施用的细胞数可以是108-109个的数量级，但是根据治疗目的而不同。通常，该量足以获得在靶细胞处例如在表达PSMA的胂瘤细胞处的局部化，以及通过例如吞噬作用实现对细胞的杀伤。施用途径也可以不同。应用靶标特异性效应细胞的治疗可以与其他清除乾细胞的技术一起进行。例如，使用本发明的组合物和/或带有这些组合物的效应细胞的抗肿瘤治疗可以与化学治疗一起使用。另外，可以应用联合免疫治疗将两种不同的细胞毒性效应群体导向至肿瘤细胞排斥。C.免疫偶联物的应用和联合治疗在一个实施方案中，通过将化合物与抗体连接，本发明的免疫偶联物可以将目标化合物(例如治疗剂、标记物、细胞毒素、；改射性毒素、免疫抑制剂等)靶向至具有PSMA细胞表面受体的细胞。因此，本发明也提供用于离体或在体内定位表达PSMA的细胞的方法(例如应用可4企测标记物，如;故射性同位素、荧光化合物、酶或酶辅因子)。可替代地，免疫偶联物通过将细胞毒素或放射性毒素靶向至PSMA，也可以用来杀伤具有PSMA细胞表面受体的细胞，如表达PSMA的肺瘤细胞，由此消除肿瘤细胞。在另外一些实施方案中，可以另外用调节(例如增强或抑制)Fcy或Fq受体的表达或活性的药物治疗受试者，例如用细胞因子治疗受试者。在治疗过程中施用的优选细胞因子包括粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、干扰素-y(IFN-y)和胂瘤坏死因子(TNF)。在另一实施方案中，可以对用本发明的抗体组合物治疗的患者另外施用(在施用本发明的抗体之前、同时或之后)另一种治疗剂，如增强或加强人抗体的治疗效果的细胞毒剂或放射性毒剂。抗体可以与该治疗剂连接(作为免疫复合物)，或者可以与该治疗剂分开给药。对于后者(分开给药)，抗体可以在治疗剂之前、之后或同时给药，或者可以与其他已知治疗(如抗癌治疗，例如放射治疗)共同应用。这些治疗剂特别包括，抗肿瘤剂，如多柔比星(阿霉素)、顺铂硫酸博来霉素、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、羟基脲，它们本身仅在对患者具有毒性或亚毒性的水平时有效。顺铂以100mg/ml的剂量静脉内给药，每4周1次，阿霉素以60-75mg/ml的剂量静脉内给药，每21天1次。本发明的抗-PSMA抗体或其抗原结合片段与化疗剂的共同给药提供了两种抗癌剂，它们通过对人肿瘤细胞产生细胞毒性作用的不同机制起作用。这种共同给药能够解决由于发展耐药性或肺瘤细胞抗原性改变(这将使它们对抗体没有反应性)引起的问题。D.癌症的治疗已经证明PSMA在肿瘤细胞如前列腺癌肺瘤细胞上表达，也已证明在靠近癌细胞的血管内皮细胞如尿道上皮癌细胞、结肠癌细胞、直肠癌细胞、肺癌细胞、乳腺癌细胞和肝转移性腺癌细胞上表达(见美国专利No.6,136,311)。因此，本发明的抗体通过抑制表达PSMA的肺瘤细胞的生长或者通过抑制靠近肿瘤细胞的血管内皮细胞的生长，可以用来治疗癌症。因此，在另一实施方案中，本发明提供一种抑制受试者中肿瘤生长的方法，其中该肿瘤的细胞或靠近该肿瘤的血管内皮细胞是PSMA+,其中给受试者施用本发明的脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体，使肺瘤的生长受到抑制。对于人类受试者，抗体优选是人源化或人抗体。在一个优选实施方案中，肿瘤细胞是前列腺癌细胞。在其他实施方案中，肿瘤细胞来自于诸如结肠癌、肾癌、直肠癌、尿道上皮癌、乳腺癌、膀胱癌、肝癌、胰腺癌或黑素瘤等癌。本发明的治疗方法包括给受试者施用有效治疗或预防疾病的量的本发明的抗体组合物。抗体组合物可以单独施用或与诸如细胞毒剂或放射性毒剂等另一种治疗剂一起施用(与抗体偶联或与抗体一起施用)，该另一种治疗剂与抗体组合物联合或协同起作用，以治疗或预防与PSMA表达相关的疾病。药盒本发明的范围内还包括含有本发明的抗体和使用说明的药盒。该药盒可以进一步含有一种或多种另外的药物，如免疫刺激剂、细胞毒剂或放射性毒剂，或一种或多种本发明的其他抗体(例如，具有补充活性的人抗体，它与PSMA抗原上与第一人抗体不同的表位结合)。药盒一般包括标明该药盒内容物目标用途的标签。术语标签包括在药盒上提供或与药盒一起提供或以其他方式随药盒提供的任何书面或记录材料。本发明进一步通过下面的实施例进行阐述，不应将这些实施例理解为进一步的限制。全部附图和在本申请中引用的全部参考文献、专利和公开专利申请的内容均在此引用作为参考。实施例实施例1:抗-PSMA单克隆抗体在嵌合鸡鸡蛋中的表达在该实施例中描述了抗-PSMA人单克隆抗体7F12在嵌合鸡的鸡蛋中的表达。在嵌合鸡的鸡蛋中表达包括抗体在内的蛋白质的一般方法在PCT乂>开W02004/015123中描述，其内容引入本文作为参考。关于在嵌合鸡的鸡蛋中表达抗体的其他信息在2005年2月18日提交的题目为"TissueSpecificExpressionofAntibodiesinChickens"、序号为11/062,325的美国申请中描述，其内容引入本文作为参考。在下面的实施例中，构建了含有包括启动子的内源蛋白调节序列和外源免疫球蛋白轻链和重链基因的转基因，以在输卵管的管状腺细胞中产生组织特异性抗体表达。这样表达的抗体分子然后沉积在转基因鸡的蛋白中。在该实施方案中，由任何重排的免疫球蛋白基因编码的抗体在含有输卵管壶腹(magnum)区管状腺细胞的组织中特异性表达，并且能够从蛋白中分离。编码单克隆抗体的重排的免疫球蛋白基因优先在输卵管中表达，基本排除在其它组织中表达，尽管也可能在其他组织中的表达高于可检测的水平。用于卵白蛋白衍生的单克隆抗体构建体的优选的转基因构建体在图12中示出。这些转基因构建体被命名为Ov7.5和0v15,具有位于MAb编码区5，端序列处的分别为大约7.5kb和15kb的卵白蛋白启动子，和位于编码区3'侧的15kb的15kb的启动子序列。编码区包含轻链和重链的可变区、J-C内含子序列、K轻链恒定区、IRES序列和yl同种型重链恒定区。该构建体的3'末端包含GFP基因和选择性标记，在该例中为CX启动子驱动的嘌呤霉素抗性基因。位于单克隆抗体编码区3，和5，侧的卵白蛋白启动子序列的长度仅是例子，类似的构建体可以包括5'序列的25-100kb或更多，以及3，序列的不同长度。本领域技术人员应当理解，GFP标记的存在只是用于在生理标本中检测，可以除去而不背离转基因的应用。噤呤霉素抗性标记可以替换为具有选择已被转基因成功转化的胚胎干细胞的能力的任何标记。几种类型的类似选择性标记在本领域众所周知，基本可以与该实施方案的噤呤霉素抗性基因互换使用。用于表达人抗-PSMAmAb7F12的转基因^皮称为Ovl5raAb7F12，包括卯白蛋白启动子的15kb的5，调节序列。另外，信号肽直接与VL连接，以阻止它在mRNA加工过程中被除去。使用新产生的雌性cES细胞系(如PCT公开W02004/015123所述制备)，因此高级嵌合体能够产生鸡蛋。用Ovl5MAb7F12载体转染雌性cES细胞系，通过PCR筛选稳定转染的克隆。通过Southern印迹法进一步分析一个克隆(OVH)。显示只有一个拷贝的Ovl5MAb7F12转基因被整合到cES的基因组中，并且该转基因至少含有10kb的5，0v启动子序列。由该OVH克隆产生嵌合鸡用于转基因分析。用10只嵌合鸡进行早期雌激素诱导。收集来自包括输卵管壶腹部分、肌肉、脑、肝和肠在内的各种组织的供体cES衍生的区域(GFP-阳性)。使用L和H链特异性引物利用RT-PCR监测转基因的表达。在壶腹中检测到L和H链转录物，但是在4只被诱导的母鸡中有3只(0V15-34、0V15-76和0V15-8"的肌肉、脑和肝脏样品中未检测到。但是，在回肠、盲肠和结肠中也检测到低水平表达。对来自雌激素诱导的壶腹的切片进行免疫组化，证实单克隆抗体在GFP-阳性管状腺细胞中表达，但不在GFP-阳性上皮细胞中表达。综上所述，这些数据证明Ovl5MAb7F12载体引导转基因在输卵管管状腺细胞中的表达。在肠中检测到低水平的异位表达，提示15Kb的0V的5'调节序列可能不足以使转基因位置独立地、组织特异性地表达。由带有0vHAbF12的0VHcES细胞产生69个嵌合体，用于评价全人MAb在鸡蛋中的沉积。使30只嵌合母鸡性成熟并开始产蛋。ELISA分析表明，所有母鸡的鸡蛋在蛋白中含有MAb。鸡蛋中MAb的浓度和含量在嵌合母鸡之间不同，这可能是由于壶腹中嵌合程度的不同所致。8只嵌合母鸡产的蛋每只蛋含有1mg以上的MAb，30只嵌合体的最大水平为每只蛋3.4mgMAb。4只嵌合母鸡产的蛋的平均MAb水平为每只蛋1.2至1.6mg。6只嵌合母鸡产的蛋的平均MAb水平为每只蛋0.5至1.0mg。通过Western印迹法分析，4吏用识别H和L链的兔抗人IgG(H+L),进一步分析蛋白中MAb的存在。来自野生型非嵌合白来杭鸡的蛋白作为阴性对照。纯化的人IgGl，K(Sigma)作为参照标准。在来自5只嵌合母鸡(OV15-17、0V15-29、Ovl5-71、0V16-34和OV16-42)的蛋白样品中检测到全长L和H链。也见到完全装配的H2L2,尽管也存在少量的装配中间体。为了确定沉积在蛋白中的MAb浓度的差异，在3-4个月的期限内监测5只不同嵌合母鸡(OV16-34，0V16-42，OV17-29,0V17-52和0V17-83)的鸡蛋。在3只鸡中，MAb的量在前几周达到峰值，然后在接下来的几个月中下降大约两倍，并保持稳定。在两只母鸡中，表达水平随时间进程保持相对稳定。如果当鸡蛋通过输卵管壶腹部分时不是所有的管状腺都分泌和沉积卵白蛋白，则由于这些母鸡的管状腺的嵌合性质，当每只鸡蛋通过壶腹时在蛋白中沉积的MAb的量可能不同。来自26只嵌合母鸡和BarredPlymouthRock(BPR)母鸡(阴性对照)的血样通过ELISA分析其中人IgG的存在。18只母鸡在血液中具有可才佥测到的水平的MAb，在母鸡OV17-83中观察到39ng/ml的最高浓度。血液中MAb水平和蛋白中MAb浓度之间的相关系数(r)为0.67。但是，不同组织中嵌合程度可能显著不同这一事实使这种比较复杂化。例如，母鸡0V17-122在鸡蛋中具有极少的MAb(平均O.02mg/蛋)，但是在血液中具有第二高的MAb浓度(36ng/ml)。我们推测血液中MAb的存在可能不是从输卵管表达中泄露的结果，而是反映了异位表达(例如，通过RT-PCR在雌激素诱导的嵌合体的肠中检测到异位表达)。实施例2:抗体产物的纯化和蛋白质表征如下从蛋白中纯化MAb7F12。首先在室温下将蛋白以低剪切率混合30分钟，然后通过本领域公知的方法沉淀卵粘蛋白。将一倍体积的匀浆的蛋白悬液加至3倍体积的反渗水中，搅拌30分钟。使用0.5M磷酸将稀释的悬浮液调节至pH6.0,然后以12，100g离心20分钟。用通过方法除去了约3°/。的含有大多数卯粘蛋白的蛋白蛋白质。使用0.5M磷酸氢二钠将上清液调节至pH7.4,用结晶盐调节至150mM氯化钠的浓度。以120cm/h的线性流速在蛋白ASepharoseFF柱(AmershamBiosciences)上纯化人IgG。用5倍体积的加样緩冲液(PBS，pH7.4)洗下吸附的人IgG，然后用3mM磷酸洗脱。用含有230mMNaCl的60mM磷酸钠(pH7.5)将洗脱下来的人IgG级分调节至pH7.5,达到终浓度为40mM磷酸钠和150mMNaCl。然后将样品通过0.2拜注射器滤器(Pall)过滤。大多数纯化的材料是完全装配的MAb分子，纯度大于90%(通过ELISA和A280测定)。在几个测定中将鸡中产生的MAb"7F12与在常规CHO细胞培养中产生的MAb7F12如下进行比较1.抗体的SEC-HPLC分析4吏用4.6x300mmBioSepSECS3000柱(Phenomenex)在Waters2795HPLC上分析大约10pgIgG样品。在0.1M磷酸钠，0,15MNaCl，和0.1M石克酸钠，pH7,2中以0.4ml/min的流速进4亍层析20分钟。于A加监测分离。利用分子量标准(Bio-Rad)测定大致的分子量。SEC-HPLC分析显示均为多于90%IgG单体。2.蛋白质的NanoLCESIMS/MS序列分析将两种MAb制品(鸡蛋表达的和CHO细胞表达的)还原并烷基化，透析过夜，在37°C下在25raM碳酸氢铵(PH8)中用胰蛋白酶消化4小时。在与QSTARpulsar质谱仪(MDSSciex,Concord,Ontario,Canada)通过界面连才妄的NanoHPLC系统(Dionex，Sunnyvale,CA)上对两种胰蛋白酶消化物进行串联质i普分析，以阳离子模式操作，并且使用碰撞诱导的解离(CID)来获得串联镨。注射各1pi等份样品，并用75jim直径的PepmapC18柱以250nl/min的流速分离。移动相是溶剂A(95%水，5°/。乙腈，0.5%甲酸)和溶剂B(20%水，80%乙腈，0.5%甲酸)。该设备以信息依赖性的采集模式操作，使用7s的操作循环，记录全光谱2s,然后选择最强离子在下一个5s中记录CID语。用Mascot(MatrixScience,London,UK)分析光谱。通过上述方法对两种MAb制品的分析显示没有表达系统引起的序列差异。3.LC-MS分析通过将样品在6(TC下温育90分钟，用25mMDTT还原在4M盐酸胍中的IgG样品(50|_ig)。然后将样品在45mM;f舆乙酸中在室温下在暗处烷基化15分钟，用22mMDTT终止反应。在LC-MS样品用1L25mM碳酸氢铵透析之前，使用装备有MicromassZQ质谱仪的Waters2795HPLC将各50pi才羊品注射到PorosRl/102,1x100mm柱(A卯liedBiosystems)上，以阳离子模式分析。移动相为(A)0.1%甲酸和0.01。/。三氟乙酸(TFA)和(B)100%CH3CN和0.1%曱酸和0.01%TFA。用(B)在(A)中10-60%的线性梯度进行洗脱(0."ml/min)，进行超过100min。乙链的分析显示两种{^13制剂具有相同的质量(+/-3Da.)。4.cIEF分析IgG样品(各50ug,1.0mg/ml)用水透析，以在CE分析之前除去盐。使用50nm内径和30cm有效长度的eCAP中性毛细管(Beckman)，在正常极性的P/ACEMDQCE系统(Beckman)上进行毛细管电泳等电聚焦。通过20psi的压力注射注射样品60s。使用15kV分离45min。毛细管的温度为20°C。阳极电解液为20mM磷酸，阴极电解液为40mM氢氧化钠。漂洗溶液为10riiM磷酸，使用提供的阴极移动溶液(Beckman)。于A训监测分离。cIEF分析表明两者具有相似的等电点(pl),尽管CH0产生的MAb7F12的电荷异质性增加。5.通过差示扫描量热法测定热稳定性利用差示扫描量热法(DSC)获得在鸡和CH0表达系统中产生的7F12的热稳定性，并与它们相应的在Fc结构域中脱糖基化的形式进行比较。在与自动采样器组合的VP-毛细管DSC差示扫描微热量计平台(MicroCalLLC，Northampton,MA,USA)进行熔解温度(Tm)的量热学测量。样品细胞体积为0.144mL。关于抗体的糖基化和脱糖基化形式的变性数据如下获得将浓度为2.3pM的样品以rC/min的速度从30。C加热到95°C。蛋白质样品存在于pH7.4的磷酸盐緩冲盐水(PBS)中。在参照细胞中使用相同的緩冲液，通过比较获得摩尔热容。对观察到的热解曲线进行基线校正，使用Originv7.Q软件分析标准化的数据。CHO和鸡产生的抗体的解折叠谱非常不同，而Fc-脱糖基化抗体的解折叠谱几乎相同。DSC数据表明CHO和鸡产生的Mab的热稳定性不同，主要是由于在它们相应的CH2结构域中存在不同的糖基化模式。在几个熔解转变点中，第一个是非常重要的，因为它决定抗体在较低温度下的总体稳定性。鸡产生的抗体的L测定为63.8。C，而CHO表达的抗体的乙测定为62.7°C。由于鸡产生的抗体的L高于CHO表达的抗体的乙，可能鸡产生的抗体在室温下更稳定。实施例3:鸡表达的抗-PSMA抗体的寡糖分析在该实施例中，用多种不同技术分析鸡蛋表达的7F12抗体的糖基化模式。1.通过CE-LIF的寡糖表征通过样品与12.5ml/PNGaseF(Prozyme)在40。C下温育过夜，从IgG样品(100pg)中释放寡糖。在使用的条件下，从在CHO细胞和鸡中表达的HuMAbFl的Fc部分释放N-连接的聚糖。在乙醇沉淀除去MAb蛋白后，通过真空离心干燥含有聚糖的上清液，并重悬浮在15%乙酸中的19mMAPTS(Beckman)和在THF(Sigma)中的1M氰基硼氢化钠中。聚糖标记反应在40。C下继续过夜，然后用水25倍稀释样品。使用50pm内径、50cm有效长度的涂覆N-CHO的毛细管(Beckman)，在具有反极性的P/ACEMDQCE系统(Beckman)上，对APTS-标记的聚糖进行激光诱导荧光毛细管电泳。压力注射样品(8sec.),在20。C下使用碳水化合物分离胶緩沖液(Beckman)在25kV下分离20分钟。使用激光诱导的荧光^^测系统(Beckman)，利用3mW氩离子激光和488nm的激发波长和520nm的发射波长监测分离。发现在鸡中产生的7F12的寡糖谱与在CHO细胞中产生的7F12非常不同。2.通过MALDIQ-TOFMS的寡糖表征纯化的抗体(各1001.0fflg/ml)用4|ulPNGaseF处理，PNGaseF是一种内切糖苷酶，切割N-连4妾的^友水化合物(Prozyme)。将样品在37。C下温育过夜，然后用50mM碳酸氢铵(pH8)透析过夜。通过乙醇沉淀除去蛋白质。将释放的碳水化合物在来自GlygenCorp.(Columbia,MD)的microcarbon柱上脱盐，基本4安照供应商的方案，但是洗脱体积减至5pl。各1fil等份的聚糖样品与基质溶液(a-氰基-4-羟基肉桂酸或2，5-二羟苯甲酸(AppliedBiosystems)1:1(v:v)混合，点样至MALDI靶板上，使之风干。利用MALDI-Q-T0F串联分析对完整的糖偶联物进行分析。所有质谱都记录在配备有o-MALDIsource2的QSTARpulsari质谱仪(MDSSciex,Concord,Ontario,Canada)上，其提供碳水化合物类别的质量(组成)。在对两种MAb进行聚糖序列型分析后，研究每种聚糖中可能的糖苷键。高CID质谱记录在具有T0F/T0f光学系统的4700蛋白质组分析仪(A卯liedBiosystems，ForsterCity,CA)上。对于高CIDMSMS实验，将碰撞能设置为1kV。在碰撞单元内部，以2x10—6托的压力用氩碰撞选择的寡糖离子。通过MALDIT0F质语法分析的在鸡产生的7F12中11种主要聚糖的碳水化合物组成和可能的糖苷键总结在图13A和13B中。发现寡糖结构含有高甘露糖类型、复合类型和杂合类型的N-聚糖。没有结构含有岩藻糖残基。3.通过HPAE-DAD及HPLC的单糖分析使用2NTFA(用于评价中性糖)或6NHC1(用于评价氨基糖)将IgG样品(200)ug)在IO(TC下酸解4小时。样品通过在室温下真空离心干燥，用200pi水重建，之后通过HPAE-PAD(Dionex)分析。使用具有前置斗主AminoTrap禾口BorateTrap的CarboPacPA104x250mm斗主(Dionex)分离单糖。程序按照DionexTechnicalNote53进行。使用单糖标准(Dionex)测定单糖峰身份和相对丰度。鸡和CHO产生的7F12的单糖分析总结在下面的表l中。表1:鸡和CHO产生的MAb7F12的单糖分析<table>tableseeoriginaldocumentpage80</column></row><table>单糖分析揭示了碳水化合物组成的差异，并且显示在鸡产生的7F12中存在N-乙酰葡糖胺残基、甘露糖残基和极低含量的半乳糖残基。在鸡产生的7F12中没有检测到岩藻糖残基，与之相反，CHO表达的抗体制品含有岩藻糖残基。为筌定末端糖残基通过CE和质谱法对聚糖进行糖苷外切酶分析，证实在鸡管状腺细胞中产生的MAb7F12中不存在末端唾液酸和岩藻糖残基。总之，N-连接的寡糖谱的最显著的差异是，在鸡产生的抗体中存在高甘露糖类型的N-聚糖，不存在岩藻糖，存在极低含量的半乳糖残基。实施例4:鸡表达的抗-PSMA抗体的功能分析在该实施例中，才金测了鸡蛋表达的7F12抗-PSMA抗体的功能性质，包括结合亲和力、内化、体内血清半衰期和抗体依赖的细胞毒性(ADCC)活性。1.对PSMA的结合亲和力通过流式细胞术使用LNCaP细胞(ATCCCRL1740)上的PSMA作为抗原测定抗体结合。细胞在含有10%FBS、10tnM服PES、2niML-谷氨酰胺和1mM丙酮酸钠的RPMI1640培养基中生长。将在鸡管状腺细胞中产生的7F12的抗原结合性质与在CHO细胞中产生的7F12相比较。200,000细胞/孔与各种浓度的50jal等份抗体一式两份温育30分钟。洗涤细胞两次，然后以50(al/孔加入1:200稀释的山羊抗人IgGPE标记的抗体(JacksonImmunoResearch)，在4°C下30分钟。用含有1%BSA的PBS洗涤细胞两次，进行FACS分析。使用GraphPadPrism3.0(GraphPadSoftware)由结合曲线确定MAb与LNCaP细月包上PSMA结合的ECs。值。两种抗体制品对LNCaP细胞上表达的PSMA产生几乎相同的结合曲线，具有类似的ECs。值。数据证明尽管鸡产生的和CHO产生的抗体被不同地糖基化，但是它们相同地识别并结合抗原。2.抗体的内化7F12mAb与PSMA的结合导致抗体的内化。在一种可能的应用中，MAb与细胞毒素偶联，以把向或破坏表达PSMA的肺瘤细胞。与LNCaP细胞上PSMA结合的抗体的内化通过将细胞与MAb和Hum-Zap(AdvancedTargetingSystems)温育来测定。H咖Zap是与核糖体灭活蛋白肥皂草毒蛋白(saporin)偶联的山羊抗人IgG抗体。当7F12MAb/Hum-Zap复合体与细胞表面上的PSMA结合并一皮内化时细胞,皮杀伤，而单独的抗体或Hum-Zap对LNCaP细胞没有毒性。LNCaP细胞(10，000/孔)一式三份在含有300ngHum-Zap和300ng7F12MAb或对照MAb的l50pi培养基中在37。C下温育48小时。细胞增殖和存活用CelITiter-GloLuminescentCellViabilityAssay(Promega)观寸定。也如下进行内化试验，将抗体在细胞培养基中的稀释液与10,000个附着的LNCaP细胞/孔在4DC下温育2小时。轻轻除去抗体溶液，更换为150|al含有200ngH咖Zap的培养基。在37°C下温育48小时后测定细胞存活率。使用Prism3.0(GraphPadSoftware)根据图形测定抗体内化的ECs。值。鸡表达的和CHO表达的抗体制品都以相似的效率内化。当在一定抗体浓度范围内检测时，鸡产生的和CHO产生的7F12MAb的内化的EC5。值为0.49nM。3.体内半衰期在BALB/c小鼠中通过静脉注射放射性标记的抗体平行分析了鸡产生的7F12MAb和CHO产生的抗体的体内半衰期。4吏用Iodobead法(Pierce)用mI轻微碘化10MAb蛋白质(每个抗体少于1个I)。在实验前通过饮用水给6周大的雌性BALB/c小鼠(TaconicFarms,Germant冊n,NY)喂以0.1mg/ml碟化钾，持续一周。每种蛋白质4只小鼠向尾静脉内静脉注射约600,000cpm标记的MAb,在选定的时间使用全身y计数器(Wm.B.JohnsonNal晶体检测器，具有Ludlumscaler)测量全身放射性。通过残余放射性的指数回归分析来计算半衰期。鸡管状腺细胞产生的7F12MAb的清除半衰期Um)为102.4主0.9小时，而CHO细胞产生的7F12MAb的清除更慢，半衰期为20L5±18.3小时。4.ADCC活性利用改良的"CrADCC试验检测LNCaP-(M2B细胞。通过标准FicoU-paque分离从肝素化的全血中纯化人外周血单核细胞。将细胞重悬浮(lxl()6细胞/na)在含有10%FBS和10U/ml人IL-2的RPMI1640培养基中，并在37。C下温育过夜。次日，收集细胞，用培养基洗一次，并以2x107细胞/ml的浓度重悬浮。二百万个革巴LNCaP-C42b细胞与200pCi51Cr在1ml总体积中37。C温育1小时。将把细胞洗一次，重悬浮在lml培养基中，再于"。C温育30分钟。最后一次温育后，将靶细胞洗一次，使终浓度为lx105细胞/ml。对于最后的ADCC测定，100iai标记的LNCaP细胞与50n1效应细胞和50ju1抗体一起温育。选择l:IOO的最终靶效比。在所有研究中还进行人IgGl同种型对照并与CHO产生的抗-PSMA7F12抗体相比较。包括的其他对照有a)靶细胞和效应细胞而不含抗体，b)耙细胞而没有效应细胞，c)耙细胞和效应细胞，存在3%TritonX-100。在37。C温育4小时后，收集上清液，用y计数器(CobraIIauto-gamma，来自PackardInstruments)计数，读取窗口为240-400keV。将每分钟的计数作为抗体浓度的函数作图，并使用Prism软件(SanDiego，CA)利用非线性回归S形剂量应答(可变斜率)分析这些数据。裂解百分比用以下方程式来确定%裂解=(样品CPM-无抗体CPM)/(TritonXCPM-无抗体CPM)X100我们发现在所有研究中既监测EC5o值又监测y。裂解是重要的。例如，当比较两种抗体时，EC5。或。/o裂解或两者都可能改变。两个不同ADCC实验的结果显示在图14A(IL-2刺激的效应细胞)和图14B(新鲜人外周血效应细胞)中。图14A显示CHO产生的MAb诱导剂量依赖性的细胞裂解，当使用IL-2刺激的效应细胞时，在38%裂解处达到稳定，E"为O.11]uig/ml。相反，鸡蛋产生的MAb更强更有效。对于两种不同的抗体制剂，鸡蛋产生的MAb的最大y。裂解为60%。比CHO产生的MAb增强的能力也得到证明，因为该材料的ECs。为0.018jig/ml。即，鸡表达的抗体的ECs。比CH0表达的抗体低约6倍。最后，如预期的，同种型对照抗体不诱导细胞裂解。使用未刺激的效应细胞(新鲜PBMCs)的ADCC显示ECw值有较大差异，但是总细胞杀伤较低(图14B)。CD16(FcyRIII)是介导ADCC的重要受体。使用抗CD16单克隆抗体阻断靶细胞和效应细胞的内化显示了ADCC应答的特异性。抗CD16抗体对ADCC活性的阻断按照上述ADCC测定来进行，但具有如下改变。在存在或不存在5pg/ml抗-CD16抗体3G8或同种型对照抗体的条件下，细胞与1lag/ml(饱和剂量)或O.01fig/ml(亚最适剂量)的(鸡或CH0表达的)7F12抗-PSMA抗体一起温育。结果显示在图15中。对于CH0产生的和鸡产生的抗体，在不存在抗-CD16时，1^g/ml的抗-PSMA抗体分别诱导约15°/。和38°/。的裂解。在存在抗-CD16时该％裂解降至约4%，而同种型对照抗体没有影响。实施例5:脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体在FUT8阴性宿主细胞中的制备和表征在该实施例中，在缺乏岩藻糖基转移酶的细胞系中表达完全人类抗-PSMA单克隆抗体，因此该细胞系产生在其碳水化合物中缺乏岩藻糖的蛋白质。使用多种化学分析技术，包括毛细管电泳、氨基酸序列比较、通过质谱分析的质量差异、和通过毛细管等电聚焦的电荷差异，相对于岩藻糖基化抗-PSMA抗体(在含有岩藻糖基转移酶的不同细胞系中表达)检测脱岩藻糖基化抗体，来确定这两种抗体之间结构和特征的差异。使用抗PSMA完全人类单克隆抗体2A10。2A10重纟连的氨基酸和核苷酸序列在图5A中显示，2A10轻链的氨基酸和核苷酸序列在图5B中显示。将2A10重链和轻链可变区序列亚克隆到表达载体内。将包括其信号序列和最佳Kozak序列的2A10K可变区cDNA亚克隆为与人k恒定区在阅读框内。将包括其信号序列和最佳Kozak序列的2A10重链可变区cDNA亚克隆为与人Yl重链恒定区在阅读框内。轻链和重链表达均由SRa启动子引导。该表达载体在PCT申请PCT/US2004/028954中详细描述，其内容引入本文作为参考。通过DNA电穿孔将该表达载体转染到FUT8——宿主细胞系Ms7(M内。通过使用两个置换载体定向破坏CHO/DG44细胞中的FUT8基因，来产生Ms704FUT8—〃细胞系,这在Yamane等人的美国专利申请20040110704和Yamane-0hnuki等人.(2004)肠&c力加7"/oe/^^2:614-22中更全面地描述。Ms704细胞适合在添加了100juM次黄噤呤和16juM胸苷(Invitrogen#11067-030)和6mML-谷氨酰胺(Invitr。gen#25030-081)的生长培养基EX-CELL325PFCHO培养基(JRH#14335)中悬浮培养生长。将要用于电穿孔的载体DNA经乙醇沉淀，并重悬浮在水中。8次电穿孔中的每一次使用1.5ygDNA。通过在蔗糖緩沖溶液(SBS)中洗涤细胞并将细胞以1X107细胞/mlSBS溶液的浓度重悬浮，来准备Ms704细胞用于转染。400jul细胞与构建体謹A混合，使用250伏、275;微法拉第电容和25欧姆电阻的设置进行电穿孔(BTXMolecularDeliverySystems#630电细力包操作器)。从电穿孔杯中取出细胞，加入20ml生长培养基。将细胞以每孔200|i1细胞的密度加至96孔板上，大约为4X104细胞/孔。电穿孑L2天后，从每孔中除去l50ial培养基，更换为150yl选择培养基，即含400jug/mlG"8(Invitrogen#10131-035)的生长培养基。每3-7天，将每孔150yl选择培养基更换为新鲜的选择培养基。使用类似的程序用相同的2A10构建体对CHODG44宿主细胞(FUT8+/+)进行电穿孔，建立表达含有岩藻糖基化碳水化合物的重组2A10抗体的CHODG44转染子。将产量最高的Ms704和CHODG44克隆扩增，通过蛋白A亲和层析法从细胞培养上清液中纯化重组2A10抗体。由Ms704产生的N-连接的寡糖和CHODG44产生的抗PSMA单克隆抗体样品的比较分析通过毛细管电泳激光诱导的荧光法(cLIF)来进行(Chen和Evangelista(1998)f/ec"o;力ares/sU:1892)。通过加入肽N-聚糖酶(Prozyme)并温育过夜来释放;故纯化抗体的N-连接的寡糖。乙醇沉淀该蛋白质，将含有碳水化合物的上清液转移到新的试管中，使用Speedvac干燥。重悬浮该碳水化合物，在脱唾液酸化和岩藻糖残基损失最小化的温和还原性胺化条件下用8-氨基芘-1，3，6-三磺酸酯(APTS)进行衍生化。使用激光诱发的荧光4全测器(BeckmanCoulter)通过毛细管电泳来分析反应加合物(Ma和Nashabeh(1999)J加7.C力e瓜21:5185)。在从Ms704细胞系和从CHODG44细胞系获得的抗体之间观察到寡糖谱的差异，这与Ms704衍生的抗-PSMA抗体中不存在岩藻糖残基相一致。使用Dionex-HPLC阴离子交换及脉沖电流检测的单糖分析证实Ms7(M表达的抗体缺乏任何岩藻糖残基的表达。结果总结在下面的表2中。表2:来自FUT8-/-和FUT8+/+细胞的MAb2A10的单糖分析<table>tableseeoriginaldocumentpage86</column></row><table>除了毛细管电泳和单糖分析所显示的寡糖的差异以外，Ms7(M和CHODG44产生的抗-PSMA抗体蛋白质样品基本上相同。N末端蛋白质序列的分析显示N末端氨基酸序列相同。Ms704和CHODG"产生的抗-PSMA抗体的轻链的质谱分析分别获得23，552和23,548的质量，这在仪器的误差之内。还使用标准毛细管等电聚焦试剂盒试验(BeckmanCoulter)检测了这两种抗体，显示这两种抗体样品具有相同的等电点。这些研究表明，除了Ms704产生的抗体的脱岩藻糖基化以外，Ms7(M和CHODG44细胞产生的抗体样品的蛋白质成分基本上相同。碳水化合物分析表明，该抗体的脱岩藻糖基化形式比该抗体的岩藻糖基化形式具有更多的末端半乳糖残基。实施例6:在RJT8阴性宿主细胞中表达的脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体的ADCC活性的评价Ms7(M0产生的(脱岩藻糖基化)2A10抗体对LNCaP-C42B细胞的(乂人ViroMedLaboratories,Minnetonka，MN获4寻)的纟田月包毒'l"生利用改良的"CrADCC试验来4全测。通过标准Ficoll-paque分离法乂人肝素^f匕的全血中纯化人外周血单核细胞。将细胞重悬浮(lx106细胞/ml)在含有10%FBS和10U/ml人IL-2的RPMI1640培养基中，并在37。C下温育过夜。次日，收集细胞，用培养基洗一次，并以2x107细胞/ml的浓度重悬浮。二百万个耙LNCaP-C42b细胞与200juCi51Cr在1ml总体积中37。C温育1小时。将靶细胞洗一次，重悬浮在lml培养基中，再于37。C温育30分钟。最后一次温育后，将靶细胞洗一次，使终浓度为lx105细胞/ml。对于最后一次ADCC测定，100ju1标记的LNCaP细月包与50m1效应细胞和50m1抗体一起温育。选择1:100的最终靶效比。在所有研究中还包括人IgGl同种型对照，并与CHODG"产生的(岩藻糖基化)抗-PSMA2A10抗体进行比较。包括的其他对照有a)靶细胞和效应细胞而不含抗体，b)靶细胞而没有效应细胞，c)靶细月包和效应细胞，存在3%TritonX-IOO。在37。C温育4小时后，收集上清液，用y计数器(CobraIIauto-gamma,来自PackardInstruments)计数，读取窗口为240-400keV。将每分钟的计数作为抗体浓度的函数作图，并使用Prism软件(SanDiego，CA)利用非线性回归S形剂量应答(可变斜率)分析这些数据。裂解百分比用以下方程式来确定%裂解=(样品CPM-无抗体CPM)/(TritonXCPM-无抗体CPM)X100三个分开的ADCC实验的结果显示在图16A、16B(IL-2刺激的效应细胞)和16C(新鲜人外周血效应细胞)中。使用各种浓度的fuc-2A10和defuc-2A10确定对于LnCaP细胞系的细胞毒性曲线，并且确定E"和°/。裂解值。分别对应于图16A、16B、16C的三个实验的结果在下面的表3中显示。表3:脱岩藻糖基化抗-PSMAmAb2A10的细胞毒性能力<table>tableseeoriginaldocumentpage88</column></row><table>Ms704产生的(即脱岩藻糖基化的)2A10mAb与CHODG44产生的(即岩藻糖基化的)2A10bmAb相比增强的能力通过脱岩藻糖基化形式抗体的较低的EC50值和较高的％裂解得到证明。例如，脱岩藻糖基化形式的EC50值比岩藻糖基化形式大约低3倍至18倍。与IL-2刺激的效应细胞相比，对未刺激的效应细胞(新鲜PBMC)的ADCC活性显示EC50值有较大差异，但是总细胞杀伤较低(图16C)。CD16(FcYRIII)是介导ADCC的重要受体。使用抗CD16单克隆抗体阻断耙细胞和效应细胞的内化显示了ADCC应答的特异性。抗CD16抗体对ADCC活性的阻断按照上述ADCC测定来进行，但是具有如下改变。在存在或不存在5pg/ml抗-CD16抗体3G8或同种型对照抗体的条件下，细胞与1网/ml(饱和剂量)或0.01pg/ml(亚最适剂量)的(Ms704或CHODG44表达的)"10抗-PSMA抗体一起温育。结果显示在图17中。对于岩藻糖基化和脱岩藻糖基化抗体，在不存在抗-CD16时，1jag/ml的抗-PSMA抗体分别诱导约12%和37%的裂解。在存在抗-CD16时该％裂解降至小于5%，而同种型对照抗体基本没有影响。等同方案仅仅应用常少见实验，本领域:技术人员就将认识到或者能够确定本文描述的本发明特定实施方案的许多等同方案。这些等同方案包含在下面的权利要求书中。序列表概述<table>tableseeoriginaldocumentpage89</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage90</column></row><table>权利要求1.一种分离的抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)抗体，其缺乏岩藻糖残基。2.权利要求1的抗体，其中所述抗体与含有岩藻糖残基的抗体形式相比增强了表达细胞表面PSMA的细胞的抗体依赖性细胞毒性。3.权利要求2的抗体，其中缺乏岩藻糖残基的抗体对LNCaP前列腺癌细胞的ADCC活性的E"为0.05pg/ml或更低。4.权利要求2的抗体，其中缺乏岩藻糖残基的抗体对LNCaP前列腺癌细胞的ADCC活性的ECs。比含有岩藻糖残基的抗体形式对LNCaP前列腺癌细胞的ADCC活性的ECs。至少低3倍。5.权利要求1的抗体，它是单克隆抗体。6.权利要求5的抗体，它是人源化或嵌合抗体。7.权利要求6的抗体，其中所述人源化或嵌合抗体是由选自3F5.4G6、3D7.1.1、4E10-1.14、3E11、4D8、3E6、3C9、2C7、1G3、3C4、3C6、4D4、1G9、5C8B9、3G6、4C8B9、E99、J415、J533和J591的小鼠抗-PSMA抗体制备的。8.4又利要求5的抗体，它是人抗体。9.权利要求8的抗体，其中所述人抗体包括人重链可变区和人轻链可变区，其中(a)人重链可变区包含选自SEQIDNO:1-9的氨基酸序列；(b)人轻链可变区包含选自SEQIDNO:10-18的氨基酸序列。10.权利要求9的抗体，其中人重链可变区包含SEQIDNO:1的氨基酸序列，人轻链可变区包含SEQIDNO:IO的氨基酸序列。11.权利要求9的抗体，其中人重链可变区包含SEQIDNO:2的氨基酸序列，人轻链可变区包含SEQIDNO:ll的氨基酸序列。12.权利要求9的抗体，其中人重链可变区包含SEQIDNO:3的氨基酸序列，人轻链可变区包含SEQIDNO:12的氨基酸序列。13.权利要求9的抗体，其中人重链可变区包含SEQIDNO:4的氨基酸序列，人轻《连可变区包含SEQIDNO:13的氨基酸序列。14.权利要求9的抗体，其中人重链可变区包含SEQIDNO:5的氨基酸序列，人轻链可变区包含SEQIDNO:14的氨基酸序列。15.权利要求9的抗体，其中人重链可变区包含SEQIDNO:6的氨基酸序列，人轻链可变区包含SEQIDNO:15的氨基酸序列。16.权利要求9的抗体，其中人重链可变区包含SEQIDNO:7的氨基酸序列，人轻链可变区包含SEQIDNO:16的氨基酸序列。17.权利要求9的抗体，其中人重链可变区包含SEQIDNO:8的氨基酸序列，人轻链可变区包含SEQIDNO:17的氨基酸序列。18.权利要求9的抗体，其中人重链可变区包含SEQIDNO:9的氨基酸序列，人轻链可变区包含SEQIDNO:18的氨基酸序列。19.权利要求5的抗体，该抗体包括(a)包含选自SEQIDNO:19-27的氨基酸序列的人重链可变区CDR1;(b)包含选自SEQIDNO:28-36的氨基酸序列的人重链可变区CDR2;(c)包含选自SEQIDNO:37-45的氨基酸序列的人重链可变区CDR3;(d)包含选自SEQIDNO:46-54的氨基酸序列的人轻链可变区CDR1;(e)包含选自SEQIDNO:55-63的氨基酸序列的人轻链可变区CDR2;和(f)包含选自SEQIDNO:64-72的氨基酸序列的人轻链可变区CDR3。20.^又利要求19的抗体，该抗体包括(a)包含SEQIDNO(b)包含SEQIDNO(c)包含SEQIDNO19的人重链可变区CDR128的人重链可变区CDR237的人重链可变区CDR3(d)包含SEQIDNO:46的人轻链可变区CDRl(e)包含SEQIDNO:55的人轻链可变区CDR2(f)包含SEQIDNO:64的人轻链可变区CDR321.权利要求19的抗体，该4元体包4舌(a)包含SEQIDNO20的人重链可变区CDRl;(b)包含SEQIDNO29的人重《连可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO38的人重链可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO47的人轻链可变区CDRl;(e)包含SEQIDNO:56的人轻《连可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO.65的人轻链可变区CDR3。22.权利要求19的4元体，该4元体包4舌(a)包含SEQIDNO-21的人重《连可变区CDRl;(b)包含SEQIDNO30的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO:39的人重链可变区CDR3;(d)包含SEQID冊:48的人轻《连可变区CDRl;(e)包含SEQIDNO'57的人轻《连可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO66的人轻《连可变区CDR3。23,权利要求19的4元体，该抗体包才舌(a)包含SEQIDNO22的人重链可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO31的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO40的人重链可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO.49的人轻链可变区CDR1;(e)包含SEQIDNO.58的人轻链可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO:67的人轻链可变区CDR3。24.权利要求19的抗体，该抗体包j舌(a)包含SEQIDNO:23的人重链可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO:32的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO:41的人重链可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO:50的人轻链可变区CDR1;(e)包含SEQIDNO,59的人轻《连可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO68的人轻链可变区CDR3。25.权利要求19的抗体，该抗体包才舌(a)包含SEQIDNO24的人重《连可变区CDRl;(b)包含SEQIDNO33的人重《连可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO42的人重链可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO51的人轻《连可变区CDR1;(e)包含SEQIDNO60的人轻链可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO:69的人轻链可变区CDR3。26.权利要求19的才元体，该4元体包4舌(a)包含SEQIDNO.25的人重《连可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO:34的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO'43的人重《连可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO:52的人轻链可变区CDR1;(e)包含SEQIDNO-61的人轻链可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO70的人轻链可变区CDR3。27.权利要求19的抗体，该抗体包4舌(a)包含SEQIDNO26的人重链可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO35的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO44的人重《连可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO:53的人轻链可变区CDR1;(e)包含SEQIDNO:62的人轻链可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO:71的人轻链可变区CDR3。28.权利要求19的4元体，该4元体包4舌(a)包含SEQIDNO:27的人重链可变区CDR1;(b)包含SEQIDNO:36的人重链可变区CDR2;(c)包含SEQIDNO:45的人重链可变区CDR3;(d)包含SEQIDNO:54的人轻链可变区CDR1;(e〕包含SEQIDNO:63的人轻链可变区CDR2;(f)包含SEQIDNO:72的人轻链可变区CDR3。29.权利要求8的抗体，其包括产自或来源于人VH5-51或VH3-30.3基因的重链可变区。30.权利要求8的抗体，其包括产自或来源于人VkL6、04/014或L18基因的轻链可变区。31.权利要求8的抗体，其包括产自或来源于人VH5-51或VH3-30.3基因的重链可变区和产自或来源于人VkL6、04/014或L18基因的轻链可变区。32.—种宿主细^^，其包括编码抗-PSMA抗体的免疫3求蛋白重4连和轻链基因，其中所述宿主细胞缺乏岩藻糖基转移酶，使得所述宿主细胞表达的抗-PSMA抗体缺乏岩藻糖残基。33.权利要求32的宿主细胞，其中所述免疫球蛋白重链和轻链基因是人免疫球蛋白重链和轻链基因。34.权利要求32的宿主细胞，其中所述岩藻糖基转移酶是FUT8。35.权利要求32的宿主细胞，它是CH0细胞。36.—种抑制PSMA+细胞生长的方法，包括使所述细胞与脱岩藻糖基化的抗-PSMA抗体在足以诱导所述细胞的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)的条件下接触。37.权利要求36的方法，其中所述细胞是肿瘤细胞。38.权利要求36的方法，其中所述抗-PSMA抗体是人抗体。39.—种抑制受试者中肿瘤细胞生长的方法，其中该肿瘤细胞或靠近该胂瘤细胞的血管内皮细胞表达PSMA，该方法包括给受试者施用有效抑制受试者中肿瘤细胞生长的量的脱岩藻糖基化抗-PSMA抗体。40.权利要求39的方法，其中所述抗-PSMA抗体是人抗体。41.权利要求39的方法，其中所述肿瘤细刀包是前列尿泉癌肿瘤细胞。42.权利要求39的方法，其中所述肿瘤细胞是选自结肠癌、肾癌、直肠癌、尿道上皮癌、乳腺癌、膀胱癌、肝癌、胰腺癌或黑素瘤的癌的肿瘤细胞。全文摘要本发明涉及缺乏岩藻糖残基的抗-PSMA抗体。本发明的抗体与该抗体的岩藻糖化抗体形式相比表现出增强的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)活性。本发明还提供表达缺乏岩藻糖残基的抗-PSMA抗体的宿主细胞，其中该宿主细胞缺乏岩藻糖基转移酶。也提供了使用抗体抑制PSMA+细胞如肿瘤细胞生长的方法。文档编号C07K16/30GK101160324SQ200680005451公开日2008年4月9日申请日期2006年2月17日优先权日2005年2月18日发明者D·B·帕斯莫尔,J·M·卡达雷里,J·阿尔巴内斯,磊朱申请人:米德列斯公司