专利名称：一种综合提取纯化川芎中川芎嗪、阿魏酸和挥发油的方法
技术领域：
本发明属于综合提取分离纯化川芎中主要有效成分的方法技术领域，具体涉及一 种综合提取纯化〗11芎中主要有效成分——〗11芎嗪、阿魏酸和挥发油的方法。
技术背景川芎为常见的中药材，其性辛，温，归肝、胆、心包经，具有活血行气，祛风止 痛的功效，在临床上可以用于心血管疾病，肾脏疾病及妇女月经不调、经闭、痛经、 产后淤滞腹痛等疾病的治疗。川芎中的活性成分主要有以川芎嗪为代表的生物碱类， 以阿魏酸为代表的有机酸类以及挥发油。其中川芎嗪在临床上用于治疗脑血栓、偏头 痛及脑外伤综合症；阿魏酸已作为治疗偏头痛的药物用于临床；挥发油中的内酯成分 有明显的强心、增加冠脉流量的作用。四川省是川芎的主要栽培地，其中地道产区都江堰常年川芎种植面积700 1000hm2,出口量占全国出口量的60%，近两年彭州种植面积发展迅速，全市川芎产量 占全国总产量的90%。四川的川芎的产量虽然很大，但大多是以原料药的形式销往国 内外，没有对川芎进行精细加工，其获得的经济效益极其有限。而目前国内的这些川芎药材一般是作为饮片使用，且实际使用率和消耗率仅有 7%;另有少数国内一些制药厂家通过提取川芎中的挥发油，并开发制成软胶囊或硬胶 囊使用，但此举也仅利用了川芎中5%的资源，且在提取过程中其余大量的有用成分如 总碱、酚酸等都被丢弃，造成了药材资源的大量浪费。因而，对川芎开展精细加工研 究，满足物尽其用，减少药材资源的浪费，并形成川芎的中成药生产工程化、规模化， 提高经济效益，己成为该领域的迫切要求。据了解，有关川芎的精细加工研究，即其主要有效成分的提取研究已有一些报道。 如赵丽恋(赵丽恋，夏新华.川芎醇提工艺研究[J].中成药,2002,24(3):173 174)、欧英富(欧英富， 雍红.川芎有效成分提取方法选择[J],山东医药,2007，47(4):72 73)、黄国兴(黄国兴,季芳，杨文丹. 川芎中阿魏酸的提取工艺研究[J].中国现代应用药学杂志,2007,24(3):203 204)等人使用乙醇作 为溶媒单独提取川芎嗪或阿魏酸。虽然用乙醇作为提取剂所产生的水溶性杂质较少，但是醇提工艺会导致挥发油的损失，不利于挥发油的提取；又如张虹(张虹,柳正良，王洪 泉.超临界流体萃取法提取川芎中有效成分的研究[J].中草药，2001,32(12):1077 1079)、刘本(刘 本，John R Dean, Rachel Price.法多索溶剂和超临界流体提取川芎中的川芎嗪[J].中国医药工业杂 志，1999,30(5):196 199)、 t汤林(杨林,罗晓星,王四旺等.两种提取当归川芎挥发油的工艺比较研究 [J].中国中医急症,2006，15(10):114(M141)等人采用超临界流体萃取法单独提取川芎嗪或阿 魏酸或挥发油。虽然超临界流体萃取法具有操作温度低、保存有效成分不易破坏等优 点，但该法设备昂贵，成本高，不适宜工业化生产。而关于川芎单一有效成分纯化的研究报道，主要是采用过大孔树脂柱和溶剂萃取等方法进行分离。如洪燕龙(洪燕龙,徐德生，冯仪等.川芎中含阿魏酸有效组分的提取、纯化工 艺研究[J].中国中医急症，2006,15(10):114(M141)、刘旭(刘旭,杨雪梅，徐江平等.正交试验对川芎 提取工艺的筛选研究[J].广东药学,2003，13(6):3 5)等人使用大孔树脂纯化阿魏酸；如马双成 (马双成，邓少伟.川芎提取、纯化工艺条件的实验研究[J].中国中药杂志,1999,24(4):215 217)等 人使用大孔吸附树脂分离纯化得到川芎嗪和阿魏酸的川芎总提物。由于大孔树脂和大 孔吸附树脂是利用树脂的吸附和筛分作用原理进行分离纯化的，因而针对性不够强， 不能将生物碱类和酚酸类物质进行选择性的分离；又如陈立娜(陈立娜,金哲雄，蒋竟等.川 芎嗪提取工艺的研究[J].黑龙江医药,2000，13(5):278-280)等人采用了过大孔树脂柱、多种有机 溶剂萃取、碱性氧化铝层析等方法纯化川芎嗪，但此纯化工艺过程复杂，环节较多损 失严重，成本较高；再如赵飞(赵飞,胡燕月,陈益萍等.川芎中阿魏酸的提取分离[J].中国医院药 学杂志，2005，25(1):8 10)等人使用乙醚和碳酸钠依次萃取纯化得到阿魏酸，但乙醚安全性 差，不适于工业化生产。由于上述这些研究只涉及到单独获得某一种有效成分，因而资源利用率不高，于 是人们开始重视川芎有效成分的综合提取，但相关研究还较少。文献报道的有魏玉 平(魏玉平,刘俊,王永富,石兴明,陈大军，任天池.川芎中活性成分的提取工艺建立与综合评判[J].中 草药，2005， (36):53-54)等人探讨了川芎中三种活性成分(川芎嗪、阿魏酸和藁本内酯) 提取工艺与综合评判，该文是将川芎粗粉(未经过筛)以1:6的料液比，分别采用水 煎法、回馏法、渗漉法提取，用石油醚作为萃取剂，使用单一溶剂萃取进行分离纯化。 该文的研究目的是想在同一基准条件下，通过对不同提取方法所得结果进行比较，说 明在不同条件下各类有效成分的提取效果具有较大差异，因而以任何一个指标成分来 评价提取工艺的优劣都会失之偏颇，并建议使用多种有效成分的产率进行综合评判的结论。该文并没有根据各提取成分的性质选择最优化的提取条件以及纯化条件。罗华 菲(罗华菲.川芎综合利用的产业化研究中关于川芎综合提取p].成都中医药大学硕士毕业论文， 2003)则公开了分别采用渗漉法、直接蒸馏法和水煎煮法依次提取川芎总生物碱、挥发 油和总酚酸，并使用膜分离技术对提取物进行纯化，采用比色法进行检测的研究。但 由于该研究采用水煎煮法提取总酚酸，而水煎煮的温度就是水沸的温度，远高于阿魏 酸的分解温度(因为阿魏酸在温度超过8(TC时就会迅速分解)，因此会对总酚酸中治疗 头痛的主要有效成分阿魏酸造成严重破坏；而渗漉法的渗漉过程很慢，提取周期长； 膜分离提纯技术难度较大，成本较高，不利于较大规模的工业化；并且该研究先采用 直接蒸馏法提取挥发油再提取总酚酸，由于直接蒸馏法的温度也很高，因而也会对总 酚酸中的一些成分，特别是对治疗头痛的主要有效成分阿魏酸造成严重破坏。 发明内容本发明的目的是针对已有技术存在的问题，提供一种新的综合提取纯化川芎中川 芎嗪、阿魏酸和挥发油的方法，该方法一方面不会对川芎中所含的有效成分造成破坏， 提取率高，另一方面工艺简便，易于控制，提取周期短，所获产品纯度高，具有更好 的工业化优势。达到本发明目的而提供的一种综合提取纯化川芎中川芎嗪、阿魏酸和挥发油的方 法，该方法是先将川芎进行切片、粉碎预处理，然后将原料粉末用酸水溶液在25 40°C 下，搅拌回流提取川芎嗪，再将提取后的药渣加水在40 6(TC下搅拌回流提取阿魏酸， 最后将提取阿魏酸后的药渣用水蒸气回熘法在蒸馏速度3 5ml/min下，提取挥发油， 并将提取的川芎嗪提取液、阿魏酸提取液分别用强酸性阳离子交换树脂柱与有机溶剂 萃取相结合的方式和有机溶剂沉淀、萃取以及结晶相结合的方式进行提纯。为了能够将川芎中的川芎嗪、阿魏酸和挥发油尽可能多的提取出来又不致于因颗 粒太细影响固-液分离效率，原料川芎预处理应粉碎至10 50目过筛。上述方法中提取川芎嗪的具体工艺是以体积百分比浓度为0. 05 0. 5%的酸水溶液 为溶媒，按质量比计，川芎粉末溶媒=1 : 3 5的配比，搅拌回流提取2 3次，每 次1. 5 2. 5小时。所用的酸水溶液为盐酸溶液或醋酸溶液或硫酸溶液。上述方法中提取阿魏酸的具体工艺是将提取川芎嗪后的药渣按与水的质量比= l:4 6的条件下，搅拌回流提取2 3次，每次0.5 1.5小时。上述方法中提取挥发油的具体工艺是将提取阿魏酸后的药渣按与水的质量比= 1 : 4 6的条件下，提取8 12小时。所得的川芎嗪、阿魏酸分别按以下方法提纯-1) 川芎嗪提取液的提纯具体是先将川芎嗪提取液经经蒸发浓縮后、再减压过滤， 然后用pH调节剂调节滤液的pH值为1 3，再将该滤液加入装填有强酸性阳离子交换 树脂的离子交换树脂柱上，用体积百分比浓度60 80%洗脱液溶液洗脱，将洗脱液经 减压蒸发浓縮后，再用1 3倍体积的萃取剂萃取2 4次，合并2 4次的萃取层，减 压蒸发浓縮，真空干燥，即得纯度为79% 83%的川芎嗪；2) 阿魏酸提取液的提纯具体是先将阿魏酸提取液经减压蒸发浓缩后，用1 3倍 体积的无水乙醇，静置沉淀，滤去沉淀物，浓縮去醇，然后用pH调节剂调节滤液的 pH值为2 5，再用1 3倍的体积乙酸乙酯萃取2 4次，合并2 4次的萃取层，减 压蒸发浓縮，真空干燥，即得纯度为76% 81%的阿魏酸。J11芎嗪提取液和阿魏酸提取液的提纯过程所用的pH调节剂均为盐酸或醋酸；其中 川芎嗪提取液的提纯过程所用的强酸性阳离子交换树脂为001X7 (732)或001X12 强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，洗脱液为氨水乙醇溶液或氢氧化钠乙醇溶液，萃取 剂为氯仿或石油醚。本发明与已有技术相比，具有以下优点1、 由于本发明提供的综合提取工艺不仅可将川芎中的三种主要有效成分全部提取 出来，而且因其提取的顺序是先在较低温度下依次提取川芎嗪和阿魏酸，最后才在高 温下提取挥发油，因而可避免巳有技术采用直接蒸馏法在高温下提取挥发油后对阿魏 酸产生的破坏，以及用水煎煮法提取总酚酸时对阿魏酸造成严重破坏问题，以达到尽 可能多的提取出三种有效成分。2、 由于本发明在提取前还将原料川芎预处理粉碎过筛至10 50目，因而既能够 使川芎粉末充分地与溶媒接触，使其中的川芎嗪、阿魏酸和挥发油尽可能多的提取出 来，又不致于因颗粒太细影响固-液分离效率。3、 由于本发明选用的提取川芎嗪和阿魏酸的方式为用酸水和水作为溶剂并加热搅 拌回流浸提，因而比已有技术采用的水煎煮法条件较为温和，且通过溶剂的蒸发与回 流，使得每次与原料相接触的溶剂都是纯溶剂，从而大大提高了萃取动力，加之还有 搅拌促进传质，使提取物更易溶出。4、 由于本发明选用水蒸气直接蒸馏法提取挥发油，因而与已有技术采用超临界二 氧化碳萃取法相比，水蒸气直接蒸馏法所提取的物质含脂肪酸和脂肪酸酯很少，因此获得的内酯类物质相对含量较高。这样，不仅所获产品中藁本内酯的相对含量较超临 界二氧化碳萃取法高，且设备非常低廉，操作简单，易于工业化。5、 由于本发明选用强酸性阳离子交换树脂与有机溶剂萃取相结合纯化川芎嗪，因 而与单纯使用有机溶剂萃取相比，不仅避免了单纯溶剂萃取产生的乳化现象以及杂质 较多的情况，使产物纯度更高，而且强酸性阳离子交换树脂选择性吸附，使其针对性 更强，加之比硅胶和氧化铝等便宜很多，并可反复使用，使成本更低。6、 由于本发明在阿魏酸的纯化过程中，采用溶剂萃取技术取代柱层析和膜分离提 纯，因而技术难度小，成本较低，更利于较大规模的工业化，且选用乙酸乙酯作为萃 取剂，比乙醚安全性更高。7、 由于本发明采用的不管是提取还是纯化方式都是较为成熟，加之整个工艺过程条件温和，各工艺环节所用溶剂可回收使用，因而操作简单，易于控制，生产成本低， 不仅符合国家大力倡导的充分利用资源，减少环境污染的循环经济要求，而且有利于 实现工业化生产。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行具体描述，有必要在此指出的是以下实施例只用于 对本发明作进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人 员根据上述本发明内容对本发明做出一些非本质的改进和调整，仍属于本发明保护范 围。实施例1将市购川芎原药材切片后用粉碎机将其粉碎，并将所得川芎粗粉过20目筛，得川 芎粉末。称取川芎粉末100g，加入500ml的0.1^的盐酸溶液，在温度40。C下搅拌回流提 取2次，每次2.5小时，减压过滤，合并二次滤液，得川芎嗪提取液。将川芎嗪提取液 经蒸发浓縮后，再减压过滤，用lmol/L的醋酸调节滤液pH值为2.5;将滤液加到装填 有强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂001x7(732)的离子交换树脂柱上，用乙醇1Omol/L 氨水=7 : 3 (体积比)的溶液洗脱，收集洗脱液；将洗脱液经减压蒸发浓縮至50ml后， 再用2倍体积的氯仿萃取3次。合并三次氯仿萃取层，减压蒸发浓缩，真空干燥，即 得川芎嗪无色针状晶体。该晶体经过高效液相色谱测定，计算获得川芎嗪量以川芎原 药材计为0.81mg/g，纯度为83%。将提取川芎嗪后的药渣，加入600ml水，在温度5(TC下搅拌回流提取3次，每次0.5小时，减压过滤，合并3次提取液，得阿魏酸提取液。将阿魏酸提取液经减压蒸发 浓縮后，加入3倍体积的无水乙醇静置沉淀10h;滤去沉淀，浓縮去醇，用lmol/L的 盐酸调节滤液pH值为4，用3倍体积的乙酸乙酯萃取2次。合并2次萃取的乙酸乙酯 层，减压蒸发浓縮，真空干燥，即得淡黄色油状物的阿魏酸。该油状物的阿魏酸经过 高效液相色谱测定，计算获得阿魏酸量以川芎原药材计为0.44mg/g，纯度为80%。将提取阿魏酸后的药渣，加入500ml水，在蒸馏速度5ml/min条件下，按照药典 (中国药典2000版一部[S],2000,附录XD)给出的方法使用挥发油提取器、采用水蒸气蒸馏 法进行挥发油的提取，提取时间为9小时，获得挥发油量以川芎原药材计为 0.70ml/100g。实施例2将市购川芎原药材切片后用粉碎机将其粉碎，并将所得川芎粗粉过50目筛，得川芎粉末。称取川芎粉末100 g，加入450ml的0.4%的醋酸溶液，在温度25'C下搅拌回流提 取2次，每次2.0小时，减压过滤，合并二次滤液，得川芎嗪提取液。将川芎嗪提取液 经蒸发浓縮后，再减压过滤，用lmol/L的盐酸调节滤液pH值为1.5;将滤液加到装填 有强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂001x7(732)的离子交换树脂柱上，用乙醇1Omol/L 氢氧化钠=6.5 : 3. 5(体积比)溶液洗脱，收集洗脱液；将洗脱液经减压蒸发浓缩至50ml 后，再用l倍体积的氯仿萃取4次。合并四次氯仿萃取层，减压蒸发浓縮，真空干燥， 即得川芎嗪无色针状晶体。该晶体经过高效液相色谱测定，计算获得川芎嗪量以川芎 原药材计为0.79mg/g，纯度为80.5%。将提取川芎嗪后的药渣，加入500ml水，在温度55'C下搅拌回流提取2次，每次 1.0小时，减压过滤，合并2次提取液，得阿魏酸提取液。将阿魏酸提取液经减压蒸发 浓縮后，加入2倍体积的无水乙醇静置沉淀13h;滤去沉淀，浓縮去醇，用lmol/L的 醋酸调节滤液pH值为3.5，用l倍体积的乙酸乙酯萃取3次。合并3次萃取的乙酸乙 酯层，减压蒸发浓縮，真空干燥，即得淡黄色油状物的阿魏酸。该油状物的阿魏酸经 过高效液相色谱测定，计算获得阿魏酸量以川芎原药材计为0.43mg/g，纯度为76%。将提取阿魏酸后的药渣，加入600ml水，在蒸馏速度4ml/min条件下，按照药典 (中国药典2000版一部[S].2000，附录XD)给出的方法使用挥发油提取器、采用水蒸气蒸馏 法进行挥发油的提取，提取时间为10小时，获得挥发油量以川芎原药材计为 0.70ml/100g。实施例3将市购川芎原药材切片后用粉碎机将其粉碎，并将所得川芎粗粉过30目筛，得川 芎粉末。称取川芎粉末100 g，加入300ml的0.05%的醋酸溶液，在温度4(TC下搅拌回流提 取3次，每次1.5小时，减压过滤，合并三次滤液，得川芎嗪提取液。将川芎嗪提取液 经蒸发浓縮后，再减压过滤，用lmol/L的醋酸调节滤液pH值为3.0;将滤液加到装填 有强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂001x12的离子交换树脂柱上，用乙醇1Omol/L氨 水=8 : 2 (体积比)溶液洗脱，收集洗脱液；将洗脱液经减压蒸发浓縮至50ml后，再 用3倍体积的石油醚萃取2次。合并二次石油醚萃取层，减压蒸发浓縮，真空干燥， 即得川芎嗪无色针状晶体。该晶体经过高效液相色谱测定，计算获得川芎嗪量以川芎 原药材计为0.80mg/g，纯度为81%。将提取川芎嗪后的药渣，加入400ml水，在温度50'C下搅拌回流提取3次，每次 1.0小时，减压过滤，合并3次提取液，得阿魏酸提取液。将阿魏酸提取液经减压蒸发 浓縮后，加入2倍体积的无水乙醇静置沉淀llh;滤去沉淀，浓縮去醇，用lmol/L的 醋酸调节滤液pH值为5.0,用l倍体积的乙酸乙酯萃取4次。合并4次萃取的乙酸乙 酯层，减压蒸发浓縮，真空干燥，即得淡黄色油状物的阿魏酸。该油状物的阿魏酸经 过高效液相色谱测定，计算获得阿魏酸量以川芎原药材计为0.43mg/g，纯度为78%。将提取阿魏酸后的药渣，加入400ml水，在蒸馏速度3ml/min条件下，按照药典 (中国药典2000版一部问.2000,附录乂0)给出的方法使用挥发油提取器、采用水蒸气蒸馏 法进行挥发油的提取，提取时间为11小时，获得挥发油量以川芎原药材计为 0.68ml/100g。实施例4将市购川芎原药材切片后用粉碎机将其粉碎，并将所得川芎粗粉过IO目筛，得川 芎粉末。称取川芎粉末100g，加入500ml的0.5X的硫酸溶液，在温度25'C下搅拌回流提 取3次，每次1.5小时，减压过滤，合并三次滤液，得川芎嗪提取液。将川芎嗪提取液 经蒸发浓縮后，再减压过滤，用lmol/L的盐酸调节滤液pH值为1.0;将滤液加到装填 有强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂001x12的离子交换树脂柱上，用乙醇1Omol/L氨 水=6:4 (体积比)溶液洗脱，收集洗脱液；将洗脱液经减压蒸发浓縮至50ml后，再 用1倍体积的石油醚萃取4次。合并四次石油醚萃取层，减压蒸发浓縮，真空干燥，即得川芎嗪无色针状晶体。该晶体经过高效液相色谱测定，计算获得川芎嗪量以川芎 原药材计为0.80mg/g，纯度为79%。将提取川芎嗪后的药渣，加入600ml水，在温度45'C下搅拌回流提取2次，每次 1.5小时，减压过滤，合并2次提取液，得阿魏酸提取液。将阿魏酸提取液经减压蒸发 浓縮后，加入1倍体积的无水乙醇静置沉淀16h;滤去沉淀，浓縮去醇，用lmol/L的 醋酸调节滤液pH值为2.5，用2倍体积的乙酸乙酯萃取4次。合并4次萃取的乙酸乙 酯层，减压蒸发浓缩，真空干燥，即得淡黄色油状物的阿魏酸。该油状物的阿魏酸经 过高效液相色谱测定，计算获得阿魏酸量以川芎原药材计为0.45mg/g，纯度为79%。将提取阿魏酸后的药渣，加入600ml水，在蒸馏速度5ml/min条件下，按照药典 (中国药典2000版一部[S].2000，附录XD)给出的方法使用挥发油提取器、采用水蒸气蒸馏 法进行挥发油的提取，提取时间为8小时，获得挥发油量以川芎原药材计为 0.69ml/100g。实施例5将市购川芎原药材切片后用粉碎机将其粉碎，并将所得川芎粗粉过40目筛，得川 芎粉末。称取川芎粉末100g，加入350ml的0.2X的硫酸溶液，在温度35。C下搅拌回流提 取2次，每次2.5小时，减压过滤，合并二次滤液，得川芎嗪提取液。将川芎嗪提取液 经蒸发浓縮后，再减压过滤，用lmol/L的盐酸调节滤液pH值为2.0;将滤液加到装填 有强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂001x7(732)的离子交换树脂柱上，用乙醇1Omol/L 氢氧化钠=7:3 (体积比)溶液洗脱，收集洗脱液；将洗脱液经减压蒸发浓縮至50ml 后，再用2倍体积的石油醚萃取3次。合并三次石油醚萃取层，减压蒸发浓縮，真空 干燥，即得川芎嗪无色针状晶体。该晶体经过高效液相色谱测定，计算获得川芎嗪量 以川芎原药材计为0.78mg/g,纯度为81.5%。将提取川芎嗪后的药渣，加入400ml水，在温度4(TC下搅拌回流提取3次，每次 1.5小时，减压过滤，合并3次提取液，得阿魏酸提取液。将阿魏酸提取液经减压蒸发 浓縮后，加入1倍体积的无水乙醇静置沉淀15h;滤去沉淀，浓縮去醇，用lmd/L的 盐酸调节滤液pH值为3.0，用3倍体积的乙酸乙酯萃取2次。合并2次萃取的乙酸乙 酯层，减压蒸发浓縮，真空干燥，即得淡黄色油状物的阿魏酸。该油状物的阿魏酸经 过高效液相色谱测定，计算获得阿魏酸量以川芎原药材计为0.44mg/g，纯度为77%。将提取阿魏酸后的药渣，加入400ml水，在蒸馏速度4ml/min条件下，按照药典(中国药典2000版一部[S].2000，附录XD)给出的方法使用挥发油提取器、采用水蒸气蒸馏 法进行挥发油的提取，提取时间为9小时，获得挥发油量以川芎原药材计为 0.68ml/100g。 实施例6将市购川芎原药材切片后用粉碎机将其粉碎，并将所得川芎粗粉过20目筛，得川芎粉末。称取川芎粉末100g，加入400ml的0.3X的盐酸溶液，在温度30'C下搅拌回流提 取3次，每次2.0小时，减压过滤，合并3次滤液，得川芎嗪提取液。将川芎嗪提取液 经蒸发浓縮后，再减压过滤，用lmol/L的醋酸调节滤液pH值为1.5;将滤液加到装填 有强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂001x12的离子交换树脂柱上，用乙醇1Omol/L氢 氧化钠=7.5 : 2.5 (体积比)溶液洗脱，收集洗脱液；将洗脱液经减压蒸发浓縮至50ml 后，再用3倍体积的氯仿萃取2次。合并二次氯仿萃取层，减压蒸发浓縮，真空干燥， 即得川芎嗪无色针状晶体。该晶体经过高效液相色谱测定，计算获得川芎嗪量以川芎 原药材计为0.79mg/g，纯度为82%。将提取川芎嗪后的药渣，加入500ml水，在温度60'C下搅拌回流提取2次，每次 0.5小时，减压过滤，合并2次提取液，得阿魏酸提取液。将阿魏酸提取液经减压蒸发 浓缩后，加入3倍体积的无水乙醇静置沉淀12h;滤去沉淀，浓缩去醇，用lmol/L的 盐酸调节滤液pH值为2.0，用2倍体积的乙酸乙酯萃取3次。合并3次萃取的乙酸乙 酯层，减压蒸发浓縮，真空干燥，即得淡黄色油状物的阿魏酸。该油状物的阿魏酸经 过高效液相色谱测定，计算获得阿魏酸量以川芎原药材计为0.42mg/g，纯度为81%。将提取阿魏酸后的药渣，加入500ml水，在蒸馏速度3ml/min条件下，按照药典 (中国药典2000版一部[S].2000，附录XD)给出的方法使用挥发油提取器、采用水蒸气蒸馏 法进行挥发油的提取，提取时间为12小时，获得挥发油量以川芎原药材计为 0.69ml/100g。
权利要求
1、一种综合提取纯化川芎中川芎嗪、阿魏酸和挥发油的方法，该方法是先将川芎进行切片、粉碎预处理，然后将原料粉末用酸水溶液在25～40℃下，搅拌回流提取川芎嗪，再将提取后的药渣加水在40～60℃下搅拌回流提取阿魏酸，最后将提取阿魏酸后的药渣用水蒸气回馏法在蒸馏速度3～5ml/min下，提取挥发油，并将提取的川芎嗪提取液、阿魏酸提取液分别用强酸性阳离子交换树脂柱与有机溶剂萃取相结合的方式和有机溶剂沉淀、萃取以及结晶相结合的方式进行提纯。
2、 根据权利要求l所述的综合提取纯化川芎中川芎嗪、阿魏酸和挥发油的方法， 其特征在于该方法中原料川考预处理应粉碎至10 50目过筛。
3、 根据权利要求1或2所述的综合提取纯化川芎中川芎嗪、阿魏酸和挥发油的方 法，其特征在于该方法中提取川芎嗪是以体积百分比浓度为0. 05 0. 5%的酸水溶液为 溶媒，按质量比计，川芎粉末溶媒=1 :3 5的配比，搅拌回流提取2 3次，每次 1. 5 2. 5小时。
4、 根据权利要求3所述的综合提取纯化川芎中川芎嗪、阿魏酸和挥发油的方法， 其特征在于该方法中提取川芎嗪所用的酸水溶液为盐酸溶液或醋酸溶液或硫酸溶液。
5、 根据权利要求1或2所述的综合提取川芎中川芎嗪、阿魏酸和挥发油的方法， 其特征在于该方法中提取阿魏酸是将提取川芎嗪后的药渣按与水的质量比=1 : 4 6 的条件下，搅拌回流提取2 3次，每次0.5 1.5小时。
6、 根据权利要求4所述的综合提取纯化川芎中川芎嗪、阿魏酸和挥发油的方法， 其特征在于该方法中提取阿魏酸是将提取川芎嗪后的药渣按与水的质量比二l : 4 6 的条件下，搅拌回流提取2 3次，每次0.5 1.5小时。
7、 根据权利要求1或2所述的综合提取纯化川芎中川芎嗪、阿魏酸和挥发油的方 法，其特征在于该方法中提取挥发油是将提取阿魏酸后的药渣按与水的质量比= 1 : 4 6的条件下，提取8 12小时。
8、 根据权利要求6所述的综合提取纯化川芎中川芎嗪、阿魏酸和挥发油的方法， 其特征在于该方法中提取挥发油是将提取阿魏酸后的药渣按与水的质量比=1 : 4 6 的条件下，提取8 12小时。
9、 根据权利要求1或2所述的综合提取纯化川芎中川芎嗪、阿魏酸和挥发油的方 法，其特征在于-1) 川芎嗪提取液的提纯具体是先将川芎嗪提取液经蒸发浓縮后、再减压过滤，然 后用pH调节剂调节滤液的pH值为1 3，再将该滤液加入装填有强酸性阳离子交换树 脂的离子交换树脂柱上，用体积百分比浓度60 80%洗脱液溶液洗脱，将洗脱液经减 压蒸发浓縮后，再用1 3倍体积的萃取剂萃取2 4次，合并2 4次的萃取层，减压 蒸发浓縮，真空干燥，即得纯度为79% 83%的川芎嗪；2) 阿魏酸提取液的提纯具体是先将阿魏酸提取液经减压蒸发浓縮后，用1 3倍 体积的无水乙醇，静置沉淀，滤去沉淀物，浓缩去醇，然后用pH调节剂调节滤液的 pH值为2 5，再用1 3倍体积的乙酸乙酯萃取2 4次，合并2 4次的萃取层，减 压蒸发浓縮，真空干燥，即得纯度为76% 81%的阿魏酸。
10、根据权利要求9所述的综合提取纯化川芎中川芎嗪、阿魏酸和挥发油的方法， 其特征在于川芎嗪提取液和阿魏酸提取液的提纯过程所用的pH调节剂均为盐酸或醋 酸；其中川芎嗪提取液的提纯过程所用的强酸性阳离子交换树脂为001X7 (732)或 001X12强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，洗脱液为氨水乙醇溶液或氢氧化钠乙醇溶 液，萃取剂为氯仿或石油醚。
全文摘要
本发明公开的综合提取纯化川芎中川芎嗪、阿魏酸和挥发油的方法是先将川芎进行切片、粉碎预处理，然后将原料粉末用酸水溶液在25～40℃下，搅拌回流提取川芎嗪，再将提取后的药渣加水在40～60℃下搅拌回流提取阿魏酸，最后将提取阿魏酸后的药渣用水蒸气回馏法在蒸馏速度3～5ml/min下，提取挥发油，并将提取的川芎嗪提取液、阿魏酸提取液分别用强酸性阳离子交换树脂柱与有机溶剂萃取相结合的方式和有机溶剂沉淀、萃取以及结晶相结合的方式进行提纯。本发明提供的方法不仅可将川芎中的三种主要有效成分全部提取出来，而且提取量大、纯度高，工艺成熟，易于控制，生产成本低，有利于实现工业化生产。
文档编号C07D241/12GK101215265SQ20081004519
公开日2008年7月9日 申请日期2008年1月15日 优先权日2008年1月15日
发明者兰先秋, 航 宋, 李新莹 申请人:四川大学