专利名称：：垫状卷柏提取物、提取方法及用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一类新的垫状巻柏提取物，本发明还涉及其提取方法及用途。巻柏属植物约有700种植物，广泛分布于全世界，我国约产50余种，各地均有分布。2005年版《中国药典》收载了巻柏Selaginellatamariscina(Beauv.)Spring和垫状巻柏S.pulvinata(Hook.etGrev.)Maxim两个品种，除药典品种外，另约有20个品种的巻柏属植物在民间被作为药用。巻柏属植物的化学成分主要是双黄酮类化合物，其次是生物碱、苯丙素、甾类、多糖等。江南巻柏(S.moellendrfiihieron.)具有清热解毒，抗癌，止血之功效，用于治疗癌症，肺炎，急性扁桃炎，眼结膜炎和乳腺炎。现代药理研究表明巻柏属植物具有免疫调节及抗肿瘤、保护皮肤、抑菌抗炎、镇静镇痛等作用。垫状巻柏(Selaginell即ulvinataMaxim.)为巻柏科巻柏属植物，垫状巻柏具有活血通经之功效，用于经闭痛经，跌打损伤，炒碳后可化淤止血。兰州大学Li-PingZhang等2007年报导了从中华巻柏中分离出一个新型碳骨架结构的炔酚类化合物一selaginellin，最近，林瑞超等从巻柏中分离得到了selaginellinA和selaginellinB(如下结构式)。除上述化合物以外，目前国内外尚未见此类化合物的相关文献报道。&=CH20H，R2=H，Selaginellin&=R2=H，SelaginellinAR丄=CH3，R2=H，SelaginellinB
发明内容本发明对垫状巻柏进行了深入的研究，提供了垫状巻柏提取物、提取方法及其用途。本发明提供了两种新的垫状巻柏提取物，具有如下结构式
背景技术：
：<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中，R为醛基或甲基。R为醛基是垫状巻柏醛(pulvinatahyde)，R为甲基是垫状巻柏二酚(pulvinat即hendiol)。本发明还提供了上述两种提取物的提取方法，步骤包括1)取垫状巻柏全草，用75%乙醇回流提取两次，回收溶剂，得浑浊浓縮液，静置72h，过滤；2)将步骤1)得到的滤液依次以石油醚、乙酸乙酯萃取，萃取后残留滤液进行聚酰胺柱层析，分别用30%、60%、95%乙醇_水梯度洗脱；3)取步骤2)60%醇洗部分进行聚酰胺柱层析，乙醇-水梯度洗脱，再经制备液相色谱洗脱，70%甲醇为流动相，分别得到上述化合物。上述的垫状巻柏提取物，可用于抗阿尔茨海默病药物的制备。本发明运用多种柱色谱分离技术和制备高效液相色谱分离方法，分离提取得到两种新的化合物垫状巻柏醛及垫状巻柏二酚，并对其结构进行了严格的表征，所得到的新化合物能显著上调KlothomRNA表达和抑制AP卜42诱导的大鼠海马神经元细胞衰老，可用于制备抗阿尔茨海默病的药物。具体实施方式实施例取垫状巻柏全草18.0kg，75X乙醇回流提取两次，回收溶剂，得浑浊浓縮液。静置72h，过滤，滤液依次以石油醚、乙酸乙酯萃取，萃取后残留滤液进行聚酰胺柱层析，乙醇-水梯度洗脱(30%、60%、95%)，取60%醇洗部分再进行聚酰胺柱层析，乙醇_水梯度洗脱，250ml/Fr.，Frl98_206再经Pr印-HPLC分离，70%MeOH为流动相，分别得到垫状巻柏醛(15mg)和垫状巻柏二酚(15mg)。垫状巻柏醛桔红色粉末(H20，冻干)，可溶于MeOH，不溶于H20。硅胶TLC，以CHC13:CH30H(10:O.9)展开，Rf=O.30。紫外灯下可见明显暗斑；NH3熏显紫红色，H2S04-MeOH即显桃红色，FeCl3试液显红色，理化试验提示该化合物为酚类化合物。UVAmaxMe0Hnm:360.40，302.8，272.2;。IRvmaxrar(cm—1):3429(OH)，2924，2842(CH3)，1616，1508，1483(Ar_H)。垫状巻柏醛波谱数据(DMSO，400MHz)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>垫状巻柏二酚桔红色粉末(H20，冻干)可溶于MeOH，不溶于H20。硅胶TLC，以CHC13:CH30H(10:0.9)展开，Rf=0.32。紫外灯下可见明显暗斑；NH3熏显紫红色，H2S04-MeOH即显桃红色，FeCl3试液显红色，理化试验提示该化合物为酚类化合物。UVAmaxMe0Hnm:435.20，254.5，245.8。IRvmaxrar(cm-1):3429(OH)，2924，2842(CH3)，1616，1508，1483(芳氢)。垫状巻柏二酚波谱数据(DMSO，400MHz)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>权利要求垫状卷柏提取物，具有如下结构式其中，R为醛基或甲基。F2008101430567C0000011.tif2.权利要求1所述垫状巻柏提取物的提取方法，步骤包括1)取垫状巻柏全草，用75%乙醇回流提取两次，回收溶剂，得浑浊浓縮液，静置72h，过2)将步骤1)得到的滤液依次以石油醚、乙酸乙酯萃取，萃取后残留滤液进行聚酰胺柱层析，分别用30%、60%、95%乙醇-水梯度洗脱；3)取步骤2)60%醇洗部分进行聚酰胺柱层析，乙醇-水梯度洗脱，再经制备液相色谱洗脱，70%甲醇为流动相，分别得到上述垫状巻柏提取物。3.根据权利要求1所述的垫状巻柏提取物，其特征在于，可用于抗阿尔茨海默病药物的制备。全文摘要本发明对垫状卷柏进行了深入的研究，运用多种柱色谱分离技术和制备高效液相色谱分离方法，分离提取得到两种新的化合物垫状卷柏醛及垫状卷柏二酚，并对其结构进行了严格的表征，所得到的新化合物可用于抗阿尔茨海默病药物的制备。文档编号C07C47/57GK101712604SQ20081014305公开日2010年5月26日申请日期2008年10月8日优先权日2008年10月8日发明者刘苏友,周应军,姜德建,徐康平,李元建,李福双,谭桂山申请人:中南大学