具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物及其制备方法

专利名称：：具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物及其制备方法，属于药物化学
技术领域：
。目前，化学治疗仍然是肿瘤治疗的最重要手段，然而化疗中出现的多药耐药现象日益成为棘手的问题，成为化疗失败的最重要原因，也已经成为肿瘤治疗不得不面对的一大难题。对于逆转多药耐药的研究已经进行了许多年，研究表明大部分多药耐药的肿瘤细胞均伴随P-糖蛋白的过度表达，P-糖蛋白依靠其特殊的结构能够主动将化疗药物从胞内运送到细胞外，使胞内药物浓度不断降低致使肿瘤细胞不能被有效杀死从而导致多药耐药产生。因此设计P-糖蛋白抑制剂被认为是一条有效克服多药耐药现象的途径。在目前文献报道的具有逆转多药耐药活性的化合物多数由于活性不高，毒性太强或者影响化疗药的动力学过程而无法走向临床使用，迄今为止依然没有能够运用于临床的多药耐药逆转剂上市，寻找安全有效的多药耐药逆转剂及其先导化合物依然是抗肿瘤药物研发的重要课题。本发明的目的在于提供一类具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物，该类化合物具有逆转肿瘤细胞多药耐药的药理活性，有望用于肿瘤化学治疗中的增敏剂。本发明的另一目的在于提供该类具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物的制备方法。本发明的技术方案为具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物，其特征是它有如通式(I)的结构、式中Rt和R2相同或不同，各自独立地选自氢、CM直链或支链烷基、卤素、氰基、含1~4个碳原子的垸氧基、含14个碳原子的卤代烷基；R3选自羟基或甲氧基或乙氧基或羧基成甲酯或乙酯取代的天然L-氨基酸残基、任意取代的其他伯胺基、任意取代的仲胺基；其中所述的天然L-氨基酸残基选自L-丝氨酸、L-精氨酸、L-苏氨酸、L-甘氨酸、L-天冬氨酸、L-丙氨酸、L-谷氨酰胺、L-缬氨酸、L-酪氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-半胱氨酸、L-天冬酰胺、L-苯丙氨酸、L-谷氨酸、L-甲硫氨酸、L-组氨酸
背景技术：
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发明内容L-脯氨酸、L-羟脯氨酸、L-赖氨酸、L-色氨酸；所述的任意取代的其他伯胺基选自取代的苯胺类、CM垸基氨基、环戊烷基氨基、环己烷氨基、Y-氨基丁酸甲酯、6-氨基己酸甲酯；所述的任意取代的仲胺基选自N-双取代CM垸基氨基、吗啉基、哌嗪基、取代哌嗪基。所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物，包括下列化合物2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2/)-基)-乙酸；2-(6,7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2//)-基)-乙酸；2-(6,7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉小(2历-基)-乙酸乙酯；2-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酰胺基)-乙酸乙酯；2<2-(6，7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉小(2印-基)-乙酰胺基)-乙酸乙酯；2-(2-(6,7-二甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2用-基)-乙酰胺基)-乙酸乙酯；(2&4i)-4-羟基-l-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2/f)-基)-乙酰胺基)-吡咯基-2-羧酸甲酯；(5>2-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2W)-基)-乙酰胺基)-3-苯丙氨酸甲酯；(5>2-(2-(6,7-二氯-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2历-基)-乙酰胺基)-3-苯丙氨酸甲酯；(5)-2-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酰胺基)-1，5-戊二酸二甲酯；(5>2-(2-(6，7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2^)-基)-乙酰胺基)-1,5-戊二酸二争酯；(5>2-(2-(6，7-二甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2司-基)二乙酰胺基)-1,5-戊二酸二甲酯；(S)-2-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(27/)-基)-乙酰胺基)4-(甲硫基)-丁酸甲酯(S)-2-(2-(6，7-二甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2H)-基)-乙酰胺基)-4-(甲硫基)-丁酸甲酯；(5>2-(2-(6,7-二氯-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酰胺基)-4-(甲硫基)-丁酸甲酯；(5>3-羟基-2-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2//)-基)-乙酰胺基)-丙酸甲酯；W-环己基-2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2//)-基)-乙酰胺基)-乙酰胺#-环己基-2-(6，7-二甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2^)-基)-乙酰胺基)-乙酰胺；W-环己基-2"(6，7-二氯-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2用-基)-乙酰胺基)-乙酰胺；6-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2)-基)~乙酰胺基)-己基甲酯；6-(2-(6，7-二甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酰胺基)-己基甲酯；6-(2-(6，7-二氯-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2/0-基)-乙酰胺基)-己基甲酯；4-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酰胺基)-丁基甲酯；(￡)-3-甲基-卜(2-氧-2-(4-(3-苯丙基-1-烯基)-哌嗪-1-基)-乙基)-喹喔啉-2-(2^-酮。具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物的制备方法，其特征是它主要通过以下步骤实现a)用4、5-位被R卜R2二取代的邻苯二胺与丙酮酸甲酯在一定溶剂中加热回流反应制备喹喔啉酮母核化合物(II);b)化合物(n)与溴代或氯代乙酸乙酯在弱碱催化剂作用下于乙醇或丙酮溶剂中加热回流反应，然后水解得到化合物(in);c)化合物(m)在缩合剂的作用下，于反应溶剂中与氨基取代化合物縮合得到化合物(i)。所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物的制备方法，其中步骤a)中所述的溶剂为乙醇或四氢呋喃或二氯甲烷或1,4-二氧六环；所述的溶剂的用量为每毫摩尔的4、5-位被R,、R2二取代的邻苯二胺用45ml溶剂；所述的4、5-位被R!、112二取代的邻苯二胺与丙酮酸甲酯用量的摩尔比为1:U~1.2。所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物的制备方法，其中步骤b)中所述的弱碱催化剂为弱无机碱，优选碳酸钠或碳酸钾；所述的化合物(II)与溴代的或氯代的乙酸乙酯与弱碱催化剂用量的摩尔比为1:1.2:1.2;所述的乙醇或丙酮溶剂的用量为每毫摩尔的化合物(II)用810ml溶剂；所述的水解是在浓度为0.4mol/L2mol/L氢氧化钾的醇溶液中搅拌4小时，然后加水并用盐酸酸化至pH=l~3完成。所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物的制备方法，歩骤c)中，所述的氨基取代化合物为L-氨基酸类衍生物，縮合剂优选l-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDOHC1)加l-羟基苯并三唑(HOBt)，反应溶剂优选无水二氯甲垸或WiV-二甲基甲酰胺，化合物(III)与氨基取代化合物与縮合剂EDOHC1与缩合剂HOBt用量的摩尔比为1:1:U-1.2:1.1~1.2，反应溶剂的用量为每毫摩尔的化合物(111)用2.5~51111溶剂，反应温度为10°C以下。所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物的制备方法，步骤c)中，所述的氨基取代化合物为L-氨基酸类衍生物以外的其他伯胺或者仲胺类，縮合剂优选WAT-羰基二咪唑，反应溶剂优选无水二氯甲烷或四氢呋喃或ww-二甲基甲酰胺，化合物(in)与氨基取代化合物与縮合剂用量的摩尔比为1:1:2，反应溶剂的用量为每毫摩尔的化合物(III)用510ml溶剂，反应温度为0~30°C。本发明所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物，目标化合物的制备路线如表1所示0.07本发明的有益效果是用本发明所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物在细胞水平上做了逆转多药耐药细胞株K562/A02的体外药理活性筛选。实验结果表明所述化合物能够大大增强阿霉素对P-糖蛋白高表达的K562/A02多药耐药细胞株的细胞毒效力(部分化合物的药理测试结果如表2)，为有效的多药耐药逆转剂，有望开发成为新型的化疗药物增敏剂。逆转多药耐药细胞株K562/A02的体外药理活性筛选，具体原理和程序简介如下以四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)评价化合物对细胞增殖能力的抑制作用，若待测化合物能够逆转多药耐药细胞K562/A02,则阿霉素(Adriamycin)对其杀伤作用会大大增强。将一定浓度(通常使用其IC^)的待测化合物分别和一系列浓度的阿霉素联合用药，分别作用于K562/A02细胞24、48、72、96、120小时，使用MTT实验方法计算活着的细胞数目，计算ICso值；单独使用阿霉素的IC5o值也以同样方法计算，二者相比较得到逆转倍数(ReversalFactor,RF)值。显然，RF值越高则代表待测化合物的逆转耐药能力越强，RF等于1表示无逆转多药耐药活性。平行实验重复三次，维拉帕米(Verapamil,Ver,4昭/ml)做阳性对照。同时对K562/A02对应的非耐药细胞株K562也做了同样的药理测试，其RF-1，证明该类化合物不能增强阿霉素对非耐药细胞株的杀伤力，也可说明该类化合物的确是通过逆转MDR而非细胞毒作用增强了耐药细胞对阿霉素的敏感性。表2TreatmentK562/A02K562IC5"ng/ml)RFICso(ng/ml)RFAdriamycin5.78±0.660.15±0,06Adriamycin+11.15±0.125.010.13±0.061.15Adriamyciii+23.48±0.521.660.16±0.080.94Adriamycin+34.28±0.521.350.18±0.120.84Adriaraycin+41.75±0.193.300.16±0.040.94Adriamycin+ll2.74±0.222.110.17±0.120.89Adriamycin+123.25±0.411.780.15±0.101.00Adriamycin+132.08±0.332.770.16±0.070.94Adriamycin+145.25±0.661.100.13±0.031.15Adriamycin+153.48±0.521.660.16±0.080.94Adriamycin+164.01±0.371.440.15±0.041.00Adriamycin+171.32±0.214.370.14±0.041.07Adriamycin+182.07±0.192.780.16±0.040.94Adriamycin+194.31±0.341.340.11±0.041.36Adriamycin+202.01±0.292.890.14±0,051.07Adriamycin+212.79±0.312.070.16±0.080.94Adriamycin+222.48±0.362.330.12±0.081.25Adriamycin+232.88±0.332.010.18±0.110.84Adriamycin+242.46±0.212.350.18±0.110.84Adriamycin+254.28±0.521.350.18±0.120.84Adriamycin+265.30±0.781.090.14±0.021.07Adriamycin+271.98±0.272.920.16±0.050.94Adriamycin+Ver2.33±0.322.480.14±0.041.0具体实施例方式本发明使用表3列出来的化合物进一步来说明，但是并不限定本发明。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>以下结合实施例来进一步说明本发明。实施例l(5)-2-(2-(6，7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2^)-基)-乙酰胺基)-1，5-戊二酸二甲酯(表3中化合物NO.l)的制备3,4-二氟苯胺32.1g(0.25mol)用1,4-二氧六环180ml溶解，冰浴下搅拌10min后，滴加醋酸酐30.46g(0.30mo1)，冰浴下搅拌lh，后转移到室温，TLC检测反应完毕后，旋干溶剂，再加入100ml水，过滤，滤饼用水洗涤4次得白色固体3，4-二氟乙酰苯胺，产率97.5%，m.p.=96~98°C;取3,4-二氟乙酰苯胺5g(0.03moI)用40ml浓H2S04溶解，冰浴下搅拌20min后，把研磨好的KNO33.54g(0.035mo1)分批加入，TLC检测反应完毕后，反应液倒入碎冰中析出黄色固体，过滤，用乙醇重结晶得2-硝基-4,5-二氟乙酰苯胺，产率82%,m.p.=104~105。C;取2-硝基-4,5-二氟乙酰苯胺2g溶于浓度为70%(质量分数)的H2S04中，加热回流3hr，反应液倒入碎冰中，过滤，滤饼用乙醇重结晶，得黄色固体4,5-二氟-2-硝基苯胺，产率70%，m.p.=109-lll°C;取SnCl2'2H2O7.77g(0.034mol)溶解在20ml浓盐酸中(常温搅拌大约lh)，把4，5-二氟-2-硝基苯胺2g(0.011mol)分批加入，常温下反应，TLC检测反应完毕后，冰浴条件下调pH值大约到13左右，用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯旋干得固体，用乙酸乙酯重结晶得4，5-二氟邻苯二胺，产率75%，m.p.=130-133°C;4,5-二氟邻苯二胺lg(0.007mol)和丙酮酸甲酯0.85g(0.008mol)溶解在30ml乙醇中，加热回流3hr，旋干溶剂，加20ml水和60ml乙酸乙酯萃取三次，旋干，乙酸乙酯重结晶得到6,7-二氟-3-甲基喹喔啉-2-(1//)-酮，产率62%，m.p.=286~287°C;称取6，7-二氟-3-甲基喹喔啉-2-(1//)-酮lg(0.005mo1)，氯代乙酸乙酯0.75g(0.006mol)和K2CO30.84g(0.006mol)放入100ml单口瓶中，加入丙酮50ml，加热回流，TLC检测反应完毕，旋干溶剂得固体，加入30ml水和50ml乙酸乙酯萃取三次，乙酸乙酯旋干得固体，用乙醇重结晶得2-(6，7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2/0-基)-乙酸乙酯，产率69%,m.p.=l68~169°C;称2-(6,7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2/f)-基)-乙酸乙酯0.5g(0.002mo1)用乙醇溶解，加入0.4mol/L的KOH溶液9ml，40。C反应4hr，旋干溶剂，加入10ml水，用盐酸调pH-3，过滤，滤饼用水洗涤得2-(6,7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酸，产率81.2%,m.p.=228~230。C;取2-(6,7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2i/)-基)-乙酸2g(0.008mo1)溶解于20ml无水DMF中，0°C下搅拌半小时后加入EDC11.8g(0.009mo1),HOBt1.21g(0.009mo1)继续保持0°C反应2小时后加入L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐1.53g(0.008mol)和三乙胺0.91g(0.009mo1)，体系温度保持5°C以下，TLC检测反应完毕后，减压去除DMF得油状物，用乙醚100ml溶解，分别用饱和碳酸氢钠溶液50ml、5%(质量分数)柠檬酸溶液50ml、水50ml、饱和氯化钠50ml洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，用甲醇重结晶得(S)-2-(2-(6,7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2//)-基)-乙酰胺基H,5-戊二酸二甲酯，产率55%，m.p.=183~184。C;H'-画R:(CDC13)5:2.56(3H,s),2.97(1H,dd,/=5.4，13.8Hz),3.17(1H，dd，>/-5.4,14.1Hz)，3.75(3H，s)，4.54(1H，d,J=15.0Hz)，4.88(2H，m),6.65(1H,br)，6.91—7.65(7H,m);ESI-MS416.5[M+H〗。实施例2M环己基-2-(6，7-Z:甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2/f)-基)-乙酰胺基)-乙酰胺(表3中化合物N0.16)的制备2-(6,7-二甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2印-基)-乙酸的制备与实施例1中的2-(6,7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酸的制备方法类似，2-(6，7-二甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酸2.78g(lOmmol)溶于50ml无水DMF中，加入EDCHC12.4g(12mmo1),体系保持0。C搅拌1小时，然后加入环己基胺l.Og(lOmmol)，氮气保护下，升温到室温继续搅拌5小时左右，直到TLC检测到反应结束，加入水100ml，50ml乙酸乙酯萃取三次，用50ml水洗三次，再用50ml饱和氯化钠洗涤三次，无水硫酸钠干燥24小时，减压旋千溶剂，得到深黄色油状物，快速柱层析(洗脱剂乙酸乙酯/石油醚=1/4)，得到黄色固体，产率73%,m.p.=251~2520C;'H-NMR:(DMS(W6)S:1.121-1.264(5H,m)，1.532-1.553(1H,m),1.668-1.745(4H，m)，2.502(3H，s)，3.549-3.605(1H，m)，3.825-3.892(6H，m)，4.839-4.899(2H,m),6.742(1H,s)，7.281(1H，s)，8.220(1H，d，J=7.8Hz);ESI-MS:360.4[M+H]。实施例32-(6，7-二氯-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2^)-基)^/-(3,4-二甲氧基苯基)-乙酰胺(表3中化合物NO.20)的制备2-(6,7-二氯-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酸的制备与实施例1中的2-(6，7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酸的制备方法类似，2-(6,7-二氯-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2^>基)-乙酸2.78g(lOmmol)溶于30ml二氯亚砜中，加热回流3小时，减压蒸干溶剂得浅黄色油状物，溶于100ml无水二氯甲垸中，0°C下搅拌30分钟，慢慢加入3，4-二甲氧基苯胺1.53g(lOmmol),保持体系温度0°C继续搅拌1小时左右，直到TLC检测原料反应完毕，蒸干溶剂，得到白色固体，乙醇重结晶得到白色晶体2-(6,7-二氯-3-甲基二2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)善(3，4-二甲氧基苯基)-乙酰胺1.95g,收率52%,m.p.=219~220。C;^-NMR:(CDC13)S:2.65(3H，s)，3.83(6H，(!,/=0.92Hz),4.99(2H,s)，6.74-7.87(7H,m),8.49(1H，s);ESI-MS:354.4[M+H]。实施例4(￡)-3-甲基-卜(2-氧-2-(4-(3-苯丙基-1-烯基)-哌嗪-1-基)乙基)-喹喔啉-2-(2//)-酮(表3中化合物N0.22)的制备邻苯二胺1.08g(lOmmol)溶于无水乙醇50ml中，待完全溶解后，一次性加入丙酮酸甲酯1.05g(12mmo1)，保持加热回流2小时，冷却静置出现黄色沉淀，过滤收集沉淀，乙醇重结晶得到针状黄色晶体3-甲基喹喔啉-2-(l/f)-酮1.41g，收率88%，m.p.=241~243°C;称取3-甲基喹喔啉-2-(1//)-酮l.Og(6.25mmo1)，溴乙酸乙酯1.04g(6.25mmo1)溶于丙酮50ml中，加入6gNa2C03做催化剂，保持加热回流6小时，减压蒸干溶剂得到黄色固体，100ml水洗，过滤收集固体，乙醇重结晶得到黄色晶体2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2/0-基)-乙酸乙酯1.08g，收率74%，m.p.=121~123°C;2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酸乙酯lg(4.07mmol)溶于30mlKOH的甲醇溶液(KOH浓度为2mol/L)中，常温搅拌4小时，加入浓盐酸酸化到pH=l,析出白色沉淀，用甲醇或水重结晶得到白色晶体2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2^)-基)-乙酸0.81g,收率92%，m.p.=225~227°C;2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2/f)-基)-乙酸2.18g(lOmmol)溶于100ml无水二氯甲烷中，待完全溶解后加XCDL3.24g(20mmo1)，常温下剧烈搅拌1小时，一次性加入肉桂基哌嗪2.02g(10mmo1),继续搅拌6小时，低压蒸干溶剂得固体，大量水洗，用乙醚/丙酮重结晶得桔红色固体(巧-3-甲基-l-(2-氧-2-(4-(3-苯丙基-l-烯基)-哌嗪-l-基)-乙基)-喹喔啉-2-(2//)-酮1.98g,收率49%，m.p.=275~2760C;!H-NMR:(DMSO-^)S:2.455-2.502(3H,m)，3.045-3.152(1H，m)，3.219-3.233(2H，m)，3.588-3.703(2H，m)，3.708(1H,s),3.987(2H,s),3.519-3.703(2H，m)，4.287-4.402(2H，m)，6.443(1H，t，J=7.2Hz)，6.873(1H，(!，/=15.0Hz)，7.354-7.529(8H，m),7.778(1H,<!，/=7.8Hz);ESI-MS:404.5[M+H]。实施例56-(2-(6,7-二氯-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2坊-基)-乙酰胺基)-己基甲酯(表3中化合物N0.27)的制备2-(6，7-二氯-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酸的制备与实施例1中的2-(6，7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2历-基)-乙酸的制备方法类似，2-(6，7-二氯-3-甲基-2-氧-喹喔啉4-(2//)-基)-乙酸2.23g(0.008mol)溶于100ml无水二氯甲烷中，待完全溶解后加入2.6gCDL(0.016mo1)，6-氨基己酸甲酯盐酸盐1.45g(0.008mo1)，三乙胺0.91g(0.009mo1)，3(TC下反应5小时，旋干溶剂后得固体。大量水洗，甲醇重结晶得6-(2-(6，7-二甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2^)-基)-乙酰胺基)-己基甲酯，产率79%，m.p.=152-153°C;^-NMR(DMSO-J6)5:1.204-1.255(2H，m),1.368-1.418(2H，m)，1.479-1.529(2H，m)，2.270(2H,t，■/=7.2Hz)，2.452(3H,s)，3.062(2H,q，《/=6.0Hz)，3.577(3H，s)，5.086(2H，s),7.664(1H，s)，7.994-8.057(1H,m),8.217(1H,sH，t,/=5.4Hz);ESI-MS:414.7[M+H]。权利要求1、具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物，其特征是它有如通式(I)的结构式中R1和R2相同或不同，各自独立地选自氢、C1～4直链或支链烷基、卤素、氰基、含1～4个碳原子的烷氧基、含1～4个碳原子的卤代烷基；R3选自羟基或甲氧基或乙氧基或羧基成甲酯或乙酯取代的天然L-氨基酸残基、任意取代的其他伯胺基、任意取代的仲胺基。2、按照权利要求1所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物，其特征是，所述的天然L-氨基酸残基选自L-丝氨酸、L-精氨酸、L-苏氨酸、L-甘氨酸、L-天冬氨酸、L-丙氨酸、L-谷氨酰胺、L-缬氨酸、L-酪氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-半胱氨酸、L-天冬酰胺、L-苯丙氨酸、L-谷氨酸、L-甲硫氨酸、L-组氨酸、L-脯氨酸、L-羟脯氨酸、L-赖氨酸、L-色氨酸。3、按照权利要求1所述的真有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物，其特征是，所述的任意取代的其他伯胺基选自取代的苯胺类、Cw烷基氨基、环戊烷基氨基、环己垸氨基、？氨基丁酸甲酯、6-氨基己酸甲酯。4、按照权利要求l所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物，其特征是，所述的任意取代的仲胺基选自N-双取代Cw烷基氨基、吗啉基、哌嗪基、取代哌嗪基。5、按照权利要求l所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物，其特征是，包括下列化合物2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酸；2<6，7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酸；2-(6,7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酸乙酯；2-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酰胺基)-乙酸乙酯；2-(2-(6，7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酰胺基)-乙酸乙酯；2-(2-(6，7-二甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2印-基)-乙酰胺基)-乙酸乙酯；(28，411)-4-羟基-1-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酰胺基)-吡咯基-2-羧酸甲酯(5)-2-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2^-基)-乙酰胺基)-3-苯丙氨酸甲酯；(5)-2-(2-(6，7-二氯-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2if)-基)-乙酰胺基)-3-苯丙氨酸甲酯；(5)-2-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2/f)-基)-乙酰胺基H,5-戊二酸二甲酯；O(5>2-(2-(6,7-二氟-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2^)-基)-乙酰胺基)-1，5-戊二酸二甲酯；(5)-2-(2-(6，7-二甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2均-基)-乙酰胺基)-1，5-戊二酸二甲酯；(S)-2-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2//)-基)-乙酰胺基)-4-(甲硫基)-丁酸甲酯；0S)-2-(2-(6，7-二甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2^>基)-乙酰胺基)-4-(甲硫基)-丁酸甲酯；0)-2-(2-(6，7-二氯-3-甲基-2_氧-喹喔啉-1-(2^-基)-乙酰胺基)-4-(甲硫基)-丁酸甲酯；(5)-3-羟基-2-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2^-基)-乙酰胺基)-丙酸甲酯；7V-环己基-2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2//)-基)-乙酰胺基)-乙酰胺；iV-环己基-2-(6,7-二甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2^-基)-乙酰胺基)-乙酰胺；iV-环己基-2-(6,7-二氯-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2均-基)-乙酰胺基)-乙酰胺；6-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2^-基)-乙酰胺基)-己基甲酯；6-(2-(6,7-二甲氧基-3-甲基-2-氧-喹喔啉-1-(2^-基)-乙酰胺基)-己基甲酯；6-(2-(6,7-二氯-3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2/^)-基)-乙酰胺基)-己基甲酯；4-(2-(3-甲基-2-氧-喹喔啉-l-(2历-基)-乙酰胺基)-丁基甲酯；(￡)-3-甲基-1-(2-氧-2-(4-(3-苯丙基-1-烯基)-哌嗪-l-基)-乙基)-喹喔啉-2-(2//)-酮。6、具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物的制备方法，其特征是它主要通过以下步骤实现a)用4、5-位被R卜R2二取代的邻苯二胺与丙酮酸甲酯在一定溶剂中加热回流反应制备喹喔啉酮母核化合物(II);b)化合物(II)与溴代的或氯代的乙酸乙酯在弱碱催6.化剂作用下于乙醇或丙嗣溶剂中加热回流反应，然后水解得到化合物(m);c)化合物(ni)在縮合剂的作用下，于反应溶剂中与氨基取代化合物縮合得到化合物(I)。7、按照权利要求6所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物的制备方法，其特征是，步骤a)中所述的溶剂为乙醇或四氢呋喃或二氯甲垸或l,4-二氧六环；所述的溶剂的用量为每毫摩尔的4、5-位被R卜R2二取代的邻苯二胺用45ml溶剂；所述的4、5-位被R!、R2二取代的邻苯二胺与丙酮酸甲酯用量的摩尔比为1:1.1-1.2。8、按照权利要求6所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物的制备方法，其特征是，步骤b)中所述的弱碱催化剂为弱无机碱，优选碳酸钠或碳酸钾；所述的化合物(II)与溴代或氯代乙酸乙酯与弱碱催化剂用量的摩尔比为1:1.2:1.2;所述的乙醇或丙酮溶剂的用量为每毫摩尔的化合物(n)用8~10m溶剂;所述的水解是在浓度为0.4md/L~2mol/L氢氧化钾的醇溶液中搅拌4小时，然后加水并用盐酸酸化至pH=l~3完成。9、按照权利要求6所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物的制备方法，其特征是，步骤c)中，所述的氨基取代化合物为L-氨基酸类衍生物，縮合剂优选l-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐加1-羟基苯并三唑，反应溶剂优选无水二氯甲烷或;v，A^二甲基甲酰胺，化合物(III)与氨基取代化合物与缩合剂l-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐与縮合剂l-羟基苯并三唑用量的摩尔比为1:1:U1.2:1.1~1.2，反应溶剂的用量为每毫摩尔的化合物(III)用2.55mL溶剂，反应温度为10°C以下。10、按照权利要求6所述的具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物的制备方法，其特征是，步骤c)中，所述的氨基取代化合物为L-氨基酸类衍生物以外的其他伯胺或者仲胺类，缩合剂优选iV,A^-羰基二咪唑，反应溶剂优选无水二氯甲烷或四氢呋喃或W,W-二甲基甲酰胺，化合物(III)与氨基取代化合物与縮合剂用量的摩尔比为1:1:2,反应溶剂的用量为每毫摩尔的化合物(III)用5~10mL溶剂，反应温度为0~30°C。全文摘要本发明公开了具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的喹喔啉酮类衍生物及其制备方法，属药物化学
技术领域：
。它有如通式(I)的结构，R₁和R₂相同或不同，各自独立地选自氢、C_1～4直链或支链烷基、卤素、氰基、含1～4个碳原子的烷氧基、含1～4个碳原子的卤代烷基；R₃选自羟基或甲氧基或乙氧基或羧基成甲酯或乙酯取代的天然L-氨基酸残基、任意取代的其他伯胺基、任意取代的仲胺基。本发明化合物在逆转多药耐药细胞株K562/A02的体外药理活性筛选实验中能够大大增强阿霉素对P-糖蛋白高表达的K562/A02多药耐药细胞株的细胞毒效力，为有效的多药耐药逆转剂，有望开发成为新型的化疗药物增敏剂。文档编号C07D241/00GK101514192SQ20091002009公开日2009年8月26日申请日期2009年4月2日优先权日2009年4月2日发明者周怀瑜,徐文方,曲显俊,荀李,李勇刚,袁洪雨申请人:山东大学