专利名称：由杜仲叶提取、分离、纯化绿原酸的方法
由杜仲叶提取、分离、纯化绿原酸的方法本发明涉及一种制做绿原酸的方法，特别是由杜仲叶提取、分离、纯化绿原酸的方法。绿原酸(chlorogenic acid简称CA)是一种缩酚酸，属酚类化合物。具有抗菌、抗 病毒、升高白细胞、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基等作用。因而在食疗及制 药业的应用上受到人们高度重视。现有的由杜仲叶提取绿原酸产品提取工艺采用有机溶剂在酸性条件下提取，存在 下列缺点产品纯度低、工序复杂、操作繁琐、消耗溶剂多、材料不易再生、产生的污水较多， 能耗高、提取成本相对比较高，终产物的纯度只能到60%。本发明的目的是提供一种以杜仲叶为原料，经提取、分离、纯化制备绿原酸的方 法。它能解决现有技术中消耗溶剂多、材料不易再生、产生的污水较多，能耗高的缺点。本 发明由于应用了超滤、树脂分离及纳滤技术，它的分离、纯化方法工艺简便，成本低，所用材 料能再生利用，不产生污染，利于工业化生产。提取分离杜仲叶中绿原酸的工艺流程为杜仲叶一干燥粉碎一乙醇溶液回流提取一减压蒸除乙醇一絮凝去杂一脱色 —XDA-5树脂吸附一纯净水洗脱糖和京尼平苷酸一20%乙醇洗脱得到绿原酸粗品一减压 回收乙醇一过150Da纳滤膜浓缩一乙醇重结晶一低温干燥得绿原酸精品。它包括如下步 骤A.制备绿原酸提取液将干燥粉碎的杜仲叶过60目筛，加到乙醇水溶液中，调PH = 4，加热搅拌提取，过 滤，将滤液减压蒸出乙醇，得绿原酸水提取液。B.绿原酸提取液的分离滤液加活性碳脱色、过超滤膜去蛋白质、多糖，得绿原酸粗品水提取液。C.纯化绿原酸绿原酸粗品溶液用大孔吸附树脂吸附，用含酸的乙醇溶液解吸附，得绿原酸纯品 溶液。D.制备绿原酸精品绿原酸纯化液经纳滤，乙醇重结晶，得绿原酸纯品。步骤A中用于提取绿原酸杜仲叶粉碎后过40-80目筛；步骤A中所述的加热温度为65度，搅拌提取时间为2小时，提取次数为2次；步骤A中所述的溶液为60%乙醇，固液比例为1 12，溶液的PH = 4。步骤B中所述的脱色剂为活性碳，添加比例为5%搅拌脱色时间为20分钟，步骤B中所述的超滤膜为5000Da的中空纤维膜，超滤压力0. 4PM，温度为30度。步骤C中用于吸附的树脂为XAD-5，树脂和吸附液的比例为1 5，吸附时间4小 时；步骤C中用于解吸附的溶液为20%乙醇水溶液，溶液的PH = 3 ；解吸附的溶液与 树脂的比例为4 1，解吸附时间为3小时。步骤D中所用纳滤膜为截留分子量为150Da的陶瓷膜，工作压力为0.4Mpa，温度为常温；步骤D中所用的重结晶溶液为无水乙醇及正己烷，二种溶液体积比为1 1，重结 晶温度为0度。本发明中采用乙醇提取、超滤、树脂吸附、纳滤分离纯化浓缩、乙醇重结晶的方法， 它替代了现有的有机溶剂在酸碱性条件下提取、萃取的工艺。本方法首先用60%乙醇溶液 从杜仲叶中提取绿原酸、蛋白、多糖及黄酮等物质，经脱色、超滤去除蛋白质、多糖、色素，分 离得绿原酸粗品；经大孔树脂、纳滤纯化、乙醇重结晶，制备了绿原酸纯品。本发明的优点是无污染、能耗低、所用材料可再生回收利用，提取成本低、可连续 生产。在提取过程中未使用有毒溶剂，产品安全，易实现工厂化生产。下面以实施例对本发明具体说明。实施例由杜仲叶提取、分离、纯化绿原酸的方法，包括以下步骤A.制备含绿原酸的水提取物将粉碎过60目筛的干杜仲叶0. 5KG(绿原酸含量为4. 96% )放入IOL的三口瓶 中，用6L60%乙醇溶液，加HCL调PH = 4，搅拌加热到65度，在该温度下提取2小时，过滤， 得滤液(1)；滤渣加4L60%乙醇溶液调PH = 4，搅拌加热到65度，在该温度下提取2小时， 过滤，得滤液(2)。合并滤液(1)和(2)，减压回收乙醇，得提取液3L。B.制备含绿原酸的粗品溶液将含绿原酸的水提取液加热到50度，以5%比例添加活性碳150g，搅拌30分钟，静置30分钟，离心过滤；将滤液在压力为0. 4MP、温度30度下超滤，截流液加去离 子水超滤3次。每次加水2L，得绿原酸粗品溶液约8L。C.纯化绿原酸取XAD-5树脂经再生处理，绿原酸粗品溶液和树脂量的比例是5:1，本实施例中 为1. 6KG，溶液调PH = 4，在20L搅拌罐中搅拌吸附4小时，离心过滤，树脂用去离子水搅拌洗3次，直至洗出水不混浊；每次用水10L，收集洗 脱水可以过纳滤膜脱多糖后再回收使用；水洗后的树脂用10%乙醇3L洗1次，滤除溶液得 吸附有绿原酸的树脂。取6.5L PH= 3的20%乙醇溶液(和树脂比为4 1)，和树脂一起 放入搅拌罐中，搅拌洗脱3小时，过滤，用去离子水洗一次，收集滤液约9L。D.制备绿原酸精品将纯化的绿原酸溶液在常温下过纳滤膜，膜为截留分子量为150Da的陶瓷膜，工 作压力为0. 4MP ；浓缩比例为10倍，得浓缩液900ml，减压浓缩得固形物；用无水乙醇在60 度下溶解得150ml溶液，加入等体积正己烷在0度下重结晶16小时，得纯度为92%的绿原 酸精品17. 86克。
权利要求
一种由杜仲叶提取、分离和纯化绿原酸的方法A制备绿原酸提取液将干燥粉碎的杜仲叶过60目筛，加到乙醇水溶液中，调PH＝4，加热搅拌提取，过滤，将滤液减压蒸出乙醇，得绿原酸水提取液B.绿原酸提取液的分离滤液加活性碳脱色、过超滤膜去蛋白质、多糖，得绿原酸粗品水提取液C.纯化绿原酸绿原酸粗品溶液用大孔吸附树脂吸附，用含酸的乙醇溶液解吸附，得绿原酸纯品溶液。D.制备绿原酸精品绿原酸粗品溶液过纳滤膜，乙醇重结晶，得绿原酸纯品。
2.根据权利要求1所述由杜仲叶提取、分离和纯化绿原酸的方法，其特征是步骤A中 所述的提取温度为65度，搅拌提取时间为2小时。
3.根据权利要求1所述由杜仲叶提取、分离和纯化绿原酸的方法，其特征是步骤A中 用于提取绿原酸的溶液为60%的乙醇溶液，其PH为4。
4.根据权利要求1所述由杜仲叶提取、分离和纯化绿原酸的方法，其特征是步骤A中 用于提取绿原酸的固液比为1 12。
5.根据权利要求1所述由杜仲叶提取、分离和纯化绿原酸的方法，其特征是步骤B中 用于超滤的膜的截留分子量为5000Da的中空纤维膜，超滤时工作压力为0. 4MPa，工作温度 为30度。
6.根据权利要求1所述由杜仲叶提取、分离和纯化绿原酸的方法，其特征是步骤B中 所用的脱色剂为活性碳，添加比例为溶液的5%;搅拌脱色温度为40度，搅拌脱色时间为30 分钟。
7.根据权利要求1所述由杜仲叶提取、分离和纯化绿原酸的方法，其特征是步骤C中 所用的纯化树脂为XAD-5，树脂用量和被纯化溶液比例为1 5;吸附时间为4小时，溶液PH=4。
8.根据权利要求1所述由杜仲叶提取、分离和纯化绿原酸的方法，其特征是步骤C中 用于洗脱吸附的溶液为20%乙醇溶液，溶液PH = 3，洗脱时间为3小时。
9.根据权利要求1所述由杜仲叶提取、分离和纯化绿原酸的方法，其特征是步骤D中 用于纯化浓缩的膜是截留分子量为150Da的陶瓷膜，工作压力为0. 4MPa，工作温度为常温， 纯化后的溶液被浓缩倍数为10倍。
10.根据权利要求1所述由杜仲叶提取、分离和纯化绿原酸的方法，其特征是步骤D中 用于重结晶的溶剂是乙醇和正己烷，重结晶的温度为0度。
全文摘要
由杜仲叶提取、分离和纯化绿原酸的方法包括A制备绿原酸提取液，B.绿原酸提取液的分离，C.纯化绿原酸D.制备绿原酸精品；本发明将超滤膜及纳滤膜技术和大孔吸附树脂纯化技术相结合，有效解决了绿原酸提取中工序复杂、操作繁琐、消耗溶剂多、材料不易再生、产生的污水多，能耗高、提取成本相对比较高的缺点；提供了一种提取、分离、纯化杜仲叶中绿原酸的新方法，该方法工艺简便，成本低，能耗低，所用材料能再生利用，不产生污染，利于工业化生产。
文档编号C07C69/732GK101935278SQ200910147928
公开日2011年1月5日 申请日期2009年6月11日 优先权日2009年6月11日
发明者丁松法, 乔玉环, 吴美娟, 周大捷, 周宗明 申请人:周大捷