专利名称：一种用于抗菌的新化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于抗菌作用的新化合物，该化合物对MRSA、MSSA具有很好的抗 菌活性。
背景技术：
近年来，随着抗生素的广泛应用(包括人和动物)、糖皮质激素及免疫抑制剂应用 的增加以及老年患者的增多，肺部耐药菌感染问题日益突出。这些耐药菌常见的有耐青霉 素肺炎链球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、耐万古霉素肠球菌(VRE)、产超广谱β 内酰胺酶(ESBL)革兰阴性菌等。有关耐甲氧西林金黄色葡萄球菌也是比较棘手的问题， 自首株MRSA检出以来的40余年，MRSA感染在世界各地一直呈上升趋势，美国国家院内感 染监测(NNIS)报道，1975年182所医院MRSA占金葡菌感染总数的2.4%，1997年上升至 24. 8%。国内90年代后京、沪等地大型医院MRSA分离率均超过金葡菌感染总数的50%以 上。MRSA具有多重耐药性，对所有β内酰胺类抗生素(包括含酶抑制剂)耐药，并常对喹 诺酮类、氨基糖苷类、大环内酯类抗生素及克林霉素等耐药。临床证实，糖肽类抗生素(万 古霉素、去甲万古霉素、替考拉宁)对MRSA敏感，目前已成为临床上首选药物。1997年日 本发现对万古霉素中度敏感的金黄色葡萄球菌(VISA)，2002年美国发现耐万古霉素的金 黄色葡萄球菌(VRSA)，迄今为止，全世界已报道多例VISA及2例VRSA感染的病例。VISA 感染可选用糖肽类与其他抗生素联合治疗，如利福平、阿米卡星/阿贝卡星等，亦可选用新 型抗生素，如奎奴普丁 /达福普丁(quinupristin/dol fopristin)、利奈唑胺(Iinezolid) 等，VRSA感染可选用新型抗生素。然而这些药物在临床应用一段时间后均产生了不同程度 的耐药性，因此探究针对耐药菌的新抗生素成为了必要。
发明内容
我们提供了一种新的四环素类化合物，这种化合物以土霉素为原料，经过硝化、还 原、纯化、精制等反应而得。这种化合物对耐甲氧西林金葡菌(MRSA)、甲氧西林敏感金葡菌 (MSSA)的抑菌效果显著，优于土霉素等抗生素。
具体实施例实施例1 式1化合物的制备(1)硫酸9-硝基土霉素素的制备将一定量的盐酸土霉素(Ikg)加入到96% -98% 的浓硫酸(4kg)中，温度保持在10°C以下。然后冷却溶液至低于7°C后，逐滴加入浓硝酸 (浓度大于90%，0. 2kg)，搅拌反应混合物，期间温度小于10°C。将反应混合物倾入温度在 0_5°C的异丙醇(25L)和庚烷(4L)的混合液中，保持温度小于40°C下搅拌混悬液，待冷却混 悬液至25°C以下是，离心硫酸9-硝基美他环素并用异丙醇和甲醇的混合液洗涤。在45°C 下干燥得产物1。(2)将得到的产物1溶解在甲醇(7L)和纯净水(0. 1L)的混合液中。将10%钯-碳(0. 03kg)催化剂加入甲醇中，通入氢气进行氢化反应至反应完全，压力小于5巴，温度小于 25°C。滤除催化剂，将反应混合物倾入到异丙醇(20L)和庚烷(IOL)的混合液中，冷却至 0_5°C，搅拌混悬液离心产物，在40-45°C温度下真空干燥得产物2，称重0. 92kg。(3)将产物2 (0. 92kg)溶解在纯净水(5L)中，冷却溶液至5°C下，加入Ikg的叔丁 基甘氨酰氯，搅拌反应混合物并保证在温度8°C以下，至产物2反应完，将反应混合液加入 到二氯甲烷(9L)和甲醇(2. 3L)的混合液中，保持温度在小于10°C，用28%的氨水调节PH 至7. 0-7. 4，分离有机相。真空蒸发有机相，加入甲醇(6L)，在20-25°C下搅拌混悬物，过滤 固体并用甲醇洗涤，得湿粗品。(4)纯化将粗品悬浮于丙酮(3L)和甲醇(3L)的混合液中，在小于25°C下搅拌混 悬物。过滤固体并用甲醇洗涤。(5)结晶将以上粗品溶解到甲醇(IL)和二氯甲烷(6L)的混合液中，搅拌混悬 物至溶解完全，以1 μ m的滤筒过滤溶液，在小于20°C下真空蒸馏，得到浓稠剩余物，在小 于 60°C下真空干燥得到 0. 93kg 该化合物，1H NMR(400MHz，DMS0-d6) δ 15. 02 (br s，2H)， 8. 01(br s, 1H)，7· 68 (d, J = 8. 7Hz, 1H)，6· 92 (d, J = 8. 7Hz, 1H)，6· 02 (br s，2H)，3· 49 (s, 2H)，3. 42-3. 38 (m, 1H)，3. 29 (d, J = 2. 7Hz, 1H)，2. 51 (d，J = 2. 7Hz, 1H)，2. 32-2. 28 (m, 1H)， 2. 27(s，6H)，1. 59(s，3H)，1. 10(s，9H) ； ESI-MS m/z 589. 24 (M+H)+。实施例2 式1化合物的抗菌活性研究2.1材料与方法抗菌药物式1化合物对照药盐酸土霉素购自武汉远城化工有限公司被测菌株101株MRSA和105株MSSA均获赠于中山大学药学院，经鉴定后按NCCLS 标准确定。培养基购自法国生物梅里埃公司，批号811813401。方法采用二倍琼脂稀释法测定式1化合物和盐酸土霉素对所有菌株的最低抑菌 浓度(MIC)。即先将两种抗生素分别以不同浓度PH的无菌磷酸盐缓冲液倍比稀释成12个浓 度，将各浓度的药液各IOml，分别加入到已溶化并冷至50°C左右的M-H琼脂中，立即倾注平 皿，使培养基的抗生素最终浓度依次为0. 0625,0. 125,0. 25_128mg/L。用微量多点接种仪将 108-109CFU/ml菌悬液接种到含不同浓度抗生素的上述琼脂平板表面，置35°C培养24h观察 结果，以抑制细菌声场的最低抗生素浓度确定为MIC。分别统计MIC范围、MIC50、MIC90，并 根据抗菌药物敏感的临界浓度，计算对细菌的敏感率，同时描绘浓度积累抑菌百分率曲线。2. 2 结果式1化合物和盐酸土霉素抗菌效果比较如表1 (MIC，mg/L)
权利要求
式I所示的化合物及其在药学上可以接受的酸的盐及水合物式IFSA00000267648300011.tif
2.含有权利要求1所述的式I化合物及其在药学上可以接受的酸的盐及水合物和其它 药用辅料组成的药物组合物。
3.如权利要求1和2所述的物质或组合物用于抗菌作用。
全文摘要
一种具有显著抗菌活性的新化合物，结构如下(式I)，对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)具有很好的抗菌作用。(式I)
文档编号C07C231/02GK101948403SQ20101028032
公开日2011年1月19日 申请日期2010年9月10日 优先权日2010年9月10日
发明者王伟, 苏春华 申请人:苏春华