专利名称：一种超临界流体萃取大叶茜草素的方法
技术领域：
本发明属于中药有效成分提取技术领域，涉及一种超临界流体萃取大叶茜草素的方法，具体涉及一种采用超临界(X)2萃取和硅胶柱层析技术从茜草中提取纯化大叶茜草素的方法。
背景技术：
大叶茜草素，为萘醌类。分子式=C17H15O4,分子量J83. 30, mp. U8_132°C。为黄色片状结晶，熔点1 132°C，具有升华性，不溶于水，溶于乙醚、乙醇，易溶于氯仿、乙酸乙酯。茜草Rubia cordifolia L.始载于《神农本草经》，具有凉血、祛瘀、止血、通经的功效，用于吐血、衄血、崩漏、外伤出血、淤阻经闭、关节痹痛、跌扑肿痛。茜草主产于陕西、河南等地。根中含有蒽醌衍生物、萘醌衍生物、萘氢醌衍生物、三萜化合物等。茜草有显著的止血、抑菌、消炎作用，大叶茜草素是其主要有效成分之一，体外实验表明，茜草素对金黄色葡萄球菌、变形杆菌、大肠埃希氏菌、绿脓杆菌、沙门氏菌和克雷伯氏菌等均有显著的抑制作用。索菲规等研究不同采收期茜草中大叶茜草素含量的动态，发现夏季最高，即6-8 月份，平均含量高于1.2%。目前国内对大叶茜草素提取纯化工艺研究方面文献较少，谭朝阳、刘倩、彭亮等均采用乙醇回流提取，该方法仅得到茜草粗提物，无法得到高含量的大叶茜草素。
发明内容
本发明目的是针对茜草中有效成分的提取纯化问题，提供一种超临界流体萃取大叶茜草素的方法。本发明是采用如下技术方案实现的将茜草粉末用乙醇溶液对其进行浸润，放入萃取釜中，以超临界的CO2为萃取剂， 乙醇为夹带剂进行萃取，然后再解压进行分离，出料，再采用柱层析对萃取物进行纯化分离、洗脱剂进行洗脱；其中萃取压力25-45MPa、温度为30_60°C、萃取时间为1_5小时、解析压力为4-8MPa ；层析柱填料为硅胶，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯混合溶剂、乙醇或甲醇。本发明浸润所用乙醇溶液为体积百分比70-95%的乙醇溶液，料液比为1 3-8， 浸润1-3小时。本发明超临界流体萃取步骤中，CO2流量为0. 25-0. 5L/min。本发明超临界流体萃取步骤中，夹带剂乙醇的流速为1-lOml/min，用量为茜草体积的 20-35%。本发明超临界流体萃取步骤中，石油醚-乙酸乙酯体积比为50 1-20 1。本发明硅胶柱层析步骤中，洗脱方法为先用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱杂质，再改以乙醇或甲醇洗脱，收集乙醇或甲醇洗脱部分。
本发明的有益效果采用超临界(X)2提取大叶茜草素的重现性良好，萃取温度低、 无溶剂残留，大叶茜草素的含量高；本方法工艺简单、操作时间短。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步阐述。实施例1 取Ikg茜草粉碎至50目后用90%乙醇4L密闭浸润1小时，放入5L规格的超临界萃取釜中，以(X)2为萃取溶剂，萃取压力为^MPa、温度为37°C、萃取时间为3h，CO2流量为0. 3L/min，在整个萃取过程中，夹带剂乙醇以2ml/min的流速通入200ml ；分离釜在压力
条件下解析分离，得到萃取物81g。将萃取物溶于石油醚中，上硅胶层析柱，先以石油醚-乙酸乙酯50 1洗脱，再以90%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱部分，减压回收乙醇，浓缩成浸膏、低温干燥即获得6. 05g大叶茜草素，含量为92%。实施例2:取Ikg茜草粉碎至20目后用70%乙醇6L密闭浸润2小时，放入5L规格的超临界萃取釜中，以(X)2为萃取溶剂，萃取压力为^MPa、温度为36°C、萃取时间为2h，CO2流量为0. 4L/min，在整个萃取过程中，夹带剂乙醇以3ml/min的流速通入^Oml ；分离釜在压力
条件下解析分离，得到萃取物78g。将萃取物溶在石油醚中，上硅胶层析柱，先以石油醚-乙酸乙酯34 1洗脱，再以95%甲醇洗脱，收集甲醇洗脱部分，减压回收甲醇，浓缩成浸膏、低温干燥即获得6. 43g大叶茜草素，含量为92%。实施例3 取Ikg茜草粉碎至40目后用80%乙醇8L密闭浸润3小时，放入5L规格的超临界萃取釜中，以(X)2为萃取溶剂，萃取压力为32MPa、温度为39°C、萃取时间为4h，CO2流量为0. 25L/min，在整个萃取过程中，夹带剂乙醇以5ml/min的流速通入330ml ；分离釜在压力
条件下解析分离，得到萃取物79g。将萃取物溶在石油醚中，上硅胶层析柱，先以石油醚-乙酸乙酯48 1洗脱，再以95%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱部分，减压回收乙醇，浓缩成浸膏、低温干燥即获得5. 49g大叶茜草素，含量为95%。实施例4 取1.5kg茜草粉碎至40目后用75%乙醇9L密闭浸润2小时，放入5L规格的超临界萃取釜中，以(X)2为萃取溶剂，萃取压力为34MPa、温度为31°C、萃取时间为池，0)2流量为0. 35L/min，在整个萃取过程中，夹带剂乙醇以8ml/min的流速通入390ml ；分离釜在压力
条件下解析分离，得到萃取物75g。将萃取物溶在石油醚中，上硅胶层析柱，先以石油醚-乙酸乙酯30 1洗脱，再以85%甲醇洗脱，收集甲醇洗脱部分，减压回收甲醇，浓缩成浸膏、低温干燥即获得5. 97g大叶茜草素，含量为93%。实施例5 取1. 5kg茜草粉碎至50目后用95%乙醇12L密闭浸润3小时，放入5L规格的超临界萃取釜中，以(X)2为萃取溶剂，萃取压力为43MPa、温度为48°C、萃取时间为处，0)2流量为0. 45L/min,在整个萃取过程中，夹带剂乙醇以5ml/min的流速通入300ml ；分离釜在压力
条件下解析分离，得到萃取物78g。将萃取物溶在石油醚中，上硅胶层析柱，先以石油醚-乙酸乙酯40 1洗脱，再以90%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱部分，减压回收乙醇，浓缩成浸膏、低温干燥即获得5. 73g大叶茜草素，含量为97%。实施例6 取1.5kg茜草粉碎至30目后用85%乙醇4. 5L密闭浸润1小时，放入5L规格的超临界萃取釜中，以(X)2为萃取溶剂，萃取压力为57MPa、温度为55°C、萃取时间为让，0)2流量为0. 3L/min，在整个萃取过程中，夹带剂乙醇以7ml/min的流速通入330ml ；分离釜在压力 SMI^a条件下解析分离，得到萃取物84g。将萃取物溶在石油醚中，上硅胶层析柱，先以石油醚-乙酸乙酯20 1洗脱，再以80%甲醇洗脱，收集甲醇洗脱部分，减压回收甲醇，浓缩成浸膏、低温干燥即获得6. 45g大叶茜草素，含量为90%。
权利要求
1.一种超临界流体萃取大叶茜草素的方法，其特征在于将茜草粉末用乙醇溶液对其进行浸润，放入萃取釜中，以超临界的CO2为萃取剂，乙醇为夹带剂进行萃取，然后再解压进行分离，出料，再采用柱层析对萃取物进行纯化分离、洗脱剂进行洗脱；其中萃取压力 25-45MPa、温度为30_60°C、萃取时间为1_5小时、解析压力为4_8MPa ；层析柱填料为硅胶， 洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯混合溶剂、乙醇或甲醇。
2.根据权利要求1所述一种超临界流体萃取大叶茜草素的方法，其特征在于浸润所用乙醇溶液为体积百分比70-95%的乙醇溶液，料液比为1 3-8，浸润1-3小时。
3.根据权利要求1所述一种超临界流体萃取大叶茜草素的方法，其特征在于(X)2流量为 0. 25-0. 5L/min。
4.根据权利要求1所述一种超临界流体萃取大叶茜草素的方法，其特征在于夹带剂乙醇的流速为1-lOml/min，用量为茜草体积的20-35%。
5.根据权利要求1所述一种超临界流体萃取大叶茜草素的方法，其特征在于石油醚-乙酸乙酯体积比为50 1-20 1。
6.根据权利要求1所述一种超临界流体萃取大叶茜草素的方法，其特征在于洗脱方法为先用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱杂质，再改以乙醇或甲醇洗脱，收集乙醇或甲醇洗脱部分。
全文摘要
本发明属于中药有效成分提取技术领域，具体涉及一种超临界流体萃取大叶茜草素的方法。在本发明中，茜草粉末用乙醇溶液对其进行浸润，放入萃取釜中，以超临界的CO2为萃取剂，乙醇为夹带剂进行萃取，然后再解压进行分离，出料，再采用柱层析对萃取物进行纯化分离、洗脱剂进行洗脱；其中萃取压力25-45MPa、温度为30-60℃、萃取时间为1-5小时、解析压力为4-8MPa；层析柱填料为硅胶，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯混合溶剂、乙醇或甲醇。本发明所得大叶茜草素通过超临界CO2萃取，质量好，纯度高，整个方法操作时间短、工艺简单。
文档编号C07D311/92GK102558131SQ20101060389
公开日2012年7月11日 申请日期2010年12月24日 优先权日2010年12月24日
发明者刘东锋, 李法庆 申请人:苏州宝泽堂医药科技有限公司