专利名称：一种瓜馥木碱甲的制备方法
技术领域：
本发明属于天然产物分离领域，具体是涉及一种应用高速逆流色谱技术从瓜馥木中纯化瓜馥木碱甲的方法。
背景技术：
瓜馥木Fissistigma oldhamii (Hems. 1)Merr.又名钻山风、广香藤，为番荔枝科 (Annonaceae)瓜馥木属(Fissistigma)植物，分布于浙江、江西、福建、台湾、湖南、广东、海南、广西、云南等地，根或藤茎入药，性温味辛，具有祛风除湿、镇痛消肿、活血化瘀等功效， 主要用于跌打损伤、关节炎及坐骨神经痛的治疗。据文献报道，瓜馥木中含有生物碱类、有机酸类、黄酮类、马兜铃内酰胺类、黄烷醇类、丙烯酰胺类成分，主要含有生物碱类成分。药理实验表明，其总生物碱有镇痛、心血管生物活性，对心律不齐与慢性心肌供血不足患者均有一定疗效。在临床治疗类风湿关节炎方面研究较多的有青风藤，该药具有较明确的疗效。青藤碱为青风藤中的有效成分，从化学结构来看，青藤碱为吗啡烷型结构的化合物，具有该类型结构的生物碱一般均具有抗炎镇痛作用，文献资料表明，瓜馥木植物中也有这种结构母核的化学成分，可以说瓜馥木在医药领域方面将有广阔开发前景。瓜馥木碱甲为瓜馥木生物碱的主要成分，钟瑞建等通过反相高效液相色谱法测定瓜馥木碱甲的含量为0. 034 0. 045%。瓜馥木碱甲，瓜馥木生物碱的主要成分。分子式=C18H17NO4；分子量311.12。现有提取瓜馥木碱甲的报道并不多见，市场上也尚未有瓜馥木碱甲对照品的出售，因此提供一种瓜馥木碱甲的制备方法则很有必要，可以为其的后续研究提供支持。
发明内容
1.发明目的本发明的目的是提供一种瓜馥木碱甲的制备方法，该方法制得的瓜馥木碱甲质量好，纯度高。2.技术方案一种瓜馥木碱甲的制备方法，其特征在于包含以下步骤1)提取将瓜馥木药材粉碎，加入5 20倍量的乙醇液回流或渗漉提取1 2次， 每次0.5 证，合并得提取液；2)除杂将上述提取液浓缩至小体积，加入2 5倍量盐酸溶液稀释，滤过，再加入碱液将稀释液调至PH9 11，加等量二氯甲烷萃取，萃取液回收试剂得瓜馥木总碱；3)纯化将上述瓜馥木总碱采用高速逆流色谱法分离纯化，设定色谱仪转速为 800 lOOOr/min，流速为1 lOml/min，收集流出液，回收试剂，真空干燥得产品。所述步骤1)中乙醇液为60 80%乙醇水溶液。
所述步骤2)中提取液浓缩至密度1. 3 1. 8g/ml。所述步骤2)中的碱性溶液为2 ％iol/L的氨水溶液。所述步骤幻中的高速逆流色谱法采用的溶剂系统是氯仿-甲醇-pH3. 6醋酸盐缓冲液(8 11 10 13 15 20)。所述的溶剂系统制备方法为将氯仿-甲醇-pH3. 6醋酸盐缓冲液按上述比例量取，混合均勻后静置，放出上层作为固定相，下层作为流动相，将瓜馥木总碱用下相溶解。本发明的优势为采用高速逆流色谱法纯化，样品损失少，制备工艺得率高、适合小规模制备。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1 取瓜馥木药材1kg，粉碎，加入5L60%乙醇回流提取2次，每次0.证，合并提取液， 浓缩至密度1. 3g/ml，加入2倍量1 %盐酸溶液稀释，滤除沉淀后，加入2mol/L氨水调至 PH9，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收试剂，得瓜馥木总碱。取氯仿-甲醇-pH3. 6醋酸盐缓冲液按(8 10 1 体积比置于分液漏斗中， 混勻后，静置，放出上层作为固定相，下层作为流动相，将瓜馥木总碱用下相溶解，开启制备型高速逆流色谱仪，先将固定相泵入色谱柱中，再以lml/min流速泵入流动相，并通过进样阀连续进样，控制转速为800r/min，收集流出液，浓缩，干燥得瓜馥木碱甲0. 27g，检测含量 99. 3%。实施例2 取瓜馥木药材10kg，粉碎，加入200L70 %乙醇渗漉提取2次，每次证，合并提取液， 浓缩至密度1. 8g/ml，加入10倍量1 %盐酸溶液稀释，滤除沉淀后，加入4mol/L氨水调至 PHl 1，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收试剂，得瓜馥木总碱。取氯仿-甲醇-pH3. 6醋酸盐缓冲液按(11 13 20)体积比置于分液漏斗中， 混勻后，静置，放出上层作为固定相，下层作为流动相，将瓜馥木总碱用下相溶解，开启制备型高速逆流色谱仪，先将固定相泵入色谱柱中，再以:3ml/min流速泵入流动相，并通过进样阀连续进样，控制转速为lOOOr/min，收集流出液，浓缩，干燥得瓜馥木碱甲2.91g，检测含量 99. 1%。实施例3 取瓜馥木药材10kg，粉碎，加入60L80%乙醇回流提取2次，每次lh，合并提取液， 浓缩至密度1. 5g/ml，加入8倍量1 %盐酸溶液稀释，滤除沉淀后，加入3mol/L氨水调至 PH10，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收试剂，得瓜馥木总碱。取氯仿-甲醇-pH3. 6醋酸盐缓冲液按(10 12 17)体积比置于分液漏斗中， 混勻后，静置，放出上层作为固定相，下层作为流动相，将瓜馥木总碱用下相溶解，开启制备型高速逆流色谱仪，先将固定相泵入色谱柱中，再以lOml/min流速泵入流动相，并通过进样阀连续进样，控制转速为900r/min，收集流出液，浓缩，干燥得瓜馥木碱甲2. 43g，检测含量 98. 3%o
权利要求
1.一种瓜馥木碱甲的制备方法，其特征在于包含以下步骤1)提取将瓜馥木药材粉碎，加入5 20倍量的乙醇液回流或渗漉提取1 2次，每次0.5 证，合并得提取液；2)除杂将上述提取液浓缩至小体积，加入2 5倍量1%盐酸溶液稀释，滤过，再加入碱液将稀释液调至PH9 11，加等量二氯甲烷萃取，萃取液回收试剂得瓜馥木总碱；3)纯化将上述瓜馥木总碱采用高速逆流色谱法分离纯化，设定色谱仪转速为800 lOOOr/min，流速为1 lOml/min，收集流出液，回收试剂，真空干燥得产品。
2.如权利要求1所述的一种瓜馥木碱甲的制备方法，其特征在于所述步骤1)中乙醇液为60 80%乙醇水溶液。
3.如权利要求1所述的一种瓜馥木碱甲的制备方法，其特征在于所述步骤幻中提取液浓缩至密度1. 3 1. 8g/ml ο
4.如权利要求1所述的一种瓜馥木碱甲的制备方法，其特征在于所述步骤幻中的碱性溶液为2 4mol/L的氨水溶液。
5.如权利要求1所述的一种瓜馥木碱甲的制备方法，其特征在于所述步骤幻中的高速逆流色谱法采用的溶剂系统是氯仿-甲醇-PH3. 6醋酸盐缓冲液(8 11 10 13 15 20)。
6.如权利要求5所述的一种瓜馥木碱甲的制备方法，其特征在于所述的溶剂系统制备方法为将氯仿-甲醇-PH3. 6醋酸盐缓冲液按上述比例量取，混合均勻后静置，放出上层作为固定相，下层作为流动相，将瓜馥木总碱用下相溶解。
全文摘要
本发明提供一种瓜馥木碱甲的制备方法，其特征在于包含以下步骤(1)将瓜馥木药材粉碎，乙醇回流或渗漉提取，提取液浓缩至小体积，加盐酸调节至酸性，滤除不溶物，再将酸液调碱，用二氯甲烷萃取，萃取液回收试剂得瓜馥木总碱；(2)将上述瓜馥木总碱采用高速逆流色谱法分离纯化得瓜馥木碱甲。本方法具有制得产品含量高，操作简单，提取率高等优点，适合小规模制备。
文档编号C07D491/056GK102241682SQ20111011793
公开日2011年11月16日 申请日期2011年5月6日 优先权日2011年5月6日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司