专利名称：京都酚修饰的脂肪胺/醇衍生物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种人工合成的多肽化合物，特别是涉及一种对二肽的羧基端用脂肪胺、脂肪醇进行保护修饰而得到的化合物及其制备方法以及在制备镇痛抗炎剂药物中的应用。
背景技术：
疼痛作为人类主要生命指征之一，具有重要的生物学意义。世界疼痛大会将疼痛确认为继呼吸、脉搏、体温和血压之后的“人类第5大生命指征”，众多患者正在忍受着疼痛的折磨。目前，临床上使用的镇痛药物都存在各自的毒副作用，例如阿片类镇痛药的成瘾性和水杨类镇痛药对胃肠道的刺激性，寻找镇痛药物是新药研究的热点之一。在镇痛剂设计中发明人认识到京都酚(Tyr-Arg)是一种有潜力的镇痛二肽，以及口服活性差。按照这种 认识，发明人对二肽的羧基端用脂肪胺、脂肪醇进行保护修饰，形成了本发明。
发明内容
本发明要解决的第一个技术问题是，提供通式I中的化合物(5a_l)Tyr-Arg-XCH2(CH2)n CH3,式中，X 为 NH 或 0 ;式中，n 为 6、8、10、12、14 或 16。对所合成的通式I中的化合物(5a_l)进行编号5a中X = NH, n = 6 ;5b中X =NH, n = 8 ；5c 中 X = NH, n = 10 ；5d 中 X = NH, n = 12 ；5e 中 X = NH, n = 14 ；5f 中 X =NH,n = 16 ；5g 中 X = 0,n = 6 ；5h 中 X = 0,n = 8 ；5i 中 X = 0,n = 10 ；5j 中 X = 0,n =12 ；5k 中 X = 0，n = 14 ；51 中 X = 0，n = 16。以上编码号只是为了方便描述，并无任何对发明的限制意义。本发明所要解决的第二个技术问题是提供通式化合物5a_l的制备方法，该方法包括(I)浓硫酸、浓硝酸条件下，Arg硝基化得Ne-Arg (NO2)；(2)弱碱性水二氧六环条件下，Nc-Arg(NO2)与(Boc)2O反应制得Na-Boc-Nc-Arg(NO2)；(3)在DCC和HOBt存在下，Na-Boc-Nc-Arg(NO2)在无水THF中与脂肪胺或脂肪醇缩合成 Na-Boc-Ne-Arg (NO2) -XCH2 (CH2) nCH3 ；(4)在含氯化氢的乙酸乙酯中，N°-Boc-Nt=-Arg(NO2)-XCH2(CH2)nCH3 脱 Boc 保护，得Nc-Arg (NO2) -XCH2 (CH2) nCH3 ；(5)在 DCC 和 HOBt 存在下，Boc-Tyr 在无水 THF 中与 NG_Arg (NO2) -XCH2- (CH2) nCH3缩合，制备得到 Boc-Tyr-NG-Arg (NO2) -XCH2 (CH2) nCH3 ；(6)H2/Pd 条件下 Boc-Tyr-NG-Arg(N02)-XCH2(CH2)nCH3 脱-NO2 保护，得Boc-Tyr-Arg-XCH2 (CH2) nCH3 ；(7)在含氯化氢的乙酸乙酯中，Boc-Tyr-Arg-XCH2 (CH2) nCH3脱Boc保护，即得Tyr-Arg-XCH2(CH2)nCH3O
该制备方法可以用图I的路线概括。本发明所要解决的第三个技术问题是提供了所述的化合物在制备镇痛和抗炎药物中的应用。本发明所要解决的第四个技术问题是在小鼠热甩尾法模型上评价本发明的化合物的镇痛活性。本发明的第五个目的是在小鼠耳肿胀模型上评价本发明的化合物的抗炎活性。
图I为本发明通式5a_l化合物的合成路线示意图。i)DCC,HOBt,CH3(CH2)nCH2NH2(n = 6,8,10,12,14,16)或CH3(CH2)nCH2OH, (n = 6,8, 10，12，14，16) ；ii)EtoAc/HCl,冰浴；iii)DCC, HOBt, Boc-Tyr ；iv)H2, Pd/C ；v)EtOAc/HCl,冰浴；5a 中 X = NH, n = 6 ;5b 中 X = NH, n = 8 ;5c 中 X = NH, n = 10 ;5d 中 X = NH, n =12 ；5e 中 X = NH, n = 14 ；5f 中 X = NH, n = 16 ；5g 中 X = 0，n = 6 ；5h 中 X = 0，n = 8 ;5i 中 X = 0，n = 10 ;5j 中 X = 0，n = 12 ；5k 中 X = 0，n = 14 ；51 中 X = 0，n = 16。
具体实施例方式为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。实施例 I 制备 Ns-Arg (NO2)冰盐浴搅拌条件下，向500ml茄瓶中加入80ml浓硝酸，然后缓慢加入80ml浓硫酸。IOmin后，分批加入47. 33g(272mmol)L-Arg，反应混合物冰盐浴下搅拌反应2h。向反应混合物中缓慢加入冰水96ml，然后缓慢加入浓氨水，调pH = 8，再用冰醋酸调pH = 6，有大量无色固体析出，放入4°C冰箱中继续析晶。减压过滤，弃去滤液，滤饼用80°C热水溶解，放入4°C冰箱中重结晶。室温下减压过滤，收集不溶物52. 5g，为无色固体，产率88% .ESI-MS(m/e) :220[M+H]+。实施例2 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2)称取I. 752g (8mmol) Nc-Arg (NO2)于反应瓶中，加入3ml水溶解，冰浴条件下，缓缓滴加IN NaOH 8ml，将溶有I. 92g (Boc)2O的二氧六环缓缓倒入其中，调反应液pH为9，反应48h,期间每隔2h用单通抽反应体系中CO2—次。TLC检测反应完全后,调反应液pH为7,旋除二氧六环，再调反应液pH为2，用乙酸乙酯萃取反应液三次，得到的乙酸乙酯层再用饱和NaCl萃洗三次，得到乙酸乙酯层用无水NaSO4干燥过夜，过滤除去NaSO4,旋干乙酸乙酯得到标题化合物2. 4g，为无色固体，产率94% .ESI-MS (m/e) :320 [M+H]+。实施例3 制备 NG_Arg (NO2) -OBzl取6. 57g(30mmol)NG-Arg(N02)于反应瓶中，然后加入6. 21g苯磺酸钠,50ml苯甲醇，20ml环己烷，80°C油浴下反应8h.向反应液中加入大量乙醚，有无色固体析出，常温减压过滤，得标题化合物14. lg，为无色固体，产率98% .ESI-MS (m/e) :310 [M+H]+.实施例4制备Boc-Tyr称取0. 905g (5mmol) Boc-Tyr于反应瓶中，加入2ml水溶解，冰浴条件下，缓缓滴加IN NaOH 5ml，将溶有I. 199g (Boc) 20的二氧六环缓缓倒入其中，调反应液pH为9，反应48h，期间每隔2h用单通抽反应体系中CO2 —次。TLC检测反应完全后，调反应液pH为7，旋除二氧六环，再调反应液PH为2，用乙酸乙酯萃取反应液三次，得到的乙酸乙酯层再用饱和NaCl萃洗三次，得到乙酸乙酯层用无水NaSO4干燥过夜，过滤除去NaSO4,旋干乙酸乙酯得到标题化合物 0. 91g，为无色固体，产率 65% .ESI-MS (m/e) :282 [M+H]+.实施例5 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 6CH3 (Ia)将3. 06g (10. 8mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)溶于 20ml 无水四氧咲喃(THF),冰浴下往里加I. 08g(8mmol)N-轻基苯并三唑(HOBt)和I. 98g(9. 6mmol) 二环己基羰二亚胺(DCC)的无水THF溶液。反应混合物冰浴搅拌30分钟，得对应的活泼酯溶液，待用。将I. 032g(8mmol) CH3(CH2)7NH2溶于20ml无水四氢呋喃(THF)，然后与上面待用的 活泼酯溶液混溶，用N-甲基吗啉(NMM)调pH = 8 9。得到的反应混合物室温反应24小时。TLC (展开剂CHCl3 CH3OH = 30 I)显示直链CH3 (CH2) 7NH2消失。反应混合物减压浓缩至干，残留物用乙酸乙酯溶解，滤除不溶物。滤液依次用5%碳酸氢钠水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次；5%硫酸氢钾水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次和饱和碳酸氢钠水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次。分出的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液32°C减压浓缩，重结晶纯化，得3. Olg标题化合物，为无色固体，产率88% . ESI-MSWe) :453. 6 [M+Na]+ 实施例6 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 8CH3 (lb)按照实施例5 的方法，2. 42g (7. 58mmol)Na -Boc-Nc-Arg (NO2)与 0. 976g (6. 22mmol)CH3 (CH2) 9NH2反应，得到标题化合物2. 52g，为无色固体，产率88 % . ESI-MS (m/e)
481.7 [M+Na]+.实施例7 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 10CH3 (Ic)按照实施例5 的方法，3. 06g (9. 59mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2)与 I. 48g (8mmol)CH3 (CH2) nNH2反应，得到标题化合物3. 6g，为无色固体，产率93 % ESI-MS (m/e)
509.5 [M+Na]+.实施例8 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 12CH3 (Id)按照实施例5 的方法，3. 06g (9. 59mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2)与 I. 704g (8mmol)CH3 (CH2) 12NH2反应，得到标题化合物4. Og，为无色固体，产率97 % ESI-MS (m/e)
537.7 [M+Na]+.实施例9 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 14CH3 (Ie)按照实施例5 的方法，3. 06g (9. 59mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2)与 I. 928g (8mmol)CH3 (CH2) 15NH2反应，得到标题化合物4. I lg，为无色固体，产率95 % . ESI-MS (m/e)
565.3 [M+Na]+.实施例10 制备 Na -Boc-Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 16CH3 (If)按照实施例5 的方法，3. 06g(9. 59mmol)Na-Boc_NG-Arg(NO2)与 2. 152g(8mmol)CH3 (CH2) 17NH2反应，得到标题化合物4. 4g，为无色固体，产率96 % . ESI-MS (m/e)
593.5 [M+Na]+.实施例11 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 6CH3 (Ig)将4. 785g(15mmol)Boc-Nq-Boc-Ng-(NO2 溶于 30ml 无水四氢呋喃(THF)，冰浴下往里加0. 525g(15mmol)N-羟基苯并三唑(HOBt)和3. 708g(18mmol) 二环己基羰二亚胺(DCC)的无水THF溶液。反应混合物冰浴搅拌30分钟，得对应的活泼酯溶液，待用。将2. 34g(19. 5mmol) CH3(CH2) 70H溶于20ml无水四氢呋喃(THF)，然后与上面待用的活泼酯溶液混溶。得到的反应混合物室温反应24小时。TLC(展开剂CHCl3 CH3OH =30 I)显示Na-Boc-Ne-Arg(NO2)消失。反应混合物减压浓缩至干，残留物用乙酸乙酯溶解，滤除不溶物。滤液依次用5%碳酸氢钠水溶液洗3次,饱和氯化钠水溶液洗3次；5%硫酸氢钾水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次和饱和碳酸氢钠水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次。分出的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液32°C减压浓缩，柱层析纯化，得2. Og标题化合物，为无色固体，产率31% .ESI-MS (m/e) 454. 7 [M+Na]+.实施例12 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 8CH3 (Ih)按照实施例11 的方法，4. 785g (15mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)与 3. 081g (19. Bmmol)CH3(CH2)9OH反应，得到标题化合物2. Og，为无色固体，产率29 % . ESI-MS (m/e)
482.6 [M+Na]+.
实施例13 制备 N° -Boc-Nc-Arg(NO2) -OCH2 (CH2) 10CH3 (Ii)按照实施例11 的方法，4. 785g (15mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)与 3. 627g (19. Bmmol)CH3 (CH2) n0H反应，得到标题化合物2. Og，为无色固体，产率27 % . ESI-MS (m/e)
510.5 [M+Na]+.实施例14 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 12CH3 (Ij)按照实施例11 的方法，4. 785g (15mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2)与 4. 173g (19. Bmmol)CH3 (CH2) 12CH20H反应，得到标题化合物I. 5g，为无色固体，产率19 % ESI-MS (m/e)
538.7 [M+Na]+.实施例 15 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 14CH3 (Ik)按照实施例11 的方法，4. 785g (15mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2)与 4. 719g (19. Bmmol)CH3 (CH2) 14CH20H反应，得到标题化合物2. lg，为无色固体，产率26 % . ESI-MS (m/e)
566.5 [M+Na]+.实施例16 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 16CH3 (11)按照实施例11 的方法，4. 785g (15mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)与 5. 265g (19. Bmmol)CH3 (CH2) 170H反应，得到标题化合物2. Og，为无色固体，产率23 % ESI-MS (m/e)
594.4 [M+Na]+.实施例17 制备 HCl Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 6CH3 (2a)3. Olg (8. 2mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 6CH3 溶于适量乙酸乙酯，加入约25ml 4N无水氯化氢-乙酸乙酯液，室温搅拌3小时，TLC(展开剂石油醚丙酮=5 I)显示原料点消失。反应混合液在室温下减压浓缩，残留物再用乙酸乙酯溶解并室温下浓缩，如此反复4次；然后向浓缩物中加入乙醚，室温下减压浓缩，如此反复3次，直至除净游离的氯化氢，得标题化合物2. 6g，为无色固体，产率87% .ESI-MS (m/e) :331. 8 [M+H]+.实施例18 制备 HCl Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 8CH3 (2b)按照实施例17 的方法，以 2. 52g(5. 50mmol)Na-Boc-Nc-Arg(NO2)-NHCH2(CH2)8CH3为原料，得标题化合物1.969g，为无色固体，产率91% .ESI-MS (m/e) :359. 7 [M+H]+.实施例19 制备 HCl Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 10CH3 (2c)按照实施例17 的方法，以 3. 6g (7. 41mmol) Na-Boc-Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 10CH3 为原料，得标题化合物2. 98g，为无色固体，产率95% . ESI-MS (m/e) :387. 5 [M+H]+.实施例 20 制备 HCl Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 12CH3 (2d)按照实施例17 的方法，以 4. Ig (7. 98mmol) Na-Boc-Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 12CH3 为原料，得标题化合物3. 33g，为无色固体，产率93% . ESI-MS (m/e) :415. 5 [M+H]+.实施例21 制备 HCl Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 14CH3 (2e)按照实施例17 的方法，以 4. 28g (7. 9mmol) Na-Boc-Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 14CH3 为原料，得标题化合物3. 43g，为无色固体，产率90% . ESI-MS (m/e) :443. 5 [M+H]+.实施例22 制备 HCl Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 16CH3 (2f)
按照实施例17 的方法，以 4. 4g (7. 72mmol) Na-Boc-Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 16CH3 为原料，得标题化合物3. 84g，为无色固体，产率98% . ESI-MS (m/e) :471. 7 [M+H]+.实施例23 制备 HCl Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 6CH3 (2g)按照实施例17 的方法，以 2. Og (4. 64mmol) Na-Boc-Nc-Arg (NO2) -OCH2- (CH2) 6CH3 为原料，得标题化合物I. 68g，为无色固体，产率98% . ESI-MS (m/e) :332. 5 [M+H]+.实施例24 制备 HCl Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 8CH3 (2h)按照实施例17 的方法，以 2. 52g(5. 49mmol)Na-Boc-Nc-Arg(NO2)-OCH2-(CH2)8CH3为原料，得标题化合物2. 15g，为无色固体，产率99% . ESI-MS (m/e) :360. 7 [M+H]+.实施例 25 制备 HCl Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 10CH3 (2i)按照实施例17 的方法，以 2. Og (4. Ilmmol) N°-Boc-Ne-Arg (NO2)-OCH2-(CH2)ltlCH3S原料，得标题化合物I. 7g，为无色固体，产率98% . ESI-MS (m/e) :388. 7 [M+H]+.实施例26 制备 HCl Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 12CH3 (2 j)按照实施例17 的方法，以 I. 5g (2. 91mmol) Na-Boc-Nc-Arg (NO2) -OCH2- (CH2) 12CH3 为原料，得标题化合物I. 28g，为无色固体，产率97% ESI-MS (m/e) :416. 8 [M+H]+ 实施例27 制备 HCl Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 14CH3 (2k)按照实施例17 的方法，以 2. Ig (3. 87mmol) Na-Boc-Nc-Arg (NO2) -OCH2- (CH2) 14CH3 为原料，得标题化合物I. 81g，为无色固体，产率98% . ESI-MS (m/e) :444. 5 [M+H]+.实施例28 制备 HCl Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 16CH3 (21)按照实施例17 的方法，以 2. Og (3. 5mmol) Na-Boc-Nc-Arg (NO2) -OCH2- (CH2) 16CH3 为原料，得标题化合物I. 74g，为无色固体，产率98% . ESI-MS (m/e) :472. 5 [M+H]+.实施例29 制备 Boc-Tyr-Arg(NO2)-OBzl将I. 686g(6mmol) Boc-Tyr溶于20ml无水四氢呋喃(THF),冰浴下往里加
0.81g(6mmol)N_轻基苯并三唑(HOBt)和I. 483g (7. 2mmol) 二环己基羰二亚胺(DCC)的无水THF溶液。反应混合物冰浴搅拌30分钟，得对应的活泼酯溶液，待用。将 2. 2g (7. 12mmol) Nc-Arg (NO2) -OBzl 溶于 30ml 无水四氢呋喃(THF)，然后与上面待用的活泼酯溶液混溶，用N-甲基吗啉(NMM)调pH = 8 9。得到的反应混合物室温反应14小时。TLC显示Ng Arg(NO2)-OBzl消失。反应混合物减压浓缩至干，残留物用乙酸乙酯溶解，滤除不溶物。滤液依次用5%碳酸氢钠水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次；5%硫酸氢钾水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次和饱和碳酸氢钠水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次。分出的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液32°C减压浓缩，柱层析纯化，得标题化合物2. 14g，为无色固体，产率64% .Mp 138 V， [a]2^ = - 43.8 (c = 2.63, CH3OH), ESI-MS(m/z) :595[M+Na]+ IR(KBr):
3329.59,2949.05，1741.03，1688. 89，1649. 77，1520. 88，1288. 35，1173. 14,761.23，656. 22. 1H-NmrGOOmHz, DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 15 (s，1H) ,8. 53 (s, 1H) ,8. 32-8. 30 (d, J =6Hz, 1H), 8. 05-7. 90 (m, 2H), 7. 36 (s, 5H), 7. 05-7. 02 (d, J = 9Hz, 2H), 6. 78-6. 75 (d, J =9Hz, 1H) ,6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz，2H)，5. 13(s，2H)，4. 36-4. 35 (m, 1H), 4. 13 (m, 1H)，3. 16 (s，2H)，2. 83-2. 79 (m, 1H), 2. 63-2. 55 (m, 1H)，I. 82-1. 78 (m, 1H), I. 70-1. 65 (m, 1H)，I. 55 (m,2H)，I. 30(s,9H).实施例30 制备 Boc-Tyr-NG_Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 6CH3 (3a)将2. 36g (8. 4mmol) Boc-Tyr溶于20ml无水四氢呋喃(THF),冰浴下往里加
0.95g(7mmol)N_轻基苯并三唑(HOBt)和I. 73g(8. 4mmol) 二环己基羰二亚胺(DCC)的无水THF溶液。反应混合物冰浴搅拌30分钟，得对应的活泼酯溶液，待用。将2. 6g (7. 09mmol) HCl Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 6CH3 溶于 3Oml 无水四氢呋喃(THF)，然后与上面待用的活泼酯溶液混溶，用N-甲基吗啉(NMM)调pH = 8 9.得到的反应混合物室温反应14小时。TLC显示HCl Nc-Arg(NO2)-NHCH2-(CH2)6CH3消失。反应混合物减压浓缩至干，残留物用乙酸乙酯溶解，滤除不溶物。滤液依次用5%碳酸氢钠水溶液洗3次,饱和氯化钠水溶液洗3次；5%硫酸氢钾水溶液洗3次,饱和氯化钠水溶液洗3次和饱和碳酸氢钠水溶液洗3次,饱和氯化钠水溶液洗3次。分出的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液32°C减压浓缩，柱层析纯化，得标题化合物2. 94g，为无色固体，产率 70 % Mp 89 V,[a]2^= - 46.6 (c = 3.47, CH3OH), ESI-MS(m/z) :616. 6[M+Na]+ IR(KBr) :3316. 92,2938. 85，1653. 84，1527. 68，1261. 17，571. 10. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6)8 /ppm = 9. 15 (s, 1H)，7. 86-7. 84 (d, J = 6Hz,2H)，7. 75 (m, 1H)，7. 29-7. 26 (d, J = 9Hz,1H)，7. 11-7. 08 (d, J = 9Hz，lH)，7. 03-7. 01 (d, J = 6Hz，2H)，6. 87-6. 85 (d, J = 6Hz，lH)，
6.66-6. 63 (d, J = 9Hz,2H)，4. 25-4. 23 (m, 1H)，4. 08 (m, 1H)，3. 15 (s,2H)，3. 04-3. 02 (m,2H)，2. 87-2. 83 (m, 1H)，2. 63 (m, 1H)，I. 65 (m, 2H)，I. 48 (m, 2H)，I. 39 (m, 2H)，I. 31 (s，9H)，
1.23 (s, 10H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例31 制备 Boc-Tyr-NG-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 8CH3 (3b)按照实施例30 的方法，I. 85g (6. 58mmol) Boc-Tyr 与 I. 97g (4. 99mmol)HCl NcArg (NO2) NHCH2 (CH2) 8CH3反应，得标题化合物I. 99g，为无色固体，产率64 % .Mp 89 V，[afo = - 114.8 (c = 1.17, CH3OH), ESI-MS(m/z) :644. 6[M+Na]+ IR(KBr)3317.23,2935.66,2855.93，1650.35，1520.67，1261. 36,1165.00,570. 50. 1H-NMR(3OOMHz,DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 15 (s, 1H)，7. 86-7. 84 (d, J = 6Hz, 1H)，7. 75 (m, 1H)，7. 43-7. 41 (d,J = 6Hz，lH)，7. 28-7. 26 (d, J = 6Hz，lH)，7. 11-7. 08 (d, J = 9Hz，lH)，7. 03-7. 01 (d, J =6Hz, 1H) ,6. 87-6. 84(d, J = 9Hz, 1H) ,6. 65-6. 63(d, J = 6Hz，2H)，4. 24 (s，1H), 4. 07 (m, 1H)，
3.15 (m, 2H)，3. 04-3. 02 (m, 3H)，2. 86-2. 83 (m, 1H)，2. 67-2. 59 (m, 1H)，I. 65 (m, 2H)，I. 48 (m,2H)，I. 37 (m, 2H)，I. 31 (s, 9H)，I. 23 (s, 14H), 0. 85-0. 81 (t, J = 6. 0Hz, 3H).实施例32 制备 Boc-Tyr-NG-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 10CH3 (3c)按照实施例30 的方法,3. Og (10. 7mmol) Boc-Tyr 与 2. 98g (7. 05mmol)HCl Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 10CH3反应，得标题化合物2. 0g，为无色固体，产率44 % .Mp 92 °C, [a]2D° = - 198.4 (c = 1.02, CH3OH), ESI-MS (m/z) :672.2. [M+Na]+.IR(KBr) :3316. 06, 29 33. 8 3, 28 55. 41, 1650. 59, 1527. 48, 1261. 58, 1 164. 80,572. 14. 1H-N-MR (300MHz, DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 19 (s, 1H), 8. 55 (s, 1H), 7. 91-7. 88 (d,J = 9Hz，2H)，7. 79 (m，2H)，7. 04-7. 01 (d，J = 9Hz,2H) ,6. 91-6. 88 (d, J = 9Hz,1H) ,6. 65-6. 62 (d, J = 9Hz，2H)，4. 40-4. 14-4. 04 (m, 1H)，3. 14(s，2H)，3. 02(m，2H)，
2.87-2. 81 (dd, J = 3Hz, J = 15Hz, 1H)，2. 66-2. 57 (dd, J = 12Hz, J = 15Hz, 1H)，I. 65 (m,2H)，I. 47(m，2H)，I. 36 (m, 2H)，I. 30(s，9H)，I. 22(s，22H)，0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例33 制备 Boc-Tyr-NG-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 12CH3 (3d)按照实施例30 的方法,2. 48g (8. 83mmol) Boc-Tyr 与 3. 33g (7. 39mmol)HCl Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 12CH3反应，得标题化合物I. 6g，为无色固体，产率32 % Mp 94 V，[a]2D° = - 130.9 (c = 0.97, CH3OH), ESI-MS(m/z) 700. 3[M+Na]+. IR(KBr)3317. 37,2931. 77,2854. 99，1649. 60，1526. 73，1261. 21，573. 55. 1H-NmrGOOMHz, DMS0_d6)8 /ppm = 9. 19 (s, 1H)，7. 90-7. 87 (d, J = 9Hz, 1H)，7. 79 (m, 1H)，7. 03-7. 00 (d, J = 9Hz,2H)，6. 92-6. 89 (d, J = 9Hz, 1H)，6. 65-6. 62 (d, J = 9Hz,2H)，4. 22 (m, 1H)，4. 06-4. 03 (m,1H), 3. 14(m，2H)，3. 02-3. 01(m，2H)，2. 86-2. 81 (dd, J = 3Hz, J = 12Hz, 1H)，2. 65-2. 57 (m,1H)，I. 64 (m, 2H)，I. 47 (m, 2H)，I. 36 (m, 2H)，I. 30 (s,9H)，I. 22 (s, 18H)，0. 86-0. 82 (t, J =
6.0Hz,3H).实施例 34 制备 Boc-Tyr-NG-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 14CH3 (3e)按照实施例30 的方法,2. 48g (8. 83mmol) Boc-Tyr 与 3. 5g (7. 31mmol)HCl Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 14CH3反应，得标题化合物2. 4g，为无色固体，产率47 % .Mp 94 V，[a]2D° =-48.3 (c = 2.81, CH3OH), ESI-MS(m/z) :728. 2[M+Na]+ IR(KBr):3316. 91,2930. 16,2855. 20，1648. 65，1526. 68，1261.70,1165.91,573. 19.1H-NMR(3OOMHz,DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 15 (s，1H)，8. 52 (s，1H)，7. 86—7. 84 (d，J = 6Hz，1H)，7. 76 (m，1H)，
7.03-7. 00 (d, J = 9Hz，2H)，6. 87-6. 84(d，J = 9Hz, 1H) ,6. 65-6. 62 (d, J = 9Hz，2H)，
4.23 (m, 1H), 4. 07-4. 04 (m, 1H), 3. 14 (s, 2H), 3. 02 (m, 2H), 2. 87-2. 82 (dd, J = 6Hz, J =12Hz, 1H) ,2. 66-2. 58 (m, 1H)，I. 65(m，2H)，I. 47 (m, 2H)，I. 36 (m，2H)，I. 30(s，9H)，I. 22 (s,26H)，0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例35 制备 Boc-Tyr-NG-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 16CH3 (3f)按照实施例30 的方法，3. Og (10. 7mmol) Boc-Tyr 与 3. 84g (7. 58mmol)HCl Nc-Arg (NO2) -NHCH2 (CH2) 16CH3反应，得标题化合物I. 6g，为无色固体，产率29 % Mp 94 °C, [a]2D° = - 51.9 (c = 3.05, CH3OH), ESI-MS(m/z) 756. 6[M+Na]+. IR(KBr)3316.19.2928.28,2853.24，1650.90，1522.56，1259.79.1166.06,579.27. 1H-NMR (3 OOMHz,DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 15 (s，1H)，8. 52 (s，1H)，7. 87—7. 84 (d，J = 9Hz，1H)，7. 76 (m，1H)，7. 42-7. 40 (IH)，7. 28-7. 25 (IH)，7. 03-7. 00 (d, J = 9Hz,2H)，6. 86-6. 84 (d, J = 6Hz, 1H)，
6.65-6. 62 (d, J = 9Hz，2H)，4. 24 (m, 1H) ,4. 08-4. 01 (m, 1H)，3. 16-3. 15(m，2H)，3. 02 (m,2H)，2. 88-2. 82 (dd, J = 3Hz, J = 15Hz, 1H)，2. 67-2. 59 (m, 1H)，I. 65 (m, 2H)，I. 48 (m, 2H)，
I.36 (m, 2H)，I. 30(s,9H)，I. 22(s,30H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例36 制备 Boc-Tyr-NG-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 6CH3 (3g)按照实施例30 的方法，I. 58g (5. 62mmol) Boc-Tyr 与 I. 73g (4. 71mmol)HCl Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 6CH3反应，得标题化合物0. 85g，为无色固体，产率30 %，Mp 52 °C, [a]2° = - 105.5 (c = 1.52, CH3OH), ESI-MS (m/z) :617. 6 [M+Na]+ IR(KBr)3333. 97，2941. 57，2358. 30，1675. 38，1516. 92，1260. 81，666. 94. 1H-^rUOOMHz,DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 17 (s，1H)，8. 54 (s，1H)，8. 29-8. 27 (d，J = 6Hz, 2H), 7. 31-7. 29 (m,1H) ,7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz,2H) ,6. 81-6. 78 (d, J = 9Hz, 1H) ,6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz,2H)，4. 28-4. 22 (m, 1H)，4. 15-4. 07 (m, 1H)，4. 05-3. 97 (t, J = 12Hz,2H)，3. 16 (m, 2H)，
2.87-2. 81 (dd, J = 3Hz J = 15Hz, 1H) ,2. 64-2. 57 (dd, J = 9Hz, J = 12Hz，lH)，
1.87-1. 62 (m, 2H)，I. 57-1. 53 (m, 4H)，I. 30 (s, 9H), I. 21 (s, I OH), 0. 86-0. 82 (t, J = 6. OHz,3H).实施例37 制备 Boc-Tyr-NG-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 8CH3 (3h)按照实施例30 的方法，I. 36g (4. 84mmol) Boc-Tyr 与 I. 6g (4. 04mmol) HCl Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 8CH3反应，得标题化合物0. 8g，为无色固体，产率32 % .Mp 71 V，[a]2D° = - 318.4 (c = 0.78, CH3OH), ESI-MS(m/z) 645. 6[M+Na]+. IR(KBr)3326. 44,2936. 49,2856. 02,2357. 75，1691. 97，1521. 02，1287. 85,653. 87. 1H-NMR(3OOMHz,DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 18 (s，1H)，8. 54 (s，1H)，8. 30-8. 27 (d，J = 9Hz, 1H)，7. 90 (s,1H) ,7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz,2H) ,6. 82-6. 79 (d, J = 9Hz, 1H) ,6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz,2H) ,4. 28-4. 23 (m, 1H)，4. 13-4. 03 (m, 1H) ,4. 00-3. 94 (t，J = 9Hz，2H)，3. 16(m，2H)，
2.86-2. 81 (dd, J = 3Hz, J = 12Hz，1H)，2. 64-2. 56 (dd，J = 12Hz, J = 15Hz，lH)，
1.75-1. 73(m，2H)，I. 66-1. 61 (m，2H)，I. 56-1. 52 (t, J = 6Hz，2H)，I. 30(s，9H)，I. 21 (s,14H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例38 制备 Boc-Tyr-NG-Arg (NO2) -0CH2 (CH2) 10CH3 (3i)按照实施例30 的方法，I. 39g(4. 95mmol)Boc-Tyr 与 I. 7g(4. Olmmol)HCl Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 10CH3反应，得标题化合物0. 9g，为无色固体，产率35 % .Mp 61 V，[a]2D° = - 161.0 (c = 1.06, CH3OH), ESI-MS(m/z) :673. 7[M+Na]+ IR(KBr)3329.90,2935.98,2855.48,2343.29，1665.31，1518.00，1263.54,678.93. 1H-NMR (3 OOMHz,DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 18 (s，1H) ,8. 29-8. 26 (d, J = 9Hz, 1H)，7. 31-7. 28 (d, J = 9Hz, 1H)，
7.07-7. 04 (d, J = 9Hz,2H)，6. 94 (s, 1H)，6. 81-6. 78 (d, J = 9Hz, 1H)，6. 66-6. 63 (d, J =9Hz,2H) ,4. 28-4. 24 (m, 1H) ,4. 15-4. 07 (m，1H)，4. 04-4. 01 (t，J = 9Hz，2H)，3. 16(m，2H)，
2.8-2. 81 (dd, J = 3Hz, J = 12Hz, 1H)，2. 64-2. 56 (m, 1H)，I. 75-1. 71 (m, 2H)，I. 66-1. 61 (m,2H)，I. 56 (m, 4H)，I. 30 (s,9H), I. 21 (s, 18H), 0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz, 3H).实施例 39 制备 Boc-Tyr-NG-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 12CH3 (3 j)按照实施例 30 的方法，I. 27g (4. 52mmol) Boc-Tyr 与 I. 28g (2. 83mmol)HCl Nc-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 12CH3反应，得标题化合物0. 7g，为无色固体，产率36 % .Mp 61 V，[a]2° = - 222.9 (c = 0.67, CH3OH), ESI-MS(m/z) 702. 2[M+Na]+. IR(KBr)3330. 88,2934. 28,2856. 88,2344. 26，1665. 64，1519. 66，1261.88，674.55. 1H-NMR(3OOMHz,DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 16 (s, 1H)，8. 54 (s, 1H)，8. 29-8. 26 (d, J = 9Hz, 1H)，7. 92-7. 90 (m,1H) ,7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz，2H) ,6. 80-6. 77 (d，J = 9Hz, 1H)，6. 66-6. 63 (d, J =9Hz，2H)，4. 28-4. 27 (m, 1H)，4. 12-4. 09 (m, 1H)，4. 05-4. 01 (t, J = 6Hz，2H)，3. 16 (m,2H) ,2. 87-2. 81 (dd, J = 3Hz J = 15Hz 1H) ,2. 61-2. 51 (dd, J = 12Hz, J = 18Hz,1H)，I. 76-1. 74(m，2H)，I. 70-1. 62 (m, 2H)，I. 56-1. 52 (t，J = 6Hz，2H)，I. 30(s，9H)，
1.23-1. 21(m,22H),0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例40 制备 Boc-Tyr-NG-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 14CH3 (3k)按照实施例30 的方法，I. 43g (5. 08mmol) Boc-Tyr 与 I. 81g (3. 77mmol)HCl Nc-Arg(NO2)-OCH2(CH2)14CH3反应，得标题化合物I. 2g，为无色固体，产率45 % .Mp 65 V，[a]2° = - 148.9 (c = 1.18, CH3OH), ESI-MS(m/z) 729. 5[M+Na]+.IR(KBr) :3325.38,2925.23,2854.50,2344. 11，1673.64，1516.47，1262.22,1166.50，686. 41. 1H-NmrGoomHz, DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 16 (s，1H) ,8. 53 (s, 1H) ,8. 29-8. 26 (d, J =9Hz, 1H), 7. 31-7. 28 (d, J = 9Hz, 1H)，7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz，2H)，6. 80-6. 77 (d, J = 9Hz,1H) ,6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz，2H)，4. 29—4. 25 (m，1H)，4. 12—4. 08 (dd，J = 3Hz, J = 9Hz,1H),4. 05-4. 01 (t, J = 6Hz，2H)，3. 16(m，2H)，2.86-2.81(dd，J = 3Hz, J = 12Hz，lH)，
2.64-2. 56(dd, J = 9Hz, J = 12Hz, 1H)，I. 75-1. 74(m，2H)，I. 69-1. 62 (m, 2H)，I. 56-1 . 52 (t,J = 6Hz,2H)，I. 30(s,9H)，I. 23-1. 21(m,26H) ,0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例41 制备 Boc-Tyr-NG-Arg (NO2) -OCH2 (CH2) 16CH3 (31)按照实施例30 的方法，I. 28g (4. 56mmol) Boc-Tyr 与 I. 77g (3. 48mmol)HCl Nc-Arg(NO2)-OCH2(CH2)16CH3反应，得标题化合物I. lg，为无色固体，产率43 % .Mp 74 V，[afo = - 100.6 (c = 2.13, CH3OH), ESI-MS(m/z) 757. 5[M+Na]+.IR(KBr) :3319. 66,2924. 78,2853. 44,2344. 15，1652. 06，1520. 03，1254. 32，1171. 41，esgje.iH-MffiOOOMHz’DMSO-cy 8 /ppm = 9. 26 (s, m), 8. 53 (s, IH), 8. 28-8. 26 (d,J = 6Hz, 1H) ,7. 31-7. 28 (d, J = 9Hz，1H)，7. 07-7. 04 (d，J = 9Hz，2H)，6. 93-6. 86 (m，1H) ,6. 79-6. 76 (d, J = 9Hz，1H)，6. 66—6. 63 (d，J = 9Hz，2H)，4. 38 (s，1H)，4. 27 (m，1H)，
4.09-4. 01 (t, J = 12Hz,2H)，3. 16 (s, 2H)，2. 86-2. 82 (m, 1H)，2. 65-2. 57 (t, J = 12Hz, 1H)，
I.76-1. 74 (m, 1H)，I. 67-1. 62 (m, 1H)，I. 56-1. 52 (m, 4H)，I. 30(s，9H)，I. 23-1. 21(m，30H)，
0.87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例42制备Tyr-Arg将900mg(l. 573mmol)Boc-Tyr-Nc-Arg(NO2)-OBzl 用 15ml CH3OH 溶解，再力口入270mg Pd/C(5% )，减压排出反应瓶中的空气，通入氢气置换，反复置换三次后，通氢气室温搅拌反应，直至TLC显示Boc-Tyr-Nt=-Arg (NO2) -OBzl消失。停止反应，滤除Pd/C，滤液减压浓缩至干，得Boc-Tyr-Arg 673mg,为无色固体。取Boc-Tyr-Arg 673mg溶于适量乙酸乙酯，加入约15ml 4N盐酸乙酸乙酯液，室温搅拌3小时，TLC显示原料点消失。反应混合液在室温下减压浓缩，残留物再用乙酸乙酯溶解并室温下浓缩，如此反复5次；然后向浓缩物中加入乙醚，室温下减压浓缩，如此反复5次，直至除净游离的氯化氢，得标题化合物480mg，为无色固体，产率91 % . Mp120-121 °C, [a]2° = - 57.3 (c = 1.35, CH3OH), ESI-MS (m/z) 338. 2 [M+Na]+. IR(KBr)3169. 98，1665. 50，1514. 29，1419. 94，1234. 60,688. 17. 1H-匪R(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm=9. 42-9. 39 (m, 1H) ,9. 21-9. 19 (d, J = 6Hz, 1H) ,9. 09-9. 07 (d, J = 6Hz, 1H) ,8. 26 (m, 2H)，
7.97 (s, 1H)，7. 59-7. 53 (t, J = 9Hz, 1H)，7. 42-7. 36 (t, J = 9Hz, 1H)，7. 25-7. 22 (d, J =9Hz, 1H), 7. 14-7. 12 (d, J = 6Hz，2H)，6. 72-6. 69 (d, J = 9Hz，2H)，4. 26-4. 21 (dd, J = 6Hz,J = 9Hz, 1H)，4. 10 (m, 1H)，3. 14-3. 12 (m, 2H)，3. 07-3. 06 (m, 1H)，2. 88-2. 80 (dd, J = 9Hz, J=15Hz, 1H)，I. 80-1. 78 (m, 1H)，I. 72-1. 66 (m, 1H)，I. 59-1. 57 (m, 2H).实施例43 制备 Tyr-Arg-NHCH2 (CH2) 6CH3 (5a)按照实施例42 的方法，以 800mg (I. 35mmol) Boc-Tyr_NG-Arg (NO2)-NHCH2 (CH2) 6CH3为原料，得标题化合物560mg，为无色固体，产率93 % Mp 122-123 V，[a]2D° = - 38.4 (c = 1.45, CH3OH), ESI-MS (m/z) :449. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3255. 66,2936. 75, 1656. 00, 1533. 13, 1235. 53, 570. 88. 1H-MirOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm =
9.32 (s，1H) ,8. 87-8. 85 (d, J = 6Hz, 1H) ,8. 33-8. 31 (d, J = 6Hz, 1H) ,8. 28 (m, 1H)，
7.99 (m, 1H), 7. 50 (s, 2H), 7. 26 (s, 1H), 7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz，2H)，6. 70-6. 67 (d，J =9Hz，2H)，4. 27-4. 21 (Q, J = 6Hz, 1H), 4. 06 (s, 1H)，3. 15-3. 12(m，2H)，3. 06-3. 00 (m, 3H)，
2.88-2. 82 (dd, J = 6Hz, J = 12Hz 1H)，I. 73 (m，2H)，I. 58-1. 45 (m，2H)，I. 39 (m，2H)，
I.23 (s, 10H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例44 制备 Tyr-Arg-NHCH2 (CH2) 8CH3 (5b)按照实施例42 的方法，以 700mg (I. 13mmol) Boc-Tyr-NG-Arg (NO2)-NHCH2 (CH2) 8CH3为原料，得标题化合物530mg，为无色固体，产率99 % Mp 125-126 V，[a]2D° = - 46.4 (c = 1.66, CH3OH), ESI-MS (m/z) :477. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3196. 55,
2935.38，1656. 57，1533. 25，1238. 09,569. 57. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 39 (s,1H) ,8. 88-8. 86 (d, J = 6Hz，2H)，8. 31-8. 30 (d, J = 3Hz, 1H) ,8. 27-8. 25 (d, J = 6Hz, 1H)，
8.01-7. 96 (m, 2H), 7. 49 (s, 2H), 7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz，2H)，6. 70—6. 67 (d，J = 9Hz，2H)，
4.28-4. 24 (m, 1H)，4. 06-4. 05 (m, 1H)，3. 12 (m, 2H)，3. 05-3. 01 (m, 3H)，2. 87-2. 80 (dd, J =6Hz, J = 15Hz 1H)，I. 72-1. 63 (m, 1H)，I. 58-1. 57 (m, 1H)，I. 51-1. 45 (m, 2H)，I. 22 (s, 14H)，0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例45 制备 Tyr-Arg-NHCH2 (CH2) 10CH3 (5c)按照实施例42 的方法，以 930mg (I. 43mmol) Boc-Tyr_NG-Arg (NO2)-NHCH2 (CH2) 10CH3为原料，得标题化合物710mg，为无色固体，产率98 % Mp 129-130 V，[a]2D° = - 65.6 (c = 1.58, CH3OH), ESI-MS (m/z) :505. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3413. 08,
2936.07，1650. 61，1241. 43，1109. 47,574. 11. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 31 (s,1H) ,8. 88-8. 86 (d, J = 6Hz，1H)，8. 33—8. 31 (d，J = 6Hz，1H)，8. 28 (m，1H)，8. 00 (s，2H)，
7.51 (s，1H) ,7.33-7. 24 (m，2H) ,7.07-7. 04 (d，J = 9Hz，2H)，6. 70—6. 67 (d，J = 9Hz，2H)，
4.42-4. 40 (m, 1H)，4. 06 (s, 1H)，3. 12 (m, 2H)，3. 06-3. 00 (Q, J = 6Hz,3H)，2. 88-2. 81 (dd,J = 6Hz, J = 15Hz，1H)，I. 68-1. 64(m，2H)，I. 59-1. 48(m，2H)，I. 38(m，2H)，I. 22(s，18H)，
0.87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例46 制备 Tyr-Arg-NHCH2 (CH2) 12CH3 (5d)按照实施例42 的方法，以 806mg (I. 19mmol) Boc-Tyr_NG-Arg (NO2)-NHCH2 (CH2) 12CH3为原料，得标题化合物618mg，为无色固体，产率79 % . Mp 138-139 V，[a]2D° = - 31.7 (c = 2.68, CH3OH), ESI-MS (m/z) :533. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3368. 55,3200. 21,2920. 03，1658. 31，1472. 16，1229. 38,680. 09. 1H-NMR(30OMHz, DMS0_d6) 8 /ppm=9. 38 (s, 1H) ,8. 87-8. 85 (d, J = 6Hz，1H)，8. 22 (s，2H)，8. 00-7. 98 (d，J = 6Hz，2H)，
7.39-7. ll(m，3H)，7. 07-7. 05 (d, J = 6Hz，2H)，6. 70-6. 67 (d, J = 9Hz，2H)，4. 26-4. 21 (m,1H) ,4. 08-4. 04(t, J = 6Hz，2H) ,3. 14-3. 12(m，2H) ,3. 06-3. 00 (Q, J = 6Hz，3H)，2.88-2. 82 (dd, J = 6Hz, J = 12Hz 1H)，I. 69 (m，1H)，I. 59-1. 49 (m，3H)，I. 39 (m，2H)，
I.23(s,22H) ,0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例47 制备 Tyr-Arg-NHCH2 (CH2) 14CH3 (5e)按照实施例42 的方法，以 400mg (0. 57mmol) Boc_Tyr-NG-Arg (NO2)-NHCH2 (CH2) 14CH3为原料，得标题化合物320mg，为无色固体，产率94 % . Mp 142-143 V，[a]2D° = - 68.0 (c = 1.48, CH3OH), ESI-MS (m/z) :561. 8 [M+H]+ IR (KBr) :3222. 60,
2926.35，1650. 41,1551. 58，1474. 24，1227. 14,681. 87. 1H-MffiGOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm=9. 40 (s, 1H) ,8. 89-8. 87 (d, J = 6Hz，1H)，8. 25 (s，3H)，8. 01-7. 99 (d，J = 6Hz，2H)，
7.46-7. 44 (m, 1H)，7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz,3H)，6. 70-6. 67 (d, J = 9Hz,2H)，4. 25-4. 21 (m,1H)，4. 06 (m, 1H)，3. 14-3. 12 (m, 2H)，3. 04-3. 02 (m, 3H)，2. 89-2. 82 (dd, J = 6Hz, J = 9Hz1H)，I. 69(m，2H)，I. 59-1. 49 (m, 2H)，I. 39 (m, 2H)，I. 22(s，26H)，0. 87-0. 83 (t, J = 6. OHz,3H).实施例48 制备 Tyr-Arg-NHCH2 (CH2) 16CH3 (5f)按照实施例42 的方法，以 500mg (0. 69mmol) Boc-Tyr_NG-Arg (NO2)-NHCH
2(CH2) 16CH3为原料，得标题化合物300mg，为无色固体，产率70 % . Mp 145-146 V，[a]2D° = - 45.3 (c = 1.34, CH3OH), ESI-MS (m/z) :589. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3292. 18,
2927.61，1657. 73，1515. 64，1240. 28,571. 51. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 36 (s,1H) ,8. 87-8. 85 (d, J = 6Hz, 1H) ,8. 33-8. 31 (d, J = 6Hz, 1H) ,8. 28-8. 27 (d, J = 3Hz, 1H)，
7.98 (m, 2H)，7. 47-7. 16 (m, 3H)，7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz,2H)，6. 70-6. 65 (d, J = 9Hz,2H)，
4.23 (m, 1H)，4. 06 (s, 1H)，3. 12 (m, 2H)，3. 04-3. 00 (m, 3H)，2. 89-2. 81 (dd, J = 9Hz, J = 15Hz1H)，I. 68-1. 64 (m, 2H)，I. 59-1. 49 (m, 2H)，I. 38 (m, 2H)，I. 22 (s, 30H)，0. 86-0. 82 (t, J =
6.0Hz,3H).实施例49 制备 Tyr-Arg-OCH2 (CH2) 6CH3 (5g)按照实施例42 的方法，以 600mg(I. Olmmol)Boc-Tyr-Nc-Arg(NO2) -OCH2(CH2) 6CH3为原料，得标题化合物380mg，为无色固体，产率77 % . Mp 106-107 V，[a]2D° =-79.2 (c= 1.33, CH3OH), ESI-MS (m/z) :449. 3 [M+H]+ IR (KBr) :3187. 11,
2937.87，1662. 85，1513. 63，1232. 09,573. 29. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 32 (s,1H) ,9. 28-9. 26 (d, J = 6Hz, 1H) ,8. 32-8. 27 (m，3H)，8. 02 (s，1H)，7. 51-7. 41 (m, 1H)，
7.14-7. 11 (d，J = 9Hz，2H)，7. 02-6. 93 (m, 1H)，6. 72-6. 69 (d, J = 9Hz，2H)，4. 28-4. 27 (m,1H)，4. 07-4. 02(m，3H)，3. 13-3. 11 (m，2H)，3. 07-3. 05 (m，1H)，2. 86-2. 78 (dd，J = 9Hz,J = 12Hz, 1H)，I. 80-1. 77(m,2H)，I. 72-1. 67 (m, 2H)，I. 57-1. 56 (m, 2H)，I. 22 (s, 10H)，0.85-0. 81 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例50 制备 Tyr-Arg-OCH2 (CH2) 8CH3 (5h)按照实施例42 的方法，以 600mg (0. 96mmol) Boc-Tyr-Nc-Arg (NO2) -OCH2(CH2) 8CH3为原料，得标题化合物420mg，为无色固体，产率85 % . Mp 107-108 V，[a]2D° = - 31.1 (c = 5.74, CH3OH), ESI-MS (m/z) :478. 4 [M+H]+ IR (KBr) :3442. 53,3221. 27,3093. 95, 2941. 87，1656. 80，1221. 75. 1H-MffiOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm =
9.45 (s, 1H)，9. 27-9. 25 (d, J = 6Hz, 1H)，8. 30-8. 29 (d, J = 3Hz, 1H)，8. 25 (s, 1H)，8. 00 (m,1H), 7. 58-7. 55 (m, 1H), 7. 44-7. 41 (m, 1H), 7. 14-7. 11 (d，J = 9Hz,2H) ,6. 99-6. 93 (t, J =9Hz, 1H)，6. 72-6. 69 (d, J = 9Hz,2H)，4. 30-4. 26 (m, 1H)，4. 19-4. 14 (m, 3H)，3. 13-3. 10 (m,2H) , 3. 07-3. 05 (m, 1H) , 2. 85-2. 77 (dd, J = 9Hz, J = 15Hz，1H)，I. 81-1. 78 (m，2H)，
I.74-1. 67 (m, 2H)，I. 62-1. 56 (m, 2H), I. 21 (s, 14H), 0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz, 3H).实施例51 制备 Tyr-Arg-OCH2 (CH2) 10CH3 (5i)按照实施例42 的方法，以 850mg(I. 31mmol)Boc-Tyr-Nc-Arg(NO2)-OCH2(CH2) 10CH3为原料，得标题化合物550mg，为无色固体，产率78 % . Mp 111-112 °C,[a]2D° = - 99.1 (c = 1.52, CH3OH), ESI-MS (m/z) :506. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3188. 23,
2932.80，1666. 24，1514. 82，1231. 76,572. 08. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 45 (s,1H)，9. 28-9. 25 (d, J = 9Hz,2H)，8. 23 (s, 3H)，8. 05-8. 02 (d, J = 3Hz, 1H)，7. 14-7. 11 (d，J =9Hz，3H)，6. 72-6. 69 (d, J = 9Hz，2H)，4. 31-4. 25 (q, J = 6Hz, 1H), 4. 06-4. 02 (t, J = 6Hz,3H), 3. 16-3. 10(q, J = 6Hz，2H)，3. 07-3. 03 (m, 1H)，2. 86-2. 78(dd, J = 9Hz, J = 15Hz, 1H) ，
1.86-1. 70(m，2H)，I. 62-1. 54(m，4H)，I. 22 (s, 18H) ,0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例52 制备 Tyr-Arg-OCH2 (CH2) 12CH3 (5 j)按照实施例42 的方法，以 600mg (0. 88mmol) Boc-Tyr-Nc-Arg (NO2) -OCH2(CH2) 12CH3为原料，得标题化合物360mg，为无色固体，产率72 % . Mp 136-137 V，[a]2D° = - 85.6 (c = 1.18, CH3OH), ESI-MS (m/z) :534. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3180. 27,
2928.00. 1661. 37，1510. 73，1228. 78,669. 56. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 44 (s,1H) ,9. 27-9. 25 (d, J = 6Hz，2H)，8. 30-8. 28 (d，J = 6Hz，1H)，8. 25 (m，1H)，8. 00 (m，1H)，
7.44-7. 41(m,2H),7. 13-7. 11 (d, J = 6Hz，2H)，6. 72-6. 69 (d, J = 9Hz，2H)，4. 29-4. 25 (m,1H)，4. 07-4. 02 (m, 3H)，3. 12-3. 10 (m, 2H)，3. 08-3. 05 (m, 1H)，2. 84-2. 77 (dd, J = 9Hz,J = 15Hz, 1H)，I. 84-1. 76(m，2H)，I. 74-1. 66 (m, 2H)，I. 62-1. 55 (m, 2H)，I. 22(s，22H)，0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例53 制备 Tyr-Arg-OCH2 (CH2) 14CH3 (5k)按照实施例42 的方法，以 750mg(I. 06mmol)Boc-Tyr-Nc-Arg(NO2) -OCH2(CH2) 14CH3为原料，得标题化合物510mg，为无色固体，产率81 % . Mp 140-141 V，[a]2D° = - 23.7 (c = 3.89, CH3OH), ESI-MS (m/z) :562. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3185. 75,
2929.25，1661. 37，1512. 85，1232. 12，832. 85,653. 79. 1H-NmrGOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm =
9.44 (s, 1H)，9. 26-9. 24 (d, J = 6Hz,2H)，8. 30-8. 28 (d, J = 6Hz, 1H)，8. 25 (s, 1H)，7. 99 (m,1H)，7. 50(m，lH)，7. 13-7. ll(d，J = 6Hz，2H)，6. 99—6. 96 (d，J = 9Hz，1H)，6. 72—6. 69 (d，J = 9Hz，2H)，4. 29-4. 28 (m, 1H)，4. 07-4. 02 (m, 3H)，3. 13-3. 10 (m, 2H)，3. 07-3. 02 (m, 1H)，
2.85-2. 77(dd, J = 9Hz J = 15Hz, 1H)，I. 78-1. 74(m，2H)，I. 72-1. 67 (m, 2H)，I. 62-1. 55 (m,2H)，I. 22(s,26H) ,0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例54 制备 Tyr-Arg-OCH2 (CH2) 16CH3 (51)按照实施例42 的方法，以 700mg(0. 96mmol) Boc-Tyr-Nc-Arg (NO2)-OCH2(CH2) 16CH3为原料，得标题化合物500mg，为无色固体，产率83 % . Mp 145-146 V，[a]2D° = - 21.8 (c = 2.2, CH3OH), ESI-MS (m/z) :590. 6 [M+H]+ IR (KBr) :3189. 43,2929. 08，1661. 01，1514. 60，1232. 87. 833. 09,575. 19. 1H-NmrGOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm =
9.44 (s, 1H)，9. 27-9. 25 (d, J = 6Hz,2H)，8. 30-8. 29 (d, J = 3Hz, 1H)，8. 26 (m, 1H)，8. 00 (m,1H)，7. 51(m，lH)，7. 14-7. 11 (d, J = 9Hz,2H) ,7. 02-6. 99 (d, J = 9Hz, 1H) ,6. 72-6. 69 (d,J = 9Hz，2H)，4. 29-4. 25 (m, 1H)，4. 06-4. 02 (m, 3H)，3. 15-3. 10 (m, 2H)，3. 07-3. 00 (m, 1H)，
2.85-2. 77(dd, J = 9Hz, J = 15Hz, 1H)，I. 78-1. 74(m，2H)，I. 72-1. 65 (m, 2H)，I. 62-1. 53 (m,2H)，I. 23(s,30H) ,0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).试验例I本发明的化合物5a_l的镇痛活性实验I)受试化合物本发明的化合物5a_l阳性对照品阿司匹林；2)实验动物ICR小鼠，雄性，体重20±2g;每12只小鼠一组，空白及阳性对照各一组。
3)剂量设置阿司匹林 165 u mol/kg, Tyr-Arg 100 u mol/kg, 5a-1 10 u mol/kg,
均单次灌胃。药物配制生理盐水(NS)溶解。4)给药方案0. 2ml溶液/鼠。5)动物模型ICR雄性小鼠使用前静息I天，操作间保持室内温度22°C，每组小鼠12只。基础痛阈的测定是在开始时，先测三次，每次间隔5分钟，取其平均值为基础痛阈。每次试验设生理盐水组为平行对照。6)痛阈提高率的测定灌胃后每30min测定一次痛阈值，共测定6组180min。痛阈改变以下列公式表示痛阈提高％ =[(给药后痛阈-基础痛阈)/基础痛阈]X 100%。7)统计方法本实验数据统计均采用t检验和方差分析，以X土SD表示。8)实验结果受试化合物热辐射甩尾实验痛阈提高率结果如表I所示。在10 y mol/kg剂量下受试化合物经灌胃给药后对疼痛有显著的抑制作用。表I化合物5a_l的镇痛作用
痛 W 提 ft (X ± SD%)
化合物30 min60 min90 min120 min 150 nun 180 min
5a 46.03 ± B.49c 92.05 ± 12.36e 66.41 ± 10.77e 53.20 ± 11.68e 35.77±8.11e 21.78±4.62e
Sb52.75 ± 10.38c86.04 ±9.57e44.80 ± 11.06s36.43 ± 7.34c21.67±5.008 19.12±5.43e
Sc48 69 ±9.51c88.53 ±9.95e53.63 ± 10.Olc43.46 ± 8.55e25 11±5 90e 18.67±4.41e
Sd52.90 ±9.02c85.99 ± 11.79e44.22 ± 9.07d31.24 ± 6.90c24.76±5.52e 11.92 ±2.90
Se45.96 ±9.91c76.54 ± 9.69e43.59 ± 8.09c33.57 ± 5.72c17 70±3 92a 10.75 ±1.9权利要求
1.一种通式为I的化合物Tyr-Arg-XCH2(CH2)nCH3 I 式中，X为NH或O ;式中，n 为 6、8、10、12、14 或 16。
2.一种制备权利要求I所述的化合物的方法，其特征在于包括以下步骤 (1)浓硫酸、浓硝酸条件下，Arg硝基化得Ne-Arg(NO2)； (2)弱碱性水二氧六环条件下,Nti-Arg(NO2)与(Boc) 20反应制得Na-Boc-Nti-Arg (NO2)； (3)在DCC和HOBt存在下，Na-Boc-Nc-Arg(NO2)在无水THF中与脂肪胺或脂肪醇缩合成 Na-Boc-Ne-Arg (NO2) -XCH2 (CH2) nCH3 ； (4)在含氯化氢的乙酸乙酯中，N°-Boc-Nc-Arg (NO2) -XCH2 (CH2) nCH3脱Boc保护，得Nc-Arg (NO2) -XCH2 (CH2) nCH3 ；(5)在DCC 和 HOBt 存在下，Boc-Tyr 在无水 THF 中与 NG_Arg (NO2) _XCH2_ (CH2) nCH3 缩合，制备得到 Boc-Tyr-Nc-Arg (NO2) -XCH2 (CH2) nCH3 ； (6)H2/Pd条件下 Boc-Tyr-NG-Arg(N02)-XCH2(CH2)nCH3 脱-NO2 保护，得Boc-Tyr-Arg-XCH2 (CH2) nCH3 ； ⑵在含氯化氢的乙酸乙酯中，Boc-Tyr-Arg-XCH2 (CH2)nCH3脱Boc保护，即得Tyr-Arg-XCH2(CH2)nCH3O
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述步骤(3)中所述的脂肪胺为正八胺、正十胺、正十二胺、正十四胺、正十六胺或正十八胺；所述脂肪醇为正八醇、正十醇、正十二醇、正十四醇、正十六醇或正十八醇。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述Arg和Tyr均为L构型氨基酸。
5.权利要求I所述的化合物在制备镇痛和抗炎药物中的用途。
全文摘要
本发明公开了京都酚(Tyr-Arg)修饰的脂肪胺/醇衍生物及其制备方法和作为镇痛剂和抗炎剂的应用，京都酚修饰的脂肪醇/胺衍生物的结构为通式I即Tyr-Arg-XCH2(CH2)nCH3，式中X为NH或O；n为6、8、10、12、14或16。本发明采用小鼠热甩尾法模型评价了通式化合物的镇痛活性，采用小鼠耳肿胀模型评价了通式I化合物的抗炎活性，实验结果表明通式I代表的12种化合物具有优秀的镇痛作用，且在相同剂量下具有较好的抗炎活性，可应用于镇痛药和抗炎药的生产中。
文档编号C07K5/065GK102796164SQ20111013559
公开日2012年11月28日 申请日期2011年5月24日 优先权日2011年5月24日
发明者赵明, 彭师奇, 于言言 申请人:首都医科大学