专利名称：一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法
技术领域：
本发明涉及一种高熊果酚苷的制备方法，尤其是一种从植物中提取高熊果酚苷的制备方法。
背景技术：
高熊果酚苷(Homoarbutin)，分子式=C13H18O7'分子量:286.281，CAS 登录号25712-94-1，主要存在于鹿蹄草科多种植物中，其中鹿蹄草科植物鹿蹄草Pyrola calIiantha H. Andres中含量丰富。其分子式如下。现代研究表明，高熊果酚苷具有抗肿瘤作用，同时其也作为合成其它活性衍生物的原料。鹿蹄草科植物鹿蹄草Pyrola calIiantha H. Andres的全草被作为中药鹿衔草使用，能补肾强骨，祛风除湿，止咳，止血。现有技术中，尚没有适用于高纯度高熊果酚苷工业化大生产的制备工艺报道。本发明所要解决的技术问题是提供一种利于大生产操作、产品纯度高的高熊果酚苷的制备方法。为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案。取鹿蹄草全草，粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力20-40MPa，温度50_60°C，CO2流量l_3ml/g生药·π η，萃取时间80-120min，得萃取物，加入到大孔吸附树脂柱上吸附，60-80%乙醇洗脱， 收集3-8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，通过强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以0. 5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得。CO2超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%。CO2超临界萃取压力30MPa，温度55°C，CO2流量2ml/g生药· min
发明内容
CO2超临界萃取时间lOOmin。大孔吸附树脂选自DlOl型、D102型、AB_8型大孔吸附树脂中的一种。大孔吸附树脂洗脱用乙醇的浓度为70%。大孔吸附树脂洗脱用乙醇的收集量为5柱体积。强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂选自201 X 7型、201 X 4型、D201型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂中的一种。强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂选自001X7型、001X4型、DOOl型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂中的一种。制备所得高熊果酚苷可采用下列方法检测。试验例1 HPLC法测定高熊果酚苷纯度色谱条件
色谱柱十八烷基硅烷键合胶硅胶为填充剂；流动相甲醇-水(90 10)；流速lmL/ min ；检测波长:224nm ；柱温:30°C。测定方法
精密称取高熊果酚苷ang，置于50mL量瓶中，加人甲醇20mL，超声振荡使溶解，甲醇定容至刻度，吸取10 μ L，注入高效液相色谱仪，采用归一化法测定样品纯度。采用本发明制备高熊果酚苷，利于大生产操作，能耗小，污染小。下面将结合具体实施方式
对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1
取鹿蹄草全草10Kg，粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4%，萃取压力20MPa，温度50°C，CO2流量lml/g生药·π η，萃取时间80min，得萃取物，加入到DlOl型大孔吸附树脂柱上吸附，60%乙醇洗脱，收集3倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，通过201X7型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以 0. 5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过001 X 7型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得高熊果酚苷2. 5g，经 HPLC检测，纯度为95. 5%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。实施例2
取鹿蹄草全草10Kg，粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为6%，萃取压力40MPa，温度60°C，CO2流量3ml/g生药·π η，萃取时间120min，得萃取物，加入到D102型大孔吸附树脂柱上吸附，80%乙醇洗脱，收集8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，通过201X4型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附， 以0. 5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过001 X 4型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得高熊果酚苷3. 2g， 经HPLC检测，纯度为94. 4%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。
实施例3
取鹿蹄草全草10Kg，粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力30MPa，温度55°C，CO2流量2ml/g生药·π η，萃取时间lOOmin，得萃取物，加入到AB-8型大孔吸附树脂柱上吸附，70%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，通过D201型型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附， 以0. 5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过DOOl型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得高熊果酚苷2. 9g，经 HPLC检测，纯度为97. 6%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。
权利要求
1.一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述的方法由下列步骤组成 取鹿蹄草全草，粉碎，加入到(X)2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力20-40MPa，温度50-60°C，CO2流量l_3ml/g生药· min， 萃取时间80-120min，得萃取物，加入到大孔吸附树脂柱上吸附，60-80%乙醇洗脱，收集3_8 倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，通过强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以 0. 5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得。
2.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述CO2 超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%。
3.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述(X)2 超临界萃取压力30MPa，温度55°C，CO2流量2ml/g生药· min。
4.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述CO2 超临界萃取时间lOOmin。
5.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂选自DlOl型、D102型、AB-8型大孔吸附树脂中的一种。
6.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂洗脱用乙醇的浓度为70%。
7.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂洗脱用乙醇的收集量为5柱体积。
8.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂选自201 X 7型、201 X 4型、D201型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂中的一种。
9.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂选自001 X 7型、001 X 4型、DOOl型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂中的一种。
全文摘要
本发明涉及一种操作简便、污染小、能耗少的从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，工艺步骤为取鹿蹄草全草，加入到CO2超临界萃取器中，得萃取物，加入到大孔吸附树脂柱上吸附，60-80%乙醇洗脱，通过强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以0.5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得。采用本发明制备高熊果酚苷，产品纯度高，易于实现产业化放大。
文档编号C07H15/203GK102250163SQ20111015060
公开日2011年11月23日 申请日期2011年6月7日 优先权日2011年6月7日
发明者张发成, 王峰, 王琳 申请人:苏州派腾生物医药科技有限公司