专利名称：一种鹤草酚的制备方法
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，特别是涉及一种鹤草酚的制备方法。
背景技术：
鹤草酚(Agrimophol)又叫仙鹤草酚，是一种间苯三酚类化合物，CAS号 65792-05-4分子式C26H34O8,分子量474. 55，分子结构式
鹤草酚，淡黄色结晶，熔点138. 5-139. 5°C。易溶于氯仿、苯，微溶于甲醇、乙醇，遇三氯化铁呈棕褐色，遇浓硫酸呈橙红色。鹤草酚对猪肉绦虫囊尾蚴、幼虫、莫氏绦虫和短膜壳绦虫均有确切的杀虫作用。仙鹤草为蔷薇科Rosaceae龙芽草属Agrimonia植物，又叫鹤草芽、龙牙草、施州龙牙草、瓜香草、黄龙尾等，全草含仙鹤草素、仙鹤草内酯、鞣质(为焦性儿茶酚鞣质、没食子鞣质等)、留醇、有机酸、酚性成分、皂甙等，具有止血、杀虫、抗肿瘤作用。现有从仙鹤草中提取鹤草酚的方法，多是采用硅胶柱分离。杜超采用通过溶剂提取及反复硅胶柱色谱，制备薄层，S^hadex LH-20和反复重结晶等手段制备得到鹤草酚等 10个成分。传统的柱层析分离，会造成产品死吸附，导致产品收率低，而且操作复杂，一般较难放大和再现。
发明内容
本发明的目的克服现有技术的不足，提供一种鹤草酚的制备方法，该方法利用高速逆流色谱分离，操作简单，收率高。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的 一种鹤草酚的制备方法，其特征在于包含以下步骤
1)取仙鹤草药材粉碎，加5-10倍量60-90%乙醇溶液回流提取2-3次，提取液加活性炭脱色，过滤浓缩，浓缩液用氯仿萃取，萃取液回收试剂，得粗提物；
2 )将上述粗提物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器监测，根据图谱收集目标成分，流分减压回收试剂，干燥即得高纯度鹤草酚。所述步骤2)中的高速逆流色谱溶剂系统可选正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，配比 2-5 5-7 3-5 4-5，取上相做流动相，下相用磷酸二氢钠调节pH5-6做固定相。所述步骤2 )中的高速逆流色谱溶剂系统可选氯仿、甲醇、水，配比5-10 3-7 4-7， 取下相做流动相，上相用三乙胺调节PH7. 5-8做固定相。本发明的优点是方法采用高速逆流色谱法，这种方法是液液分配色谱，不产生死吸附，分离过程产品不损失，配合紫外检测器在线监测，操作简单，所得物质纯度高，制备周期短，制备量较大，可连续化生产。
下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1:
仙鹤草药材粉碎，称取^ig,加10倍量60%乙醇溶液回流提取2次，提取液加300g活性炭脱色，过滤浓缩至250ml，加氯仿萃取3次，萃取液回收试剂，得粗提物20g。取正己烷、 乙酸乙酯、甲醇、水，按2 :5:3: 4比例在分液漏斗中充分混合，取下相用磷酸二氢钠调节PH6充满高速逆流色谱柱中做固定相，转动主机，转速调节为SOOrpm，泵入上相，待建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，同时取流动相溶解粗提物，由进样阀进样，根据紫外检测器图谱，收集目标成分，回收试剂，干燥得到1. 2g鹤草酚，经HPLC检测，含量98. 5%。实施例2:
仙鹤草药材粉碎，称取^g，加6倍量90%乙醇溶液回流提取3次，提取液加500g活性炭脱色，过滤浓缩至200ml，加氯仿萃取3次，萃取液回收试剂，得粗提物17g。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按5 :7:3: 5比例在分液漏斗中充分混合，取下相用磷酸二氢钠调节 PH5充满高速逆流色谱柱中做固定相，转动主机，转速调节为900rpm，泵入上相，待建立动态平衡后，流速调节为3ml/min，同时取流动相溶解粗提物，由进样阀进样，根据紫外检测器图谱，收集目标成分，回收试剂，干燥得到1. 3g鹤草酚，经HPLC检测，含量97. 3%。实施例3:
仙鹤草药材粉碎，称取^ig,加10倍量80%乙醇溶液回流提取2次，提取液加500g活性炭脱色，过滤浓缩至250ml，加氯仿萃取3次，萃取液回收试剂，得粗提物19g。取氯仿、甲醇、水，按5 3 5比例在分液漏斗中充分混合，取上相用三乙胺调节pH7. 5充满高速逆流色谱柱中做固定相，转动主机，转速调节为700rpm，泵入下相，待建立动态平衡后，流速调节为lml/min，同时取流动相溶解粗提物，由进样阀进样，根据紫外检测器图谱，收集目标成分，回收试剂，干燥得到1. Ig鹤草酚，经HPLC检测，含量98. 1%。实施例4:
仙鹤草药材粉碎，称取^ig,加10倍量80%乙醇溶液回流提取2次，提取液加500g活性炭脱色，过滤浓缩至250ml，加氯仿萃取3次，萃取液回收试剂，得粗提物19g。取氯仿、甲醇、水，按10 7 7比例在分液漏斗中充分混合，取上相用三乙胺调节pH8充满高速逆流色谱柱中做固定相，转动主机，转速调节为750rpm，泵入下相，待建立动态平衡后，流速调节为3ml/min，同时取流动相溶解粗提物，由进样阀进样，根据紫外检测器图谱，收集目标成分，回收试剂，干燥得到1. 3g鹤草酚，经HPLC检测，含量97. H
权利要求
1.一种鹤草酚的制备方法，其特征在于包含以下步骤1)取仙鹤草药材粉碎，加5-10倍量60-90%乙醇溶液回流提取2-3次，提取液加活性炭脱色，过滤浓缩，浓缩液用氯仿萃取，萃取液回收试剂，得粗提物；2 )将上述粗提物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器监测，根据图谱收集目标成分，流分减压回收试剂，干燥即得高纯度鹤草酚。
2.如权利要求1所述从仙鹤草中提取鹤草酚方法，其特征在于所述步骤2)中的高速逆流色谱溶剂系统可选正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，配比2-5 5-7 3-5 4-5，取上相做流动相，下相用磷酸二氢钠调节PH5-6做固定相。
3.如权利要求1所述从仙鹤草中提取鹤草酚方法，其特征在于所述步骤2)中的高速逆流色谱溶剂系统可选氯仿、甲醇、水，配比5-10:3-7:4-7，取下相做流动相，上相用三乙胺调节pH7. 5-8做固定相。
全文摘要
本发明属于天然药物化学领域，特别是涉及一种鹤草酚的制备方法，方法是1)取仙鹤草药材粉碎，加5-10倍量60-90%乙醇溶液回流提取2-3次，提取液加活性炭脱色，过滤浓缩，浓缩液用氯仿萃取，萃取液回收试剂，得粗提物；2)将上述粗提物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器监测，根据图谱收集目标成分，流分减压回收试剂，干燥即得高纯度鹤草酚。本方法采用高速逆流色谱制备鹤草酚，工艺简单，制备周期短，产品收率高。
文档编号C07C45/78GK102329206SQ20111021005
公开日2012年1月25日 申请日期2011年7月26日 优先权日2011年7月26日
发明者刘东锋, 李法庆 申请人:苏州宝泽堂医药科技有限公司