专利名称：一种从植物中提取蜕皮甾酮的方法
技术领域：
本发明涉及一种从植物中提取蜕皮留酮的方法，特别是涉及一种采用酶解和膜过滤技术从植物中提取蜕皮留酮的方法。
背景技术：
蜕皮留酮又叫蜕皮激素。50年代科学家从家蚕蛹中纯化而得两种活性物质，能诱导昆虫蜕皮，因而被称为α-蜕皮激素和β-蜕皮激素。现在已从1000多种植物中分离出许多蜕皮激素的类似物，中国云南省已经从露水草、江苏省从土牛膝、浙江省从百日青等植物中获得大量植物蜕皮留酮。植物蜕皮留酮在植物中起什么作用还不清楚。如果从植物和昆虫关系来说，植物蜕皮留酮属于一种保护性物质，能促进幼虫早日蜕皮，化为成虫，避免昆虫的幼虫过多地侵食植物。在中国江苏、浙江一带养蚕地区，当蚕取食的桑叶不足时，从植物中提取蜕皮留酮可以喷到五龄蚕儿身体上，促进蚕」L化蛹。研究发现蜕皮留酮不仅触发昆虫，甲壳类动物的蜕皮过程的开始，而且能确保整个蜕皮过程的持续进行，并促进新的表皮鞣化等步骤。促使昆虫分泌新的外表皮，新的内表皮的形成，蜕皮液的产生，老的外表皮的消化，新老皮层溶解、分离，老的表皮蜕去，新的表皮的膨胀，鞣化和内表皮的加厚等步骤，而蜕皮激素的分泌活动正好在蜕皮过程以前达到最高峰。蜕皮留酮不仅广泛的用在养殖业，还可用做杀虫剂以及化妆品和医药保健方面。植物蜕皮留酮提取方法，多采用水提取或醇提取，浓缩液采用萃取或树脂分离，再采用氧化铝或硅胶分离。传统工艺为露水草粉碎一乙醇或水回流提取一浓缩的浸膏采用乙醇或乙醇、乙酸乙酯混合溶液溶解一再次浓缩上氧化铝柱或正丁醇萃取后再上氧化铝柱分离一浓缩结晶。文献“从露水草中提取纯化蜕皮激素工艺研究”公开的方法是露水草为原料，用水提取，加澄清剂后大孔树脂法分离，通过重结晶，分离出蜕皮激素。如专利(申请号201010039119. 1) “一种从露水草中提取蜕皮激素的方法及其蜕皮激素”，该专利公开的方法是露水草水提或醇提后，减压浓缩至相对密度1. 05 1. 20的液体，用碱调pH 至6 10，再用正丁醇乙酸乙酯为4 6 0.5 9. 5的混合溶剂萃取，经洗涤，并减压浓缩至相对密度为1. 2 1. 3的流浸膏，加50 95%甲醇或乙醇溶解稀释后过强碱型阴离子交换树脂，经洗脱、减压浓缩并减压干燥即得所述的蜕皮激素。如上所述，现有工艺存在着能耗高、提取率低、工艺操作繁琐和生产成本高等诸多技术缺陷。
发明内容
本发明的目的是克服现有方法的不足和技术缺陷，提供一种从植物中提取蜕皮甾酮的方法。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的一种从植物中提取蜕皮留酮的方法，其特征在于以下步骤
a.原料粉碎，加入生物酶在40-50°C条件下酶解2-3小时后，加水升温至70_80°C，保温浸泡1-2小时，提取2-3次，过滤得提取液；b.上述提取液加入超滤膜超滤，透过液再加入纳滤膜浓缩，浓缩液加入等体积乙醇溶液滤过，再加入乙酸乙酯萃取，萃余液加入活性炭回流脱色，脱色液滤过浓缩至无醇结晶， 结晶物干燥得蜕皮甾酮。所述的步骤a中的原料可选鸭跖草科植物珍珠露水草、唇形科植物紫背金盘和苋科植物土牛膝。所述的步骤a中的生物酶为纤维素酶、淀粉酶和果胶酶中的一种或任意组合，用量为原料量的1-3%。。所述的步骤b中的超滤膜为截留分子量2000-5000的中空纤维素超滤膜，纳滤膜为截留分子量100-300的中空纤维素纳滤膜。本发明的积极效果是
(1)方法通过添加生物酶酶解，破坏了植物组织结构，有效成分容易溶出，降低提取温度，减少了高温对有效成分的破坏，也降低了能耗；
(2)方法采用膜过滤技术进行分子截留，属于物理方法，常温下进行，即实现了除杂，又浓缩了物料，过程中不造成成分分解，操作简单，耗能少。
具体实施例方式
下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明。实施例1
鸭跖草科植物珍珠露水草粉碎，取IOkg加入提取罐，称取30g纤维素酶溶解在10kgph5 的水溶液中加入提取罐，在50°C条件下酶解2小时后，升温至80°C，再加入60kg保温浸泡 2小时，过滤液体再加50kg水保温1小时，过滤提取液加入截留分子量2000的中空纤维素超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量300的中空纤维素纳滤膜浓缩，得浓缩液，加入等体积95%乙醇溶液滤过，再加入等体积乙酸乙酯萃取1次，萃余液加入50g活性炭回流脱色， 脱色液滤过浓缩至无醇结晶，结晶物滤出干燥得蜕皮留酮U6g，含量87%。实施例2:
唇形科植物紫背金盘粉碎，取IOkg加入提取罐，称取20g淀粉酶溶解在10kgph4的水溶液中加入提取罐，在40°C条件下酶解3小时后，升温至70°C，再加入50kg保温浸泡2小时，过滤液体再加50kg水保温1小时，过滤提取液加入截留分子量5000的中空纤维素超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量200的中空纤维素纳滤膜浓缩，得浓缩液，加入等体积 95%乙醇溶液滤过，再加入等体积乙酸乙酯萃取1次，萃余液加入80g活性炭回流脱色，脱色液滤过浓缩至无醇结晶，结晶物滤出干燥得蜕皮留酮78g，含量85%。实施例3:
苋科植物土牛膝粉碎，取IOkg加入提取罐，称取IOg果胶酶溶解在10kgph5的水溶液中加入提取罐，在50°C条件下酶解3小时后，升温至70°C，再加入50kg保温浸泡1小时，过滤液体再加50kg水保温1小时，过滤提取液加入截留分子量3000的中空纤维素超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量300的中空纤维素纳滤膜浓缩，得浓缩液，加入等体积95%乙醇溶液滤过，再加入1/2体积乙酸乙酯萃取2次，萃余液加入60g活性炭回流脱色，脱色液滤过浓缩至无醇结晶，结晶物滤出干燥得蜕皮留酮阳8，含量81%。
权利要求
1.一种从植物中提取蜕皮留酮的方法，其特征在于以下步骤a.原料粉碎，加入生物酶在40-50°C条件下酶解2-3小时后，加水升温至70_80°C，保温浸泡1-2小时，提取2-3次，过滤得提取液；b.上述提取液加入超滤膜超滤，透过液再加入纳滤膜浓缩，浓缩液加入等体积乙醇溶液滤过，再加入乙酸乙酯萃取，萃余液加入活性炭回流脱色，脱色液滤过浓缩至无醇结晶， 结晶物干燥得蜕皮甾酮。
2.如权利要求1所述从植物中提取蜕皮留酮的方法，其特征在于所述的步骤a中的原料可选鸭跖草科植物珍珠露水草、唇形科植物紫背金盘和苋科植物土牛膝。
3.如权利要求1所述从植物中提取蜕皮留酮的方法，其特征在于所述的步骤a中的生物酶为纤维素酶、淀粉酶和果胶酶中的一种或任意组合，用量为原料量的1-3%。。
4.如权利要求1所述从植物中提取蜕皮留酮的方法，其特征在于所述的步骤b中的超滤膜为截留分子量2000-5000的中空纤维素超滤膜，纳滤膜为截留分子量100-300的中空纤维素纳滤膜。
全文摘要
本发公开了一种从植物中提取蜕皮甾酮的方法，其特征在于以下步骤a.原料粉碎，加入生物酶在40-50℃条件下酶解2-3小时后，加水升温至70-80℃，保温浸泡1-2小时，提取2-3次，过滤得提取液；b.上述提取液加入超滤膜超滤，透过液再加入纳滤膜浓缩，浓缩液加入等体积乙醇溶液滤过，再加入乙酸乙酯萃取，萃余液加入活性炭回流脱色，脱色液滤过浓缩至无醇结晶，结晶物干燥得蜕皮甾酮。本发明的方法操作简单，提取效率高，能耗低，易于工业化生产。
文档编号C07J9/00GK102351936SQ20111026418
公开日2012年2月15日 申请日期2011年9月8日 优先权日2011年9月8日
发明者刘东锋, 杨成东 申请人:南京泽朗医药科技有限公司