专利名称：从甘草中提取纯化异甘草素的方法
技术领域：
本发明属于异甘草素的提取纯化方法，特别涉及一种从甘草中提取纯化异甘草素的方法。甘草为豆科植物甘草属乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)、胀果甘草 (G. inflate Batal.)、光果甘草(G. glabra L.)的干燥根及根茎H J，具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药之功效。甘草中黄酮类成分具有多种生物活性，除了消炎、抗菌、抗变态等作用外，在抗氧化、抗癌、防癌、防肿瘤等也有明显的作用。现代药理研究表明甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素为甘草黄酮类的主要有效成分。异甘草素(Isoliquiritigenin)，是甘草素的同分异构体，黄色结晶，分子式 C15H1204，分子量256. 25，可溶于甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇等有机溶剂，熔点206°C 210°C。现代研究表明，异甘草素有抗氧化、抗溃疡、治疗抑郁性精神病、艾滋病、辅助治疗糖尿病等功效。
连续逆流提取是指在提取的过程中，物料和溶剂同时连续运动，但运动方向相反，通过机械传输，连续定量加料，使物料和溶媒充分接触，设备内溶剂不断更新，最终连续出渣。同时在设备内部不断更新溶剂，溶剂在流动过程中不断获得物料的有效成份，浓度不断提高。在连续进液和连续出液的过程中，溶剂中存在连续的浓度梯度，从而使提取液可以获得比较快的浸出速度，也可以获得比较高的提取液浓度，同时节省了提取溶剂。使用聚酰胺树脂、大孔树脂两种树脂的混合，使得异甘草素分离纯化效果更好。目前，异甘草素提取已经有了 1个专利，中国专利CN1013^115从甘草中提取异甘草素的方法，是先用酸水解，然后碱解，醇提，而其最后纯化分离也是使用单一树脂，而且没有重结晶过程，提取过程中消耗有机溶剂多，效率差，含量低。
发明内容
本发明的目的是充分利用自然资源，提供一种从甘草中提取纯化异甘草素的方法。本发明的技术方案概述如下
从甘草中提取纯化异甘草素的方法，包括如下步骤
(1)将甘草粉碎成60目粉末，用体积百分浓度为80%乙醇水溶液为提取溶剂，采用连续逆流提取技术，在50°C，料液质量比为1 10 30的条件下，提取60分钟，过滤，得甘草提
背景技术：
异甘草素结构式取液；
(2)将所得提取液减压浓缩挥尽乙醇后，加入8倍体积的浓度为lmol/L的盐酸溶液， 在90°C，酸解2个小时后，然后用氢氧化钠调节溶液PH值至12，在90°C，碱解2个小时，然后用lmol/L盐酸溶液调PH值为7，得异甘草素粗提液；
(3)将异甘草素粗提液，上混合树脂柱，用5-8倍柱体积的去离子水、5倍柱体积的体积百分浓度为20% 40%乙醇水溶液、4倍柱体积的体积百分浓度为80%乙醇水溶液进行洗脱，收集体积百分浓度为80%乙醇水溶液洗脱液，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，吸去上清液，结晶加入4倍体积的无水乙醇溶解，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，过滤，结晶以去离子水洗至无醇味，在60°C条件下减压干燥，即得到纯化后的异甘草素。所述混合树脂为聚酰胺树脂、大孔树脂两种树脂的混合。所述料液比为1 10 30。所述混合树脂为聚酰胺树脂、硅胶两种树脂的混合，混合质量比为5:5。所述聚酰胺树脂型号为30-60目；60-100目。所述大孔树脂，型号为HPD-100；DlOlB ；HP-30。
具体实施例方式下面通过具体的实施例说明本发明从甘草中提取纯化异甘草素的方法，下面的描述仅是为了使本领域的技术人员更好地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。实施例1
从甘草中提取纯化异甘草素的方法，包括如下步骤
(1)将甘草粉碎成60目粉末，用体积百分浓度为80%乙醇水溶液为提取溶剂，采用连续逆流提取技术，在50°C，料液质量比为1 :10的条件下，提取60分钟，过滤，得甘草提取液；
(2)将所得提取液减压浓缩挥尽乙醇后，加入8倍体积的浓度为lmol/L的盐酸溶液， 在90°C，酸解2个小时后，然后用氢氧化钠调节溶液PH值至12，在90°C，碱解2个小时，然后用lmol/L盐酸溶液调PH值为7，得异甘草素粗提液；
(3)将异甘草素粗提液，上混合树脂柱，混合树脂由质量比为55的聚酰胺树脂30-60 目与大孔树脂HPD-100组成，用5倍柱体积的去离子水、5倍柱体积的体积百分浓度为20% 乙醇水溶液、4倍柱体积的体积百分浓度为80%乙醇水溶液进行洗脱，收集体积百分浓度为 80%乙醇水溶液洗脱液，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，吸去上清液，结晶加入4倍体积的无水乙醇溶解，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，过滤，结晶以去离子水洗至无醇味，在 60°C条件下减压干燥，即得到纯化后的异甘草素。异甘草素含量为96. 3%。实施例2
从甘草中提取纯化异甘草素的方法，包括如下步骤
(1)将甘草粉碎成60目粉末，用体积百分浓度为80%乙醇水溶液为提取溶剂，采用连续逆流提取技术，在50°C，料液质量比为1 :20的条件下，提取60分钟，过滤，得甘草提取液；
(2)将所得提取液减压浓缩挥尽乙醇后，加入8倍体积的浓度为lmol/L的盐酸溶液， 在90°C，酸解2个小时后，然后用氢氧化钠调节溶液PH值至12，在90°C，碱解2个小时，然后用lmol/L盐酸溶液调PH值为7，得异甘草素粗提液；
(3)将异甘草素粗提液，上混合树脂柱，混合树脂由质量比为5 5的聚酰胺树脂 60-100目与大孔树脂DlOlB组成，用6倍柱体积的去离子水、5倍柱体积的体积百分浓度为 30%乙醇水溶液、4倍柱体积的体积百分浓度为80%乙醇水溶液进行洗脱，收集体积百分浓度为80%乙醇水溶液洗脱液，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，吸去上清液，结晶加入4倍体积的无水乙醇溶解，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，过滤，结晶以去离子水洗至无醇味， 在60°C条件下减压干燥，即得到纯化后的异甘草素。异甘草素含量为97. 5%。实施例3
从甘草中提取纯化异甘草素的方法，包括如下步骤
(1)将甘草粉碎成60目粉末，用体积百分浓度为80%乙醇水溶液为提取溶剂，采用连续逆流提取技术，在50°C，料液质量比为1 :30的条件下，提取60分钟，过滤，得甘草提取液；
(2)将所得提取液减压浓缩挥尽乙醇后，加入8倍体积的浓度为lmol/L的盐酸溶液， 在90°C，酸解2个小时后，然后用氢氧化钠调节溶液PH值至12，在90°C，碱解2个小时，然后用lmol/L盐酸溶液调PH值为7，得异甘草素粗提液；
(3)将异甘草素粗提液，上混合树脂柱，混合树脂由质量比为55的聚酰胺树脂 60-100目与大孔树脂HP-30组成，用7倍柱体积的去离子水、5倍柱体积的体积百分浓度为 40%乙醇水溶液、4倍柱体积的体积百分浓度为80%乙醇水溶液进行洗脱，收集体积百分浓度为80%乙醇水溶液洗脱液，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，吸去上清液，结晶加入4倍体积的无水乙醇溶解，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，过滤，结晶以去离子水洗至无醇味， 在60°C条件下减压干燥，即得到纯化后的异甘草素。异甘草素含量为98. 1。实施例4
从甘草中提取纯化异甘草素的方法，包括如下步骤
(1)将甘草粉碎成60目粉末，用体积百分浓度为80%乙醇水溶液为提取溶剂，采用连续逆流提取技术，在50°C，料液质量比为1 :25的条件下，提取60分钟，过滤，得甘草提取液；
(2)将所得提取液减压浓缩挥尽乙醇后，加入8倍体积的浓度为lmol/L的盐酸溶液， 在90°C，酸解2个小时后，然后用氢氧化钠调节溶液PH值至12，在90°C，碱解2个小时，然后用lmol/L盐酸溶液调PH值为7，得异甘草素粗提液；
(3)将异甘草素粗提液，上混合树脂柱，混合树脂由质量比为55的聚酰胺树脂30-60 目与大孔树脂D101B组成，用8倍柱体积的去离子水、5倍柱体积的体积百分浓度为40%乙醇水溶液、4倍柱体积的体积百分浓度为80%乙醇水溶液进行洗脱，收集体积百分浓度为 80%乙醇水溶液洗脱液，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，吸去上清液，结晶加入4倍体积的无水乙醇溶解，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，过滤，结晶以去离子水洗至无醇味，在 60°C条件下减压干燥，即得到纯化后的异甘草素。异甘草素含量为98. 6%。实施例5
从甘草中提取纯化异甘草素的方法，包括如下步骤
(1)将甘草粉碎成60目粉末，用体积百分浓度为80%乙醇水溶液为提取溶剂，采用连续逆流提取技术，在50°C，料液质量比为1 :10的条件下，提取60分钟，过滤，得甘草提取液；
(2)将所得提取液减压浓缩挥尽乙醇后，加入8倍体积的浓度为lmol/L的盐酸溶液， 在90°C，酸解2个小时后，然后用氢氧化钠调节溶液PH值至12，在90°C，碱解2个小时，然后用lmol/L盐酸溶液调PH值为7，得异甘草素粗提液；
(3)将异甘草素粗提液，上混合树脂柱，混合树脂由质量比为55的聚酰胺树脂 60-100目与大孔树脂HPD-100组成，用8倍柱体积的去离子水、5倍柱体积的体积百分浓度为35%乙醇水溶液、4倍柱体积的体积百分浓度为80%乙醇水溶液进行洗脱，收集体积百分浓度为80%乙醇水溶液洗脱液，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C 条件下析晶8小时，吸去上清液，结晶加入4倍体积的无水乙醇溶解，减压浓缩至糖度30%， 加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，过滤，结晶以去离子水洗至无醇味，在60°C条件下减压干燥，即得到纯化后的异甘草素。异甘草素含量为99. 1%。实施例6
从甘草中提取纯化异甘草素的方法，包括如下步骤
(1)将甘草粉碎成60目粉末，用体积百分浓度为80%乙醇水溶液为提取溶剂，采用连续逆流提取技术，在50°C，料液质量比为1 :30的条件下，提取60分钟，过滤，得甘草提取液；
(2)将所得提取液减压浓缩挥尽乙醇后，加入8倍体积的浓度为lmol/L的盐酸溶液， 在90°C，酸解2个小时后，然后用氢氧化钠调节溶液PH值至12，在90°C，碱解2个小时，然后用lmol/L盐酸溶液调PH值为7，得异甘草素粗提液；
(3)将异甘草素粗提液，上混合树脂柱，混合树脂由质量比为55的聚酰胺树脂30-60 目与大孔树脂HP-30组成，用7倍柱体积的去离子水、5倍柱体积的体积百分浓度为25%乙醇水溶液、4倍柱体积的体积百分浓度为80%乙醇水溶液进行洗脱，收集体积百分浓度为 80%乙醇水溶液洗脱液，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，吸去上清液，结晶加入4倍体积的无水乙醇溶解，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，过滤，结晶以去离子水洗至无醇味，在 60°C条件下减压干燥，即得到纯化后的异甘草素。异甘草素含量为96. 8%。实施例7
从甘草中提取纯化异甘草素的方法，包括如下步骤
(1)将甘草粉碎成60目粉末，用体积百分浓度为80%乙醇水溶液为提取溶剂，采用连续逆流提取技术，在50°C，料液质量比为1 :15的条件下，提取60分钟，过滤，得甘草提取液；
(2)将所得提取液减压浓缩挥尽乙醇后，加入8倍体积的浓度为lmol/L的盐酸溶液， 在90°C，酸解2个小时后，然后用氢氧化钠调节溶液PH值至12，在90°C，碱解2个小时，然后用lmol/L盐酸溶液调PH值为7，得异甘草素粗提液；
(3)将异甘草素粗提液，上混合树脂柱，混合树脂由质量比为55的聚酰胺树脂 60-100目与大孔树脂HP-30组成，用5倍柱体积的去离子水、5倍柱体积的体积百分浓度为 30%乙醇水溶液、4倍柱体积的体积百分浓度为80%乙醇水溶液进行洗脱，收集体积百分浓度为80%乙醇水溶液洗脱液，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，吸去上清液，结晶加入4倍体积的无水乙醇溶解，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，过滤，结晶以去离子水洗至无醇味， 在60°C条件下减压干燥，即得到纯化后的异甘草素。异甘草素含量为97. 7%。
实施例8
从甘草中提取纯化异甘草素的方法，包括如下步骤
(1)将甘草粉碎成60目粉末，用体积百分浓度为80%乙醇水溶液为提取溶剂，采用连续逆流提取技术，在50°C，料液质量比为1 :20的条件下，提取60分钟，过滤，得甘草提取液；
(2)将所得提取液减压浓缩挥尽乙醇后，加入8倍体积的浓度为lmol/L的盐酸溶液， 在90°C，酸解2个小时后，然后用氢氧化钠调节溶液PH值至12，在90°C，碱解2个小时，然后用lmol/L盐酸溶液调PH值为7，得异甘草素粗提液；
(3)将异甘草素粗提液，上混合树脂柱，混合树脂由质量比为55的聚酰胺树脂30-60 目与大孔树脂DlOlB组成，用7倍柱体积的去离子水、5倍柱体积的体积百分浓度为20%乙醇水溶液、4倍柱体积的体积百分浓度为80%乙醇水溶液进行洗脱，收集体积百分浓度为 80%乙醇水溶液洗脱液，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，吸去上清液，结晶加入4倍体积的无水乙醇溶解，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，过滤，结晶以去离子水洗至无醇味，在 60°C条件下减压干燥，即得到纯化后的异甘草素。异甘草素含量为97. 6%。
权利要求
1.从甘草中提取纯化异甘草素的方法，其特征是包括如下步骤(1)将甘草粉碎成60目粉末，用体积百分浓度为80%乙醇水溶液为提取溶剂，采用连续逆流提取技术，在50°C，料液质量比为1 10 30的条件下，提取60分钟，过滤，得甘草提取液；(2)将所得提取液减压浓缩挥尽乙醇后，加入8倍体积的浓度为lmol/L的盐酸溶液， 在90°C，酸解2个小时后，然后用氢氧化钠调节溶液PH值至12，在90°C，碱解2个小时，然后用lmol/L盐酸溶液调PH值为7，得异甘草素粗提液；(3)将异甘草素粗提液，上混合树脂柱，用5-8倍柱体积的去离子水、5倍柱体积的体积百分浓度为20% 40%乙醇水溶液、4倍柱体积的体积百分浓度为80%乙醇水溶液进行洗脱，收集体积百分浓度为80%乙醇水溶液洗脱液，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，吸去上清液，结晶加入4倍体积的无水乙醇溶解，减压浓缩至糖度30%，加入等体积的去离子水，搅勻，在20°C条件下析晶8小时，过滤，结晶以去离子水洗至无醇味，在60°C条件下减压干燥，即得到纯化后的异甘草素。
2.所述混合树脂为聚酰胺树脂、大孔树脂两种树脂的混合。
3.根据权利要求1所述从甘草中提取纯化异甘草素的方法，其特征在于所述料液比为 1 10 30。
4.根据权利要求1所述从甘草中提取纯化异甘草素的方法，其特征在于所述混合树脂为聚酰胺树脂、大孔树脂两种树脂的混合，混合质量比为5: 5。
5.根据权利要求1或3所述从甘草中提取纯化异甘草素的方法，其特征在于所述聚酰胺树脂型号为=30-60目；60-100目。
6.根据权利要求1或3所述从甘草中提取纯化异甘草素的方法，其特征在于所述大孔树脂，型号为HPD-100 ；DlOlB ；HP—30。
全文摘要
本发明公开了一种从甘草中提取纯化异甘草素的方法，该方法包括如下步骤(1)将甘草粉碎，用乙醇水溶液采用连续逆流提取，过滤，得甘草提取液；(2)挥尽乙醇，加入1mol/L盐酸溶液酸解2个小时，然后用氢氧化钠调节溶液pH值至12，碱解2个小时后，用1mol/L盐酸溶液调pH值为7，得异甘草素粗提液；(3)将异甘草素粗提液上混合树脂柱，并进行洗脱分离纯化重结晶。本发明的方法提取的异甘草素为天然提取物，纯度高，成本低，生产效率高，质量稳定可控。
文档编号C07C45/79GK102285875SQ20111028783
公开日2011年12月21日 申请日期2011年9月26日 优先权日2011年9月26日
发明者吴巍 申请人:天津市尖峰天然产物研究开发有限公司