专利名称：一种安托芬的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种安托芬的制备方法，特别是涉及一种应用超临界(X)2萃取和高速逆流色谱制备安托芬的方法。
背景技术：
老瓜头是萝摩科鹅绒藤属植物，别名牛心朴，民间有药用，以全草入药，具有活血、 止痛、消炎等功效。安托芬是其主要活性成分，为异喹啉类生物碱。安托芬对K-562、HL_60和Hela细胞有较强的细胞毒活性，浓度为lmg/ml时，对P388抑制率为73. 1%。安托芬有抗菌作用，对枯草杆菌、藤黄微球菌和大肠杆菌等均有显著抑制作用。经文献检索，尚未发现安托芬的工业提取纯化方法的相关报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种安托芬的制备方法，该方法产品收率高、含量尚。为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下 一种安托芬的制备方法，其特征在于包括以下步骤
(1)取老瓜头原料细粉，加入碱性醇浸润2-6小时，加入萃取釜中，采用超临界(X)2萃
取；
(2)萃取物用3%的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；
(3)以正己烷-氯仿-甲醇-pH=8.5的氨水溶液为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离粗品中的安托芬，收集目标组分，浓缩、干燥即得高含量安托芬。所述步骤(1)中碱性醇为90-99%甲醇，氨水调节pH8-10。
所述步骤(1)中超临界CO2萃取条件为萃取温度为40_55°C，萃取压力为 30-40MPa, CO2流量为2_5ml/g生药/min，萃取时间为2_4h，分离釜I温度为40_45°C，压力为7-9MPa，分离釜II温度为30-40°C，压力为4_6MPa。所述步骤(3)中正己烷-氯仿-甲醇_pH=8. 5的氨水溶液体积为3-5 7~9 :4_5 2-4。所述步骤(3)中溶剂系统上相为流动相，下相为固定相。本发明的积极效果在于
1)采用超临界(X)2萃取，环保无污染，效率高，能耗较低；
2)采用高速逆流色谱分离，制备量大，样品损失少，制备周期短，产品含量高。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1
取原料细粉1kg，加300mlpH10的90%甲醇浸润4小时，加入萃取釜中进行超临界萃取， 萃取温度为55°C，萃取压力为32MPa，CO2流量为3ml/g生药/min，萃取时间为4h，分离釜 I温度为42°C，压力为7MPa，分离釜II温度为35°C，压力为5MPa，收集解析萃取物，用3%的盐酸水溶液溶解萃取物，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；取正己烷、氯仿、甲醇、PH=8. 5的氨水溶液，按体积比为3 7 4 3混合，静置，分出上下相，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节750rpm，取上相溶解沉淀物注入色谱仪，控制流动相流速为2ml/min，收集安托芬流分，浓缩、干燥得安托芬191mg，经 HPLC检测，含量为96. 3%ο实施例2:
取原料细粉1kg，加400mlpH9的95%甲醇浸润6小时，加入萃取釜中进行超临界萃取， 萃取温度为50°C，萃取压力为35MPa，CO2流量为％il/g生药/min，萃取时间为3h，分离釜 I温度为40°C，压力为8MPa，分离釜II温度为30°C，压力为6MPa，收集解析萃取物，用3%的盐酸水溶液溶解萃取物，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；取正己烷、氯仿、甲醇、PH=8. 5的氨水溶液，按体积比为4 9 5 2混合，静置，分出上下相，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节SOOrpm，取上相溶解沉淀物注入色谱仪，控制流动相流速为2. 5ml/min，收集安托芬流分，浓缩、干燥得安托芬230mg， 经HPLC检测，含量为95. 4%。实施例3:
取原料细粉3kg，加1000mlpH8的99%甲醇浸润6小时，加入萃取釜中进行超临界萃取， 萃取温度为45°C，萃取压力为30MPa，CO2流量为2ml/g生药/min，萃取时间为2h，分离釜 I温度为40°C，压力为7MPa，分离釜II温度为35°C，压力为5MPa，收集解析萃取物，用3%的盐酸水溶液溶解萃取物，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；取正己烷、氯仿、甲醇、PH=8. 5的氨水溶液，按体积比为3 8 5 4混合，静置，分出上下相，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节700rpm，取上相溶解沉淀物注入色谱仪，控制流动相流速为2ml/min，收集安托芬流分，浓缩、干燥得安托芬601mg，经 HPLC检测，含量为95. 7%。实施例4:
取原料细粉^g，加1. SLpHlO的99%甲醇浸润2小时，加入萃取釜中进行超临界萃取， 萃取温度为55°C，萃取压力为40MPa，CO2流量为5ml/g生药/min，萃取时间为3h，分离釜 I温度为45°C，压力为8MPa，分离釜II温度为40°C，压力为4MPa，收集解析萃取物，用3%的盐酸水溶液溶解萃取物，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；取正己烷、氯仿、甲醇、PH=8. 5的氨水溶液，按体积比为3 8 5 4混合，静置，分出上下相，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节900rpm，取上相溶解沉淀物注入色谱仪，控制流动相流速为2. 5ml/min,收集安托芬流分，浓缩、干燥得安托芬897mg， 经HPLC检测，含量为91.8%。实施例5:
取原料细粉10kg，加3LpH8的95%甲醇浸润5小时，加入萃取釜中进行超临界萃取，萃取温度为40°C，萃取压力为35MPa，CO2流量为3ml/g生药/min，萃取时间为4h，分离釜I温度为40°C，压力为8MPa，分离釜II温度为30°C，压力为6MPa，收集解析萃取物，用1的盐酸水溶液溶解萃取物，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；取正己烷、 氯仿、甲醇、pH=8. 5的氨水溶液，按体积比为5 8 5 :4混合，静置，分出上下相，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节850rpm，取上相溶解沉淀物注入色谱仪，控制流动相流速为:3ml/min，收集安托芬流分，浓缩、干燥得安托芬2. lg，经HPLC检测，含量为96. 0%。
权利要求
1.一种安托芬的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)取老瓜头原料细粉，加入碱性醇浸润2-6小时，加入萃取釜中，采用超临界(X)2萃取；(2)萃取物用3%的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；(3)以正己烷-氯仿-甲醇-pH=8.5的氨水溶液为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离粗品中的安托芬，收集目标组分，浓缩、干燥即得高含量安托芬。
2.根据权利要求1所述一种安托芬的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中碱性醇为 90-99%甲醇，氨水调节pH8-10。
3.根据权利要求1所述一种安托芬的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中超临界CO2 萃取条件为萃取温度为40-55°C，萃取压力为30-40MPa，C02流量为2_5ml/g生药/min，萃取时间为2-4h，分离釜I温度为40-45°C，压力为7-9MPa，分离釜II温度为30_40°C，压力为 4-6MPa。
4.根据权利要求1所述一种安托芬的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中正己烷-氯仿-甲醇_pH=8. 5的氨水溶液体积为3-5 7-9 :4_5 :2_4。
5.根据权利要求1所述一种安托芬的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中溶剂系统上相为流动相，下相为固定相。
全文摘要
本发明提供了一种安托芬的制备方法。工艺步骤为取原料细粉，加入碱性醇浸润2-6小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取；萃取物用3%的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；以正己烷-氯仿-甲醇-pH=8.5的氨水溶液为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离粗品中的安托芬，收集目标组分，浓缩、干燥即得高含量安托芬。本发明操作简单、污染小，采用本发明制备的安托芬，产品纯度高，易于实现产业化放大。
文档编号C07D471/04GK102432606SQ20111030370
公开日2012年5月2日 申请日期2011年10月10日 优先权日2011年10月10日
发明者万冬梅, 刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司