肽序列和组合物的制作方法

专利名称：肽序列和组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及肽序列，含有这些肽序列的组合物，特别是含有这些序列和组合物的流感疫苗，以及这些序列的用途。具体的，本发明涉及疫苗，其能够防护抵抗多种流感病毒株，包括跨越不同物种的现有病毒(例如防护抵抗人类流感和禽流感)以及从现有病毒突变的未来病毒(例如容易在人与人之间传播的禽流感的未来突变形式，其可能引起大流行性流感)。
背景技术：
对疾病的防御对于所有动物的生存而言是至关重要的，为该目的所采用的防御机制是动物的免疫系统。因此，对免疫系统的理解是开发用于人类和类似动物的新型和更完善治疗的关键。免疫系统的运转机制已经被研究了许多年。该系统由许多细胞类型和多种分子构成，这使得该系统非常复杂。即使多年研究之后，免疫系统组分的整个范围以及它们相互之间的作用仍未被完全理解。许多年之前，认识到从特定疾病恢复的人将来可能会获得某些防护抵抗该疾病， 但不会抵抗他还未感染过的疾病。那时，免疫系统的这种基本方面被解释为一旦发生暴露给某些病原体，则免疫系统会获得某些针对这些病原体的一类“记忆”，该记忆对于某些疾病是特异的。逐渐地，知道暴露到病原体的不大有害变异体会引起针对更有害变异体的防护 (例如暴露到牛痘以防护抵抗天花，或者暴露到灭活的炭疽以保护抵抗活的炭疽)。因此， 出现了接种疫苗抵抗疾病的观念。目前已知免疫系统具有至少两个分支先天性免疫和适应性免疫。在病原体进入免疫系统之前，先天性系统是具有完全功能的，而在病原体进入免疫系统之后，适应性系统才被打开。接着，其产生对病原体的特异性攻击。先天性系统包括许多组分，包括吞噬细胞如巨噬细胞，其(如名字所暗示的)会“吃掉”或者吞掉外源物体如病原体。通常，但不是排他的，本发明涉及适应性免疫系统，除非特别以其他方式说明，否则本文中的“免疫系统”是指适应性免疫系统。为了更充分地理解免疫系统如何发挥功能，其每个个别组分的作用必须要被仔细考虑。关于适应性免疫系统，众所周知针对病原体的免疫性是由淋巴细胞的作用提供的，淋巴细胞构成了免疫系统中最常见的细胞类型。存在两种类型的淋巴细胞B淋巴细胞和T淋巴细胞。通常分别被称作B细胞和T细胞。B细胞具有发育成浆细胞的能力，所述浆细胞制造抗体。抗体是动物免疫系统非常
4重要的组分。它们是响应所入侵病原体的某些识别标志部分(病原体的抗原——抗原在这里被定义为免疫系统所识别的任何外源物质)而产生的，并且对于该病原体通常是特异性的。然而，如果两种病原体非常类似，或者至少含有相同的抗原，则针对一种病原体所产生的抗体仍然能够针对另一种病原体有效(它们可以“交叉反应”)。这解释了为什么接种牛痘能够防护抵抗天花。重要的是意识到抗体仅“识别”病原体的小部分抗原分子，而不是整个病原体。这些部分被称作抗原决定簇。T细胞不具有抗体或者不产生抗体。而是，它们通过被称作TCR(T细胞受体)的特化受体来识别与主要组织相容性复合体(MHC)(或者对于人，是人白细胞抗原(HLA))形成复合物的外源抗原的片段(即抗原决定簇)。T细胞自身可以分成多种亚型，其可以具有调节功能或者效应功能。效应细胞参与“实现”清除外源物质。例如，细胞毒性T细胞(CTL) 是效应细胞，其能够杀死被感染的细胞，以及其他多余的成分例如肿瘤细胞。另一方面，调节性T细胞在辅助效应T细胞和B细胞变得更有效方面发挥作用。由于该功能，这些调节性T细胞通常被命名为“辅助性”T细胞。另一种被命名为“阻抑性”T细胞的调节性T细胞被认为抑制免疫应答，但这些T细胞没有被充分了解。调节性T细胞也可以与先天性免疫系统的组分相互作用以加强它们的活性。在正常的健康个体中，免疫系统的淋巴细胞直到免疫应答被触发前均保持无活性的“静息”状态。在需要免疫应答时，淋巴细胞变为被激活、增殖并开始发挥它们被指派的功能。例如，在表面上展示用于识别与MHC分子形成复合物的入侵病原体抗原决定簇的TCR 的任何静息T细胞被激活、增殖(这被命名为克隆扩充)，所得到的后代开始活跃地发挥它们预定的效应功能，所述功能是抗击入侵的生物体所需的。当免疫应答结束时(S卩，病原体和/或被感染的细胞已经被清除)，则淋巴细胞再次恢复到静息状态。然而，该静息状态不等同于开始的无活性静息状态。以后，响应相同或紧密相关病原体的感染，被激活过但静息的淋巴细胞，能够被快速地募集并诱导增殖。在再次遇到入侵的病原体之后，被激活的静息淋巴细胞这种提供更快和更强应答的能力，有效地为免疫系统提供了 “记忆”。免疫系统记忆的开发是所有长期免疫预防性药物(例如疫苗)的基础，并依然是非常长期免疫治疗性药物开发的目标。为了使细胞在复杂的动物系统内发挥功能，细胞需要在其表面上具有“受体”。这些受体能够“识另Γ特异性的物质，所述特异性的物质控制各种基本过程，例如激活、增殖和附着到其他细胞或底物上。例如，在免疫系统的情况中，τ细胞和B细胞上的受体使它们不仅识别抗原，而且相互作用，从而调节它们的活性。没有这些受体，这些细胞会缺乏基本的通讯手段，并可能无法有效协调地发挥作用，而这对于多细胞生物体的免疫系统是必要的。为了能够特异性地识别和处理环境中存在的大量病原体，免疫系统在淋巴细胞上发展出两种类型的高度可变的抗原受体Β细胞中的抗体以及T细胞中的T细胞受体或 TCR。在身体中存在大量不同的可能抗原受体，以使免疫系统能够识别多种多样的入侵病原体。事实上，个体中存在大约IO12种不同的B细胞和T细胞受体。每种单独的B细胞仅有一种类型的受体，以便处理特定的病原体，具有针对那种病原体的抗原的“最佳适合” 受体的B细胞必须被选择。该过程被称作“克隆选择”。理论上，根据病原体所表现的抗原 /抗原决定簇的数目以及为这些抗原/抗原决定簇所选择的多种B细胞的特异性，可以仅一种克隆进行应答(单克隆应答)或者几个(寡克隆应答)或许多(多克隆应答)。在能够被B细胞和T细胞识别的抗原类型之间存在重大的差别。根据目前已知， 只有B淋巴细胞表面上的受体(即抗体)能够直接识别抗原如病毒和细菌上的蛋白质，或者溶解在体液中的外源分子。在B细胞被激活并发育成浆细胞时，B细胞也能够产生可溶形式的抗体。这些抗体也被命名为免疫球蛋白(缩写为Ig)。另一方面，T细胞受体仅识别身体细胞表面上的短肽，也被称作T细胞抗原决定簇。这些T细胞抗原决定簇是通过较大蛋白质的降解所产生的，所述蛋白质是自身的(即天然存在的体蛋白质)或非自身的(即来自感染身体的外源生物体)。只有来自外源蛋白质的那些，即抗原通常能够诱导体内的免疫应答。一旦产生，这些抗原决定簇会结合到特定类型的分子MHC (主要组织相容性复合体)上，接着所得到的复合物被呈递在细胞表面上用于结合T细胞受体。需要理清楚的是，由于免疫应答的破坏性特征，该应答不得不仅针对外源病原体发挥作用，而不能针对身体自身细胞或蛋白质发挥作用。因此，免疫系统需要区分“自身”和 “非自身”。已经提出，尽管产生针对自身反应的淋巴细胞克隆，但它们在能够发生任何反应之前就被除去了。该过程被命名为“克隆缺失”。还提出，任何自身反应的淋巴细胞可以被保留但仅处于“关闭”状态。这种机制被命名为“克隆无反应性”。无论考虑何种过程，仍不清楚精确的基本机制是什么，使得淋巴组织如胸腺从仅针对非自身反应的T淋巴细胞群中鉴定针对自身反应的个别T细胞克隆。目前本发明人已经更充分地研究了自身/非自身区分的机制，这导致了本发明的开发。目前，本发明人已经建立了一种预测物质如肽的免疫原性的方法，其能够在大的蛋白质内实现更快地鉴定免疫原性肽序列。许多年来，已知主要组织相容性复合体(MHC)在动物的免疫系统中发挥了关键作用。正如上面已经讨论的，MHC分子使T细胞能够识别抗原。存在三种主要类型的MHC分子，I类、II类和III类。I类和II类MHC分子是存在于细胞表面上的糖蛋白，而III类则通常是细胞内存在的可溶分子。存在大量的不同类型的MHC分子。例如，在人类中(在人类中MHC被命名为HLA，人白细胞抗原)，存在数百种不同的编码MHC分子的等位基因，这意味着在人群中，存在许多不同类型的HLA。通常，根据不同的惯例对不同物种的MHC进行命名，因此，小鼠的MHC被命名为H-2，大鼠是RTl，兔是RLA。个体中编码不同MHC分子的不同基因区通常被单独命名，例如在人类中为HLA-A、HLA-C等。MHC分子是重要的免疫系统分子，这是因为是该分子将抗原的抗原决定簇呈递给免疫系统。例如，如果T细胞将对特定的病原体做出应答，则该病原体必须具有至少一个抗原(例如蛋白质)，该抗原具有至少一个抗原决定簇(例如蛋白质的肽部分)，该抗原决定簇能够与细胞表面上的MHC分子结合，并因此与能够结合MHC-肽复合物的T细胞相互作用。因此，该免疫应答依赖于MHC结合于抗原决定簇的能力。如果没有将与MHC结合的抗原决定簇，或者没有结合于MHC-肽复合物的T细胞，则不会出现免疫应答。然而，关于“自身”蛋白质，许多抗原决定簇的一种可以能够结合MHC分子，并因此可能诱导免疫应答。在这些情况中，必须提供特异性的“信号”用于清除或“关闭”与自身反应的淋巴细胞克隆。因此，如上所述，自身和外源(即，非自身)肽都能够结合MHC分子，各种肽与MHC 分子的结合在免疫学领域中已经受到特别详细的研究。许多研究已经寻求算出或者预测某些MHC(特别是HLA和H-幻类型和肽序列之间结合的强度，以试图解释免疫应答或其缺失(即，区分自身和外源所必需的“信号”)。这些研究的例子包括以下Altuvia Y, Schueler 0， Margalit H. 1995. “Ranking potential binding peptides toMHC molecules by a computational threading approach ( ffliiif^^^^ 排列潜在的与MHC分子结合的肽)” .J. 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通常，现有技术试图通过计算肽和特定MHC分子的已知结合环境之间的结合强度来预测特定肽的免疫原性。结合环境包括MHC分子中的“袋”，其适合接受一定长度的肽(例如7 15个氨基酸)。通过之前的X-射线晶体学研究已经可以知道所述“袋”的结构。使用原子和分子相互作用的适当运算法则可以在数学上计算这种强度。作为选择，现有技术试图根据肽中所存在的基序对肽的结合强度进行“评分”，例如与特定的已知HLA分子结合的在一定长度的肽的特定位置存在的特定氨基酸，例如在八氨基酸肽中位置3上存在的脯氨酸。通常，这些方法已经获得了有限的成功。本发明人相信他们已经对上述理论进行了改进，其由于更充分地理解了与诸如自身蛋白质等自身物质反应的T细胞如何在它们的消除(克隆缺失)或沉默(克隆无反应性)之前被鉴定出来。因此，发明人已经能够鉴定特异性的免疫原性肽序列，其可提供针对特异性病原体的防护，并且使用所鉴定的序列已经开发出了针对这些病原体的疫苗。对于本发明，发明人已经开发出了用于引起T细胞应答的流感疫苗的肽。之前，通过鉴定现有的流感病毒株并接着生产对该病毒具有特异性的疫苗，已经开发了流感疫苗。通常，这些疫苗已经基于B细胞(抗体)应答，所述抗体与特异性流感病毒株的表面抗原(即血凝素和神经氨酸苷酶)具有反应性，针对该流感病毒株已经开发了抗体。典型的是，含有抗原的表面蛋白在流感病毒株之间是可以变化的，这是因为产生新病毒的病毒突变倾向于出现在表面蛋白中。其结果是，传统的流感疫苗通常仅防护抵抗一种特定的病毒株，并且不会防护抵抗由突变导致的新病毒株。因此，需要新的疫苗防护抵抗出现的病毒株。这种方法的明确问题是在新病毒株的出现以及疫苗的开发之间存在一段时间，在这段时间中，针对该病毒没有可以利用的防护。如果病毒特别有害，则这能够引起数百万人死亡，例如在上世纪出现的重大流行性流感。知道细胞毒性T淋巴细胞可以提供对流感病毒株的免疫应答已经有一段时间了。 最近的研究已显示人类中的CTL应答可以指向多个抗原决定簇。已经暗示，针对HLA-A2 限定的M-I 58-66抗原决定簇存在显著的应答。这些研究包括A. C. Boon等人，J. Virol, 2002 年 1 月，582 90 ；S. Tamura 等人，Jpn. J. Infect. Dis.，2004 年 12 月，236 47 ； G. Deliyannis 等人，J. Virol.，2002 年 5 月，4212 21 ；C. Gianfrani 等人，Hum. Immunol.， 2000 年 5 月，438 52 ；和 J. Jameson 等人，J. Immunol.，1999 年 6 月，7578 83。最近还已经有针对特异性免疫原性肽的研究，所述免疫原性肽可能对开发引起T 细胞应答的流感疫苗有用。通常，这些工作已经涉及到研究CTL应答以测试例如在转基因小鼠中的流感肽。所测试的肽倾向于是可以与一种MHC(或HLA)类型反应的短序列，并且从特异性测试流感病毒株中获得。例如，在Vaccine，2005，5231 44中，N. Hu等人公开了在表达HLA-A2、HLA-B7或HLA-B27的HLATg小鼠中测试野生型Ml 58-66肽。这些结果显示该肽是由表达HLA-A2的转基因小鼠所识别的流感抗原决定簇。在Clin. Exp. Immunol.， 2005年10月，45 52中，Α. C. Boon等人公开了 Ml 58-66和NP 44-52流感A肽作为在 HLA-A*0101和HLA-A*0201个体中所识别的抗原决定簇。在Cell Immunol.，2005年4月， 110 123中，E. Cheuk等人公开NP383-391流感A肽作为HLA-B27/H2 I类缺陷小鼠中所识别的抗原决定簇。使用抗原决定簇预测程序，作者鉴定了另外三种B27限制性流感A抗原决定簇 BP-2 702-710、PB-I 571-579 和 PB-2 368-376。在 J. Immunol.，2004 年 2 月， 2453 60中，A. C. Boon等人公开了对NP 418-426中HLA B*3501限制性抗原决定簇的天然变种特异的人CTL克隆。在J. Immunother.，2003年1月 2月，41 6中，A. Trojan 等人公开了 HLA-A3限制性九肽RLEDVFAGK，其能够诱导特异性的CTL反应性。还公开了 HLA-A2限制性流感病毒A基质肽GILGFVFTL。在J. Gen. Virol.，2001年7月，1749 55 中，3.1\)1^(1时等人鉴定了来自于流感病毒株4/ 1 /8/34聚合酶蛋白？8-1的鼠0(10限制性抗原决定簇，其对应于氨基酸残基349 357 (ARLGKGYMF)。在J. Immunol.中，2001 年4月，4627 33，G. T. Belz等人从流感聚合酶蛋白PB-I鉴定了一种对应于氨基酸残基 703 711的免疫原性肽(SSYRRPVGI)和来自PB-2聚合酶的模拟表位(ISPLMVAYM)。PCT/ US2005/002954公开了含有NP 265-273的CTL抗原决定簇，其具有序列ILRGSVAHK，还公开了含有NP 305-313的抗原决定簇。最后，US 6，740325公开了两种CTL抗原决定簇NP 335-350 和 NP 380-393。进一步研究已经显示来自转基因小鼠的数据提供了可靠的模型以用于研究人类中CTL应答。在Int. Immunol.，1995年4月，597-605中，S. Man等人已经显示来自HLA-A2. 1 转基因小鼠的HLA-A2. 1限制性细胞毒性T淋巴细胞所识别的主要流感A抗原决定簇是基质蛋白I(M-I)肽抗原决定簇，其在人CTL应答中是免疫显性的。E.J. Bernhard等人 (J. Exp. Med.，1998 年 9 月，1157 62)和 E. Cheuk 等人(J. Immunol.，2002 年 11 月，5571 80)已经进行了该领域的进一步研究。然而，尽管已经广泛地研究了已知的抗原决定簇，但对于形成能够防护抵抗多于一种流感病毒株的流感疫苗的基础还没有令人满意的。而且，根据这些单个抗原决定簇的疫苗，即使它们提供了某些保护，但仍将对特定的HLA是特异性的，这使得它们在大比例人群中是无效的。因此，无论依赖B细胞还是T细胞应答，已知疫苗的显著问题是它们仅防护抵抗现有的病毒株，而不提供针对未来可能发展出来的病毒株的防护。随着禽类中高度危险的 H5N1株的出现，在基于H5W株后续突变的人类大流行病之前变得越来越迫切需要疫苗。而且，根据引起T细胞应答的已知肽的疫苗可能在大部分人群中不会有效。

发明内容
因此，本发明的一个目的是解决与已知的上述现有技术相关的问题。本发明进一步的目的是提供一种多肽，该多肽能够在脊椎动物中针对多种流感株和/或在表达不同 MHC(HLA)的多种个体中引起CTL免疫应答。本发明进一步的目的是提供一种使用本发明的多肽的流感疫苗。优选的是，该疫苗能够防护抵抗多种流感株和/或在表达不同MHC(HLA) 的多种个体中有效。因此，本发明提供了一种具有不超过100个氨基酸的多肽，该多肽含有与SEQ IDl 6任一序列具有至少60%同源性的一条或者多条序列，或者含有两个或者更多个具有7个氨基酸或更多氨基酸的抗原决定簇，每个抗原决定簇与SEQ ID 1 6任一序列的和所述抗原决定簇长度相同的子序列具有至少60%的同源性SEQ ID 1 DLEALMEffLKTRPILSPLTKGILGFVFTLTVPSEQ ID 2 LLYCLMVMYLNPGNYSMQVKLGTLCALCEKQASHSSEQ ID 3 DLIFLARSALILRGSVAHKSCSEQ ID 4 PGIADIEDLTLLARSMVVVRP
10
SEQ ID 5 LLIDGTASLSPGMMMGMFWLSTVLGVSILNLGQSEQ ID 6 IIGILHLILffILDRLFFKCIYRLF其中，所述多肽在表达主要组织相容性复合体(MHC)等位基因的脊椎动物中是免疫原性的，且其中所述多肽不是完整的流感病毒蛋白。因此，所述多肽是一种可以含有完整的上述序列中任一条序列(或者可以含有上述序列中任一条序列的至少两种七残基或者更多残基部分)，但总体不能具有超过100个氨基酸残基。所述多肽在表达MHC(人类中为HLA)等位基因的脊椎动物中也必需是免疫原性的。免疫原性多肽在本文中被理解为一种多肽，其在脊椎动物中引发免疫应答，例如通过与脊椎动物MHC结合，并使MHC与细胞毒性T细胞淋巴细胞反应。在下面的实验1中提出了一种用于确定多肽是否具有免疫原性的方法。然而，本发明不限于这些方法，并且本领域技术人员可以根据需要选择任何已知的方法用于确定免疫原性。如上所提到的，所述多肽可以是一种含有两种七残基或更多残基的抗原决定簇的多肽，所述抗原决定簇与一个或者多个MHC反应，这样引起广泛的CTL应答。该应答可以在一种个体中，或者可以在至少两种不同的个体中(并且所述个体可以是相同的物种或不同的物种)。因此，所述多肽可以含有至少两种不同的七残基或更多残基的抗原决定簇，其中每个抗原决定簇独立地提供了对不同目标的应答。在本发明上下文中抗原决定簇是多肽的一部分，其能够结合于脊椎动物中的脊椎动物MHC，优选引发免疫应答，例如通过使MHC-抗原决定簇复合物与CTL反应。在下面的实验1中提出了一种用于确定多肽是否是抗原决定簇或者含有抗原决定簇的方法。然而，本发明不限于这些方法，并且本领域的技术人员可以根据需要选择任何已知的方法用于确定多肽是否是抗原决定簇或含有抗原决定簇。本发明的发明人已经发现上述序列含有多种CTL抗原决定簇，其可以对群体中多种多样脊椎动物提供针对流感的防护。另外，发明人已经分析了跨所有物种的所有已知流感病毒株序列，并且已经发现所指定的序列在所有已知的流感病毒株中是非常保守的。同样地，这些序列在由现有株突变所产生的新株中也不太可能是显著变化的。因此，这些序列中提供防护作用的抗原决定簇在新株中很可能以未改变的形式存在，这是因为通常突变不会出现这些区域。因此，这些抗原决定簇提供了非常好的机会，不仅用于提供针对现有流感株(例如“鸟流感”的H5m株)的防护，而且提供针对还未知的病毒株(例如H5m的突变形式，其能够容易在人之间传播，并形成大流行病的基础)的防护。如上所讨论的，在对跨所有物种的所有已知流感病毒株序列进行分析之后，已经鉴定了这些序列。因此，这些序列是从上述分析所得到的共有序列。尽管是共有序列，但在某些情况中，这些序列与某些已知流感病毒株中的天然序列精确对应。由于所有物种中所有病毒间的序列中的显著保守性，这些共有序列，即使在与实际序列有区别时，也仅在少量残基中有不同，并因此含有许多较小的抗原决定簇(八氨基酸、九氨基酸、十氨基酸等)， 因此与天然序列没有区别。因此，上述共有序列作为整体含有许多与天然的抗原决定簇相同的有效抗原决定簇，以及与天然抗原决定簇仅稍有不同的有效抗原决定簇。对于本领域技术人员显而易见的是，本发明不仅扩展到共有序列和它们的抗原决定簇，还扩展到任何流感病毒株中相应的实际序列。因此，与这些共有序列具有某些同源性的序列也在本发明的范围内。例如，这类同源性允许最高3个氨基酸的取代存在于八氨基酸抗原决定簇中 (62. 5%同源性)或九氨基酸、十氨基酸或十一氨基酸抗原决定簇中。优选在对应SEQ ID1 6全长序列的本发明序列中可以鉴定不超过10个这些取代(对于全长三十个氨基酸是 66. 6%的同源性)。优选的是，这些取代是符合已知取代方案的保守取代。考虑到本发明从这些共有序列扩展到对应的天然序列，因此本发明还提供了一种不超过100个氨基酸的多肽，该多肽含有由流感病毒蛋白的下列氨基酸残基所限定的一条或者多条序列，或者含有两个或者更多个抗原决定簇，所述抗原决定簇具有来自由流感病毒蛋白的下列氨基酸残基所限定的序列的7个氨基酸或更多个氨基酸Ml蛋白的残基36 75 (优选来自流感A株)Ml蛋白的残基IM 158(优选来自流感B株)NP蛋白的残基255 275 (优选来自流感A株)
NP蛋白的残基306 3 (优选来自流感B株)PBl蛋白的残基395 似8M2蛋白的残基32 55其中，所述多肽在表达主要组织相容性复合体(MHC)等位基因的脊椎动物中是免疫原性的，且其中所述多肽不是完整的流感病毒蛋白。对本发明中提及的序列的编号是根据公认的原则所确定的。因此，编号是从公认翻译起始密码子(ATG)的1位开始的。对于编码感兴趣蛋白的流感基因组的区段，这对应于甲硫氨酸(M)。换句话说，正如由已列出序列的数据库(即GenBank，SwissProt等)所使用和限定的，其开始于1位，相对于显示为感兴趣的蛋白质序列中的第一个氨基酸的甲硫氨酸。


参考后面的附图仅以实施例的方式对本发明进行更充分地描述，其中图IA IF显示根据下面实施例1所描述的方案，FLU-v和NRP疫苗接种的小鼠的原代脾细胞培养物所产生的IFN-γ，所述原代脾细胞培养物被下列所刺激Con Α(10μ g/ ml)、可溶性溶菌酶(5yg/ml)、纯化的可溶性多肽(Pl (图ΙΑ)、P2(图IB)、P3 (图1C)、 P4(图 ID)、P5(图 1E)和 P6(图 1F) ；5μ g/ml)和被溶菌酶 PI、P2、P3、P4、P5 或 P6 所转染的HLA-匹配的Tl (Tl)和不匹配的JURKAT(Ju)人细胞(脾细胞与转染细胞的比例是 10 I). IFN-Y的产生被表示为响应所考虑抗原的产生水平减去响应可溶性溶菌酶或转染溶菌酶的相应细胞所产生的IFN-γ之间的差异。溶菌酶介导的IFN-Y的产生的背景水平对于可溶性抗原是25士 10pg/ml，对于Tl中的抗原是316士43pg/ml，对于Jurkat中的抗原是 19 士6pg/ml ；图2显示根据下面实施例1所描述的方案，FLU-v和NRP疫苗接种的小鼠的原代脾细胞培养物所产生的IFN-γ，所述原代脾细胞培养物被被下列所刺激Con A (10 μ g/ml)、 可溶性溶菌酶(5 μ g/ml)、纯化的可溶性FLU-v多肽制备物(PU P2、P3、P4、P5和P6，全部为5μ g/ml)和HLA匹配的Tl(Tl)和不匹配的JURKAT(Ju)人细胞，所述人细胞被感染流感病毒株 A/New_Caledonia/20/99,A/NYMC/X-147 或 B/Johannesburg/5/99，或转染溶菌酶 (脾细胞感染/转染细胞的比例为10 1) ；IFN-γ的产生被表示为响应所考虑抗原的产生水平减去响应可溶性溶菌酶或转染溶菌酶的相应细胞所产生的IFN-Y之间的差异 ’溶菌酶介导的IFN- γ的产生的背景水平对于可溶性抗原是25 士 10pg/ml，对于Tl中的抗原是316士43 8/1111，对于1^1 ^中的抗原是19 士6pg/ml ；以及图3A和;3B显示在使用流感A/PR/8/34进行致死攻击之后，动物的存活率；在第 1和15天，动物被皮下免疫FLU-v或NRP-v，第20天，在麻醉下，用45 μ 1病毒(每剂量为 5 X 107pfu)对所有的动物进行鼻内攻击；在第19和22天，将图3Α中的动物腹腔内接种 100 μ g的大鼠抗小鼠CD8血清；在第19和22天，将图中的动物腹腔内接种无关大鼠血清；箭头表示鼻内攻击的日期；而菱形表示动物接种抗CD8血清的日期。
具体实施例方式上面所描述的多肽通常含有一个或者多个(优选2个或者更多个)抗原决定簇。 优选的是，这些抗原决定簇是T细胞抗原决定簇，例如细胞毒性T淋巴细胞(CTL)抗原决定簇。通常，所述多肽对于流感病毒株是免疫原性的，并优选对于多种流感病毒株是免疫原性的。在本文中，对流感病毒株是免疫原性的多肽被理解为意味着所述多肽作为流感病毒蛋白一部分，并能够引起免疫系统应答，例如通过在结合MHC时表现CTL反应性。下面的实验 1中提出了一种用于确定多肽是否具有这类免疫原性的方法。然而，本发明并不限于这些方法，本领域技术人员可以根据需要选择任何已知的方法用于确定免疫原性。在本发明中，所述多肽含有上述的两条或者更多条序列。通常，如果需要，在多肽中可以存在两条、三条、四条、五条或者更多条这样的序列。所存在的这类抗原决定簇越多， 则在具有不同HLA或MHC的人和/或动物个体群体中提供的保护幅度就越大。如果需要，根据本发明的多肽还可以包含一条或者多条不是抗原决定簇的其他序列。通常，所述其他序列来自于一个或者多个流感病毒蛋白。这些序列可以位于上述两条或者更多条序列(抗原决定簇)之间，或者可以位于多肽的一个或者两个末端。这些其它序列的存在不应该影响所述多肽的功能，倘若所述多肽作为整体不会变得太大，干扰脊椎动物的免疫系统中抗原决定簇的呈递。在本发明的具体实施方式
中，当所述多肽与SEQ ID 1同源时，则优选所述其他序列是来自流感Ml蛋白(优选来自流感A株)的一条或者多条序列；当所述多肽与SEQ ID 2同源时，则优选所述其他序列是来自流感Ml蛋白(优选来自流感B株)的一条或者多条序列；当所述多肽与SEQ ID 3同源时，则优选所述其他序列是来自流感NP蛋白(优选来自流感A株)的一条或者多条序列；当所述多肽与SEQ ID 4同源时，则优选所述其他序列是来自流感NP蛋白(优选来自流感B株)的一条或者多条序列； 当所述多肽与SEQ ID 5同源时，则优选所述其他序列是来自流感PBl蛋白的一条或者多条序列；当所述多肽与SEQ ID 6同源时，则优选所述其他序列是来自流感M2蛋白的一条或者多条序列。在最优选的实施方式中，来自上述蛋白质的所述其他序列是下列共有序列内的序列，或者与下列共有序列内的序列具有至少60%的同源性的序列Ml流感A共有序列-SEQ ID 7MSLLTEVETYVLSIVPSGPLKAEIAQRLEDVFAGKNTDLEALMEffLKTRPILSPLTKGILGFVFTLTVP SERGLQRRRFVQNALNGNGDPNNMDKAVKLYRKLKREITFHGAKEIALSYSAGALASCMGLIYNRMGAVTTEVAFGL VCATCEQIADSQHRSHRQMVATTNPLIKHENRMVLASTTAKAMEQMAGSSEQAAEAMEIASQARQMVQAMRTVGTHP SSSTGLRDDLLENLQTYQKRMGVQMQRFKMl流感B共有序列-SEQ ID 8
MSLFGDTIAYLLSLTEDGEGKAELAEKLHCffFGGKEFDLDSALEffIKNKRCLTDIQKALIGASICFLKP KDQERKRRFITEPLSGMGTTATKKKGLILAERKMRRCVSFHEAFEIAEGHESSALLYCLMVMYLNPGNYSMQVKLGT LCALCEKQASHSHRAHSRAARSSVPGVRREMQMVSAMNTAKTMNGMGKGEDVQKLAEELQSNIGVLRSLGASQKNGE GIAKDVMEVLKQSSMGNSALVKKYLNP流感A共有序列-SEQ ID 9MASQGTKRSYEQMETD⑶RQNATEIRASVGKMIDGIGRFYIQMCTELKLSDYEGRLIQNSLTIEKMVLS AFDERRNRYLEEHPSAGKDPKKTGGPIYRRVDGKWMRELVLYDKEEIRRIWRQANNGEDATAGLTHMMIWHSNLNDA TYQRTRALVRTGMDPRMCSLMQGSTLPRRSGAAGAAVKGIGTMVMELIRMIKRGINDRNFWRGENGRKTRSAYERMC NILKGKFQTAAQRAMVDQVRESRNPGNAEIEDLIFLARSALILRGSVAHKSCLPACVYGPAVSSGYDFEKEGYSLVG IDPFKLLQNSQVYSLIRPNENPAHKSQLVWMACHSAAFEDLRLLSFIRGTKVSPRGKLSTRGVQIASNENMDNMGSS TLELRSGYWAIRTRSGGNTNQQRASAGQISVQPTFSVQRNLPFEKSTVMAAFTGNTEGRTSDMRAEIIRMMEGAKPE EVSFRGRGVFELSDEKATNPIVPSFDMSNEGSYFF⑶NAEEYDNNP流感B共有序列-SEQ ID 10 MS匪DIDGINTGTIDKTPEEITSGTSGTTRP11RPATLAPPSNKRTRNPSPERATTSSEADVGRKTQKK QTPTEIKKSVYNMVVKLGEFYNQMMVKAGLNDDMERNLIQNAHAVERILLAATDDKKTEFQKKKNARDVKEGKEEID HNKTGGTFYKMVRDDKTIYFSPIRITFLKEEVKTMYKTTMGSDGFSGLNHIMIGHSQMNDVCFQRSKALKRVGLDPS LISTFAGSTLPRRSGATGVAIKGGGTLVAEAIRFIGRAMADRGLLRDIKAKTAYEKILLNLKNKCSAPQQKALVDQV IGSRNPGIADIEDLTLLARSMVVVRPSVASKVVLPISIYAKIPQLGFNVEEYSMVGYEAMALYNMATPVSILRMGDD AKDKSQLFFMSCFGAAYEDLRVLSALTGTEFKPRSALKCKGFHVPAKEQVEGMGAALMSIKLQFWAPMTRSGGNEVG ⑶GGSGQISCSPVFAVERPIALSKQAVRRMLSMNIEGRDADVKGNLLKMMNDSMAKKTNGNAFIGKKMFQISDKNKT NPVEIPIKQTIPNFFFGRDTAEDYDDLDYPBl 流感共有序列-SEQ ID 11MDVNPTLLFLKVPAQNAISTTFPYTCDPPYSHGTGTGYTMDTVNRTHQYSEKGKWTTNTETGAPQLNPI DGPLPEDNEPSGYAQTDCVLEAMAFLEESHPGIFENSCLETMEVVQQTRVDKLTQGRQTYDWTLNRNQPAATALANT IEVFRSNGLTANESGRLIDFLKDVMESMDKEEMEITTHFQRKRRVRD匪TKKMVTQRTIGKKKQRVNKRGYLIRALT LNTMTKDAERGKLKRRAIATPGMQIRGFVYFVETLARSICEKLEQSGLPVGGNEKKAKLANVVRKMMTNSQDTELSF TITCDNTKWNENQNPRMFLAMITYITKNQPEWFRNILSIAPIMFSNKMARLGKGYMFESKRMKLRTQIPAEMLASID LKYFNESTRKKIEKIRPLLIDGTASLSPGMMMGMF匪LSTVLGVSILNLGQKKYTKTTYWWDGLQSSDDFALIVNAP NHEGIQAGVDRFYRTCKLVGI匪SKKKSYINKTGTFEFTSFFYRYGFVANFSMELPSFGVSGINESADMSIGVTVIK NNMINNDLGPATAQMALQLFIKDYRYTYRCHRGDTQIQTRRSFELKKLWDQTQSKAGLLVSDGGPNLYNIRNLHIPE VCLKWELMDEDYRGRLCNPLNPFVSHKEIESVNNAVVMPAHGPAKSMEYDAVATTHSWIPKRNRSILNTSQRGILED EQMYQKCCNLFEKFFPSSSYRRPVGISSMVEAMVSRARIDARIDFESGRIKKEEFSEIMKICSTIEELRRQKKM2流感共有序列-SEQ ID 12MSLLTEVETPIRNEWGCRCNDSSDPLVVAASIIGILHLILfflLDRLFFKCIYRLFKHGLKRGPSTEGVP ESMREEYRKEQQNAVDADDSHFVSIELE关于这些序列与上面的同源性优选为75%、85%、95%或基本上为100%。在本发明中，流感株不受到特别限制，所述多肽可以对任何已知的流感株是免疫原性的，和/或来自任何已知的流感株。然而，优选的是，相关的株是流感A株或流感B株。 已从任何现有株突变得到的未来流感株也可以是以下流感株所述多肽针对该流感株为免疫原性的，或者所述多肽来自该流感株。定义本发明多肽的序列所位于其中的蛋白质选自任何流感病毒株(特別是A株和 B株)的M1、NP、PB和M2蛋白(如上所述，其为所有分析序列的共有序列，或者作为选择， 其位置位于所述蛋白质内)。发明人对下列特异性的蛋白进行了分析，优选本发明中所提 到的流感病毒蛋白选自这些特定蛋白，或者来自这些蛋白的突变体。因此，上面所描述的与 SEQ ID 1 6同源的特定序列优选是在下列蛋白内适当位置上的。类似的，由任何流感株 的蛋白内残基位置所限定的本发明的序列，即Ml蛋白的残基36 75(特别是流感A Ml), Ml蛋白的残基124 158(特别是在流感B Ml中)，NP蛋白的残基255 275(特别是在 流感A NP中)，NP蛋白的残基306 3 (特别是在流感B NP中)，PBl蛋白的残基395 4 和M2蛋白的残基32 55优选是位于下列特定蛋白质中的序列。该列表是以|版本号 (gi号)I数据库识别码(例如对于GenBank是gb) NCBI索取号|可选择的其他信息(例 如，产生蛋白序列的核苷酸序列的索取号)的形式。这些序列和产生它们的对应流感株可 以全部在公共NCBI蛋白质数据库中发现，其可以通过以下URL地址在线进入http//www. ncbi. nlm. nih. gov/entrez/query/static/heip/ helpdoc. html#Protein.该& 白质数据 库含有来自GenBanK EMBL和DDBJ中DNA序列经过翻译的编码区的序列数据，以及提交到 蛋白质信息资源(Protein Information Resource, PIR)、SWISS-PR0T、蛋白质研究基金会 (PRF)和蛋白质数据银行(Protein Data Bank, PDB)(来自经解释的结构的序列)的蛋白 质序列的序列数据。Ml 蛋白I 27530653 I db j I BAC54009. 1 I ； | 27530634 | db j | BAC53998. 1 ； 53829719|gbIAAU94746. 11 ；I 538297 16 I gb I AAU94744. 1 I ； | 5 3 8 2 9 7 1 3 | gb | A AU 9 4 7 4 2 1 | ； 53829710|gbIAAU94740. 11 ；I 53829707 I gb I AAU94738. 1 I ； | 5 3 8 2 9 7 0 4 | gb | A AU 9 4 7 3 6 1 | ； 53829701|gb|AAU94734. 11 ；I 53829698 I gb I AAU94732. 1 I ； 53829695 | gb | AAU94730. 1 | ； 53829692|gbIAAU94728. 11 ；I 53829689 I gb I AAU94726. 1 I ； 53829686 | gb | AAU94724. 1 | ； 53829683|gbIAAU94722. 11 ；8486 160 | ref | NP_056664. 1 ； | 3 0 4 6 6 2 4 2 | r e f | NP_8 48 6 8 9 1 | ； 30349250|gbIAAP22121. 11 ；30466211 |ref|NP_848672. 1 ； 30349219|gbIAAP22104. 11 ；4761025 | gb | MD29208. 11 AF100392_1 ； 14761022 | gb | MD29206. 11 AF100391_1 ；4761019 I gb | MD29204. 11 AF100390_1 ； 14761016 | gb | MD29202. 11 AF100389_1 ；4761013 I gb | MD29200. 11 AF100388_1 ； 14761010 | gb | MD29198. 11 AF100387_1 ；4761007 I gb | MD29196. 11 AF100386_1 ； 147610041 gb | MD29194. 11 AF100385_1 ；47610011 gb IMD29192. 11 AF100384_1 ； 14760998 | gb | MD29190. 11 AF100383_1 ；4760995 | gb | MD29188. 11 AF100382_1 ； 14760992 | gb | MD29186. 11 AF100381_1 ；
4760989 | gb | MD29184. 11 AF100380_1 ； 14760986 | gb | MD29182. 11 AF100379_1 ；4760983 | gb | MD29180. 11 AF100378_1 ； 14760980 | gb | MD29178. 11 AF100377_1 ；4760977 | gb | MD29176. 11 AF100376_1 ； 147609741 gb | MD29174. 11 AF100375_1 ；4760971|gb|AAD29172. 1|AF100374_1 ； 112862823|dbj|BAB32623. 1 ；I 1 2862820 I db j I BAB3262 1 · 1 I ； | 1 2 8 6 2 8 1 7 | db j | B AB 3 2 6 1 9 · 1 | ； 5702096|gbIAAD47140. 11 ；I 5 1 340785 I gb I AAUO 100 1 · 1 I ； | 5 0 0 5 9 4 3 8 | gb | AAT 6 9 4 5 1 · 1 | ； 50059400|gbIAAT69429. 11 ；I 50 0 59 4 1 9 I gb I AAT69440. 1 I ； | 3 2 5 1 9 6 | gb | AAA6 7 1 00.1 ； 325202|gbIAAA43726. 11 ；138823|sp|P03489|VMT1_INBLE ； 1138824|sp|P06816|VMT1_INBSI ；138822|sp|P13880|VMT1_INBAD ； 11388211sp|P13879|VMT1_INBAC ；|325198|gb|AAA66416.l| ； |325194|gb|AAA66414.l| ； 9049382|dbj|BAA99399. 11 ；5764368|gb|AAD51265. 11AF153257_1 ； |76443315|gb|ABA424411 ；I 764433 1 2 I gb I ABA42439. 1 I ； | 7 6 4 4 3 3 0 9 | g b | A B A 4 2 4 3 7 · 1 | ； 76443306|gbIABA42435. 11 ；76443303|gbIABA42433. 1 ； |21636455|gb|AAM70003. 1|AF457712_1 ；1216364501gb|AAM70000. 11AF457710_11 ； 1216364341gb|AAM69991. 11AF457703_11 ；1216364161gb|AAM69981. l|AF457695_l| ； 1216363981gb|AAM69971. l|AF457687_l| ；1216363781gb|AAM69960. l|AF457678_l| ； 198022911gb|AAF99672. l|AF258523_l| ；19802288 | gb | MF99670. 11 AF258522_11 ； | 57643741 gb | MD51269. 11 AF153259_11 ；5805289 | gb | MD51928. 11 AF144306_1 ； | 57643711 gb | MD51267. 11 AF153258_1 ；I 7 1 655384 I gb I AAZ38740. 1 I ； | 7 1 6 5 5 3 7 9 | gb | AAZ 3 8 7 3 8 · 1 | ； 71655371|gbIAAZ38736. 11 ；I 7 1 6 5 5 356 I gb I AAZ38734. 1 I ； | 7 1 6 5 5 3 4 5 | gb | AAZ 3 8 7 3 2 · 1 | ； 71655341|gbIAAZ38730. 11 ；I 7 1655320 I gb I AAZ38728. 1 I ； | 7 3 8 5 2 9 5 7 | r e f | YP_3 0 8 6 7 1 · 1 | ； 73912688|refIYP_308854. 1 ；I 28849409 | gb | M052887. 11 AF509044_11 ； | 5732422 | gb | MD49093. 11 AF156470_2 | ；I 5732419 | gb | MD49091. 11 AF156469_2 | ； | 5732416 | gb | MD49089. 11 AF156468_2 | ；I 281943541gb|AA033517. 11AF474058_11 ； 1281943511gb|AA033515. 11AF474057_11 ；1281943481gb|AA033513. 11AF474056_11 ； 1281943451gb|AA033511. 11AF474055_11 ；1281943421gb|AA033509. 11AF474054_11 ； 1281943391gb|AA033507. 11AF474053_11 ；1281943361gb|AA033505. 11AF474052_11 ； 1281943331gb|AA033503. 11AF474051_11 ；1281943301gb|AA033501. 11AF474050_11 ； 1281943271gb|AA033499. 11AF474049_11 ；1288494511gb|AA052908. 1|AF509065_11 ； 1288494491gb|AA052907. 1|AF509064_11 ；1288494471gb|AA052906. 11AF509063_11 ； 1288494451gb|AA052905. 11AF509062_11 ；1288494431gb|AA052904. 11AF509061_11 ； 1288494411gb|AA052903. 11AF509060_11 ；
1288494391gb|AA052902. 11AF509059_11 ； 1288494371gb|AA052901. 11AF509058_11 ；1288494351gb|AA052900. 11AF509057_11 ； 1288494331gb|AA052899. 11AF509056_11 ；1288494311gb|AA052898. 11AF509055_11 ； 1288494291gb|AA052897. 11AF509054_11 ；1288494271gb|AA052896. 11AF509053_11 ； 1288494251gb|AA052895. 11AF509052_11 ；1288494231gb|AA052894. 11AF509051_11 ； 1288494211gb|AA052893. 11AF509050_11 ；1288494191gb|AA052892. 11AF509049_11 ； 1288494171gb|AA052891. 11AF509048_11 ；1288494151gb|AA052890. 11AF509047_11 ； 1288494131gb|AA052889. 11AF509046_11 ； 1288494111gb|AA052888. 11AF509045_11 ； 1288494071gb|AA052886. 11AF509043_11 ；1288494051gb|AA052885. 11AF509042_11 ； 1288494031gb|AA052884. 11AF509041_11 ；1288494011gb|AA052883. 11AF509040_11 ； 157324071gb|AAD49083. 11AF156465_21 ；157324251gb|AAD49095. 11AF156471_21 ； 157324131gb|AAD49087. 11AF156467_21 ；157324101gb|AAD49085. 11AF156466_21 ； 157324041gb|AAD49081. 11AF156464_21 ；157324011gb|AAD49079. 11AF156463_21 ； 157323981gb|AAD49077. 11AF156462_21 ；157323951gb|AAD49075. 11AF156461_21 ； 157323921gb|AAD49073. 11AF156460_21 ；157323891gb|AAD49071. 11AF156459_21 ； 157323861gb|AAD49069. 11AF156458_21 ；I 3 2 426 3 I gb I AAA43 2 54. 1 I ； | 3 7 9 3 3 0 7 7 | g b | A A 0 4 6 7 1 3 · 1 | ； 37933074|gbIAA046711. 11 ；379 3 307 1 I gb | AA046709. 1 ； | 3 7 9 3 3 0 6 8 | g b | AA046707. 1 ； 37933065|gbIAA046705. 11 ；I 379 3 306 2 I gb I AA046703. 1 I ； | 3 7 9 3 3 0 5 9 | g b | A A 0 4 6 7 0 1 · 1 | ； 37933056|gbIAA046699. 11 ；I 379 3 305 3 I gb I AA046697. 1 I ； | 3 7 9 3 3 0 5 0 | g b | A A 0 4 6 6 9 5 · 1 | ； 37933047|gbIAA046693. 11 ；I 37933044 I gb I AA04669 1 · 1 I ； | 3 7 9 3 3 0 4 1 | g b | A A 0 4 6 6 8 9 · 1 | ； 37933038|gbIAA046687. 11 ；379 3 303 5 I gb | AA046685. 1 ； | 3 7 9 3 3 0 3 2 | g b | AA046683. 1 ； 37933029|gbIAA046681. 11 ；I 379 3 3026 I gb I AA046679. 1 I ； | 3 7 9 3 3 0 2 3 | g b | A A 0 4 6 6 7 7 · 1 | ； 37933020|gbIAA046675. 11 ；I 379 3 30 1 7 I gb I AA046673. 1 I ； | 3 7 9 3 3 0 1 4 | g b | A A 0 4 6 6 7 1 · 1 | ； 37933011|gb|AA046669. 11 ；I 37933008 I gb I AA046667. 1 I ； | 3 7 9 3 3 0 0 5 | g b | A A 0 4 6 6 6 5 · 1 | ； 37933002|gbIAA046663. 11 ；I 37932999 I gb I AA04666 1 · 1 I ； | 3 7 9 3 2 9 9 6 | g b | A A 0 4 6 6 5 9 · 1 | ； 37932993|gbIAA046657. 11 ；I 37932990 I gb I AA046655. 1 I ； | 3 7 9 3 2 9 8 7 | g b | A A 0 4 6 6 5 3 · 1 | ； 37932984|gbIAA046651. 11 ；I 37 78 5 1 6 3 I gb I AA046420. 1 I ； | 3 7 7 8 5 1 6 0 | g b | A A 0 4 6 4 1 8 · 1 | ； 37785157|gbIAA046416. 11 ；
17
37785 154gtI AA0464 1 4.1 I ；3 7 785 1 5 1 I gt)IAA0464 1 2.1 I ；37785145|gbIAA046408.1
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1 ；113274638|gb|AAK18013. 11AF25882211 ； |50296446|gb|AAT73499. 11 ；I 8307775|gb|AAF74316. 11AF084266_11 ； | 8307773|gb|AAF74315. 11AF084265_1I 83077711gb|AAF74314. 11AF084264_11 ； |73852949|ref|YP_308665. 11 ；I 7 10 1 3490 I db j I BAE07 199. 1 I ； | 5 4 6 1 0 0 3 5 | gb | A A V 3 5 1 1 6 1 | ； 54299856|gbIAAV32652. 11 ；54299842|gbIAAV32644. 1 ； 113925398|gb|AAK49362. 11AF258826_1 ；1139253951gb|AAK49361. l|AF258825_l| ； 1139253921gb|AAK49360. l|AF258824_l| ；1139253891gb|AAK49359. 11AF258821_11 ； 1139253861gb|AAK49358. 11AF258820_11 ；1139253831gb|AAK49357. l|AF258819_l| ； 1139253801gb|AAK49356. l|AF258818_l| ；1139253771gb|AAK49355. l|AF258817_l| ； 1139253741gb|AAK49354. l|AF258816_l| ；I 47 1 5656 1 I gb I AAT12168. 1 I ； | 4 7 1 5 6 5 5 9 | gb | AAT 1 2 1 6 7 1 | ； 47156557|gbIAAT12166. 11 ；I 47 1 56 55 5 I gb I AAT12165. 1 I ； | 4 7 1 5 6 5 5 3 | gb | AAT 1 2 1 6 4 1 | ； 47156551|gbIAAT12163. 11 ；I 47 1 56549 I gb I AAT12162. 1 I ； | 4 7 1 5 6 5 4 7 | gb | AAT 1 2 1 6 1 1 | ； 47156545|gbIAAT12160. 1 ；I 47 1 56543 I gb I AAT 1 2 1 59. 1 I ； | 4 7 1 5 6 5 4 1 | gb | AAT 1 2 1 5 8 1 | ； 47156539|gbIAAT12157. 11 ；I 47 1 56 53 7 I gb I AAT 1 2 1 56. 1 I ； | 4 7 1 5 6 5 3 5 | gb | AAT 1 2 1 5 5 1 | ； 47156533|gbIAAT12154. 11 ；I 47 1 5653 1 I gb I AAT 1 2 1 53. 1 I ； | 4 7 1 5 6 5 2 9 | gb | AAT 1 2 1 5 2 1 | ； 47156527|gbIAAT12151. 11 ；I 47 1 56 52 5 I gb I AAT 1 2 1 50. 1 I ； | 4 7 1 5 6 5 2 3 | g b | A A T 1 2 1 4 9 1 | ； 47156521|gbIAAT12148. 11 ；114308311emb|CAA67498. 11 ； 119422189|gb|AAL87925. 11AF455727_11 ；1194221831gb|AAL87922. l|AF455724_l| ； 1194221811gb|AAL87921. l|AF455723_l| ；I 14532423 I gb I AAK64 188. 1 I ； | 1 366 1046 | emb | CAC37002. 1 ； 5805279|gbIAAD51923. 11 ；I 579 1 6067 I gb I AAW59406. 1 I ； | 5 7 9 1 6 0 1 3 | g b | A A W 5 9 3 9 6 1 | ； 57915966|gbIAAW59388. 11 ；I 477 16769 I gb I AAT3756 1. 1 I ； | 5 8 5 3 1 1 7 3 | db j | B A D 8 9 3 4 4 1 | ；58531153|dbjIBAD89333 1 [1458] I 5853 1 1 35 I dbjBAD893231；I 5853 1 1 1 7dbjBAD89313.1 ；58531085|dbjIBAD89303 1 [1459] I 50956624gbAAT90830.1；I 50296498gbAAT73525.1 I ；50296468|gbIAAT73510.1 ；[1460] I 50296462 IgbAAT73507.H；I 50296458gbAAT73505.ι I ；50296456|gbIAAT73504.1 ；[1461] I 50296454gbAAT73503.ι；I 50296452gbAAT73502.ι I ；50296450|gbIAAT73501.1 ；[1462] I 50296448gbAAT73500.1；I 50296444gbAAT73498.ι I ；50296440|gbIAAT73496.1 ；[1463] I 50296438gbAAT73495.1；I 50296436gbAAT73494.ι I ；50296432|gbIAAT73492.1 ；[1464] 50296430gbAAT7349 11；I 50296428gbAAT73490.ι I ；50296416|gbIAAT73484.1 ；[1465] I 50 2964 1 4gbAAT734831；I 502964 1 2gbAAT73482.ι I ；37963694|gbIAAR05984.1 ；[1466] 37963692gbAAR059831；I 37963696gbAAR05985.ι I ；38524562 IdbjIBAD02360 1 [1467] I 38 5 245 42dbjBAD02349.1；I 24286097gbAAN46833.11 ；61612044|gbIAAX47280.1 ；[1468] I 6 16 1 2038gbAAX47279.1；I 7 1000 1 78db jBAE07 1 53.11 ；30025725|gbIAAP04506.1 ；[1469] I 70905275gbAAZl 416 11；I 70905273gbAAZ14160.ι I ；70905271|gbIAAZ14159.1 ；[1470] 70905269gbAAZl 41581；I 70905267gbAAZ14157.ι I ；70905265|gbIAAZ14156.1 ；[1471] I 70905263 IgbAAZ14155H；I 7090526 1gbAAZl 4 154.11 ；70905259|gbIAAZ14153.1[1472] I 70905257gbAAZ141521；I 70905255gbAAZl 4 15 1.ι I ；70905253|gbIAAZ14150.1[1473] 3 3 3 5 4 3 5 I g？bAAC32096.1；I 3 3 3 5 4 1 5gbAAC32085.ι I ；56548870|gbIAAV97600.1[1474] 56548868gbAAV975991；I 56548866gbAAV97598.ι I ；I 56548864|gbIAAV97597.H[1475] I 56424948gbAAV9 12071；I 56424946gbAAV9 1 206.ι I ；56424942|gbIAAV91204.1[1476] I 50542650gbAAT785901；I 50365727gbAAT76 1 65.ι I ；47834828|gbIAAT39049.1
77[1477]I 47834824 I gb I AAT39047. 1 I ； | 4 7 8 3 4 8 2 2 | g b | A A T 3 9 0 4 6 · 1 | ； 47834814|gbIAAT39042. 11 ；I 478348 1 2 I gb I AAT3904 1 · 1 I ； | 4 0 7 3 2 8 9 6 | e mb | C A F 0 4 4 6 4 · 1 | ； 14275693|emb|CAC40038. 11 ；I 1 3383273 I db j I BAB39508. 1 I ； | 1 3 3 8 3 2 7 1 | db j | B AB 3 9 5 0 7 · 1 | ； 13661044 IembICAC37001. 11 ；I 288230 1 9 I gb I AA046859. 1 I ； | 2 8 8 2 2 8 2 8 | g b | A A 0 4 6 8 5 8 · 1 | ； 28822609|gbIAA046857. 11 ；I 28822076 I gb I AA046856. 1 I ； | 2 8 8 2 1 8 7 1 | gb | AA046 8 5 5 · 1 | ； 28821644|gbIAA046854. 11 ；I 2882 1 462 I gb I AA046853. 1 I ； | 2 8 8 2 1 2 8 0 | g b | A A 0 4 6 8 5 2 · 1 | ； 28821223|gbIAA046851. 11 ；274621131gb|AA015325. 11AF225521_1 ； 1274621111gb|AA015324. 11AF225520_1 ；1274621091gb|AA015323. l|AF225519_l| ； 1274621071gb|AA015322. l|AF225518_l| ；I 21359664|gb|AAM49557. 11AF468839_11 ； |20068025|emb|CAC84758. 11 ；I 20068023 I emb I CAC84686. 1 I ； | 2 0 0 6 8 0 2 1 | emb | C AC 8 4 7 5 7 · 1 | ； 20068019 IembICAC84756. 11 ；I 200680 17 I emb I CAC84755. 1 I ； | 2 0 0 6 8 0 1 5 | emb | C AC 8 4 7 5 4 · 1 | ； 20068007 Iemb|CAC84750. 11 ；I 19697848 I gb I AAL3 1425. 1 I ； | 1 9 6 9 7 8 4 6 | gb | AAL 3 1 4 2 4 · 1 | ； 19697836|gbIAAL31419. 11 ；1194221951gb|AAL87928. l|AF455730_l| ； 1194221931gb|AAL87927. l|AF455729_l| ；1194221911gb|AAL87926. 11AF455728_11 ； 1194221871gb|AAL87924. 11AF455726_11 ；1194221851gb|AAL87923. l|AF455725_l | ； 1160767171gb|AAL14089. l|AF222819_l| ；16076715|gbIAAL14088. 1|AF222818_1 ； 113661048|emb|CAC37003. 1 ；8452850 | gb | MF75122. 11 AFl 15293_1 ； 18452848 | gb | MF75121. 11 AFl 15292_1 ；323669|gbIAAA42968. 1 ； 1133517|sp|P16508|RRP1_IAMAN ；1133523|sp|P03430|RRP1_IAWIL| ； |2506782|sp|P16506|RRP1_IAKOR| ；133527|sp|P16512|RRP1_IAZTF ； 1133526|sp|P16510|RRP1_IAZ0N ；1133525|sp|P16509|RRP1_IAZH3| ； 1133524|sp|P16514|RRP1_IAWIS| ；1133522|sp|P16513|RRPl_IATKM| ； 11335211sp|P165111RRP1_IASIN ；1133518|sp|P16507|RRP1_IAME8| ； 1133512|sp|P18882|RRP1_IAKIE| ；1335111sp|P16505|RRP1_IAHTE ； 1133510|sp|P16504|RRP1_IAHL0 ；133509|sp|P16503|RRP1_IAGU2 ； 1133506|sp|P16502|RRP1_IABEI ；6647779|sp|Q825711RRP1_IAF0M ； |6647775|sp|0917411RRP1_IAKIT ；6647773|sp|089749|RRP1_IACKH ； 11335311sp|P19703|RRP1_INCJJ ；133520|sp|P034311RRP1_IAPUE ； 1133519|sp|P03432|RRP1_IANT6| ；133505|sp|P21426|RRPl_IAANN ； |401026|sp|P313411RRP1_IAVI7 ；133516|sp|P261211RRP1_IALE3 ； 1133515|sp|P26120|RRP1_IALE2| ；[1507]133514|sp|P26119|RRP1_IALE1 ；|133508|sp|P26118|RRP1_IADUN ；34733402|gbIAAQ81638. 1 ； |34733400|gb|AAQ81637. 1 ；9863938 | gb | MG01228. 11 AF216740_1 ； 19863920 | gb | MGO1218. 11 AF216732_1 ；9863902 | gb | MG01208. 11 AF216724_1 ； 19863883 | gb | MGOl 198. 1 |AF216716_1 ；I 324980|gb|AAA43647. 11 ； |324970|gb|AAA43646. 1。在本发明中所引用的优选流感株是含有这些特定蛋白质的流感株，例如针对该流感株的本发明多肽需要是免疫原性的。上述的索取号除明确表明特定蛋白质序列外，还明确地表明病毒株的身份(identity)。在某些优选实施方式中，根据本发明的多肽可以含有一条或者多条上述的序列， 并且与已知人类和禽流感病毒株的共有序列具有至少60%的同源性(或与这样序列具有至少60%同源性的2个或更多个七氨基酸或者更多氨基酸的抗原决定簇)。在进一步优选的实施方式中，所述多肽可以含有一条或者多条上述的序列，并且与已知人类流感病毒株的共有序列具有至少60%的同源性(或与这样序列具有至少60%同源性的2个或更多个七氨基酸或者更多氨基酸的抗原决定簇)。在本发明的上下文中所提及的第一多肽序列与第二多肽序列的同源性百分比被定义为将第二序列中与第一序列的氨基酸残基在位置和同一性上均匹配的氨基酸残基的数目除以第二多肽中氨基酸残基的总数(第一多肽和第二多肽必需具有相同的氨基酸残基数目)并乘以100。在本发明中，优选与所限定序列的多肽同源性是75%或更高，85%或更高，95%或更高或100% (或基本上为100% )。在上述序列内的抗原决定簇不受到特别限定，只要它们含有7个氨基酸或更多。 优选的是，这些抗原决定簇的长度适合用于具有特定MHC的特定脊椎动物物种中(例如人类中)的CTL抗原决定簇。通常，这些抗原决定簇含有8个、9个、10个或11个氨基酸残基， 但如果需要可以含有更多个。通常，适当的抗原决定簇是脊椎动物如人类中的CTL抗原决定簇。通常，所述多肽含有7 100个氨基酸，优选8 50个氨基酸。该尺寸不应该大到可使所用的抗原决定簇会遭受与免疫系统中非保护性的抗原决定簇的竞争(由于这个原因，不包括全长蛋白质)，该尺寸也不能小到仅提供非常窄的保护范围。更优选的范围是 8 40个氨基酸，15 40个氨基酸和15 35个氨基酸。最优选的长度是20 35个氨基酸残基。特别优选的是，所述多肽由以下序列构成(或基本上由其构成)，该序列选自在上面所列出的蛋白质具体列表中如上限定的位置的序列。除了长度不应该超过100个氨基酸残基的上述多肽外，本发明还提供了多抗原决定簇免疫原性多肽，其含有本发明的两个或者更多个多肽。这些多抗原决定簇多肽在尺寸上不受到限制。因此，它们不仅扩展到上面提出的具有7 100个氨基酸残基的多肽，还扩展到较大的多肽，只要这些较大的多肽含有两个或者更多个单元，每个单元都由本发明的多肽构成。因此，本发明包括一种多肽，其具有本发明的100个重复的七氨基酸单元，比方说作为一种多肽，其具有52个某八氨基酸抗原决定簇单元，23个另一种十氨基酸抗原决定簇单元。这种类型的多肽将不会遭受与含有一个或两个抗原决定簇的类似长度多肽相关的竞争问题。为了避免怀疑，所述多抗原决定簇多肽可以含有相同抗原决定簇的多个拷贝，或者许多不同抗原决定簇的单拷贝，或者两个或更多个抗原决定簇的多拷贝。[1518]本发明还提供了一种多肽组合物，其含有两种或者更多种不同的上述多肽。因此， 所述多肽组合物可以含有共同在相同混合物或制剂中的任何数目的本发明多肽。同时存在多种多肽是有用的，因为每一种都可以引发其自己的免疫应答，从而扩大了该组合物的保护效果。特别优选的是，该组合物含有所有的SEQ ID 1 6序列，可以每一种序列都在单独的肽中，也可以几种序列在较少数目的肽中(例如，三种序列组合在一条较大的肽中，另外三种序列组合在另一条较大的肽中等)。本发明还提供了一种多肽构建体，该构建体含有载体和上述的多肽。可以通过将载体与上述的两个或者更多个抗原决定簇和/或多肽组合在一起形成该构建体。所述载体可以是分子，例如辅助剂(adjuvant)和/或赋形剂。在本文中，组合的意思是混合在一起或者结合在一起(例如通过共价键)。本发明还提供了一种用于药物中的上述多肽。还提供了一种针对流感的药物或疫苗组合物，其含有上述的多肽，和一中或者多种适当的赋形剂和/或辅助剂，或者上述的多肽构建体，以及可选择地一个或者多个适当的赋形剂和/或辅助剂(如果所述构建体的载体部分自身是赋形剂或辅助剂，则可以不需要其他的赋形剂或辅助剂)。赋形剂或辅助剂不受到特别的限制，可以采用在药物和疫苗中所使用的任何赋形剂或辅助剂。根据为本发明进行适当改造(例如通过将本发明的多肽与适当的赋形剂进行混合)的任何已知方法可以生产所述药物或疫苗组合物。本发明还提供了一种生产上述多肽的方法。该方法不受特别的限制，并通常包括将两个或者更多个抗原决定簇连接以形成所述多肽。然而，所述多肽可以通过直接化学合成(例如每次引入一个氨基酸，直到形成全长的多肽)或者通过重组方法来合成。这些普通的方法对于本领域技术人员是公知的，并且如果需要还可以根据本发明进行改造。在某些情况中，本发明的多肽可以在一个末端或者两个末端含有额外的氨基酸序列，以辅助合成该多肽。优选的是，这些额外的序列长度为1 5个氨基酸。典型的是，包括3个氨基酸。 例如，在一个优选的实施方式中，SEQ ID 6在所述序列的IIG部分之前紧接着包含氨基酸 AAS。本发明还提供了上述多肽或组合物在制备药物或疫苗中的应用，所述药物或疫苗能有效地治疗或预防流感。本发明还提供了一种治疗或预防流感的方法，该方法包括给脊椎动物施用上述的多肽、组合物、药物或疫苗。给药方法不受到特别限制，并可以包括皮下给药、肌内给药、静脉内给药、皮内给药或鼻内给药，或者可以口服给药(例如以药丸或液体制剂的形式)，或者如果需要，可以以栓剂的形式给药。这些给药制剂的形式不受特别的限制，可以采用已知的进行过对本领域技术人员显而易见的适当改变的形式。剂量不受到特别的限制，可以在ι μ g ioog多肽/个体的范围内，这依赖于所涉及个体的尺寸、体重和物种。本发明可以应用于任何脊椎动物，这是因为脊椎动物的免疫系统以相关的方式运行。本文中所提到的脊椎动物通常是哺乳动物、鸟类、爬行动物或鱼。特别优选的是所述脊椎动物是人、家畜(例如狗和猫)、养殖的动物(例如猪或马)、牛类动物(例如牛或奶牛) 或家禽(例如家养的鸟、养殖的鸟类、猎鸟)。如果所述脊椎动物是鸟类，则优选是鸡、火鸡、 鸭或鹅。本发明可以采用的人MHC(HLA)的例子包括下列[1525]HLA-AA氺010101、ΑΦ010102、ΑΦ010103、A*0102, A*0103, A*0104N, A*0106, A*0107,A*0108、ΑΦ0109、ΑΦ0110、A氺02010101、A*02010102L、A*020102、A*020103、A*020104、A*020105、A*020106、A*020107、A*020108、A*020109、A氺020110、A*02011UA*0202,A*02030UA*020302,A*0204,A*0205,A*02060UA*020602,ΑΦ020603、ΑΦ0207、ΑΦ0208、A*0209, A*0210, A*021U A*0212, A*0213, A*0214,A*0215N、A*0216、A*021701、A*021702、A*0218、A*0219、A*022001、A*022002、ΑΦ0221、ΑΦ0222、ΑΦ0224、A*0225> A*0226> A*0227> A*0228> A*0229> A*0230>ΑΦ0231、ΑΦ0232Ν、A*0233, A*0234, A*02350U A*023502, A*0236, A*0237,A*0238、A*0239、A*0240、A*0241、A*0242、A*0243N、A*0244、A*0245、A*0246、A*0247、A*0248、A*0249、A*0250、A*0251、A*0252、A*0253N、A*0254、A*0255、A*0256、A*0257、A*0258、A*0259、A*0260、A*0261、A*0262、A*0263、A*0264、ΑΦ0265、ΑΦ0266、ΑΦ0267、A*0268, A*0269, A*0270, A*027U A*0272, A*0273,ΑΦ03010101、ΑΦ03010102Ν、A*03010103, A*030102, A*030103, A*0302, A*0303N,A*0304、A*0305、A*0306、A*0307、A*0308、A*0309、A*0310、A*0311N、A*0312、A*0313、A*0314、A*110101、A*110102、A*1102、A*1103、A*1104、A*1105、A*1106、A*1107、A*1108、A*1109、A*1110、A*1111、A*1112、A*1113、A*1114、A*1115、A*1116、A*1117、A*1118、A*1119、A*2301、A*2302、A*2303、A*2304、A*2305、ΑΦ2306、ΑΦ2307Ν、A*2308N, A*2309, A*2310, A*2311N, A*2312, A*2402010UA*24020102L,A*240202,A*240203,A*240204,A*240205,A*240206, A*24030UΑΦ240302、ΑΦ2404、A*2405, A*2406,A*2407,A*2408,A*2409N,A*2410,A*2411N,A*2413、A*2414、A*2415、A*2417、A*2418、A*2419、A*2420、A*2421、A*2422、A*2423、A*2424、A*2425、A*2426、A*2427、A*2428、A*2429、A*2430、A*2431、A*2432、A*2433、A*2434、A*2435、A*2436N、A*2437、A*2438、A*2439、A*2440N、ΑΦ2441、ΑΦ2442、ΑΦ2443、A*2444,A*2445N,A*2446,A*25010UA*250102,A*2502、A*2503、A*2504、A*2601、A*2602、A*2603、A*2604、A*2605、A*2606、ΑΦ260701、ΑΦ260702、ΑΦ2608、A氺2609、ΑΦ2610、ΑΦ2611Ν、A*2612,A*2613,A*2614、A*2615、A*2616、A*2617、A*2618、A*2619、A*2620、A*2621、A*2622、ΑΦ2623、ΑΦ29010101、ΑΦ29010102Ν、A*29020U A*290202, A*290203, A*2903,A*2904、A*2905、A*2906、A*2907、A*2908N、A*2909、A*2910、A*2911、A*300101、A*300102、A*300201、A*300202、A*3003、A*3004、A*3006、A*3007、A*3008、ΑΦ3009、ΑΦ3010、ΑΦ3011、ΑΦ3012、ΑΦ310102、ΑΦ3102、A*3103,A*3104,A*3105,A*3106、A*3107、A*3108、A*3109、A*3110、A*3201、A*3202、A*3203、A*3204、A氺3205、ΑΦ3206、ΑΦ3207、A*3208, A*330U A*33030U A*330302, A*3304, A*3305,A*3306、A*3307、A*3401、A*3402、A*3403、A*3404、A*3405、A*3406、A*3601、A*3602、A*3603、A*3604、A*4301、A*6601、A*6602、A*6603、A*6604、A*680101、A祁80102、A祁80103、A祁802、A祁80301、A祁80302、A祁804、A祁805、A祁806、A*6807、A*6808、A*6809、A*6810、A*6811N、A*6812、A*6813、A*6814、A祁815、A*6816、A*6817、A*6818N、A*6819、A*6820、A*6821、A*6822、A*6823、A*6824、1564]A*6825、A 祁826、A*6827、A*6901、ΑΦ7401、ΑΦ7402、A*7403、ΑΦ7404、A*7405、1565]A*7406、A*7407、A*7408、A*7409、ΑΦ7410、ΑΦ8001。1566]HLA-B1567]B*070201、B*070202、B*070203、B*070204、B*0703、B*0704、B*0705、B*0706、1568]B*0707、B*0708、B*0709、B*0710、B*0711、B*0712、B*0713、B*0714、B*0715、1569]B*0716、B*0717、B*0718、B*0719、B*0720、B*0721、B*0722、B*0723、B*0724、1570]B*0725,B*0726,B*0727、B*0728、B*0729、B*0730、B*0731、B*0732、B*0733、1571]B*0734、B*0735,B*0736、B*0737、B*0738、B*0801、B*0802、B*0803、B*0804、1572]B*0805、B*0806、B*0807、ΒΦ0808Ν、B*0809、B*0810、B*0811、ΒΦ0812、B*0813、1573]B*0814、B*0815、B*0816、B*0817、B*0818、B*0819N,B*0820、B*0821、ΒΦ0822、1574]B*1301、B*1302、B*1303、B*1304、B*1306、B*1307N、B*1308、B*1309、B*1310、1575]B*1311、B*1312、B*1313、B*1401、ΒΦ1402、B*1403, B*1404, B*1405, B*140601、1576]B*140602、B*15010101、ΒΦ15010102Ν、B氺150102、B*150103、B*150104、B*150105、1577]B*1502、B*1503、B*1504、B*1505、B*1506、B*1507、B*1508、B*1509、B*1510、1578]B*151101、B*151102、B*1512、B*1513、B*1514、B*1515、B*1516、B*15170101、1579]Β*15170102、Β*1518、ΒΦ1519、ΒΦ1520、ΒΦ1521、ΒΦ1523、ΒΦ1524、ΒΦ1525、ΒΦ1526Ν、1580]B*1527、B*1528,B*1529、ΒΦ1530、B*153UB*1532,B*1533,B*1534,B*1535,1581]B*1536、B*1537、B*1538、ΒΦ1539、B*1540, B*1542, B*1543, B*1544, B*1545,1582]B*1546、B*1547、B*1548、ΒΦ1549、B*1550,B*155UB*1552,B*1553,B*1554,1583]B*1555、B*1556、B*1557、ΒΦ1558、B*1560,B*156UB*1562,B*1563,B*1564,1584]B*1565、B*1566、B*1567、ΒΦ1568、B*1569, B*1570、B*1571、ΒΦ1572、B*1573、1585]B*1574、B*1575、B*1576、B*1577、B*1578、B*1579N、B*1580,B*158UB*1582,1586]B*1583、B*1584、B*1585、ΒΦ1586、B*1587,B*1588,B*1589,B*1590,B*159U1587]B*1592、B*1593、B氺1594N、B*180101、ΒΦ180102、B*1802,B*1803,B*1804,1588]B*1805、B*1806、Β*1807、Β*1808、ΒΦ1809、ΒΦ1810、ΒΦ1811、ΒΦ1812、ΒΦ1813、1589]B*1814、B*1815、B*1817N、ΒΦ1818、B*1819、B*1820,B*270UB*2702,B*2703,1590]B*2704、B氺270502、ΒΦ270503、ΒΦ270504、B*270505、B*270506,B*270507,B*2706,1591]B*2707、B*2708、B*2709、B*2710、B*2711、B*2712、B*2713、B*2714、B*2715、1592]B*2716、B*2717、B*2718、B*2719、B*2720、B*2721、B*2723、B*2724、B*2725、1593]B*2726,B氺350101、ΒΦ350102、B*3502, B*3503, B*3504, B*3505, B*3506, B*3507,1594]B*3508、Β*350901、ΒΦ350902、ΒΦ3510、Β*3511、ΒΦ3512、ΒΦ3513、ΒΦ351401、1595]B*351402、ΒΦ3515、B*3516, B*3517、B*3518,B*3519、B*3520,B*352UB*3522,1596]B*3523、B*3524,B*3525、ΒΦ3526、B*3527、B*3528, B*3529, B*3530, B*3531、1597]B*3532、B*3533、B*3534、ΒΦ3535、B*3536, B*3537、B*3538, B*3539, B*3540N,1598]B*3541、B*3542、B*3543、B*3544、B*3545、B*3546、B*3547、B*3548、B*3549、1599]B*3550、B*3551、B*3552、B*3553N、B*3701、B*3702、B*3703N、B*3704、B*3705、1600]B*3706、B*3707、B氺3801、ΒΦ380201、ΒΦ380202、B*3803, B*3804,B*3805,B*3806,1601]B*3807、B*3808、B*3809、ΒΦ3810、B氺390101、ΒΦ390103、B*390104、B*390201、1602]B*390202、ΒΦ3903、B*3904,B*3905,B*39060UB*390602, B*3907,B*3908,
82[1603]B*3909、B*3910、B*3911、B*3912、B*3913、B*3914、B*3915、B*3916、B*3917、B*3918、B*3919、B*3920、B*3922、B氺3923、B*3924、B*3925N、B*3926、B*3927、B*3928、B*3929、B*3930、B*3931、B*3932、B*400101、B*400102、B*400103、B*400104、B*400105、B*400201、B*400202、B*4003、B*4004、B*4005、B*40060101、B*40060102、B*4007、B*4008、B*4009、B*4010、B*4011、B*4012、B*4013、B*401401、B*401402、B*401403、B*4015、B*4016、B*4018、B*4019、B*4020、B*4021、B*4022N、B*4023、B*4024、B*4025、B*4026、B*4027、B*4028、B*4029、B*4030、B*4031、B*4032、B*4033、B*4034、B*4035、B*4036、B*4037、B*4038、B*4039、B*4040、B*4042、B*4043、B*4044、B*4045、B*4046、B*4047、B*4048、B*4049、B*4050、B*4051、B*4052、B*4053、B*4054、B*4055、B*4056、B*4057、B*4101、B*4102、B*4103、B*4104、B*4105、B*4106、B*4201、B*4202、B*4204、B*420501、B*420502、B*4206、B*44020101、B*44020102S、B*440202、B*440203、B*440301、B*440302、B*4404、B*4405、B*4406、B*4407、B*4408、B*4409、B*4410、B*4411、B*4412、B*4413、B*4414、B*4415、B*4416、B*4417、B*4418、B*4419N、B*4420、B*4421、B*4422、B*4423N、B*4424、B*4425、B*4426、B*4427、B*4428、B*4429、B*4430、B*4431、B*4432、B*4433、B*4434、B*4435、B*4436、B*4437、B*4438、B*4439、B*4440、B*4501、B*4502、B*4503、B*4504、B*4505、B*4506、B*4507、B*4601、B*4602、B*4603、B*4604、B*47010101、B*47010102、B*4702、B*4703、B*4704、B*4705、B*4801、B*4802、B*4803、B*4804、B*4805、B*4806、B*4807、B*4808、B*4809、B*4810、B*4901、B*4902、B*4903、B*5001、B*5002、B*5004、B*510101、B*510102、B*510103、B*510104、B*510105、B*510201、B*510202、B*5103、B*5104、B*5105、B*5106、B*5107、B*5108、B*5109、B*5110、B*5111N、B*5112、B*511301、B*511302、B*5114、B*5115、B*5116、B*5117、B*5118、B*5119、B*5120、B*5121、B*5122、B*5123、B*5124、B*5126、B*5127N、B*5128、B*5129、B*5130、B*5131、B*5132、B*5133、B*5134、B*5135、B*5136、B*520101、B*520102、B*520103、B*520104、B*5202、B*5203、B*5204、B*5205、B*5206、B*530101、B*530102、B*5302、B*5303、B*5304、B*5305、B*5306、B*5307、B*5308、B*5309、B祁401、B*5402、B*5501、B*5502、B*5503、B*5504、B*5505、B*5507、B*5508、B*5509、B*5510、B*5511、B*5512、B*5513、B*5514、B*5515、B*5516、B*5601、B*5602、B*5603、B*5604、B*560501、B*560502、B*5606、B*5607、B*5608、B*5609、B*5610、B*5611、B*5612、B*5613、B*5614、B*570101、B*570102、B*5702、B*570301、B*570302、B*5704、B*5705、B*5706、B*5707、B*5708、B*5709、B*5801、B*5802、B*5804、B*5805、B*5806、B*5807、B*5808、B*5809、B*5810N、B*5901、B*670101、B*670102、B*6702、B*7301、B*7801、B*780201、B*780202、B*7803、B*7804、B*7805、B*8101、B*8102、B*8201、B*8202、B*8301。HLA-CCw*010201、Cw*010202、Cw*0103、Cw*0104、Cw*0105、Cw*0106、Cw*0107、Cw*0108、Cw*0109、Cw*0110、Cw*020201、Cw*020202、Cw*020203、Cw*020204、Cw*020205、Cw*0203、Cw*0204、Cw*0205、Cw*0206、Cw*0207、Cw*0208、Cw*0209、1642]Cw*03020UCw*030202, Cw*03030U Cw*030302, Cw*030303, Cw*030304,
1643]Cw*030401、Cw*030402, Cw*030403, Cw*0305, Cw*0306、Cw*0307, Cw*0308、
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1645]Cw*0317,Cw*0318,Cw*0401010U Cw*04010102, Cw*040102, Cw*0403,
1646]Cw*040401、Cw*040402、Cw*0405、Cw*0406、Cw*0407、Cw*0408、Cw*0409N、
1647]Cw*0410, Cw*041 U Cw*0412, Cw*0413, Cw*0414, Cw*0415, Cw*05010U
1648]Cw*050102, Cw*0502, Cw*0503, Cw*0504, Cw*0505, Cw*0506, Cw*0507N,
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1650]Gw氺0607、Gw氺0608、Gw氺0609、Gw氺0610、Gw氺0611、Gw氺070101、Gw氺070102、
1651]Cw*070103, Cw*0702010U Cw*07020102, Cw*07020103, Cw*0703, Cw*07040U
1652]Cw祁70402、Cw祁705、Cw祁706、Cw祁707、Cw祁708、Cw祁709、Cw祁710、Cw祁711、
1653]Cw*0712、Cw*0713、Cw*0714、Cw*0715、Cw*0716、Cw*0717、Cw*0718、Cw*0719、
1654]Cw*0720、Cw*0721、Cw*0722、Cw*0723、Cw*0724、Cw*0725、Cw*0726、Cw*0727、
1655]Gw氺0728、Gw氺0729、Gw氺080101、Gw氺080102、Gw氺0802、Gw氺0803、Gw氺0804、
1656]Gw氺0805、Gw氺0806、Gw氺0807、Gw氺0808、Gw氺0809、Gw氺0810、Gw氺0811、Gw氺0812、
1657]Cw*12020UCw*120202, Cw*120203, Cw*12030U Cw*120302, Cw*120303,
1658]Cw* 12040 U Cw* 120402, Cw* 1205, Cw* 1206, Cw* 1207, Cw* 1208, Cw* 1209,
1659]Cw*1210、Cw*1211、Cw*1212、Cw*1213、Cw*1214、Cw*1215、Cw*140201、
1660]Cw*140202, Cw*140203, Cw*1403, Cw*1404,Cw*1405,Cw*15020U Cw*150202,
1661]Cw* 1503, Cw* 1504, Cw*150501、Cw*150502、Cw*150503、Cw*150504、Cw* 1506,
1662]Cw* 1507, Cw* 1508, Cw* 1509, Cw*1510, Cw*151U Cw*1512, Cw*160U Cw*1602,
1663]Cw*16040UCw*1606, Cw* 170U Cw* 1702, Cw* 1703, Cw*180U Cw*1802o
1664]HLA-E
1665]E*0101、ΕΦ010301、ΕΦ010302、E*010303、E*0104o
1666]HLA-F
1667]F*010101、F*010102。
1668]HLA-G
1669]G*01010UG*010102, G氺010103、G*010104、G*010105, G*010106、G*010107,
1670]G氺010108、G*0102、G*0103、G*010401、G*010402、G*010403、G*0105N、G*0106。
1671]HLA-DRA
1672]DRA*010UDRA*01020UDRA*010202o
1673]HLA-DRBl
1674]DRB1*01010UDRB1*010102, DRB1*010103, DRB1*01020U DRB1*010202,
1675]DRB1*010203、DRB1*010204、DRB1*0103、DRB1*0104、DRB1*0105、DRB1*0106、
1676]DRB1*0107、DRB1*0108、DRB1*0109、DRB1*0110、DRB1*0111、DRB1*030101、
1677]DRB1*030102,DRB1*03020UDRB1*030202, DRB1*0303, DRB1*0304,
1678]DRB1*03050UDRB1*030502, DRB1*0306, DRB1*0307, DRB1*0308, DRB1*0309,
1679]DRB1*0310、DRB1*0311、DRB1*0312、DRB1*0313、DRB1*0314、DRB1*0315、
1680]DRB1*0316、DRB1*0317、DRB1*0318、DRB1*0319、DRB1*0320、DRB1*0321、[1681]DRB1*0322、DRB1*0323、DRB1*0324、DRB1*0325、DRB1*0326、DRB1*0327、DRB1*0328, DRB1*04010U DRB1*040102, DRB1*0402, DRB1*04030UDRB1*040302,DRB1*0404,DRB1*04050UDRB1*040502, DRB1*040503,DRB1*040504,DRB1*0406,DRB1*04070UDRB1*040702, DRB1*040703,DRB1*0408、DRB1*0409、DRB1*0410、DRB1*0411、DRB1*0412、DRB1*0413、DRB1*0414、DRB1*0415、DRB1*0416、DRB1*0417、DRB1*0418、DRB1*0419、DRB1*0420, DRB1*042UDRB1*0422, DRB1*0423,DRB1*0424, DRB1*0425,DRB1*0426, DRB1*0427, DRB1*0428, DRB1*0429,DRB1*0430,DRB1*043UDRB1*0432, DRB1*0433, DRB1*0434, DRB1*0435,DRB1*0436,DRB1*0437,DRB1*0438,DRB1*0439, DRB1*0440, DRB1*044UDRB1*0442, DRB1*0443,DRB1*0444、DRB1*0445、DRB1*0446、DRB1*0447、DRB1*0448、DRB1*0449、DRB1*0450,DRB1*07010UDRB1*070102, DRB1*0703, DRB1*0704, DRB1*0705,DRB1*0706, DRB1*0707, DRB1*0708, DRB1*08010U DRB1*080102, DRB1*08020UDRB1*080202、DRB1*080203、DRB1*080302、DRB1*080401、DRB1*080402、DRB1*080403、DRB1*080404、DRB1*0805、DRB1*0806、DRB1*0807、DRB1*0808、DRB1*0809、DRB1*0810、DRB1*0811、DRB1*0812、DRB1*0813、DRB1*0814、DRB1*0815,DRB1*0816, DRB1*0817, DRB1*0818, DRB1*0819, DRB1*0820,DRB1*0821、DRB1*0822、DRB1*0823、DRB1*0824、DRB1*0825、DRB1*0826、DRB1*0827,DRB1*0828,DRB1*0829,DRB1*090102,DRB1*090103, DRB1*0902,DRB1*0903,DRB1*10010UDRB1*100102,DRB1*11010UDRB1*110102,DRB1*110103、DRB1*110104、DRB1*110105、DRB1*1102、DRB1*1103、DRB1*110401、DRB1*110402、DRB1*1105、DRB1*110601、DRB1*110602、DRB1*1107、DRB1*110801、DRB1*110802、DRB1*1109、DRB1*1110、DRB1*1111、DRB1*111201、DRB1*111202、DRB1*1113、DRB1*1114、DRB1*1115、DRB1*1116、DRB1*1117、DRB1*1118、DRB1*1119、DRB1*1120、DRB1*1121、DRB1*1122、DRB1*1123、DRB1*1124、DRB1*1125、DRB1*1126、DRB1*112701、DRB1*112702、DRB1*1128、DRB1*1129、DRB1*1130、DRB1*1131、DRB1*1132、DRB1*1133、DRB1*1134、DRB1*1135、DRB1*1136、DRB1*1137、DRB1*1138、DRB1*1139、DRB1*1140、DRB1*1141、DRB1*1142、DRB1*1143、DRB1*1144、DRB1*1145、DRB1*1146、DRB1*1147、DRB1*1148、DRB1*1149、DRB1*1150、DRB1*1151、DRB1*1152、DRB1*1153、DRB1*1154、DRB1*120101、DRB1*120102、DRB1*120201、DRB1*120202、DRB1*120302、DRB1*1204、DRB1*1205、DRB1*1206、DRB1*1207、DRB1*1208, DRB1*1209, DRB1*1210,DRB1*13010U DRB1*130102, DRB1*130103,DRB1*130201、DRB1*130202、DRB1*130301、DRB1*130302、DRB1*1304、DRB1*1305, DRB1*1306, DRB1*13070UDRB1*130702,DRB1*1308,DRB1*1309,DRB1*1310、DRB1*1311、DRB1*1312、DRB1*1313、DRB1*131401、DRB1*131402、DRB1*1315、DRB1*1316、DRB1*1317、DRB1*1318、DRB1*1319、DRB1*1320、DRB1*1321、DRB1*1322、DRB1*1323、DRB1*1324、DRB1*1325、DRB1*1326、DRB1*1327,DRB1*1328, DRB1*1329, DRB1*1330,DRB1*133U DRB1*1332,
85[1720]DRB1*1333、DRB1*1334、DRB1*1335、DRB1*1336、DRB1*1337、DRB1*1338、DRB1*1339、DRB1*1340、DRB1*1341、DRB1*1342、DRB1*1343、DRB1*1344、DRB1*1345,DRB1*1346,DRB1*1347, DRB1*1348, DRB1*1349, DRB1*1350,DRB1*1351、DRB1*1352、DRB1*1353、DRB1*1354、DRB1*1355、DRB1*1356、DRB1*1357,DRB1*1358,DRB1*1359,DRB1*1360,DRB1*136UDRB1*1362,DRB1*1363、DRB1*1364、DRB1*1365、DRB1*140101、DRB1*140102、DRB1*1402、DRB1*140301、DRB1*140302、DRB1*1404、DRB1*140501、DRB1*140502、DRB1*1406, DRB1*14070UDRB1*140702, DRB1*1408,DRB1*1409,DRB1*1410,DRB1*1411、DRB1*1412、DRB1*1413、DRB1*1414、DRB1*1415、DRB1*1416、DRB1*1417、DRB1*1418、DRB1*1419、DRB1*1420、DRB1*1421、DRB1*1422、DRB1*1423、DRB1*1424、DRB1*1425、DRB1*1426、DRB1*1427、DRB1*1428、DRB1*1429,DRB1*1430,DRB1*143U DRB1*1432,DRB1*1433, DRB1*1434,DRB1*1435、DRB1*1436、DRB1*1437、DRB1*1438、DRB1*1439、DRB1*1440、DRB1*1441、DRB1*1442、DRB1*1443、DRB1*1444、DRB1*1445、DRB1*1446、DRB1*1447、DRB1*1448、DRB1*150101、DRB1*150102、DRB1*150103、DRB1*150104,DRB1*150105,DRB1*15020UDRB1*150202, DRB1*150203,DRB1*1503、DRB1*1504、DRB1*1505、DRB1*1506、DRB1*1507、DRB1*1508、DRB1*1509、DRB1*1510、DRB1*1511、DRB1*1512、DRB1*1513、DRB1*1514、DRB1*1515、DRB1*1516、DRB1*160101、DRB1*160102、DRB1*160201、DRB1*160202, DRB1*1603, DRB1*1604,DRB1*16050UDRB1*160502, DRB1*1607,DRB1*1608。HLA-DRB2-9DRB2*010UDRB3*01010UDRB3*0101020UDRB3*01010202,DRB3*010103,DRB3*010104、DRB3*0102、DRB3*0103、DRB3*0104、DRB3*0105、DRB3*0106、DRB3*0107、DRB3*0108、DRB3*0109、DRB3*0110、DRB3*0111、DRB3*0201、DRB3*02020UDRB3*020202, DRB3*020203, DRB3*020204, DRB3*0203,DRB3*0204,DRB3*0205, DRB3*0206, DRB3*0207,DRB3*0208,DRB3*0209,DRB3*0210、DRB3*0211、DRB3*0212、DRB3*0213、DRB3*0214、DRB3*0215、DRB3*0216, DRB3*0217, DRB3*0218, DRB3*0219,DRB3*03010UDRB3*030102,DRB3*0302、DRB3*0303、DRB牡01010101、DRB牡0102、DRB牡01030101、DRB4*01030102N、DRB4*010302、DRB4*010303、DRB4*010304、DRB4*0104、DRB4*0105、DRB4*0106、DRB4*0107、DRB4*0201N、DRB4*0301N、DRB5*010101[1752]DRB5*010102, DRB5*0102, DRB5*0103,DRB5*0104,DRB5*0105,DRB5*0106,DRB5*0107、DRB5*0108N、DRB5*0109、DRB5*01ION、DRB5*0111、DRB5*0112、DRB5*0113、DRB5*0202、DRB5*0203、DRB5*0204、DRB5*0205、DRB6*0101、DRB6*020UDRB6*0202, DRB7*01010U DRB7*010102, DRB8*0101、DRB肿OlOl。HLA-DQAlDQA1*01010U DQA1*010102, DQA1*01020U DQA1*010202, DQA1*0103,DQA1*010401、DQA1*010402、DQA1*0105、DQA1*0106、DQA1*0107、DQA1*0201、
86[1759]DQA1*03010U DQA1*0302, DQA1*0303, DQA1*04010U DQA1*040102,DQA1*0402、DQA1*0403N、DQA1*0404、DQA1*050101、DQA1*050102、DQA1*0502、DQA1*0503、DQA1*0504、DQA1*0505、DQA1*060101、DQA1*060102、DQA1*0602。HLA-DQBlDQB1*02010U DQB1*020102, DQB1*0202, DQB1*0203, DQB1*03010UDQB1*030102,DQB1*03020UDQB1*030202,DQB1*030302,DQB1*030303,DQB1*0304、DQB1*030501、DQB1*030502、DQB1*030503、DQB1*0306、DQB1*0307、DQB1*0308、DQB1*0309、DQB1*0310、DQB1*0311、DQB1*0312、DQB1*0313、DQB1*0401、DQB1*0402、DQB1*050101、DQB1*050102、DQB1*05020UDQB1*050202, DQB1*05030U DQB1*050302, DQB1*0504,DQB1*06010UDQB1*060102, DQB1*060103, DQB1*0602, DQB1*0603,DQB1*06040U DQB1*060402, DQB1*06050U DQB1*060502, DQB1*0606,DQB1*0607,DQB1*0608,DQB1*0609,DQB1*0610,DQB1*06110UDQB1*061102,DQB1*0612、DQB1*0613、DQB1*0614、DQB1*0615、DQB1*0616、DQB1*0617、DQB1*0618, DQB1*0619, DQB1*0620,DQB1*062UDQB1*0622,DQB1*0623。HLA-DPAlDPA1*010301、DPA1*010302、DPA1*010303、DPA1*0104、DPA1*0105、DPA1*0106、DPA1*0107,DPA1*0108,DPA1*02010UDPA1*020102,DPA1*020103, DPA1*020104,DPA1*020105,DPA1*020106,DPA1*02020UDPA1*020202,DPA1*020203,DPA1*0203、DPA1*0301、DPA1*0302、DPA1*0303、DPA1*0401。HLA-DPBlDPB1*01010U DPB1*010102,DPB1*010103,DPB1*0102,DPB1*020102,DPB1*020103, DPB1*020104,DPB1*020105,DPB1*020106,DPB1*0202,DPB1*0203, DPB1*03010U DPB1*030102, DPB1*0302, DPB1*04010UDPB1*040102, DPB1*0402, DPB1*050U DPB1*060U DPB1*080U DPB1*090UDPB1*100UDPB1*11010UDPB1*110102,DPB1*130UDPB1*140UDPB1*150UDPB1*160UDPB1*170UDPB1*180UDPB1*190UDPB1*20010UDPB1*200102,DPB1*210UDPB1*220UDPB1*230UDPB1*240UDPB1*250UDPB1*26010UDPB1*260102, DPB1*270U DPB1*280U DPB1*290U DPB1*300U DPB1*310UDPB1*320UDPB1*330UDPB1*340UDPB1*350UDPB1*360UDPB1*370UDPB1*3801、DPB1*3901、DPB1*4001、DPB1*4101、DPB1*4401、DPB1*4501、DPB1*4601、DPB1*4701、DPB1*4801、DPB1*4901、DPB1*5001、DPB1*5101、DPBl祁201、DPBl祁301、DPBl祁401、DPBl祁501、DPBl祁601、DPBl祁701、DPBl祁801、DPBl祁901、DPBl祁001、DPBl祁101N、DPBl祁201、DPBl祁301、DPBl祁401N、DPBl祁501、DPBl祁601、DPBl祁701、DPBl祁801、DPBl祁901、DPB1*7001、DPB1*7101、DPB1*7201、DPB1*7301、DPB1*7401、DPB1*7501、DPB1*760UDPB1*770UDPB1*780UDPB1*790UDPB1*800UDPB1*810UDPB1*820UDPB1*830UDPB1*840UDPB1*850UDPB1*860UDPB1*870U1798]DPB1*880UDPB1*890UDPB1*900UDPB1*910UDPB1*920UDPB1*930U
1799]DPB1*940UDPB1*950UDPB1*960UDPB1*970UDPB1*980UDPB1*9901o
1800]HLA-DMA
1801]DMA*0101、DMA*0102、DMA*0103、DMA*0104。
1802]HLA-DMB
1803]DMB*0101、DMB*0102、DMB*0103、DMB*0104、DMB*0105、DMB*0106。
1804]HLA-DOA
1805]D0A*01010UD0A*0101020UD0A*01010202, D0A*01010203, D0A*010103,
1806]D0A*01010401、D0A*01010402、D0A*010105。
1807]HLA-DOB
1808]D0B*0101010UD0B*01010102, D0B*010102, D0B*01020U D0B*010202,
1809]D0B*0103、D0B*01040101、D0B*01040102。
1810]MHC I 类
1811]H-2Db、H-2Dd、H_2Dk、H_2Dq、H_2Kb、H_2Kd、H_2Kk、H_2Ld、H-2M3、H_2Ad、
1812]H-2Ag7、H_2Ak、H2_Ab、H_2Ed、H_2Ek、H_2Bxk、H-2F、H-2I、H-2P、H-2R、H-2S、
1813]H-2&cd、H-2T4、H_2U。
1814]MHC II 类
1815]I-Ab、I-AcU I_Ag7、I_Ak、I_Ap、I_Aq、I_Ar、I-As> I_Au、I_Av、I_Ea、I_Eb、I_Ed、
1816]I-Ek、I-Es、I-Eu、H-2Q、H-2Qa-2、H-2Qa-2a、Qa_la、Qa-lb。
1817]本发明不限于这些MHC和HLA分子，并且如果需要，可以仅仅通过建立诸如肽的物质与这些分子的反应性来适应于新发现的这类分子。这可以使用本领域中标准的已知技术而容易地完成。用于本发明的特别优选的HLA等位基因包括下列基因HLA I 类
88[1819]
权利要求
1.一种具有不超过100个氨基酸的多肽，所述多肽含有与SEQ ID 3具有至少85%同源性的一条或者多条序列，或者含有两个或者更多个具有7个氨基酸或更多氨基酸的抗原决定簇，每个抗原决定簇与SEQ ID 3的和所述抗原决定簇长度相同的子序列具有至少85% 的同源性SEQ ID 3 DLIFLARSALILRGSVAHKSC其中，所述多肽在表达主要组织相容性复合体(MHC)等位基因的脊椎动物中是免疫原性的，且其中所述多肽不是完整的流感病毒蛋白。
2.如权利要求1所述的多肽，所述多肽含有细胞毒性T淋巴细胞(CTL)抗原决定簇。
3.如前述任一项权利要求所述的多肽，其包含2、3、4、5或更多个抗原决定簇。
4.如前述任一项权利要求所述的多肽，其对SEQID 1 6中任何所述序列内的抗原决定簇是免疫原性的。
5.如前述任一项权利要求所述的多肽，其对流感病毒株是免疫原性的。
6.如权利要求5所述的多肽，其对多种流感病毒株是免疫原性的。
7.如前述任一项权利要求所述的多肽，其还含有一条或者多条来自流感病毒蛋白的其他序列。
8.如权利要求7所述的多肽，其中所述蛋白是流感NP蛋白。
9.如前述任一项权利要求所述的多肽，其中所述同源性基本上为100%。
10.如前述任一项权利要求所述的多肽，其中所述抗原决定簇包含8、9、10或11个氨基酸或者更多个氨基酸。
11.如前述任一项权利要求所述的多肽，其具有不超过50个氨基酸残基。
12.如前述任一项权利要求所述的多肽，其包含15 35个氨基酸残基。
13.一种多肽组合物，其含有两种或者更多种如前述任一项权利要求所述的多肽。
14.如权利要求13所述的多肽组合物，其中具有SEQID 1、3、4和6序列的多肽全部存在SEQ ID 1 DLEALMEffLKTRPILSPLTKGILGFVFTLTVP SEQ ID 3 DLIFLARSALILRGSVAHKSC SEQ ID 4 PGIADIEDLTLLARSMVVVRP SEQ ID 6 IlGILHLILffILDRLFFKCIYRLFo
15.如权利要求14所述的多肽组合物，其中具有SEQID 1 6序列的多肽全部存在 SEQ ID 1 DLEALMEffLKTRPILSPLTKGILGFVFTLTVPSEQ ID 2 LLYCLMVMYLNPGNYSMQVKLGTLCALCEKQASHSSEQ ID 3 DLIFLARSALILRGSVAHKSCSEQ ID 4 PGIADIEDLTLLARSMVVVRPSEQ ID 5 LLIDGTASLSPGMMMGMF匪LSTVLGVSILNLGQSEQ ID 6 IlGILHLILffILDRLFFKCIYRLFo
16.如前述任一项权利要求所述的多肽或多肽组合物，所述多肽或多肽组合物用于药物中。
17.—种产生前述任一项权利要求所述的多肽的方法，所述方法包括将两个或更多个抗原决定簇组合以形成所述多肽。
18.一种多肽构建体，所述构建体包含载体和前述任一项权利要求所述的多肽。
19.一种产生权利要求18所述的多肽构建体的方法，所述方法包括将两个或者更多个抗原决定簇和/或多肽与所述载体组合。
20.如权利要求18或19所述的多肽构建体或方法，其中所述载体是分子。
21.如权利要求18 20中任一项所述的多肽构建体或方法，其中所述载体包括辅助剂和/或赋形剂。
22.—种针对流感的药物或疫苗组合物，其包含权利要求1 16中任一项所述的多肽或多肽组合物，以及适当的赋形剂和/或辅助剂。
23.—种针对流感的药物或疫苗组合物，其包含权利要求18、20或21所述的多肽构建体，并且任选包含适当的赋形剂和/或辅助剂。
24.一种制备权利要求22所述的药物或疫苗组合物的方法，所述方法包括将权利要求 1 16中任一项所述的多肽或多肽组合物与适当的赋形剂和/或辅助剂进行混合。
25.权利要求1 16、18和20 23中任一项所述的多肽、多肽组合物、多肽构建体或药物或疫苗组合物在制备有效治疗或预防流感的药物或疫苗中的应用。
26.如权利要求25所述的应用，其中所述流感是脊椎动物的流感。
27.如权利要求沈所述的应用，其中所述脊椎动物选自哺乳动物、鸟、爬行动物和鱼。
28.如权利要求27所述的应用，其中所述脊椎动物是人、家养的动物、养殖的动物或牛类动物，或者是家禽。
29.如权利要求观所述的应用，其中所述脊椎动物选自鸡、鸭、鹅、猪、马、牛、狗或猫。
30.根据前述权利要求任一项所述的多肽、多肽构建体、方法、药物、疫苗或应用，其中所述流感是流感A株。
31.如权利要求1 四中任一项所述的多肽、多肽构建体、方法、药物、疫苗或应用，其中所述流感是流感B株。
全文摘要
本发明提供了一种具有不超过100个氨基酸的多肽，所述多肽含有与SEQ ID 1～6任一序列具有至少60％同源性的一条或者多条序列，或者含有两个或者更多个具有7个氨基酸或更多氨基酸的抗原决定簇，每个抗原决定簇与SEQ ID 1～6任一序列的和所述抗原决定簇长度相同的子序列具有至少60％的同源性SEQ ID 1DLEALMEWLKTRPILSPLT KGILGFVFTLTVP ；SEQ ID 2LLYCLMVMYLNPGNYSMQVKLGTL CALCEKQASHS；SEQ ID 3DLIFLARSALILRGSVAHKSC；SEQ ID 4 PGIADIEDLTLLARSMVV VRP；SEQ ID 5LLIDGTASLSPGMMMGM FNMLSTVLGVSILNLGQ；SEQ ID 6IIGILHLILWILDRLFFKCIYRLF；其中，所述多肽在表达主要组织相容性复合体(MHC)等位基因的脊椎动物中是免疫原性的，且其中所述多肽不是完整的流感病毒蛋白。
文档编号C07K14/00GK102382179SQ201110311189
公开日2012年3月21日 申请日期2007年2月5日 优先权日2006年2月7日
发明者威尔逊·罗梅罗·卡帕罗斯-万德雷, 格雷戈里·艾伦·斯特洛夫 申请人:派特塞尔有限公司