专利名称：一种从藏丹参中分离纯化迷迭香酸的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种从藏丹参中分离纯化迷迭香酸的制备方法。
背景技术：
藏丹参为唇形科的绒毛鼠尾草5 /Wa castanea Diels f. tomentosa Stib，其在 《中国植物志》和《西藏植物志》中均有记载，为栗色鼠尾草的变型。在藏医里，藏丹参广泛用于心悸、心烦失眠、肝脾肿大、关节疼痛、产后淤血疼痛、黄疸性发烧、口腔溃疡、月经不调等病症的治疗。藏丹参集中分布住林芝地区的林芝、米林、工布江达和波密等四个相邻县， 为林芝地区独特的林下藏药材。初步调查认为林芝地区绒毛鼠尾草资源量约为5000吨以上，在资源上具有较大的开发潜力。迷迭香酸(Rosmarinic Acid)是一种多功能酚酸类化合物，作为抗氧化剂，具有极强的清除体内自由基的活性.其抗氧化性强于咖啡酸、绿原酸、叶酸等，能抑制内皮细胞调节的低密度脂蛋白的氧化，并具有显著的抗病毒活性。迷迭香酸的来源甚广，在丹参、紫苏草、鼠尾草、夏枯草、轮香山香、牛至、迷迭香、蜜蜂花和马郁兰中等均发现迷迭香酸，但含量较低。迷迭香酸结构式如下
由其结构式可以看出迷迭香酸为一种多酚类化合物，结构不稳定，易被氧化。传统的迷迭香酸提取工艺是药材粉碎后热水提取，乙酸乙酯萃取得浸膏后上硅胶柱分离，氯仿-甲醇洗脱。此工艺消耗时间长，容易造成溶剂残留
发明内容
本发明的目的在于提供一种操作简便，能从藏丹参中分离纯化出高纯度迷迭香酸的方法。为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案
一种从藏丹参中分离纯化迷迭香酸的方法，包括以下步骤
(1)取藏丹参药材，粉碎，用乙醇水溶液提取；
(2)提取液加酸调节pH值到1-5；
(3)处理后的提取液在大孔树脂柱上进行吸附、洗脱先以水为洗脱液，再以乙醇溶液洗脱；洗脱液经浓缩、干燥后即得产品。在上述方法中，步骤(1)中所述乙醇水溶液的乙醇体积百分比浓度为20-90%。所述乙醇水溶液提取包括乙醇加热回流提取法、浸渍法、渗漉法、微波提取法、超声法或酶法的一种，优选加热回流法提取。乙醇溶液的体积百分比浓度优选为40-90%，最佳乙醇溶液体积百分比浓度为70%。在上述方法中，步骤(2)中所述酸为盐酸、硫酸、硝酸、甲酸、乙酸或高氯酸中的一种或两种以上混合。PH值优选=2. 5^3. 5。在上述方法中，步骤(3)中所述吸附采用的吸附剂为弱碱性离子交换树脂D392、 D380或D301R，所述大孔树脂为AB_8、SP825、DlOl或HPD750中的一种或多种组合。在上述方法中，步骤(3)中所述大孔树脂吸附pH值在2-8之间，优选pH=3 3.5; 吸附与洗脱温度在20-35°C，优选温度25°C。在上述方法中，步骤(3)中所述水洗脱以0.5_4BV/hr的速度洗脱，洗脱体积为 1-5BV。在上述方法中，步骤(3)中所述乙醇溶液洗脱所用乙醇体积浓度为20%_80%，洗脱速度为0. 5-1. 5BV/hr，洗脱体积4-7BV。在上述方法中，步骤(3)中的所述干燥采用真空干燥或喷雾干燥。浓缩采用常压或者减压旋转蒸发浓缩法。所得产品的迷迭香酸经高效液相色谱测定。其中色谱分析条件如下=Hypersil 0DS2色谱柱(5 μ m, 4. 6 mm χ 250 mm )流动相以乙腈为流动相A，以0. 05%磷酸溶液为流动相B按表1中的规定进行梯度洗脱；检测波长为；柱温30°C ；流速为1. Oml/min。表1迷迭香酸HPLC梯度洗脱条件
权利要求
1.一种从藏丹参中分离纯化迷迭香酸的制备方法，其特征包括以下步骤(1)取藏丹参药材，粉碎，用乙醇水溶液提取；(2)提取液加酸调节pH值到1-5；(3)处理后的提取液在大孔树脂柱上进行吸附、洗脱先以水为洗脱液，再以乙醇溶液洗脱；洗脱液经浓缩、干燥后即得产品。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述乙醇水溶液的乙醇体积百分比浓度为20-90%。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述酸为盐酸、硫酸、硝酸、甲酸、乙酸或高氯酸中的一种或两种以上混合。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述吸附采用的吸附剂为弱碱性离子交换树脂D392、D380或D301R，所述大孔树脂为AB_8、SP825、D101或HPD750中的一种或多种组合。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述大孔树脂吸附pH值在2-8 之间，吸附与洗脱温度在20-35°C。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述水洗脱以0.5-4BV/hr的速度洗脱，洗脱体积为1-5BV。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤C3)中所述乙醇溶液洗脱所用乙醇体积浓度为20%-80%，洗脱速度为0. 5-1. 5BV/hr，洗脱体积4-7BV。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中的所述干燥采用真空干燥或喷雾干燥。
全文摘要
本发明公开了一种从藏丹参中分离纯化迷迭香酸的制备方法。将藏丹参药材粉碎成细粉，加入乙醇，控制pH值，低温提取，离心或过滤得澄清液，在大孔树脂柱上动态吸附，先用去离子水洗脱，再以一定浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥即得产品。本发明以迷迭香酸含量较高的藏丹参为原料，筛选不同型号大孔吸附树脂，并优化吸附洗脱条件，实现对藏丹参中迷迭香酸的工业化制备。所得的迷迭香酸含量为32.11%，回收率可达93.22%。
文档编号C07C67/56GK102351701SQ20111033059
公开日2012年2月15日 申请日期2011年10月27日 优先权日2011年10月27日
发明者刘忠云, 孙红梅, 张聪琪, 李金华, 杨丽, 汪涛, 葛发欢, 许定舟, 钟鸣 申请人:广州汉方现代中药研究开发有限公司