专利名称：抗cd38抗体与来那度胺或硼替佐米用于治疗多发性骨髓瘤和nhl的制作方法
抗CD38抗体与来那度胺或硼替佐米用于治疗多发性骨髓
瘤和NHL相关申请的交叉引用本申请要求于2011年5月17日提交的美国临时申请序列号61/486，814、于2011年3月29日提交的美国临时申请序列号61/468，607、于2011年I月31日提交的美国临时申请序列号61/437，696、以及于2010年9月27日提交的美国临时申请序列号61/386，619的权益，它们的全部内容都通过引用相结合。
背景技术：
多发性骨髓瘤是一种B细胞恶性肿瘤，其特征在于骨髓中分泌性浆细胞大量积累，这些细胞繁殖指数低并且寿命延长。该疾病最终攻击骨骼和骨髓，在整个骨骼系统导致多种肿瘤和损伤。所有癌症中有约1%、并且所有血液性恶性肿瘤中有近超过10%可归因于多发性骨髓瘤(MM)。MM的发生率在老年人群中增加，确诊时中位数年龄为约61岁。目前可使用的针对多发性骨髓瘤的疗法包括化学治疗、干细胞治疗、Thalomid (沙利度胺)、Veleade⑩(硼替佐米)、Aredia (帕米膦酸盐)、以及Zometa (唑来膦酸)。目前的治疗方案(它们包括化学治疗剂例如长春新碱、bcnu、美法仑、环磷酰胺、阿霉素、以及泼尼松或地塞米松的组合)的完全缓解率仅为约5%，而中位数存活时间为从确诊时间起大概36至48个月。最近，使用高剂量的化学治疗之后跟随自体骨髓或外周血液单核细胞移植的完整缓解率和缓解周期增加。然而，总体生存时间仅略微延长，并且没有证据显示获得了治愈。最终，MM患者经常复发，甚至在单独使用干扰素a (IFN-a)或将其与类固醇类相组合进行维持治疗时也如此。非霍奇金氏淋巴瘤是 一大类淋巴瘤，它们是起源于淋巴系统的癌症，那时淋巴细胞(B细胞或T细胞)已经恶化并且繁殖失控，形成肿瘤块。总体而言，NHL涵盖了约30中不同亚型的淋巴瘤，包括弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)以及滤泡型淋巴瘤(FL)。到2019年，NHL的发生在主要市场中将达到超过14万。可供使用的治疗选择包括美罗华/莫须瘤、它们的组合，例如R-CHOP (利妥昔单抗、环磷酰胺、阿霉素以及泼尼松)、R-CVP (美罗华、环磷酰胺、长春新碱以及泼尼松)以及化学治疗。此外，缓解之后或复发之后，可以考虑血液干细胞移植。尽管存在着当前这些治疗选择，但在进行性NHL的高风险群体中存活率在5年内可以低至30%。因此，对于有效治疗以及组合治疗仍然存在高的未满足的需求。⑶38是一种抗原的实例，该抗原表达于此类恶性浆细胞上、以及其他淋巴细胞上。CD38所具有的功能包括在黏附和信号传导事件中的受体介导以及(胞外酶)酶活性这二者。作为一种胞外酶，⑶38使用NAD+作为底物，用于环ADP-核糖(cADPR)以及ADPR的形成，但也用于尼克酰胺和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸盐(NAADP)的形成。cADPR和NAADP已经显示充当用于Ca2+动员的第二信使。提及将NAD+转化成cADPR，⑶38调控细胞外的NAD+浓度，并且因此通过调解NAD诱导的细胞死亡(NCID)而调控细胞存活。除了经由Ca2+进行信号传导之外，CD38的信号传导经由与T细胞以及B细胞上的抗原-受体复合物或其他类型的受体复合物(例如MHC分子)交叉对话而发生，并且以此方式涉及若干细胞反应，并且也涉及IgGd转换和分泌。对CD38 特异的抗体说明于 WO 1999/62526 中(Mayo Foundation) ;W0 200206347(CrucelI Holland 公司)；US 2002164788 (Jonathan Ellis (乔纳森艾利斯))，其全文通过引用相结合；W0 2005/103083 (MorphoSysAG公司)，美国序列号10/588，568，其全文通过引用相结合，W02006/125640 (MorphoSys AG公司)，美国序列号11/920，830，其全文通过引用相结合，以及WO 2007/042309 (MorphoSys AG公司)，美国序列号12/089，806，其全文通过引用相结合；W0 2006099875 (Genmab公司)，美国序列号11/886，932，其全文通过引用相结合；以及WO 08/047242 (Sanof1-Aventis集团)，美国序列号12/441，466，其全文通过引用相结合。对⑶38特异的抗体与其他药剂的组合说明于以下文件中:W0200040265(Research Development Foundation(研究发展基金会));W02006099875 和 WO 2008037257(Genmab 公司)；以及 WO 2010061360、WO 2010061359、WO 2010061358 和 WO 2010061357(Sanofi Aventis集团),它们的全文都通过引用相结合。很明显，尽管最近抗癌药剂的发现和发展取得了进展，但涉及到表达⑶38的肿瘤的多种癌症形式预后仍不佳。因此，对于用于治疗此种形式癌症的改进方法存在需要。概述—方面，本披露涉及一种对CD38特异的抗体与沙利度胺或它的一种类似物(例如，来那度胺)的协同组合。另一方面，本披露涉及一种协同组合，该组合包括一种对⑶38特异的抗体以及硼替佐米或其他蛋白酶体抑制剂。此类组合可用于治疗以下癌症，例如多发性骨髓瘤和/或非霍奇金氏淋巴瘤。
体内和体外模型被认为预测了某种化合物或化合物的组合在人体内的行为将如何。在此，对CD38特异的抗体与来那度胺的组合在人类多发性骨髓瘤细胞系中进行测试，并且鉴定了协同作用。此外，对CD38特异的抗体与来那度胺的组合、以及对CD38特异的抗体与硼替佐米的组合在针对抗多发性骨髓瘤细胞和伯基特淋巴瘤淋巴瘤(一种NHL形式)这二者的小鼠模型中进行测试，并且鉴定了协同作用。因此，这些组合将有效地治疗人类的多发性骨髓瘤和/或非霍奇金氏淋巴瘤。此外，在本说明书中示例的对CD38特异的抗体正进入临床试验，在这些试验中此类组合可以在人类中确认。当化合物在体内亦或体外相组合时，期待该组合仅具有加和效应。相当意外的是，诸位发明人发现一种具体抗CD38抗体与来那度胺的组合介导了 AM0-1和NC1-H929多种骨髓瘤细胞系中抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)的协同水平。此外，并且还出乎意料的是，一种具体的抗CD38抗体当与来那度胺相组合或者当与硼替佐米相组合时，介导了在NC1-H929 SCID小鼠模型中的骨溶解的降低的协同水平，并且协同地在RAMOS SCID小鼠模型中增加了中位数存活天数。因此，示例的对CD38特异的抗体与来那度胺的组合以及示例的对CD38特异的抗体与硼替佐米的组合在与多发性骨髓瘤和/或非霍奇金氏淋巴瘤相关的体内和/或体外模型中协同地发挥作用。本披露的一个方面包括一种组合，其中该对⑶38特异的抗体包括序列GFTFSSYYMN (SEQ ID 号:1)的或序列 SYYMN (SEQ ID 号:14)的一个 HCDRl 区、序列GIS⑶PSNTYYADSVKG (SEQ ID 号:2) —个 HCDR2 区、序列 DLPLVYTGFAY (SEQ ID 号:3)的一个 HCDR3 区、序列 S⑶NLRHYYVY (SEQ ID 号:4)的一个 LCDRl 区、序列⑶SKRPS (SEQ ID号:5)的一个IXDR2区、以及序列QTYTGGASL (SEQ ID号:6)的一个IXDR3区，并且该沙利
度胺或它的一种类似物是来那度胺。在优选的方面，该组合用于治疗多发性骨髓瘤和/或非霍奇金氏淋巴瘤。本披露的一个方面包括一种组合，其中该对⑶38特异的抗体包括序列GFTFSSYYMN (SEQ ID 号:1)的或序列 SYYMN (SEQ ID 号:14)的一个 HCDRl 区、序列GIS⑶PSNTYYADSVKG (SEQ ID 号:2)的一个 HCDR2 区、序列 DLPLVYTGFAY (SEQ ID 号:3)的一个 HCDR3 区、序歹Ij SGDNLRHYYVY (SEQ ID 号:4)的一个 LCDRl 区、序列⑶SKRPS (SEQ ID号:5)的一个IXDR2区、以及序列QTYTGGASL (SEQ ID号:6)的一个IXDR3区，并且该蛋白酶体抑制剂是硼替佐米。在优选的方面，该组合用于治疗多发性骨髓瘤和/或非霍奇金氏淋巴瘤。
图1显示了单独使用来那度胺在AM0-1细胞中对⑶38表达的效应。图2显示了单独使用来那度胺在不同的多发性骨髓瘤细胞系中对细胞增殖的效应。这个测量值代表了来那度胺对每种细胞系的相对细胞毒性。图3显示了 M0R03087与来那度胺的组合在AM0-1细胞中对ADCC的介导。PBMC细胞和AM0-1细胞在用M0R03087处理之前用来那度胺处理。M0R03207结合了溶菌酶，并且用作同种型对照，因为它是lgGl。LEN表示来那度胺。“理论性”表示单独使用M0R03087的数值与单独使用LEN的数 值之和。所显示的这些数据是表3b的平均数。图4显示了 M0R03087与来那度胺的组合在AM0-1细胞上对ADCC的介导。仅有PBMC在用M0R03087处理之前用来那度胺处理。M0R03207结合了溶菌酶，并且用作同种型对照，因为它是lgGl。LEN表示来那度胺。“理论性”表示单独使用M0R03087的数值与单独使用LEN的数值之和。所显示的这些数据是表4b的平均数。图5显示了单独使用来那度胺在NC1-H929细胞中对⑶38表达的效应。图6显示了 M0R03087与来那度胺的组合在NC1-H929细胞上对ADCC的介导。PBMC细胞和NC1-H929细胞在用M0R03087处理之前用来那度胺处理。理论性表示使用由Chou(周)等人的分数产物概念(fractional productconcept)所计算的组合。所显示的这些数据是表7b的平均数。图7显示了 M0R03087与来那度胺的组合在NC1-H929细胞上对ADCC的介导。仅有PBMC在用M0R03087处理之前用来那度胺处理。理论性表示使用由Chou (周)等人的分数产物概念所计算的组合。所显示的这些数据是表8b的平均数。图8显示了由单独使用硼替佐米所造成的不同的多发性骨髓瘤细胞系的生长抑制。AM0-1 细胞上 IC50 是 3.9nM。LP-1 细胞上 IC50 是 6.1nM。NC1-H929 细胞上 IC50 是
3.3nM。RPM1-8226 细胞上 IC50 是 9.0nM0图9 显示了 15 u g/ml 的 M0R03087 与 VeluKie (硼替佐米)的组合在 NC1-H929细胞上对ADCC的介导。这两幅图表示两个不同供体。图10显示了 15 u g/ml的M0R202与Velcade (硼替佐米)的组合在LP-1细胞上对ADCC的介导。这两幅图表示两个不同供体。图11显示了 M0R202的氨基酸序列。
图12显示了 M0R202与来那度胺组合在AM0-1细胞中对ADCC介导的最佳拟合曲线，如Chou (周)等人所描述，并且它还表示了所产生的最佳拟合曲线，用于分析NC1-H929细胞中对ADCC的介导。图13至图18显示了对使用M0R202与来那度胺组合在介导AM0-1细胞上的ADCC中的六个分开实验，进行的Chou (周)因素协同作用分析。图13显示实验I。图14显示实验2。图15显示实验3。图16显示实验4。图17显示实验5。图18显示实验6。图13至图15衍生自显示在表3a-c以及图3中的三个实验。图16至图18衍生自显示在表4a_c以及图4中的三个实验。图19显示了在实例7中描述的各个研究组的MicroCT扫描平均总骨体积，其中这些结果显示在表11中。图20显示了在实例11中描述的各个研究组的MicroCT扫描平均总骨体积，其中这些结果显示在表17中。发明详细说明“协同”、“协同作用”或“协同的”是指超过一个组合预期的加和作用某组合的“协同”、“协同作用”、“协同的”效应通过Chou (周)等人和/或Clark (克拉克)等人的方法在此确定。参见 Ting-Chao Chou (周廷朝)，Theoretical Basis, Experimental Design, andComputerized Simulation of Synergism and Antagonism in Drug Combination Studies(药物组合研究中协同作用和拮抗作用的理论基础、实验设计、与计算机化模拟)，PharmacoIRev (药理学评论)58:621-681 (2006),其全文通过引用相结合。在Chou (周)等人中，披露了确定协同作用的多种方法，并且在此使用了这些方法中的至少一种。参见Clarke (克拉克)等人，Issues in experimental design and endpoint analysis in the studyof experimental cytotoxic agents in vivo in breast cancer and other models (乳癌和其他模型中体内实验细胞毒剂的研究中的实验设计和终点法分析中的问题)，BreastCancer Research and Treatment (乳癌研究与治疗)46:255-278 (1997),其全文通过引用相结合。术语“抗体”是指单克隆抗体，包括任何同种型，例如IgG、IgM、IgA、IgD以及IgE。IgG抗体由两条相同的重链和两条相同的轻链组成，它们通过二硫键相连接。每条重链和轻链包含一个恒定区和一个可变区。每个可变区包含三个片段，被称为“互补决定区”(“⑶R”)或“高变区”，它们主要负责结合抗原的表位。他们按照顺序从N末端编号，被称为CDR1、⑶R2、以及⑶R3。⑶R以外的可变区的高度保守部分被称为“框架区”。“抗体片段”是指Fv、scFv、dsFv、Fab、Fab’ F (ab' )2片段或其他片段,它包含至少一个可变重链或可变轻链,各自含有⑶R和框架区。THALOMID (沙利度胺)结合地塞米松适用于治疗患有新近诊断为多发性骨髓瘤的患者，并且由Celgene公司上市。“沙利度胺类似物”包括但不局限于:沙利度胺其自身、来那度胺(CC-5013，Revlimid ),Pomalidomide (CC4047, Actimid )以及在 WO 2002068414 和 WO 2005016326中披露的化合物，其全文通过引用相结合。该术语是指一种合成的化学化合物，使用沙利度胺结构作为骨架(例如，已加入侧面基团或此类基团已从母体结构中删除)。该类似物与沙利度胺以及它的代谢化合物在结构上存在以下差异:例如烷基链、 一个分子片段的长度差异，一个或多个功能基团、或离子作用的变化。术语“沙利度胺类似物”还包括沙利度胺的代谢物。沙利度胺类似物包括一种对应化合物的S-与R-对映体的消旋混合物，以及单个的S-对映体或R-对映体。消旋体混合物是优选的。沙利度胺类似物包括以下结构的化合物:(A)来那度胺
权利要求
1.一种对⑶38特异的抗体与以下各项的协同组合，该抗体包括序列GFTFSSYYMN (SEQID 号:I)的或 SYYMN (SEQ ID 号:14)的一个 HCDRl 区、序列 GISOTPSNTYYADSVKG (SEQ ID号:2)的一个HCDR2 区、序列DLPLVYTGFAY(SEQ ID 号:3)的一个HCDR3 区、序列 S⑶NLRHYYVY(SEQ ID号:4)的一个LCDRl区、序列⑶SKRPS (SEQ ID号:5)的一个LCDR2区、以及序列QTYTGGASL (SEQ ID 号:6)的一个 LCDR3 区 (a)沙利度胺或它的一种类似物，或 (b)一种蛋白酶体抑制剂， 用于治疗多发性骨髓瘤和/或非霍奇金氏淋巴瘤。
2.根据权利要求2所述的一种组合，其中该抗体包括序列QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYYMNffVRQAPGKGLEff VSGIS⑶PSNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLPLVYTGFAYffGQGTLVTV SS (SEQ ID 号:10)的一个可变重链以及序列 DIELTQPPSVSVAPGQTARISCS⑶NLRHYYVYWYQQKPGQAPVLVIY ⑶SKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAEDEADYYCQTYTGGASLV FGGGTKLTVLGQ (SEQ ID 号:11)的一个可变轻链。
3.根据权利要求1或2所述的一种组合，其中该抗体包括一个IgGlFc区。
4.根据以上权利要求中任一项所述的一种组合，其中该抗体包括一个经修饰的Fe区，其中所述修饰增强了 ADCC活性。
5.根据以上权利要求中任一项所述的一种组合，其中所述对CD38特异的抗体以及所述沙利度胺或它的一种类似物或一种蛋白酶体抑制剂是分开给药的。
6.根据以上权利要求中任一项所述的一种组合，该组合能降低骨溶解，其效能比单独使用来那度胺和/或硼替佐米好至少两倍。
7.根据以上权利要求中`任一项所述的一种组合，其中所述对CD38特异的抗体与沙利度胺或它的一种类似物相组合。
8.根据权利要求7所述的一种组合，其中该沙利度胺类似物包括来那度胺。
9.根据以上权利要求中任一项所述的一种组合，其中来那度胺在给予对CD38特异的抗体之前给药。
10.根据以上权利要求中任一项所述的一种组合，其中来那度胺在给予对CD38特异的抗体之前至少72小时给药。
11.根据权利要求7至10中任一项所述的一种组合，该组合能在分离的人类PBMC的存在下通过ADCC来介导表达⑶38的AMO-1和/或NC1-H929细胞的杀伤，其效能比单独使用来那度胺好至少两倍。
12.根据权利要求1至6中任一项所述的一种组合，包括所述对⑶38特异的抗体以及一种蛋白酶体抑制剂。
13.根据权利要求12所述的一种组合，其中所述蛋白酶体抑制剂是硼替佐米。
14.根据权利要求12或13所述的一种组合，该组合能在分离的人类PBMC的存在下通过ADCC来介导表达⑶38的LP-1和/或NC1-H929细胞的杀伤，其效能比单独使用硼替佐米好至少两倍。
15.一种对CD38特异的抗体与来那度胺或其他沙利度胺类似物的协同组合，该抗体包括序列 GFTFSSYYMN (SEQ ID 号:I)的一个 HCDRl 区、序列 GIS⑶PSNTYYADSVKG (SEQ ID号:2)的一个HCDR2 区、序列 DLPLVYTGFAY(SEQ ID 号:3)的一个HCDR3 区、序列 S⑶NLRHYYVY(SEQ ID号:4)的一个LCDRl区、序列⑶SKRPS (SEQ ID号:5)的一个LCDR2区、以及序列QTYTGGASL (SEQ ID号:6)的一个IXDR3区，用于治疗多发性骨髓瘤和/或非霍奇金氏淋巴瘤。
16.一种对CD38特异的抗体与硼替佐米或其他蛋白酶体抑制剂的协同组合，该抗体包括序列 GFTFSSYYMN (SEQ ID 号:I)的一个 HCDRl 区、序列 GIS⑶PSNTYYADSVKG (SEQ ID号:2)的一个HCDR2 区、序列 DLPLVYTGFAY(SEQ ID 号:3)的一个HCDR3 区、序列 S⑶NLRHYYVY(SEQ ID号:4)的一个LCDRl区、序列⑶SKRPS (SEQ ID号:5)的一个LCDR2区、以及序列QTYTGGASL (SEQ ID号:6)的一个IXDR3区，用于治疗多发性骨髓瘤和/或非霍奇金氏淋巴瘤。
全文摘要
本发明涉及一种抗CD38抗体与来那度胺的药物组合以及一种抗CD38抗体与硼替佐米的药物组合。
文档编号C07K16/28GK103118706SQ201180043775
公开日2013年5月22日 申请日期2011年9月26日 优先权日2010年9月27日
发明者利莎·罗杰克加尔, 瑞纳·博克斯哈默, 简·恩德尔, 马克·温德尔利奇, 克里斯托夫·萨缪尔森 申请人:莫佛塞斯公司