专利名称：一种制备叶下珠斯泰丁a的方法
技术领域：
本发明属于中药化学 技术领域，涉及ー种制备叶下珠斯泰丁 A的方法。
背景技术：
叶下珠斯泰丁 A (Phyllanthostatin A)是ー种木脂素类化合物，分子式为C29H3tlO13，分子量为586. 55，为无定性固体，mp. 127_130°C。主要存在于大戟科渐尖叶下珠Phyllanthus acuminatus Vahl.的根中、不齐浅裂叶下珠anisolvbus 的叶和枝中。药理学研究表明叶下珠斯泰丁具有细胞抑制活性，体外抑制PS白血病细胞生长，ED50 为 4 μ g/mL0目前对叶下珠斯泰丁A的研究较少，因此提供一种叶下珠斯泰丁 A的制备方法对含有叶下珠斯泰丁 A的药材资源开发及药理研究具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是提供ー种操作简单、制备量大、纯度高，适合エ业化生产的制备叶下珠斯泰丁 A的方法。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案
一种制备叶下珠斯泰丁 A的方法，其特征在于包括以下步骤
A.提取取富含叶下珠斯泰丁A的药材粉碎，依次用70-90%丙酮和75-95%こ醇渗漉提取，合并提取液，浓缩成浸膏，得提取液浸膏；
B.萃取将上述提取液浸膏用正丁醇萃取，萃取液进行浓缩得浸膏；
C.柱层析将上述浸膏用中性氧化镁拌样上柱，石油醚-丙酮按体积比20:1-3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液；
D.制备液相纯化将石油醚-丙酮(3:1)洗脱液浓缩干燥，用制备液相色谱分离纯化，流速为20-501111/1^11，流动相为甲醇-こ腈-水(18:35:47)。所述步骤C中，氧化镁目数为100-200目，氧化镁柱为中低压柱，柱压为5-8bar，柱径高比为1:7-10。本发明的有益效果是采用本发明方法，操作简单、制备量大、得率高、产品纯度高，适合エ业化生产。下面将结合具体实施方式
进ー步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例I :
取渐尖叶下珠根粉碎，先用70%的丙酮渗漉提取，再用85%こ醇渗漉提取，合并丙酮提取液和こ醇提取液，减压浓缩得提取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，浓缩得萃取浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至100-200目的中性氧化镁低压柱(柱压为6bar，柱径高比为1:7)，用石油醚-丙酮按体积比20:1-3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液，将石油醚-丙酮(3:1)洗脱液浓缩、干燥，得粗品。将粗品用制备高效液相色谱分离纯化，流速为20ml/min，流动相为甲醇-こ臆-水(18:35:47)，紫外检测器在线监测，针对性收集叶下珠斯泰丁 A的制备流分溶液，减压回收试剂得叶下珠斯泰丁 A，含量为96. 7%ο实施例2
取渐尖叶下珠根粉碎，先用80%的丙酮渗漉提取，再用90%こ醇渗漉提取，合并丙酮提取液和こ醇提取液，减压浓缩得提 取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，浓缩得萃取浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混 合拌样，低温烘干，上样至100-200目的中性氧化镁低压柱(柱压为5bar，柱径高比为1:10)，用石油醚-丙酮按体积比20:1_3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液，将石油醚-丙酮(3:1)洗脱液浓缩、干燥，得粗品。将粗品用制备高效液相色谱分离纯化，流速为40ml/min，流动相为甲醇-こ臆-水(18:35:47)，紫外检测器在线监测，针对性收集叶下珠斯泰丁 A的制备流分溶液，减压回收试剂得叶下珠斯泰丁 A，含量为95. 5%。实施例3:
取渐尖叶下珠根粉碎，先用90%的丙酮渗漉提取，再用95%こ醇渗漉提取，合并丙酮提取液和こ醇提取液，减压浓缩得提取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，浓缩得萃取浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至100-200目的中性氧化镁低压柱(柱压为8bar，柱径高比为1:9)，用石油醚-丙酮按体积比20:1-3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液，将石油醚-丙酮(3:1)洗脱液浓缩、干燥，得粗品。将粗品用制备高效液相色谱分离纯化，流速为50ml/min，流动相为甲醇-こ臆-水(18:35:47)，紫外检测器在线监测，针对性收集叶下珠斯泰丁 A的制备流分溶液，减压回收试剂得叶下珠斯泰丁 A，含量为96. 2%ο实施例4:
取渐尖叶下珠根粉碎，先用75%的丙酮渗漉提取，再用75%こ醇渗漉提取，合并丙酮提取液和こ醇提取液，减压浓缩得提取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，浓缩得萃取浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至100-200目的中性氧化镁低压柱(柱压为7bar，柱径高比为1:8)，用石油醚-丙酮按体积比20:1-3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液，将石油醚-丙酮(3:1)洗脱液浓缩、干燥，得粗品。将粗品用制备高效液相色谱分离纯化，流速为30ml/min，流动相为甲醇-こ臆-水(18:35:47)，紫外检测器在线监测，针对性收集叶下珠斯泰丁 A的制备流分溶液，减压回收试剂得叶下珠斯泰丁 A，含量为95. 8%ο
权利要求
1.一种制备叶下珠斯泰丁 A的方法，其特征在于包括以下步骤 A.提取取富含叶下珠斯泰丁A的药材粉碎，依次用70-90%丙酮和75-95%乙醇渗漉提取，合并提取液，浓缩成浸膏，得提取液浸膏； B.萃取将上述提取液浸膏用正丁醇萃取，萃取液进行浓缩得浸膏； C.柱层析将上述浸膏用中性氧化镁拌样上柱，石油醚-丙酮按体积比20:1-3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液； D.制备液相纯化将石油醚-丙酮(3:1)洗脱液浓缩干燥，用制备液相色谱分离纯化，流速为20-501111/1^11，流动相为甲醇-乙腈-水(18:35:47)。
2.如权利要求I所述的一种制备叶下珠斯泰丁A的方法，其特征在于所述步骤C中，氧化镁目数为100-200目，氧化镁柱为中低压柱，柱压为5-8bar，柱径高比为1:7-10。
全文摘要
本发明公开了一种制备叶下珠斯泰丁A的方法，该方法的步骤是将药材粉碎，依次用丙酮和乙醇溶液渗漉提取，合并提取液，浓缩后用正丁醇萃取，萃取液上氧化镁柱，石油醚-丙酮混合溶液梯度洗脱，洗脱液浓缩后采用制备高效液相色谱进一步纯化，获得叶下珠斯泰丁A。该方法操作简单、制备量大、得率高、产品纯度高，适合工业化生产。
文档编号C07H13/08GK102659857SQ20121011893
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月23日 优先权日2012年4月23日
发明者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司