专利名称:一种天冬碱a的提取方法
技术领域:
本发明涉及一种植物有效成分的提取方法,具体来说是一种天冬碱A的提取方法。
背景技术:
天冬碱A,属吡咯生物碱类化合物,无色棱晶。天冬碱A具有抗肿瘤的作用,剂量为10-100 μ g/ml时,体外对几种肿瘤具有抗肿瘤作用,并呈剂量依赖关系。天冬碱A主要来源于百合科总序天冬Willd.的根。总序天冬又名长刺天冬,是一种分布较广的小灌木,是印度阿育吠陀传统学最重要的草药和著名的强壮剂。民间药理学理论认为总序天冬具有促进身心健康、增强免疫力和延年益寿的适应原样活性。现代研究表明,总序天冬块根中含有多种化学成分,主要为生物碱和留体。总序天冬根的提取物具有雌激素样作用、减弱神经毒性、降血脂、抗溃疡、抗结石、免疫佐剂、辐射防护、抗腹泻、镇咳和抗菌等多种生物学活性。目前,国内尚无天冬碱A的提取方法相关专利报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种天冬碱A的提取方法,工艺操作简单,易于实现工业化生产。为了解决上述技术问题,本发明的目的是这样来实现的
(1)将总序天冬根粉碎,用5-10倍量90%的乙醇溶液回流提取1-2次,每次O.5-2h,得到提取液;
(2)上述提取液加入其体积的O.8-1%的活性炭40-60°C下保温脱色20-60min,过滤得到脱色液,脱色液浓缩干燥得到粗提物;
(3)上述粗提物采用高速逆流色谱对粗提物进行分离纯化,以氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统,紫外在线检测,收集目标流分,浓缩干燥,用丙酮回流溶解,趁热过滤,放冷结晶,滤出结晶干燥即得高纯度天冬碱A产品。所述步骤(I)中回流提取温度为70_100°C。所述步骤(3)中氯仿-甲醇-水的体积比为7-9:3-4:7-8。所述步骤(3)中紫外检测波长为294nm。本发明采用高速逆流色谱法对天冬碱A进行分离纯化,与以往的技术手段相比有明显的优点分离能力强、时间段、样品损失少,以及分离和纯化同步进行,实现了工业化目的。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例I :
取总序天冬根1kg,粉碎至20目,用5倍量90%的乙醇溶液100°C下回流提取2次,每次O. 5h,得到提取液,加入其体积的1%的活性炭60°C下保温脱色20min,过滤得到脱色液,脱色液浓缩干燥得到粗提物,以体积比为9:3:8氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统,将其充分混和,静置分相,两相分别超声波脱气25min,上相为固定相,下相为流动相,将粗提物溶于两相(上相与下相体积比为I: I)混合溶液中,注入高速逆流色谱仪,紫外在线检测,检测波长为294nm,收集目标流分,浓缩干燥,用丙酮回流溶解,趁热过滤,放冷结晶,滤出结晶干燥即得产品I. 3g,含量为98. 8%。实施例2:
取总序天冬根1kg,粉碎至20目,用6倍量90%的乙醇溶液70°C下回流提取2次,每次
I.5h,得到提取液,加入其体积的1%的活性炭50°C下保温脱色30min,过滤得到脱色液,脱 色液浓缩干燥得到粗提物,以体积比为8:3:7氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统,将其充分混和,静置分相,两相分别超声波脱气25min,上相为固定相,下相为流动相,将粗提物溶于两相(上相与下相体积比为1:1)混合溶液中,注入高速逆流色谱仪,紫外在线检测,检测波长为294nm,收集目标流分,浓缩干燥,用丙酮回流溶解,趁热过滤,放冷结晶,滤出结晶干燥即得产品l.Og,含量为98. 5%。实施例3
取总序天冬根5kg,粉碎至30目,用8倍量90%的乙醇溶液80°C下回流提取I次,每次lh,得到提取液,加入其体积的O. 8%的活性炭50°C下保温脱色40min,过滤得到脱色液,脱色液浓缩干燥得到粗提物,以体积比为9:4:8氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统,将其充分混和,静置分相,两相分别超声波脱气20min,上相为固定相,下相为流动相,将粗提物溶于两相(上相与下相体积比为1:1)混合溶液中,注入高速逆流色谱仪,紫外在线检测,检测波长为294nm,收集目标流分,浓缩干燥,用丙酮回流溶解,趁热过滤,放冷结晶,滤出结晶干燥即得产品7. 3g,含量为98. 6%。实施例4:
取总序天冬根5kg,粉碎至40目,用9倍量90%的乙醇溶液90°C下回流提取I次,每次2h,得到提取液,加入其体积的1%的活性炭60°C下保温脱色60min,过滤得到脱色液,脱色液浓缩干燥得到粗提物,以体积比为8:4:7氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统,将其充分混和,静置分相,两相分别超声波脱气30min,上相为固定相,下相为流动相,将粗提物溶于两相(上相与下相体积比为1:1)混合溶液中,注入高速逆流色谱仪,紫外在线检测,检测波长为294nm,收集目标流分,浓缩干燥,用丙酮回流溶解,趁热过滤,放冷结晶,滤出结晶干燥即得产品6. 5g,含量为98. 3%。实施例5:
取总序天冬根10kg,粉碎至20目,用10倍量90%的乙醇溶液70°C下回流提取2次,每次2h,得到提取液,加入其体积的O. 8%的活性炭40°C下保温脱色20min,过滤得到脱色液,脱色液浓缩干燥得到粗提物,以体积比为7:3:7氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统,将其充分混和,静置分相,两相分别超声波脱气20min,上相为固定相,下相为流动相,将粗提物溶于两相(上相与下相体积比为1:1)混合溶液中,注入高速逆流色谱仪,紫外在线检测,检测波长为294nm,收集目标流分,浓缩干燥,用丙酮回流溶解,趁热过滤,放冷结晶,滤出结晶干燥即得产品12. 2g, 含量为98. 0%。
权利要求
1.一种天冬碱A的提取方法,其特征在于包括以下步骤 (1)将总序天冬根粉碎,用5-10倍量90%的乙醇溶液回流提取1-2次,每次O.5-2h,得到提取液; (2)上述提取液加入其体积的O.8-1%的活性炭40-60°C下保温脱色20-60min,过滤得到脱色液,脱色液浓缩干燥得到粗提物; (3)上述粗提物采用高速逆流色谱对粗提物进行分离纯化,以氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统,紫外在线检测,收集目标流分,浓缩干燥,用丙酮回流溶解,趁热过滤,放冷结晶,滤出结晶干燥即得高纯度天冬碱A产品。
2.根据权利要求I所述一种天冬碱A的提取方法,其特征在于所述步骤(I)中回流提取温度为70-100°C。
3.根据权利要求I所述一种天冬碱A的提取方法,其特征在于所述步骤(3)中氯仿-甲醇-水的体积比为7-9:3-4:7-8。
4.根据权利要求I所述一种天冬碱A的提取方法,其特征在于所述步骤(3)中紫外检测波长为294nm。
全文摘要
本发明涉及一种天冬碱A的提取方法。方法包括以下步骤将总序天冬根粉碎,用90%的乙醇溶液回流提取,得到提取液,加入活性炭脱色,过滤得到脱色液,脱色液浓缩干燥得到粗提物,采用高速逆流色谱对粗提物进行分离纯化,结晶得到天冬碱A产品。本发明工艺简单易操作,污染小,适合工业化生产。
文档编号C07D491/22GK102643282SQ20121011957
公开日2012年8月22日 申请日期2012年4月23日 优先权日2012年4月23日
发明者万冬梅, 刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司