专利名称：治疗关节炎之药物组合物及保健食品的制作方法
技术领域：
本发明系关于关节炎的治疗，特别是关于以植物萃取物中的活性成分治疗关节炎的用途。
现有技术关节炎为近代人类疾病中很常见的疾病，罹患率也随着文明发展而有增加的趋·势。关节炎的治疗包括类固醇药物(corticosteroids)以降低发炎症状及抑制免疫系统，或者非类固醇药物(NSAIDs)，例如C0X-1抑制剂、C0X-2抑制剂、希乐葆(celebrex)、或布洛芬(ibuprofen)，以减少疼痛及发炎。然而，严重的副作用及有限的药效表现，促使新一代的药物问世。新一代的关节炎治疗药物着眼于细胞激素TNF-a在关节炎中扮演的角色，发展出一系列生物制剂以降低关节炎患者体中TNF-a的分泌量，例如抗TNF-a抗体的埃达里美(adalimumab)、因福利美(infliximab), TNF- a 拮抗物的恩博(etanercept)。后续并有研究组合免疫抑制剂-胺基甲基叶酸(methotrexate)及上述TNF-a拮抗物可提高治疗效果(Tracey D, et al. , Tumor necrosis factor antagonist mechanisms of action acomprehensive review, Pharmacology & Therapeutics 117(2008)244-279.)。其它细胞激素的活性抑制如IL-6抗体与IL-lb-ra亦可使用，然而，有限的药效、无法合并使用及伴随的副作用，仍有开发新药物的必要。
发明内容
本发明人为了研发新颖的关节炎之医药，进行多种测试及试验，进而完成本发明。本发明一实施例,提供一种治疗关节炎之药物组合物,包括安托芬(antofine)为活性成分及医药上可接受载体。本发明另一实施例，提供一种治疗关节炎之药物组合物，包括白前属植物(Cynanchum sp.)萃取物为活性成分。本发明又一实施例提供一种量产安托芬(antofine)的制造方法，包括下列步骤-M)混合选自下列之植物粉末与一第一溶剂，形成一第一混合物；(ii)加热该第一混合物及过滤，获得第一萃取液；(iii)浓缩上述第一萃取液后，加入酸，形成含有黏稠物的悬浮液；(iv)过滤上述悬浮液，取得一澄清液；(V)使上述澄清液与第二溶剂形成第二混合物；(vi)利用第二溶剂进行萃取，获得第二萃取物；及(vii)浓缩及纯化上述第二萃取物，以获得安托芬；上述之植物粉末为选自合欢(Albizzia julibrissin)、Antitoxicumfunebre、樟叶木防己(Cocculus laurifolius)、Cocculus pendulus、细叶黄堇(Corydalis meifolia)>Croton sparsiflours>Cryptocarya oubatchensis、Cryptocaryaphyllostemon、厚壳桂(Cryptocarya chinensis)、华北白前(Cynanchum hancockianum)、竹灵消(Cynanchum inamoenum)、老瓜头(Cynanchum komarovii)、徐长卿(Cynanchumpaniculatum)、催吐白前(Cynanchum vincetoxicum)、7jC 同木(Ficus fistulosa)、棱果格(Ficus septica)、紫荆梦崖(Pergularia daemia)、西藏地不容(Stephania glabra) >七层楼(Tylophora fIoribunda)、印度娃儿藤(Tylophora indica)、Tylophora tanakae、Vincetoxicum hirundinaria、 Vincetoxicum nigrum、 Vincetoxicum officinale、Vincetoxicum pumilu 及 Vincetoxicum rossicum 之至少一种。本发明之再一实施例进一步提供一种保健食品，包括安托芬为活性成分及食品添加剂。本发明另一实施例提供一种保健食品，包括白前属植物萃取物为活性成分。本发明之再一实施例进一步提供一种调控TNF-a或IL-6的组合物，包括对一个体投予有效量的白前属植物(Cynanchum sp.)萃取物为活性成分，其中该活性成份包含安 托芬。本发明另一实施例提供一种调控TNF- a或IL_6的方法，包括对一个体投予有效量的白前属植物(Cynanchum sp.)萃取物为活性成分，其中该活性成份包含安托芬。本发明还提供安托芬在制备治疗关节炎之药物组合物中的用途。
图1、2显示萃取自华北白前的结晶物之NMR数据，根据此数据鉴定华北白前的结晶物为Antofine ；图3显示华北白前酒精萃取物对U937细胞株的TNF-a抑制作用及细胞存活率；图4显示安托芬对U937细胞株的TNF- a抑制作用及细胞存活率；图5显示白前属植物萃取物在LPS诱导发炎的小鼠模式中的TNF-a抑制作用；图6显示白前属植物萃取物在LPS诱导发炎的小鼠模式中的IL-6抑制作用；图7显示数种白前属植物萃取物在LPS诱导发炎的小鼠模式中的TNF-a抑制作用；图8显示数种白前属植物萃取物在LPS诱导发炎的小鼠模式中的IL-6抑制作用；图9显示数种白前属植物萃取物在LPS诱导发炎的小鼠模式中的TNF-a抑制作用；图10显示数种白前属植物萃取物在LPS诱导发炎的小鼠模式中的IL-6抑制作用；图11显示白前属植物萃取物在鹿角胶诱导的大鼠后掌肿胀之动物模式的脚掌体积变化；图12显示白前属植物萃取物在佐剂诱导的关节炎动物模式中的关节炎评分(score)；图13显示白前属植物萃取物在佐剂诱导的关节炎动物模式中的脚掌体积变化；图14显示安托芬的给药方案对胶原蛋白诱导的关节炎动物模式的发病率的影响；图15显示安托芬的给药方案对胶原蛋白诱导的关节炎动物模式的动物体重的影响；图16显示安托芬的给药方案在胶原蛋白诱导的关节炎动物模式中脚掌体积的变化；以及图17显示安托芬的给药方案对胶原蛋白诱导的关节炎动物模式中的关节炎评分(score)o发明的
具体实施例方式本发明所述之安托芬(antofine)系指具有下式(I)所示之啡并吲嗪啶生物碱(phenanthroindolizidine alkaloid)、其镜像异构物、或其盐。
权利要求
1.安托芬在制备治疗关节炎之药物组合物中的用途。
2.根据权利要求I所述的用途，其中该安托芬为下式所示之化合物、镜像异构物、或其盐
3.根据权利要求I所述的用途，其中该安托芬为化学合成或来自植物萃取物。
4.根据权利要求3所述的用途，其中该植物包括合欢(Albizziajulibrissin)、Antitoxicum funebre、樟叶木防己(Cocculus laurifolius)、Cocculus pendulus、细叶黄堇(Corydalis meifolia) > Croton sparsiflours> Cryptocarya oubatchensis、Cryptocarya phyllostemon、厚壳桂(Cryptocarya chinensis)、华北白前(Cynanchumhancockianum)、竹灵消(Cynanchum inamoenum)、老瓜头(Cynanchum komarovii)、徐长卿(Cynanchum paniculatum)、催吐白前(Cynanchum vincetoxicum)、/K 同木(Ficusfistulosa)、棱果格(Ficus septica)、紫荆梦崖(Pergularia daemia)、西藏地不容(Stephania glabra)、七层楼(Tylophora fIoribunda)、印度娃儿藤(Tylophora indica)、Tylophora tanakae、Vincetoxicum hirundinaria、Vincetoxicum nigrum、Vincetoxicumofficinale、Vincetoxicum pumilu 或 Vincetoxicum rossicum。
5.根据权利要求3所述的用途，其中该植物系经由下列步骤所萃取 (i)混合选自该植物的粉末与一第一溶剂，形成一第一混合物； ( )加热该第一混合物及过滤，获得第一萃取液； (iii)浓缩上述第一萃取液后，加入酸，形成含有黏稠物的悬浮液； (iv)过滤上述悬浮液，取得一澄清液； (v)使上述澄清液与第二溶剂形成第二混合物； (vi)利用第二溶剂进行萃取，获得第二萃取物'及 (vii)浓缩及纯化上述第二萃取物以得安托芬。
6.根据权利要求5所述的用途，其中该第一溶剂包括水、醇类、酯类、醚类、酮类或其组 合。
7.根据权利要求5所述的用途，其中该酸包括盐酸。
8.根据权利要求5所述的用途，其中该第二溶剂包括二氯甲烷、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮或其组合。
9.根据权利要求5所述的用途，其中该步骤(ii)或步骤(vi)中的加热温度为室温至溶液沸腾的温度。
10.根据权利要求5所述的用途，其中该步骤(ii)或步骤(vi)中的加热时间为2小时以上。
11.根据权利要求5所述的用途，其中该步骤(iv)的过滤包括硅藻土或黏土。
12.根据权利要求5所述的用途，其中该步骤(vii)的纯化包括管柱层析法或再结晶法。
13.根据权利要求5所述的用途，其中该管柱层析法包括以乙酸乙酯及甲醇2 5的体积比之混合溶液冲提。
14.根据权利要求I所述的用途，其中该安托芬为下式所示之化合物
15.根据权利要求I所述的用途，其中该关节炎包括感染性关节炎、风湿性关节炎、儿童期特异性关节炎(juvenile idiopathic arthritis)、红斑性狼疮、退化性关节炎、纤维肌痛症(fibromyalgia)、硬皮症(scleroderma)、脊椎关节炎(spondyloarthropathies)、痛风、风湿性多发性肌痛症(polymyalgia rheumatica)、多发性肌痛症(polymyositis)、干癣性关节炎、滑液囊炎或肌腱炎。
16.—种安托芬(antofine)的制造方法,包括下列步骤 (i)混合选自下列之植物粉末与一第一溶剂，形成一第一混合物； (ii)加热该第一混合物及过滤，获得第一萃取液； (iii)浓缩上述第一萃取液后，加入酸，形成含有黏稠物的悬浮液； (iv)过滤上述悬浮液，取得一澄清液； (v)使上述澄清液与第二溶剂形成第二混合物； (vi)利用第二溶剂进行萃取，获得第二萃取物'及 (vii)浓缩及纯化上述第二萃取物，以获得安托芬； 其中，上述之植物粉末为选自合欢(Albizzia julibrissin)、Antitoxicum funebre>樟叶木防己(Cocculus laurifolius)、Cocculus pendulus、细叶黄堇(Corydalismeifolia)> Croton sparsiflours> Cryptocarya oubatchensis、 Cryptocaryaphyllostemon、厚壳桂(Cryptocarya chinensis)、华北白前(Cynanchum hancockianum)、竹灵消(Cynanchum inamoenum)、老瓜头(Cynanchum komarovii)、徐长卿(Cynanchumpaniculatum)、催吐白前(Cynanchum vincetoxicum)、7jC 同木(Ficus fistulosa)、棱果格(Ficus septica)、紫荆梦崖(Pergularia daemia)、西藏地不容(Stephania glabra) >七层楼(Tylophora floribunda)、印度娃儿藤(Tylophora indica)、Tylophora tanakae、Vincetoxicum hirundinaria、 Vincetoxicum nigrum、 Vincetoxicum officinale、Vincetoxicum pumilu 及 Vincetoxicum rossicum 之至少一种。
17.根据权利要求16所述的制造方法，其中该第一溶剂包括水、醇类、酯类、醚类、酮类或其组合。
18.根据权利要求16所述的制造方法，其中该酸包括盐酸。
19.根据权利要求16所述的制造方法，其中该第二溶剂包括二氯甲烷、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮或其组合。
20.根据权利要求16所述的制造方法，其中该步骤(ii)或步骤(vi)中的加热温度为室温至溶液沸腾的温度。
21.根据权利要求16所述的制造方法，其中该步骤(ii)或步骤(vi)中的加热时间为.2小时以上。
22.根据权利要求16所述的制造方法，其中该步骤(iv)的过滤包括硅藻土或黏土。
23.根据权利要求16所述的制造方法，其中该步骤(vii)的纯化包括管柱层析法或再结晶法。
24.根据权利要求23所述的制造方法，其中该管柱层析法包括以乙酸乙酯及甲醇.25的体积比之混合溶液冲提。
25.根据权利要求16所述的制造方法，其中该安托芬为下式所示之化合物
26.一种治疗关节炎之药物组合物，包括白前属植物(Cynanchum sp.)萃取物为活性成分，其中该活性成份包含安托芬。
27.根据权利要求26所述的药物组合物,其中该白前属植物包括华北白前(Cynanchumhancockianum)、竹灵消(Cynanchum inamoenum)、老瓜头(Cynanchum komarovii)、徐长卿(Cynanchum paniculatum)、催吐白前(Cynanchum vincetoxicum)、白薇(Cynanchumatratum)、或柳叶白前(Cynanchum stauntonii)。
28.根据权利要求26所述的药物组合物，其中该白前属植物萃取物系经由下列步骤所萃取 (i)混合选自该植物的粉末与一第一溶剂，形成一第一混合物； (ii)加热该第一混合物及过滤，获得第一萃取液； (iii)浓缩上述第一萃取液后，加入酸，形成含有黏稠物的悬浮液； (iv)过滤上述悬浮液，取得一澄清液； (v)使上述澄清液与第二溶剂形成第二混合物； (vi)利用第二溶剂进行萃取，获得第二萃取物'及 (vii)浓缩及纯化上述第二萃取物以得白前属植物萃取物。
29.根据权利要求28所述的药物组合物，其中该第一溶剂包括水、醇类、酯类、醚类、酮类或其组合。
30.根据权利要求28所述的药物组合物，其中该酸包括盐酸。
31.根据权利要求28所述的药物组合物，其中该第二溶剂包括二氯甲烷、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮或其组合。
32.根据权利要求28所述的药物组合物，其中该步骤(ii)或步骤(vi)中的加热温度为室温至溶液沸腾的温度。
33.根据权利要求28所述的药物组合物，其中该步骤(ii)或步骤(vi)中的加热时间为2小时以上。
34.根据权利要求28所述的药物组合物，其中该步骤(iv)的过滤包括硅藻土或黏土。
35.根据权利要求28所述的药物组合物，其中该步骤(vii)的纯化包括管柱层析法或再结晶法。
36.根据权利要求35所述的药物组合物，其中该管柱层析法包括以乙酸乙酯及甲醇25的体积比之混合溶液冲提。
37.根据权利要求26所述的药物组合物，其中该关节炎包括感染性关节炎、风湿性关节炎、儿童期特异性关节炎(juvenile idiopathic arthritis)、红斑性狼疮、退化性关节炎、纤维肌痛症(fibromyalgia)、硬皮症(scleroderma)、脊椎关节炎(spondyloarthropathies)、痛风、风湿性多发性肌痛症(polymyalgia rheumatica)、多发性肌痛症(polymyositis)、干癣性关节炎、滑液囊炎或肌腱炎。
38.一种保健食品，包括安托芬为活性成分。
39.根据权利要求38所述的保健食品，其中该安托芬由权利要求16至25所述的制造方法所制造。
40.根据权利要求38所述的保健食品，其中该安托芬为下式所示之化合物
41.一种保健食品，包括白前属植物萃取物为活性成分，其中该活性成份包含安托芬。
42.根据权利要求41所述的保健食品，其中该白前属植物包括华北白前(Cynanchumhancockianum)、竹灵消(Cynanchum inamoenum)、老瓜头(Cynanchum komarovii)、徐长卿(Cynanchum paniculatum)、催吐白前(Cynanchum vincetoxicum)、白薇(Cynanchumatratum)、或柳叶白前(Cynanchum stauntonii)。
43.一种调控TNF-α或IL_6的组合物，包括白前属植物(Cynanchum sp.)萃取物为活性成分，其中该活性成份包含安托芬。
44.根据权利要求43所述的组合物，其中该组合物可用於感染性关节炎、风湿性关节炎、儿童期特异性关节炎(juvenile idiopathic arthritis)、红斑性狼疮、退化性关节炎、纤维肌痛症(fibromyalgia)、硬皮症(scleroderma)、脊椎关节炎(spondyloarthropathies)、痛风、风湿性多发性肌痛症(polymyalgia rheumatica)、多发性肌痛症(polymyositis)、干癣性关节炎、滑液囊炎或肌腱炎的治疗。
全文摘要
本发明涉及治疗关节炎之药物组合物及保健食品。以安托芬或白前属植物萃取物为活性成分之医药组合物及保健食品，用以治疗关节炎或作为日常饮食的补给。本发明还提供由植物体大量生产安托芬的方法。
文档编号C07D471/04GK102755320SQ201210128430
公开日2012年10月31日 申请日期2012年4月27日 优先权日2011年4月29日
发明者李怡静, 李承榆, 李连滋, 石英珠, 童天送, 罗吉孟, 蔡莹霏, 许振霖, 颜瑞宏, 黄国魁 申请人:财团法人工业技术研究院