专利名称：一种白头翁提取物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及中药领域，特别是涉及一种白头翁提取物、其制备方法和应用，以及从白头翁提取的皂苷类化合物，该白头翁提取物可用于治疗癌症。
背景技术：
中药白头翁是毛茛科(Ranunculaceae)白头翁属植物白头翁(Pulsatillachinensis (Bunge) Regel)的根,具有清热解毒、凉血止痢的功效。白头翁的主要药理活性包括抗菌作用、抗阿米巴原虫作用、抗其它病原体作用、抗癌作用、杀精子作用和镇静镇痛作用。白头翁的主要有效成分包括白头翁素和白头翁皂苷等，其中白头翁皂苷可通过水提或醇提得到。现代药理研究发现，白头翁皂苷具有增强免疫功能、抗炎、抗肿瘤、抗病原微生物等作用，因此受到广泛的研究和关注。
中国专利ZL03178797. 5公开了一种含有常春藤配基3_0_ a -L-吡喃鼠李糖基(I —2)_[β-D-批喃葡糖基(1 — 4)]- a-L-吡喃阿糖糖苷的白头翁根浸膏，其制备方法是用乙醇水溶液提取白头翁根，并且通过向其中加入丙酮形成沉淀而获得水溶性级分得到白头翁根浸膏，白头翁浸膏再通过葡聚糖凝胶S印hedex LH20和HPLC制备得到常春藤配基
3-0-a-L-吡喃鼠李糖基(1 — 2) _[β-D-卩比喃葡糖基(I —4)]- a-L-吡喃阿糖糖苷。所得的白头翁根浸膏可用于制备治疗实体瘤的药物。该专利虽然制备得到能治疗实体瘤的白头翁根浸膏，并鉴定出其中的活性成分之一，但是，通过我们的研究已知，该白头翁根浸膏中活性成分含量较低，对实体瘤的治疗效果有限。同时，该工艺使用了丙酮，不适于工业化生产。文献“王先芳等，白头翁醇提物的抗肿瘤作用，浙江医科大学学报，1998，27(5)204-206”和文献“钟邱等，白头翁中皂苷成分对肿瘤细胞的抑制作用，中草药，2004，27 (8)604-605”虽然证明白头翁的醇提取物具有一定的抗肿瘤作用，但是从这些文献的抗肿瘤实验数据看，所得白头翁醇提取物的抗肿瘤效果并不明显，并且提取工艺过于简单，没有对有效成分进行精制，从而导致提取物中的活性成分含量低，且杂质较多，不仅影响了疗效，而且增大了毒副作用的风险。因此，十分需要研究新的白头翁提取方法，以进一步提高白头翁提取物中活性成分的含量，同时减少提取物中的杂质，从而增加白头翁提取物的治疗效果。
发明内容
本发明的目的是提供一种白头翁提取物、其制备方法和应用，以及从白头翁提取的皂苷类化合物。本发明主要是通过以下的技术方案来实现的。—方面，本发明提供了治疗癌症的白头翁提取物，其包含齐墩果酸
3-0-a-L-吡喃鼠李糖基-(I — 6)-/ -D-吡喃葡萄糖基-(I U- D-吡喃葡萄糖基-(I — 3)-a-L-吡喃鼠李糖基-(I — 2)-a-L-吡喃阿拉伯糖苷2-10重量％、常春藤皂苷元3-0-a-L-吡喃鼠李糖-(I — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(I — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖苷10-40重量％、齐墩果酸3-0-卢-D-吡喃葡萄糖基-(I — 4) - [ a -L-吡喃鼠李糖基-(I — 2) ] - a -L-吡喃阿拉伯糖苷5-30重量％和齐墩果酸3-0-卢-D-吡喃葡萄糖基-(I — 4)-卢-D-吡喃葡萄糖基-(I — 3)-a-L-吡喃鼠李糖基-(I — 2)-a-L-吡喃阿拉伯糖苷5-30重量％，并且所述提取物的总皂苷大于65%。优选地，所述白头翁提取物包含齐墩果酸3-0-O· -L-吡喃鼠李糖基-(I — 6)-卢-D-吡喃葡萄糖基-(I - Α)~β~ D-吡喃葡萄糖基-(I — 3)-a-L-吡喃鼠李糖基- (I — 2)-a-L-吡喃阿拉伯糖苷3-8重量％、常春藤皂苷元3_0_ a -L-吡喃鼠李糖-(I — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(I — 4)]-a-L-吡喃阿拉伯糖苷20-35重量％、齐墩果酸3-0-A-D-吡喃葡萄糖基-(I — 4)-[a-L-吡喃鼠李糖基-(I — 2)]-a-L-吡喃阿拉伯糖苷10-25重量％和齐墩果酸3-0-卢-D-吡喃葡萄糖基-(I — 4)-β -D-吡喃葡萄糖基-(I — 3) - σ -L-吡喃鼠李糖基-(I — 2) - σ -L-吡喃阿拉伯糖苷10-25重量％，并且所述提取物的总皂苷大于75%。在上述白头翁提取物所包含的活性成分中，齐墩果酸3-0-〃-L-吡喃鼠李糖 基-(I — 6)-卢-D-吡喃葡萄糖基-(I — 4)-卢-D-吡喃葡萄糖基-(I — 3) - a -L-吡喃鼠 李糖基- (I — 2)-a -L-吡喃阿拉伯糖苷具有式I的化学结构式
V
权利要求
1.一种治疗癌症的白头翁提取物，其特征在于包含齐墩果酸3-0-a-L-吡喃鼠李糖基-(I — 6)-卢-D-吡喃葡萄糖基-(I — 4) -P -D-吡喃葡萄糖基-(I — 3) - a -L-吡喃鼠李糖基- (I — 2)-a -L-吡喃阿拉伯糖苷2-10重量％、常春藤皂苷元3-0-a -L-吡喃鼠李糖-(I — 2) [ ^ -D-吡喃葡萄糖-(I — 4)]-a-L-吡喃阿拉伯糖苷10-40重量％、齐墩果酸3-0-A-D-吡喃葡萄糖基-(I — 4)-[a-L-吡喃鼠李糖基-(I — 2)]-a-L-吡喃阿拉伯糖苷5-30重量％和齐墩果酸3-0-卢-D-吡喃葡萄糖基- (I — 4) -3 -D-吡喃葡萄糖基-(I — 3) - a -L-吡喃鼠李糖基-(I — 2) - a -L-吡喃阿拉伯糖苷5-30重量％，并且所述提取物的总皂苷大于65%。
2.如权利要求I所述的治疗癌症的白头翁提取物，其特征在于包含齐墩果酸3-0-a-L-吡喃鼠李糖基-(I — 6)-/ -D-吡喃葡萄糖基-(I — HD-吡喃葡萄糖基-(I — 3)-a-L-吡喃鼠李糖基-(I — 2)-a -L-吡喃阿拉伯糖苷3-8重量％、常春藤皂苷元3-0-a-L-吡喃鼠李糖-(I — 2) [ ^ -D-吡喃葡萄糖-(I — 4)]-a-L-吡喃阿拉伯糖苷20-35重量％、齐墩果酸3-0-卢-D-吡喃葡萄糖基-(I — 4) - [ a -L-吡喃鼠李糖基-(I — 2) ] - a -L-吡喃阿拉伯糖苷10-25重量％和齐墩果酸3-0-卢-D-吡喃葡萄糖基-(I — 4)-卢-D-吡喃葡萄糖基-(I — 3)-a-L-吡喃鼠李糖基-(I — 2)-a-L-吡喃阿拉伯糖苷10-25重量％，并且所述提取物的总皂苷大于75%。
3.如权利要求I或2所述的治疗癌症的白头翁提取物，其特征在于提取物的制备方法包括如下步骤将白头翁药材，打碎成粗粉，用20-95%乙醇6-12倍量回流提取2-3次，每次l_3h，合并滤液，浓缩至无醇味，浓缩液用碱调节维持pH至10-13，煮沸保温，碱水解反应2-8小时后，放冷过夜；用酸调节pH至4-7，加水稀释2-4倍，上大孔树脂柱，依次用水、10-50%乙醇、60-95%乙醇洗脱；收集60-95%乙醇洗脱液，浓缩，干燥即得。
4.一种治疗癌症的药物组合物，其特征在于包含白头翁提取物和药学上可接受的任意辅料。
5.如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于药物组合物的剂型为片剂、胶囊剂、丸齐U、滴丸、注射剂、口服液或贴剂。
6.如权利要求1-3任一项所述的白头翁提取物的制备方法，其特征在于包括如下步骤将白头翁药材，打碎成粗粉，用20-95%乙醇6-12倍量回流提取2-3次，每次l_3h，合并滤液，浓缩至无醇味，浓缩液用碱调节维持PH至10-13，煮沸保温，碱水解反应2-8小时后，放冷过夜；用酸调节pH至4-7，加水稀释2-4倍，上大孔树脂柱，依次用水、10-50%乙醇、60-95%乙醇洗脱；收集60-95%乙醇洗脱液，浓缩，干燥即得。
7.如权利要求6所述的白头翁提取物的制备方法，其特征在于包括如下步骤将白头翁药材，打碎成粗粉，用50-80%乙醇6-10倍量回流提取2-3次，每次l-2h，合并滤液，浓缩至无醇味，浓缩液用NaOH调节维持pH至10-13，煮沸保温，碱水解反应3_6小时后，放冷过夜；用盐酸调节PH至5-6，加水稀释2-3倍，上DlOl大孔树脂柱，依次用水、30-50%乙醇、80-95%乙醇洗脱；收集80-95%乙醇洗脱液，浓缩，微波干燥即得。
8.一种从白头翁提取的皂苷类化合物，其特征在于该化合物的化学结构式如下
9.如权利要求8所述的化合物在制备治疗癌症的药物中的应用。
10.如权利要求1-3任一项所述的白头翁提取物在制备治疗癌症的药物中的应用。
全文摘要
一种白头翁提取物及其制备方法和应用。所述的白头翁提取物包含齐墩果酸3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷2-10重量％、常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖苷10-40重量%、齐墩果酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-α-L-吡喃阿拉伯糖苷5-30重量%和齐墩果酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷5-30重量%，并且所述提取物的总皂苷大于65%。该白头翁提取物提高了白头翁提取物中活性成分的含量，同时减少了提取物中的杂质，从而增加了白头翁提取物的治疗效果。
文档编号C07J63/00GK102793761SQ20121030614
公开日2012年11月28日 申请日期2012年8月27日 优先权日2012年8月27日
发明者杨世林, 李孝贤, 许琼明, 陈兰英, 冯育林, 李俊, 罗晓健, 罗颖颖 申请人:江西本草天工科技有限责任公司