专利名称：一种荷茗草醌的提取方法
技术领域：
本发明属于天然物质的提取技术领域，涉及ー种荷茗草醌的提取方法。
背景技术：
荷茗草醌是从唇形科(Labiatae)揚茗草Horminum pyrenaicum中分离得到的一种ニ萜类化合物，分子式为C15H2tlO2,分子量为332. 44。研究发现荷茗草醌具有I.抗菌活性，对金黄色葡萄球菌和霍乱弧菌的MIC都为7. 8 μ g/ml，对白色念珠菌和绿脓杆菌的MIC都为250 μ g/ml ；2.细胞毒活性，抑制小鼠淋巴细胞白血病P388细胞的ED50为4. 6 μ g/ml,对HeLa细胞的IC5tl为13. 5 μ g/ml，对H印-2细胞的IC5tl为15. 8 μ g/ml ；3.抗锥虫活性，体外在30 μ M浓度时能完全抑制克氏锥虫(T. cruzi)的生长；4.蛙背神经节试验表明，本品抑制神经元GABA受体控制的氯离子流(chloridecurrent),且呈浓度依赖关系。
经文献检索，国内尚未发现荷茗草醌的エ业提取方法相关报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种高效、环保的荷茗草醌的提取方法。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案
1)以荷茗草为原料，加入萃取釜中，以80-85%こ醇溶液为夹带剂，以超临界CO2为溶剂进行萃取，收集萃取物；
2)将萃取物用体积比为2:1的石油醚-こ酸こ酯混合溶液为萃取剂进行逆流萃取，收集合并萃取液，减压回收溶剂得浓缩液；
3)将浓缩液用高速逆流色谱分离纯化，以正己烷-氯仿-正丙醇-水两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，根据谱图收集成分，低温浓缩干燥即得荷茗草醌。所述步骤I)中超临界CO2萃取条件为萃取温度为35-50 °C ,萃取压カ为20-28MPa，分离釜I温度为28-35°C，压カ为6_8MPa，分离釜II温度为25_30°C，压カ为5~6. 5MPa。所述步骤3)中正己烷-氯仿-正丙醇-水体积比为(15-17) (10-13) (13-16):(5-8)。本发明的有益效果是采用超临界0)2萃取，低耗能、环保，采用高速逆流色谱分离荷茗草醌，分离过程无产品损失，高效，制备周期短。
具体实施例方式
下面将结合具体实施方式
进ー步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :
取荷茗草药材lOOOg，加入超临界CO2萃取釜中，开启设备，设置參数萃取温度为50°C，萃取压カ为25MPa，分离釜I温度为35°C，压カ为8MPa，分离釜II温度为30°C，压カ为5MPa，CO2流量为18L/h，以80%的こ醇溶液为夹带剂，萃取时间I. 5h，得到萃取物，将萃取物加入萃取塔顶，用体积比为2:1的石油醚-こ酸こ酯混合溶液为萃取剂进行逆流萃取，按与料液流量比2:1从萃取塔底部加入，使两相混合完成萃取，收集顶部萃有荷茗草醌的萃取液，减压回收萃取剂得浓缩液。取正己烷、氯仿、正丙醇、水按15:10:13:5比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为850rpm，同时把下相以3ml/min流速泵入，注入ニ浓缩液，紫外检测器监测，收集流分，减压浓缩后，干燥即得荷茗草醌，含量96. 7%，收率81. 3%ο实施例2:
取荷茗草药材lOOOg，加入超临界CO2萃取釜中，开启设备，设置參数萃取温度为35°C，萃取压カ为25MPa，分离釜I温度为30°C，压カ为7MPa，分离釜II温度为25°C，压カ为6MPa，CO2流量为20L/h，以85%的こ醇溶液为夹带剂，萃取时间2h，得到萃取物，将萃取物加入萃取塔顶，用体积比为2:1的石油醚-こ酸こ酯混合溶液为萃取剂进行逆流萃取，按与料液流量比2:1从萃取塔底部加入，使两相混合完成萃取，收集顶部萃有荷茗草醌的萃取液，减压回收萃取剂得浓缩液。取正己烷、氯仿、正丙醇、水按17:13:16:8比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为850rpm，同时把下相以3ml/ min流速泵入，注入浓缩液，紫外检测器监测，收集流分，减压浓缩后，干燥即得荷茗草醌，含量 97. 3%,收率 84. 5%ο实施例3:
取荷茗草药材lOOOg，加入超临界CO2萃取釜中，开启设备，设置參数萃取温度为50°C，萃取压カ为20MPa，分离釜I温度为35°C，压カ为8MPa，分离釜II温度为30°C，压カ为6. 5MPa，CO2流量为15L/h，以85%的こ醇溶液为夹带剂，萃取时间lh，得到萃取物，将萃取物加入萃取塔顶，用体积比为2:1的石油醚-こ酸こ酯混合溶液为萃取剂进行逆流萃取，按与料液流量比2:1从萃取塔底部加入，使两相混合完成萃取，收集顶部萃有荷茗草醌的萃取液，减压回收萃取剂得浓缩液。取正己烷、氯仿、正丙醇、水按16:13:14:8比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为850rpm，同时把下相以3ml/min流速泵入，注入浓缩液，紫外检测器监测，收集流分，减压浓缩后，干燥即得荷茗草醌，含量 96. 4%,收率 82. 6%ο实施例4:
取荷茗草药材IOOOg加入超临界CO2萃取釜中，开启设备，设置參数萃取温度为45°C，萃取压カ为28MPa，分离釜I温度为28°C，压カ为6MPa，分离釜II温度为28°C，压カ为5MPa，CO2流量为18L/h，以85%的こ醇溶液为夹带剂，萃取时间I. 5h，得到萃取物，将萃取物加入萃取塔顶，用体积比为2:1的石油醚-こ酸こ酯混合溶液为萃取剂进行逆流萃取，按与料液流量比2:1从萃取塔底部加入，使两相混合完成萃取，收集顶部萃有荷茗草醌的萃取液，减压回收萃取剂得浓缩液。取正己烷、氯仿、正丙醇、水按15:12:15:8比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为850rpm，同时把下相以3ml/min流速泵入，注入浓缩液，紫外检测器监测，收集流分，减压浓缩后，干燥即得荷茗草醌，含量97. 2%，收率83. 4%。
权利要求
1.一种荷茗草醌的提取方法，其特征在于包括以下步骤(1)以荷茗草为原料，加入萃取釜中，以こ醇溶液为夹带剂，以超临界CO2为溶剂进行萃取，收集萃取物；(2)将萃取物用体积比为2:1的石油醚-こ酸こ酯混合溶液为萃取剂进行逆流萃取，收集合并萃取液，减压回收溶剂得浓缩液；(3)将浓缩液用高速逆流色谱分离纯化，以正己烷-氯仿-正丙醇-水两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，根据谱图收集成分，低温浓缩干燥即得荷茗草醌。
2.如权利要求I所述的ー种荷茗草醌的提取方法，其特征在于所述步骤(I)中超临界CO2萃取条件为萃取温度为35-50°C，萃取压カ为20-28MPa，分离釜I温度为28_35°C，压カ为6-8MPa，分离釜II温度为25-30°C，压カ为5-6. 5MPa。
3.如权利要求I所述的ー种荷茗草醌的提取方法，其特征在于所述步骤(3)中正己烷-氯仿-正丙醇-水体积比为(15-17) :(10-13) :(13-16) :(5-8)。
全文摘要
本发明公开了一种荷茗草醌的提取方法，属于天然药物化学领域。所述的方法包括以下过程以荷茗草为原料，加入萃取釜中，以乙醇溶液为夹带剂，超临界CO2为溶剂进行萃取，收集萃取物，经逆流萃取，萃取液浓缩后采用高速逆流色谱分离，以正己烷-氯仿-正丙醇-水为溶剂系统，流分减压浓缩，即得荷茗草醌。本发明采用超临界CO2萃取和高速逆流色谱分离技术，高效环保，适合产业规模化生产。
文档编号C07C46/10GK102826988SQ20121034607
公开日2012年12月19日 申请日期2012年9月18日 优先权日2012年9月18日
发明者刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司