阿卡地新衍生物、含阿卡地新衍生物的产品和组合物、它们的治疗用途以及合成阿卡地新 ...的制作方法
【专利摘要】本发明涉及作为药物的阿卡地新衍生物，以及涉及所述衍生物用于治疗癌症，尤其是用于治疗慢性髓性白血病(CML)。本发明进一步涉及包含所述衍生物和至少一种第二种有效成分的产品，作为在癌症治疗中同时或单独给药或者随时间给药的组合产品，以及涉及包含所述衍生物和药学上可接受的载体的药物组合物。最后，本发明涉及体外抑制细胞增殖的方法，该方法包括使细胞与所述衍生物在体外接触，以及涉及合成所述衍生物的方法。
【专利说明】阿卡地新衍生物、含阿卡地新衍生物的产品和组合物、它们的治疗用途以及合成阿卡地新衍生物的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物化学领域中的阿卡地新(l’acadhine)衍生物，阿卡地新为5_氨基咪唑-4-甲酰胺-1-P-D-呋喃核糖苷，也被称为AICAR。更具体地说，本发明涉及用于治疗癌症的阿卡地新衍生物。再具体地说，本发明涉及用于治疗髓性血液疾病、诸如尤其是慢性髓性白血病(CML)的阿卡地新衍生物。【背景技术】
[0002]恶性髓性血液疾病通过髓系细胞的存活、增殖和分化性质的改变来表征。它们是由影响参与特定分化途径的造血干细胞或者祖细胞(分化的或者“参与的”干细胞)的一般获得性遗传异常引起的。这些血液疾病包括急性成髓细胞性白血病(AML)、骨髓增生异常综合征(MDS)和骨髓增生综合征(MPS)。慢性髓性白血病(CML)是一种恶性骨髓增生综合征(MPS)，其与白血病干细胞的异常有关，导致在所有分化期粒细胞的产生量增加。其是由获得性细胞遗传缺陷引起的，该获得性细胞遗传缺陷是由染色体9和染色体22的长臂之间的遗传物质的相互易位或者费城染色体易位(t9;22)(q34-qll)引起的。这种分子重排的后果是在超过95%的慢性髓性白血病(CML)患者中产生嵌合蛋白P210BCR-ABL。
[0003]BCR-ABL是一种组成性激活的酪氨酸激酶，这解释了患者干细胞对自发性或诱导性细胞凋亡不敏感性的原因。这些特性使得BCR-ABL成为治疗性干预慢性髓性白血病(CML)的优选药理学靶点。
[0004]近年来在癌症治疗方面已取得了不可否认的进展。通过供应抗肿瘤非常有效的新药物产品使早期提供治疗和护理方法更有益。在短短几年间，骨髓移植，尤其是靶向治疗的出现能够给予患者更好的护理。实际上，近年来的重大进步之一是甲磺酸伊马替尼(Gleevec?)的上市。
[0005]Gleevec?,正式名称为甲磺酸伊马替尼(頂)，是BCR_ABL、c_KIT和TOGF受体的药理学抑制剂，因此在过去十年间成为慢性髓性白血病(CML)的参照治疗。目前，其是在抗癌疗法中使用的酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的原型。但是，相当大比例的患者出现了对这种化合物的耐药性，并且这一比例在疾病的加速期和急性期内显著增加。导致这种耐药性的机理各不相同，包括BCR-ABL的ATP结合位点处具有突变T315I的偶然突变，突变T315I产生了多重耐药性并带来实际治疗问题；罕见的BCR-ABL扩增；位于这种激酶下游的信号途径的改变，诸如SRC激酶的活化。
[0006]现在，Gleevec?能够改善疾病预后以及在大约95%的病例中获得完全缓解。因此，采用伊马替尼的化学疗法逐渐代替移植成为一线治疗，对于伊马替尼无效的患者，仍保留移植适应证。
[0007]但是，因为一些患者对这一治疗无响应或者产生耐药性，尤其是疾病处于急变期时，对BCR-ABL抑制以及试图阻断不同信号途径下游的替代策略(包括SRC激酶抑制)进行评价。已发现这些策略是有效的，并且评价了取代产品，诸如Novartis?公司开发的尼洛替尼(nilotinib)或者 Brystol-Meyers Squibb? 公司开发的达沙替尼(dasatinib)(SpryceI?)。目前对具有Gleevec?耐药性的患者开处Sprycel?。
[0008]但是，对于一些患者，尤其是在p210BCR-ABL的ATP结合位点上具有T315I突变的患者，使用慢性髓性白血病(CML)治疗中使用的几乎所有的酪氨酸激酶抑制剂(TKI)都是难治的。因此，对替代治疗策略有实际需求，尤其是对于具有T315I突变或者下游BCR-ABL耐药性的患者。
[0009]阿卡地新或5-氨基咪唑-甲酰胺核苷(AICAR)是对代谢具有很大影响的核苷。具体地说，将其描述为AMP激活性蛋白激酶(AMPK)。目前，这一有效成分正在III期临床试验中，用于评价冠状动脉架桥外科手术期间心血管或脑血管并发症风险的降低。此外，一项近期研究显示出这种化合物诱导慢性淋巴细胞性白血病的B细胞细胞凋亡(Campdis等人，2003)，对于这种血液疾病该化合物正处于I/II期研究中。 [0010]因此，需要开发提供替代现有产品或者正在开发的产品的新化合物，以便尤其能够治疗对现有疗法有耐药性的患者，尤其是对酪氨酸激酶抑制剂(TKI)型治疗有耐药性的患者。同时还需要开发能够解决治疗无效问题的新化合物。治疗无效或者快速耐受是指药物使用一段时间后治疗效果减缓。此外，还需要开发可能具有不同作用机理的化合物，使其能够治疗慢性髓性白血病，以及更广泛地说，治疗某些癌症。最后，目前需要开发具有比目前可用化合物更低的细胞毒性的新化合物。
【发明内容】
[0011]因此，解决所述问题的技术方案涉及作为药物的具有以下通式的化合物、其外消旋体、对映异构体、非对映异构体及它们的混合物、其互变异构体及其药学上可接受的盐:
[0012]
吖命2
Ra
[0013]其中:
[0014]-R1 选自:
[0015]?呋喃形式的环戊糖基团，其中OH基团是游离的或者任选被一个或多个单磷酸酯、双磷酸酯或三磷酸酯(或磷酸酯的前药)、乙酰基、异亚丙基、苯甲酰基或对甲苯酰基基团取代，
[0016]?吡喃形式的己糖基团，其中OH基团是游离的或者任选被一个或多个单磷酸酯、双磷酸酯或三磷酸酯(或磷酸酯的前药)或乙酰基基团取代，
[0017]?萘基，任选被一个或多个烷基或具有I至4个碳原子的取代胺基团取代，
[0018]?苄基，任选被一个或多个烷基或具有I至4个碳原子的取代胺基团取代，
[0019]?苯基、联苯基或杂芳基；
[0020]- R2 选自:
[0021 ] ? -CONH2、-CONHMe、-CONHEt、-CON (Me)2, -CON (Et) 2 酰胺基团，
[0022]? -CO2H, CO2Me、CO2Et 酸或酯基团；_CN、-C (NH2) NH、-C (NHMe) NH、-C (NHEt) NH 氰基或脒基团，
[0023]?任选被选自Cl、Br、I和F的卤素取代的苯基，
[0024]?噻吩基团，
[0025]?具有3至10个碳原子的线型或支链碳链，或
[0026]?甲氧基萘基团；以及
[0027]- R3 选自:
[0028]?卤素基团，
[0029]?呋喃或-CO-呋喃基团，
[0030]?噻吩或-CO-噻吩或-C = C-噻吩基团，
[0031]?甲苯酰基，
[0032]?乙炔基团，
[0033]? -CO- (CH2)n-CH3 基团，其中 n 为 2-9，
[0034]?苯基或-C = C-苯基，任选被卤素取代，
[0035]? -C = C-CO2Me、_C = C-CO2Et、_C = C-CONH2 基团， [0036]? -C E C- (CH2) 6CH3 基团，或
[0037]?-C E C-2-甲氧基萘基团。
[0038]令人惊奇的是， 申请人:能够证明根据本发明的化合物能够使对伊马替尼敏感的K562白血病细胞系和/或对伊马替尼耐药的ImaR细胞系的活力降低。具体地说，在实施例1和实施例2中证明了这一点。
[0039]此外， 申请人:能够证明根据本发明的化合物对不同类型的程序性细胞死亡(PCD)
具有作用。
[0040]PCD在维持任何活生物体的正常功能方面起到根本性的作用，因为它能够使得细胞不再需要被清除。
[0041]已知有两种主要类型的P⑶:P⑶I型，也称为细胞凋亡；以及P⑶II型，也称为自
体吞曬。
[0042]胱门蛋白酶(caspases)(半胱氨酸蛋白酶)是细胞凋亡中的主要作用物。它们裂解细胞存活所必需的各种蛋白质底物。两种主要途径导致它们的活化。内源性途径由Bcl-2家族的蛋白质编配，并通过线粒体释放细胞色素C触发，接着形成多蛋白复合物(凋亡体)，首先活化胱门蛋白酶9，然后活化胱门蛋白酶3。外源性途径在质膜通过以下步骤被触发:活化膜受体，接着形成多蛋白复合物(DISC)，促使胱门蛋白酶8活化，然后使胱门蛋白酶3活化(Grutter, 2000)。
[0043]自体吞噬可导致细胞存活或者导致细胞死亡。初始步骤是形成双膜液泡(由吞噬泡(phagophore)的成核、延伸和成熟产生的自噬体)，它们捕获一部分细胞溶质和将被清除的大分子和细胞器。自噬体与溶酶体融合形成自噬溶酶体，在自噬溶酶体中溶酶体水解酶(组织蛋白酶)降解其内容物。自噬体的形成取决于Atg蛋白和LC3-1I和p62/SQSTMl蛋白的募集(Klionsky 等人，2008 ； Mari no and Lopez-Otin, 2004)。mTOR 途径参与其调节。事实上，活化的mTOR抑制自体吞噬，而AMPK对其的抑制作用启动了这一过程。
[0044]如实施例1中所示出的，根据本发明的化合物能够使其对上述两种类型的程序性细胞死亡(PCD)发挥作用。更具体地说，根据本发明的化合物所涉及的作用机理是自体吞噬或细胞凋亡，或者是这两种类型机理的组合。在实施例1中证明了这一点。
[0045]标题为“Acadesine Kills Chronic Myelogenous Leukemia(CML) Cells throughPKC-Dependent Induction of Autophagic Cell Death (阿卡地新通过 PKC 依赖性诱导的自体吞噬细胞死亡杀死慢性髓性白血病(CML)细胞)”的文献(Robert G等人，PloS ONE,2009年11月，第4卷，第11期)特别指出阿卡地新在慢性髓性白血病(CML)的治疗中是有效的，并且它对II型程序性细胞死亡发挥作用(即自体吞噬机理)。但是，该文献没有披露阿卡地新衍生物或者其在治疗慢性髓性白血病(CML)中可能的活性。
[0046]标题为“Tandem Azide-Alkynel, 3-Dipolar Cyc I oaddi t i on/Electrophilic Addition:A concise Three-Component Route to4, 5-DisubstitutedTriazolyl-Nucleosides (串联叠氮化物_炔烃1，3_偶极环加成/亲电子加成:4，5_ 二取代三唑基-核苷的简明三组分路线)”的文献(Malnuit V等人，Synlett2009, N0.13，第2123-2128页)未描述根据本发明的化合物作为药物。该文献描述了阿卡地新衍生物的合成，该衍生物具有不同于根据本发明的化合物的通式。此外，即使该文献指出这些化合物可具有有益的生物学性质，但是该文献中没有任何内容表明此类化合物能够具有作为药物的适应证，而且更具体地说，具有治疗癌症(举例来说，例如慢性髓性白血病(CML))的适应证。
[0047]第二，本发明还涉及含有根据本发明的化合物和至少一种第二活性剂的产品，作为在癌症治疗中同时、单独或顺序给药的组合产品。
[0048]第三，本 发明还涉及包含根据本发明的化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。
[0049]第四，本发明涉及抑制体外细胞增殖的方法，该方法包括使体外细胞与根据本发明的化合物相接触。
[0050]最后，第五，本发明涉及合成根据本发明的化合物的方法。
[0051 ] 根据本发明，上述不同化合物尤其可根据下述的不同方法进行合成。在这些方法中，基团Rp R2和R3如上面所定义。
[0052]根据第一可选实施方式，本发明的化合物通过一锅法反应获得，根据以下反应路线图，在所述反应中，使叠氮化物(R1N3)与炔烃(R2-C = C-H)和亲电体(R3-X,其中X=Br或I)在铜(催化剂)的存在下反应，生成三取代的三唑产物:
[0053]
【权利要求】
1.作为药物的具有如下通式的化合物、其外消旋体、对映异构体、非对映异构体及它们的混合物、其互变异构体及其药学上可接受的盐:吖命2R3 其中: -R1选自: ?呋喃形式的环戊糖基团，其中OH基团是游离的或者任选被一个或多个单磷酸酯、双磷酸酯或三磷酸酯、乙酰基、异亚丙基、苯甲酰基或对甲苯酰基基团取代， ?吡喃形式的己糖基团，其中OH基团是游离的或者任选被一个或多个单磷酸酯、双磷酸酯或三磷酸酯或乙酰基基团取代， ?萘基，任选被一个或多个烷基或具有I至4个碳原子的取代胺基团取代， ?苄基，任选被一个或多个烷基或具有I至4个碳原子的取代胺基团取代， ?苯基、联苯基或杂芳基； -R2选自:
?-CONH2、-CONHMe、-CONHEt、-CON (Me)2, -CON (Et) 2 酰胺基团，?-CO2H, CO2Me、CO2Et 酸或酯基团；_CN、-C (NH2) NH、-C (NHMe) NH、-C (NHEt) NH 氰基或脒基团， ?任选被选自Cl、Br、I和F的卤素取代的苯基， ?噻吩基团， ?具有3至10个碳原子的线型或支链碳链，或 ?甲氧基萘基团；以及 -R3选自: ?卤素基团， ?呋喃或-CO-呋喃基团， ?噻吩或-CO-噻吩或-C = C-噻吩基团， ?甲苯酰基， ?乙炔基团，
?-CO-(CH2)n-CH3 基团，其中 η 为 2-9， ?苯基或_c = C-苯基,任选被卤素取代，
?-C E C-CO2Me、-C = C-CO2Et、-C = C-CONH2 基团，
?_C = C- (CH2) 6CH3 基团，或 ?_C = C-2-甲氧基萘基团。
2.根据权利要求1所述的作为药物的化合物、其外消旋体、对映异构体、非对映异构体及它们的混合物、其互变异构体及其药学上可接受的盐，其中: -R1选自:
3.根据权利要求2所述的作为药物的化合物、其外消旋体、对映异构体、非对映异构体及它们的混合物、其互变异构体及其药学上可接受的盐，其中R1是:
4.根据权利要求3所述的作为药物的化合物、其外消旋体、对映异构体、非对映异构体及它们的混合物、其互变异构体及其药学上可接受的盐，其中R1是:
5.根据权利要求4所述的化合物，选自: -1，-(4-乙氧羰基-5-碘-[1，2，3]-三唑-1-基)-2’，3’，5，-三-0-乙酰基-P -D-呋喃核糖； -1’ - (4-氨基甲酰基-5-碘-[1，2，3]-三唑-1-基)-0 -D-呋喃核糖； -1，-(4-甲氧羰基-5-乙炔基_[1，2，3]-三唑-1-基)-0-D-呋喃核糖； -1_(萘基-2-甲基)-4-乙氧羰基-5-碘-1,2，3-三唑； -1_(萘基-2-甲基)-4-乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-1，2，3-三唑； -1，-(4-乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-[1，2，3]-三唑-1-基)-2’，3’，5’-三-0_乙酰基-P-D-呋喃核糖； -1，-(4-乙氧羰基-5-(2-噻吩基)-[1，2，3]-三唑-1-基)-2’，3’，5’-三-0_ 乙酰基-P-D-呋喃核糖；-1’-(4-乙氧羰基-5-苯基-[1，2，3]_三唑-1-基)-2’，3’，5’_三-O-乙酰基-P-D-呋喃核糖； -1-(4-甲基苄基)-4-乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-1，2，3-三唑； -1，-(4-庚基-5-(壬-1-炔-1-基-[I, 2，3]-三唑-1-基)-2’，3’，5’ -三-0-乙酰基-P-D-呋喃核糖； -1，-(4-乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-[1,2, 3]-三唑-1-基)-2’，3’，5’ -三-0-苯甲酰基-P-L-呋喃核糖； -2’-去氧乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-[1，2，3]_三唑-1-基)-3’，5’ - 二 -0-(对甲苯酰基)-a -D-呋喃核糖； -1，-(4-乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-[1，2，3]-三唑-1-基)-2’，3’，4’，6’-四-0-乙酰基-P-D-吡喃葡萄糖； -1’ -(4-乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-[1，2，3]-三唑-1-基)_2’，3’ -0-异亚丙基-P-D-呋喃核糖； -1’ -(4-乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-[1，2，3]-三唑-1-基)_2’，3’ -0-异亚丙基-5’ -0-乙酰基-P -D-呋喃核糖； -1’ -(4-乙氧羰基-5-(2-噻吩基)-[1，2，3]-三唑-1-基)_2’，3’ -0-异亚丙基-3-D-呋喃核糖；和 -1’ -(4-乙氧羰基-5-(2-噻吩基)-[1，2，3]-三唑-1-基)_2’，3’ -0-异亚丙基-5’ -0-乙酰基-P -D-呋喃核糖。
6.根据权利要求5所述的化合物`，选自: -1，-(4-乙氧羰基-5-(2-噻吩基)-[1’，2’，3’]-三唑-1-基)-2’，3’，5’-三-0_ 乙酰基-P-D-呋喃核糖； -1，-(4-乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-[1，2，3]-三唑-1-基)-2’，3’，5’-三-0_乙酰基-P-D-呋喃核糖； -1’ -(4-乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-[1，2，3]-三唑-1-基)_2’，3’ -0-异亚丙基-P-D-呋喃核糖； -1’ -(4-乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-[1，2，3]-三唑-1-基)_2’，3’ -0-异亚丙基-5’ -0-乙酰基-P -D-呋喃核糖；和 -1-(4-甲基苄基)-4-乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-1，2，3-三唑。
7.根据权利要求5所述的化合物，选自: -1，-(4-乙氧羰基-5-(2-噻吩基)-[1，2，3]-三唑-1-基)-2’，3’，5’-三-0_ 乙酰基-P-D-呋喃核糖； -1’-(4-乙氧羰基-5-苯基-[1，2，3]_三唑-1-基)-2’，3’，5’_三-0-乙酰基-P-D-呋喃核糖； -1-(4-甲基苄基)-4-乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-1，2，3-三唑； -1，-(4-乙氧羰基-5-丙炔酸乙酯-[1，2，3]-三唑-1-基)-2’，3’，4’，6’-四-0-乙酰基-3-D-吡喃葡萄糖；和 -1’ -(4-乙氧羰基-5-(2-噻吩基)-[1，2，3]-三唑-1-基)_2’，3’ -0-异亚丙基-P-D-呋喃核糖。
8.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，用于治疗代谢疾病。
9.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，用于治疗癌症。
10.根据权利要求9所述的化合物，用于治疗实体瘤。
11.根据权利要求9所述的化合物，用于治疗恶性血液疾病。
12.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，用于治疗慢性髓性白血病(CML)。
13.根据权利要求9所述的化合物，用于治疗酪氨酸激酶抑制剂耐药型癌症。
14.根据权利要求12所述的化合物，用于治疗酪氨酸激酶抑制剂耐药型慢性髓性白血病(CML)。
15.产品，其包含如权利要求1 -14中任一项所述的化合物和至少一种第二有效成分，作为在治疗癌症中同时、单独或顺序给药的组合产品。
16.药物组合物，其包含如权利要求1-14中任一项所述的化合物和药学上可接受的载体。
17.抑制体外细胞增殖的方法，其包括使体外细胞与根据权利要求1-14中任一项所述的化合物相接触。
18.合成根据权利要求1-14中任一项所述的化合物的方法，根据以下反应路线图，所述方法包括以下步骤: -具有式R1N3的叠氮化物与具有式R2-C = C-H的炔烃和亲电体R3-X, X选自Cl、Br或I，在铜催化剂的存在下进行一锅法反应；和 -获得1，4，5-三取代的1，2，3-三唑化合物，
19.合成根据权利要求1-14中任一项所述的化合物的方法，根据以下反应路线图，所述方法包括以下步骤: -Sonogashira反应，使其中X选自Br或I的三唑底物在具有式R4-C = C-H的炔烃和钯催化剂的存在下发生反应；和 -获得1，4，5-三取代的1，2，3-三唑衍生物，其中5位上的R3对应于R4-C = C-基团，R4 选自 H、SiMe3' Ph、CO2Me 和 Co2Et,
20.合成根据权利要求1-14中任一项所述的化合物的方法，根据以下反应路线图，所述方法包括以下步骤: -使具有式R3-SnBu3的锡衍生物或具有式R3-B(OH)2的硼酸衍生物与其中X选自Br或I的1，4-三取代的5-卤素-三唑进行Stille或Suzuk1-Miyaura型钯偶联反应；和-获得1，4，5-三取代的1，2，3-三唑，其在5位上含有为芳基或杂芳基类型的R3基团，
21.合成根据权利要求1-14中任一项所述的化合物的方法，根据以下反应路线图，所述方法包括以下步骤: -使具有式R1N3的叠氮化物与具有式R2-C = C-H的炔烃在铜基催化剂和氧化剂的存在下反应；和 -获得1，4，5-三取代的1，2，3-三唑，其中5位上的R3对应于基团R2-C = C-,
【文档编号】C07D249/06GK103619332SQ201280019365
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2012年4月17日 优先权日:2011年4月18日
【发明者】拉希德·本希达, 派翠克·奥贝热, 文森特·马尔尼, 穆赫辛妮·德里奥怀亚, 亚历山大·皮桑, 纪尧姆·罗贝尔 申请人:索菲亚安提波利斯尼斯大学, 国家科学研究中心, 国家健康与医学研究院