1-吡唑基-3-(4-((2-(苯氨基嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)用作p38 MAP激酶抑制剂的制作方法
【专利摘要】本文提供了为p38促分裂原活化蛋白激酶家族的抑制剂的式(I)化合物，及其在治疗上的用途，包括用于药物组合，特别是用于治疗炎性疾病，包括肺的炎性疾病例如哮喘和COPD中的用途。
【专利说明】1 -吡唑基-3- (4- ((2-(苯氨基嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)用作p38 MAP激酶抑制剂
发明领域
[0001]本发明涉及为P38促分裂原活化蛋白激酶家族(例如其α和Y激酶亚型)抑制剂(本文中称为Ρ38 MAP激酶抑制剂)以及Syk激酶和酪氨酸激酶的Src家族的抑制剂的化合物，并涉及其在治疗上的用途，包括用于药物组合，特别是用于治疗炎性疾病，具体而言肺的炎性疾病，例如哮喘和C0PD，以及胃肠道的炎性疾病，例如溃疡性结肠炎和克罗恩病以及眼睛的炎性疾病，例如葡萄膜炎中的用途。
[0002]发明背景
已鉴定出四种p38 MAPK问种型(分别为α、β、Y和δ),各自在人中显不不问的组织表达模式。所述Ρ38 MAPK α和β同种型在人体中无处不在，存在于许多不同的细胞类型中。所述α同种型就其在炎症中的作用而言已被充分表征。虽然在小鼠中使用化学基因法的研究显示，所述p38 MAPK β同种型并未在炎症中起作用(O’Keefe，S.J.等，J.Biol.Chem., 2007, 282 (48): 34663-71.)，但是其通过C0X2表达的调节涉及疼痛机制(Fitzsimmons, B.L.等，Neuroreport, 2010, 21 (4): 313-7) ? 这些同种型受许多先前描述的小分子量化合物所抑制。因这些同种型的广泛组织分布(这导致化合物的多重脱靶效应)所致，早期的抑制剂种类为高度毒性的。此外，大量抑制剂的开发由于临床研究上不可接受的安全性而中断(Pettus, L.H.和 Wurz, R.P., Curr.Top.Med.Chem., 2008,8 (16): 1452-67.)。因这些不利效应随化学型而不同，并且所述化合物具有不同的激酶选择性模式，所观察到的毒性可能为结构相关的，而非基于P38机制。
[0003]有关p38 MAPK Y和δ同种型所知较少，其不像α和β同种型是在特定的组织和细胞中表达。所述Ρ38 MAPK-δ同种型在胰腺、睪丸、肺、小肠和肾中较高地表达。其在巨噬细胞中亦很丰富并可在中性粒细胞、CD4+T细胞以及在内皮细胞中检出(Shmueli，
0.等，Comptes Rendus Biologies, 2003，326(10-11):1067-1072; Smith, S.J.Br.J.Pharmacol., 2006, 149:393-404; Hale, K.K., J.Tmmunnl., 1999, 162(7):4246-52 ； Wang, X.S.等，7； Biol.Chem., 1997，272 (38):23668-23674.)。虽然在脑、骨骼肌和心脏以及在淋巴细胞和巨噬细胞中较高地表达，但有关p38 MAPK Y的分布所知甚少(Shmueli, 0.等，Comptes Rendus Biologies, 2003, 326 (10-11):1067-1072;Hale, K.K., J.1mmunol., 1999，162(7):4246-52 ；Court, N.1 等，J.Mol.Cell.Cardiol., 2002，34(4):413-26 ；Mertens, S.等，F^S Lett.，1996，383(3):273-6.)。
[0004]虽然已知先前公开的一种化合物BIRB 796具有泛同种型抑制活性，但目前不可获得p38 MAPK Y和p38 MAPK δ的选择性小分子抑制剂。与抑制p38 MAPK α和ρ38 β所需的浓度相比，在更高的化合物浓度下观察到p38 MAPK Y和δ同种型的抑制(Kuma，Y., J.Biol.Chem., 2005, 280:194 72-19479.)。此外 BIRB 796 亦通过上游激酶MKK6 或MKK4削弱p38 MAPK或JNK的磷酸化。Kuma论述了这样的可能性:由抑制剂与MAPK蛋白的结合所造成的构象改变可能影响其磷酸化位点和用于上游激活物的停泊位点二者的结构，从而削弱P38 MAPK或JNK的磷酸化。
[0005]认为p38 MAP激酶在涉及启动和维持人类疾病(例如重度哮喘和C0PD)中的慢性、持续性炎症的许多信号转导途径中起关键作用(Chung，F.，Chest, 2011，139(6):1470-1479.)。目前有大量文献显示，p38 MAP激酶由一系列促炎细胞因子激活并且其激活导致额外的促炎细胞因子的募集和释放。实际上，来自一些临床研究的数据证实在使用P38MAP激酶抑制剂的治疗期间在患者的疾病活动性上的有益改变。例如Smith阐述了 p38 MAP激酶抑制剂对TNF α (但非IL-8)自人PBMC释放的抑制作用。
[0006]亦已提出p38 MAP激酶的抑制剂在治疗慢性阻塞性肺病(COPD)中的用途。靶定p38 MAPK α/β的小分子抑制剂已证明有效降低获自患有COPD的患者(所述患者通常为皮质类固醇不敏感的)的细胞和组织(Smith，S.J.，Br.J.Pharmacol., 2006, 149:393-404.)以及各种活体内动物模型(Underwood, D.C.等，Am.J.Physiol., 2000,279:L895-902 ；Nath, P.等，Bur.J.Pharmacol.，2006，544:160-167.)中炎症的各种参数。Irusen和同事亦提出p38 MAPK α/β可能经由降低细胞核中糖皮质激素受体(GR)的结合亲和力牵涉皮质类固醇不敏感性(Irusen, E.等，J Allergy Clin.1mmunol.,2002，109:649-657.)。使用一系列 p38 MAP 激酶抑制剂(包括 AMG548、BIRB 796、VX702、SC10469 和 SC10323)的临床经验已有描述(Lee, M.R.和 Dominguez, C.，Current Med.Chem., 2005，12:2979-2994.)。
[0007]coro为这样的病况，其中据报道潜在的炎症基本上耐受吸入式皮质类固醇的抗炎作用。因此，用于治疗coro的更佳策略会是开发这样的介入，其既具有固有的抗炎作用，又具有增加COPD患者的肺组织 对吸入式皮质类固醇的敏感性的能力。Mercado的新近出版物(Mercado, N.,等，Mol.Pharmacol.，2011，80 (6):1128-1135.)证实沉默 p38 MAPK Y具有恢复对皮质类固醇的敏感性的可能性。因此患者使用p38 MAP激酶抑制剂治疗COPD和重度哮喘可能具有双重益处。然而，阻碍利用P38 MAP激酶抑制剂治疗人类慢性炎性疾病的主要障碍为在患者中所观察到的严重毒性，其导致包括上文具体提及的所有化合物在内的许多化合物退出临床开发。
[0008]诊断为患有哮喘或COPD的许多患者持续承受不受控制的症状和其医疗状况的恶化，其可导致住院治疗。尽管使用最先进、新近可得的治疗方案，包括吸入式皮质类固醇和长效β-激动剂的组合产品，该状况仍发生。在过去10年间累计的数据显示，无法有效管理肺部疾病的潜在发炎组分为恶化发生的最可能的原因。鉴于作为抗炎药的皮质类固醇以及具体而言吸入式皮质类固醇在治疗哮喘中的已确立的功效，这些研究结果已激起密集的研究。因而发生的研究已鉴定的是，某些环境危害引起患者肺部的皮质类固醇不敏感性炎性改变。一个实例为由病毒介导的上呼吸道感染(URTI)所引起的反应，所述感染在增加与哮喘和COPD有关的发病率上具有特别的重要性。
[0009]流行病学调查已显示上呼吸道的病毒感染和已诊断患有慢性呼吸道疾病的患者承受的相当大百分比的恶化之间的强烈相关性。就此而言，某些最引人注目的数据来源于对受哮喘所累的儿童的纵向研究(Papadopoulos, N.G., Papi, A., Psarras, S.和Johnston, S.L., Paediatr.Respir.Rev,.2004, 5(3):255-260.)。病毒感染可促成恶化并增加疾病严重性，多个另外的研究支持该结论。例如，已报道鼻病毒的实验临床感染在哮喘患者中引起对组胺的支气管高反应性，所述哮喘患者对使用皮质类固醇的治疗无反应(Grunberg, K., Sharon, R.F.，等，Am.J.Respir.Cr it.Care Med., 2001, 164(10):1816-1822.)。进一步的证据来源于在患有囊性纤维化的患者中的疾病恶化和HRV感染之间观察到的关联(Wat, D., Gelder, C.，等，J.Cyst.Fibres,.2008，7:320-328.)。呼吸道病毒感染(包括鼻病毒)代表与儿科肺移植受者的12个月存活率负相关的独立风险因子这一发现，亦与此数据主体相符(Liu, M., Worley, S.，等，Transpl.1nfect.Dis,.2009，11(4):304-312.)。
[0010]临床研究显示，病毒载量与观察到的症状和并发症成比例，并暗示着与炎症的严重性成比例。例如，在实验性鼻病毒感染后，下呼吸道症状和支气管高敏感性与病毒载量显著相关(Message, S.D., Laza-Stanca, V.，等，PNAS, 2008 ; 105 (36): 13562-13567.)。类似地，在无其它病毒物质的情况下，当具有免疫能力的儿科患者中病毒载量高时，鼻病毒感染通常与下呼吸道感染和气喘有关(Gerna, G., Piralla, A.，等，J.Med.Virol,.2009，81(8):1498-1507.)。[0011]有趣地是，最近已报道预先暴露于鼻病毒降低了人肺泡巨噬细胞中由细菌产物诱发的细胞因子反应(Oliver, B.G., Lim, S.，等，Thorax, 2008，63:519-525.)。此外，已记载以鼻病毒感染鼻上皮细胞促进细菌的黏附，所述细菌包括金黄色葡萄球菌(5:<3?r<9?5.)和流感嗜血杆菌(/Z influenzae) (Wang, J.H., Kwon, H.J.和 Yong, J.J., TheLaryngoscope, 2009, 119 (7):1406-1411.)。所述细胞效应可能促成患者在上呼吸道感染之后罹患下呼吸道感染的增加的可能性。因此，治疗上相关的为聚焦于新型介入在降低各种体外系统中的病毒载量的能力，作为其在临床环境中的益处的替代预测物。
[0012]对其而言上呼吸道中的鼻病毒感染可导致严重的继发性并发症的高危人群，不限于患有慢性呼吸道疾病的患者。其包括例如易发生下呼吸道感染的免疫缺陷者，以及面临急性、威胁生命的发烧的进行化疗的患者。亦表明的是，其它慢性疾病(例如糖尿病)与受损的免疫防御反应有关。这增加了获得呼吸道感染和以住院治疗为结果二者的可能性(Peleg, A.Y., ffeerarathna, T.，等，Diabetes Metab.Res.Rev., 2007, 23(1):3-13 ；Kornum, J.B.，Reimar, I ,等,Diabetes Care, 2008, 31(8):1541-1545.)。
[0013]当上呼吸道病毒感染为患有潜在疾病或带有其它风险因子的患者的重大发病率和死亡率的原因时；其亦代表一般人群中的重大医疗保健负担并且为学校缺席和工时损失的主要原因(Rollinger, J.M.和 Schmidtke, M., Med.Res.Rev., 2010，Doi 10.1002/med.20176.)。这些考虑清楚地表明，具有与目前疗法相比改良的功效的新型药物为预防和治疗鼻病毒介导的上呼吸道感染所迫切需要的。一般而言，用于开发改良的抗病毒剂的策略已靶定病毒产生的各种蛋白，作为治疗介入点。然而，广泛范围的鼻病毒血清型使得此策略成为在实行上特别具挑战性的方法，并可解释为何目前用于预防和治疗鼻病毒感染的药物尚未经任何管理机构获准。
[0014]病毒进入宿主细胞与许多胞内信号转导途径的激活有关，认为所述途径在启动炎症过程(通过 Ludwig, S，2007 -,Signal Transduction, 7:81-88 综述.)及病毒增殖和后续释放中起重要作用。已确定在体外流感病毒增殖中起作用的一个这类机制为磷酸肌醇3-激酶/Akt途径的激活。已报道的是此信号转导途径由病毒的NSl蛋白激活(Shin，Y.K.，Liu, Q.等，7； Gen.Virol., 2007，88:13-18.)并且其抑制降低了子代病毒的滴度(Ehrhardt, C.，Marjuki, H.等，Cell Microbiol.，2006, 8:1336-1348.)。[0015]此外，已记载MEK抑制剂U0126抑制病毒增殖而不会引发病毒的抗性变体的出现(Ludwig, S.，Wolff, Τ.等，FEBS Lett., 2004，561 (1-3):37-43.)。最近，靶向 Syk 激酶的抑制的研究已证实该酶在介导鼻病毒进入细胞及病毒诱导的炎症反应(包括ICAM-1增量调节)中起重要作用(Sanderson, Μ.P., Lau, C.W.等，Inflawm.Allergy DrugTargets, 2009, 8:87-95.)。据报道Syk活性受作为HRV感染中的上游激酶的c_Src控制(Lau, C.等，7； Immunol., 2008, 180(2):870-880.)。少量研究显示将细胞 Src (Srcl或p60-Src)或Src家族激酶的激活与病毒感染相关联。这些包括腺病毒通过c_Src依赖性机制引发PI3激酶介导的Akt激活的报道。亦已表明，在上皮细胞中鼻病毒-39依赖于Src 激酶激活来诱导 IL-8 产生(Bentley, J.K., Newcomb, D.C., J.Virol., 2007, 81:1186-1194.)。最后，已提出的是Src激酶的激活涉及在上皮细胞和黏膜下腺中鼻病毒_14诱导的黏蛋白产生(Inoue, D.和 Yamaya, M., Respir.Physiol.Neurobiol., 2006,154(3):484-499.)。
[0016]先前已公开的是，抑制c-Src和Syk激酶二者活性的化合物为抗鼻病毒复制的有效药剂(Charron，C.E.等，WO 2011/158042.)及抑制p59_HCK的化合物有效对抗流感病毒复制(Charron，C.E.等，WO 2011/070369.)。对于上文概述的原因，预期设计用于治疗慢性呼吸道疾病的化合物为特别有效的，所述化合物将这些固有性质与对p38 MAPK的抑制组合。
[0017]某些p38 MAPK抑制剂亦已描述为呼吸道合胞病毒复制的抑制剂(Cass，L.等，WO 2011/158039.)。
[0018]此外值得注意的是，发现p38 MAPK抑制剂在一周治疗后对患有IBD的患者提供益处，IBD 未在四周的疗程内持续(Schreiber, S.等，Clin.Gastr0.Hepa to logy, 2006,4:325-334.)。
[0019]除了在控制促炎途径的活性的细胞信号转导事件中起关键作用之外，目前亦已认定激酶调节一系列细胞功能的活性。在最近已论述的作用中有DNA完整性的维持(Shilo，Y.Nature Reviews Cancer, 2003, 3:155-168.)和复杂的细胞分裂过程的协调。一份新近研究结果的说明为这样的出版物，其描述对所谓的“Olaharsky激酶”起作用的一组抑制剂在体外对微核形成的频率的影响(Olaharsky, k.、.等，PLoS Comput.Biol., 2009,5(7):e1000446.)o微核形成涉及有丝分裂过程的破坏或者与之有关，并因此为不合乎需要的潜在毒性表现。已发现抑制糖原合酶激酶3 a (GSK3 α )为增加激酶抑制剂促进微核形成的可能性的特别显著的因素。最近，亦已报道用RNAi抑制激酶GSK3 0促进微核形成(Tighe, k.等，BMC Cell Biology, 2007，8:34.)。
[0020]或许有可能通过优化剂量和/或通过改变给予路径来减轻因与Olaharsky激酶(例如GSK3CI)的药物相互作用引起的不利效应。然而，鉴定出针对这些脱靶酶显示出低活性或不可检测活性并因此引起有丝分裂过程的极少破坏或不引起破坏(如在有丝分裂测定中所测定)的治疗上有效的分子，应为更有利的。
[0021]从上文所引用文献的考虑明显可见，对于鉴定和开发出与目前可得的治疗相比具有改进的治疗潜能的新型p38 MAP激酶抑制剂仍有需求。合乎需要的化合物为这样的化合物，其因在相关治疗剂量下产生至少与先前药剂等同有效的作用，但在一个或多个方面为更低毒性的，而显示出优越的治疗指数。因此本发明的一个目标为提供所述新型化合物，其抑制p38 MAP激酶(例如具有特定的亚型特异性)连同Syk激酶和Src家族中的酪氨酸激酶(特别是c-Src)的酶活性，从而具有良好抗炎特性并适用于治疗。
[0022]与先前公开的变构p38 MAP激酶抑制剂BIRB 796 (Pargellis, C.等，NatureStruct.Biol., 2002, 9(4):268-272.)相比，化合物(I)表现出更长的作用持续时间和/或作用持久性。另外的实施方案提供呈一种或多种固体晶体形式的所述新型化合物，其具有适于配制成吸入式药剂的高化学稳定性和物理稳定性。
[0023]发明概述
因此，在本发明一方面提供式(I)化合物:
【权利要求】
1.一种式(I)化合物
2.依照权利要求1的化合物，其作为游离碱。
3.依照权利要求2的化合物，其作为固体晶体形式的无水游离碱。
4.依照权利要求3的化合物，其中所述作为无水游离碱的式(I)化合物呈具有基本上如图1所示的X-射线粉末衍射图的固体晶体形式(Α型)。
5.依照权利要求3的化合物，其中所述作为无水游离碱的式(I)化合物呈具有以下X-射线粉末衍射图的固体晶体形式，所述衍射图包含选自(土 0.2) 10.3、15.2、17.5、23.1、24.6、26.7和27.4度2-0的一、二、三、四、五、六或七个峰。
6.依照权利要求3的化合物，其中所述作为无水游离碱的式(I)化合物呈具有基本上如图2所示的X-射线粉末衍射图的固体晶体形式(B型)。
7.依照权利要求3的化合物，其中所述作为无水游离碱的式(I)化合物呈具有以下X-射线粉末衍射图的固体晶体形式，所述衍射图包含选自(土 0.2) 3.9、6.1、11.8、14.3、16.7,18.3,18.7和28.9度2- Θ的一、二、三、四、五、六、七或全部八个峰。
8.—种药物组合物，其包含与一种或多种药学上可接受的稀释剂或载体组合的依照权利要求1-7中任一项的化合物。
9.依照权利要求1-7中任一项的式(I)化合物，其用作药剂。
10.依照权利要求1-7中任一项的式(I)化合物或依照权利要求8的药物组合物，其用于治疗或预防患者中慢性呼吸道疾病，例如COPD (包括慢性支气管炎和肺气肿)、哮喘、小儿哮喘、囊性纤维化、结节病、特发性肺纤维化的恶化。
11.依照权利要求1-7中任一项的式(I)化合物或依照权利要求8的药物组合物，其用于治疗或预防选自以下的病况=COPD (包括慢性支气管炎和肺气肿)、哮喘、小儿哮喘、囊性纤维化、结节病、特发性肺纤维化、变应性鼻炎、鼻炎、鼻窦炎、变应性结膜炎、结膜炎、变应性皮炎、接触性皮炎、银屑病、溃疡性结肠炎、继发于类风湿性关节炎或骨关节炎的发炎关节、类风湿性关节炎、胰腺炎、恶质病、抑制肿瘤生长和转移，所述肿瘤包括非小细胞肺癌、乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌和恶性黑素瘤。
12.依照权利要求1-7中任一项的式(I)化合物或依照权利要求8的药物组合物用于制备药剂的用途，所述药剂用于治疗或预防选自以下的病况:COPD(包括慢性支气管炎和肺气肿)、哮喘、小儿哮喘、囊性纤维化、结节病、特发性肺纤维化、变应性鼻炎、鼻炎、鼻窦炎、肺动脉高压、变应性结膜炎、结膜炎、变应性皮炎、接触性皮炎、银屑病、溃疡性结肠炎、继发于类风湿性关节炎或骨关节炎的发炎关节、类风湿性关节炎、胰腺炎、恶质病、抑制肿瘤生长和转移，所述肿瘤包括非小细胞肺癌、乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌和恶性黑素瘤。
13.一种治疗选自以下的病况或抑制肿瘤生长和转移的方法:C0PD(包括慢性支气管炎和肺气肿)、哮喘、小儿哮喘、囊性纤维化、结节病、特发性肺纤维化、变应性鼻炎、鼻炎、鼻窦炎、变应性结膜炎、结膜炎、变应性皮炎、接触性皮炎、银屑病、溃疡性结肠炎、继发于类风湿性关节炎或骨关节炎的发炎关节、类风湿性关节炎、胰腺炎、恶质病，所述肿瘤包括非小细胞肺癌、乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌和恶性黑素瘤，所述方法包括向受试者给予有效量的依照权利要求1-7中任一项的式(I)化合物或依照权利要求8的药物组合物。
14.依照权利要求1-7中任一项的式(I)化合物或依照权利要求8的药物组合物，其用于在患有诸如充血性心力衰竭、糖尿病、癌症等慢性病况的患者中或者在免疫抑制患者例如器官移植后的免疫抑制患者中治疗或预防呼吸道病毒感染。
15.依照权利要求1-7中任一项的式(I)化合物或依照权利要求8的药物组合物，其与诸如扎那米韦或奥塞米韦(例如磷酸奥塞米韦)等抗病毒疗法组合用于治疗或预防患有诸如充血性心力衰竭、糖尿病、癌症等慢性病况的患者或免疫抑制患者例如器官移植后的免疫抑制患者中的呼吸道病毒感染。
16.一种组合产品，其包含: (A)依照权利要求1-7中任一项的式(I)化合物；和 (B)另一种治疗剂； 其中组分(A)和(B)各自与药学上可接受的稀释剂或载体混合而配制； 其中所述组合产品可以是 单个药物制剂或多部件试剂盒。
【文档编号】C07D403/12GK103917536SQ201280048821
【公开日】2014年7月9日 申请日期:2012年10月3日 优先权日:2011年10月3日
【发明者】伊藤一洋, C.E.查伦, J.金-昂德伍德, S.T.奥尼翁斯, A.I.朗肖, R.布勒克克斯, W.菲利尔斯, A.科普曼斯 申请人:瑞斯比维特有限公司