专利名称:一种特异性沙丁胺醇人工抗原的合成方法
技术领域:
一种高特异性沙丁胺醇人工抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。
背景技术:
沙丁胺醇(salbutamol),是一种短效β 2肾上腺素受体激动剂,用作平喘药。添加微量沙丁胺醇于牲畜饲料内,可以增加牲畜的瘦肉量及换肉率、减少脂肪,但是其毒性远高于具有相同功能的莱克多巴胺。2002年9月10起在中国境内禁止在饲料和动物饮用水中使用沙丁胺醇。沙丁胺醇结构式如式(I)。
权利要求
1.一种特异性沙丁胺醇人工抗原的合成方法,其特征在于以沙丁胺醇为原料,沙丁胺醇与6-氨基己酸反应合成沙丁胺醇半抗原即化合物I,化合物I通过1-乙基-3-(3- 二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺EDC与N-羟基琥珀酰亚胺NHS活化、或者通过三正丁胺与氯甲酸异丁酯活化,再与载体蛋白进行偶联制得沙丁胺醇人工抗原即化合物II,合成路线如反应式所示:O
2.根据权利要求1所述的特异性沙丁胺醇人工抗原的合成方法,其特征在于:所述载体蛋白为牛血清白蛋白BSA、阳离子化的牛血清白蛋白cBSA、匙孔血蓝蛋白KLH、血蓝蛋白LPH、鸡卵清白蛋白OVA、或人血清白蛋白HSA之一种。
3.根据权利要求1所述的特异性沙丁胺醇人工抗原的合成方法,其特征在于:所述沙丁胺醇半抗原即化合物I,其分子结构式为:
4.根据权利要求1所述的特异性沙丁胺醇人工抗原的合成方法,其特征在于:所述沙丁胺醇人工抗原即化合物II,其分子结构式为:
5.用权利要求1所述方法合成的沙丁胺醇人工抗原的应用,其特征在于制备沙丁胺醇抗体,所述抗体为多克隆抗体和/或单克隆抗体。
6.用权利要求1所述方法合成的沙丁胺醇人工抗原的应用,其特征在于检测食品中的沙丁胺醇残留。
全文摘要
一种特异性沙丁胺醇人工抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。本发明包括如下步骤沙丁胺醇通过甲醛溶液活化,酚羟基邻位连接上6-氨基己酸,得到沙丁胺醇半抗原;将沙丁胺醇半抗原上的羧基与载体蛋白上的氨基进行偶联,得到沙丁胺醇人工抗原。本发明弥补了现有沙丁胺醇抗原合成技术的不足和缺陷,得到了一种高特异性的沙丁胺醇人工抗原,产生的抗体特异性高、灵敏度高,实验结果表明,用本发明的沙丁胺醇人工抗原免疫动物得到的抗血清效价可达80000,检测限为0.5ng/mL,半抑制浓度IC50为5ng/mL。本发明的抗原或抗体可用于建立酶联免疫吸附分析方法和胶体金试纸快速检测法,从而用于快速检测食品中的沙丁胺醇残留,具有广阔的应用前景。
文档编号C07K14/77GK103145831SQ20131010688
公开日2013年6月12日 申请日期2013年3月28日 优先权日2013年3月28日
发明者胥传来, 刘丽强, 王利兵, 匡华, 徐利广, 马伟, 胡拥明 申请人:江南大学