一种合成醋酸格拉替雷的方法
【专利摘要】本发明属于药物合成【技术领域】，公开了一种合成醋酸格拉替雷的方法。该方法通过采用二次解聚或多次解聚的步骤，使醋酸格拉替雷产品的平均分子量控制在一个相对较窄的范围内，从而更稳定地控制了醋酸格拉替雷的品质，提高了产品的合格率。
【专利说明】一种合成醋酸格拉替雷的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物合成【技术领域】，具体涉及一种醋酸格拉替雷的合成方法。
【背景技术】
[0002]醋酸格拉替雷，英文名称为Glatiramer acetate,是一种用于治疗多发性硬化症的的人工合成多妝混合物(Μ.M.Mouradain, Pharmacology&Therapeutics，98，245-255，2003)。醋酸格拉替雷(又称共聚物_1)是一个由丙氨酸、谷氨酸、赖氨酸和酪氨酸组成的随机聚合物。它的氨基酸摩尔比大约为0.392?0.462:0.129?
0.153:0.300?0.374:0.086?0.100，平均分子量大约为4700?11000道尔顿。醋酸格拉替雷的结构如下式所示:
[0003](Glu, Ala, Lys, Tyr) x.xCH3C00H。
[0004]醋酸格拉替雷或共聚物-1的合成方法已经在美国专利3849550,5800808，5981589，6048898，6054430，6342476，6362161等专利中进行了描述。该合成方法是通过L-丙氨酸、L-酪氨酸、L-谷氨酸- Y-苄酯、L- ε -三氟乙酰基-赖氨酸的N-甲酸酐(NCA)在无水1，4-二氧六环中，使用二乙胺引发进行随机聚合，以产生受保护的多肽。Y-苄基基团的脱保护是通过室温下在溴化氢/乙酸中搅拌受保护的多肽来实现的。同时，该条件也可以切割共聚物。下一步通过哌啶处理可以脱除ε-三氟乙酰基。最后通过透析纯化共聚物，得到醋酸格拉替雷。
[0005]合成醋酸格拉替雷的第一步聚合反应是一个随机聚合过程，因此获得的受保护的共聚物的分子量范围不易控制，受外界因素影响比较大。而在合成的第二步反应条件下，除了可以脱除苄基以外，该条件也可以切割共聚物，会将共聚物切割成相对短的肽链。在上述两步反应的综合影响下，使得醋酸格拉替雷产品的平均分子量非常不易控制，最终造成产品的合格率无法得到保证。
【发明内容】
[0006]本发明针对现有技术中存在的上述缺陷，提供了一种能够将平均分子量控制在一个相对较窄的范围内的合成醋酸格拉替雷的方法。
[0007]为此，本发明提供了一种合成醋酸格拉替雷的方法，包括如下步骤:
[0008]I)在极性非质子溶剂中，在引发剂存在下，聚合L-丙氨酸、L-酪氨酸、L-谷氨酸-γ -苄酯、L- ε -三氟乙酰基-赖氨酸的N-甲酸酐(NCA)，以形成受保护的格拉替雷；
[0009]2)将酸加入到步骤I)中形成的受保护的格拉替雷中，脱除苄基，以形成三氟乙酰基格拉替雷；
[0010]3)将IM哌啶水溶液加入到步骤2)中形成的三氟乙酰基格拉替雷中，脱除三氟乙酰基，以形成格拉替雷粗品；
[0011]4)经透析纯化获得醋酸格拉替雷；
[0012]在进行步骤3)之前至少重复进行步骤2)两次，从而使合成的醋酸格拉替雷的平均分子量控制在相对较窄的范围内。
[0013]在本发明不同的优选实施方案中，在进行步骤3 )之前分别重复进行步骤2 )两次、三次或四次。
[0014]在本发明合成醋酸格拉替雷的方法中，步骤2)中采用的酸选自乙酸、盐酸、溴化氢、氢氟酸、甲磺酸、三氟甲磺酸、磷酸、三氟乙酸、硫酸以及它们的混合物。
[0015]在本发明一个优选的实施方案中，所述的酸为乙酸和溴化氢的混合物。
[0016]在本发明合成醋酸格拉替雷的方法中，所述酸的浓度为29?35%。
[0017]在本发明一个优选的实施方案中，步骤I)中所述的引发剂为二乙胺，极性非质子溶剂为1,4-二氧六环。
[0018]本发明通过采用二次解聚或多次解聚的步骤，使醋酸格拉替雷产品的平均分子量控制在一个相对较窄的范围内，从而更稳定地控制了醋酸格拉替雷的品质，提高了产品的合格率。
【具体实施方式】
[0019]下面通过实施例对本发明作进一步的详细说明，旨在用于说明本发明而非限定本发明。应当指出，对于本领域技术人员而言，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也同样落入本发明的保护范围之内。
[0020]实施例1:合成受保护的格拉替雷
[0021]三口瓶中加入经金属钠处理过的1，4- 二氧六环200mL,室温下加入L-丙氨酸NCA2.590克，L-酪氨酸NCA1.036克，L-谷氨酸-Y -苄酯NCA1.974克，L- ε -三氟乙酰基-赖氨酸NCA4.693克。搅拌30分钟，至体系澄清，加入二乙胺33毫克。20?25摄氏度下机械搅拌24小时。将反应液缓慢倒入400mL水中，产生大量白色固体，抽滤后，真空干燥得7.424克，收率92.8%ο
[0022]实施例2:第一次脱保护/解聚
[0023]三口瓶中加入受保护的格拉替雷7.0克，31%溴化氢/乙酸混合液140mL，在22?24摄氏度下搅拌22小时。将红棕色反应液倒入400mL水中，产生大量白色固体，抽滤，真空干燥得三氟乙酰基格拉替雷4.76克。
[0024]实施例3:第二次解聚
[0025]三口瓶中加入实施例2中所得三氟乙酰基格拉替雷4.0克，31%溴化氢/乙酸混合液80mL，在22?24摄氏度下搅拌2小时。将红棕色反应液倒入200mL水中，产生大量白色固体，抽滤，真空干燥得三氟乙酰基格拉替雷3.7克。
[0026]实施例4:第三次解聚
[0027]三口瓶中加入实施例3中所得三氟乙酰基格拉替雷3.0克，31%溴化氢/乙酸混合液60mL，在22?24摄氏度下搅拌2小时。将红棕色反应液倒入150mL水中，产生大量白色固体，抽滤，真空干燥得三氟乙酰基格拉替雷2.8克。
[0028]实施例5:第四次解聚
[0029]三口瓶中加入实施例4中所得三氟乙酰基格拉替雷2.0克，31%溴化氢/乙酸混合液40mL，在22?24摄氏度下搅拌2小时。将红棕色反应液倒入10mL水中，产生大量白色固体，抽滤，真空干燥得三氟乙酰基格拉替雷1.8克。
[0030]实施例6:脱三氟乙酰基/透析
[0031]三口瓶中加入实施例2中所得三氟乙酰基格拉替雷0.76克，IM哌啶水溶液38mL，室温下搅拌24小时。用IKDa的滤膜进行透析，得到的溶液加冰乙酸至pH为5.5?5.8，搅拌I小时。冻干得白色粉末，平均分子量为7803。
[0032]实施例7:脱三氟乙酰基/透析
[0033]三口瓶中加入实施例3中所得三氟乙酰基格拉替雷0.76克，IM哌啶水溶液38mL，室温下搅拌24小时。用IKDa的滤膜进行透析，得到的溶液加冰乙酸至pH为5.5?5.8，搅拌I小时。冻干得白色粉末，平均分子量为6664。
[0034]实施例8:脱三氟乙酰基/透析
[0035]三口瓶中加入实施例4中所得三氟乙酰基格拉替雷0.76克，IM哌啶水溶液38mL，室温下搅拌24小时。用IKDa的滤膜进行透析，得到的溶液加冰乙酸至pH为5.5?5.8，搅拌I小时。冻干得白色粉末，平均分子量为6242。
[0036]实施例9:脱三氟乙酰基/透析
[0037]三口瓶中加入实施例5中所得三氟乙酰基格拉替雷0.76克，IM哌啶水溶液38mL，室温下搅拌24小时。用IKDa的滤膜进行透析，得到的溶液加冰乙酸至pH为5.5?5.8，搅拌I小时。冻干得白色粉末，平均分子量为5359。
【权利要求】
1.一种合成醋酸格拉替雷的方法，包括如下步骤: O在极性非质子溶剂中，在引发剂存在下，聚合L-丙氨酸、L-酪氨酸、L-谷氨酸-γ -苄酯、L- ε -三氟乙酰基-赖氨酸的N-甲酸酐(NCA)，以形成受保护的格拉替雷； 2)将酸加入到步骤I)形成的受保护的格拉替雷中，脱除苄基，以形成三氟乙酰基格拉替雷; 3)将IM哌啶水溶液加入到步骤2)形成的三氟乙酰基格拉替雷中，脱除三氟乙酰基，以形成格拉替雷粗品； 4)经透析纯化获得醋酸格拉替雷； 其特征在于，在进行步骤3)之前至少重复进行步骤2)两次，从而使合成的醋酸格拉替雷的平均分子量控制在相对较窄的范围内。
2.根据权利要求1所述的方法，其中在进行步骤3)之前重复进行步骤2)两次。
3.根据权利要求1所述的方法，其中在进行步骤3)之前重复进行步骤2)三次。
4.根据权利要求1所述的方法，其中在进行步骤3)之前重复进行步骤2)四次。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中步骤2)中所述的酸选自乙酸、盐酸、溴化氢、氢氟酸、甲磺酸、三氟甲磺酸、磷酸、三氟乙酸、硫酸以及它们的混合物。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述酸的浓度为29?35%。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述的酸为乙酸和溴化氢的混合物。
8.根据权利要求1所述的方法，其中步骤I)中所述的引发剂为二乙胺。
9.根据权利要求1所述的方法，其中步骤I)中所述的极性非质子溶剂为1，4-二氧六环。
【文档编号】C07K1/06GK104371012SQ201310350238
【公开日】2015年2月25日 申请日期:2013年8月12日 优先权日:2013年8月12日
【发明者】李国弢, 向闯南, 马亚平, 袁建成 申请人:深圳翰宇药业股份有限公司