一种黄蝉素的提取工艺的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种黄蝉素的制备方法，属于天然药物提取【技术领域】。本发明采用超声波辅助酶法提取，提取液室温下放置，过滤，滤液浓缩至醇浓度为30-50%，静置沉淀，高速离心，沉淀用氯仿回流溶解，趁热过滤，放置，分离沉析物，干燥即得黄蝉素。本发明的制备方法简单易操作，快速、安全，且收率高、成本低，适合工业化制备。
【专利说明】
一种黄蝉素的提取工艺
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种天然色素的提取工艺，具体涉及一种黄蝉素的提取工艺。
【背景技术】
[0002]黄蝉素(Allamcin)，分子式C13H1405，分子量250.25。黄蝉素具有细胞毒活性，对纤维肉瘤(fibrosarcoma)、黑色素瘤、乳癌、肺癌、结肠癌、KB细胞、P388的ED50(yg/mL)依次为 3.1,0.9,0.1,1.2,0.3,0.3 和 0.2。
[0003]黄蝶素来源于夹竹桃科(Apocynaceae)黄蝶Allamandaneriifolia Hook.的叶，黄蝉叶主要成分为黄蝉素和黄蝉花辛。目前对黄蝉素的研究较少，国内尚无有关黄蝉素提取工艺方面的报道。
[0004]
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种黄蝉素的提取工艺。
[0006]本发明技术方案如下:
一种黄蝉素的提取工艺，其特征在于所述的方法包括以下步骤:
(I)在超声条件下，先采用生物酶对黄蝉叶进行酶解，再以75-90%的乙醇溶液为提取齐IJ，在60-85°C下进行提取，每次l-3h，提取2-3次，过滤，得到提取液；(2)将步骤(I)所得提取液室温下放置l_2h，过滤，滤液浓缩至醇浓度为30-50%，静置沉淀，2900-3200rpm高速离心，得到沉淀；(3)沉淀用氯仿回流溶解，趁热过滤，放置，分离沉析物，干燥即得黄蝉素。
[0007]所述步骤(I)中生物酶为纤维素酶和果胶酶的复合酶，质量比为1:1，超声频率为20-60KHz。
[0008]本发明优势在于:采用超声辅助酶法提取黄蝉叶中黄蝉素成分，条件温和，提取率闻，杂质少。
[0009]4、
【具体实施方式】
下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
[0010]实施例1:
将黄蝉叶1.5kg粉碎，在超声条件下，超声频率为60KHZ，先采用纤维素酶和果胶酶的复合酶，质量比为1:1，对黄蝉叶进行酶解10h，再用18L90%的乙醇溶液，在85°C下进行提取，每次3h，提取2次，过滤，得到提取液，室温下放置2h，过滤，滤液浓缩至醇浓度为30%，静置沉淀，3200rpm高速离心，得到沉淀，用200ml氯仿60°C回流溶解，趁热过滤，放置，分离沉析物，干燥即得黄蝉素，含量68.5%。
[0011]实施例2:
将黄蝉叶1.5kg粉碎，在超声条件下，超声频率为40KHZ，先采用纤维素酶和果胶酶的复合酶，质量比为1:1，对黄蝉叶进行酶解18h，再用12L75%的乙醇溶液，在65°C下进行提取，每次1.5h，提取3次，过滤，得到提取液，室温下放置2h，过滤，滤液浓缩至醇浓度为30%,静置沉淀,3200rpm高速离心,得到沉淀,用200ml氯仿8(TC回流溶解,趁热过滤，放置，分离沉析物，干燥即得黄蝉素，含量55.4%。
[0012]实施例3:
将黄蝉叶1.5kg粉碎，在超声条件下，超声频率为20KHz，先采用纤维素酶和果胶酶的复合酶，质量比为1:1，对黄蝉叶进行酶解6h，再用15L85%的乙醇溶液，在70°C下进行提取，每次2h，提取3次，过滤，得到提取液，室温下放置2h，过滤，滤液浓缩至醇浓度为40%，静置沉淀，3200rpm高速离心，得到沉淀，用200ml氯仿80°C回流溶解，趁热过滤，放置，分离沉析物，干燥即得黄蝉素，含量58.7%。
[0013]实施例4:
将黄蝉叶1.5kg粉碎，在超声条件下，超声频率为20-60KHZ，先采用纤维素酶和果胶酶的复合酶，质量比为1:1，对黄蝉叶进行酶解8h，再用10L80%的乙醇溶液，在65°C下进行提取，每次lh，提取3次，过滤，得到提取液，室温下放置lh，过滤，滤液浓缩至醇浓度为35%，静置沉淀，3100rpm高速离心，得到沉淀，用200ml氯仿65°C回流溶解，趁热过滤，放置，分离沉析物，干燥即得黄蝉素，含量43.2%。
[0014]实施例5:
将黄蝉叶2kg粉碎，在超声条件下，超声频率为20-60KHZ，先采用纤维素酶和果胶酶的复合酶，质量比为1:1，对黄蝉叶进行酶解12h，再用12L80%的乙醇溶液，在65°C下进行提取，每次lh，提取3次，过滤，得到提取液，室温下放置1.5h，过滤，滤液浓缩至醇浓度为40%,
静置沉淀，3000rpm高速离心,得到沉淀,用250ml氯仿65?回流溶解,趁热过滤,放置，分离沉析物，干燥即得黄蝉素，含量65.6%。
[0015]实施例6:
将黄蝉叶2kg粉碎，在超声条件下，超声频率为20-60KHZ，先采用纤维素酶和果胶酶的复合酶，质量比为1:1，对黄蝉叶进行酶解15h，再用8L75%的乙醇溶液，在75°C下进行提取，每次3h，提取2次，过滤，得到提取液，室温下放置lh，过滤，滤液浓缩至醇浓度为50%，静置沉淀，2900rpm高速离心，得到沉淀，用220ml氯仿80°C回流溶解，趁热过滤，放置，分离沉析物，干燥即得黄蝉素，含量59.8%。
【权利要求】
1.一种黄蝉素的提取工艺，其特征在于所述的方法包括以下步骤: (1)在超声条件下，先采用生物酶对黄蝉叶进行酶解，再以75-90%的乙醇溶液为提取齐IJ，在65-85°C下进行提取，每次l_4h，提取2-3次，过滤，得到提取液； (2)将步骤(1)所得提取液室温下放置l_2h，过滤，滤液浓缩至醇浓度为30-50%，静置沉淀，2900-3200rpm高速离心，得到沉淀； (3)沉淀用氯仿回流溶解，趁热过滤，放置，分离沉析物，干燥即得黄蝉素。
2.如权利要求1所述的一种黄蝉素的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中生物酶为纤维素酶和果胶酶的复合酶，质量比为1:1，超声频率为20-60KHZ。
【文档编号】C07D493/20GK104447788SQ201310438612
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2013年9月25日 优先权日:2013年9月25日
【发明者】谭超智 申请人:青岛中人智业生物科技有限公司