一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法
【专利摘要】一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法，包括以下步骤：（1）自然酶解：将虎杖粉碎，加入用盐酸调pH至4～5的水，混合均匀，置于发酵罐中密封，于温度40～50℃保温酶解4～5天，得酶解物料；（2）提取：向酶解物料中加入有机溶剂回流提取2～4次，合并提取液；（3）柱层析：将提取液通过装有氧化铝树脂的层析柱，提取液的流速为1～2BV/小时，收集过柱流出液；（4）脱色：向流出液中加入活性炭，升温至60～120℃，搅拌1～2小时，趁热过滤，得滤液；（5）浓缩结晶：将滤液浓缩至原滤液体积的1/10～1/15，降温析晶，过滤，即成。本发明生产成本低，所得产品纯度高，收率高，适合工业化大规模生产。
【专利说明】一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种提取白藜芦醇的方法，尤其是涉及一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法。
【背景技术】
[0002]白藜芦醇是一种天然的抗氧化剂，可降低血液粘稠度，抑制血小板凝结和血管舒张，保持血液畅通，可预防癌症的发生及恶化，具有抗动脉粥样硬化，冠心病、缺血性心脏病、高血脂的防治，抑制肿瘤，雌激素样作用，可用于治疗乳腺癌等疾病。1998年，美国学者编著《抗衰老圣典》一书时，将白藜芦醇列为“100种最热门有效抗衰老物质”之一。
[0003]目前，从虎杖中提取白藜芦醇的方法主要有三种:
1、往原料中加入植物酶，将白藜芦醇甙在外源酶的作用下水解为白藜芦醇，再用有机溶剂提取。此法酶的用量大，成本高。
[0004]2、用有机溶剂提取原料，浓缩得浸膏，往浸膏中加入植物酶，将白藜芦醇甙水解，再用有机溶剂萃取。此法酶的用量虽然小，但是所得产品纯度不高，约50%左右。
[0005]3、用有机溶剂提取原料，浓缩，除杂，精制，得白藜芦醇甙纯品，再用化学方法将其水解，得白藜芦醇。此法所得产品虽然纯度较高，但是生产周期长，收率低，不超过70%。
【发明内容】
[0006]本发明所要解决的技术问题是，提供一种成本低，所得产品纯度高，收率高的从虎杖中提取白藜芦醇的方法。
[0007]本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法，包括以下步骤:
(1)自然酶解:将虎杖粉碎，加入相当于虎杖重量0.5~1.0倍的用盐酸调pH至4~5的水，混合均匀，置于发酵罐中密封，于温度40~50°C保温酶解4~5天，得酶解物料；
(2)提取:向步骤(1)所得酶解物料中加入有机溶剂回流提取2~4次(优选3次)，每次回流提取有机溶剂的用量为原料虎杖重量的2~5倍，每次回流提取时间为2~4小时，合并提取液；
(3)柱层析:将步骤(2)所得提取液通过装有氧化铝树脂的层析柱，氧化铝树脂的用量为原料虎杖重量的0.5~1.5倍，提取液的流速为I~2BV/小时，收集过柱流出液；
(4)脱色:向步骤(3)所得流出液中加入活性炭，活性炭的用量为流出液重量的I~10%，升温至60~120°C，搅拌I~2小时，趁热过滤，得滤液；
(5)浓缩结晶:将步骤(4)所得滤液浓缩至原滤液体积的1/10~1/15，降温析晶，过滤，即成。
[0008]进一步，步骤(1)中，虎杖粉碎至颗粒大小为60~100目。
[0009]进一步，步骤(2)中，提取用有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、丙酮或乙酸乙酯等，优选体积分数80~85%的甲醇或体积 分数80~85%的乙醇。[0010]进一步，步骤(5)中，降温析晶的温度为O~5°C，时间为6~8小时。
[0011]所述氧化铝树脂可为中性氧化铝树脂、碱性氧化铝树脂或酸性氧化铝树脂，优选中性氧化铝树脂。
[0012]与现有技术相比，本发明具有以下优点:
(1) 利用虎杖自身的内源酶将白藜芦醇甙酶解成为白藜芦醇，不需使用外源酶，从而降低生产成本；
(2)提取所用有机溶剂回收后可重复使用，柱层析所用氧化铝树脂活化后也可重复使用，生产成本大幅度降低；
(3)氧化铝树脂对提取液中的大黄素、色素等杂质有特异的吸附能力，而对白藜芦醇无吸附，可有效地去除杂质，同时确保产品收率；
(4)分离纯化的效果显著，产品纯度在98%以上；
(5)提取彻底，生产过程损耗小，产品收率高，达95%以上；
(6 )原料来源广泛，设备要求低，适合工业化大规模生产。
【具体实施方式】
[0013]以下结合实施例对本发明作进一步说明。
[0014]实施例1
本实施例包括以下步骤:
(1)自然酶解:取虎杖IOOkg(白藜芦醇含量1.29%)，粉碎至80目，加入50kg用盐酸调pH至5的水，混合均匀，置于发酵罐中密封，于50°C保温酶解4天，得酶解物料；
(2)提取:向步骤(1)所得酶解物料加入体积分数85%的甲醇回流提取三次，第一次甲醇用量为400L，提取时间为3小时；第二次甲醇用量为300L，提取时间为2小时；第三次甲醇用量为300L，提取时间为2小时，合并提取液；
(3)柱层析:将步骤(2)所得提取液通过装有中性氧化铝树脂的层析柱，氧化铝树脂的用量为100kg，提取液的流速为1.5BV/小时，收集过柱流出液；
(4)脱色:向步骤(3)所得流出液中加入活性炭5kg，升温至68°C，搅拌1.5小时，趁热过滤，得滤液；
(5)浓缩结晶:将滤液浓缩至70L，降温至5°C，析晶8小时，过滤，得到白藜芦醇纯品
1.25kg,纯度为 98.60%,收率为 96.9%。
[0015]实施例2
本实施例包括以下步骤:
(1)自然酶解:取虎杖IOOkg(白藜芦醇含量1.24%)，粉碎至80目，加入50kg用盐酸调pH至5的水，混合均匀，置于发酵罐中密封，于45°C保温酶解5天，得酶解物料；
(2)提取:向步骤(1)所得酶解物料中加入体积分数80%的乙醇回流提取三次，第一次乙醇用量为400L，提取时间为3小时；第二次乙醇用量为300L，提取时间为2小时；第三次乙醇用量为300L，提取时间为2小时，合并提取液；
(3)柱层析:将步骤(2)所得提取液通过装有中性氧化铝树脂的层析柱，中性氧化铝树脂的用量为100kg，提取液的流速为IBV/小时，收集过柱流出液；
(4)脱色:向步骤(3)所得流出液中加入活性炭7kg，升温至80°C，搅拌1.5小时，趁热过滤，得滤液；
(5)浓缩结晶:将滤液浓缩至75L，降温至0°C，析晶8小时，过滤，得到白藜芦醇纯品1.18kg，纯度为 98.52%，收率为 95.16%。
【权利要求】
1.一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)自然酶解:将虎杖粉碎，加入相当于虎杖重量0.5~1.0倍的用盐酸调pH至4~5的水，混合均匀，置于发酵罐中密封，于温度40~50°C保温酶解4~5天，得酶解物料； (2)提取:向步骤(1)所得酶解物料中加入有机溶剂回流提取2~4次，每次回流提取有机溶剂的用量为原料虎杖重量的2~5倍，每次回流提取时间为2~4小时，合并提取液； (3)柱层析:将步骤(2)所得提取液通过装有氧化铝树脂的层析柱，氧化铝树脂的用量为原料虎杖重量的0.5~1.5倍，提取液的流速为I~2BV/小时，收集过柱流出液； (4)脱色:向步骤(3)所得流出液中加入活性炭，活性炭的用量为流出液重量的I~10%，升温至60~120°C，搅拌I~2小时，趁热过滤，得滤液； (5)浓缩结晶:将步骤(4)所得滤液浓缩至原滤液体积的1/10~1/15，降温析晶，过滤，即成。
2.根据权利要求1所述的从虎杖中提取白藜芦醇的方法，其特征在于，步骤(1)中，虎杖粉碎至颗粒大小为60~100目。
3.根据权利要求1或2所述的从虎杖中提取白藜芦醇的方法，其特征在于，步骤(2)中，提取用有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、丙酮或乙酸乙酯。
4.根据 权利要求1或2所述的从虎杖中提取白藜芦醇的方法，其特征在于，步骤(5)中，降温析晶的温度为O~5°C,时间为6~8小时。
【文档编号】C07C39/21GK103571891SQ201310531416
【公开日】2014年2月12日 申请日期:2013年11月1日 优先权日:2013年11月1日
【发明者】李伟, 刘志强 申请人:湖南科源生物制品有限公司