一种雷公藤红素的制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种雷公藤红素的制备方法，其特征在于，具体步骤为：将新鲜南蛇藤根洗净、切片，晒干，粉碎成南蛇藤粉；将南蛇藤粉浸泡提取；将提取液回收溶剂，得到提取物浸膏；将提取物浸膏用有机溶剂溶解，干法上硅胶柱，经二氯甲烷和甲醇梯度洗脱，收集含有雷公藤红素的洗脱部分，回收溶剂，得到雷公藤红素粗品；将雷公藤红素粗品用有机溶剂溶解，干法上硅胶柱，经二氯甲烷和甲醇梯度洗脱，收集含有雷公藤红素的洗脱部分回收溶剂，得到雷公藤纯品。本发明操作简单，工艺简便，对仪器和设备要求低，浸泡法获得的提取物直接进行两次硅胶柱层分离，避免溶剂萃取、酸碱处理等手段，产品收率高，浸泡溶剂经回收可反复使用，适合工业化生产。
【专利说明】一种雷公藤红素的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种从南蛇藤药材中制备雷公藤红素的新方法，尤其涉及一种从南蛇藤中提取、分离、纯化雷公藤红素的制备方法，属于天然活性产物制备方法的【技术领域】。
【背景技术】
[0002]南蛇藤为卫矛科南蛇藤属植物南蛇藤(celastrus orbiculatus Thunb)根。本品具有驱风除湿，活血解毒，消肿的功效。主治筋骨疼痛，四肢麻木，风湿性关节炎，腰腿痛，闭经，小儿惊风，痧症、痢疾、肿毒、毒蛇咬伤、跌打损伤。民间常用该药煎汤或外敷治疗风湿痹疼，该药的汤剂和酊剂已在临床上用于治疗类风湿性关节炎多年，疗效确切。南蛇藤化学成分复杂，已从该植物种子、叶及地上部分分离到50多种成分，主要有三萜类、黄酮类、有机酸类、多元醇类、留体、生物碱及鞣质。其中三萜类、生物碱类、黄酮类含量较高。南蛇藤以其根入药，治疗风湿性和类风湿性关节炎，原发性血小板增多症，以及关节神经痛强直性脊柱炎和痹症。近年的国内外研究表明，南蛇藤在抗炎，抗肿瘤，抗氧化，抗多药耐药性以及抗生育方面都有着广阔的研究和应用前景，尤其最值得关注的是抗肿瘤方面的显著作用，其主要活性成分为南蛇藤素(雷公藤红素)。
[0003]雷公藤红素:分子式:C29H3804，分子量:450.61，
[0004]结构式为:
[0005]
【权利要求】
1.一种雷公藤红素的制备方法，其特征在于，具体步骤为: 第一步:将新鲜南蛇藤根洗净、切片，晒干，粉碎成南蛇藤粉； 第二步:将第一步得到的南蛇藤粉用有机溶剂浸泡提取至少一次，合并提取液； 第三步:将第二步得到的提取液旋转蒸发回收溶剂，得到提取物浸膏； 第四步:将第三步得到的提取物浸膏用有机溶剂溶解，以层析用硅胶拌样，待有机溶剂挥发干净后，干法上硅胶柱，经二氯甲烷和甲醇梯度洗脱，薄层层析色谱检测洗脱进程，收集含有雷公藤红素的洗脱部分，旋转蒸发回收溶剂，得到雷公藤红素粗品； 第五步:将第四步得到的雷公藤红素粗品用有机溶剂溶解，以层析用硅胶拌样，待有机溶剂挥发干净后，干法上硅胶柱，经二氯甲烷和甲醇梯度洗脱，薄层层析色谱检测洗脱进程，收集含有雷公藤红素的洗脱部分，旋转蒸发回收溶剂，得到雷公藤纯品。
2.如权利要求1所述的雷公藤红素的制备方法，其特征在于，所述第二步中的浸泡提取的温度为0-35°C，南蛇藤粉和有机溶剂的体积比为1: 1-2，每次提取的浸泡时间为24h以上，浸泡期间进行搅拌，浸泡提取8次以上。
3.如权利要求1所述的雷公藤红素的制备方法，其特征在于，所述第三步、第四步以及第五步中旋装蒸发的温度为0-50°C，压力为0.07-0.1MPa0
4.如权利要求1所述的雷公藤红素的制备方法，其特征在于，所述第四步中的有机溶剂为醋酸乙酯，提取物浸膏和有机溶剂的重量体积比为20g: 200ml，提取物浸膏和拌样用的硅胶的重量比为1: 10-15，提取物浸膏与装柱用的硅胶的重量比为20g: 1000-1200g,二氯甲烷与甲醇的体积比为20: 1-1: 1，所得的雷公藤红素粗品含有75-90wt%的雷公藤红素。
5.如权利要求1所述的雷公藤红素的制备方法，其特征在于，所述第五步中的有机溶剂为醋酸乙酯，雷公藤红素粗品和有机溶剂的重量体积比为15g: 150ml,雷公藤红素粗品和拌样用的硅胶的重量比为1: 10.15，雷公藤红素粗品与装柱用的硅胶的重量比为I: 50-60，二氯甲烷与甲醇的体积比为20: 1-1: I。
6.如权利要求1所述的雷公藤红素的制备方法，其特征在于，所述第二步中浸泡提取所用的有机溶剂为正己烷。
7.如权利要求1所述的雷公藤红素的制备方法，其特征在于，所述的第四步和第五步中所用的硅胶为200-300目柱层析用硅胶。
8.如权利要求1所述的雷公藤红素的制备方法，其特征在于，所述的第四步和第五步中薄层层析色谱的检测条件为:硅胶GF254板，展开剂为:体积比为30: I的二氯甲烷和甲醇的混合液，以雷公藤红素对照品对照，直立上行展开，紫外灯254nm下检视。
9.如权利要求1所述的雷公藤红素的制备方法，其特征在于，所述的第五步中使用HPLC检测所得 到的雷公藤纯品的纯度，HPLC条件为:C18200mmX 4.6mm色谱柱，采用体积比为87: 13的甲醇和体积浓度为1%的醋酸溶液的混合液为为流动相，流速:1.0mm/min，检测波长为425nm。
【文档编号】C07J63/00GK103570795SQ201310574275
【公开日】2014年2月12日 申请日期:2013年11月15日 优先权日:2013年11月15日
【发明者】卞俊, 陈海飞, 鲍蕾蕾, 杨扬, 王海林, 宫丽, 刘明珠, 刘海军 申请人:中国人民解放军第四一一医院